快速测定盾叶薯蓣中原薯蓣皂苷含量的方法与流程

文档序号:12119120阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种测定盾叶薯蓣中原薯蓣皂苷含量的方法,其特征在于采用高效液相色谱串联三重四级杆(大气压离子化) 质谱法(HPLC-QqQ-MS)(API),快速测定盾叶薯蓣中原薯蓣皂苷的含量,按如下步骤进行:

1)对照品、内标溶液制备:称取原薯蓣皂苷对照品及甘草次酸对照品各5.0mg分别置于5mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,配制成浓度为1mg/mL的储备液,4℃保存备用;

2)供试品溶液制备:取盾叶薯蓣干燥根茎粉末1g精密称定,加入甲醇25mL, 42kHz超声波处理30min,5000r·min-1离心5min后,上清液过0.45μm微孔滤膜, 滤液即HPLC-QqQ-MS法测定用的供试溶液;

3)测定:分别精密吸取步骤1)得到的对照品溶液和步骤2)提取的供试品溶液各10μL,注入HPLC-MS/MS联用仪,测定,多级反应检测模式进行扫描,用外标法计算原薯蓣皂苷含量;

4)色谱及质谱条件 色谱柱:SHIMADZU GL Inertsil ODS-3 C18柱,流动相:乙腈:水(70:30),等度洗脱:8min,进样量:10μL,柱温:40℃,流速0.5mL/min,扫描方式为多级反应监测(MRM)模式,离子源ESI(Turbo Spray)负离子化方式检测,离子源电压为5.5kV,加热毛细管温度为400℃,CAD为5,帘气为10,Gas1为45,Gas2为45,去簇电压为-114V。

2.如权利要求1所述,其特征在于,所述液相色谱条件,色谱柱:SHIMADZU GL Inertsil ODS-3 C18柱,流动相:乙腈:水(70:30),等度洗脱:8min,进样量:10μL,柱温:40℃,流速0.5mL/min。

3.如权利要求1所述,其特征在于质谱条件为离子源ESI(Turbo Spray)源,负离子化方式检测,离子源电压为5.5kV,加热毛细管温度为400℃,CAD为5,帘气为10,Gas1为45,Gas2为45,去簇电压为-114V。

4.如权利要求1所述,其特征在于甘草次酸为外标测定原薯蓣皂苷含量。

5.如权利要求1所述,其特征在于多级反应检测模式(MRM)及其参数设立:原薯蓣皂苷碰撞能量-56eV,离子反应选择1047.6→901.4m/z;甘草次酸碰撞能量-60eV,离子反应选择469.3→425.3 m/z

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