一种1-(氨基甲酰基)甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的检测方法
【专利摘要】本发明涉及一种1-(氨基甲酰基)甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的检测方法，采用正相HPLC色谱系统，以直链淀粉酯类衍生物为填料的色谱柱，流动相为有机溶剂按照适当比例组成的混合溶剂，有机溶剂可选甲醇、无水乙醇、乙腈、异丙醇、丙醇、正己烷、庚烷；检测器为紫外检测器，检测波长210nm。本发明方法准确、便捷，优于传统旋光法，可用于1-(氨基甲酰基)甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮的单一手性异构体、混合手性异构体及消旋体的光学纯度定性和定量分析检测，对于左旋或右旋的1-(氨基甲酰基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体质量控制具有重要意义。
【专利说明】
-种1-(氨基甲醜基）甲基-4-哲基-2- P比略烧酬手性异 构体的检测方法
技术领域
[0001] 本发明设及药物分析检测技术领域，特别是设及一种1-(氨基甲酯基）甲 基-4-径基-2-化咯烧酬手性异构体的检测方法。
【背景技术】
[0002] 1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬是四氨化咯的衍生物，分子式： 化，在精细化工领域可作合成子（Synthon)或手性彻块烟liral bui Iding block,手 性子）；其消旋体为脑神经用药，治疗记忆障碍和脑功能不全。该化合物有一个手性中屯、， 存在两种手性异构体：左旋体和右旋体（见下结构式）。*为手性碳原子。
[0003]
[0004] 传统的旋光法可W对该化合物的比旋度进行粗略测定，但无法精确检测手性异构 体组份。采用手性流动相理论上也可实现对手性异构体的分离，但是由于此流动相存在粘 度大、配比复杂、对仪器要求高等缺点，手性拆分分离效果和重现性并不理想，难W满足实 际需求。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种科学、快速、准确、便捷的1-(氨基甲酯基） 甲基-4-径基-2-化咯烧酬的手性异构体的检测方法。
[0006] 为达上述目的，本发明一种1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬手性异 构体的检测方法，采用正相高效液相色谱法检测。
[0007] 其中所述正相高效液相色谱检测条件为：流动相选自甲醇、无水甲醇、乙醇、无水 乙醇、乙腊、异丙醇、丙醇、正己烧和庚烧中的一种或任意比例的两种，采用直链淀粉醋类化 合物为填料的色谱柱，紫外检测波长为210nm。
[0008] 其中所述色谱柱填料粒径为1-10 μ m。
[0009] 其中所述色谱柱为4. 6mm*250mm，5 μ m的CHIRAL PAK AD-H色谱柱。
[0010] 其中所述样品浓度为0. 0022. 5mg/ml，进样量10-20 μ 1，流动相为80-100%的乙 腊和0-20 %的甲醇的混合液或流动相为80-100 %的正己烧和0-20 %的乙醇的混合液，流 动相流速为 0. 5ml/min-l. 2ml/min，柱溫为 25°C -35°C。
[0011] 其中所述样品通过所述流动相溶解或稀释。 阳01引其中所述流动相流速为1.0ml/min。
[0013] 其中所述柱溫为30°C。
[0014] 其中所述流动相为85%的乙腊和15%的甲醇的混合液或流动相为85%的正己烧 和15%的乙醇的混合液。
[0015] 本发明与现有技术不同之处在于本发明取得了如下技术效果：
[0016] 本发明采用正相高效液相色谱系统、W直链淀粉醋类衍生物为填料的色谱柱、普 通有机溶剂为流动相，可W使1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬的两个手性异 构体完全分离，显著优于传统旋光法，本发明为控制1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化 咯烧酬的手性异构体提供了科学便捷的方法。
【附图说明】
[0017] 图1为1-(氨基甲酯基）甲基-4做-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（正己烧-无 水乙醇）；
[00化]图2为1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（正己烧-无 水乙醇）；
[0019] 图3为1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（正己烧-无水 乙醇）；
[0020] 图4为1-(氨基甲酯基）甲基-4做-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（乙腊-甲 醇）；
[002U 图5为1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-?基-2-化咯烧酬液相色谱图（乙腊-甲 醇）；
[0022] 图6为1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（乙腊-甲醇） [002引图7为做-1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-乙 腊）；
[0024] 图8为1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-乙 腊）；
[0025] 图9为1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-乙腊）；
