从结晶寡糖除去残余有机溶剂的方法与流程

本发明涉及从结晶寡糖，优选人乳寡糖(hmo)，除去有机溶剂残余物的方法，以及通过该方法得到的有机溶剂残余物水平低的结晶寡糖、优选为结晶hmo。
背景技术：
：过去数年来，人乳寡糖(hmo)由于其对人产后发育的有益效果而备受关注。迄今，有多于140种hmo的结构已经得到确认(参见urashima等人:milkoligosaccharides,novabiomedicalbooks,newyork,2011；chenadv.carbohydr.chem.biochem.72,113(2015))，并且相当地更有可能存在于人乳中。已经在寻求尽可能多地制造工业品质hmo的低成本方式，使得其在用于婴儿以及可能用于儿童和成人的营养和治疗制剂中的用途得以由全世界的研究者发现、开发和利用。若干hmo近来已经以高质量和高收率得到化学合成，或者可通过生物方式获取。这些技术的最后一步常常是将各个hmo从含水有机溶剂中结晶或重结晶，有机溶剂常常是醇，通常是甲醇(参见，例如，wo2011/100980、wo2011/150939、wo2014/009921、wo2014/075680、wo2014/086373、wo2014/069625、wo2015/188834、wo2016/086947、wo2016/095924、ep-a-1405856，kuhn等人chem.ber.95,513和518(1962)；takamura等人chem.pharm.bull.28,1804(1980))。但是，根据上述方法或类似方法合成的高含量结晶hmo可能仍会被hmo的结晶或重结晶中用作溶剂或共溶剂的有机溶剂残余物污染，即使在真空和/或高温下，上述残余物也不能通过常规的干燥除去。为了将hmo用于哺乳动物特别是人的营养制剂，充分地降低这种残余溶剂水平是必需的。出于消费者安全，食品成分中残余溶剂的推荐可接受量要远低于药品。2012年3月9日委员会条例(eu)第231/2012号——欧洲议会和理事会条例(eu)第1333/2008号的附件ii和iii所列的食品添加剂的制定规范(thecommissionregulation(eu)no231/2012of9march2012layingdownspecificationsforfoodadditiveslistedinannexesiiandiiitoregulation(ec)no1333/2008oftheeuropeanparliamentandofthecouncil，http://data.europa.eu/eli/reg/2012/231/oj)规定了食品添加剂在溶剂残余物方面的纯度标准(在适用处)。尽管有机溶剂残余物的限制可以根据所关注的食品添加剂而变化，但例如作为很常用的结晶/重结晶溶剂或共溶剂的甲醇的限制通常低于100ppm，并且从不超过1000ppm。对于药学活性成分，相同的限制为3000ppm(参见impurities:guidelineforresidualsolvents,theinternationalcouncilforharmonisationoftechnicalrequirementsforpharmaceuticalsforhumanuse(ich),http://www.ich.org/products/guidelines/quality/quality-single/article/impurities-guideline-for-residual-solvents.html)。尽管食品监管主管部门可以根据具体情况决定或推荐食品成分的浓度(包括考虑其暴露评估)，还是很有可能意图用于人食品的hmo中的有机溶剂残余物限制基本上不偏离食品添加剂。因此，例如，hmo中甲醇残余物的批准水平可以预期为大约50-100ppm。wo2013/185780公开了去除或至少大大降低hmo中有机溶剂残余物的量的方法，其包括将hmo的水溶液喷雾干燥的步骤。该方法提供无定形形式的hmo。因此，本发明的目的在于提供用于去除或大大降低寡糖、特别是hmo之中和/或之上有机溶剂残余物的量和/或浓度的方法，其为结晶形式的所述寡糖/hmo提供非常低水平的有机溶剂残余物，该低水平的有机溶剂残余物可以是食品监管部门可接受的。