专利名称：：与免疫球蛋白g结合的核酸及其利用方法
技术领域：
：本发明涉及对免疫球蛋白G(IgG)具有结合活性的核酸。通过该核酸使通用抗体的纯化、标记、固定化、修饰等成为可能。
背景技术：
：IgG为血清的主要蛋白质之一，在免疫系统中担任识别异物、引导排除的重要角色。活用该特性将其应用至各种疾病的治疗药、诊断药或试剂中的研究正在广泛进行。其中之一是在对癌症的抗体疗法中，正在进行以下方面的开发利用依赖抗体的细胞毒性(ADCC)或依赖补体的细胞毒性(CDC)的疗法，用抗体特异性阻断癌细胞中表达的受体等进行饥饿策略(starvationtactics)的分子靶向药物，或者利用癌细胞特异性抗体中结合有抗癌剂的抗体的导弹(missle)疗法等。其中，抗HER2受体人化单克隆抗体作为乳腺癌等恶性肿瘤的治疗剂被开发上市(商品名赫赛汀(Herceptin))。另外，利用其与抗原特异性结合的性质，IgG被用作以免疫学测定为代表的细胞或蛋白质的功能解析、基因的表达筛选等各种生化学实验的必需工具。IgG为2条H链与2条L链以二硫键(S-S键)结合的Y字形结构。若将IgG用作为蛋白质分解酶的木瓜蛋白酶分解，则可分为由恒定区组成的Fc片段及含有抗原结合部位的Fab片段。另外，IgG有亚群存在，对于人IgG有IgGl、IgG2、IgG3、IgG4四种。抗体为使用抗体纯化用柱从血清或杂交瘤(hybridoma)细胞培养上清液纯化而得。通常在第一阶段的纯化中使用ProteinA作为配体。ProteinA为金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)产生的分子量42kDa的蛋白质，牢固结合于IgG的Fc区域。ProteinA价格高，且根据动物种或亚群的不同有不能获得高纯度抗体的情况，或在使用了ProteinA的纯化条件下有抗体变性的情况，目前正在寻求性能超过ProteinA的新型分离剂。由萤光物质或酶标记的抗体被用于免疫组织化学实验、组织染色、ELISA、蛋白质印迹法、流式细胞术等各种实验。例如在组织染色中，可以通过使用结合有FITC等萤光物质的抗体来研究目标蛋白质的组织定位。另外，在ELISA或蛋白质印迹法等的测定中，首先使一抗与欲检测的物质发生反应，接着使与该一抗结合的经标记的二抗发生反应，藉此进行更高感度的测定。例如，在GE医疗(healthcare)公司的ECL系统中，使用结合有辣根过氧化物酶的抗体作为二抗，通过其催化作用使鲁米诺氧化，发光，藉此检测目标物质。但是，通过化学修饰使标记物质结合于抗体费时费力，根据情况的不同抗体有时会变性，需要开发新的抗体标记技术。另外，也期待有更便宜且高感度的经标记化了的二抗。作为针对各种疾病的诊断用芯片，正在进行抗体芯片的开发。其课题之一是在抗体对基板的固定方法中，使抗体的抗原结合部位在表面以高活性状态高密度地排列的方法的开发。在利用非特异性吸附的固定法或利用氨基的固定法中，抗体无秩序地排列不能获得充分的灵敏度。作为对于癌或风湿病等疾病的分子靶向治疗药，抗体的开发研究被急速推进，至今已有约20种抗体药物被实用化，另外全世界正在实施约300种候选抗体药物的临床试验。开发之初，使用小鼠单克隆抗体作为抗体药物，但是，小鼠抗体在人免疫系统被识别为异物，诱导人抗小鼠抗体的产生，因此不能充分提高治疗效果。因而使用基因重组技术，开发了将小鼠抗体的恒定区域置换成人抗体的恒定区域的嵌合体抗体或将除小鼠抗体的互补性决定区域以外的部分全部置换为人抗体的人化抗体。另外，亦正在开发使用了产生人抗体的小鼠(KM小鼠)的人单克隆抗体的制作方法。抗体疗法中使用的单克隆抗体药物之一为通过使抗癌剂或毒素结合于特异性识别癌细胞的抗体，使其内化(intemalization)到靶细胞，将靶细胞杀死。抗癌剂或毒素被内化后需从抗体脱离。因此，想使抗体与抗癌剂或毒素结合的连接基中含有蛋白酶识别部位等，在被内化后实施使抗癌剂或毒素从抗体脱离之类的操作。例如作为急性骨髓性白血病的治疗药而开发的gemtuzumabozogamicin(吉妥单抗(Mylotarg))为将加利车霉素(calicheamicin)衍生物结合于人化抗CD33单克隆抗体的药物，因此若将吉妥单抗结合于CD33，在细胞内内化，则加利车霉素衍生物发生游离，将细胞杀死。因此，将抗体与抗癌剂或毒素结合的连接基的设计很重要，为了引出更高的药效，正在进行新型连接基的开发。近年来，RNA适配体(aptamer)在治疗药、诊断药、试剂的应用受到注目，有几个RNA适配体己进入临床阶段或实用化阶段。于2004年12月，美国承认了世界首创的为RNA适配体药物的玛库根(Macugen)作为老年性黄斑变性症的治疗药。RNA适配体是指与蛋白质等目标物质特异性结合的RNA，可使用SELEX法(指数级富集的配体系统进化(SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEnrichment))审!j备(Ellington等，(1990)Nature,346,818-822;Tuerk等，(1990)Science,249,505-510)。