专利名称：生物活性浓缩物,其生产方法和某些还含有硫酸软骨素的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种生物活性浓缩物，其生产方法和治疗变性疾病、风湿病、关节病和其它相关疾病的药物组合物。
背景技术：
一种抗透明质酸酶物质的配合物衍生于含有氨基酸、总糖、糖原、硫酸软骨素、苯酚、降血压物质的天然产品如小鱼，抗透明质酸酶活性最低为50I.U/ml。
生产此配合物的方法在于用0.5％苯酚溶液分两阶段处理海鱼24小时，合并的提取物在最高40℃真空浓缩，再用等体积96c乙醇处理，除去沉淀物，所得的上清液用硅藻土处理、过滤，在最高40℃真空浓缩，然后用提取溶剂处理，除去溶剂后，用苯酚处理至4.5-5.5％的值。
含一种抗透明质酸酶生物活性提取物、苯酚和偏亚硫酸氢钠的药物组合物也被开发出来。
这些药物有赖于一种物质即天然活性成分的配合物，其比例与正常的起作用的比例接近，通过从动物组织提取而生产或在细胞和微生物培养物中生物合成，这种配合物的作用是取代，代替在结缔组织中由于各种原因引起失衡和导致疾病的天然配合物的功能，或甚至使其恢复正常。
已经确立了提取和调节方法，以使活性物质的损失和降解尽可能低，并且当原料成分的比例与治疗人类疾病所需的不同时，可通过提取物的适当复配或通过治疗程序加以平衡。
现在，已知导致疾病的机理是由于关节正常活动所依赖的正常成分的生物合成和破坏失衡。
生物体组织中的细胞包埋于基础物质中并于其中演化。该基础物质-一种生物结构的普通化合物-充满所有间隙并把每一个固定的细胞与其相邻者隔开。细胞外环境组成的变化对细胞的行为有深刻的影响，而反过来，细胞具有强大的调节其中间环境的作用。
细胞间质是一种配合物凝胶，含水、电解质类、代谢产物类、溶解的气体、酶类、痕量元素、脂肪类、蛋白质类、糖类。这种物质由于富含某些长链酸性粘多糖聚合物，尤其是葡萄糖胺聚糖和相关的蛋白聚糖而具有高粘性，在微观水平上由胶原纤维的三维网状结构而增强(Cameron，E.和Pauling，L.-The Encyclopaedia of Ignorance，p377-385，Pergamon Press，Oxford，1982)。
发现于所有关节处的滑液的作用不仅是用来润滑活动结构，而且用来消散能量。
这种功能是由滑液组合物实现的，其中葡萄糖胺聚糖(GAC)和蛋白聚糖(PG)如透明质酸和硫酸软骨素由于其螺旋结构而导致高粘性，当运动频率低时表现为粘稠样，当运动频率高时表现为弹性样(Ogston，A.G.和Stanier，J.E.(1953)-生理学杂志(J.Physiol)，199，124)。
弹性是由于在pH＝2.5时存在非常浓的透明质酸，它在盐溶液中形成一种粘弹性糊状物(Balasz，E.A.，胞内基质的化学和细胞生物学(Chemistry and Molecular Biology of the Intercellular Matrix)，第II和III卷，Academic Press，New York，1970)。
就其粘性而论，滑液在不同年龄表现类似，但在高运动频率时吸收的能量是不同的，在年轻人中滑液吸收77％的能量，而在老年人中只能通过弹性贮藏吸收52％的能量。
在受疾病侵袭的关节中(骨关节病)，滑液是粘性而不是弹性的。这种滑液的稠度为健康老年人的七分之一。这些滑液中透明质酸的浓度低，导致低粘度指数，而蛋白质的浓度高。浓度变化的负面影响在某些病例中可能较低，粘度指数可达30倍。
而且，在关节、腱、眼玻璃体中-流质区(滑液，玻璃体液)是与固体基质(关节软骨、腱、筋膜、玻璃体)相邻的。
在流体基质中的粘弹性大分子化合物-透明质酸-穿透固体基质的表面。从流变学上讲，两种基质的主要区别是固体基质中存在胶原纤维而在流体基质中不存在。
1-2μ的表面层是由透明质酸和蛋白质构成。
这一层可由在细胞间质中发现的过量透明质酸酶的作用而除去或破坏。