技术实现要素：本发明提供去除结晶寡糖之中和/或之上的有机溶剂残余物的量和/或大大降低其浓度的有效方法。本发明进一步提供能够通过该种方法得到的结晶寡糖，特别是结晶hmo，其中所述寡糖/hmo包括对于食品产品来说可接受的量的有机溶剂残余物。因此，本发明的第一方面涉及一种除去或大大降低结晶寡糖之中或之上的有机溶剂残余物的量或浓度的方法，所述方法包括使结晶寡糖暴露于水蒸气的步骤。优选地，寡糖是结晶水合物。本发明的第二方面涉及一种结晶寡糖水合物，其基本上没有有机溶剂残余物，或者至少其量或浓度很低。有机溶剂残余物的低量或低浓度优选为不大于100ppm，更优选50-100ppm或更低。本发明的另一方面涉及水蒸气在除去或大大降低寡糖之中或之上的有机溶剂残余物的量或浓度中的用途，上述寡糖是结晶水合物形式的。在任意上述方面的一实施方式中，寡糖是hmo。在本发明的一个实施方式中，有机溶剂是低级醇、酮、酯或酸。本发明的另一方面涉及通过根据本发明第一方面的方法可得到的结晶寡糖水合物，其中或其上包括含量至多为100ppm的有机溶剂残余物。附图说明以下将参考附图对本发明进行进一步详述，其中：图1显示根据实施例6制备的结晶plnnh水合物的粉末x-射线衍射图；图2显示根据实施例7制备的结晶lnt水合物的粉末x-射线衍射图。具体实施方式术语“寡糖”优选地是指含有至少两个通过糖苷间键彼此连接的单糖单元的具有直链或支链结构的糖聚合物。本发明上下文中的寡糖优选为游离形式的，即，在任何其游离的异头、伯和仲oh-基(例如醚、酯、缩醛等)上不含保护基，并且在氨基脱氧糖中，在其除乙酰基之外的游离nh2-基上不含保护基。寡糖优选为二糖、三糖、四糖、五糖或六糖。术语“单糖”优选是指具有5-9个碳原子的糖(碳水化合物)，其为醛糖(例如，d-葡萄糖、d-半乳糖、d-甘露糖、d-核糖、d-阿拉伯糖、l-阿拉伯糖、d-木糖等)、酮糖(例如，d-果糖、d-山梨糖、d-塔格糖等)、脱氧糖(例如，l-鼠李糖、l-岩藻糖等)、脱氧氨基糖(例如，n-乙酰葡萄糖胺、n-乙酰甘露糖胺、n-乙酰半乳糖胺等)、糖醛酸、醛糖酸、酮醛酸(例如，唾液酸)、醛糖二酸(aldaricacid)或糖醇。术语“人乳寡糖”或“hmo”是在人母乳中发现的三糖、四糖或更高级的寡糖(urashima等人:milkoligosaccharides,novabiomedicalbooks,newyork,2011；chenadv.carbohydr.chem.biochem.72,113(2015))。优选地，hmo选自三糖(例如，2'-fl(2'-o-岩藻糖乳糖)、3-fl(3-o-岩藻糖乳糖)、3'-sl(3'-o-唾液乳糖)、6'-sl(6'-o-唾液乳糖)、β3'-gl(3'-o-β-半乳糖乳糖)、β4'-gl(4'-o-β-半乳糖乳糖)、β6'-gl(6'-o-β-半乳糖乳糖)或乳酰-n-三糖ii(glcnac(β1-3)gal(β1-4)glc))、四糖(例如，dfl(2',3-二-o-岩藻糖乳糖)、sfl(3-o-岩藻糖-3'-o-唾液乳糖)、lnt(乳酰-n-四糖)或lnnt(乳酰-n-新四糖))、五糖(例如，lnfpi(乳酰-n-岩藻五糖i)、lnfpii(乳酰-n-岩藻五糖ii)、lnfpiii(乳酰-n-岩藻五糖iii)、lnfpv(乳酰-n-岩藻五糖v)、lsta(唾液乳酰-n-四糖a)、lstb(唾液乳酰-n-四糖b)lnh或lstc(唾液乳酰-n-四糖c))、和六糖(例如，lnh(乳酰-n-六糖)、lnnh(乳酰-n-对六糖)、plnh(对-乳酰-n-六糖)、plnnh(对-乳酰-n-新六糖)、lnfdhi(乳酰-n-二岩藻六糖i)、lnfdhii(乳酰-n-二岩藻六糖ii)、lnfdhiii(乳酰-n-二岩藻六糖iii)、f-lsta(岩藻糖-唾液乳酰-n-四糖a)、f-lstb(岩藻糖-唾液乳酰-n-四糖b)、f-lstc(岩藻糖-唾液乳酰-n-四糖c)或ds-lnt(二唾液乳酰-n-四糖))。术语“寡糖结晶水合物”优选地是指结晶相的晶格中结合有水分子的寡糖。