H-C = CH2)，4· 45、4· 47 (2H Ar-CH2-R)。核磁 表征结果表明，实验成功制备了 TBC半抗原中间体。
[0059] 实施例2、三（2,3-二溴丙基）异氰脲酸醅半抗原中间体的制备和表征
[0060] (I) TBC半抗原中间体的制备
[0061] 称取12.468(0.05111〇1)2,4,6-三（烯丙氧基）-1，3,5-三嗪和0.98(0.05111〇1)水 和0. 42g (2. 5mmol) CuCl2 · 2Η20,溶于甲苯后加入到圆底烧瓶中，逐渐升温至95°C回流加热 5小时，直至薄板层析法（TLC)检测原料点消失为止（R f= 0. 2 ;展开剂，正己烷：乙酸乙酯 =5 : 1);反应结束后冷却至室温，将反应液转移至旋转蒸发仪中减压蒸馏除去溶剂，再用 二氯甲烷和石油醚（V : V = 2 : 1)重结晶，抽滤得浅绿色粉末状固体。随后用稀盐酸重 复洗涤绿色固体直至颜色变为白色，再用蒸馏水洗涤至近中性，得二烯丙基异氰脲酸酯即 TBC半抗原中间体。二烯丙基异氰脲酸酯分子式：分子式=C9H11N3O 3;分子量：209. 2 ;产率： 63. 6% ;熔点：146-148°C，纯度 97%。
[0062] (2) TBC半抗原中间体的表征
[0063] 获得的TBC半抗原中间体，其结构通过核磁共振等检测手段分析鉴定，TBC半 抗原中间体的核磁共振氢谱图特征如下= 1H NMR(⑶Cl3) δ (ppm) :8. 44(1H ArH非苯环）， 5. 89 (IH-C = C-H 共辄），5. 23-5. 34 (2H-C = CH2)，4. 45、4. 47 (2H Ar-CH2-R)。核磁表征结 果表明，实验成功制备了 TBC半抗原中间体。
[0064] 实施例3、三（2,3-二溴丙基）异氰脲酸醅半抗原的制备和表征
[0065] (I) TBC半抗原的制备
[0066] 称取0.5g(0.9448mmol)TBC半抗原中间体（二烯丙基异氰脲酸酯）溶于20mL CH 2Cl2中；在加热50°C状态下，向上述液体中逐滴加入120 μ L (3. 78mmol)液溴，保持回流反 应2小时，薄板层析法（TLC)监测反应直至反应完全；反应液冷却至室温后，向反应体系中 加入饱和Na25203溶液，直至反应体系液红色消失；用IOOmL水和150mL(50mLX 3次）CH 2C12 重复萃取反应液，随后，分离并保留有机相，并用饱和NaCl溶液多次洗涤，再用无水Na2SO4 干燥有机相以除去多余的水分，得二（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯粗品。粗品用乙酸乙酯和 正己烷的混合液（V/V=l : 1)重结晶，得二（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯即TBC半抗原。 三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原分子式=C9H10Br4N3O 3;分子量527. 78 ;产率47. 1% ; 熔点：128~131 °C，纯度98%。
[0067] (2) TBC半抗原的表征
[0068] 获得的TBC半抗原，其结构通过核磁共振、红外光谱、紫外光谱等检测手段分析鉴 定，TBC半抗原中间体的核磁共振氢谱图如图2所示，其特征如下：? NMR(⑶Cl3) δ (ppm): 9. 22 (1H N-H)，4. 42 (1H R-CH-Br)，3· 77、3· 88 (2H-CH2-Br)，1. 44、1. 28 (2H-CH2_)。核磁表征 中有明显的-NH基团特征峰，结果表明：实验成功制备了 TBC半抗原。
[0069] TBC半抗原的红外光谱特征如下：IR(KBr)v/cm S1671. 98(C = 0伸缩）， 1430.92(0-!1面内弯曲）；3320.82(仲氨1?1伸缩），1295.93、1315.21((：4芳香伸缩） ； 2989. 12 (C-H 伸缩），1648. 84 ~1432. 85 (C = C 苯环骨架振动），910 ~665 (C-H 面外弯 曲），621. 08 (C-Br伸缩）。从图3的红外图谱结果分析看出，TBC半抗原分子的红外光谱中 有明显的-C00H、-NH、苯环、C-Br等基团特征吸收峰，证明制备的TBC半抗原分子中含有氨 基官能团。