SELEX法是指从约10"的具有不同核苷酸序列的RNA池(pool)中筛选与目标物质特异性结合的RNA的方法。使用的RNA为约40个残基左右的随机序列夹在引物序列之间的结构。使该RNA池与目标物质合并，使用过滤器等只回收与目标物质结合的RNA。将回收的RNA用RT-PCR扩增，将其用作以后循环的模板。通过将该作业反复进行约10次，可以获得与目标物质特异性结合的RNA适配体。当获得的RNA适配体促进或抑制目标物质的功能时，可将该RNA适配体应用于药品等。实际上，使用SELEX法制备与作为人翻译起始因子的elF4A(日本专利特开2002-300885号公报，Oguro等，(2003)RNA9,394-407)或elF4E(日本专利特开2004-344008号公报，Mochizuki等，(2005)RNA11,77-89)、与骨代谢相关的受体RANK(ReceptorActivatorofNF-KB、Mori等，(2004)NucleicAcidsRes.32,6120-6128)等特异性结合的RNA适配体。也有关于通过抗DNA自身抗体的抗原识别部位结合的RNA适配体的报道(Kim等,(2003)BiochemicalandBiophysicalResearchCommunication300,516-523)。
发明内容本发明的目的在于，提供针对IgG的适配体及其利用方法等。本发明人等为了解决上述课题进行了深入研究，结果成功制备了针对IgG高度设计的优良适配体，因而完成本发明。亦即，本发明提供以下的发明等。[1〗结合于IgG的Fc部分的适配体。[2]上述[l]的适配体，其中，与作为IgG的Fc部分的人IgG的Fc部分特异性结合。[3]上述[1]或[2]的适配体，其中，构成适配体的总核苷酸数为40个以下。[4]上述[1]至[3]中任何一种适配体，其中，适配体中含有的至少一种核苷酸为在核糖的2'位含有选自氢原子、氟原子、羟基及-O-Me基的至少2种基团的核苷酸。[5]上述[3]的适配体，其中，含有GGUG(C/A)(U/T)所示的核苷酸序列。[6]上述[5]的适配体，其中，GGUG(C/A)(U/T)中第3个的U是在核糖的2'位羟基被氟原子取代的核苷酸。[7]上述[6]的适配体，其中，GGUG(C/A)(U/T)中的各核苷酸(除了第3个的U之外)分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。[8]上述[5]的适配体，其中，GGUG(C/A)(U/T)为GGUGCU或GGUGAU。[9]上述[5]的适配体，其中，还含有ANC(N为选自A、G、C、U及T的核苷酸)所示的核苷酸序列。[10]上述[9]的适配体，其中，ANC中的各核苷酸分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。[11]上述[9]的适配体，为以下(i)至(iii)中的任一者(i)于GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGA，且于ANC的3，侧含有UCC;(ii)于GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGNxlA，且于ANC的3'侧含有UNx2CC(Nx,、Nx2分别为选自A、G、C、U及T的核苷酸)；或，(iii)于GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGNx3Nx4A，且于ANC的3，侧含有UNx5Nx6CC(Nx3、Nx4、Nx5、Nx6分别为选自A、G、C、U及T的<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>[式中，N1、N2、N3、N4、N5分别相同或不同，为选自A、G、C、U及T的核苷酸、>^及1^3为互相互补的核苷酸、N"及NS为互相互补的核苷酸、(i)GGUG(C/A)(U/T)中的各核苷酸(除了第3个的U之外)、(ii)AN1。中的各核苷酸、(iii)N^NS的各核苷酸分别为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸]。[14]上述[ll]的适配体，其中，环(loop)结构中的所有核苷酸的于核糖的2'位的羟基被氢原子取代。[15]上述[13]的适配体，其中，具有(I)至(III)中任一项所示的潜在性二级结构的适配体具有以下(r)至(nr)中任一项所示的潜在性二级结构核苷酸)。[12]上述[ll]的适配体，其中，GGA、GGNxlA或GGNx3Nx4A含有的GG以及UCC、UNx2CC或UNx5Nx6CC含有的CC分别为于核糖的2'位的羟基被氢原子取代的核苷酸。[13]上述[6]的适配体，其中，具有以下(I)至(III)表示的潜在性二级结构(!)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>(r)[式中，N1、N2、N3、N4、N5的意义分别与上述[13滩同]。