专利名称：干化学法钙定性检测试剂盒及其制造方法
技术领域：
本发明涉及一种检测代表人体微量元素钙营养水平的试剂盒以及该试剂盒的制造方法。
背景技术：
目前钙元素的检测多以血钙为主，被检测者需要提供血样，检测单位需要配备相关专业检测仪器，反映的是被检测者血液中钙含量水平。由于钙元素对人体而言是一种非常重要的微量元素，在骨骼生长，神经传递等各种生命活动中发挥着不可或缺的作用，而血液作为人体的最基本的一种体液，其中各种元素物质的含量都是非常稳定的，当血液中相关物质含量发生改变时，其反映的已经是患者的临床症状了。所以，血液中的钙含量并不适合作为判断人体钙营养水平的一种指标。本试剂盒检测的是人体另外的体液(如乳汁，尿液)中的钙含量水平，由于人体内的钙每时每刻都在进行代谢，当机体开始缺乏钙但是并没有引起临床病症的时候，最先反映出来的就是体液中钙代谢含量的不平衡，如果长期机体处于钙代谢水平不平衡的话，预期后果可能会引起因为缺钙造成的许多病症(如佝偻病，神经麻木，骨刺等等)。
而在临床上要检测人体钙代谢水平，必须在医院内依赖专业的仪器由专业人士进行的实验操作才能知道结果，检测时间长，成本大。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种操作简单、方便，不需要依靠医院的专业仪器和专业人士就能定性检测人体内微量元素钙的代谢水平的试剂盒。
本发明的另一目的则是提供一种上述试剂盒的制备方法。
按照本发明提供的技术方案，在检测试剂盒的容器中包含附着于容器内壁的乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸0.70～1.50份，及以粉状盛装于容器内的反应物40～60份；在每份反应物中包含三羟甲基氨基甲烷20～30份，氯化锌2～5份，氯化钠65～78份，单位为重量份。
所述的容器为玻璃瓶。
干化学法钙定性检测试剂盒的制造方法包含如下步骤a、制备乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液将乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶解于水配置成3.5～7.5g/L的溶液后待用；这里的水通常为蒸馏水或其它纯净的适于医用标准的水。
b、乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液的预包被将制得的乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液加入清洁的容器中，并置于烘干箱内烘干，使乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸附着于容器内壁，乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液的加入量应确保将该溶液烘干后，留下的乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸具有0.70～1.50份；c、取三羟甲基氨基甲烷20～30份，氯化锌2～5份，氯化钠65～78份混合均匀，形成反应物；d、将步骤c中经过充分混匀的反应物40～60份加入预先在内壁附着有0.70～1.50份乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸的容器内，密封加盖，得到本试剂盒。
本发明利用干化学的原理，它将整个反应过程中的主要参与物质预先固相化，使检测钙的过程大大缩短并且简化。现场检测只需30秒钟，并且在检测过程中不需要任何辅助设备，这使得现场快速检测或者家庭自检成为可能。
具体实施例方式
本发明的一种干化学法钙定性检测试剂盒，在检测试剂盒的容器中盛装有若干份预先混合的反应物，每份反应物为40～60mg，在每份反应物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸即EGTA、三羟甲基氨基甲烷即Tris、氯化锌(ZnCl)与氯化钠(NaCl)的反应组合物，在反应组合物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸0.70～1.50mg，在剩余组分中，三羟甲基氨基甲烷的质量占20～30％，氯化锌的质量占2～5％，氯化钠的质量占65～78％。
下面结合具体实施例对本发明作进一步地说明。
实施例1取乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸配置成3.5g/L的溶液后取0.429ml加入到清洁的玻璃瓶中，并置于烘干箱内烘干；取三羟甲基氨基甲烷7.7mg、氯化锌1.925mg和氯化钠28.875mg并混合均匀，将混合均匀的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠置于粉碎机内充分粉碎混匀；充分混匀粉碎的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠反应物加入预先包被有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸的玻璃瓶内，密封加盖，得到本发明的试剂盒。
