，1号峰为苯甲酸，2号 峰为肉桂酸，3号峰为苯甲酸节酯，4号峰为肉桂酸节酯，5号峰为桂酸苯乙酯。
[0087] 实施例2
[0088] 1、实验部分
[0089]I. 1样品前处理
[0090] 供试品溶液的制备：精密称取麝香保心丸粉末〇. 2-lg，置于具塞三角瓶中，精密 加入无水乙醇20-100ml，密塞封闭后超声提取20-40min，取上清液，用孔径为0. 22ym的滤 膜过滤，即得供试品溶液。
[0091] 对照品溶液的制备：分别精密称取对照品苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸 苄酯和桂酸苯乙酯适量，加甲醇溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液。具体来说，将精 密称取的苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸苯乙酯置于5mL容量瓶中，用甲 醇溶解并稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述容量瓶中的溶液lmL，置于IOmL容量瓶中， 用甲醇稀释至刻度，配成混合对照品溶液。对照品溶液中各成分的含量范围为：苯甲酸 0? 01833-1. 833mg/mL、肉桂酸0? 002038-0. 2038mg/mL、苯甲酸苄酯0? 05008-5. 008mg/mL、 肉桂酸苄酯〇? 01817-1. 817mg/mL、桂酸苯乙酯0? 001148-0. 1148mg/mL。
[0092] 1. 2色谱条件
[0093] 高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：watersC18柱；柱温：20-30°C;检测波 长：230-280nm;流速：0? 1-1.Oml/min;进样量：2-10y1 ;流动相：0? 01-0. 5v/v%磷酸水溶 液-乙腈，其中，A相为0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分析时间：45min;梯度洗 脱。
[0094] 梯度洗脱的具体程序为：
[0095] 0-9min，A相：B相体积比为 95 :5-75 :25 ;
[0096] 9-14min，A相：B相体积比为 75 :25-42 :58 ;
[0097] 14-40min，A相：B相体积比为 42 :58-0 :100 ;
[0098] 40-45min，A相：B相体积比为O:100-0 :100。
[0099] 1. 3 测定
[0100] 采用外标法，将制备的混合对照品溶液和供试品溶液，采用高效液相色谱仪进样 分析，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，指认共有 特征峰，从而获得供试品溶液中5种苏合香药味成分的指纹图谱。
[0101] 2、指纹图谱
[0102] 采用上述I. 1的前处理方法和上述1. 2的HPLC检测条件，我们建立了麝香保心丸 的苏合香中5种指标药味成分的指纹图谱，麝香保心丸的苏合香中5种指标药味成分及5 个混合对照品成分的色谱图见图1、2,各成分的保留时间和峰面积见表8。由表8、图1-2可 知，获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图根据相对保留时间进行 比较后，指认了 5个主要共有峰，其中，1号峰为苯甲酸，2号峰为肉桂酸，3号峰为苯甲酸苄 酯，4号峰为肉桂酸苄酯，5号峰为桂酸苯乙酯。该指纹图谱的精密度、重复性、稳定性良好。
[0103] 表8苏合香中5种指标药味成分的指纹图谱
[0104]
[0105] 实施例3
[0106] I、实验部分
[0107] 1.1样品前处理
[0108] 供试品溶液的制备：精密称取麝香保心丸粉末0. 5g，置于具塞三角瓶中，精密加 入无水乙醇20ml，密塞封闭后超声提取30min，取上清液，用孔径为0. 22ym的滤膜过滤，即 得供试品溶液。
[0109] 对照品溶液的制备：分别精密称取对照品苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄 酯和桂酸苯乙酯适量，加甲醇溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液。具体来说，将精密称 取的苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸苯乙酯置于5mL容量瓶中，用甲醇溶 解并稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述容量瓶中的溶液lmL，置于IOmL容量瓶中，用甲醇 稀释至刻度，配成混合对照品溶液。对照品溶液中各成分的含量范围为：苯甲酸1.833mg/ mL、肉桂酸0. 2038mg/mL、苯甲酸节酯5. 008mg/mL、肉桂酸节酯I. 817mg/mL、桂酸苯乙酯 0.1148mg/mL〇
