基于psa磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒的制作方法
【专利摘要】本实用新型所述基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其包括盒体，与盒体相连接的用于对所述盒体进行封闭的盒盖，盒体底部设有固定板，用于分别竖直放置有增强液试剂瓶、浓缩清洗液试剂瓶和反应缓冲液试剂瓶的第一凹槽，以及用于分别竖直放置有包被PSA单克隆抗体的磁微粒试剂瓶、PSA的校准品试剂瓶、铕标记fPSA单抗溶液试剂瓶和钐标记的tPSA单抗溶液试剂瓶的大小适配的多个第二凹槽；所述盒盖的内表面设有容置有微孔板的第三凹槽，所述第三凹槽上设有罩体，用于盖住所述第三凹槽，本实用新型试剂盒具有方便使用、操作简单、稳定性好的优势，且更高的检测灵敏度和特异性，检测更加准确可靠，并达到了较佳的性能参数。
【专利说明】
基于PSA磁微粒的双标记时间分辨焚光免疫分析试剂盒
技术领域
[0001]本实用新型涉及一种基于前列腺特异性抗原(PSA)磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，属于免疫检测分析技术和纳米生物技术领域
【背景技术】
[0002]前列腺特异性抗原(prostate specific antigen，PSA)是人类前列腺上皮产生的一种丝氨酸蛋白酶，最早由Hara等于1971年从人类精楽中发现并命名为精楽蛋白(gammaseminoprotein)，1979年Wang等从前列腺上皮细胞中分离和提纯出与此完全相同的糖蛋白，且证明其是前列腺特异的，因此将其命名为前列腺特异性抗原。
[0003]PSA是一种包含240个氨基酸的单链糖蛋白，分子量为34KD。正常前列腺上皮、增生前列腺组织及前列腺癌细胞均能产生PSA13PSA自上述细胞分泌后进人前列腺导管腔内，以高浓度储存，其中极少的部分进入血循环系统，成为血清PSA13PSA在组织中的浓度是血清中的10倍。巨大浓度差异原因在于正常的上皮细胞与毛细血管、淋巴系统之间被完整的基底细胞层和基底膜所分隔。
[0004]在外周血中的PSA可大致分为两大类:游离PSA(fPSA)以及Ct-1抗凝乳蛋白酶形成稳定复合物的结合型PSA(CPSA)t^fPSA占总PSA(tPSA)的5%-30%。在正常生理条件下，它存在于前列腺组织、前列腺液、精液、血清和尿中。目前，前列腺特异抗原(PSA)检查作为一种筛选工具，已越来越普及。由于PSA的检查，越来越多的癌肿在临床早期就被发现。通常，PSA的正常值小于4yg/L。前列腺肥大与前列腺炎这两种良性疾病，会造成PSA升高，浓度通常在4至lOyg/L之间。如果PSA浓度大于lOyg/L，发生前列腺癌的机会就增加，要进一步做直肠超声波检查支持诊断。如果PSA大于40yg/ml，就有可能发生晚期前列腺癌。如果前列腺癌治疗后，PSA浓度上升，代表可能局部复发或有远处扩散的情形。但PSA有一定的漏症率，1/3具有重要临床意义的癌症病例，必须配合直肠指检、直肠超声波检查才能减少误诊率。
[0005]fPSA在良性前列腺肥大时显著增高，与单独检测tPSA相比，检测fPSA和tPSA并计算f PSA/tPSA对鉴别良性前列腺肥大与前列腺癌极为有利。
[0006]时间分辨突光免疫分析技术(Time-resolved fluoroimmunoassay ,TrFIA)又称解离-增强镧系突光免疫分析(dissociat1n-enhancement lanthanidefluoroimmunoassay，DELFIA)，是用三价稀土离子及其螯合物作为示踪物，当反应体系发生后，用时间分辨荧光免疫分析仪，测定反应物中的荧光强度，定量分析待测物质的含量。其灵敏度高，可达10-17mol/孔，技术上具有独特优势，应用范围广泛。铕(Eu)标记时间分辨荧光免疫技术是一种非放射标记超微量免疫检测技术，利用光谱分辨、时间分辨、解离-增强原理，具有荧光寿命极长、Stokes位移大、荧光特异性强、Eu3+离子的发光范围宽的特点。TRFIA是继酶联免疫技术和放免技术之后发展起来的新兴技术，相对于后两者化学发光免疫技术具有高灵敏度、高特异性，操作简便、快速，标记结合物稳定，同时无放射性同位素损伤和污染等特点，因此近年来在临床检测分析中被广泛推广使用。