10-15μ厚的下层含典型的胶原纤维，而且原纤维间隙被大致等量的透明质酸和硫酸软骨素充满。
根据专业领域已知的资料(Cameron，E.和Pauling，L.-TheEncyclopaedia of Ignorance，p377-385，Pergamon Press，Oxford，1982和Balasz，E.A.和Sweeney，D.B.-1968-视网膜脱落的新的且有争论的方面(New and Controversial Aspects of Retinal Detachement)，p371，Ed.McPerson，Harpen和Row，New York)，本发明的目的在于生产一种各成分的配合物，其中粘多糖聚合物和蛋白聚糖以透明质酸和硫酸软骨素的形式参与其中，还有它们的片断，肝素和抗坏血酸，它们都是被最近的研究证实，对恢复变性疾病中结缔组织正常功能有贡献的物质。这些疾病改变了包埋细胞的基础物质，恶化了基础物质和这些细胞间的现存关系。“正常”平衡的条件是对每一部分-基础物质和细胞-保持其自身的功能，因为任何变化，例如由细胞过量分泌的透明质酸酶的作用而引起的透明质酸解聚导致的基础物质粘度降低，会伴随着疾病的发生。
另一种恢复平衡的途径与一种叫做抗透明质酸酶的抗酶有关(透明质酸酶终究是一种与结缔结构有同样功能的酶类)，它与硫酸软骨素、肝素和抗坏血酸一起阻止或限制透明质酸的解聚。
已知有某些尝试来制备基于从含有抗透明质酸酶的原料，如牛的气管、牛和羊的睾丸、脐带、小海鱼等提取得到的抗透明质酸酶的药物。
尽管当时很重要(专利RO/82273-1982和由the Institute ofChemical and Pharmaceutical Research-Bucharest起草的“技术报告(Technological Reports)”，No.84740/1977和No.5160/1979)，这些尝试代表了一种只部分地解决了生产方法和得到的药物组成的问题的基本可选途径。
发明公开根据本发明，生物活性浓缩物是一种活性物质-10％水溶液，包含7-9％的抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物和加有1-3％的重组(restitutive)且抗透明质酸酶的硫酸软骨素，它具有pH＝4-6，抗透明质酸酶活性为450-750I.U./ml，呈淡黄至浅棕色；冻干状态下它含至少93％的活性物质，活性物质包含65-84％的粘多糖聚合物和9-28％的硫酸软骨素，呈淡黄至浅棕色并含有通常的防腐剂(conservant)。生物活性浓缩物的生产方法在于用含0.5％苯酚，pH＝2-4的酸性水溶液分两阶段处理来自动物的软骨结缔组织，如牛和羊的气管、脐带、未成年动物的腱、肠、睾丸或海洋生物，第一阶段用1∶3.5-4的比例，第二阶段用1∶1.5的比例，两阶段的提取都需24小时，在0-4℃温度下每3小时搅拌30分钟，然后第一阶段得到的提取物与第二阶段得到的合并，并用Ca(OH)2溶液调节至pH＝4.5-5，让其在0-4℃静置8小时，然后过滤，得到的溶液在最高45℃温度下真空蒸发浓缩至浓缩比值为7∶1，此后溶液通过弱离子(ion-weak)阴离子交换柱，随后以1∶4的比例用提取溶剂脱脂6-10次，直至残余的脂质不超过1-5％。最后一次脱脂过程以同样的比例用正己烷进行，然后产生的水溶液真空浓缩至体积为原溶液体积的70％；经过滤，所得上清液用96c乙醇处理以脱除蛋白质，直至达到50％乙醇浓度，然后在0-5℃凉处放置12小时，再过滤，乙醇溶液浓缩以除去乙醇，直到与进行脱蛋白质的水溶液相比为70％的体积，蛋白质沉淀物用硫酸铵梯度处理，低分子量蛋白质级分与通过用磷酸三钠连续处理最后溶液直至pH＝8.5而从中除去醇和组胺杂质的水溶液合并，然后过滤，所得溶液通过弱离子阳离子交换柱-pH值回复至4-6，然后加入硫酸软骨素至1-3％的浓度。原料可以是新鲜、冷冻或保护状态。溶液通过弱阳离子交换剂是在每小时不超过原溶液体积的1/5的流速下进行的。