[0026] 图10为1-(氨基甲酯基）甲基-4做-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-异 丙醇）；
[0027] 图11为1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-异 丙醇）；
[002引图12为1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-异丙 醇）；
[0029] 图13为1-(氨基甲酯基）甲基-4做-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-无 水乙醇）；
[0030] 图14为1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-无 水乙醇）；
[0031] 图15为1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬液相色谱图（甲醇-无水 乙醇）。
【具体实施方式】
[0032] W下结合实施例，对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。 阳〇3引 实施例1
[0034] 仪器：Shima化U 2010A HT高效液相色谱仪；Lcsolution工作站；
[0035] 色谱柱：CHIRAL PAK AD-H 色谱柱（4. 6mm巧50mm，5 μ m);
[0036] 流动相：正己烧：无水乙醇=85:15 ;
[0037] 柱溫：30°C ;
[0038] 流速：1.0ml/min ;
[0039] 紫外检测波长：210nm ;
[0040] 定位溶液1的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4(S)-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液1。
[0041] 定位溶液2的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4(时-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液2。
[0042] 样品溶液的配制：取供试品适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液。
[0043] 测定：各取定位溶液1、定位溶液2、样品溶液各20 μ 1，注入高效液相色谱仪，记录 色谱图，见图1-图3。 W44] 消旋体1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬中左、右旋体的分离度为1.8， 其中左旋（巧含量为50. 1 %，右旋（时含量为49. 9 %。 W45] 实施例2
[0046] 仪器：Shima化U 2010Α ΗΤ高效液相色谱仪；Lcsolution工作站；
[0047] 色谱柱：CHIRAL PAK AD-H 色谱柱（4. 6mm*250mm，5 μ m); W48] 流动相：乙腊：甲醇=85:15 ;
[0049]柱溫：30°C ;
[(K)加]流速：0. 5ml/min ;
[0051] 紫外检测波长：210nm ; 阳0巧定位溶液1的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4做-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液1。
[005引定位溶液2的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液2。
[0054] 样品溶液的配制：取供试品适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液。 阳化5] 测定：各取定位溶液1、定位溶液2、样品溶液各20 μ 1，注入高效液相色谱仪，记录 色谱图，见图4-图6。
[0056] 消旋体1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬中左、右旋体的分离度为1.8， 其中左旋（巧含量为50. 4%，右旋（时含量为49. 6%。
[0057] 实施例3
[0058] 仪器：Shima化U 2010Α ΗΤ高效液相色谱仪；Lcsolution工作站；
[0059] 色谱柱：CHIRAL PAK AD-H 色谱柱（4. 6mm巧50mm，5 μ m); W60] 流动相：甲醇：乙腊85:15 ;
[0061 ]柱溫：30 C,
[0062] 流速：0. 5ml/min ;
[0063] 紫外检测波长：210nm。 W64] 定位溶液1的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4(S)-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液1。 W65] 定位溶液2的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液2。
[0066] 样品溶液的配制：取供试品适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液。
[0067] 测定：各取定位溶液1、定位溶液2、样品溶液各20 μ 1，注入高效液相色谱仪，记录 色谱图，见图7-图9。 W側消旋体1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬中左、右旋体的分离度为3. 1， 其中左旋（巧含量为50. 3%，右旋（时含量为49. 7%。 W例实施例4
[0070] 仪器：Shima化U 2010Α ΗΤ高效液相色谱仪；Lcsolution工作站；