然而现有技术中配套设置的时间分辨荧光免疫分析的检测试剂盒，该试剂盒都是采用将各种试剂瓶、盛装抗体的试剂瓶、微孔板简单收纳的方式将其放入试剂盒内部，没有对试剂盒内部进行进一步的辅助设置，使得上述试剂盒内简单收纳的试剂瓶、微孔板在运输过程中容易发生错位和相互碰撞，不仅不利于试剂盒内试剂、抗体和微孔板保存，而且摩擦或碰撞过程中可能导致试剂瓶和微孔板发生磨损，使得试剂瓶容易产生裂痕或发生破裂，导致试剂瓶内的有效物质流淌到瓶外发生混合，或试剂瓶内进入空气影响试剂或抗体的质量，进而使得试剂盒内试剂盒内试剂、抗体减少或失效。
[0007]为此，本实用新型提供了一种基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，通过在试剂盒内部设置辅助装置，重新收纳试剂瓶、盛装抗体的试剂瓶、微孔板，避免试剂盒内的试剂瓶和微孔板在运输过程中容易发生错位和相互碰撞，使得试剂盒内的试剂、抗体保存完好，且稳定性高，同时具有方便使用、操作简单的优势。
【实用新型内容】
[0008]因此，本实用新型要解决的技术问题在于一种方便使用、操作简单、稳定性好、检测更加准确可靠和灵敏度和特异性高的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒。
[0009]为此，本实用新型提供了一种基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其包括盒体，与所述盒体相连接的用于对所述盒体进行封闭的盒盖，所述盒体底部设有固定板，分别竖直放置有增强液试剂瓶、浓缩清洗液试剂瓶和反应缓冲液试剂瓶的大小适配的多个第一凹槽，以及分别竖直放置有包被PSA单克隆抗体的磁微粒试剂瓶、PSA的校准品试剂瓶、铕标记fPSA单抗溶液试剂瓶和钐标记的tPSA单抗溶液试剂瓶的大小适配的多个第二凹槽;所述盒盖的内表面设有容置有微孔板的第三凹槽，所述第三凹槽上设有罩体，所述罩体与所述第三凹槽槽口可拆卸连接，用于盖住所述第三凹槽并固定所述微孔板。
[0010]所述的试剂盒，所述罩体的一端与所述第三凹槽槽口的一端转动连接，另一端设有通孔与所述盒盖内表面设置的卡扣相配合将所述罩体扣在所述第三凹槽上。
[0011]所述的试剂盒，所述卡扣包括固定部和连接部，所述连接部与所述盒盖内表面连接，所述固定部通过所述通孔固定所述罩体。
[0012]所述的试剂盒，所述通孔为长方形，所述固定部为长方形滑片，所述滑片与所述连接部活动连接。
[0013]所述的试剂盒，所述固定部一端设有倒钩，另一端与所述连接部转动连接。
[0014]所述的试剂盒，所述第一凹槽、第二凹槽依次沿所述固定板的长度方向排列设置。
[0015]所述的试剂盒，所述微孔板由可拆式酶标板和放置在其上的酶标条组成。
[0016]所述的试剂盒，所述微孔板为透明的96孔板。
[0017]上述试剂瓶为市售产品，所述试剂瓶中盛装的反应缓冲液试剂、浓缩清洗液试剂、增强液试剂、包被PSA单克隆抗体的磁微粒试剂、若干PSA的校准品试剂、铕标记fPSA单抗溶液试剂和钐标记的tPSA单抗溶液试剂可以为市售产品，在本实用新型中上述试剂均由江苏省原子医学研究所提供。
[0018]本实用新型相比现有技术的技术方案，具有如下优点:
[0019](I)本实用新型所述的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其包括盒体，与所述盒体相连接的用于对所述盒体进行封闭的盒盖，所述盒体底部设有固定板，分别竖直放置有增强液试剂瓶、浓缩清洗液试剂瓶和反应缓冲液试剂瓶的大小适配的多个第一凹槽，以及分别竖直放置有包被PSA单克隆抗体的磁微粒试剂瓶、PSA的校准品试剂瓶、铕标记fPSA单抗溶液试剂瓶、钐标记的tPSA单抗溶液试剂瓶的大小适配的多个第二凹槽;所述盒盖的内表面设有容置有微孔板的第三凹槽，所述第三凹槽上设有罩体，所述罩体与所述第三凹槽槽口可拆卸连接，用于盖住所述第三凹槽并固定所述微孔板;通过在所述盒体内设置的固定板上设置第一凹槽和第二凹槽，以便于所述试剂瓶竖直插入所述第一凹槽或第二凹槽内，不仅保证固定所述试剂瓶，避