得益于其小的尺寸以及参与多方向形成氢键的能力，水能够缔合寡糖分子，形成各种规则排列的3d结构。基于水在结晶结构中的位置，结晶水合物可以分成位点水合物、离子-缔合水合物或通道水合物；通道水合物可以进一步分成膨胀(expanded)通道水合物和平面水合物(例如，参见datta等人.nat.rev.drug.discov.3,42(2004))。结晶水的量可以是化学计量的，或者非化学计量的。水合程度可以通过多种方式确定，例如单晶x-射线衍射(scxrd)或动态蒸汽吸附(dvs)结合标准分析技术。粉末x-射线衍射(pxrd)适合于对晶型进行表征。此外，在某些晶相中，参与晶体结构的水的量可以在不改变其3d结构的情况下在一定范围内变化，换言之，相同的结晶寡糖可以以不同的百分比进行水合，如通过dvs和pxrd可证实。术语“低级醇”优选地是指低分子量的醇，其为具有1-6个碳原子的单-或二羟基烷烃，例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丁醇、己醇或乙二醇，更优选单羟基烷烃，特别是“c1-c4醇”，例如甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇、仲丁醇和叔丁醇。术语“基本上没有有机溶剂残余物的结晶寡糖”优选地是指结晶寡糖之中或之上的有机溶剂含量低于气相色谱的检出水平，即，低于0.001-0.0001w/w％或1-10ppm。以上术语和定义是通用的，适用于本发明的所有方面和实施方式。其他术语，不管是通用术语还是与具体的方面和实施方式有关的术语，可以定义如下。已经观察到，某些结晶寡糖，特别是以其结晶水合物形式存在的结晶寡糖，具有很强的从其结晶出来的有机溶剂中吸附该有机溶剂的能力。由于这些有机溶剂常常沸点相对较低，因此将其视为是挥发性的，将其从结晶材料中除去、直至达到所要求的一定水平的常规方式通常要应用真空和/或高温。尽管如此，有机溶剂会常常保留在晶体中，甚至范围在大约5000-20000ppm。很明显，这会限制或者甚至妨碍这些结晶寡糖、特别是hmo在食品和药物产品中的应用。本发明的方法可以克服这一问题。已经出人意料地发现，包括在水蒸气气氛或者高湿度环境中进行的干燥步骤的改良的常规干燥方法，导致有效地去除溶剂残余物，并在不改变晶相的情况下提供有机溶剂残余物水平低的结晶寡糖。因此，本发明的第一方面涉及一种大大降低结晶寡糖水合物之中或之上的有机溶剂残余物的量或浓度的方法，该方法包括使结晶寡糖水合物暴露于水蒸气的步骤。在本上下文中，术语“大大降低”是指将常规干燥之后大于100ppm的寡糖晶体中有机溶剂残余物的量或浓度降低至不大于100ppm或低于100ppm的值。优选地，寡糖晶体中有机溶剂残余物的量或浓度降低的程度为大约2-3个数量级，这意味着寡糖晶体中大约0.5w/w％或更高、例如大约5000-20000ppm的有机溶剂残余物的含量(该含量原本通过常规干燥不能降低)被降低到低于100ppm的值，例如，低于50ppm、25ppm或10ppm。为实现这一点，根据本发明，将有机溶剂残余物要被降低的结晶寡糖置于高湿度环境中。在优选的实施方式中，将结晶寡糖水合物在容器中与水蒸气接触，上述容器的内部空间与该容器的外部相比具有或者保持升高的湿度。容器的内部空间中升高的湿度有利地为相对湿度(rh％)大约60-100％。值得注意的是，在根据本发明暴露于水蒸气时，被处理的结晶寡糖水合物中不发生相变，换言之，暴露之前和之后物质的pxrd图不发生变化。短语“暴露于水蒸气”的含义在本文中与“湿干燥”、“蒸汽干燥”和“蒸汽汽提”是可互换的。在一实施方式中，大大降低有机溶剂残余物的量或浓度是指将所述有机溶剂残余物从寡糖晶体去除，使得其量或浓度降低到气相色谱的检出水平以下(低于0.001-0.0001w/w％或1-10ppm)。适合于该方法用途的容器可以是任意用于干燥固体化学物质的实验室或工业装置，例如干燥器、烘箱、干燥柱、双锥干燥机、锥形螺杆干燥机等，或者是任意其他适用于干燥的装置，例如旋转蒸发仪。合适的容器不能是封闭系统，而是应当具有至少一个出口，该出口的开放用于使水蒸气与从结晶材料去除的痕量有机溶剂一起连续逃逸。