]实施例3
[0032](1)称取一定量的大豆分离蛋白，配制成3%水溶液，搅拌均匀，用1.0mol/L的NaOH溶液将其pH值调至12，在温度为65°C的恒温水浴中搅拌预热20分钟，得到预处理的大豆分离蛋白溶液。
[0033](2)在保持体系pH12的条件下，向步骤⑴得到的预处理的大豆分离蛋白溶液中，添加0.2%的乙二胺四乙酸酐进行酰化反应，反应时间为2h，得到酰化改性大豆分离蛋白溶液。
[0034](3)取一定量由步骤(2)得到的酰化改性大豆分离蛋白溶液，室温搅拌10分钟，搅拌速度为800rpm，加入0.8%的葡萄糖酸内酯为交联剂，继续搅拌15min，然后在4°C下放置一夜。
[0035](4)将由步骤(3)得到的酰化改性大豆分离蛋白凝胶置于干燥箱中，40°C干燥一夜，得到干燥样品。
[0036](5)配制不同pH值的缓冲溶液，将制备好的大豆分离蛋白凝胶样品，分别放置于pH2、4、6、8、10、12的缓冲溶液中，用湿滤纸吸取凝胶表面的水分称重，计算溶胀率，得到不同pH缓冲溶液下酰化改性大豆分离蛋白凝胶溶胀率，用以分析凝胶的pH值响应性。
[0037]实施例4
[0038](1)称取一定量的大豆分离蛋白，配制成3%水溶液，搅拌均匀，用1.0mol/L的NaOH溶液将其pH值调至10，在温度为75°C的恒温水浴中搅拌预热30分钟，得到预处理的大豆分离蛋白溶液。
[0039](2)在保持体系pH1的条件下，向步骤⑴得到的预处理的大豆分离蛋白溶液中，添加0.2%的乙二胺四乙酸酐进行酰化反应，反应时间为2h，得到酰化改性大豆分离蛋白溶液。
[0040](3)取一定量由步骤(2)得到的酰化改性大豆分离蛋白溶液，室温搅拌10分钟，搅拌速度为800rpm，加入0.8%的葡萄糖酸内酯为交联剂，继续搅拌15min，然后在4°C下放置一夜。
[0041](4)将由步骤(3)得到的酰化改性大豆分离蛋白凝胶置于干燥箱中，40°C干燥一夜，得到干燥样品。
[0042](5)配制不同pH值的缓冲溶液，将制备好的大豆分离蛋白凝胶样品，分别放置于pH2、4、6、8、10、12的缓冲溶液中，用湿滤纸吸取凝胶表面的水分称重，计算溶胀率，得到不同pH缓冲溶液下酰化改性大豆分离蛋白凝胶溶胀率，用以分析凝胶的pH值响应性。
[0043]实施例5
[0044](1)称取一定量的大豆分离蛋白，配制成3%水溶液，搅拌均匀，用1.0mol/L的NaOH溶液将其pH值调至11，在温度为75°C的恒温水浴中搅拌预热50分钟，得到预处理的大豆分离蛋白溶液。
[0045](2)在保持体系pHll的条件下，向步骤⑴得到的预处理的大豆分离蛋白溶液中，添加0.5%的乙二胺四乙酸酐进行酰化反应，反应时间为2h，得到酰化改性大豆分离蛋白溶液。
[0046](3)取一定量由步骤(2)得到的酰化改性大豆分离蛋白溶液，室温搅拌10分钟，搅拌速度为800rpm，加入0.8%的葡萄糖酸内酯为交联剂，继续搅拌15min，然后在4°C下放置一夜。
[0047](4)将由步骤(3)得到的酰化改性大豆分离蛋白凝胶置于干燥箱中，40°C干燥一夜，得到干燥样品。
[0048](5)配制不同pH值的缓冲溶液，将制备好的大豆分离蛋白凝胶样品，分别放置于pH2、4、6、8、10、12的缓冲溶液中，用湿滤纸吸取凝胶表面的水分称重，计算溶胀率，得到不同pH缓冲溶液下酰化改性大豆分离蛋白凝胶溶胀率，用以分析凝胶的pH值响应性。
[0049]实施例6
[0050](1)称取一定量的大豆分离蛋白，配制成3%水溶液，搅拌均匀，用1.0mol/L的NaOH溶液将其pH值调至12，在温度为65°C的恒温水浴中搅拌预热30分钟，得到预处理的大豆分离蛋白溶液。
[0051](2)在保持体系pH12的条件下，向步骤⑴得到的预处理的大豆分离蛋白溶液中，添加0.3%的乙二胺四乙酸酐进行酰化反应，反应时间为2h，得到酰化改性大豆分离蛋白溶液。
[0052](3)取一定量由步骤(2)得到的酰化改性大豆分离蛋白溶液，室温搅拌10分钟，搅拌速度为lOOOrpm，加入1.2%的葡萄糖酸内酯为交联剂，继续搅拌15min，然后在4°C下放置一夜。
[0053](4)将由步骤(3)得到的酰化改性大豆分离蛋白凝胶置于干燥箱中，40°C干燥一夜，得到干燥样品。
