-2-[3-(巧S, 12R)-9-异丙基-11-氧 代-2, 7-二氧杂-10-氮杂-二环[12. 2. 2]十八碳-1 (17)，14 (18)，15-Ξ締-12-基）-脈 基]-2-甲基-丙酸叔下醋（20%产率）。 阳208]LC/MS(方法B) :Rt= 1.lOmin，m/z:689. 3[MH+]。 阳209]F. (S)-3-((1R, 3R)-3-氨基-环戊基）-2-[3-(巧S, 12R)-9-异丙基-11-氧 代-2, 7-二氧杂-10-氮杂-二环[12. 2. 2]十八碳-1 (17)，14 (18)，15-Ξ締-12-基）-脈 基]-2-甲基-丙酸（式II化合物） 阳 210]
悦11] 44mg(63.lymoU外消旋3-((lR，3R)-3-叔下氧基幾基氨基-环戊 基）-2-[3-(巧S, 12R)-9-异丙基-11-氧代-2, 7-二氧杂-10-氮杂-二环[12. 2. 2] 十八碳-1(17)，14(18)，15-Ξ締-12-基）-脈基]-2-甲基-丙酸叔下醋（步骤E的化 合物）溶于0. 5mlTFA、15μ1 &0和15μ1Ξ异丙基硅烷的混合物中并在室溫揽拌1小 时。将混合物通过制备型RP-HPLC(CH3CN/H20梯度+0. 1 %TFA)纯化，得到32mg纯的外消 旋（S)-3-( (1R, 3R)-3-氨基-环戊基）-2-[3-(巧S, 12R)-9-异丙基-11-氧代-2, 7-二氧 杂-10-氮杂-二环[12. 2. 2]十八碳-1(17),14(18),15-二締-12-基）-脈基]-2-甲 基-丙酸。通过使用手性固定相烟liralpak1C250x20mm)和庚烧/乙醇/甲醇的混合 物巧：1:1，用N，N-二乙胺调节）作为流动相分离非对映异构体。因此，得到8. 5mg纯的 做-3- ((1R, 3R) -3-氨基-环戊基）-2- [3-(巧S, 12R) -9-异丙基-11-氧代-2, 7-二氧 杂-10-氮杂-二环[12. 2. 2]十八碳-1(17),14(18),15-二締-12-基）-脈基]-2-甲 基-丙酸，其为无色无定形的物质（25%产率）。 阳21引 LC/MS(方法B) :Rt= 0. 64min，m/z:533. 3[MH+]。 悦13] 实施例4
[0214](巧-3-(6-氨基-R比晚-3-基）-2-[3-((3S, 6R)-3-异丙基-5-氧代-1, 8-二氧 杂-4-氮杂-环十二烧-6-基）-脈基]-2-甲基-丙酸 阳 215]
[0216]A. 2-(二苯亚甲基-氨基）-3- (6-叔下氧基幾基氨基-化晚-3-基）-2-甲基-丙 酸叔下醋（式XI化合物） 阳 217]
阳21引在氣气气氛下将3. 35g(10. 83mmol)(巧-2-(二苯亚甲基-氨基）-丙酸叔下醋 (来自实施例2,步骤A的化合物）在25血DMF中的溶液冷却至0°C，慢慢加入8. 13血 NaHMDS(2M的THF溶液，16. 25mmol)并将混合物揽拌 30min。滴加 3.llg(10. 83mmol) (5-漠 乙基-化晚-2-基）-氨基甲酸叔下醋在15mLDMF中的溶液并将混合物溫热至室溫。5小 时后将反应混合物用畑典1溶液泽灭，加入乙酸乙醋并分离各层。将有机层用化C1溶液洗 涂，干燥并减压浓缩。将残余物通过在使用正庚烧/乙酸乙醋作为洗脱剂的硅胶上的快速 色谱纯化，得到1.09g(19%产率）标题化合物。 阳219] LC/MS(方法B) :Rt= 1.01min，m/z:516. 3[MH+]。 阳220] B. 2-氨基-3-(6-叔下氧基幾基氨基-化晚-3-基）-2-甲基-丙酸叔下醋（式 VIII化合物） 阳 221]
