一种罗非鱼盐溶蛋白的提取方法及其热诱导凝胶的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物技术领域，尤其设及一种罗非鱼盐溶蛋白的提取方法及其热诱导 凝胶的制备方法。
【背景技术】
[0002] 鱼肉中的盐溶性蛋白主要是指肌原纤维蛋白，它是影响肉制品的保水性及凝胶特 性的一类最主要的蛋白质，加热时形成凝胶的持水性与肉制品的得率密切相关。它的功能 性质是肉食品加工中重要的功能特性之一。目前对于盐溶性蛋白热诱导凝胶特性的研究多 W畜禽肉为对象，畑ang等2001年研究了离子强度对兔肉盐溶性蛋白热凝胶性的影响； Tomasz等2003年研究了pH值对鸡胸肉蛋白凝胶特性的影响;王修俊等2008年对复合憐酸盐 对鲜切猪里脊肉肌球蛋白凝胶保水性的影响作了研究；王淑杰、周亚军等2010年对鹿肉盐 溶蛋白热诱导凝胶特性影响因素进行了研究，而目前国内外对鱼肉中盐溶性蛋白凝胶特性 的研究还比较少。
[0003] 罗非鱼俗称非洲娜鱼，中国作为全球最大的罗非鱼生产基地，2007年罗非鱼的产 量已经达到121万吨，近年来产量仍在不断增加，而罗非鱼的加工主要是利用集中冷冻保鲜 或初加工冷藏保鲜，产品附加值低。研究罗非鱼鱼肉盐溶蛋白热诱导凝胶保水性，进行更多 品种的罗非鱼肉制品的开发及生产，对罗非鱼肉制品加工具有重要的指导意义。而盐溶蛋 白热诱导凝胶的形成除受其蛋白质结构和分子特征的影响外，还受到提取和加工条件等因 素的影响。
[0004] 有鉴于此，本发明人研究和设计了一种罗非鱼盐溶蛋白的提取方法及其热诱导凝 胶的制备方法，本案由此产生。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种罗非鱼盐溶蛋白的提取方法，通过原料处理及加盐等 步骤，W有效提高罗非鱼盐溶蛋白的提取率。
[0006] 本发明的另一目的在于提供一种罗非鱼盐溶蛋白的热诱导凝胶的制备方法，通过 添加憐酸盐，W提高热诱导凝胶的凝胶持水性。
[0007] 为了实现上述目的，本发明解决其技术问题所采取的技术方案是：
[000引一种罗非鱼盐溶蛋白的提取方法，包括W下步骤：
[0009] 步骤一、原料处理：
[0010] 罗非鱼取肉，漂洗后渐干，绞碎，分装为30g/袋，冷冻胆藏，备用；
[0011] 步骤二、罗非鱼鱼肉盐溶蛋白的提取：
[0012] 先将样品解冻至半冻结状态，放入绞肉机，同时加入氯化钢溶液，充分绞碎，绞碎 后的样品用巧樣酸或氨氧化钢调整pH，匀浆后在4°C冰箱中静置10min，4000r/min离屯、 lOmin，得到的上清液即为盐溶蛋白溶液，4°C冷藏备用。
[0013] 作为实施例的优选方式，所述步骤二中，所述罗非鱼鱼肉盐溶蛋白的提取条件是 氯化钢盐浓度ο. 63mo 1/L、调节pH至7.3、提取时间15.9h、固液比1:20。
[0014] -种罗非鱼盐溶蛋白的热诱导凝胶的制备方法，包括W下步骤:将所制得的盐溶 蛋白溶液称重后，加入适量的憐酸盐，置于干净的烧杯中，然后于40°C水浴锅中加热40min， 加热后的溶液于沸水浴中加热lOmin得到热诱导凝胶。
[0015] 作为实施例的优选方式，所述憐酸盐的组分及其含量为焦憐酸钢(SAP)0.15%、Ξ 聚憐酸钢(STP)0.2%、六偏憐酸钢(ΗΜΡ)0.10%。
[0016] 本发明采用上述技术方案后，当罗非鱼鱼肉盐溶性蛋白提取条件为化C1溶液浓度 6.3mol/L，抑7.3，提取时间15.9h罗非鱼鱼肉盐溶性蛋白提取值为24.35mg/g;憐酸盐可W 明显增加罗非鱼肉盐溶性蛋白热诱导凝胶的持水性，当添加比例为焦憐酸钢0.15%、Ξ聚 憐酸钢0.20%、六偏憐酸钢0.10%时，凝胶持水性达到最大值为80.47%。