水蒸气可以在容器的内部或外部产生，在后一种情形中，将水蒸气以指定的流速经由适当的管子引入到容器中。在一实施方式中，该方法在大气压下进行，有利地在可以在内部产生水蒸气的容器中进行。为了迅速实现高相对湿度和/或加速有机溶剂残余物的去除，温度有利地设定在40℃以上，例如50-60℃、60-70℃或者70-90℃。该方法在相对较短的时间内，例如在数小时至数天的范围内，使结晶寡糖具有非常低的有机溶剂残余物水平。但是，应当予以注意，因为长时间使用高温可能对结晶寡糖的稳定性产生不利影响。合适的温度范围可以由本领域技术人员通过试错加以确定，例如在过程中对样品连续进行控制和分析。如果必要的话，应当设定在较低的温度下，在该情形中溶剂残余物去除的完成可能要更久。在一优选的实施方式中，本发明的方法在真空下进行。内部和外部的水蒸气产生均可以应用。在真空下，较低的温度是必要的，以达到所需的相对湿度水平，这在产物稳定性方面会是有利的。此外，真空产生将痕量有机溶剂带出的蒸汽流。真空汽提的典型温度范围为大约40-60℃，或者是结晶寡糖保持稳定的温度。在容器的内部产生水蒸气时，典型地使用装有水并置于容器中与结晶寡糖相同的空间中的开放槽(tank)，例如结晶皿或盘。通过使水蒸发，其蒸汽将容器的内部空间饱和，蒸汽与结晶寡糖接触。内部温度越高，蒸发越快，有机溶剂的去除发生得越快。但是，温度不能超过指定压力下水的沸点。可取的是，将温度设定成至少为室温。在外部蒸汽产生的情形中，典型地经由管子将水蒸气引入到容器中，与结晶寡糖接触。在一实施方式中，借助于载气流引入水蒸气。载气应当是惰性的，即，载气不能与水蒸气或结晶寡糖发生反应。载气的一些非限定性例子有空气、氮气或氩气。典型地，惰性的气体通过水鼓泡，并通过施加正压或负压，将加湿的气流引入到容器中。为了加快本发明的方法和/或使其适合于更大的量，在一些实施方式中，本发明的方法可以通过以下步骤进行。从包括含水有机溶剂的溶剂体系中结晶之后，过滤收集到的寡糖晶体(“湿饼”)常常含有大量的有机溶剂(30-50％)和水。有机溶剂的量可以通过实施预干燥步骤降低至大约0.5-2％，上述预干燥步骤典型地是在适当容器中的常规干燥方法(例如，使用真空和/或高温)。本上下文中的常规干燥是指由通过使有机溶剂和水从结晶寡糖中蒸发而将其除去所构成的传质过程，例如，通过加热容器壁和/或应用真空，通过以下方式进行：水(湿气)和有机溶剂二者沿着其浓度降低方向(即从结晶固体到容器内部空间，然后离开容器)扩散/移动。在例如烘箱中，预干燥的湿饼常常导致形成块状结晶固体，其需要加以研磨和/或筛分，以增加颗粒的表面，用以更有效地与蒸汽接触。直径为大约1-2mm(或更小)的颗粒通常适合于本发明的方法。因此，方法的某些实施方式包括以下步骤：a)从水和适当有机溶剂的混合物中结晶寡糖水合物，b)对步骤a)中得到的晶体进行常规预干燥，以除去大部分有机溶剂，和c)使步骤b)中得到的晶体暴露以除去剩余的有机溶剂，直至其浓度降低至100ppm或更低。而且，在一些情形中，该方法可以提供有机溶剂残余物水平极低、但以水蒸气过饱和的结晶材料。为了符合特定寡糖的含水量规定，可以在本发明的方法之后进行额外的干燥步骤，其中通过在不存在水蒸气、且存在常规干燥剂的情况下进行常规干燥(真空和/或高温)除去过量的或不必要的水。要通过本发明的方法除去其残余量的有机溶剂，是通常在寡糖结晶中主要用作完全或部分地与水混溶的抗溶剂中的一种。经常适合的溶剂包括低级醇、酮(例如丙酮和甲乙酮)、乙酸、吡啶、二甲亚砜、dmf、乙酸乙酯或醚(例如乙醚、thf、二噁烷和乙二醇单-或二乙基醚)。优选地，要通过本发明的方法除去的有机溶剂是c1-c4链烷醇，其为甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇、仲丁醇或叔丁醇，特别是甲醇。为了实现相当短的汽提时间，结晶寡糖应当是水合物。在该情形中，除去残余有机溶剂的动力学是指数性的，取决于该方法中所用装置的设置和/或寡糖晶体的大小(bulkiness)，可以在数小时到1-2天的时间内得到基本上没有有机溶剂或者其量非常低的寡糖晶体。