[0070] 实施例4、三（2,3-二溴丙基）异氰脲酸醅半抗原的制备和表征
[0071] (I)TBC半抗原的制备
[0072] 称取0.5g(0.9448mmol)TBC半抗原中间体（二烯丙基异氰脲酸酯）溶于20mL CH 2Cl2中；在加热60°C状态下，向上述液体中逐滴加入132 μ L (4. 16mmol)液溴，保持回流反 应1小时，薄板层析法（TLC)监测反应直至反应完全；反应液冷却至室温后，向反应体系中 加入饱和Na 25203溶液，直至反应体系液红色消失；用IOOmL水和150mL(50mLX 3次）CH 2C12 重复萃取反应液，随后，分离并保留有机相，并用饱和NaCl溶液多次洗涤，再用无水Na2SO4 干燥有机相以除去多余的水分，得二（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯粗品。粗品用乙酸乙酯和 正己烷的混合液（V/V=l : 1)重结晶，得二（2,3_二溴丙基）异氰脲酸酯即TBC半抗原。 三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原分子式=C9H10Br4N3O 3;分子量527. 78 ;产率47. 1% ; 熔点：128~131 °C，纯度98%。
[0073] (2) TBC半抗原的表征
[0074] 获得的TBC半抗原，其结构通过核磁共振、红外光谱、紫外光谱等检测手段分析鉴 定，TBC半抗原中间体的核磁共振氢谱特征如下= 1H NMR(⑶Cl3) δ (ppm) :9. 22 (1H N-H)， 4· 42 (1H R-CH-Br)，3· 77、3· 88 (2H-CH2-Br)，L 44、L 28 (2H-CH2_)。核磁表征中有明显的-NH 基团特征峰，结果表明：实验成功制备了 TBC半抗原。
[0075] TBC半抗原的红外光谱特征如下：IR(KBr)v/cm S1671. 98(C = 0伸缩）， 1430.92(0-!1面内弯曲）；3320.82(仲氨1?1伸缩），1295.93、1315.21((：4芳香伸缩） ； 2989. 12 (C-H 伸缩），1648. 84 ~1432. 85 (C = C 苯环骨架振动），910 ~665 (C-H 面外弯 曲），621. 08 (C-Br伸缩）。从红外图谱数据结果分析看出，TBC半抗原分子的红外光谱中有 明显的-C00H、-NH、苯环、C-Br等基团特征吸收峰，证明制备的TBC半抗原分子中含有氨基 官能团。
[0076] 实施例5、三（2,3-二溴丙基）异氰脲酸醅人工全抗原的制备
[0077] 本发明制备的三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯半抗原，主要应用在环境中三（2， 3_二溴丙基）异氰脲酸酯的免疫检测中。它的主要用途之一，就是可以用来直接和蛋白质 大分子偶联，制备出用来免疫动物的免疫原，进而制备出相应的单克隆或多克隆抗体。在此 基础上建立三（2, 3-二溴丙基）异氰脲酸酯的免疫测定方法。下面就三（2, 3-二溴丙基） 异氰脲酸酯半抗原的使用做以下应用举例：
[0078] 采用戊二醛法制备TBC-BSA免疫原，具体合成步骤：称取0. 1434g(0. 5mmol)TBC半 抗原，溶于ImL DMF中；称取120mg BSA溶于IOmL 0.01M pH 7.40PBS缓冲液中；4°C磁力搅 拌下，逐滴将TBC半抗原溶液滴入BSA溶液中，滴加结束后向反应体系中加入200 μ L 25 % 戊二醛，4°C低温磁力搅拌24h;反应结束后，低温离心分离上清液，将上清液装入透析袋 中，用0.0 lM pH7. 40的PBS透析3d，每天换水3次，离心分离沉淀后得TBC免疫原TBC-BSA。 免疫原经紫外-可见分光光度计鉴定后，小量分装，-20°C冷冻保存。
[0079] 通过碳二亚胺法制备