式管或者滤网过滤以便去除细胞团块;8)将细胞过流式细胞仪检测。检测的结果表明，CSFl与G-CSF联合动员比单独用G-CSF动员，CD34阳性细胞比例增加1.8倍，数据为5次独立实验的平均值SEM (P〈0.01)(如图1所示)。
[0035]实施例2、
CSFl对造血干细胞增殖的促进作用
经⑶34磁珠分选获得的造血干细胞采用造血干细胞无血清培养基培养，造血干细胞接种培养袋后置于在37 °C(5%C02)培养，每过12小时温和摇动培养袋，整个培养过程培养基一直额外添加有2ng/mL CSFl。每隔12小时显微镜下目测细胞密度，72小时之后用MTT法测定细胞总密度。研究结果表明，采用本发明所描述的添加有CSFl的培养基条件下，造血干细胞密度比不添加CSFl的培养条件下获得的细胞密度提高3.6倍，数据为5次独立实验的平均值SEM(P〈0.01)(如图 2 所示)。
[0036]实施例3、
CSFl对间充质干细胞增殖的促进作用
培养间充质干细胞的常规培养基配方为:DMEM/F12基本培养基，10%胎牛血清(FBS)。为比较本实施例所描述的培养基与为检查本实施例所描述的培养基对人干细胞培养的扩增速度的影响，本实施例选用了脂肪、骨髓间以及脐带三种组织器官来源的人干细胞(ADSC，BMSC，UMBSC)做体外细胞培养实验，细胞接种密度控制在10-20%之间，接种前培养皿用细胞贴壁材料室温处理2小时或4°C保温过夜，接种后加入培养基培养(37°C，5% CO2)ο每隔12小时通过MTT法测一次细胞密度。研究结果表明，采用本实施例所描述的干细胞培养基对造血干细胞的扩增速度与常规的血清培养基相比，达到细胞密度饱和的时间大大缩短，数据为5次独立实验的平均值SEM(P〈0.01)(如图3所示)。
[0037]实施例4、
CSFl活化后间充质干细胞的成脂能力
在体外适当诱导分化条件下间充质干细胞可以分化成脂肪细胞，为检测培养之后间充质干细胞的成脂能力，实验组为CSFl添加后培养获得的间充质干细胞，对照组为未添加CSFl培养获得的间充质干细胞，培养的间充质干细胞来源于脐带、骨髓和脂肪，因此又分为脐带间充质干细胞(UMSC)、骨髓间充质干细胞(BMSC)以及脂肪干细胞(ADSC)，本发实施例采用如下步骤进行检测:I)首先配制分化培养基A和B，其中分化培养基A组分包括:基础培养基，胎牛血清，青霉素链霉素，谷氨酰胺，胰岛素，3-异丁基-1-甲基黄嘌呤，罗格列酮，地塞米松及吲哚美辛；分化培养基B组分包括:基础培养基，胎牛血清，青霉素链霉素，谷氨酰胺以及胰岛素，配制完毕之后混合均匀，放4°C冰箱避光保存备用;2)在六孔板中接种105个细胞/孔，继续培养细胞;3)待细胞长到100%汇合度后，吸去旧的培养基，每孔加入1.5 mL分化培养基A;4)三天后吸去分化培养基A，每孔加入1.5mL分化培养基B; 5)24小时后，吸去分化培养基B，每孔加入1.5mL分化培养基A; 6 )轮换加入分化培养基A和B，重复d_e步骤4次;7 )最后加入分化培养基B培养7天(中间需换液一次分化培养基B) ; 8)诱导结束之后，吸去培养基，向每孔中加入ImL的4%多聚甲醛固定30分钟;9)用PBS洗2遍；10)向每孔中加入ImL油红O染色液，染色30分钟；11)用PBS洗3遍，然后置于倒置显微镜下观察拍照，统计脂肪细胞所占比率。结果发现，添加CSFl之后获得的不同来源的间充质干细胞相对不加CSFl培养获得的间充质干细胞的形成脂肪细胞的能力完全保持，数据为5次独立实验的平均值SEM(P〈0.01)(如图4所示)。
