一种麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药成分分析检测技术领域，涉及一种麝香保心丸中苏合香药味成分 指纹图谱的检测方法及其应用，具体涉及一种麝香保心丸的苏合香中苯甲酸、肉桂酸、苯甲 酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸苯乙酯5种药味成分指纹图谱的检测方法及其在含量测定中应 用。
【背景技术】
[0002] 麝香保心丸是70年代从宋代的苏合香丸的基础上改良而成，以其疗效肯定、安全 经济而成为目前冠心病最常用的治疗药物之一，它缓解症状起效迅速，没有硝酸酯类的禁 忌症及耐药性，长期服用可以保护血管，阻止动脉粥样硬化，减少心绞痛发作次数，减少严 重心血管事件的发生，其芳香温通，益气强心，临床上用于气滞血瘀所致的胸痹，症见心前 区疼痛、固定不移；心肌缺血所致的心绞痛、心肌梗死见上述症候者。因为疗效卓越、安全性 高被列为国家中药保密品种，受国家秘密技术保护，且被列名国家基本药物目录，荣获中国 中西医结合学会科学技术奖，入选国家十一五科技支撑重点项目等众多荣誉。
[0003] 麝香保心丸呈黑褐色有光泽的微丸，破碎后断面为棕黄色，味苦、辛凉，有麻舌感。 麝香保心丸由人工麝香、人参提取物、苏合香、人工牛黄、肉桂、蟾酥、冰片等7味中药组成。 其中，苏合香来源于金缕梅科植物苏合香树LiquidambarorientalisMill的树干渗出的 香树脂，为处方中臣药，目前，在10版《中国药典》一部麝香保心丸项下采用肉桂酸薄层鉴 别的方法控制质量，而且苏合香项下仅以肉桂酸为含测指标。虽然有一些文献中针对苏合 香以肉桂酸、苯甲酸和苯甲酸苄酯为指标进行含量测定，但是苏合香中成分复杂，还含有一 些其它必要成分。因此，有必要建立苏合香中指标成分的指纹图谱，同时建立了基于指纹图 谱的指标成分含量测定方法，以一次样品制备、一次进样分析，同时完成定性和定量分析， 用于对成方制剂中苏合香进行有效的质量控制。
【发明内容】
[0004] 鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种麝香保心丸中苏合香 药味成分指纹图谱的检测方法及其应用，采用优化条件的高效液相色谱方法首次建立了麝 香保心丸中苏合香中5种指标药味成分（苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸 苯乙酯）的指纹图谱，并且同时一次对这5种主要成分进行定量分析。本发明中方法通过 指纹图谱和多成分含量测定可以比较全面的反映麝香保心丸中苏合香的主要指标成分，实 现多成分定量控制苏合香质量，提高麝香保心丸中苏合香质控水平。
[0005] 为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种麝香保心丸中苏合香 药味成分指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：
[0006] 优选地，所述苏合香药味成分为苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸 苯乙酯。
[0007] 1)供试品溶液的制备：称取麝香保心丸粉末，加入无水乙醇，密闭后超声提取，取 上清液，过滤，即得供试品溶液；
[0008] 优选地，所述麝香保心丸粉末加入的重量与所述无水乙醇加入的体积之比为 0? 2-1 :20-100(g/ml) 〇
[0009] 更优选地，所述麝香保心丸粉末加入的重量与所述无水乙醇加入的体积之比为 0. 5 :20 (g/ml)。
[0010] 所述麝香保心丸粉末和无水乙醇称取时，应当精密称取。
[0011] 优选地，所述超声提取时间为20-40min。更优选的，所述超声提取时间为30min。
[0012] 所述供试品溶液在密闭容器中进行，所述密闭容器为密塞的三角瓶。
[0013] 优选地，所述过滤的方式为滤膜过滤方式。更优选地，所述滤膜的孔径为0. 22iim。
[0014] 2)对照品溶液的制备：分别称取苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸 苯乙酯对照品，加甲醇溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液；
[0015] 优选地，所述对照品溶液中苯甲酸的CAS号为65-85-0 ;肉桂酸的CAS号为 140-10-3;苯甲酸苄酯的CAS号为120-51-4;肉桂酸苄酯的CAS号为103-41-3;桂酸苯乙 酯的CAS号为103-53-7。
[0016] 优选地，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：苯甲酸0. 01833-1. 833mg/ mL、肉桂酸 0? 002038-0. 2038mg/mL、苯甲酸苄酯 0? 05008-5. 008mg/mL、肉桂酸苄酯 0? 01817-1. 817mg/mL、桂酸苯乙酯 0? 001148-0. 1148mg/mL。