[16]上述[3]的适配体，其中，是含有用AGGUG(C/A)(U/T)C表示的核苷酸序列，AGGUG(C/A)(U/T)C中的第4个的U为于核糖的2'位的羟基被氟原子取代的核苷酸，AGGUG(C/A)(U/T)C中的各核苷酸(除了第4个的U之外)分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。[17]上述[16]的适配体，其中，还含有GANCU(N为选自A、G、C、U及T的核苷酸)表示的核苷酸序列，GANCU中的各核苷酸分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。[18]上述[6]的适配体，其中，具有以下(Ia)至(IIIa)表示的潜在性二级结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>[式中，N1、N2、N3、N4、N5、N6、N7分别相同或不同，为选自A、G、C、U及T的核苷酸、W及N3为互相互补的核苷酸、N"及NS为互相互补的核苷酸、#及1^7为互相互补的核苷酸、(i)GGUG(C/A)(U/T)中的各核苷酸(除了第3个的U之外)、(ii)AN'C中的各核苷酸、(iii)N2至W的各核苷酸分别为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸]。[19]上述[18]的适配体，其中，具有(Ia)至(IIIa)中任一项表示的潜在性二级结构的适配体具有以下(Ia')至(IIIa')中任一项表示的潜在性二级结构<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>[式中，N1、N2、N3、N4、N5的意义分别与上述[18]相同]。[20]上述[19]的适配体，其中，N4、W分别为于2'位的羟基被氢原子取代的核苷酸，N5、N分别为于2，位含有羟基的核苷酸。[21]上述[19]的适配体，其中，具有(Ia')至(IIIa')中任一项表示的潜在性二级结构的适配体具有以下(Ia"，)至(nia"')中任一项表示的潜在性二级结构[22]上述[3]的适配体，为以下(a)至(c)中的任一者(a)由序列编号1至23中任一项所示的核苷酸序列(尿嘧啶也可为胸腺嘧啶)组成的适配体；(b)由序列编号1至23中任一项所示的核苷酸序列(尿嘧啶也可为胸腺嘧啶)表示的核苷酸序列中的1个或数个核苷酸经取代、缺失、插入或附加后的核苷酸序列所组成的适配体；(c)选自该(a)的连结物、该(b)的连结物以及该(a)与(b)的连结物的连结物。[23]复合体，其中，含有上述[1]至[22]中任一项记载的适配体及与其结合的功能性物质。[24]上述[23]的复合体，其中，功能性物质为亲和性物质、标记用物质、酶、药物、毒素或药物传递介质。[25]固相载体，其中，固定有上述[1]至[22]中任一项记载的适配体或者上述[23]或[24]的复合体。[26]上述[25]的固相载体，其中，固相载体为基板、树脂、盘(plate)、过滤器、筒(cartridge)、柱或多孔质材。[27]医疗用设备，其中，含有上述[25]或[26]的固相载体。[28]上述[27]的设备，其中，医疗用设备为血液净化用设备。[29]诊断用或检查用试剂，其中，含有上述[1]至[22]中任一项记载的适配体、上述[23]或[24]的复合体或者上述[25]或[26]的固相载体。[30]药物，其中，含有上述[1]至[22]中任一项记载的适配体，或者上述[23]或[24]的复合体。[31]抗体纯化或浓縮方法，其中，包括使IgG抗体吸附到上述[25]或[26]的固相载体，再通过洗脱液使所吸附的IgG抗体洗脱的步骤。[32]上述[31]的方法，其中，洗脱液为中性溶液。[33]纯化抗体的制造方法，其中，包括制备IgG抗体，再将制备的IgG抗体通过上述[25]或[26]的固相载体纯化的步骤。[34]IgG检测及/或定量方法，其中，包括使用上述[1]至[22]中任一项记载的适配体、上述[23]或[24]的复合体或者上述[25]或[26]的固相载体，测定试样中有无IgG及/或IgG的量的步骤。图1表示序列编号1所示的RNA的预测二级结构。图2表示序列编号2所示的RNA的预测二级结构。图3表示序列编号3所示的RNA的预测二级结构。图4表示序列编号4所示的RNA的预测二级结构。图5表示序列编号5所示的RNA的预测二级结构。图6表示序列编号6所示的RNA的预测二级结构。图7表示序列编号7所示的RNA的预测二级结构。图8表示序列编号8所示的RNA的预测二级结构。图9表示序列编号9所示的RNA的预测二级结构。图10表示序列编号10所示的RNA的预测二级结构。图11表示序列编号11所示的RNA的预测二级结构。图12表示序列编号12所示的RNA的预测二级结构。图13表示序列编号13所示的RNA的预测二级结构。图14表示序列编号14所示的RNA的预测二级结构。图15表示序列编号15所示的RNA的预测二级结构。图16表示序列编号16所示的RNA的预测二级结构。图17表示序列编号17所示的RNA的预测二级结构。图18表示序列编号18所示的RNA的预测二级结构。