但是，结晶寡糖无水物似乎并不适合于根据本发明方法的有机溶剂汽提目的，因为从这些结晶材料中除去残余有机溶剂的动力学是低梯度线性的，因此达到完全或至少大大除去有机溶剂残余物的外推时间会长得不切实际。在一实施方式中，本发明的方法在环境压力或真空下在干燥烘箱中进行。蒸汽来源是置于烘箱底部的装有水的大结晶皿或盘。随着处理时间的进行，水从皿中缓慢蒸发。该具体实施方式适合于处理克到千克级别的寡糖晶体。在另一实施方式中，使水蒸气通过结晶寡糖的流化床，例如使用干燥柱。这种设置确保水蒸气到晶体的传质提高，这增加了汽提效率，并减少完成处理的时间(典型地耗时小于24小时)。在另一实施方式中，本发明的方法在锥形螺杆干燥机(适于工业应用)中进行。将水蒸气经由套管和进样阀在底部导入至锥形干燥机中。锥形干燥机装有将结晶块以密集的、但温和的方式连续混合的转动混合螺杆，确保蒸汽的良好传质。混合机的机械力破坏了之前的结晶和/或预干燥步骤中偶尔形成的块体材料块，因此可以有利地避免在进行本发明的方法之前进行单独的研磨/筛分步骤。在锥形螺杆干燥机中进行环境和真空汽提均可。结晶寡糖水合物，包括结晶hmo水合物，可以根据现有技术中公开的结晶方法制备。例如，可以从含水甲醇、乙醇、丙醇或丙酮中结晶出2'-fl(2'-o-岩藻糖乳糖，fucpα1-2galpβ1-4glc)3/2水合物(wo2014/009921)，可以从含水丙酮中结晶出lnnt(乳酰-n-新四糖，galpβ1-4glcnacpβ1-3galpβ1-4glc)多晶型物ii(ep-a-1405856)，可以从含水甲醇中结晶出lnnt多晶型物iii(wo2011/100980)，可以从含水乙醇中结晶出dfl(二岩藻糖乳糖，fucpα1-2galpβ1-4[fucpα1-3]glc)(wo2016/086947)。其他结晶hmo水合物在本文说明如下。本发明的第二方面涉及其中或其上包括含量不大于100ppm的有机溶剂残余物的结晶寡糖水合物。第二方面的结晶寡糖有利地可以通过应用根据本发明第一方面的方法得到。结晶寡糖水合物之中或之上的有机溶剂残余物的量或浓度可以通过标准方法测定，例如，通过气相色谱测定。本发明第二方面的实施方式包括其中或其上的有机溶剂残余物低于50、25或10ppm水平的结晶寡糖。在某些实施方式中，结晶寡糖水合物包括大约50-100ppm、25-75ppm、25-50ppm、10-50ppm或10-25ppm的有机溶剂残余物。本发明第二方面的另一实施方式涉及其中或其上基本上没有有机溶剂残余物的结晶寡糖水合物，即，当通过标准的气相色谱方法测定时，有机溶剂的量或浓度实际上不可检出(低于大约1-10ppm)。结晶寡糖水合物的示例性实施方式为海藻糖二水合物、蜜三糖五水合物和hmo水合物。优选的实施方式为hmo水合物。更优选地，结晶hmo水合物选自wo2014/009921中表征的2'-fl多晶型物a(3/2水合物)、ep-a-1405856中表征的lnnt多晶型物ii、wo2011/100980中表征的lnnt多晶型物iii、wo2016/086947中表征的dfl水合物、lnt(乳酰-n-四糖，galpβ1-3glcnacpβ1-3galpβ1-4glc)水合物和plnnh(对-乳酰-n-新六糖，galpβ1-4glcnacpβ1-3galpβ1-4glcnacpβ1-3galpβ1-4glc)水合物，再更优选lnnt多晶型物iii、dfl水合物、lnt水合物和plnnh水合物。优选的实施方式为：包括含量不大于100ppm的有机溶剂残余物乙醇或异丙醇的lnnt多晶型物iii；包括含量不大于25、优选15ppm的有机溶剂残余物甲醇的lnnt多晶型物iii；包括含量不大于100、优选50、更优选25ppm的有机溶剂残余物甲醇或乙醇的结晶二岩藻糖乳糖水合物；包括含量不大于100、优选50、更优选25ppm的有机溶剂残余物甲醇或乙醇的结晶lnt水合物；包括含量不大于100、优选50、更优选25ppm的有机溶剂残余物甲醇或乙醇的结晶plnnh水合物。其中或其上基本上没有有机溶剂残余物或其水平非常低(低于100ppm)的结晶寡糖水合物代表了结晶寡糖的新品质产品，其通过常规的离析和/或分离方法尚无法得到。值得注意的是，尽管结晶寡糖晶体易于通过将其从含水有机溶剂中结晶而得到，但在常规条件下例如在高温和/或真空下干燥晶体之后，有机溶剂的残余量经证实相当高。