一种干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法
【专利摘要】本发明提供了一种干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，本发明首先确定了铁浓度为0.1mg/L浓度水平适合作为铁胁迫筛选的临界浓度，在此基础上，又确定了生长点状态、叶片黄化指标和根系发育指标作为评估指标，建立了干制辣椒铁高效基因型育种资源的筛选方法，最终所筛选的育种材料是具有较高的耐缺铁性表现型，目的是筛选出铁高效基因型的品种资源，本发明所述的筛选方法是建立在科学实验的基础上，并且经过具体筛选例证进行筛选确定，所选育的育种材料可以直接用于辣椒铁高效基因型新品种选育中，具有良好的市场应用前景。
【专利说明】-种干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物新品种选育【技术领域】，具体涉及一种干制辣椒铁高效基因型育种 资源的快速筛选方法。
【背景技术】
[0002] 植物缺铁失绿症是一个世界性植物营养失调问题。在干旱、半干旱地区的石灰性 ±壤上广泛存在着植物缺铁问题，在盐碱±上植物常发生缺铁现象。据统计，全世界约有 40%的±壤缺铁。我国南起四川盆地，北至内蒙古高原，东至淮北平原，西到黄±高原及甘 肃、青海、新疆都有大面积缺铁±壤。
[0003] 铁是植物生命过程中必需的重要微量元素，它参与和影响包括氮素代谢、有机酸 代谢、碳水化合物代谢及原生质性状等许多生理过程。轻度缺铁会导致叶绿素合成减少，光 合速率降低，严重缺铁时，叶绿素合成停止，新叶变黄，生物量大幅度下。
[0004] 辣椒正常生长最低需铁量为2. 5mg/L。然而，根据2006-2012年在新疆辣椒生产主 产区±壤抽样调查表明，该区域±壤有效铁含量太低。焉香、和静、博湖等县±壤抽样测定 有效铁含量是在0. 15-0. 37mg/L之间。因此提高干制辣椒产量潜力的一个重要途径是，选 育耐缺铁高效基因型的辣椒新品种，筛选出铁高效基因型的育种材料是辣椒育种工作的首 要任务。
【发明内容】
[0005] 本发明的发明目的是提供了一种干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方 法，具体包括：适宜的铁浓度筛选水平；建立筛选铁高效基因型的辣椒形态学指标；筛选出 铁高效基因型的品种资源。
[0006] 为实现上述发明目的，本发明采用W下技术方案予W实现：
[0007] -种干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，它包括W下步骤：
[0008] (1)先基质育苗，待辣椒幼苗展2叶时移入完全营养液育苗；
[0009] (2)当达到辣椒苗龄4-5叶时移入铁胁迫营养液继续培养，使用所述铁胁迫营养 液水培培养20-30天，所述铁胁迫营养液中铁浓度为0. Img/L ;
[0010] (3)然后进行形态评估，铁高效基因型的形态指标体系判别标准包括；辣椒苗生 长点状态、叶片黄化指标和根系发育指标；
[0011] a、辣椒苗生长点状态，分3级：
[0012] 生长点正常；顶端生长点新叶依次展出，叶色正常，叶形正常；
[0013] 生长点崎形；顶端生长点新叶卷缩，或卷曲，或新叶片在幼小时呈叶脉皱，叶色不 正常；
[0014] 生长点坏死；顶端生长点新叶无法抽出，枯顶，新叶色变深或褐黑色；
[0015] b、叶片黄化指标，分5级：
[0016] 看新叶叶片状态；正常；卷曲；皱缩；花叶；
[0017] 每份材料随机抽取10株，每株自生长点向下取1至5片叶判别叶片黄化度，计算 叶片黄化指数；
[0018] 0级；正常绿叶；
[0019] 1级：微黄绿色，叶片的叶基部分表现发黄，叶尖大部分仍绿色；
[0020] 2级；黄绿色，整片叶片均表现出比正常叶呈黄绿色；
[002。 3级；黄色，整片叶片表现出比正常叶呈黄色；或叶色權色轻但是叶片出现小枯 斑；
[0022] 4级；白黄色，整片叶片表现出比正常叶呈白黄色；或叶片上沿叶脉伴有较大的透 明坏死斑；
[0023] C、根系发育指标，分5级：
[0024] 每份材料随机取10株评估，统计根系伤害指数；
[002引1级；发新根多，根粗长，根尖未枯，色白；
[002引 2级；发新根较多，根粗长，根尖稍枯，色较白；
[0027] 3级；发新根较少，根较粗，稍短，根尖稍枯，色褐；
[002引 4级：发新根少，根较粗短，根尖枯，色褐；
[002引 5级；不发根，根尖严重枯，色褐；
[0030] (4)辣椒育种资源耐缺铁统计分析
[0031] 统计每份辣椒资源的叶片黄化指数和根系伤害指数，计算公式如下：
[0032] 叶片黄化指数％={ E (黄化级叶片数X黄化级级数）}/(总叶片数X黄化最 重级级数）X 100 ;
[0033] 根系伤害指数％ = { E (株数X级数）} / (总株数X最高级数）X 100 ;
[0034] (5)筛选和评估铁高效基因型育种资源
[0035] 计算出参试材料的叶片黄化指数和根系伤害指数的平均值+标准差，依据表型 判断育种材料耐铁基因型判别式：《平均值-3标准差，而且生长点接近正常状态是铁高效 基因型；> 平均值-2标准差且《平均值-标准差，且生长点崎形明显的是铁次高效基因型； >平均值，且生长点坏死的是铁低效基因型，予W淘汰。
[0036] 与现有技术相比，本发明的优点和技术效果是；本发明经过一系列实验首先确定 了铁浓度为0. Img/L浓度水平适合作为铁胁迫筛选的临界浓度，在此基础上，又确定了生 长点状态、叶片黄化指数和根系发育指数H个指标作为评估指标，建立了干制辣椒铁高效 基因型育种资源的筛选方法，最终所筛选的育种材料是具有较高的耐缺铁性表现型，目的 是筛选出铁高效基因型的品种资源，本发明所述的筛选方法是建立在科学实验的基础上， 并且经过具体筛选例证进行筛选确定，所选育的育种材料可W直接用于辣椒铁高效基因型 新品种选育中，具有良好的市场应用前景。
