双亲型低密度脂蛋白吸附剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用于血液灌流的医用吸附材料，特别涉及一种低密度脂蛋白吸附 剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 低密度脂蛋白（LDL)浓度过高是最常见而又不健康的情况，它与粥样斑块的快速 增生、动脉硬化及过早出现严重的心血管疾病，甚至于死亡相关。而心血管疾病是威胁人类 健康的三大疾病之一，全世界每年约800~1000万人死于动脉硬化引起的心血管疾病和中 风，而我国每年死于心脑血管疾病者约400万人。
[0003] 血清中低密度和高密度脂蛋白（HDL)的含量比是1:2。两者都有重要任务：低密度 脂蛋白把胆固醇从肝脏运送到全身组织，高密度脂蛋白将各组织的胆固醇送回肝脏代谢。 当低密度脂蛋白，尤其是氧化修饰的低密度脂蛋白（OX-LDL)过量时，它携带的胆固醇便积 存在动脉壁上，久了容易引起动脉硬化。因此被氧化的低密度脂蛋白胆固醇被称为"坏的胆 固醇"。
[0004] 目前控制高血脂症的最直接的手段是饮食控制，但这对于难治性高血脂症和家族 性高血脂症，饮食控制起不到作用，而常用的药物治疗也达不到目的，相反还会带来一定的 副作用。
[0005] 随着材料和装置技术的发展，以吸附法治疗高血脂症越来越受到各国科研工作者 的重视。在我国开展吸附剂的研究，对于治疗高胆固醇脂血症为主的心血管疾病具有重要 的理论和现实意义。血液吸附疗法主要是利用吸附剂清除血液中的毒素和致病物质，从而 达到净化血液，缓解、治疗疾病的目的。血液吸附疗法在临床上具有明显的疗效，是目前不 可缺少的一种治疗方法。
[0006] 低密度脂蛋白直径约18~25nm，带有较多的残余氨基，带正电。现有技术大多用 带负电的吸附剂对其进行清除，但目前的吸附剂不具有特异性作用，其也会把人体有益的 成分（例如高密度脂蛋白（直径约7. 5~IOnm)、白蛋白、免疫球蛋白IgG)吸附清除，容易 产生副作用。虽然也有专门的免疫吸附配基（LDL抗体）的吸附剂，但其合成成本高、储存 困难，且配基脱落会使部分患者出现免疫反应，不适于推广应用。
[0007] 目前LDL吸附剂的配基主要有聚丙烯酸盐、硫酸葡聚糖、氯磺酸、磷酸、LDL抗体、 马来酸酐及其共聚物等。商业化的LDL吸附剂仍然存在很多问题需要改进。如纤维素固 载硫酸右旋葡聚糖（专利号JP61165330)是利用吸附剂的负电与LDL的正电结合，达到 吸附清除LDL的目的，但硫酸右旋葡聚糖能激活第ΧΠ 凝血因子，治疗过程需谨慎。德国 Fresenius公司的DALI产品，它是在多孔聚丙烯酰胺载体上固载聚丙烯酸盐形成的阴离子 型吸附剂。该吸附柱是一次性使用的，无法进行再生。高选择性吸附剂（专利号CA2001358) 通过偶联LDL抗体，可以特异性吸附清除LDL，但抗体成本高、储存困难。德国PlasmaSeIect 公司的Therasorb产品，其配基为抗LDL抗体Αρο-ΒΙΟΟ,该系统能够重复治疗40次以上。
[0008] 总之，目前的LDL吸附剂的选择性吸附能力不高，而选择性吸附能力高的吸附剂 价格高昂，高达10万元以上。为了解决这些问题，本技术采用相对廉价的原料来制备具有 高选择性吸附能力的吸附剂。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的在于一种双亲型低密度脂蛋白吸附剂及其制备方法。
[0010] 本发明所采取的技术方案是： 双亲型低密度脂蛋白吸附剂，其骨架为载体，载体表面固载有牛磺酸，牛磺酸上偶联有 脱氧胆酸。
[0011] 进一步的，载体为大孔聚苯乙烯-二乙烯基苯吸附树脂、聚甲基丙烯酸酯、纤维素 微球、琼脂糖微球中的至少一种。
[0012] 进一步的，载体的比表面积不低于500平方米/g。
[0013] 进一步的，吸附剂的孔径为20~50nm。
[0014] -种血液灌流装置，其所使用的吸附剂如上所述。
[0015] -种低密度脂蛋白吸附柱，其所使用的吸附剂如上所述。
[0016] 双亲型低密度脂蛋白吸附剂的制备方法，包括如下步骤： 1) 将载体上的双键环氧化或羟基环氧化，得到改性载体； 2) 将改性载体与牛磺酸水溶液混合反应，固载牛磺酸； 3) 或固载有牛磺酸的载体与脱氧胆酸溶液混合，加入酰胺化催化剂并调节pH，使脱氧 胆酸缩合偶联到牛磺酸上； 4) 反应完全后清洗，得到双亲型低密度脂蛋白吸附剂。