图19表示序列编号19所示的RNA的预测二级结构。图20表示序列编号20所示的RNA的预测二级结构。图21表示序列编号21所示的RNA的预测二级结构。图22表示序列编号22所示的RNA的预测二级结构。图23表示序列编号23所示的RNA的预测二级结构。图24显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示序列编号1所示的RNA与人IgG-Fc的结合状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射IgG-Fc，观察与RNA的相互作用。纵轴的RU表示相对单位(RelativeUnit)，Resp.Diff.表示反应差异(ResponseDifferences)。横轴表示时间(秒)。纵轴、横轴中的这些符号在以下的图25至图31、42中也相同。图25显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示序列编号3所示的RNA与人IgG-Fc结合的状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射IgG-Fc，观察与RNA的相互作用。图26显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示随机序列的RNA池与人IgG-Fc结合的状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射IgG-Fc，观察与RNA的相互作用。图27显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示序列编号1所示的RNA与人IgGl及人FqRI的复合体形成的状态。将于3'末端附加有16残基的PdyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射IgGl将其结合于RNA，接着喷射FcyRI，观察与IgGl的相互作用。图28显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示含有随机序列的RNA池与人IgGl及人FcYR结合的状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射IgGl，再喷射Fc萍。图29显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示序列编号1所示的RNA与人IgGl及ProteinA的复合体形成的状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射IgGl将其结合于RNA，接着喷射ProteinA，观察与IgGl的相互作用。图30显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示序列编号1所示的RNA适配体与ProteinA结合的状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射ProteinA，观察与RNA的相互作用。图31显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示序列编号17-2所示的RNA适配体与人IgGl结合的状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射IgGl，观察与RNA的相互作用。图32表示将序列编号15及17所示的RNA作为抗体纯化用分离剂的配体使用而将IgGl下拉(pulldown)时的SDS-PAGE的结果。将结合有Poly(A)的RNA固定于结合有Poly(dT)的珠，进行人IgGl的下拉。泳道1:为将序列编号15所示的RNA作为配体使用的情况。泳道2:为将序列编号17所示的RNA作为配体使用的情况。泳道3:为将ProteinA作为配体使用的情况。泳道4:为将rProteinA作为配体使用的情况。图33表示将序列编号15所示的RNA作为抗体纯化用分离剂的配体使用，从人血清纯化人IgG时的SDS-PAGE结果。将结合有生物素的RNA固定于抗生蛋白链菌素(Streptavidin)的珠，从人血清将IgG下拉。使用3种中性洗脱液洗脱结合于RNA的IgG。为了确认中性的洗脱液是否可将IgG高效洗脱，向完成洗脱的珠中加入试样缓冲液，进行加热，用SDS-PAGE进行分析。泳道l:分子量标记(marker)蛋白质。泳道2:用由200mM氯化钾及10mMEDTA组成的洗脱液从使用RNA作为配体的珠洗脱的IgG。泳道3:用由200mM氯化钾、10mMEDTA及10%甘油组成的洗脱液从使用RNA作为配体的珠洗脱的IgG。泳道4:用由600mM氯化钾、10mMEDTA及10%甘油组成的洗脱液从使用RNA作为配体的珠洗脱的IgG。泳道5:使用rProteinA琼脂糖珠(Sepharosebeads)将IgG下拉时，用pH3甘氨酸缓冲液洗脱的IgG。泳道6:结合于用泳道2的洗脱液处理后的珠的IgG。