药物组合物含有此生物活性浓缩物-溶液或者是冻干状态，还有增效物质，如肝素、乙酰水杨酸钠或溶素，抗坏血酸、维生素E，“I”样构造的水、苄醇、亚丙基甘氨酸(propylene glycocoll)、植物提取物(蓍属，金盏花属，母菊属，车前草属，金丝桃属)和通常的赋形剂，调制成肌内注射液、关节内注射液、软膏、凝胶和栓剂形式。
对肌内给药，组合物在1ml水溶液中包含0.1ml10％生物活性浓缩物溶液或11mg冻干的生物活性浓缩物，最多5mg苯酚和2mg偏亚硫酸氢钠，它具有pH＝4-6，抗透明质酸酶活性最低为45I.U./ml。对关节内给药，组合物在1ml水溶液中包含由10％的生物活性浓缩物溶液组成的15mg/ml干活性物质或者16.5mg冻干的生物活性浓缩物，10mg乙酰水杨酸钠或溶素，2mg抗坏血酸、0.2mg肝素、20mg苄醇、40mg亚丙基甘氨酸，它具有pH＝4-6，抗透明质酸酶活性最低为65I.U./ml，给药剂量是2ml；其它类型的防腐剂也可使用，如2mg偏亚硫酸氢钠，5mg苯酚，只要不改变活性物的性质或最终产品的质量。对于软膏、凝胶或栓剂形式的调制，100g组合物包含3-10g由10％的生物活性浓缩物溶液组成的干物质或4-12g冻干的生物活性浓缩物，0.3-0.5g乙酰水杨酸钠或溶素，0.2-0.4g维生素E，0.4-0.8g抗坏血酸(优选0.5g)，0.2g肝素，2-5g植物总提取物，在含40-75g，优选65g“I”样构造的水的乳油或凝胶基质中乳化，以及通常的防腐剂和调味剂。可用的植物是多叶蓍、金盏花、母菊、车前草属数种、贯叶金丝桃(Hypericum Perforatum)。“I”样构造的水是一种具有增加的能势(energetic potential)，高的跨膜穿透能力和显著的抗炎和抗感染作用的水(罗马尼亚专利号109835B.1/1995，作者Manzatu Ioan和Ionita-Manzatu Vasile)。
本发明提出的溶液解决了引用著作中发现的某些缺点，因为这是一个关键的方法，以与现存于基础物质中，因而也现存于关节中相似的比例高效地完成抗透明质酸酶与硫酸软骨素的提取。如果进行提取的原料缺少必需的硫酸软骨素部分，最终产品通过充分利用的方法加入从其它原料中得到的这种配合物。
按照这一方法，得到了下列药物用于肌内给药的注射液本身或冻干粉剂，用于关节内给药的注射液或冻干粉剂，外部、局部使用的软膏和凝胶，以及用于肛门给药的栓剂。
根据治疗程序使用这些药物以获得某些协同作用，它们使每一种成份单独的作用提高。
通过它的作用，生物活性浓缩物防止正常组成的大分子结构的混乱，并在间质和关节周围水平以及关节软骨水平上刺激炎性疾病中的组织和关节周围的重建过程，积极地影响钙离子在抗炎、再生、生物刺激、皮肤和组织重组作用中的动力学，并刺激恢复期病人的新陈代谢。
所有五种药物组合物对病因有吸引力，通过恢复细胞和细胞间机制，同时阻止透明质酸酶过量并开始组织的恢复过程。它们易于给药且无任何副作用。
生产方法可用于工业规模，具有低能耗和所用物质可回收利用。
提出的提取方法除了其非常有效这一事实外，在第一阶段在pH＝2-4下排除了已发现的很多缺点，因为包括选择性的纯化过程，如组胺的除去，它是一个必需的操作，因为从前生产的一些产品具有不令人满意的组胺试验结果，导致因其降血压作用而将其扔掉。还包括离子交换去离子作用，以降低在反复的浓缩操作后的高离子负荷。
最后，在提取流程中包含的最重要的过程是实现了与废物回收的平行提取流程，因此可提供更高含量的氨基酸和硫酸软骨素，这在前面引用的著作中是没有出现的。
最终，肝素和抗坏血酸的加入也使得获得一种要用于关节内的注射液以及适当的软膏，凝胶和栓剂成为可能。
实施本发明的最佳方式以下给出四个实施
