可知，5个共有峰面积的相对 保留时间RSD小于1. 63%，相对峰面积RSD小于1. 45%，说明该方法在24h内稳定性良好。
[0146] 表15苏合香中5种指标药味成分含量测定的稳定性考察结果（相对保留时间）
[0147]
[0150] 2. 6实际样品中苏合香的5种指标药味成分含量的测定
[0151] 取麝香保心丸样品按上述I. 1和1. 2的条件处理并测定，具体结果见表17。
[0152] 表17麝香保心丸样品中苏合香的5种指标药味成分含量
[0153]
[0154] 实施例4
[0155] 1、实验部分
[0156] Ll样品前处理
[0157] 供试品溶液的制备：精密称取麝香保心丸粉末0. 2-lg，置于具塞三角瓶中，精密 加入无水乙醇20-100ml，密塞封闭后超声提取20-40min，取上清液，用孔径为0. 22ym的滤 膜过滤，即得供试品溶液。
[0158] 对照品溶液的制备：分别精密称取对照品苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸 苄酯和桂酸苯乙酯适量，加甲醇溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液。具体来说，将精 密称取的苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸苯乙酯置于5mL容量瓶中，用甲 醇溶解并稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述容量瓶中的溶液lmL，置于IOmL容量瓶中， 用甲醇稀释至刻度，配成混合对照品溶液。对照品溶液中各成分的含量范围为：苯甲酸 0? 01833-1. 833mg/mL、肉桂酸0? 002038-0. 2038mg/mL、苯甲酸苄酯0? 05008-5. 008mg/mL、 肉桂酸苄酯〇? 01817-1. 817mg/mL、桂酸苯乙酯0? 001148-0. 1148mg/mL。
[0159] 1.2色谱条件
[0160] 高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：watersC18柱；柱温：20-30°C;检测波 长：230-280nm;流速：0? 1-1.Oml/min;进样量：2-10yI;流动相：0? 01-0. 5v/v%磷酸水溶 液-乙腈，其中，A相为0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分析时间：45min;梯度洗 脱。
[0161] 梯度洗脱的具体程序为：
[0162] 0-9min，A相：B相体积比为 95 :5-75 :25;
[0163] 9-14min，A相：B相体积比为 75 :25-42 :58 ;
[0164] 14-40min，A相：B相体积比为 42 :58-0 :100 ;
[0165] 40-45min，A相：B相体积比为O:100-0 :100。
[0166] 1.3 测定
[0167] 采用外标法，将制备的混合对照品溶液配成一系列不同浓度的混合对照品标准溶 液，采用高效液相色谱仪进样分析，绘制标准工作曲线。再将获得的供试品溶液，采用高效 液相色谱仪进样分析，并将分析结果代入标准工作曲线，即得供试品溶液中的苏合香中5 种指标药味成分的含量。
[0168] 2、结果与讨论
[0169] 按上述I. 1制备的混合对照品溶液，配成一系列不同浓度的混合对照品标准溶 液，根据1. 2的高效液相色谱条件进行测定，采用高效液相色谱仪进样分析，绘制标准工作 曲线，该标准工作曲线的线性良好。同时，进行混合对照品溶液的加样回收率试验，其测定 结果的回收率良好，符合要求。
[0170] 按上述I. 1制备的供试品溶液，在上述1. 2确认的HPLC条件进行测定其精密度、 重复性、稳定性试验，测定结果的精密度、重复性良好，并能在24h内保持稳定。
[0171] 取麝香保心丸实际样品按上述I. 1和1. 2的条件处理并测定，能够测定出麝香保 心丸样品中苏合香的5种指标药味成分的含量。
[0172] 所以，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。
[0173] 上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟 悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因 此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完 成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
【主权项】