免试剂瓶在所述盒体内与其他试剂瓶发生碰撞，避免试剂瓶和微孔板发生磨损破裂，进而致使试剂瓶内的有效物质流淌到瓶外发生混合，使得试剂盒内试剂盒内试剂、抗体减少或失效，而且还极大的节省了所述盒体内的空间，使得所述试剂盒内部更加紧凑，缩小了所述试剂盒的体积，便于试剂盒的运输降低了成本，同时通过在盒盖内表面设有容置有微孔板的第三凹槽，所述微孔板可以嵌入所述第三凹槽内，同时通过罩体盖住所述第三凹槽，使得所述微孔板固定在所述第三凹槽内，进一步避免微孔板与其他试剂瓶碰撞，使得试剂瓶内的试剂、抗体保存完好，稳定性高，试剂瓶内的试剂或抗体更加均相，进而使得检测结果更加稳定、准确可靠，又由于所述试剂盒通过辅助设置，合理利用了试剂盒的空间，使得试剂盒结构更加紧凑，更加易于运输，方便使用，而且操作简单，综上，本实用新型所述的试剂盒具有方便使用、操作简单、稳定性好，且具有更高的检测灵敏度和特异性，检测结果更加准确可靠，达到了较佳的性能参数；
[0020]进一步的，由于所述试剂盒中的试剂瓶固定可靠，保证了在运输过程中试剂瓶中的试剂、抗体保持完好，稳定性高，进而使得所述试剂盒中的试剂接近均相，能够提供一个均相的反应体系，有利于检测的进行，使得当利用所述试剂盒进行检测fPSA和tPSA时，大大缩短反应时间，提高检测灵敏度，大大减少了配对抗体用量以及提高检测的精密度和灵敏度，可以保证不超过0.5ng/mL的血清(浆)样本不需要稀释，可以直接检测，操作简单，同时还具有量程宽，样品浓度值介于0.5-100ng/mL的都能准确检测，检测时间短，从样品孵育到检测，约25min完成，样品需求量少，一次上样只需50yL。
[0021](2)本实用新型所述的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，通过将所述罩体的一端与所述第三凹槽槽口的一端转动连接，另一端设有通孔与所述盒盖2内表面设置的卡扣相配合，当将所述微孔板嵌入所述第三凹槽中后，可以转动所述罩体扣在所述第三凹槽槽口上方，然后通过所述罩体上的通孔与所述卡扣配合，将所述罩体扣在所述第三凹槽上，使得所述盒盖在合在盒体上时，置于盒盖内表面的微孔板不掉下来。
[0022](3)本实用新型所述的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，通过将所述卡扣设置为包括固定部和连接部，所述连接部与所述第三凹槽槽口的一端连接，所述固定部通过所述通孔固定所述罩体，将所述罩体扣在所述第三凹槽上，使得所述盒盖在合在盒体上时，置于盒盖内表面的微孔板不掉下来。
[0023](4)本实用新型所述的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，通过将所述第一凹槽、第二凹槽依次沿所述固定板的长度方向排列设置，达到了合理的利用所述盒体内部的空间，大大缩小了所述盒体的体积，便于所述试剂盒的运输，降低了成本。
【附图说明】
[0024]为了更清楚地说明本实用新型【具体实施方式】或现有技术中的技术方案，下面将对【具体实施方式】或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本实用新型的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0025]图1为本实用新型的一种实施方式中所述的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒结构示意图；
[0026]图2为本实用新型的一种实施方式中所述的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒结构示意图；
[0027]图3为本实用新型实施方式中所述的固定板结构示意图；
[0028]图4为本实用新型实施方式中所述的盒盖结构示意图；
[0029]图5为本实用新型另一种实施方式中所述的盒盖的结构示意图；
[0030]图6为本实用新型实施方式中所述的卡扣结构示意图[0031 ]图7为本实用新型实施方式中所述的微孔板结构示意图；
[0032]图8为本实用新型实施方式中所述的试剂瓶结构示意图。
[0033]附图标记说明:
