0040] 表1杜酷醇的母离子、子离子和相关的参数设置
[0041]
[0042] 1.4线性关系与检测限：
[0043] 对不同浓度的杜酷醇标准溶液依次进样上机测定，W峰面积对质量浓度绘制工 作曲线，发现在lyg/l-25yg/L浓度范围内，浓度与其峰面积都成线性关系，相关系数 〉0. 995,样品的检测限为0.Img/kg，具体结果见表2。
[0044] 表2化妆品中杜酷醇的线性方程、相关系数及检测限
[0045]
[0046] 1. 5方法特异性；
[0047] 选取具有代表性的水溶液类化妆品和乳状类化妆品进行加标测试，发现利用 HPLC-MS/MS对杜酷醇进行检测，该两类化妆品本身对杜酷醇的检测结果不会产生干扰。
[0048] 实施例2 ;利用高效液相色谱串联质谱法化PLC-MS/M巧测定化妆品中的杜酷醇
[0049] 实验所用试剂和样品均为市购商品。
[0化0] 1. 1样品的前处理：准确称取l.Og美白化妆品试样（精确至O.OOlg)于洁净的 15血带刻度离屯、管中，用己醇溶解，定容至10. 0血刻度，于縱祸震荡器上混匀后，超声提取 10分钟（若提取后样品呈浑浊，W8000r/min离屯、lOmin)。取2.OOmL上述提取液于另一 根洁净的15mL带刻度离屯、管中，加入甲醇-氨水溶液（甲醇与氨水的体积比为70:30,氨水 为0.05% (V/V)的氨水溶液），定容至10. 00血刻度，摇匀。将摇匀后试样，过0.22ym针 式滤膜后，待测。
[0化1 ] 1. 2标准溶液的配置；
[0化2] (1)杜酷醇标准贬备液配置：准确称取〇.〇6250g杜酷醇标准品于25血容量瓶中， 用己醇溶解并定容至刻度，配置成浓度为2. 5g/L的杜酷醇标准贬备液，该溶液在4°C下保 存，有效期六个月；
[005引 似杜酷醇标准中间液配置；准确移取100化杜酷醇标准贬备液于lOmL容量瓶 中，用己醇定容至刻度，得到浓度为25.OOmg/L的杜酷醇标准中间液，该溶液需现配现用。
[0054] 做杜酷醇标准工作溶液配置：准确移取100yL杜酷醇标准中间液于lOmL容量 瓶中，用甲醇-氨水溶液（甲醇与氨水的体积比为70:30,氨水为0. 05% (V/V)的氨水溶 液）定容至刻度，得到浓度为0. 2500mg/L的杜酷醇标准工作溶液，该溶液需现配现用。
[0055] (4)分别取10血容量瓶中各加入0. 20血、0. 40mL、0. 60血、0. 80mL、1. 00血的杜酷 醇标准工作溶液，并同时加入1.OOmL不含杜酷醇的空白样（消除样品基质对检测结果产生 的干扰作用），然后用甲醇-氨水溶液（甲醇与氨水的体积比为70:30,氨水为0. 05% (V/ V)的氨水溶液）定容至刻度。使标准工作系列浓度分别为5. 0yg/L、10yg/L、15yg/L、 20]ig/L、25iig/L、0iig/L。现配现用。
[0056] 1. 3上机检测；利用HPLC-MS/MS分别对标准溶液和样品进行上机测定，根据标准 溶液的测量结果，绘制标准溶液含量-结果的标准曲线，然后利用该标准曲线和样品的上 机结果计算样品中杜酷醇的含量。
[0化7] 高效液相色谱（HPLC)的色谱条件为；
[0058] a)色谱仪型号；ThermoACCELA液相色谱仪；
[0059]b)色谱柱；C18 色谱柱（2.l*50mm，粒径 1. 9ym);
[0060] C)流动相：甲醇-氨水溶液，梯度洗脱，梯度洗脱程序见表3
[0061] 表3梯度洗脱程序对应的洗脱时间与流动相浓度
[0062]
[006引C)流速；200yL/min;
[0064] d)柱温；室温；
[0065] e)进样量；10化。
[0066] 质谱（M巧条件：
[0067]a)大气压化学离子源（APCI)负离子检测模式；
