）异氰脲酸酯半抗原的步骤。
[0025] 具体而言，包括以下步骤：
[0026] B、反应结束后用饱和Na2S2O3溶液以终止反应；
[0027] C、向反应液中加入二氯甲烷，分离并先后用水洗、饱和NaCl溶液多次洗涤，再用 无水Na2SO4干燥有机相以除去多余的水分；
[0028] D、将干燥后的有机相去溶剂，过层析柱分离纯化，最终得到纯化后的淡黄色针状 结晶体三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原二（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯，即式I化 合物。
[0029] 优选的，步骤B中，所述饱和Na2S2O3溶液终止反应的现象为反应体系液红色消失； 这样有利于终止反应，也防止逆反应的发生。
[0030] 优选的，所述层析柱分离纯化的薄层层析展开剂采用体积比为I : 1的乙酸乙酯 和正己烷组成的混合溶液。本发明的半抗原是有机相物质，本发明意外发现采用该展开剂 更利于半抗原的纯化，使获得的半抗原纯度更高。
[0031] 第三方面，本发明涉及一种三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原中间体，其结构 式如式（II)所示：
[0032]
[0033] 第四方面，本发明涉及一种三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯人工全抗原，所述人工 全抗原原是由如权利要求1所述的三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原通过戊二醛法或 碳二亚胺法或重氮化法与蛋白质分子偶联制备而得。
[0034] 优选的，所述人工全抗原包括三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯人工免疫原，是由所 述的三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原通过戊二醛法或碳二亚胺法或重氮化法与牛血 清蛋白偶联制备而得。
[0035] 该人工免疫原TBC-BSA的结构式为 （戊二醛法）。该人工免疫 原免疫新西兰大白兔，可通过生物体内的免疫应答进时制备得到抗三（2, 3-二溴丙基）异 氰脲酸酯的特异性抗体
[0036] 优选的，所述人工全抗原包括三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯人工包被原，是由所 述的三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原通过戊二醛法或碳二亚胺法或重氮化法与卵清 白蛋白偶联制备而得。
[0037] 该人工包被原TBC-OVA的结构式为
（碳二亚胺法）。该人工包 被原和三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯都能与抗三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯特异性抗 体免疫球蛋白IgG发生特异性识别的反应。
[0038] 第五方面，本发明涉及一种三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原用于痕量溴代 阻燃剂三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯检测中的用途。
[0039] 优选的，所述检测包括将所述三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原通过戊二醛 法或碳二亚胺法或重氮化法与载体蛋白偶联制备三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯人工全抗 原。
[0040] 本发明涉及三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原及其制备方法、用途；由于三 (2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯是小分子物质，只具有反应原性而没有免疫原性，而且该分子 上没有能与蛋白质分子直接结合的氨基、羧基等官能团，因此需要对三（2,3_二溴丙基） 异氰脲酸酯分子衍生化使其分子上带上一个氨基。为了免疫分析方法的实现，用戊二醛法 或碳二亚胺法或重氮化法将这个含羧基的半抗原与蛋白质分子偶联制备人工全抗原（包 括人工免疫原和人工包被原），其中人工免疫原免疫新西兰大白兔，通过生物体内的免疫应 答进而制备得到抗三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯的特异性抗体，而人工包被原和三（2， 3_二溴丙基）异氰脲酸酯都能与抗三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯特异性抗体免疫球蛋白 IgG发生特异性识别的反应，即人工包被原和三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯是直接竞争的 关系，从而建立免疫分析方法用于水体、土壤、大气等环境样品和电子产品、纺织印染品、建 筑装潢等产品中痕量溴代阻燃剂三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯的检测。
[0041] 与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
[0042] 1)半抗原实用性强：三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原制备和抗体制备具有 重要的实用价值和现实意义。该半抗原保留了三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯的结构，再 利用戊二醛法或碳二亚胺法或重氮化法偶联蛋白质使其具有针对三（2,3_二溴丙基）异氰 脲酸酯的抗原决定簇，可成功制备三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯人工免疫原TBC-BSA或 三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯人工包被原TBC-0VA，为制备特异性好、效价高的抗体和建 立免疫PCR生物条形码方法提供了保障。
[0043] 2)半抗原稳定性好：本发明首次制备获得了三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗 原，且此法合成的三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原结构具有较好的稳定性，在室温状 态下可保存多年，几乎不会失效。
[0044] 3)半抗原制备技术简便可行：半抗原的整个制备过程无需特别的仪器设备，成本 低廉，且制备速度快，产率高，容易工业化规模生产。
【附图说明】
[0045] 通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、 目的和优点将会变得更明显：
[0046] 图1为三（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原中间体的核磁共振谱图；
[0047] 图2为三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原的核磁共振谱图；
[0048] 图3为三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原的红外光谱图；
[0049] 图4为三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原TBC-hapten、载体蛋白BSA和人工 全抗原TBC-BSA的紫外光谱图；
[0050] 图5为三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原TBC-hapten、载体蛋白OVA和人工 全抗原TBC-OVA的紫外光谱图；
[0051] 图6为间接竞争法检测三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯免疫PCR生物条形码方法 的扩增曲线；
[0052] 图7为间接竞争免疫PCR生物条形码方法检测三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯的 标准工作曲线。
【具体实施方式】
[0053] 下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术 人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术 人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明 的保护范围。
[0054] 实施例1、三（2,3-二溴丙基）异氰脲酸醅半抗原中间体的制备和表征
[0055] (I) TBC半抗原中间体的制备
[0056] 称取12.468(0.05111〇1)2,4,6-三（烯丙氧基）-1，3,5-三嗪和0.98(0.05111〇1)水 和0. 38g (2. 25mmol) CuCl2 · 2H20,溶于甲苯后加入到圆底烧瓶中，逐渐升温至95°C回流加热 6小时，直至薄板层析法（TLC)检测原料点消失为止（R f= 0. 2 ;展开剂，正己烷：乙酸乙酯 =5 : 1);反应结束后冷却至室温，将反应液转移至旋转蒸发仪中减压蒸馏除去溶剂，再用 二氯甲烷和石油醚（V : V = 2 : 1)重结晶，抽滤得浅绿色粉末状固体。随后用稀盐酸重复 洗涤绿色固体直至颜色变为白色，再用蒸馏水洗涤至近中性，得二烯丙基异氰脲酸酯即TBC 半抗原中间体。二烯丙基异氰脲酸酯分子式=C9H11N3O3;分子量：209. 2 ;产率：63. 6%;熔点： 146-148 °C，纯度 97%。
[0057] (2) TBC半抗原中间体的表征
[0058] 获得的TBC半抗原中间体，其结构通过核磁共振等检测手段分析鉴定，TBC半抗原 中间体的核磁共振氢谱图如图1所示，其特征如下= 1H NMR(⑶Cl3) δ (ppm) :8. 44(1H ArH非 苯环），5· 89 (1H-C = C-H 共辄），5· 23-5. 34 (2