[0034]1-盒体，2-盒盖，21-第三凹槽，22-罩体，221-通孔，23-卡扣，231-固定部，2311-倒钩，232-连接部，3-固定板，31-第一凹槽，32-第二凹槽，4-增强液试剂瓶，5-浓缩清洗液试剂瓶，6-反应缓冲液试剂瓶，7-包被PSA单克隆抗体的磁微粒试剂瓶，8-PSA的校准品试剂瓶，9-铕标记fPSA单抗溶液试剂瓶，I O-钐标记的tPSA单抗溶液试剂瓶，11 -微孔板。
【具体实施方式】
[0035]下面将结合附图对本实用新型的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
[0036]在本实用新型的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0037]在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接;可以是机械连接，也可以是电连接;可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
[0038]此外，下面所描述的本实用新型不同实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。
[0039]如图1-4，图7-8所示，本实用新型所述的基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其包括盒体I，与所述盒体I相连接的用于对所述盒体I进行封闭的盒盖2，所述盒体I底部设有固定板3，分别竖直放置有增强液试剂瓶4、浓缩清洗液试剂瓶5和反应缓冲液试剂瓶6的大小适配的多个第一凹槽31，以及分别竖直放置有包被PSA单克隆抗体的磁微粒试剂瓶7、PSA的校准品试剂瓶8、铕标记PSA单抗溶液试剂瓶9和钐标记的tPSA单抗溶液试剂瓶10的大小适配的多个第二凹槽32;所述盒盖2的内表面设有容置有微孔板11的第三凹槽21，所述第三凹槽21上设有罩体22，所述罩体22与所述第三凹槽21槽口可拆卸连接，用于盖住所述第三凹槽21并固定所述微孔板11。
[0040]通过在所述盒体I内设置的固定板上设置第一凹槽31和第二凹槽32，以便于所述试剂瓶竖直插入所述第一凹槽31或第二凹槽32，不仅保证固定所述试剂瓶，避免试剂瓶在所述盒体I内与其他试剂瓶发生碰撞，提高了试剂瓶内试剂、抗体的稳定性，而且还极大的节省了所述盒体I内的空间，使得所述试剂盒内部更加紧凑，缩小了所述试剂盒的体积，便于试剂盒的运输，降低了成本。又通过在所述盒盖2内表面设置容置有所述微孔板11的第三凹槽21，所述第三凹槽21上设有罩体22，用于盖住所述第三凹槽21并固定所述微孔板11，通过所述第三凹槽21和所述罩体22的配合，可以将所述微孔板11固定在所述盒盖2的内表面上，进一步避免所述微孔板11与其他试剂瓶碰撞，使得试剂瓶试剂、抗体保存完好，稳定性高，试剂瓶内的试剂或抗体更加均相，进而使得检测结果更加稳定、准确可靠、检测灵敏度和特异性高，又由于所述试剂盒通过合理收纳所述试剂瓶和微孔板11，合理利用了所述试剂盒的空间，使得试剂盒结构更加紧凑，体积小，更加易于运输，方便使用。
[0041]进一步的，如图1-2所示，所述罩体22的一端与所述第三凹槽21槽口的一端转动连接，所述罩体22的另一端设有通孔221与所述盒盖2内表面设置的卡扣23相配合将所述罩体22扣在所述第三凹槽21上。通过将所述罩体22的一端与所述第三凹槽21槽口的一端转动连接，所述罩体22可以转动，便于所述罩体22扣在所述所述第三凹槽21槽口上或开启所述罩体22，通过在所述罩体22的另一端设置通孔221与所述盒盖2内表面设置的卡扣23相配合，使得所述罩体22可以扣在所述第三凹槽21槽口上，进而固定所述第三凹槽21内容置的所述微孔板11，避免所述盒盖2合在所述盒体I上时，所述盒盖2内表面的所述微孔板11掉落。
[0042]进一步的，如图4所示，所述卡扣23包括固定部231和连接部232，所述连接部232与所述盒盖2内表面连接，所述固定部231通过所述通孔221固定所述罩体22，可以将所述罩体22扣在所述第三凹槽21上，使得所述盒盖2在合在盒体I上时，置于所述盒盖2内表面的微孔板11不掉落。