[0110] 1.2色谱条件
[0111] 高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：watersXBridgeBE；HC18柱 (2.lX100mm，2. 5ym);柱温：25°C;检测波长：254nm;流速：0? 2ml/min;进样量：4y1 ;流 动相：0. 03v/v%磷酸水溶液-乙腈，其中，A相为0. 03v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分析 时间：45min;梯度洗脱。
[0112] 梯度洗脱的具体程序为：
[0113] 0-9min，A相：B相体积比为 95 :5-75 :25 ;
[0114] 9-14min，A相：B相体积比为 75 :25-42 :58 ;
[0115] 14-40min，A相：B相体积比为 42 :58-0 :100 ;
[0116] 40-45min，A相：B相体积比为 0 :100-0 :100。
[0117] 1.3 测定
[0118] 采用外标法，将制备的混合对照品溶液配成一系列不同浓度的混合对照品标准溶 液，采用高效液相色谱仪进样分析，绘制标准工作曲线。再将获得的供试品溶液，采用高效 液相色谱仪进样分析，并将分析结果代入标准工作曲线，即得供试品溶液中的苏合香中5 种指标药味成分的含量。
[0119] 2、结果与讨论
[0120] 2. 1苏合香中5种指标药味成分含量测定方法的线性关系
[0121] 精密称取上述I. 1的混合对照品溶液适量，分别用甲醇稀释1倍、5倍、10倍、25 倍、50倍、100倍，制成一系列浓度的混合标准品溶液，采用1. 2的HPLC检测条件，进行高效 液相色谱仪分析，测定并计算获得苏合香中5种指标药味成分的标准回归方程、相关系数 和线性范围。具体结果见表9。
[0122] 表9线性回归方程
[0124] 注：A为峰面积，X为浓度
[0125] 根据表9可知，标准回归方程以色谱峰面积为纵坐标（A)，成分浓度为横坐标（X)， 同时，5种成分在一定浓度的线性范围内均呈良好的线性关系，其标准回归方程的相关系数 均大于〇. 9998。
[0126] 2. 2回收率
[0127] 精密称取上述I. 1的混合对照品溶液适量，分别准确加入一定含量的5种对照品 溶液，具体按照样品含量的〇. 8、1、1. 2倍加入，每个浓度3份。并按I. 1进行前处理，依1. 2 的色谱条件进样测定，结果见表10。由表10可知，高、中、低三个浓度加样平均回收率在 98-101 %之间，RSD值在3. 89 %以内，符合要求，其测定结果的回收率良好。
[0128] 表10加样回收率结果
[0129]
[0131] 2. 3精密度
[0132] 精密吸取上述I. 1中制备的同一供试品溶液，在上述I. 2确认的HPLC条件下连续 进样分析6次，测定并计算苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸苯乙酯的保留 时间及峰面积，精密度具体结果见表11、12。
[0133] 结果表明，5个共有峰面积的相对保留时间RSD小于0. 40%，相对峰面积RSD小于 2. 61 %，说明该方法的精密度良好。
[0134] 表11苏合香中5种指标药味成分含量测定的精密度考察结果（相对保留时间）
[0135]
[0136] 表12苏合香中5种指标药味成分含量测定的精密度考察结果（相对峰面积）
[0137]
[0138] 2. 4重复性
[0139] 取同一批麝香保心丸粉末6份，按上述I. 1进行供试品溶液前处理，并在上述I. 2 的色谱条件下连续进样分析6次，测定并计算苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和 桂酸苯乙酯的保留时间及峰面积，重复性具体结果见表13、14。结果表明，5个共有峰面积 的相对保留时间RSD小于0. 50%，相对峰面积RSD小于2. 77%，说明该方法重复性良好。
[0140] 表13苏合香中5种指标药味成分含量测定的重复性考察结果（相对保留时间）
[0144] 2. 5稳定性
[0145] 精密吸取上述I. 1中制备的同一供试品溶液，按上述1. 2的色谱条件，分别于0h、 6h、12h、18h、24h进样测定，测定并计算苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸节酯、肉桂酸节酯和桂酸苯 乙酯的保留时间及峰面积，具体结果见表15、16。如表15、16