阳222] 向680mg(l. 32mmol)2-(二苯亚甲基-氨基）-3-化-叔下氧基幾基氨基-化 晚-3-基）-2-甲基-丙酸叔下醋（来自步骤A的化合物）在120mL乙酸乙醋中的溶液中加 入67mgPd/C(l〇%)并将混合物在2己&在室溫氨化。揽拌过夜后，与另一份67mg10% Pd/C-起加入lOOmLMeOH并重复进行氨化。1天后，滤出催化剂并减压浓缩溶液。将残余 物通过制备型HPLC纯化，得到358mg(58%产率）所期望的化合物。 阳22引 LC/MS(方法B) :Rt= 0. 65min，m/z:352. 3[MH+]。 阳224] C. (S)-2-氨基-3-(6-叔下氧基幾基氨基-化晚-3-基）-2-甲基-丙酸叔下醋 (式VIII化合物） 阳2巧]
[0226]使用化iralcel0D-H作为固定相和含0. 1%二乙胺的正庚烧/乙醇作为流动相 将12. 5g外消旋2-氨基-3-(6-叔下氧基幾基氨基-化晚-3-基）-2-甲基-丙酸叔下醋 分离成其对映异构体，得到5. 5g(44%产率）所期望的物质。 阳227]D.(巧-3- (6-叔下氧基幾基氨基-R比晚-3-基）-2- [3- ((3S, 6R) -3-异丙基-5-氧 代-1，8-二氧杂-4-氮杂-环十二烧-6-基）-脈基]-2-甲基-丙酸叔下醋（式ΧΠ化合 物） 阳22引
阳229] 将0. 358g (1. OlSmmol)(S)-2-氨基-3- (6-叔下氧基幾基氨基-化晚-3-基）-2-甲 基-丙酸叔下醋（来自步骤C的化合物）加至0. 165g(l. OlSmmol) 1, Γ-幾基二咪挫在16mL DMF中的溶液中并在室溫在氣气下揽拌。加入0. 481g(l. OlSmmol) (3R，6R)-6-氨基-3-异 丙基-1，8-二氧杂-4-氮杂-环十二烧-5-酬-Ξ氣乙酸盐和0. 376血(2. 036mmol)N，N-二 异丙基乙基胺在16mL DMF中的溶液并在室溫在氣气下揽拌过夜。蒸发溶剂并将残余物通 过制备型HPLC纯化得到0. 218g(35%产率）所期望的产物。 阳230]LC/MS(方法B):Rt=0.84min，m/z:622. 45[MH+]。 阳231]E.(巧-3- (6-氨基-R比晚-3-基）-2- [3- ((3S, 6R) -3-异丙基-5-氧代-1, 8-二氧 杂-4-氮杂-环十二烧-6-基）-脈基]-2-甲基-丙酸（式II化合物） 阳2；32]
阳23引0.218g(0. 3mmol) (S)-3-(6-叔下氧基幾基氨基-化 晚-3-基）-2-[3- ((3S,6R)-3-异丙基-5-氧代-1, 8-二氧杂-4-氮杂-环十二 烧-6-基）-脈基]-2-甲基-丙酸叔下醋（来自步骤D的化合物）溶于6mL DCM/TFA (1: 1，V/ V)中并在室溫揽拌3小时。蒸发后，将残余物吸收在1N肥1中并冷冻干燥得到0.148g标 题化合物，其为盐酸盐（99%产率）。 阳234]LC/MS(方法C) :Rt=0.73min，m/z:465. 3[MH+]
[0235]'H-NMR(DMS0-d6, 400MHz)δ[ppm] = 8. 00 (2H,s, br), 7. 70-7. 58 (2H,m), 7. 18 (d, 1 H)，6. 91 (d,IH) ,6.60-6. 56 (m，2H), 4.07 (t,IH) ,3.72-3. 29 (m,lOH), 3. 11 (dd，2H), 1.78 (m,IH)，1. 67 (m, 2H)，1. 51 (m,IH)，1. 28 (s, 3H)，0. 86 (d, 3H)，0. 80 (d, 3H)。 阳236] 下表具体详细说明一些本发明式I化合物的实例的结构。 阳237] 表1 : 阳23引
[0239] 药理学实施例
