一种葛仙米多糖的提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及化工技术领域，更具体设及一种葛仙米多糖的提取方法。
【背景技术】
[0002] 葛仙米是念珠藻属（NostocVauch)中的拟球状念珠藻（Nostocsphaeoides 肺tzing)的俗称，它属于蓝藻口（切anophyta)，蓝藻纲（切anophyceae)，念珠藻目 (Nostocales)，念珠藻科（Nostocaceae)。又称天仙米、天仙菜、珍珠菜、水木耳、田木耳，是 我国传统出口的一种珍贵野生食药两用淡水固氮蓝藻。
[0003] 葛仙米在我国历史悠久，不仅是一道营养丰富的传统佳肴，而且具有较高的医疗 和保健功效。据记载，葛仙米有治疗夜盲症，脱肛，烫伤和兼具美容之功效，另外还具有明目 益气、解热清隔、利肠胃、久食延年、消除疲劳、收敛等功效。葛仙米富含蛋白质、维生素和微 量元素，还含有多种具有生物活性的多糖，早在东晋就被作为一种美食和中草药成分，在民 间广为流传。
[0004] 随着微藻产业的兴起与稳步发展，微藻多糖的抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗福射W 及免疫调节等功效正逐渐被人们所认识和接受，为运类产物成为药物、功能食品或化妆品 提供了基础。因此需要研发一种得率高、纯度高的葛仙米多糖的制备方法。
【发明内容】
[0005] (一）要解决的技术问题
[0006] 本发明要解决的技术问题就是如何提高葛仙米多糖的得率和纯度，而提供一种葛 仙米多糖的提取方法。
[0007](二）技术方案
[0008] 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种葛仙米多糖的提取方法，该方法包括 如下步骤：
[0009] 步骤一：备料：精选葛仙米，将其烘干，干燥溫度为50-80°C，时间1-化；将干燥的 葛仙米进行粉碎，过50-100目筛；
[0010] 步骤二：浸泡：用纯化水浸泡葛仙米粉，葛仙米粉与纯化水的重量比为1:30-80， 浸泡时间20-24h;
[0011] 步骤Ξ:水提：在浸泡后的葛仙米中加入纯化水，葛仙米粉与纯化水的重量比为 1:12-18,提取溫度85-95Γ，提取时间l-5h，降溫至室溫，离屯、去渣，得到提取液；
[0012] 步骤四：酶解：将提取液加热到50-60°C，加入提取液体积0. 05-0. 5%的蛋白酶 (lOVg) (w/v)，酶解2-化。降溫至室溫，离屯、去渣，得到酶解液，然后加热至90-100°C，保 持5-15min，W灭绝活酶，降溫至室溫，再过滤W去除酶解液中的固体杂质；
[0013] 步骤五：脱色：将酶解液加溫至65-75Γ，揽拌加入滤液体积0. 5-2%的活性炭，继 续保溫揽拌0. 5-化，静置过夜；离屯、除去活性炭，得无色透明的液体；
[0014] 步骤六：醇沉：将步骤五得到的液体进行浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/5,加入质 量浓度85-95%乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:3-5,醇沉时间3-5h，离屯、收集葛仙米多 糖沉淀，得到葛仙米多糖湿品；
[0015] 步骤屯：冻干：将葛仙米多糖湿品进行真空冷冻干燥，溫度为-18至-24°C，时间 6-2地，即得葛仙米多糖成品。
[0016] 优选地，在步骤一中，所述葛仙米粉过80目筛。
[0017] 优选地，在步骤二中，所述葛仙米粉与纯化水的重量比为1:50。
[0018] 优选地，在步骤Ξ中，所述的提取溫度为90°C。
[0019] 优选地，在步骤Ξ中，所述的提取时间为化。
[0020] 优选地，在步骤四中，所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶（市购可得）、膜蛋白酶（市购可 得）、雜猴桃蛋白酶（市购可得）中的一种或者几种。