这一缺点的后果在于，其在药物和营养组合物中作为活性物质或成分的商业用途受到很大限制，甚至实际上已受到阻碍。根据本发明第二方面的其中或其上基本上没有有机溶剂残余物或其水平非常低(低于100ppm)的结晶寡糖水合物，有利地通过根据本发明第一方面的方法得到，可以有益地用于制造药物制剂、营养制剂(例如食品、饮料或饲料)、食品补剂、消化健康功能食品或其他消费产品，其意图用于动物，例如宠物如狗和猫，或者人，例如婴儿、儿童、成人或老年人。因此，本发明的第三方面涉及包括根据本发明第二方面的其中或其上有机溶剂残余物水平低于100ppm的结晶寡糖水合物的营养制剂。在优选的实施方式中，结晶寡糖水合物是营养制剂中的结晶hmo水合物。在一实施方式中，包括其中或其上有机溶剂残余物水平低于100ppm的结晶寡糖水合物的营养制剂可以是食品补剂。这样的食品补剂可以优选地含有对于上述营养食品定义的成分，例如，维生素、矿物质、痕量元素和其他微量营养素等。食品补剂的形式可以是，例如，片剂、胶囊、锭剂或液体。补剂可以含有常规的添加剂，其选自但不限于，粘合剂、涂层、乳化剂、增溶剂、包封剂、成膜剂、吸附剂、载体、填料、分散剂、润湿剂、凝胶化剂、胶凝剂等。在另一实施方式中，包括其中或其上有机溶剂残余物水平低于100ppm的结晶寡糖水合物的营养制剂可以是消化健康功能食品，因为给予饮食寡糖、特别是hmo可以对消化健康提供有益的效果。消化健康功能食品优选为加工食品，其意图用于通过利用作为生理学功能性成分或组分的根据本发明的寡糖的混合物(片剂、胶囊、粉末等的形式)，提高和保持消化健康。另外还可以使用不同的术语例如膳食补剂、营养食品、设计食品、健康产品来指代消化健康功能食品。在另一实施方式中，根据本发明第二方面的包括结晶寡糖水合物的营养制剂可以是还含有常规的食用微量营养素、维生素和矿物质的食品、饮料或饲料。这些成分的量可以取决于目标用户分类而变化，即，消费产品意图用于动物例如宠物如狗或猫，还是人例如婴儿、儿童、成人、老年人，还是具有特殊需求的受试者(例如患有代谢疾病)。微量营养素包括，例如，食用油、脂肪或脂肪酸(例如椰油、大豆油、单甘油酯、二甘油酯、棕榈油、葵花籽油、鱼油、亚油酸、亚麻酸等)、碳水化合物(例如葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖糊精、淀粉、水解玉米淀粉等)和来自酪蛋白、大豆、乳清或脱脂乳的蛋白质或这些蛋白质的水解产物，但也可以使用来自其他来源的蛋白质(完整的或水解的)。可以选择维生素，例如维生素a、b1、b2、b5、b6、b12、c、d、e、h、k、叶酸、肌醇和烟酸。营养制剂可以含有以下矿物质和痕量元素：ca、p、k、na、cl、mg、mn、fe、cu、zn、se、cr或i。而且，可以加入额外的益生菌，例如乳酸菌、双歧杆菌(bifidobacterium)物种，另外还可以添加益生元，例如低聚果糖和低聚半乳糖，来自酪蛋白、大豆、乳清或脱脂乳的蛋白质，碳水化合物，例如乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精、淀粉或其混合物，脂质(例如，棕榈油、葵花籽油、红花油)和日常膳食必需的维生素和矿物质。上述营养制剂可以通过任何常规方式制备。例如，其可以通过将微量营养组分以适当的比例混合而制备。然后，加入维生素和矿物质，但是，为了避免热分解或降解，可以在均化之后加入热敏感性的维生素。亲脂性维生素可以在混合之前溶解在脂肪来源中。使用温度优选大约50-80℃的水形成液体混合物，以有助于成分的溶解或分散。在这一阶段可以加入根据第二方面的结晶寡糖晶体。然后通过以蒸汽注入、热交换器或高压釜的方式快速加热至大约80-150℃，对产生的混合物进行均化。这种热处理还会显著降低细菌负荷。然后将热混合物迅速冷却至大约60-80℃。如果需要，可以在该温度下在大约2-30mpa的高压下进行进一步均化。冷却之后，可以在这一阶段加入热敏感性成分，并方便地调节ph和固体含量。然后通过常规方法例如喷雾干燥或冷冻干燥成粉末，对产生的混合物进行干燥。在这时可以通过干混加入益生菌。