[0043]进一步的，如图4所示，所述通孔221为长方形，所述固定部231为长方形滑片，所述滑片与所述连接部232活动连接。通过将所述固定部231设置为长方形滑片，所述滑片可以通过所述通孔221，然后旋转所述滑片，所述滑片可以固定住所述罩体22，进而将所述罩体22的一端固定在所述卡扣23上，实现固定所述第三凹槽21内的微孔板11。
[0044]进一步的，如图5-6所示，所述固定部231—端设有倒钩2311，所述固定部231另一端与所述连接部232转动连接，当所述固定部231通过所述通孔221，然后转动所述固定部231，将所述固定部231上的倒钩2311勾住所述罩体22，固定住所述罩体22，进而将所述罩体22的一端固定在所述卡扣23上，实现固定所述第三凹槽21内的微孔板11。
[0045]进一步的，如图3所示，所述第一凹槽31、第二凹槽32依次沿所述固定板3的长度方向排列设置，大大利用了空间，减少了试剂盒的体积，方便运输。
[0046]进一步的，所述微孔板11由可拆式酶标板和放置在其上的酶标条组成。
[0047]进一步的，所述微孔板11为透明的96孔板。
[0048]显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
【主权项】
1.一种基于PSA磁微粒的双标记时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其包括盒体(I)，与所述盒体(I)相连接的用于对所述盒体(I)进行封闭的盒盖(2)，其特征在于，所述盒体(I)底部设有固定板(3)，分别竖直放置有增强液试剂瓶(4)、浓缩清洗液试剂瓶(5)和反应缓冲液试剂瓶(6)的大小适配的多个第一凹槽(31)，以及分别竖直放置有包被PSA单克隆抗体的磁微粒试剂瓶(7)、PSA的校准品试剂瓶(8)、铕标记f PSA单抗溶液试剂瓶(9)和钐标记的tPSA单抗溶液试剂瓶(10)的大小适配的多个第二凹槽(32);所述盒盖(2)的内表面设有容置有微孔板(11)的第三凹槽(21)，所述第三凹槽(21)上设有罩体(22)，所述罩体(22)与所述第三凹槽(21)槽口可拆卸连接，用于盖住所述第三凹槽(21)并固定所述微孔板(11)。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述罩体(22)的一端与所述第三凹槽(21)槽口的一端转动连接，所述罩体(22)的另一端设有通孔(221)与所述盒盖(2)内表面设置的卡扣(23)相配合将所述罩体(22)扣在所述第三凹槽(21)上。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述卡扣(23)包括固定部(231)和连接部(232)，所述连接部(232)与所述盒盖(2)内表面连接，所述固定部(231)通过所述通孔(221)固定所述罩体(22)。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述通孔(221)为长方形，所述固定部(231)为长方形滑片，所述滑片与所述连接部(232)活动连接。5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述固定部(231)—端设有倒钩(2311)，另一端与所述连接部(232)转动连接。6.根据权利要求1-5任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述第一凹槽(31)、第二凹槽(32)依次沿所述固定板(3)的长度方向排列设置。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述微孔板(II)由可拆式酶标板和放置在其上的酶标条组成。8.根据权利要求1或2或4或5或7所述的试剂盒，其特征在于，所述微孔板(II)为透明的96孔板。
【文档编号】G01N33/573GK205608005SQ201620422012
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】黄飚, 周彬, 范俊, 张艺, 张珏, 郭明明, 邓黎莉, 朱岚
【申请人】江苏省原子医学研究所