从赤霉素A₄与A₇的混合物中分离赤霉素A₄的方法

专利名称：从赤霉素A₄与A₇的混合物中分离赤霉素A₄的方法
技术领域：
本发明涉及一种赤霉素A4的分离方法，尤其是一种从赤霉素A4 与A7的混合物中分离赤霉素A4的方法。
背景技术：
赤霉素是一族四环双萜羧酸类化合物，其基本结构是赤霉素烷。 由其衍生的同系物所表现的生理活性差别甚大。赤各种赤霉素之间的差别仅在于官能团的多少以及排列位置的差异，通常以Al5 A2， A3….,AN来表示。赤霉素A3(GA3)是目前应用最广的植物生长激素之一。随着研究的深入，对该族的其它同系物，特别是赤霉素A4与A7越来越受到重 视，这是由于赤霉素A4与A7对植物具有特殊作用所致，具有提高某些植物的座果率，打破休眠，促进苹果单性结实等功能。下面是赤霉素A4与A7的分子结构: <formula>formula see original document page 4</formula> GA4, <formula>formula see original document page 4</formula> GA7
赤霉素A4与A7的生理作用除了相同点外，尚有明显的差异，例 如，使用赤霉素A7可强烈抑制花芽的形成，而赤霉素A4不仅不会抑
制反而起促进作用。在防止苹果褐变和开裂上，GA4的活性高于GA7。 由于在促进茎伸长方面GA3>GA7> GA4，因此为防果锈等使用赤霉素 时，GA4最优。它没有诸如花芽分化受抑、种子数减少和细长枝增多
等副作用。因此，研究赤霉素A4与A7的分离具有重要的实际意义。

发明内容
本发明要解决的技术问题是针对上述现有技术的不足，提出一种 分子识别的方法从赤霉素A4与A7的混合物GA4+7中分离赤霉素A4， 其工艺路线合理，操作简便，分离得到产物收率高，纯度好。
本发明所采用的技术方案如下
一种从赤霉素A4与A7的混合物中分离赤霉素A4的方法，所述 的分离方法是将原料赤霉素A4与A7的混合物GA4+7和吡啶类化合物 按照l: 1 2的物质的量比混合，加入有机溶剂，加热使原料完全溶 解，在-10 3(TC放置足够长时间直至有无色、透明的晶体析出，所得 晶体为赤霉素A4(GA4)与吡啶类化合物的复合物，而赤霉素A7(GA7) 则留在原溶液中。
本发明所述赤霉素八4与A7的混合物可以使用市售商品，也可以 通过其他方式得到，其中对于混合物中赤霉素A4的质量百分比没有 特别的要求，但比较推荐赤霉素八4的质量百分比在20 80。％。本发 明可以通过NMR， IR， MS等手段确认所得到的复合物。
进一步，所述的吡啶类化合物为下列一种或两种以上任意比例的
混合2-羟基吡啶、3-羟基吡啶、4-羟基吡啶、2-氨基吡啶、3-氨基 吡啶、4-氨基吡啶。优选2-羟基吡啶。
所述的有机溶剂为下列一种或两种以上任意比例的混合甲醇、 乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲基亚砜。优选下列之一乙醇、 丙酮，更优选丙酮。
所使用的有机溶剂质量和赤霉素A4与A7的混合物质量的比值为1-31.
所述原料溶解后推荐在-10 3(TC放置5~10天，优选在室温下放 置6 7天。
具体推荐所述分离方法按照如下步骤进行将赤霉素A4与A7 的混合物GA4+7和2-羟基吡啶按物质的量比1: 1 2混合；加入质量 为赤霉素A4与A7的混合物质量1~3倍的有机溶剂，加热使原料完全 溶解，在室温下放置6 7天，有无色、透明的晶体析出，所得晶体为 赤霉素A4与2-羟基吡啶的复合物，而赤霉素A7则留在原溶液中，从 而实现赤霉素A4与A7的分离，所述有机溶剂为乙醇或丙酮。
本发明所采用的分离GA4+7的方法与以前的分离方法相比较有 以下优点
a) 从GA4+7混合物中分离得到的赤霉素A4足够纯，分离后可直接 使用，而不需要再重结晶来提高纯度；
b) 用GA4+7与吡啶类化合物进行分子识别的方法分离GA4+7混合 物的产率比其他分离方法所得产率要高。
C)本发明工艺路线合理，操作简便。
具体实施方式
下面以具体实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明的 保护范围不限于此。 实施例1:
在500ml烧杯中加入60gGA4+7原料，原料中GA4与GA7的含 量分别为40%和60%，然后加入17g2-羟基吡啶，在烧杯中加入120 g乙醇，加热后使之溶解呈透明液体，室温下放置七天，有无色、透 明的晶体析出，通过NMR, IR，MS等手段，得出该晶体结构为GA4 与2-羟基吡啶的复合物，而GA7则留在原溶液中，从而实现了 GA4与 G八7的分离，分离的纯度88.2%，产物收率90.7%。
在500ml烧杯中加入卯gGA4+7原料，原料中GA4与GA7的含 量分别为40%和60%，然后加入26g3-羟基吡啶，在烧杯中加入180g 丙酮，加热后使之溶解呈透明液体，室温下放置七天，有无色、透明 的晶体析出，通过NMR， IR, MS等手段，得出该晶体结构为GA4 与3-羟基吡啶的复合物，而GA7则留在原溶液中，从而实现了 GA4与 GA7的分离，分离的纯度84.7%，产物收率86.5%。
实施例3:
在500ml烧杯中加入120g GA4+7原料，原料中GA4与GA7的 含量分别为40%和60%，然后加入35g 4-羟基吡啶，在烧杯中加入 120 g乙酸乙酯，加热后使之溶解呈透明液体，室温下放置七天，有 无色、透明的晶体析出，通过NMR, IR， MS等手段，得出该晶体结 构为GA4与4-羟基吡啶的复合物，而GA7则留在原溶液中，从而实 现了GA4与GA7的分离，分离的纯度83.5%,产物收率87.3%。
实施例4:
在500ml烧杯中加入30gGA4+7原料，原料中GA4与GA7的含 量分别为40%和60%,然后加入9g 2-氨基吡啶，在烧杯中加入180 g 甲醇，加热后使之溶解呈透明液体，室温下放置七天，有无色、透明 的晶体析出，通过NMR, IR， MS等手段，得出该晶体结构为GA4与 2-硝基吡啶的复合物，而GA7则留在原溶液中，从而实现了GA4与 GA7的分离，分离的纯度86.5%，产物收率89.3%。
实施例5:
在500ml烧杯中加入80g GA4+7原料，原料中GA4与GA7的 含量分别为40%和60%，然后加入23g 3-氨基吡啶，在烧杯中加入 200 g乙醚，加热后使之溶解呈透明液体，室温下放置七天，有无色、 透明的晶体析出，通过NMR， IR, MS等手段，得出该晶体结构为GA4， 与3-硝基吡啶的复合物，而GA7则留在原溶液中，从而实现了 GA4与 GA7的分离，分离的纯度85.3%，产物收率89.6%。
在500ml烧杯中加入100gGA"7原料，原料中GA4与GA7的 含量分别为40%和60%，然后加入28g 4-氨基吡啶，在烧杯中加入 200 g二甲基亚砜，加热后使之溶解呈透明液体，室温下放置七天， 有无色、透明的晶体析出，通过NMR, IR， MS等手段，得出该晶体 结构为GA4，与3-硝基吡啶的复合物，而GA7则留在原溶液中，从 而实现了 GA4与GA7的分离，分离的纯度87.2%,产物收率88.6%。
实施例7:
在六个编号分别为l、 2、 3、 4、 5、 6的100ml烧杯中各加入30 gGA4+7原料，原料中GA4与GA7的含量分别为40%和60%，然后 各加入5 g 2-羟基吡啶，分别在1号到6号烧杯中各加入30 g甲醇、 乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲基亚砜，加热使原料完全溶解， 室温下放置，5天后4号烧杯中析出晶体，6天后2号烧杯中析出晶 体，7到IO天后其余四个烧杯析出晶体，通过NMR,IR,MS等手段， 得出一系列的晶体结构为GA4、四甲基乙二胺与2-羟基吡啶的复合 物，其中，4号烧杯中产物收率90.5%， 2号烧杯中产物收率88.4%， 1、 3、 5、 6号烧杯中产物收率分别为82.4%、 83.8%、 81.3%、 82.6%。
权利要求
1、一种从赤霉素A4与A7的混合物中分离赤霉素A4的方法，其特征在于所述的分离方法为将原料赤霉素A4与A7的混合物和吡啶类化合物按照1∶1～2的物质的量比混合，加入有机溶剂，加热使原料完全溶解，在-10～30℃放置足够长时间后直至有无色、透明的晶体析出，所得晶体即为赤霉素A4和吡啶类化合物的复合物；所述的有机溶剂为下列一种或两种以上任意比例的混合甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲基亚砜；所述的吡啶类化合物为下列一种或两种以上任意比例的混合2-羟基吡啶、3-羟基吡啶、4-羟基吡啶、2-氨基吡啶、3-氨基吡啶、4-氨基吡啶。
2、 如权利要求1所述的分离赤霉素A4的方法，其特征在于所述的有机溶剂为下列之一乙醇、丙酮。
3、 如权利要求1所述的分离赤霉素A4的方法，其特征在于所述的吡 啶类化合物为2-羟基吡啶。
4、 如权利要求1所述的分离赤霉素A4的方法，其特征在于所使用的有机溶剂的质量和赤霉素A4与A7的混合物质量的比值为1~3: 1。
5、 如权利要求1所述的分离赤霉素A4的方法，其特征在于所述原料 溶解后在-10 3(TC放置5~10天。
6、 如权利要求5所述的分离赤霉素A4的方法，其特征在于所述原料 溶解后在室温放置6 7天。
7、 如权利要求1所述的分离赤霉素A4的方法，其特征在于所述分离 方法按照如下步骤进行将赤霉素A4与A7的混合物和2-羟基吡啶按物质的量比l: 1~2混合；加入质量为赤霉素A4与A7的混合物质量 1 3倍的有机溶剂，加热使原料完全溶解，在室温下放置6 7天，有无色、透明的晶体析出，所得晶体即为赤霉素A4和2-羟基吡啶的复合物，所述的有机溶剂为下列之一乙醇、丙酮。
全文摘要
本发明公开了一种从赤霉素A₄与A₇的混合物中分离赤霉素A₄的方法，所述的分离方法为将原料赤霉素A₄与A₇的混合物和吡啶类化合物按照1∶1～2的物质的量比混合，加入有机溶剂，加热使原料完全溶解，在-10～30℃放置足够长时间后直至有无色、透明的晶体析出，所得晶体即为赤霉素A₄和吡啶类化合物的复合物。本发明的分离方法工艺路线合理，操作简便，分离得到产物收率高，纯度好。
文档编号A01P21/00GK101337954SQ20081006349
公开日2009年1月7日 申请日期2008年8月14日 优先权日2008年8月14日
发明者章莉玲, 磊 许, 金志敏, 陈佳丽, 马林林 申请人:浙江工业大学