泳道7:结合于用泳道3的洗脱液处理后的珠的IgG。泳道8:结合于用泳道4的洗脱液处理后的珠的IgG。泳道9:对于使用RNA作为配体的珠，不进行洗脱处理，而直接向珠加入试样缓冲液回收的IgG。泳道10:结合于用泳道5的洗脱液处理后的珠的IgG。图34表示在进行序列编号15所示的RNA是否可反复作为抗体纯化用分离剂的配体使用的试验时的SDS-PAGE结果。将结合有在抗体纯化中使用了一次的RNA的分离剂用尿素清洗，再次进行抗体纯化。反复操作2次。泳道l:分子量标记蛋白质。泳道2:第一次纯化获得的IgG。泳道3:第二次纯化获得的IgG。泳道4:第三次纯化获得的IgG。图35表示将序列编号16及序列编号17-2所示的RNA作为抗体纯化用分离剂的配体使用，从人血清纯化人IgG时的SDS-PAGE结果。泳道1:分子量标记蛋白质。泳道2:使用序列编号15所示的RNA作为配体时被下拉的IgG。泳道3:使用序列编号16所示的RNA作为配体时被下拉的IgG。泳道4:使用序列编号17-2所示的RNA作为配体时被下拉的IgG。泳道5:使用rProteinA作为配体时下拉的IgG。泳道6:人血清。图36表示使用经硫醇偶合剂固定的RNA适配体进行抗体纯化时的SDS-PAGE结果。泳道l:分子量标记蛋白质。泳道2:使用序列编号15所示的RNA作为配体，加入5nL人血清时被下拉的IgG。泳道3:使用序列编号15所示的RNA作为配体，加10pL人血清时被下拉的IgG。泳道4:对照组(blank)(向没有结合配体的珠中加入5pL人血清时被下拉的血清蛋白)。泳道5:使用rProteinA珠，加入5pL人血清时被下拉的IgG。泳道6:标准人IgGl。泳道7:人血清。图37表示使用经氨基偶合剂固定的RNA适配体，迸行抗体纯化时的SDS-PAGE结果。加样半量的回收试样。泳道l:分子量标记蛋白质。泳道2:使用序列编号15所示的RNA(固定化量25吗)作为配体，从10pL的人血清回收的IgG。泳道3:使用序列编号15所示的RNA(固定化量75吗)作为配体，从10iaL的人血清回收的IgG。图38表示使用经氨基偶合剂固定的RNA适配体，进行抗体纯化时的SDS-PAGE结果。下拉中使用10nL的人血清。泳道l:分子量标记蛋白质。泳道2:使用序列编号17-7所示的RNA作为配体的情况。泳道3:使用序列编号17-8所示的RNA作为配体的情况。泳道4:使用序列编号17-7-107所示的RNA作为配体的情况。泳道5:使用序列编号15所示的RNA作为配体的情况。泳道6:使用rProteinA树脂的情况。泳道7:标准人IgGl(6昭)。泳道8:人血清(0,2pL)。图39表示使用各种洗脱液洗脱时的SDS-PAGE结果。泳道1:分子量标记蛋白质。泳道2:200mM氯化钾+10mMEDTA+pH7.6的10mMTris。泳道3:200mM氯化钾+pH7.6的10mMTris。泳道4:300mM氯化钠+10mMEDTA+pH7.6的10mMTris。泳道5:10mMEDTA+pH7.6的10mMTris。图40表示为了评估经加热再生的适配体树脂的特性而进行的SDS-PAGE的结果。将已使用3次的适配体树脂10|iL用2种方法进行加热处理，再次使用IOjiL人血清，进行下拉实验。将中性洗脱级分用SDS-PAGE分析。泳道1:序列编号17-18所示的适配体树脂在超纯水中，于85'C加热5分钟。泳道2:序列编号17-17所示的适配体树脂在6M尿素中，于65'C加热15分钟。图41表示对经树脂结合型oligo纯化的IgG进行SDS-PAGE的结果。向共价结合有序列编号15所示的RNA的树脂结合型oligo10|iL中加入10|aL的人血清，对由中性洗脱液洗脱的级分用SDS-PAGE分析。图42显示通过表面等离振子共振分析获得的传感图，该图表示序列编号17-7所示的RNA与作为抗体药品的利妥昔单抗(Rituxan)的结合状态。将于3'末端附加有16残基的PolyA的RNA用A-dT键固定于传感芯片，喷射利妥昔单抗，观察与RNA的相互作用。具体实施方式本发明提供针对免疫球蛋白G(IgG)的适配体。所谓的适配体是对规定的目标分子具有结合活性的核酸分子。适配体通过与规定的目标分子结合，也可具有抑制规定的目标分子活性的作用。本发明的适配体可为RNA、DNA、修饰核酸或它们的混合物。本发明的适配体可为直链状或环状的形态。本发明的适配体可以特异地结合在IgG的Fc部分。本发明的适配体可以结合的IgG，列举例如人IgG(例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4)、仓鼠IgG、猪IgG。本发明的适配体可以结合到IgG的Fc部分的任意部分。IgG的Fc部分己知对在巨噬细胞或中性白细胞等免疫细胞中表达的受体蛋白质(FcyR)进行结合，本发明的适配体也可以结合到与担任结合FcyR作用的Fc部分所不同的Fc部分。另外，已知ProteinA结合于IgG的Fc部分，本发明的适配体也可以结合到与担任结合ProteinA作用的Fc部分所不同的Fc部分。