具体实施例方式实施例1为了获得生物活性浓缩物，进行提取过程的原料不但包含来自动物的软骨结缔组织-牛和羊的气管、脐带、未成年动物的腱-而且包括肠、睾丸或小海鱼。所用的原料是小海鱼(鳀)，用量20kg，为新鲜、冷冻或保护和脱盐状态，经解冻或脱盐后切成2-6mm大小的碎片，用75升含0.5％苯酚、pH＝2-4的水溶液在3-5℃的温度下进行提取。
在苯酚溶液中加入切碎的原料之前，用N(正常)HCl溶液调节其pH值。
第一次提取是用适当的玻璃或搪瓷铸铁罐，每3小时以90-120转/分间歇搅拌30分钟，共进行24小时。所得溶液用大于100针/厘米2的织物作过滤材料离心分离，第二次提取用30升含0.5％苯酚，pH如上调节至2-4的溶液处理，操作需另一24小时，也间歇搅拌。
提取物I和II合并后用绉纸(工业过滤器)过滤，海洋糊状物是废渣。
按此方法提取和过滤的溶液用Ca(OH)2溶液调节至pH＝5，然后让其在0-4℃温度下静置8小时。
用工业过滤器重复过滤以除去沉淀物和其中剩余的氯离子。
大约95升的滤液在最高45℃的内部温度下真空蒸发浓缩。浓缩比例是7∶1，因此得到13.5升棕黄色悬浮浓缩物。
浓缩后，控制pH值在4-6之间，一些离子经弱离子阴离子交换柱而被除去。
溶液经过离子交换柱的速度大约是2升/小时，以使其从柱里流出后的pH＝4-6。
所得溶液用提取溶剂重复脱脂，每次用3升溶剂，搅拌和静置过程的持续时间是2小时。这一过程反复6-10次，控制其效率以使最后残余脂质不超过1-5％。
提取溶剂中的脂质提取物通过在适当容器中静置分离，然后蒸馏以回收溶剂，回收比例为70-75％。也可用二氯乙烷、三氯乙烯或正己烷进行脱脂。最后一次脱脂过程优选用大约3kg的正己烷溶剂进行。
脱脂水溶液真空浓缩至大约9升以除去痕量溶剂。
上清液用工业滤纸过滤以除去浓缩过程中形成的沉淀物，然后用乙醇处理脱蛋白质。
过滤的上清液中加入96c乙醇，在搅拌下仔细喷入至醇浓度达到50％。然后在0-5℃的凉处放置12小时。形成的沉淀物以3000转/分离心滤过最低100针/厘米2的织物。
离心过滤的残渣用大约3升50％醇溶液洗涤。按照此法得到的醇溶液合并，并真空浓缩回收醇。最终得到大约7升含抗透明质酸酶活性成分的水溶液。
在脱脂阶段得到的蛋白沉淀物用硫酸铵分级，由第一阶段的脱蛋白质产生的低分子量蛋白级分与第一阶段脱蛋白质得到的浓溶液合并。此溶液经纯化除去组胺杂质，用350g磷酸三钠、200g氯化钙和大约300ml20％氢氧化钠溶液处理。磷酸三钠和氯化钙以30％水溶液的形式加入。加入氢氧化钠溶液以调节pH值到8.5，在0-5℃放置24小时，然后离心滤过100针/厘米2的织物，又得溶液。此法得到的大约9升溶液通过弱离子阳离子交换柱，该柱用0.5％氢氧化钠溶液再生。在溶液通过前，离子交换柱用0.5％酚盐水(phenolate water)处理。重复此操作直到可容许的组胺试验程度。
所得溶液过滤。如果需要，加入硫酸软骨素至1-3％的浓度。大约得到9升含大约10％活性物的浓溶液，pH＝4-6。
分析浓溶液，确定干物质和透明质酸酶的活性。
从这种浓溶液或冻干粉剂可以通过用蒸馏的不致热水稀释生产五种药物，也就是说，用于肌内给药的注射液，用于关节内给药的注射液，局部使用的软膏或凝胶或栓剂。
实施例2用于肌内给药的药物组合物是通过用不致热水稀释浓溶液或冻干粉剂得到的，含最多5mg/ml苯酚和最多2mg/ml偏亚硫酸氢钠。确定稀释比例以使在1ml的水溶液中注射液含0.1ml 10％的生物活性浓缩物溶液或11mg冻干的生物活性浓缩物，具有抗透明质酸酶活性最低为45I.U./ml。
溶液首先经孔隙度0.45μ的过滤器过滤纯化，然后经0.22μ的过滤器灭菌。
将其无菌地装入1ml的棕色小瓶中。这些标准的1ml小瓶含10mg/ml活性物，由7-9ml抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物和加至1-3mg的普通重组硫酸软骨素组成，通常的防腐剂，它具有pH＝4-6。