【附图说明】
[0017] 图1为本发明盐溶液浓度对蛋白质含量的影响；
[0018] 图2为本发明pH值对蛋白质含量的影响；
[0019] 图3为本发明提取时间对蛋白质含量的影响；
[0020] 图4为本发明固液比对蛋白质总量的影响；
[0021 ]图5为本发明焦憐酸钢对凝胶持水性的影响；
[0022] 图6为本发明Ξ聚憐酸钢对凝胶持水性的影响；
[0023] 图7为本发明六偏憐酸钢对凝胶持水性的影响。
【具体实施方式】
[0024] W下结合附图和【具体实施方式】W对本发明作进一步说明。
[00剧分析方法
[0026] 盐溶蛋白含量的测定一一考马斯亮蓝法
[0027] 鱼肉盐溶性蛋白热诱导凝胶的制备
[0028] 得到的盐溶蛋白溶液称重后，加入适量的憐酸盐，置于干净的烧杯中，然后于40°C 水浴锅中加热40min，加热后的溶液于沸水浴中加热lOmin得到热诱导凝胶，形成的凝胶用 自来水冷却并称重(W1)。
[0029] 鱼肉盐溶性蛋白凝胶持水性的测定
[0030] 将制备好的盐溶蛋白质凝胶W3000r/min的速度离屯、5min，称重得W2,计算持水性 (WHC)〇
[0031] WHC=W2/W1*100%
[00创式中，W巧未离屯、的凝胶重(g) ;W2为离屯、后的凝胶重(g)。
[0033] 实施例1
[0034] -种罗非鱼盐溶蛋白的提取方法，包括W下步骤：
[0035] 步骤一、原料处理：
[0036] 罗非鱼取肉，漂洗后渐干，绞碎，分装为30g/袋，冷冻胆藏，备用；
[0037] 步骤二、罗非鱼鱼肉盐溶蛋白的提取：
[0038] 先将样品解冻至半冻结状态，放入绞肉机，同时加入氯化钢溶液，充分绞碎，绞碎 后的样品用巧樣酸或氨氧化钢调整pH，匀浆后在4°C冰箱中静置10min，4000r/min离屯、 lOmin，得到的上清液即为盐溶蛋白溶液，4°C冷藏备用。
[0039] 作为实施例的优选方式，所述步骤二中，所述罗非鱼鱼肉盐溶蛋白的提取条件是 氯化钢盐浓度0.63mo 1/L、调节pH至7.3、提取时间15.她、固液比1:20。
[0040] -种罗非鱼盐溶蛋白的热诱导凝胶的制备方法，包括W下步骤:将所制得的盐溶 蛋白溶液称重后，加入适量的憐酸盐，置于干净的烧杯中，然后于40°C水浴锅中加热40min， 加热后的溶液于沸水浴中加热lOmin得到热诱导凝胶。
[0041] 作为实施例的优选方式，所述憐酸盐的组分及其含量为焦憐酸钢(SAP)0.15%、Ξ 聚憐酸钢(STP)0.2%、六偏憐酸钢(ΗΜΡ)0.10%。
[0042] 实施例2
[0043] 2.1罗非鱼鱼肉盐溶性蛋白提取条件的单因素实验
[0044] 2.1.1不同NaCl溶液浓度对盐溶性蛋白提取的影响
[0045] 在抑值为7.0、提取时间为2地、固液比为1:20的条件下，研究不同浓度的化C1溶液 对盐溶性蛋白提取的影响，见图1。
[0046] 由图1中可W看出，提取的盐溶性蛋白含量在化C1溶液浓度为0-0.4mol/L的范围 内并无明显变化，随着化C1溶液浓度由0.4mol/L提高到0.6mol/L，盐溶性蛋白的含量达到 最大值为24.02mg/g，继续增加 NaCl溶液浓度到0.8mol/L蛋白含量变化趋于平稳。
[0047] 2.1.化Η对盐溶性蛋白提取的影响
[004引在化C1溶液浓度为0.6mo 1 /L、提取时间为2地、固液比为1: 20的条件下，研究溶液 pH值对盐溶性蛋白提取的影响，见图2。
[0049] 由图2可知，当提取溶液的抑值为4.0时，溶液中盐溶性蛋白含量很低，运是因为抑 值接近蛋白质等电点，蛋白质发生沉降而造成的，在pH值由4.0至化.0的过程中，溶液中盐溶 性蛋白含量逐渐增大，而pH值由6