本发明的第四方面涉及包括根据本发明第二方面的其中或其上有机溶剂残余物水平低于100ppm的结晶寡糖水合物的药物制剂。在优选的实施方式中，药物组合物中的结晶寡糖水合物是结晶hmo水合物。在一个实施方式中，药物组合物意图用于治疗人，例如婴儿、儿童、成人和/或老年人以及具有特殊需求的特定受试者(例如患有代谢或精神疾病、感染、心血管疾病等的受试者)。可以将根据第二方面的结晶寡糖晶体加入到药物可接受的载体中，例如常规添加剂、佐剂、赋形剂和稀释剂(水、明胶、滑石、糖、淀粉、阿拉伯胶、植物胶、植物油、聚烷基乙醇、调味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、润滑剂、着色剂、填料、润湿剂等)，以制造药物组合物。本领域标准参考教科书remington'spharmaceuticalsciences的最新版本中描述了合适的载体。将根据第二方面的结晶寡糖水合物加入到药物可接受载体中时，可以制成以下剂型：例如但不限于，片剂、粉剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、灌注剂、胶囊剂、注射剂、液体、酏剂、提取物和酊剂，或者制成其他形式，例如，在适用于特定应用方法、患者类别或疾病的具体制剂中。如果需要，还可以另外向上述制剂中加入益生菌，例如乳酸菌、双歧杆菌物种，益生元，例如低聚果糖和低聚半乳糖，来自酪蛋白、大豆、乳清或脱脂乳的蛋白质，碳水化合物，例如乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精、淀粉或其混合物，脂质(例如，棕榈油、葵花籽油、红花油)和/或日常膳食必需的维生素和矿物质。本发明第四方面的药物组合物可以通过本领域已知的任何常规方式制造，例如，如本领域标准参考教科书remington'spharmaceuticalsciences的最新版本中所描述。本发明的第五方面涉及水蒸气在大大降低结晶寡糖水合物之中或之上、优选在结晶hmo水合物之中或之上的有机溶剂残余物的量或浓度中的用途。当水蒸气与含有有机溶剂残余物的结晶寡糖水合物接触时，利用水蒸气出乎意料地降低了常规干燥方法不能消除的寡糖水合物结晶块中剩下的有机溶剂残余物的量或浓度。有利地，接触在容器中进行，上述容器中水蒸气的浓度高于容器外部的浓度。水蒸气的这一特定用途则提供了品质提高的结晶寡糖水合物，这意味着它们有机溶剂残余物的量或浓度非常低，低于100ppm，例如，低于50ppm、25ppm或10ppm，因此，适合将其用于制造意图用于人消费的药物或营养组合物。本发明的第六方面涉及其中或其上包括10-100ppm或更低的有机溶剂残余物的结晶寡糖水合物，其可以通过根据本发明第一方面的方法得到。结晶寡糖水合物之中或之上的有机溶剂残余物的量或浓度可以通过标准方法测定，例如，通过气相色谱测定。根据本发明第一方面的方法可以得到的结晶寡糖水合物的实施方式包括其中或其上有机溶剂残余物的水平低于50、25或10ppm，例如大约50-100ppm、25-75ppm、25-50ppm、10-50ppm或10-25ppm的结晶寡糖水合物。本发明第六方面的优选实施方式为hmo水合物，更优选地，结晶hmo水合物选自2'-fl多晶型物a(3/2水合物)、lnnt多晶型物ii、lnnt多晶型物iii、dfl水合物、lnt水合物和plnnh水合物，再更优选lnnt多晶型物iii、dfl水合物、lnt水合物和plnnh水合物。优选的实施方式为：包括不大于100ppm的有机溶剂残余物乙醇或异丙醇的lnnt多晶型物iii；包括不大于25、优选15ppm的有机溶剂残余物甲醇的lnnt多晶型物iii；包括不大于100、优选50、更优选25ppm的有机溶剂残余物甲醇或乙醇的结晶二岩藻糖乳糖水合物；包括不大于100、优选50、更优选25ppm的有机溶剂残余物甲醇或乙醇的结晶lnt水合物；包括不大于100、优选50、更优选25ppm的有机溶剂残余物甲醇或乙醇的结晶plnnh水合物。实施例实施例1从含水甲醇中结晶的lnnt多晶型物iii(参见wo2011/100980)可以含有2.0-9.3w/w％的水，其具有相同的粉末x-射线衍射图。