所以在本发明的干化学法钙定性检测试剂盒中，检测试剂盒的玻璃瓶中盛装有40mg预先混合的反应物，在该单位反应物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸、三羟甲基氨基甲烷、氯化锌与氯化钠的反应组合物，在反应组合物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸1.50mg，在剩余组分中，三羟甲基氨基甲烷的质量为7.7mg，占剩余组分的20％，氯化锌的质量为1.925mg，占剩余组分的5％，氯化钠的质量为28.875mg，占剩余组分的75％。
实施例2取乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸配置成7.5g/L的溶液后取0.093ml加入到清洁的玻璃瓶中，并置于烘干箱内烘干；取三羟甲基氨基甲烷17.79mg、氯化锌2.965mg和氯化钠38.545mg并混合均匀，将混合均匀的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠置于粉碎机内充分粉碎混匀；充分混匀粉碎的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠反应物加入预先包被有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸的玻璃瓶内，密封加盖，得到本发明的试剂盒。
所以在本发明的干化学法钙定性检测试剂盒中，检测试剂盒的玻璃瓶中盛装有60mg预先混合的反应物，在该单位反应物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸、三羟甲基氨基甲烷、氯化锌与氯化钠的反应组合物，在反应组合物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸0.7mg，在剩余组分中，三羟甲基氨基甲烷的质量为17.79mg，占剩余组分的30％，氯化锌的质量为2.965mg，占剩余组分的5％，氯化钠的质量为38.545mg，占剩余组分的65％。
实施例3取乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸配置成5g/L的溶液后取0.2ml加入到清洁的玻璃瓶中，并置于烘干箱内烘干；取三羟甲基氨基甲烷9.8mg、氯化锌0.98mg和氯化钠38.22mg并混合均匀，将混合均匀的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠置于粉碎机内充分粉碎混匀；充分混匀粉碎的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠反应物加入预先包被有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸的玻璃瓶内，密封加盖，得到本发明的试剂盒。
所以在本发明的干化学法钙定性检测试剂盒中，检测试剂盒的玻璃瓶中盛装有50mg预先混合的反应物，在该单位反应物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸、三羟甲基氨基甲烷、氯化锌与氯化钠的反应组合物，在反应组合物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸1mg，在剩余组分中，三羟甲基氨基甲烷的质量为9.8mg，占剩余组分的20％，氯化锌的质量为0.98mg，占剩余组分的2％，氯化钠的质量为38.22mg，占剩余组分的78％。
实施例4取乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸配置成5g/L的溶液后取0.2ml加入到清洁的玻璃瓶中，并置于烘干箱内烘干；取三羟甲基氨基甲烷12.74mg、氯化锌1.96mg和氯化钠34.3mg并混合均匀，将混合均匀的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠置于粉碎机内充分粉碎混匀；充分混匀粉碎的三羟甲基氨基甲烷、氯化锌和氯化钠反应物加入预先包被有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸的玻璃瓶内，密封加盖，得到本发明的试剂盒。
所以在本发明的干化学法钙定性检测试剂盒中，检测试剂盒的玻璃瓶中盛装有50mg预先混合的反应物，在该单位反应物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸、三羟甲基氨基甲烷、氯化锌与氯化钠的反应组合物，在反应组合物中含有乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸1mg，在剩余组分中，三羟甲基氨基甲烷的质量为12.74mg，占剩余组分的26％，氯化锌的质量为1.96mg，占剩余组分的4％，氯化钠的质量为34.3mg，占剩余组分的70％。