[0021] 优选地，所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶。
[0022] 优选地，在步骤四中，加入提取液体积0. 05%的木瓜蛋白酶。 阳02引优选地，在步骤六中，所述的浓缩液与乙醇的体积比为1:4,醇沉时间地。
[0024] 优选地，本发明葛仙米多糖的提取方法包括如下步骤： 阳0巧]步骤一：备料：精选葛仙米，将其烘干，干燥溫度60°C，时间化；将干燥的葛仙米进 行粉碎，过80目筛；
[00%] 步骤二：浸泡：用纯化水浸泡葛仙米粉，葛仙米粉与纯化水的重量比为1:50,浸泡 时间2地；
[0027] 步骤Ξ:水提：在浸泡后的葛仙米中加入纯化水，葛仙米粉与纯化水的重量比为 1:15 (加入吸水后葛仙米质量的15倍水），提取溫度90°C，提取时间化，降溫至室溫，离屯、 去渣，得到提取液；
[0028] 步骤四：酶解：将提取液加热到55°C，加入提取液体积0. 05%的木瓜蛋白酶 (l〇4u/g) (w/v)，酶解化，加热到100°C，保持lOmin，W灭绝活酶，降溫至室溫，再过滤W去除 酶解液中的固体杂质；
[0029] 步骤五：脱色：将酶解液加溫至70°C，揽拌加入滤液体积1 %的活性炭，继续保溫 揽拌0.化，静置过夜；离屯、除去活性炭，得无色透明的液体；
[0030] 步骤六：醇沉：将步骤五得到的液体进行浓缩，浓缩至原体积的1/4,加入质量浓 度95%乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:4,醇沉时间地，离屯、收集葛仙米多糖沉淀，得到 葛仙米多糖湿品；
[0031] 步骤屯：冻干：将葛仙米多糖湿品进行真空冷冻干燥，溫度为-24°C，时间20h，即 得葛仙米多糖成品。
[0032] 本发明还提供了上述葛仙米多糖的提取方法所制得的葛仙米多糖。 阳03引 （S)有益效果
[0034] 本发明方法工艺稳定，葛仙米多糖得率高，提取得到的葛仙米多糖纯度高，杂质 少、外观佳，本发明方法是一种适用于工业化生产的绿色生产工艺。
【具体实施方式】
[0035] 下面结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。W下实施例用于说明本 发明，但不能用来限制本发明的范围。 阳〇36] 实施例1
[0037] 步骤一：备料：精选葛仙米，将其烘干，干燥溫度为60。时间化；将干燥的葛仙米 进行粉碎，过80目筛；
[0038] 步骤二：浸泡：用纯化水浸泡葛仙米粉，葛仙米粉与纯化水的重量比为1:50,浸泡 时间2地；
[0039] 步骤立：水提：在浸泡后的葛仙米中加入纯化水，料液比1:15 (加入吸水后葛仙米 质量的15倍水），提取溫度90°C，提取时间化，料液降溫至室溫离屯、弃去料渣，收集料液； W40] 步骤四：酶解：料液加热到55°C，加入料液体积0. 05%的木瓜蛋白酶（lOVg) (w/ V)酶解化。料液降溫至室溫离屯、弃去料渣，收集料液，然后加热至100°C，保持10min，W灭 绝活酶，再过滤W去除酶解液中的固体杂质；
[0041] 步骤五：脱色：滤液再次加溫至70°C，揽拌加入滤液体积1 %的活性炭，继续保溫 揽拌0.化，关闭揽拌，静置过夜；使用碟式离屯、机过滤掉活性炭，得澄清透明的液体；
[0042] 步骤六：醇沉：过滤液使用外循环蒸发器进行浓缩，浓缩至原体积的1/4,在酶解 液中加入95%乙醇，酶解液与乙醇的体积比为1:4,醇沉时间地，离屯、，收集葛仙米多糖沉 淀，则得到葛仙米多糖湿品；
[0043] 步骤屯：冻干：将葛仙米多糖湿品置于-24°C真空冻干机冷冻干燥12h，即得葛仙 米多糖成品。
[0044] 实施例2 W45] 步骤一：备料：精选葛仙米，将其烘干，干燥溫度为60°C，时间化；将干燥的葛仙米 进行粉碎，过50目筛；
[0046] 步骤二：浸泡：用纯化水浸泡葛仙米粉，葛仙米粉与纯化水的重量比为1:30,浸泡 时间2地；
[0047] 步骤Ξ:水提：在浸泡后的葛仙米中加入纯化水，料液比1:15