[0071] 色谱柱：CHIRAL PAK AD-H 色谱柱（4. 6mm巧50mm，5 μ m); 阳07引流动相：甲醇：异丙醇95:5 ;
[0073] 柱溫：30°C ;
[0074] 流速：0. 6ml/min ; 阳0巧]紫外检测波长：210皿。 W76] 定位溶液1的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4(S)-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液1。 W77] 定位溶液2的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液2。
[0078] 样品溶液的配制：取供试品适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液。
[0079] 测定：各取定位溶液1、定位溶液2、样品溶液各20 μ 1，注入高效液相色谱仪，记录 色谱图，见图10-图12。
[0080] 消旋体1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬中左、右旋体的分离度为1. 5， 其中左旋（巧含量为50. 6%，右旋（时含量为49. 4%。 阳0川实施例5
[0082] 仪器：Shima化U 2010Α ΗΤ高效液相色谱仪；Lcsolution工作站；
[0083] 色谱柱：CHIRAL PAK AD-H 色谱柱（4. 6mm*250mm，5 μ m);
[0084] 流动相：甲醇：无水乙醇95:5 ; 阳0化]柱溫：30°C ;
[0086] 流速：0. 6ml/min ;
[0087] 紫外检测波长：210nm。
[0088] 定位溶液1的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4(S)-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液1。 W89] 定位溶液2的配制：取1-(氨基甲酯基）甲基-4佩-径基-2-化咯烧酬（对照 品）适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液作为定位溶液2。
[0090] 样品溶液的配制：取供试品适量，用流动相溶解并稀释制成Img/ml的溶液。
[0091] 测定：各取定位溶液1、定位溶液2、样品溶液各20 μ 1，注入高效液相色谱仪，记录 色谱图，见图13-图15。
[0092] 消旋体1-(氨基甲酯基）甲基-4-径基-2-化咯烧酬中左、右旋体的分离度为1. 7， 其中左旋（巧含量为50. 5%，右旋（时含量为49. 5%。
[0093] W上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范 围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方 案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1. 一种1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的检测方法，其特征 在于：采用正相高效液相色谱法检测。2. 根据权利要求2所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的 检测方法，其特征在于所述正相高效液相色谱检测条件为：流动相选自甲醇、无水甲醇、乙 醇、无水乙醇、乙腈、异丙醇、丙醇、正己烷和庚烷中的一种或任意比例的两种，采用直链淀 粉酯类化合物为填料的色谱柱，紫外检测波长为210nm。3. 根据权利要求2所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的 检测方法，其特征在于：所述色谱柱填料粒径为1-10 μ m。4. 根据权利要求3所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的 检测方法，其特征在于：所述色谱柱为4. 6mm*250mm，5 μ m的CHIRAL PAKAD-H色谱柱。5. 根据权利要求1-4中任一项所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手 性异构体的检测方法，其特征在于：所述样品浓度为0. 0022. 5mg/ml，进样量10-20 μ 1，流 动相为80-100 %的乙腈和0-20 %的甲醇的混合液或流动相为80-100 %的正己烷和0-20 % 的乙醇的混合液，流动相流速为0. 5ml/min-l. 2ml/min，柱温为25°C -35°C。6. 根据权利要求1-4中任一项所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手 性异构体的检测方法，其特征在于：所述样品通过所述流动相溶解或稀释。7. 根据权利要求5所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的 检测方法，其特征在于：所述流动相流速为1. 〇ml/min。8. 根据权利要求5所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的 检测方法，其特征在于：所述柱温为30°C。9. 根据权利要求5所述的1-(氨基甲酰基）甲基-4-羟基-2-吡咯烷酮手性异构体的 检测方法，其特征在于：所述流动相为85 %的乙腈和15 %的甲醇的混合液或流动相为85 % 的正己烷和15%的乙醇的混合液。
【文档编号】G01N30/02GK105823828SQ201510001395
【公开日】2016年8月3日
【申请日】2015年1月4日
【发明人】李泉, 何勤, 李业生, 陈仲强
【申请人】哈尔滨三联药业股份有限公司