本发明的适配体只要可以与IgG结合，就没有特别的限定，例如，以解离常数(Kd值)为基础进行评估时，可具有约lxlO_6M以下，优选约lxlO^M以下，更优选约lxlO—SM以下的Kd。Kd值例如可以根据利用表面等离振子共振的方法算出。对本发明适配体的长度并无特别限定，通常可为约16至约200核苷酸，例如约100核苷酸以下，优选约50核苷酸以下，更优选约40核苷酸以下，再更优选约30核苷酸以下，最优选约25核苷酸以下。另外，本发明的适配体的长度也可在例如约18核苷酸以上，优选约20核苷酸以上。总核苷酸数越少，越容易化学合成及大量生产，且在成本方面的优势也大。另外，认为化学修饰也容易，机体内稳定性也高，毒性也低。本发明的适配体中含有的各核苷酸分别相同或不同，可以为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸(S卩，未取代的核苷酸)或是于核糖2'位的羟基被任意的原子或基团取代的核苷酸。作为该任意的原子或基团，可以举出例如被氢原子、氟原子或-O-烷基(例如-O-Me基)、-O-酰基(例如-O-CHO基)、氨基(例如-NH2基)取代的核苷酸。本发明的适配体可以含有以GGUG(C/A)(U/T)表示的核苷酸序列。作为GGUG(C/A)(U/T)，可以举出例如GGUGCU、GGUGAU、GGUGCT、GGUGAT，但从RNA分子的观点而言，优选GGUGCU、GGUGAU。在本发明的适配体含有GGUG(C/A)(U/T)时，核酸中所含的GGUG(C/A)(U/T)的数可为1或多个(例如2或3个)。本发明的适配体对于1个lgG可结合2个。本发明的适配体可以为GGUG(C/A)(U/T)中第3个的U的核糖2位被氟化后的适配体(S卩，2'-F修饰)，或者以可保持本发明的适配体对IgG的结合活性的方式对第3个的U的核糖2位施以氟化之外的修饰后的适配体。作为这样的修饰，列举例如-O-Me化、氨化(NH。。本发明的适配体还可为化学合成，在于5'末端可具有单磷酸酯基的方面，与经转录(例如SELEX法)合成的于5，末端具有三磷酸酯基的适配体不同。本发明的适配体的至少1种(例如1、2、3或4种)核苷酸还可为于核糖的2'位含有羟基或者上述的任意的原子或基团例如选自氢原子、氟原子、羟基及-0-Me基的至少2种(例如2、3或4种)的基团的核苷酸。当本发明的适配体含有以GGUG(C/A)(U/T)表示的核苷酸序列时，在其两端可具有茎(stem)结构。茎结构可带来突起结构的充分稳定化。例如，作为茎结构，GGUG(C/A)(U/T)中5'末端的G(第1个核苷酸)与在5'侧与其邻接的1个以上的核苷酸、3'末端的U/T(第6个核苷酸)与在3'侧与其邻接的1个以上核苷酸可分别形成分子内碱基对(basepair)。在5，侧或3，侧邻接的核苷酸只要是1个以上，就没有特别的限定，可以为2个以上，优选3个以上。本发明的适配体除了上述的GGUG(C/A)(U/T)所示的核苷酸序列之外，还可含有ANC所示的核苷酸序列。ANC中的N可以为选自A、G、C、U及T的任意核苷酸，以A、G、C及U较佳，以A及G更佳，以A最佳。当本发明的适配体含有GGUG(C/A)(U/T)及ANC所示的核苷酸序列时，可以是GGUG(C/A)(U/T)存在于5'侧、ANC存在于3，侧，或者可以是ANC存在于5'侧、GGUG(C/A)(U/T)存在于3'侧。本发明的适配体具有GGUG(C/A)(U/T)中5'末端的G与ANC的C可形成分子内碱基对的结构，及/或GGUG(C/A)(U/T)中3'末端的U/T与ANC的A可形成分子内碱基对的结构。本发明的适配体含有GGUG(C/A)(U/T)及ANC两者时，适配体含有的GGUG(C/A)(U/T)及ANC的数量分别为1或多个(例如2或3个)。本发明的适配体还可以为以下(i)至(iii)中的任一种(i)GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGA，并且ANC的3'侧含有UCC;(ii)GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGNxlA，并且ANC的3'侧含有UNx2CC(Nxl、Nx2分别为选自A、G、C、U及T的核苷酸)；或(m)GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGNx3Nx4A(^"t]GGACAG)，并且ANC的3，侧含有UNx5Nx6CC(Nx3、Nx4、Nx5、Nx6分别为选自A、G、C、U及T的核苷酸)。GGA、GGNxlA或GGNx3Nx4A及UCC、UNx2CC或UNx5Nx6CC的所有核苷酸为核糖的2'位含有羟基的核苷酸(g卩，为未取代的核苷酸)，或者为于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸，从结合活性的观点而言，以于2'位的羟基被氢原子取代的核苷酸较佳。本发明的适配体还可以含有AGGUG(C/A)(U/T)C所示的核苷酸序列及/或GANCU(N为选自A、G、C、U及T的核苷酸)表示的核苷酸序列。