[0017] 进一步的，酰胺化反应的pH为4~6。
[0018] 进一步的，酰胺化反应的催化剂为N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙 基）-3_乙基碳二亚胺盐酸盐。
[0019] 进一步的，最终得到的吸附剂中，牛磺酸与脱氧胆酸的摩尔比为（1~10) :1。
[0020] 本发明的有益效果是： 本发明的双亲型低密度脂蛋白吸附剂，利用磺酸基的静电作用，可有效吸附清除LDL ; 而进一步利用缩合的脱氧胆酸，利用其环烷结构的疏水和位阻作用降低对有益成分HDL的 吸附并能清除总胆固醇（TC)、甘油三酯（TG)，提高吸附剂的选择性清除能力。
[0021] 通过控制吸附剂的孔径在20~50nm，可选择性堵截LDL，而几乎不滞留HDL，从而 提高LDL的清除能力。
[0022] 通过利用树脂上的残余双键进行环氧活化，有效提高了环氧基的含量，进而使后 续的一系列反应中可以有效增加配基含量。该法环氧化改性后环氧基含量多2. Ommol/g，比 一般的环氧活化效果高。
[0023] 本发明的双亲型低密度脂蛋白吸附剂，带有亲水性的磺酸基和疏水性的脱氧胆 酸，与磷脂的分子结构类似，与细胞具有较好的血液相容性，可适用于全血灌流。通过调节 亲疏水基团的比例，得到血液相容性高、特异性吸附LDL的吸附剂。
[0024] 本发明的双亲型低密度脂蛋白吸附剂，使用人体必不可少的营养物质牛磺酸作为 配基，配基即便脱落进入血液，也可以通过人体代谢维持牛磺酸的平衡，对人体是安全无 害。
【具体实施方式】
[0025] 双亲型低密度脂蛋白吸附剂，其骨架为载体，载体表面固载有牛磺酸，牛磺酸上偶 联有脱氧胆酸。
[0026] 进一步的，载体为大孔聚苯乙烯-二乙烯基苯吸附树脂、聚甲基丙烯酸酯、纤维素 微球、琼脂糖微球中的至少一种。
[0027] 进一步的，载体的比表面积不低于500平方米/g。
[0028] 进一步的，吸附剂的孔径为20~50nm。
[0029] -种血液灌流装置，其所使用的吸附剂如上所述。
[0030] -种低密度脂蛋白吸附柱，其所使用的吸附剂如上所述。
[0031] 双亲型低密度脂蛋白吸附剂的制备方法，包括如下步骤： 1) 将载体上的双键环氧化或羟基环氧化，得到改性载体； 2) 将改性载体与牛磺酸水溶液混合反应，固载牛磺酸； 3) 或固载有牛磺酸的载体与脱氧胆酸溶液混合，加入酰胺化催化剂并调节pH，使脱氧 胆酸缩合偶联到牛磺酸上； 4) 反应完全后清洗，得到双亲型低密度脂蛋白吸附剂。
[0032] 进一步的，酰胺化反应的pH为4~6。
[0033] 进一步的，酰胺化反应的催化剂为N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙 基）-3_乙基碳二亚胺盐酸盐。
[0034] 进一步的，最终得到的吸附剂中，牛磺酸与脱氧胆酸的摩尔比为（1~10) :1，牛磺 酸与脱氧胆酸的摩尔比进一步为（1~8) :1、（1~5) :1、（1~3) :1。
[0035] 如本领域技术人员所周知的，应用于血液灌流的载体应当是性质稳定，对人体无 毒无害，同时基本不与血液中的物质发生反应，血液相容性好。这些载体主要有聚苯乙烯二 乙烯基苯、聚甲基丙烯酸酯、纤维素微球、琼脂糖微球等。
[0036] 直接使用表面残留有双键的载体，如聚苯乙烯二乙烯基苯等，可以方便地通过将 双键环氧化实现对载体的环氧化改性；或者使用其他公知方法直接对载体进行环氧化改 性。通过将载体进行环氧化改性，可以使其更易于牛磺酸的-NH 2基反应偶联。当然，不排 除使用其他方法对载体表面进行改性，如在载体表面引入-OH或-COOH基，也可以使用现有 技术将牛磺酸固载在载体上。
[0037] 进一步通过酰胺化反应将脱氧胆酸综合在牛磺酸，其反应条件和催化剂可以是现 有技术所公开。特别的，可以在PH为4~6,使用NHS和EDC进行催化反应的进行，以在温 和条件下获得吸附剂。
[0038] 通过调节亲疏水基团的比例，使牛磺酸与脱氧胆酸的摩尔比为（1~10) :1，可以 得到血液相容性高、特异性吸附LDL的吸附剂。
[0039] 下面结合实施例，进一步说明本发明的技术方案。
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