[0240] 药理学实施例1 :TAFIa抑制作用 阳241] 使用来自AmericanDia即ostica的Actic虹ome血浆TAFI活性试剂盒（Pr.No. 874)测试所制备物质的TAFIa抑制作用。运需要向2μ1 2. 5mM所述物质的DMS0溶液 中加入 28μ1 测定缓冲液（20mM胎pes, 150mM化C1,pH7. 4)和 10μ1TAFIa(American Dia即osticaPr.No. 874TAFIA;2. 5μg/ml)并在96半孔微量滴定板中在室溫溫育15分 钟。酶反应通过加入1〇μ1TAFIa显影剂（用测定缓冲液1:2预稀释）起始。反应时程在 420nm在微量滴定板阅读器（SpectraMaxplus384;MolecularDevices)中监测 15 分钟。 阳24引 借助于SoftmaxPro软件（版本4. 8;MolecularDevices)由所述物质的系列稀 释液的平均值（一式两份测定）计算ICs。值。 阳2创表2 :实施例化合物和W02009146802的对比实施例的ICs。值
[0244]
阳245] 对比实施例可如W02009146802中所述或经由类似的方法制备。
[0246] 本发明式I化合物显然对酶TAFIa具有强的抑制活性。此外，表2显示，作为TAFIa 抑制剂，本发明式I化合物令人惊讶地显示出比W02009146802所述的化合物明显较高的活 性。
[0247] 此外，令人惊讶地发现，与W02009146802所述的抑制剂相比，式I化合物显示出时 间依赖性ICs。且由此显示出慢的紧密结合（ti曲t-binding)机制（较长的停留时间），其 可导致有利的更长的作用持续时间。药理学实施例2和表3例证了该观察数据。
[0248] 药理学实施例2 :可变预溫育时间的TAFIa抑制作用 悦49] 使用来自AmericanDia即ostica的Actic虹ome血浆TAFI活性试剂盒（Pr. No. 874)测试所制备物质的TAFIa抑制作用。运需要向2μ1 2. 5mM所述物质的DMS0溶液 中加入 28μ1 测定缓冲液（20mM胎pes, 150mM化C1,pH7. 4)和 10μ1TAFIa(American Dia即osticaPr.No. 874TAFIA;2. 5μg/ml)并在96半孔微量滴定板中在室溫溫育可变的 预溫育时间（0、5、15和30分钟）。酶反应通过加入10μ1TAFIa显影剂（用测定缓冲液1:2 预稀释）起始。反应时程在420nm在微量滴定板阅读器（SpectraMaxplus384;Molecular Devices)中监测15分钟。 阳巧0] 借助于SoftmaxPro软件（版本4. 8;MolecularDevices)由所述物质的系列稀 释液的平均值（一式两份测定）计算ICg。值。由Omin的1CW值相对于X分钟的1Cg。值确 定ICs。值的系数，其中X可为〇、5、15或30分钟预溫育时间。 阳巧U 表3:实施例2及其来自胖02009146802的对比实施例的1〔5。系数（0111111的1〔5。值 /xmin预溫育时间的ICw值）。 阳巧2]
阳巧引在0分钟的预溫育时间，实施例2和W01009146802对比实施例的系数是类似的。 随着预溫育时间的增加，两种化合物显示出不同的表现。对于化合物2,该系数增加。对于 对比化合物，该系数在时间上保持几乎恒定。运显示出式I化合物相对于W01009146802化 合物的时间依赖性抑制剂活性并由此显示出慢的紧密结合机制（较长的停留时间），其可 导致本发明化合物的有利的更长的作用持续时间。 阳巧4]因此，本发明化合物可用作药物，尤其是作为TAFIa抑制剂的药物。 阳巧5] 因此，在另一个方面，本发明提供了药物，其包含呈其任意立体异构形式或任意比 例的立体异构形式的混合物形式的式（I)化合物，或其药用盐。 阳巧6] 本发明还提供了呈其任意立体异构形式或任意比例的立体异构形式的混合物形 式的式I化合物，或其药用盐，用于治疗一种或多种与血栓形成、栓塞、过高血液凝固性或 纤维化改变相关的病症，更具体地用于治疗一种或多种选自W下的病症：屯、肌梗塞；屯、绞 痛和其它形式的