1. 一种麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法，包括以下步骤： 1) 供试品溶液的制备：称取麝香保心丸粉末，加入无水乙醇，密闭后超声提取，取上清 液，过滤，即得供试品溶液； 2) 对照品溶液的制备：分别称取苯甲酸、肉桂酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和桂酸苯乙 酯对照品，加甲醇溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液； 3) 测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，将 获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时 间，指认出5个共有特征峰，确认供试品溶液中5种苏合香药味成分的特征峰，从而获得供 试品溶液中5种苏合香药味成分的指纹图谱。2. 根据权利要求1所述的麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法，其特征 在于，所述步骤1)中，所述麝香保心丸粉末加入的重量与所述无水乙醇加入的体积之比为 0.2-1 ：20-100〇3. 根据权利要求1所述的麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法，其特征 在于，所述步骤1)中，所述超声提取时间为20-40min。4. 根据权利要求1所述的麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法，其特征 在于，所述步骤2)中，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：苯甲酸0. 01833-1. 833mg/ mL、肉桂酸 0? 002038-0. 2038mg/mL、苯甲酸苄酯 0? 05008-5. 008mg/mL、肉桂酸苄酯 0? 01817-1. 817mg/mL、桂酸苯乙酯 0? 001148-0. 1148mg/mL。5. 根据权利要求1所述的麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法，其 特征在于，所述步骤3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：waters C18柱； 柱温：20-30 °C ;检测波长：230-280nm;流速：0. 1-1.0ml/min ;进样量：2-10 yl ;流动相： 0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液-乙腈，其中，A相为0. 01-0. 5v/v%磷酸水溶液，B相为乙腈；分 析时间：45min ;梯度洗脱。6. 根据权利要求5所述的麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法，其特征 在于，所述梯度洗脱的具体程序为：〇-9min，A相：B相体积比为95 :5-75 :25 ;9-14min，A相： B 相体积比为 75 :25-42 :58 ;14-40min，A 相：B 相体积比为 42 :58-0 :100 ;40-45min，A 相： B相体积比为O :100-0 :100。7. 根据权利要求1-6任一所述的麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法 在麝香保心丸的苏合香中5种指标药味成分含量测定中的应用。8. -种麝香保心丸的苏合香中5种指标药味成分含量的测定方法，包括以下步骤： A) 供试品溶液的制备：采用权利要求1-6任一权利要求所述麝香保心丸中苏合香药味 成分指纹图谱的检测方法的步骤1)制备； B) 对照品溶液的制备：采用权利要求1-6任一权利要求所述麝香保心丸中苏合香药味 成分指纹图谱的检测方法的步骤2)制备； C) 测定：采用高效液相色谱法在相同色谱条件下分别测定供试品溶液和对照品溶液， 并采用外标法计算供试品溶液中苏合香中5种指标药味成分的含量。9. 根据权利要求8所述的麝香保心丸的苏合香中5种指标药味成分含量的测定方法， 其特征在于，如步骤C)所述高效液相色谱法的色谱条件采用权利要求1-6任一权利要求所 述麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法的色谱条件。
【专利摘要】本发明提供一种麝香保心丸中苏合香药味成分指纹图谱的检测方法，通过对供试品溶液及对照品溶液的制备、测定并获得供试品溶液和对照品溶液的液相色谱图，经与对照品溶液的液相色谱图比较后，得到供试品溶液中5种苏合香药味成分的指纹图谱。本发明还进一步提供了上述指纹图谱检测方法在麝香保心丸的苏合香药味成分中5种指标成分含量测定中的应用。本发明通过对苏合香药味成分中5种指标成分的指纹图谱和含量分析，能够实现多成分定量控制苏合香质量，提高麝香保心丸中苏合香质控水平，也为其他复方制剂中苏合香质量控制提供一定的参考。
【IPC分类】G01N30/88
【公开号】CN105067747
【申请号】CN201510477173
【发明人】王玲, 李淞明, 詹常森, 陈忠樑, 朱诗竟
【申请人】上海和黄药业有限公司
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年8月6日