将结晶lnnt的湿饼在60℃和30mbar的条件下在旋转蒸发仪中预干燥2.5小时。样品的gc分析表明，甲醇含量为18240ppm。然后将预干燥过的材料和盛有水的器皿一起置于干燥烘箱中，温度设定成90℃。干燥24和60小时之后，残余的甲醇分别汽提至15和5ppm。实施例2根据wo2011/100980从含水异丙醇中结晶出lnnt多晶型物iii。将湿晶体在真空烘箱中(60℃，50mbar)中干燥24小时，其残余异丙醇含量为2.19％。然后将晶体研磨，并在90℃、环境压力条件下的烘箱中、在盛有水的器皿的存在下进一步干燥20小时。然后将温度降低至60℃，取出盛有水的器皿，应用真空(50mbar)，通过在室温下在水中鼓泡的空气入口确保恒定的潮湿内部气氛。17小时后，异丙醇含量降低至94ppm。实施例3根据wo2011/100980从含水甲醇中结晶出lnnt多晶型物iii。将湿晶体在真空烘箱中(60℃，50mbar)中干燥，其残余甲醇含量为15804ppm。研磨筛分(2mm)之后，将晶体置于干燥柱中，干燥柱底部经由塑料管连接有装水的槽。柱顶与真空泵连接。水槽和装有结晶lnnt多晶型物iii的干燥柱均保持在25℃。真空(17-20mbar)产生的水蒸气通过lnnt晶体床。指定时间之后，从流化床取样，并通过gc测定其甲醇含量：时间01h15m2h45m4h5mmeoh(ppm)158047371916实施例4在与实施例3相同的实验设计中，干燥柱的温度保持在50℃，水槽加温至40-45℃。真空首先设定在100mbar，然后设定在60mbar。以下数值从所取的lnnt多晶型iii样品测得。时间01h10m2h30mmeoh(ppm)1580460213真空(mbar)-10060实施例5根据wo2016/086947从含水乙醇中结晶出dfl。将湿结晶材料在真空烘箱中(8mbar)在60℃下干燥11小时，在40℃下干燥13小时。其残余乙醇含量为1.03％。干燥在相同真空烘箱(30mbar，50℃)中、但在存在盛水器皿的情况下继续进行。指定时间之后取样，通过gc测定其乙醇含量：时间015h23h38hetoh(ppm)102841174917实施例6通过蒸发5/6部分的水，将plnnh在水中的澄清溶液(brix14.2)在70℃下在真空(60mbar)中浓缩成悬浮液。过夜搅拌的同时使悬浮液冷却至室温。将固体过滤，用甲醇/水(1:1)、甲醇/水(2:1)和甲醇洗涤，然后在真空烘箱中干燥27小时(60℃，5mbar)。样品分析表明，得到的固体是晶体(参见图1)，含有7.9％的水(通过karl-fisher滴定测定)和870ppm的甲醇(通过gc测定)。将结晶固体在盛水器皿的存在下在真空烘箱中进一步干燥3天(50℃，30mbar)。所得到晶体的甲醇含量降低到gc的检出水平以下(低于1ppm)。实施例7a)将溶解于水(33ml)中的lnt(9.7g)加热至60℃。用35分钟缓慢加入甲醇(66ml)。将溶液在60℃搅拌，15分钟之后发生自发成核。将悬浮液在60℃下搅拌2小时，然后用1.5小时使其缓慢冷却至40℃。将悬浮液在40℃下进一步搅拌14小时。然后使悬浮液冷却至25℃，并在该温度下再搅拌2小时。将晶体滤出，并用10ml甲醇洗涤。将湿晶体在50℃下在50mbar干燥21小时，得到结晶材料(pxrd图参见图2)，其水含量为9.4％(通过karl-fisher滴定)。b)将含有lnt(34g)的水溶液浓缩至brix24°。在35℃下，加入第一部分meoh(150ml)。溶液中加入晶种。用1小时时间在25ml部分中再加入meoh(150ml)。将悬浮液在35℃下搅拌3小时，然后加热至55℃，在55℃下搅拌6小时，然后冷却至35℃，并在35℃下搅拌4小时。将固体滤出，并用60mlmeoh洗涤，在60℃下在50mbar的真空烘箱中干燥5小时，得到结晶材料(29g)，其根据pxrd与以上得到的样品相同，水含量为9.1％(通过karl-fisher滴定)，甲醇含量为5234ppm(通过gc)。将该固体在烘箱中相邻于盛水器皿在70℃和环境压力下进一步干燥65小时，得到29g晶体，其甲醇含量降低到10ppm以下(通过gc)。当前第1页12