AGGUG(C/A)(U/T)C中的第4个的U可以为于2'位的羟基被氟原子取代的核苷酸，或者以可保持本发明的适配体对IgG的结合活性的方式对第4个的U的核糖2'位施以除氟化之外的修饰后的核苷酸。上述U以外的核苷酸分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸或为于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。详细地讲，本发明的适配体具有潜在性二级结构，该潜在性二级结构含有突起结构以及存在于该突起结构两端的2个茎结构(S1、S2)及环(loop)结构。于本说明书中使用时，所谓的"潜在性二级结构"为可在生理条件下稳定存在的二级结构，例如，是否具有潜在性二级结构可通过实施例记载的结构预测方案来确定。环结构中所有的核苷酸可以为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸(即，为未取代的核苷酸)，或是于核糖的2'位的羟基被任意的原子或基团(例如氢原子、氟原子或-O-Me基)取代的核苷酸，从结合活性的观点而言，以于核糖的2'位的羟基被氢原子取代的核苷酸较佳。更详言地讲，本发明的适配体可具有以下(I)至(III)中任一项表示的潜在性二级结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>(I)S1S2[式中，N1、N2、N3、N4、N5分别相同或不同，为选自A、G、C、U及T的核苷酸，且NZ及NS为互相互补的核苷酸，NA及NS为互相互补的核苷酸]。上述(1)至(III)中，实线(粗线)表示选自A、G、C、U及T的核苷酸以任意长度连结，实线(细线)表示潜在性具有互补结合(碱基配对)能。Sl、S2分别表示茎结构。于S1、S2的茎结构中，可碱基配对的核苷酸数量可以分别为1以上，也可以为2以上、3以上或4以上。曲线部表示环结构。环结构优选由3个以上的核苷酸构成，较好由4个核苷酸构成。较好的是，上述(i)至(ni)表示的结构可以为上述(r)至(nr)、下述(r)至(nr)或(r")至(m，")表示的结构。另夕卜，GGUG(C/A)(U/T)中第3个的U可为于核糖的2'位被氟原子取代的核苷酸，本发明的适配体中含有的其他核苷酸(除上述U之外)分别相同或不同，可以为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸或是于核糖2'位的羟基被任意的原子或基团(例如氢原子、氟原子或-O-Me基)取代的核苷酸。本发明的适配体可具有以下(Ia)至(IIIa)中任一项表示的潜在性二级结构[式中，N1、N2、N3、N4、N5、N6、N7分别相同或不同，为选自A、G、C、U及T的核苷酸，且NZ及NS为互相互补的核苷酸，W及NS为互相互补的核苷酸，W及N〒为互相互补的核苷酸]。上述(Ia库(IIIa)中，实线(粗线)表示选自A、G、C、U及T的核苷酸以任意长度连结，实线(细线)表示潜在性具有互补结合(碱基配对)能。Sl、S2分别表示茎结构。于S1、S2的茎结构中，可碱基配对的核苷酸数量可以分别为1以上，也可以为2以上、3以上或4以上。曲线部表示环结构。环结构优选由3个以上核苷酸构成，以由4个核苷酸构成较佳。较好的是，上述(Ia)至(IIIa)表示的结构可为上述(Ia，)至(IIIa，)、下述(Ia")至(ma")或(Ia"，)至(nia"，)表示的结构。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>另外，GGUG(C/A)(U/T)中第3个的U可为于核糖的2'位被氟原子取代的核苷酸，本发明的适配体中含有的其他核苷酸(除上述U之外)分别相同或不同，可以为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸或是于核糖2'位的羟基被任意的原子或基团(例如氢原子、氟原子或-O-Me基)取代的核苷酸。从结合活性的观点而言，优选的是，N4、NS分别是于核糖的2'位的羟基被氢原子取代的核苷酸、且N5、N〒分别为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸。本发明的适配体可以为(a)由序列编号1至23中任一项所示的核苷酸序列(尿嘧啶也可为胸腺嘧啶)组成的适配体；(b)在序列编号1至23中任一项所示的核苷酸序列(尿嘧啶也可为胸腺嘧啶)表示的核苷酸序列中的1个或数个核苷酸经取代、缺失、插入或附加后的核苷酸序列所组成的适配体；(c)选自上述(a)的多个连结物、上述(b)的多个连结物、上述(a)和(b)的多个连结物的连结物。上述(b)中，取代、缺失、插入或附加的核苷酸数量只要为数个就没有特别的限定，可以例如约10个以下，较好约8个以下，更好约6个以下，再更好约5个以下，最好为4个、3个、2个或l个。上述(c)中连结可通过串级式(tandem)结合来进行。另外，连结时也可利用连接基(linker)。