技术领域本发明属于农业生物技术领域，具体为一种利用试管茎段微扦插快速繁殖降香黄檀种苗的方法。
背景技术：
降香黄檀（Dalbergiaodorifera），濒危种，海南特产，豆科蝶形花亚科的常绿乔木。其木材被称为“黄花梨”，俗称“降压木”，《本草纲目》中叫降香，其木屑泡水可降血压、血脂，其木材木质坚硬，纹理漂亮，是制作古典硬木家具的上乘材料。原产于中国海南岛，主要分布于中国海南、广东、福建等地，国家二级重点保护野生植物，濒危树种。降香黄檀的心材最具价值，心材显红褐色，材质致密硬重，纹理细密美观，自然形成天然图案，耐腐耐磨，不裂下翘，且散发芳香，经久不退，是制作高级红木家具、工艺品、乐器和雕刻、镶嵌、美工装饰的上等材料。其木材经蒸馏后所得的降香油，可作香料上的定香剂。根部心材与树干心材能代降香，供药用，为良好的镇痛剂。降香黄檀传统的繁殖方法采用种子繁殖，该方法存在的问题：(1)种子资源少，大量采集困难；(2)种子不耐储存，寿命短，无法实现定期播种育苗；近年来，扦插繁殖和组培繁殖成为降香黄檀种苗繁殖的研究重点。扦插繁殖现存的问题是：(1)扦插繁殖成活率低，甚至全部死亡；(2)扦插条资源紧缺，批量繁殖困难。组培繁殖目前采用诱导愈伤组织、分化增殖愈伤组织和诱导不定芽生根的方式获得无菌苗，这种方式存在的问题是：(1)诱导愈伤组织时间较长；(2)愈伤组织分化为不定芽的频率较低，分化出的不定芽变异率高；(3)愈伤组织分化出的不定芽伸长速度慢，达到生根标准的时间长。这些问题严重阻碍了降香黄檀种苗的规模化生产，因而无法满足市场需求。为此，必须建立能大量、快速扩繁降香黄檀种苗的生产技术体系。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种微扦插快速繁殖降香黄檀种苗的方法，利用试管中茎段侧芽萌发和伸长速度快的特点，实现了降香黄檀种苗大规模快速扩繁的目的。本发明利用少量种子获得无菌苗，以无菌苗茎段为外植体，通过试管微扦插促进侧芽不断萌发进行快速增殖，实现降香黄檀种苗大规模扩繁。本发明所采用的技术方案：一种微扦插快速繁殖降香黄檀种苗的方法，包括三个过程：无菌苗的获得、茎段微扦插、茎段生根。1、无菌苗的获得选取降香黄檀的蒴果经消毒后将种子剥出，将种子接种到诱芽培养基进行培养至长成幼苗，所述诱芽培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤、α-萘乙酸。2、茎段微扦插将步骤1所获得的幼苗切成茎段，将茎段的基部向下插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽，再将侧芽切成茎段，然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养。所述微扦插培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤、吲哚乙酸。3、茎段生根将步骤2所获得的侧芽切成茎段，并将其接种到生根培养基上，先暗培养再进行光照培养，至茎段生根即可获得降香黄檀种苗。所述生根培养基为改良的1/2MS培养基为基本培养基并附α-萘乙酸。本发明工艺简单易行，操作简单，增殖速度快，解决了利用降香黄檀种子繁殖种苗中种子数量少、发芽率低、繁殖速度慢的问题，实现了降香黄檀种苗的长期大规模快速增殖，可大量、快速、持续获得高质量的降香黄檀试管苗，实用性强，为降香黄檀大规模扩繁增殖提供了高效的方法，为降香黄檀种苗的规模化、工厂化生产奠定了基础，也为保护野生降香黄檀种质资源开辟了一条切实可行的途径。具体实施方式下面对本发明作进一步说明。本发明所提供的微扦插快速繁殖降香黄檀种苗的方法，包括无菌苗的获得、茎段微扦插、茎段生根。1)无菌苗的获得选取降香黄檀的蒴果经消毒后将种子剥出，将种子接种到诱芽培养基进行培养至长成幼苗，培养温度度为25～27℃，光照强度为15～20μmol·m-2·s-1，光照时间为12h·d-1，培养20～30天；所述诱芽培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤0.5mg·L-1、α-萘乙酸0.1mg·L-1。2)茎段微扦插将步骤1所获得的幼苗切成带1～2节的茎段，将茎段的基部向下插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽，再将侧芽切成带1～2节的茎段，然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养，培养温度度为25～29℃，光照强度为30～40μmol·m-2·s-1，光照时间为12h·d-1；所述微扦插培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤2.0mg·L-1、吲哚乙酸0.1mg·L-1。3)茎段生根将步骤2所获得的侧芽切成带1～2节的茎段，并将其接种到生根培养基上，先暗培养3天再进行光照培养20～30天，至茎段生根即可获得降香黄檀种苗。所述生根培养基是改良的1/2MS培养基（1/2NH4NO3+1/2CaCl2）为基本培养基并附α-萘乙酸0.5mg·L-1。