如果使用冻干的生物活性浓缩物，在10ml的小瓶中，含110mg冻干的生物活性浓缩物和25mg一种适当的防腐剂，在溶于蒸馏水之后，这种小瓶相当于10个标准小瓶。
实施例3用于关节内给药的药物组合物是通过用不致热水稀释浓溶液或冻干粉剂得到的，它含有20mg/ml苄醇和40mg/ml亚丙基甘氨酸(RoteListe-1993，Publishing House Cantor Aulendort/Wurttemberg，Germany)。加入10mg/ml的乙酰水杨酸钠或溶素，2mg/ml的抗坏血酸和0.2mg/ml的肝素作为活性增效物。
确定浓溶液或冻干粉剂的稀释比例以使注射液的活性物浓度为1.5％，抗透明质酸酶活性最低为65I.U./ml。
要装入小瓶的溶液首先经孔隙度0.45μ的过滤器过滤纯化，然后经0.22μ的过滤器灭菌，随后无菌地装入2ml棕色小瓶中。
这些小瓶含有15mg/ml的活性物质，由10-13mg/ml的抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物，加至2-5mg/ml的重组硫酸软骨素组成，2mg/ml的抗坏血酸和0.2mg/ml的肝素，它的pH＝4-6。
另一种调制可用0.5％苯酚水溶液和0.2％偏亚硫酸氢钠完成。
实施例4用于外部、局部给药的药物组合物-软膏、凝胶或栓剂-是在一种软膏、凝胶或栓剂的基质中实现的，在100g组合物中有3-10g由10％生物活性浓缩物溶液组成的干活性物质或4-12g冻干的生物活性浓缩物，含7-9g抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物，加入1-3g硫酸软骨素，0.4g维生素E，0.5g抗坏血酸，0.5g乙酰水杨酸钠或溶素，0.2g肝素，2-5g植物总提取物(多叶蓍、金盏花、母菊、车前草属数种，贯叶金丝桃)。值得一提的是，软膏、凝胶或栓剂的基质是用60-75％“I”样构造的水制备的。软膏基质还含通常的防腐剂和调味剂。“I”样构造的水是罗马尼亚专利号109835B的主题物，它是一种具有增加的能势，高跨膜穿透能力和显著的抗炎和抗感染作用的水。这种水是让经过滤的自来水通过活化电磁场得到的。
工业应用性这五种药物被用作治疗程序的一部分，包括这五种药物的给药程序，或者在某些情况下，医生根据不同病例只推荐使用两种药物。
权利要求
1.生物活性浓缩物，其特征在于它是一种含10％活性物质的水溶液，包含7-9％的抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物和加有1-3％的重组且抗透明质酸酶的硫酸软骨素，其pH值在4-6之间，抗透明质酸酶活性在450-750I.U./ml之间，并呈淡黄至浅棕色，在冻干状态下它含最低93％的活性物质，活性物质包含65-84％的粘多糖聚合物和9-28％的硫酸软骨素，呈淡黄至浅棕色，且含通常的防腐剂。
2.生产生物活性浓缩物的方法，通过在24小时内用0.5％苯酚溶液分两阶段处理一种有机原料，合并的提取液真空浓缩，用96c乙醇脱蛋白质，通过一种有机溶剂如提取溶剂脱脂，其特征在于来自动物的软骨结缔组织-牛和羊的气管、脐带、未成年动物的腱-以及肠、睾丸或海洋生物用含0.5％苯酚且pH＝2-4的酸性水溶液进行两阶段处理，第一阶段以1∶3.5-4的比例，第二阶段以1∶1.5的比例，两阶段的提取都需24小时，在0-4℃温度下每3小时搅拌30分钟，然后第一阶段得到的提取物与第二阶段得到的合并，用Ca(OH)2溶液调节至pH＝4.5-5，然后让其在0-4℃下静置8小时，然后过滤，得到的溶液在内部温度最高45℃下真空蒸发浓缩至达到7∶1的浓缩比值，溶液通过弱离子阴离子交换柱，然后用提取溶剂以1∶4的比例脱脂6-10次，直到残余脂质不超过1-5％，最后一次脱脂过程用正己烷以同样的比例完成，然后得到的水溶液真空浓缩直至体积为原溶液体积的70％；经过滤后，所得上清液用96c乙醇处理以脱蛋白质，直至醇浓度达到50％，然后在0-5℃放置12小时，再过滤，浓缩醇溶液以除去醇，直到达到与进行脱蛋白质的溶液相比为70％的体积，蛋白质沉淀物用硫酸铵梯度处理，低分子量蛋白质级分与除去醇的水溶液合并；组胺杂质通过连续地用磷酸三钠溶液、氯化钙和氢氧化钠处理最后的溶液直至pH＝8.5而除去，然后过滤，产生的溶液通过弱离子阳离子交换柱，pH值调节回4-6，然后加入硫酸软骨素至1-3％的浓度。