[0054](5)配制不同pH值的缓冲溶液，将制备好的大豆分离蛋白凝胶样品，分别放置于pH2、4、6、8、10、12的缓冲溶液中，用湿滤纸吸取凝胶表面的水分称重，计算溶胀率，得到不同pH缓冲溶液下酰化改性大豆分离蛋白凝胶溶胀率，用以分析凝胶的pH值响应性。
[0055]实施例7
[0056](1)称取一定量的大豆分离蛋白，配制成3%水溶液，搅拌均匀，用1.0mol/L的NaOH溶液将其pH值调至12，在温度为65°C的恒温水浴中搅拌预热40分钟，得到预处理的大豆分离蛋白溶液。
[0057](2)在保持体系pH12的条件下，向步骤⑴得到的预处理的大豆分离蛋白溶液中，添加0.5%的乙二胺四乙酸酐进行酰化反应，反应时间为2h，得到酰化改性大豆分离蛋白溶液。
[0058](3)取一定量由步骤(2)得到的酰化改性大豆分离蛋白溶液，室温搅拌10分钟，搅拌速度为1200rpm，加入1.6%的葡萄糖酸内酯为交联剂，继续搅拌15min，然后在4°C下放置一夜。
[0059](4)将由步骤(3)得到的酰化改性大豆分离蛋白凝胶置于干燥箱中，40°C干燥一夜，得到干燥样品。
[0060](5)配制不同pH值的缓冲溶液，将制备好的大豆分离蛋白凝胶样品，分别放置于pH2、4、6、8、10、12的缓冲溶液中，用湿滤纸吸取凝胶表面的水分称重，计算溶胀率，得到不同pH缓冲溶液下酰化改性大豆分离蛋白凝胶溶胀率，用以分析凝胶的pH值响应性。
【主权项】
1.一种具有pH响应特性的大豆蛋白凝胶的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤:(1)称取一定量的大豆分离蛋白，配制成3%水溶液，搅拌均匀，用l.0mol/L的NaOH溶液将其pH值调至10?12，在温度为55?75°C的恒温水浴中搅拌预热20?50分钟，得到预处理的大豆分离蛋白溶液；(2)在保持体系pH1?12的条件下，向步骤(1)得到的预处理的大豆分离蛋白溶液中，添加0.1?0.5%的乙二胺四乙酸酐进行酰化反应，反应时间为1?3h，得到酰化改性大豆分离蛋白溶液；(3)取一定量由步骤(2)得到的酰化改性大豆分离蛋白溶液，室温搅拌10分钟，搅拌速度为800?1200rpm，加入0.8?1.6%的葡萄糖酸内酯为交联剂，继续搅拌15min，然后在4°C下放置一夜；(4)将由步骤(3)得到的酰化改性大豆分离蛋白凝胶置于干燥箱中，40°C干燥一夜，得到干燥样品；(5)配制不同pH值的缓冲溶液，将制备好的大豆分离蛋白凝胶样品，分别放置于pH2、4、6、8、10、12的缓冲溶液中，用湿滤纸吸取凝胶表面的水分称重，计算溶胀率，得到不同pH缓冲溶液下酰化改性大豆分离蛋白凝胶溶胀率，用以分析凝胶的pH值响应性。2.根据权利要求1所述的一种具有pH响应特性的大豆蛋白凝胶的制备方法，其特征在于，所述的大豆蛋白酰化改性条件参数优化为:配制3%大豆蛋白水溶液，搅拌均匀，用1.0mol/L的NaOH溶液将其pH值调至12，在温度为65°C的恒温水浴中搅拌预热30分钟；在保持体系pH 12的条件下，添加0.3%的乙二胺四乙酸酐进行酰化反应，反应时间为2h。3.根据权利要求1所述的一种具有pH响应特性的大豆蛋白凝胶的制备方法，其特征在于，所述的交联条件参数优化为:将酰化改性大豆分离蛋白溶液室温搅拌10分钟，搅拌速度为lOOOrpm，加入1.2%的葡萄糖酸内酯为交联剂，继续搅拌15min，然后在4°C下放置过夜。
【专利摘要】本发明涉及一种具有pH响应特性的大豆蛋白凝胶的制备方法，属于食品蛋白质加工的技术领域；本方法以大豆分离蛋白为原始材料，利用乙二胺四乙酸酐将大豆分离蛋白酰化改性，以葡萄糖酸内酯为交联剂制备改性大豆分离蛋白凝胶，蛋白质分子中引入的羧基能够实现凝胶对pH值的响应性，所用原材料均为食品级安全材料，且可以作为营养物质被人体吸收利用，具有更好的实用性。
【IPC分类】C08J3/02, C08H1/00
【公开号】CN105367807
【申请号】CN201510945302
【发明人】张英华, 李 远, 刘艳乐, 初宇昊, 朱敏
【申请人】东北农业大学
【公开日】2016年3月2日
【申请日】2015年12月14日