[0038]实施例5、
CSFl活化后间充质干细胞的成骨能力
在体外适当诱导分化条件下间充质干细胞可以分化成成骨细胞，为检测培养之后间充质干细胞的成骨能力，实验组为CSFl添加后培养获得的间充质干细胞，对照组为未添加CSFl培养获得的间充质干细胞，培养的间充质干细胞来源于脐带、骨髓和脂肪，因此又分为脐带间充质干细胞(UMSC)、骨髓间充质干细胞(BMSC)以及脂肪干细胞(ADSC)，本实施例采用如下步骤进行检测:I)首先配制分化培养基，包括基础培养基，胎牛血清，青霉素链霉素，谷氨酰胺，维生素C，i3_甘油磷酸以及地塞米松，混合均匀，放4°C冰箱避光保存备用;2)将六孔板用0.1%的明胶预处理，接种细胞前至少提前30分钟用明胶处理，或者加入明胶之后把六孔板用封口膜封上，放4°C冰箱备用；3)六孔板在使用前吸去多余明胶液体，然后在1%明胶预处理的六孔板中接种适量细胞(5乂104个细胞/孔)；在37°(:，5%0)2培养箱中培养24小时;5)24小时后吸去培养基，换上成骨诱导分化培养基(1.5 mL/孔);6)每3天换一次成骨诱导分化培养基，诱导2-3周;7)诱导结束之后，吸去培养基，向每孔中加入ImL的4%多聚甲醛固定30分钟;8)用PBS洗2遍;9)向每孔中加入ImL茜素红S染色液，染色5-10分钟;9)用PBS洗3遍，然后置于倒置显微镜下观察拍照，统计骨细胞所占比率。研究结果表明，添加CSFl之后获得的不同来源的间充质干细胞相对不加CSFl培养获得的间充质干细胞的形成骨细胞的能力完全保持，数据为5次独立实验的平均SEM(P〈0.01)(如图5所示)。
[0039]实施例6、
CSFl活化后间充质干细胞的成软骨能力
在体外适当诱导分化条件下间充质干细胞可以分化成软骨细胞，为检测培养之后间充质干细胞的成软骨能力，实验组为CSFl添加后培养获得的间充质干细胞，对照组为未添加CSFl培养获得的间充质干细胞，培养的间充质干细胞来源于脐带、骨髓和脂肪，因此又分为脐带间充质干细胞(UMSC)、骨髓间充质干细胞(BMSC)以及脂肪干细胞(ADSC)，本实施例采用如下步骤进行检测:I)首先配制分化培养基，包括基础培养基，地塞米松，抗坏血酸，胰岛素-转铁蛋白-砸添加物，丙酮酸钠，脯氨酸以及TGF-阳，混合均匀，放4°C冰箱避光保存备用;2)将六孔板用明胶预处理;3)六孔板在使用前吸去多余明胶液体，然后在1%明胶预处理的六孔板中接种适量细胞(5X 14个细胞/孔);4)加入成软骨分化培养基，2-3天换一次液；
5)细胞分化3周后，吸去培养基，用4%多聚甲醛固定30分钟;6)用PBS洗2遍;7)向每孔中加入ImL阿利新蓝染色液，染色30分钟;8)用PBS洗3遍，然后置于倒置显微镜下观察拍照，统计软骨细胞的比率，研究结果表明，添加CSFl之后获得的不同来源的间充质干细胞相对不加CSFl培养获得的间充质干细胞的形成软骨细胞的能力完全保持，数据为5次独立实验的平均SEM(P〈0.01)(如图6所示)。
[0040]实施例7、
CSFI处理后的造血干细胞对肿瘤模型小鼠存活率的影响
将急性B淋巴细胞系白血病细胞株(Nalm-6)用含青霉素100U/mL、链霉素100U/mL、15%重量百分比的灭活新生牛血清组成RPM1-1640完全培养液，在37°C含5°/‘02饱和湿度(体积百分比)的培养箱中培养，培养细胞。用无菌PBS液