3.根据权利要求2的方法，其特征在于所用的原料可以是新鲜、冷冻或保护状态，并在使用前切碎。
4.根据权利要求2的方法，其特征在于溶液通过弱离子阳离子交换柱的流速应每小时不超过原溶液体积的1/5，以使pH值回到4-6的范围。
5.药物组合物，其特征在于它们含权利要求1所述的生物活性浓缩物，还有增效物质，如肝素、抗坏血酸、乙酰水杨酸钠或溶素、维生素E、苄醇、亚丙基甘氨酸，“I”样构造的水和植物提取物，和将它们调制成肌内注射液、关节内注射液、软膏、凝胶和栓剂形式的通常物质。
6.含一种抗透明质酸酶的生物活性配合物、苯酚和偏亚硫酸氢钠的药物组合物，其特征在于对肌内给药，1ml水溶液含0.1ml权利要求1中所述的10％生物活性浓缩物溶液或11mg冻干的生物活性浓缩物，最多5mg苯酚和2mg偏亚硫酸氢钠，其pH＝4-6，抗透明质酸酶活性最低为45I.U./ml。
7.药物组合物，其特征在于对关节内给药，1ml水溶液含由权利要求1所述的10％生物活性浓缩物溶液组成的15mg/ml干活性物质或16.5mg冻干的生物活性浓缩物，10mg乙酰水杨酸钠或溶素、2mg抗坏血酸、0.2mg肝素、20mg苄醇、40mg亚丙基甘氨酸，其pH＝4-6，抗透明质酸酶活性最低为65I.U./ml，也可与其它类型的防腐剂合用，如最多2mg偏亚硫酸氢钠和最多5mg苯酚。
8.药物组合物，其特征在于对于软膏、凝胶和栓剂的调制，100g组合物含3-10g由如权利要求1所述的10％生物活性浓缩物溶液组成的干活性物质或4-12g冻干的生物活性浓缩物，0.3-0.5g乙酰水杨酸钠或溶素、0.4-0.8g抗坏血酸，优选0.5g，0.2-0.4g维生素E，0.2g肝素，2-5g植物总提取物，在含40-75％，优选65％“I”样构造水的乳油或凝胶基质中乳化，以及通常的防腐剂和调味剂。
9.根据权利要求8的组合物，其特征在于所用植物可以是多叶蓍、金盏花、母菊、车前草属数种、贯叶金丝桃。
10.根据权利要求8的组合物，其特征在于“I”样构造的水是一种具有增加的能势和高跨膜穿透能力及显著的抗炎和抗感染作用的水。
全文摘要
这种生物活性浓缩物是一种活性物质——水溶液或冻干粉剂——包含抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物并添有重组且抗透明质酸酶的硫酸软骨素,它具有pH=4—6和抗透明质酸酶活性。本生物活性浓缩物的生产方法在于用苯酚溶液分两阶段处理来自动物的结缔软骨组织,如牛和羊的气管、脐带、未成年动物的腱、肠、睾丸或海洋生物,所得溶液真空蒸发浓缩,然后脱脂;经过滤,所得上清液进行脱蛋白质处理,过量的离子通过离子交换柱除去,醇溶液浓缩除去醇直至与进行脱蛋白质的水溶液相比为70%的体积。药物组合物含有此生物活性浓缩物——溶液或冻干状态——还有增效物质如:肝素、乙酰水杨酸钠或溶素、抗坏血酸、维生素E、“I”样构造的水、苄醇、亚丙基甘氨酸、植物提取物(蓍属、金盏花属、母菊属、车前草属、金丝桃属)和通常的赋形剂,调制成肌内或关节内注射液、软膏、凝胶和栓剂形式。最后,除去组胺并加入硫酸软骨素至要求的浓度。
文档编号C02F1/00GK1181017SQ96193190
公开日1998年5月6日 申请日期1996年3月14日 优先权日1995年4月11日
发明者I·曼萨图, D·E·阿里赞, V·伊奥尼塔曼萨图, M·卡拉萨瓦, M·帕纳特, I·G·斯卡拉特 申请人:S·C·泰曼公司