[0068] b)放电针电流；4. 0uA;
[0069] C)喷雾温度；200°C;
[0070] d)去溶剂气；氮气；
[0071]e)毛细管温度；27(TC;
[0072] f)碰撞气：氣气，纯度>99. 99% ;
[0073] g)碰撞压力；1. 5 ;
[0074]h)母离子分子量；165 ;
[0075]i)子离子分子量（碰撞能量）；93(25eV)、106(20eV)、119(21eV)、121(18eV)。106 为定量离子。
[0076] 1. 4结果计算：利用外标法定量，样品中杜酷醇含量用色谱数据处理或按照下列 公式进行计算：
[0077]
[007引 式中；
[0079]X--试样中杜酷醇含量，单位为mg/kg;
[0080] A--样液中杜酷醇的峰面积；
[0081] b-标准曲线的截距；
[0082] a--标准曲线的斜率；
[008引 Vi-一样品分取后定容体积，单位为血；
[0084] Vg--样品分取体积，单位为mL;
[0085]V3一一样品溶解定容体积，单位为血；
[0086] m--样品称样质量，单位为g。
[0087] 实施例3 ;利用高效液相色谱串联质谱法化PLC-MS/M巧测定杜酷醇的回收率和精 密度试验
[008引对空白化妆品添加不同量的标准溶液进行加标回收率和精密度实验。
[0089] 参考实施例2的试验方法，在乳状类化妆品和水溶液中分别加入浓度为0. 1、0. 5、 1. 0、2.Omg/kg的杜酷醇，进行6次平行试验，同时分别W不加杜酷醇的乳状类化妆品和水 溶液为本底，根据检测结果测定回收率和相对标准偏差。结果如表4和表5所示：
[0090] 表4乳液类化妆品加标回收统计表
[0091]
[0092] 表5水溶液类化妆品加标回收统计表
[0093]
[0094] 根据表4和表5的结果显示，利用该方法测定杜酷醇的回收率在80. 6 %~110 %， 其RSD为3. 08%~10. 5%，加标回收率和精密度均十分良好，表明HPLC-MS/MS法测定杜酷 醇结果稳定可靠。
[0095] 实施例4;超高效液相色谱法扣HX)快速测定化妆品中杜酷醇的条件选择
[0096] 4. 1样品前处理凍用己醇做溶剂，溶解杜酷醇。与甲醇等溶剂相比，己醇无毒性， 更为安全。
[0097] 4. 2流动相及洗脱条件的选择：
[009引采用己膳-水的流动相进行等度洗脱，水；己膳=75:25(体积比）为最优。
[0099] 4. 3检测波长的选择：
[0100] 采用二极管阵列检测器（WatersAcquityPDA二极管阵列检测器），W杜酷醇标准 溶液为样品采用UPLC(WatersAcquityUPLC超高效液相色谱仪）进行上机测定，测定杜酷 醇标准溶液的吸收光谱图，如图4所示。
[01 根据图4的结果可W看出，杜酷醇在221. 2和276. 9nm处均有吸收峰，但是考虑到 在实际分析中，流动相在低波长下基线噪音大，会影响检测。所W本发明采用了 280nm为杜 酷醇检测波长，W提高灵敏度。
[0102] 4. 4线性关系与检测限：
[0103] 对不同浓度的杜酷醇标准溶液依次进样上机测定，W峰面积对质量浓度绘制工作 曲线，发现在2mg/l-12mg/L浓度范围内，浓度与其峰面积都成线性关系，相关系数〉0. 995， 样品的检测限为200mg/kg，具体结果见表6。参考实施例1的结果，虽然UPLC的检测限 比HPLC-MS/MS高，即UPLC的灵敏度较低，但是美白化妆品中杜酷醇含量需要达到1. 8% (18000mg/kg)W上才会起到美白作用，因此本发明中UPLC法的杜酷醇检测限已经能够满 足检测要求。
[0104] 表6化妆品中杜酷醇的线性方程、相关系数及检测限
[0105]
[0106