用本发明的方法制造的试剂盒，因各种物质都预先被固相化，所以在规定条件下可以保存18个月，适合大规模推荐使用。
操作过程如下按照被检测对象的标本不同而分为下面两种针对于哺乳期妇女的乳汁检测(1)、将玻璃瓶按照需要数量取出，待用；(2)、取被检测者的乳汁10滴，直接垂直滴加玻璃瓶内；(3)、轻轻摇匀，待玻璃瓶上吸附的物质全部融解后，立即观察颜色；(4)、结果判断溶液呈现蓝色即提示被检测对象乳汁中钙含量水平低下，被喂养婴儿应另外补充钙；红色即提示被检测对象乳汁中钙含量水平正常，被喂养婴儿不必另外补充钙。
针对于尿液检测(1)、将玻璃瓶按照需要数量取出，待用；(2)、取被检测者的尿液10滴，直接垂直滴加玻璃瓶内；(3)、轻轻摇匀，待玻璃瓶上吸附的物质全部融解后，立即观察颜色；(4)、结果判断溶液呈现蓝色即提示被检测对象机体钙营养水平低下，需要及时补充钙；红色即提示被检测对象机体钙营养水平正常，目前不必补充钙。
本发明的试剂盒为一次性检测用耗材，属于快速微量检测。钙的含量范围因检测标本的来源不同而不同用于检测儿童尿液中钙含量(参考值为160mg/l)的标记为儿童尿钙；
用于检测成人尿液中钙含量(参考值为200mg/l)的标记为成人尿钙；用于检测母乳中钙含量(参考值为300mg/l)的标记为母乳钙。
本检测试剂盒对于快速判断人体内微量元素钙的代谢水平正常与否具有重要的指导意义。
试剂盒主要用于快速判断人体内微量元素钙的代谢水平正常与否，了解人体目前微量元素钙的整体代谢水平，可以对健康人群进行常规的微量元素代谢水平的检查，提示是否需要进行该类微量元素的补充；也可以对某个个体以后可能出现的某种由于微量元素钙长期缺乏而导致的一些功能减退或疾病进行预测或者提示。
所以本试剂盒适用于钙营养水平的调查和自身钙营养水平的不定期自测，以及时了解自身的身体健康水平，避免出现因为缺钙而造成身体机能损伤。同时也可以作为保健工作中进行补钙的参考。
权利要求
1.一种干化学法钙定性检测试剂盒，其特征是在检测试剂盒的容器中包含附着于容器内壁的乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸0.70～1.50份，及以粉状盛装于容器内的反应物40～60份；在每份反应物中包含三羟甲基氨基甲烷20～30份，氯化锌2～5份，氯化钠65～78份，单位为重量份。
2.根据权利要求1所述的干化学法钙定性检测试剂盒，其特征是所述的容器为玻璃瓶。
3.权利要求1所述的干化学法钙定性检测试剂盒的制造方法，其特征在于该方法包含如下步骤a、制备乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液将乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸配置成3.5～7.5g/L的溶液后待用；b、乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液的预包被将制得的乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液加入清洁的容器中，并置于烘干箱内烘干，使乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸附着于容器内壁，乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸溶液的加入量应确保将该溶液烘干后，留下的乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸具有0.70～1.50份；c、取三羟甲基氨基甲烷20～30份，氯化锌2～5份，氯化钠65～78份混合均匀，形成反应物；d、将步骤c中经过充分混匀的反应物40～60份加入预先在内壁附着有0.70～1.50份乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸的容器内，密封加盖，得到本试剂盒。
全文摘要
本发明涉及一种检测代表人体微量元素钙营养水平的试剂盒以及该试剂盒的制造方法，按照本发明提供的技术方案，在检测试剂盒的容器中包含附着于容器内壁的乙二醇双(2－氨基乙基)四乙酸0.70～1.50份，及以粉状盛装于容器内的反应物40～60份；在每份反应物中包含三羟甲基氨基甲烷20～30份，氯化锌2～5份，氯化钠65～78份，单位为重量份。本发明的试剂盒检测速度快，并且在检测过程中不需要任何辅助设备，这使得现场快速检测或者家庭自检成为可能。
文档编号G01N21/77GK101038258SQ20071002080
公开日2007年9月19日 申请日期2007年4月2日 优先权日2007年4月2日
发明者盛青松 申请人:上海和盛生物科技有限公司