[0047] 实施例1瑞加德松晶型E的制备
[0048] 将40mg瑞加德松，溶于2血的DMS0中，得到20mg/mL的溶液。W0. 45ym的滤 膜过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为；色谱柱为C18， 250X4. 6mm;紫外波长254nm;流动相，B相为己腊，A相为水相，流速ImL/min;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0049]
[0050] 按照上述既定程序分离，收集保留时间30min的主峰样品，获得己腊和水的混合 液。向获得的混合液加入lOmL的二氯甲焼，分得有机相，3(TC减压浓缩，残余液加入3mL DMF，溶清后，4(TC减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括XRD、 TGA、DSC、红外光谱，X畑图谱如图1所示，X畑图谱数据见表1，TGA图谱如图2所示，DSC图 谱如图3所示，红外光谱如图4所示。由图1~4可知，获得的固体为瑞加德松晶型E。
[0051] 表1瑞加德松晶型E的X畑图谱数据
[0052]
[0053] 由图2可知，在80°C时失重5. 3%，失重速率为2. 1%/min ;在182. 21°C时失重 4. 5%，失重速率为0. 39%/min ;当温度达到237°C时，出现持续失重，之后失重比例迅速提 高。分析结果认为8(TC应为样品中低沸点极性溶剂残留，182. 2rC应为样品中结晶水，而 237C失重应该是样品开始分解。结果表明本发明提供的瑞加德松晶型E热在237C才分 解，稳定性好，适合长期储存。
[0054] 由图3可知，温度达到173. 7rC时，有显著的温度吸收反应，温度达到22rC时，有 微量温度吸收，之后样品开始分解。本发明提供的瑞加德松晶型E的溶剂均为低沸点溶剂， 故173.7rc应为结晶水失水造成的温度反应。
[00巧]对该瑞加德松晶型E进行含量检测，其HPLC图谱如图5所示，HPLC图谱数据见表2。
[0056] 表2瑞加德松晶型E的HPLC图谱数据
[0057]
[005引结果显示瑞加德松晶型E的含量为99. 91%，表明制得的瑞加德松晶型E的纯度 商。
[0059] 实施例2瑞加德松晶型E的制备
[0060] 将lOmg瑞加德松，溶于1血的DMF中，得到27mg/mL的溶液。W0. 45ym的滤膜 过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为；色谱柱为C18， 250X4. 6mm;紫外波长254nm;流动相，B相为己腊，A相为水相，流速ImL/min;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0061]
[0062] 按照上述既定程序分离，收集保留时间30min的主峰样品，获得己腊和水的混合 液。向获得的混合液加入50mL的己酸己醋，分得有机相，3(TC减压浓缩，残余液加入ImL DMF，溶清后，4(TC减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括X-射线 衍射狂RD)、红外光谱、TGA、DSC,检测结果与实施例1的检测结果相化可知获得的固体为 瑞加德松晶型E。对该瑞加德松晶型E进行含量检测，其HPLC图谱与实施例的检测结果相 近。结果显示瑞加德松晶型E的含量为99. 89%，表明制得的瑞加德松晶型E的纯度高。
[0063] 实施例3瑞加德松晶型E的制备
[0064] 将30mg瑞加德松，溶于2. 5血的DMS0中，得到16mg/mL的溶液。W0. 45ym的滤 膜过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为；色谱柱为C18， 250X4. 6mm;紫外波长254nm;流动相，B相为己腊，A相为水相，流速ImL/min;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0065]
[0066] 按照上述既定程序分离，收集保留时间30min的主峰样品，获得己腊和水的混合 液。向获得的混合液加入20mL的甲苯，分得有机相，3(TC减压浓缩，残余液加入5mLDMF， 溶清后，4(TC减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括X-射线衍射 狂RD)、红外光谱、TGA、DSC,检测结果与实施例1的检测结果相近，可知获得的固体为瑞加 德松晶型E。对该瑞加德松晶型E进行含量检测，其HPLC图谱与实施例的检测结果相近。 结果显示瑞加德松晶型E的含量为99. 95%，表明制得的瑞加德松晶型E的纯度高。
[0067] 实施例4瑞加德松晶型E的制备
[006引将50mg瑞加德松，溶于0. 5血的DMF中，得到22mg/血的溶液。W0. 45ym的滤 膜过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为；色谱柱为C18， 250X4. 6mm;紫外波长254nm;流动相，B相为己腊，A相为水相，流速ImL/min;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0069]
[0070] 按照上述既定程序分离，收集保留时间30min的主峰样品，获得己腊和水的混合 液。向获得的混合液加入5mL的甲苯，分得有机化3(TC减压浓缩，残余液加入lOmLDMF， 溶清后，4(TC减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括X-射线衍射 狂RD)、红外光谱、TGA、DSC,检测结果与实施例1的检测结果相近，可知获得的固体为瑞加 德松晶型E。对该瑞加德松晶型E进行含量检测，其HPLC图谱与实施例的检测结果相近。 结果显示瑞加德松晶型E的含量为99. 89%，表明制得的瑞加德松晶型E的纯度高。
[0071] 对比例1瑞加德松晶型E的制备
[007引将Ig瑞加德松溶于10血DMF中，加入10血二氯甲焼，在50°C下减压浓缩，得到Ig瑞加德松晶型E，含量92%。
[0073] W上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可W做出若干改进和润饰，送些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种瑞加德松晶型E的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 取瑞加德松与第一有机溶剂混合，经反相高效液相色谱纯化，收集保留时间为30min的组分，获得第一中间产物； 取所述第一中间产物与第二有机溶剂混合，获得有机相，经浓缩，获得第二中间产物； 取所述第二中间产物与DMF混合，经析晶，即得。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述反相高效液相色谱的条件为：色 谱柱为C18,250X4. 6mm;紫外波长254nm;流动相的B相为己腊，流动相的A相为水相，流速 1血/min;梯度洗脱。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述梯度洗脱的方法为：4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一有机溶剂为DMSO或DMF中 的一种或两者的混合物。5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第二有机溶剂为二氯甲焼、H氯 甲焼、己酸己醋或甲苯中的一种或两者W上的混合物。6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，Wmg/mL计，所述瑞加德松与所述第 一有机溶剂的质量体积比为（10-50) : (0. 5~2. 5)。7. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，Wmg/mL计，所述瑞加德松与所述第 二有机溶剂的质量体积比为（10-50):巧~50)。8. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，Wmg/mL计，所述瑞加德松与所述 DMF的质量体积比为（10-50) : (1~10)。9. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述析晶的方法为减压浓缩。10. 根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述析晶的温度为4(TC。
【专利摘要】本发明涉及晶型制备领域，特别涉及一种瑞加德松晶型E的制备方法。该制备方法包括步骤：取瑞加德松与第一有机溶剂混合，经反相高效液相色谱纯化，收集保留时间为30min的组分，获得第一中间产物；取第一中间产物与第二有机溶剂混合，获得有机相，经浓缩，获得第二中间产物；取第二中间产物与DMF混合，经析晶，即得。本发明提供的制备方法可大大提高瑞加德松晶型E的纯度。
【IPC分类】C07H1/06, C07H19/167
【公开号】CN105198950
【申请号】CN201410269895
【发明人】刘伟, 张志刚, 任真
【申请人】上海紫源制药有限公司
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2014年6月17日