[0017] 更优选地，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：苯甲酸1.833mg/mL、肉桂酸 0? 2038mg/mL、苯甲酸节酯 5. 008mg/mL、肉桂酸节酯I. 817mg/mL、桂酸苯乙酯 0? 1148mg/mL。
[0018] 3)测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶 液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保 留时间，指认出5个共有特征峰，确认供试品溶液中5种苏合香药味成分的特征峰，从而获 得供试品溶液中5种苏合香药味成分的指纹图谱。
[0019] 优选地，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：watersC18柱；柱温： 20-30°C;检测波长：230-280nm;流速：0? 1-1.Oml/min;进样量：2-10y1 ;流动相： 0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液-乙腈，其中，A相为0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分 析时间：45min;梯度洗脱。
[0020] 更优选地，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：watersXBridgeBEHC18 柱（2.lX100mm，2. 5ym);柱温：25°C;检测波长：254nm;流速：0? 2ml/min;进样量：4y1 ; 流动相：0. 03v/v%磷酸水溶液-乙腈，其中，A相为0. 03v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分 析时间：45min;梯度洗脱。
[0021] 最优选地，所述梯度洗脱的具体程序为：
[0022] 0-9min，A相：B相体积比为 95 :5-75 :25 ;
[0023] 9-14min，A相：B相体积比为 75 :25-42 :58;
[0024] 14-40min，A相：B相体积比为 42 :58-0 :100;
[0025] 40-45min，A相：B相体积比为O:100-0 :100。
[0026] 本发明第二方面提供一种麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法在 麝香保心丸的苏合香中5种指标药味成分含量测定中的应用。
[0027] 本发明第三方面提供一种麝香保心丸的苏合香中5种指标药味成分含量的测定 方法，包括以下步骤：
[0028]A)供试品溶液的制备：与麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法的 步骤1)相同；
[0029] B)对照品溶液的制备：与麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法的 步骤2)相同；
[0030] C)测定：采用高效液相色谱法在相同色谱条件下分别测定供试品溶液和对照品 溶液，并采用外标法计算供试品溶液中苏合香中5种指标药味成分的含量。
[0031] 优选地，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：WatersC18柱；柱温： 20-30°C;检测波长：230-280nm;流速：0? 1-1.Oml/min;进样量：2-10y1 ;流动相： 0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液-乙腈，其中，A相为0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分 析时间：45min;梯度洗脱。
[0032] 更优选地，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：Waters XBridge BEH C18 柱（2. lX100mm，2. 5ym);柱温：25°C ;检测波长：254nm ;流速：0? 2ml/min ;进样量：4y 1 ; 流动相：0. 03v/v%磷酸水溶液-乙腈，其中，A相为0. 03v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分 析时间：45min ;梯度洗脱。
[0033] 最优选地，所述梯度洗脱的具体程序为：
[0034] 0-9min，A相：B相体积比为 95 :5-75 :25 ;
[0035] 9-14min，A相：B相体积比为 75 :25-42 :58 ;
[0036] 14-40min，A相：B相体积比为 42 :58-0 :100 ;
[0037] 40-45min，A相：B相体积比为O:100-0 :100。
[0038] 所述外标法是指：分别移取一系列不同体积的步骤B)所述混合对照品溶液，配成 一系列不同浓度的混合对照品标准溶液，采用高