本发明属于生物技术领域，具体涉及一种华重楼诱导培养基及其应用。
背景技术：
重楼为滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)和华重楼(Paris polyphylla var.chinensis)的地下茎，前者主产于云南，后者主产于四川。重楼具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊等功效外，还有止血、抗肿瘤、抗生育、免疫调节及心血管等多方面的生理活性，用于痛肿、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等症的治疗。
目前制约重楼植物规模化栽种的主要问题是重楼种苗的短缺。重楼种子由于存在种胚发育不完全，胚乳坚硬，胚轴后熟等明显“双重休眠”特性，因此播种后通常需要经历两冬一夏才能萌发成苗，是典型的“二年生种子”，而且在自然状态下，即使经过了长时间休眠，重楼种子的出苗率也不高，因此目前仅靠重楼种子进行有性繁殖已无法满足华重楼植物大面积栽种的需要。
中国专利CN103548682B公开了一种华重楼植株的快速繁殖方法，包括愈伤组织的诱导、不定芽的分化、生根培养及炼苗和移栽步骤，所采用的不定芽的诱导和快速增殖培养基为MS+6-BA 1.0～4.0mg/L+IAA 0.1～1.0mg/L+KT 0.1～1.0mg/L+头孢曲松钠200～500mg/L，生根培养基为1/2MS+IBA 0.1～1.0mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L+活性碳0.1～1.0％。该发明培育的组培苗生长速度快、且保留了华重楼的优良特性，但其愈伤组织诱导率有待提高。
技术实现要素：
为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种华重楼诱导培养基及其应用。本发明提供的华重楼诱导培养基具有良好的愈伤组织诱导率，解决了华重楼植物规模化栽种的问题。
本发明提供了一种华重楼诱导培养基，所述诱导培养基组成为：
MS基础培养基、6-苄氨基嘌呤1-2mg/L、萘乙酸0.1-0.5mg/L、油菜素内酯0.03-0.07mg/L、琼脂4-6g/L和蔗糖15-65g/L。制备方法：称取相应量的6-苄氨基嘌呤，萘乙酸，油菜素内酯，琼脂和蔗糖依次加入到MS培养基中，搅拌均匀，调节pH值，120℃灭菌30min，即得。
本发明提供的华重楼诱导培养基中油菜素内酯与其他激素协同促进细胞的分裂、植物的生理代谢，从而提高培养基愈伤组织诱导率。
进一步地，所述的华重楼诱导培养基的组成为：
MS基础培养基、6-苄氨基嘌呤1.5mg/L、萘乙酸0.3mg/L、油菜素内酯0.05mg/L、琼脂5g/L和蔗糖40g/L。
进一步地，所述诱导培养基的pH值为5.8。
进一步地，所述的华重楼诱导培养基在华重楼快速繁殖中的应用。
与现有技术相比，本发明提供的华重楼诱导培养基具有良好的愈伤组织诱导率，解决了华重楼植物规模化栽种的问题。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用于例证的目的，绝不限制本发明的保护范围。
实施例1一种华重楼诱导培养基
所述华重楼诱导培养基的组成为：
MS基础培养基、6-苄氨基嘌呤1mg/L、萘乙酸0.1mg/L、油菜素内酯0.03mg/L、琼脂4g/L和蔗糖15g/L。
制备方法：称取相应量的6-苄氨基嘌呤，萘乙酸，油菜素内酯，琼脂和蔗糖依次加入到MS培养基中，搅拌均匀，调节pH为5.8，120℃灭菌30min，即得。
实施例2一种华重楼诱导培养基
所述华重楼诱导培养基的组成为：
MS基础培养基、6-苄氨基嘌呤1.5mg/L、萘乙酸0.3mg/L、油菜素内酯0.05mg/L、琼脂5g/L和蔗糖40g/L。
制备方法与实施例1类似。
实施例3一种华重楼诱导培养基
所述华重楼诱导培养基的组成为：
MS基础培养基、6-苄氨基嘌呤2mg/L、萘乙酸0.5mg/L、油菜素内酯0.07mg/L、琼脂6g/L和蔗糖65g/L。
制备方法与实施例1类似。
对比例1一种华重楼诱导培养基
所述华重楼诱导培养基的组成为：
MS基础培养基、6-苄氨基嘌呤1.5mg/L、萘乙酸0.3mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.05mg/L、琼脂5g/L和蔗糖40g/L。
制备方法与实施例1类似。
与实施例2的区别在于，将油菜素内酯替换为2，4-二氯苯氧乙酸。
对比例2一种华重楼诱导培养基
所述华重楼诱导培养基的组成为：
MS基础培养基、6-苄氨基嘌呤1.55mg/L、萘乙酸0.3mg/L、琼脂5g/L和蔗糖40g/L。
制备方法与实施例1类似。
与实施例2的区别在于，未添加油菜素内酯，增加了6-苄氨基嘌呤的用量。
试验例一、愈伤组织诱导率测试
1.试验材料：实施例1-3及对比例1-2制备的华重楼诱导培养基。
2.试验内容：
选取多年生、健壮，无病虫、无损伤的华重楼植物根茎，洗净并晾晒，切除根茎上的不定根，再切取带芽体的6个茎节，用无菌水冲洗6次后切除其上的芽体，最后将该根茎茎节切成1.5cm3大小后接入所述试验材料的愈伤组织诱导培养基中，先置于10℃的冰箱中低温处理18天，再转放在培养温度为25℃、每天光照12h和光照强度为1200lx的条件下进行培养，培养55天后统计其愈伤组织诱导率。
3.试验结果：愈伤组织诱导率测试结果见表1。
表1愈伤组织诱导率测试结果
由表1可知，本发明制备的华重楼诱导培养基中愈伤组织诱导率较高。而对比例1-2制备的华重楼诱导培养基愈伤组织诱导率比实施例1-3制备的华重楼诱导培养基的差，说明本发明配伍合理科学，各组相互作用，协同起提高其愈伤组织诱导率的作用，克服了其规模化栽种的问题。