【专利附图】
【附图说明】
[0037] 图1是本发明所确定的铁高效基因型的根系分级标准图。
[0038] 图2是本发明所确定的铁高效基因型的叶片分级标准图。
[0039] 图3是本发明所确定的铁高效基因型的生长点状态分级标准图。
【具体实施方式】
[0040] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例 中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
[0041] 实施例1、建立干制辣椒铁高效基因型育种资源的筛选方法
[0042] 1、配置营养液
[0043] (1)水培营养液配方（母液）如表1所示：
[0044] 表1水培营养液组成配方
[0045]
【权利要求】
1. 一种干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，其特征在于它包括以下步 骤： (1) 先基质育苗，待辣椒幼苗展2叶时移入完全营养液育苗； (2) 当达到辣椒苗龄4-5叶时移入铁胁迫营养液继续培养，使用所述铁胁迫营养液水 培培养20-30天，所述铁胁迫营养液中铁浓度为0. lmg/L ; (3) 然后进行形态评估，铁高效基因型的形态指标体系判别标准包括：辣椒苗生长点状 态、叶片黄化指标和根系发育指标； a、 辣椒苗生长点状态，分3级： 生长点正常：顶端生长点新叶依次展出，叶色正常，叶形正常； 生长点畸形：顶端生长点新叶卷缩，或卷曲，或新叶片在幼小时呈叶脉皱，叶色不正 常； 生长点坏死：顶端生长点新叶无法抽出，枯顶，新叶色变深或褐黑色； b、 叶片黄化指标，分5级： 看新叶叶片状态：正常；卷曲；皱缩；花叶； 每份材料随机抽取10株，每株自生长点向下取1至5片叶判别叶片黄化度，计算叶片 黄化指数； 0级：正常绿叶； 1级：微黄绿色，叶片的叶基部分表现发黄，叶尖大部分仍绿色； 2级：黄绿色，整片叶片均表现出比正常叶呈黄绿色； 3级：黄色，整片叶片表现出比正常叶呈黄色；或叶色褪色轻但是叶片出现小枯斑； 4级：白黄色，整片叶片表现出比正常叶呈白黄色；或叶片上沿叶脉伴有较大的透明坏 死斑； c、 根系发育指标，分5级： 每份材料随机取10株评估，统计根系伤害指数； 1级：发新根多，根粗长，根尖未枯，色白； 2级：发新根较多，根粗长，根尖稍枯，色较白； 3级：发新根较少，根较粗，稍短，根尖稍枯，色褐； 4级：发新根少，根较粗短，根尖枯，色褐； 5级：不发根，根尖严重枯，色褐； (4) 辣椒育种资源耐缺铁统计分析 统计每份辣椒资源的叶片黄化指数和根系伤害指数，计算公式如下： 叶片黄化指数％={ E(黄化级叶片数X黄化级级数）}/ (总叶片数X黄化最重级级 数）X100 ; 根系伤害指数％= { E (株数X级数）} / (总株数X最高级数）X 100 ; (5) 筛选和评估铁高效基因型育种资源 计算出参试材料的叶片黄化指数和根系伤害指数的平均值土标准差，依据表型判断 育种材料耐铁基因型判别式平均值-3标准差，而且生长点接近正常状态是铁高效基因 型； >平均值-2标准差且<平均值-标准差，且生长点畸形明显的是铁次高效基因型；> 平均值，且生长点坏死的是铁低效基因型，予以淘汰。
2. 根据权利要求1所述的干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，其特征在 于：所述步骤（1)中基质育苗的基质配方为草炭：珍珠岩：蛭石=6:3:1，同时每立方米加入 0. 4kg的元素质量比为17:17:17的NPK复合肥。
3. 根据权利要求2所述的干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，其特征在 于：所述基质的容重为〇. 3-0. 8g/m3,总孔隙度为60-90%，通气孔隙度大于15%，且基质能够 提供20-35%容易被利用的水分，pH在6-6. 8, EC值2. 5ms/cm。
4. 根据权利要求1所述的干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，其特征在 于：所述步骤（1)中完全营养液电导度EC的控制在1. 7-2. 5mS/cm。
5. 根据权利要求1或4所述的干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，其特 征在于：所述步骤（1)中完全营养液的pH控制在5. 8-6. 5。
6. 根据权利要求1所述的干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，其特征 在于：所述步骤（2)辣椒苗培养为：初始时营养液pH调至6. 0, EC值1. 7ms ;处理中营养液 pH6. 5-7. 5, EC 值在 2-2. 5ms 之间。
7. 根据权利要求1或6所述的干制辣椒铁高效基因型育种资源的快速筛选方法，其特 征在于：所述步骤（2)辣椒苗培养为：每天14h光照，光强2000Lx，白天温度为22-28°C，夜 间17-21 °C，相对湿度60-90%。
【文档编号】A01H1/02GK104396728SQ201410620476
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2014年11月6日 优先权日:2014年11月6日
【发明者】刘建萍, 杨延杰, 林多, 易晓华, 周亚平 申请人:青岛农业大学