作为连接基，列举核苷酸链(例如1至约20个核苷酸)、非核苷酸链(例如-(CH2)n-连接基、-(0120120)11-连接基、六甘醇连<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>接基、TEG连接基、含肽的连接基、含-S-S-键的连接基、含-CONH-键的连接基、含-OP03-键的连接基)。上述多个连结物中的多个只要在2以上就没有特别的限定，例如可以为2至4个。上述(a)至(c)中的各核苷酸分别相同或不同，可以为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸或是于核糖2'位的羟基被任意的基团(例如氢原子、氟原子或-O-Me基)取代的核苷酸。本发明的适配体还可经加热处理再生、灭菌。作为这样的加热处理，例如可以举出在65至85"C下进行数分钟(例如5至15分钟)的处理。为了提高对IgG的结合性、稳定性、药物传递性等，本发明的适配体的各核苷酸的糖残基(例如核糖)也可以被修饰。作为糖残基中被修饰的部位，例如可以举出将糖残基的2'位、3'位及/或4'位的氧原子取代成其他原子等。作为修饰的种类，例如可以举出氟化、O-垸基化(例如O-甲基化、O-乙基化)、O-烯丙基化、S-垸基化(例如S-甲基化、S-乙基化)、S-烯丙基化、氨基化(例如-NH2)。这样的糖残基的改变可根据本身已知的方法进行(参照例如Sproat等,(1991)Nucle.Acid.Res.19,733-738;Cotton等，(1991)Nucl.Acid.Res.19，2629-2635;Hobbs等，(1973)Biochemistry12,5138-5145)。另外，为了提高对于IgG的结合性等，本发明的适配体的嘌呤、嘧啶也可以改变(例如化学性取代)者。作为该改变，例如可以举出5位嘧啶改变、8位嘌呤改变、环外胺的改变、4-硫代尿苷的取代、以5-溴或5-碘尿嘧啶的取代。另外，为了使对核酸酶及水解具有耐性，也可改变本发明的适配体中含有的磷酸基。例如P(O)O基也可以被P(O)S(硫代酸酯)、P(S)S(二硫代酸酯)、P(0)NR2(酰胺化物)、P(O)R、R(O)OR'、CO或CH2(甲基縮醛咸3，-胺(-NH-CH2-CH2-)取代[此处，各R或R，各自独立，为氢原子、或经取代或未经取代的垸基(例如甲基、乙基)]。连结基可通过-O-、-N-或-S-连结，结合于邻接的核苷酸。改变还可包括加帽(capping)之类的3，及5，的改变。改变还可经将聚乙二醇或其他脂质附加到末端来进行。该改变参照美国专利第5660985号、美国专利第5756703号。本发明的适配体可根据本说明书中的公开内容及在该
技术领域：
的技术常识进行化学合成。作为本发明的适配体，例如还可以举出含有GGUG(C/A)(U/T)所示的核苷酸序列(及必要时的ANC所示的核苷酸序列)的适配体，这样的适配体利用SELEX法及其他改良法(例如Ellington等，(1990)Nature,346，818-822;Tuerk等，(1990)Science,249，505-510)可高度设计。例如使用由下述弓I物用序列(i)-(N)a-GGUG(C/A)(U/T)-(N)b-引物用序列(ii)[上述中，(N)a表示由a个N组成的核苷酸链，(N)b表示由b个N组成的核苷酸链，N分别相同或不同，为选自A、G、C、U及T(较好为A、G、C及U)的核苷酸。a、b分别相同或不同，可为任意的数，例如为l至约100个，较好为1至约50个，更好为1至约30个，再更好为1至约20个或1至约IO个]所示的核苷酸序列组成的单一种的核酸分子或多种的核酸分子(例如a、b的数等不同的核酸分子的文库(libraiy))及引物用序列(i)、(ii)分别对应的引物对，由此可高度设计含有GGUG(C/A)(U/T)所示的核苷酸序列的本发明的适配体。本发明还提供该可高度设计的适配体的制造方法。本发明的适配体可用作例如作为抗体纯化用分离剂的配体、将抗体与标记物质结合的连接基、抗体的固定剂、将抗体与修饰物质结合的连接基。作为抗体纯化用分离剂的配体的具体利用法与使用ProteinA的抗体纯化方法几乎相同，但由于可用中性溶液洗脱抗体，因此与需要用酸性溶液洗脱抗体的使用了ProteinA的方法相比，具有可以防止抗体变性的优点。将本发明的适配体作为将抗体与标记物质结合的连接基使用时，本发明的适配体需有不会从抗体离解的程度的高结合活性。另一方面，作为抗体纯化用分离剂使用时，由于必须将一次吸附的抗体洗脱，因此未必结合活性越高越好。本发明中通过使用不同序列、不同长度及不同修饰方法，提供具有对IgG有不同的结合力或稳定性且便宜等利点的适配体。本发明的适配体还具有后述的各种有用性。本发明还提供含有本发明的适配体及与其结合了的功能性物质的复合体。本发明的复合体中的适配体与功能性物质之间的结合可以为共价结合或非共价结合。本发明的复合体可以为本发明的适配体与1个以上(例如2或3个)的同种或异种的功能性物质相结合而成。作为功能性物质，例如可以举出蛋白质、肽、氨基酸、脂质、糖质、单糖、聚核苷酸、核苷酸。作为功能性物质，例如还可以举出亲和性物质、标记用物质、酶、药物、毒素、药物传递介质。作为亲和性物质，列举例如生物素、链霉抗生物素蛋白、对于目标互补序列具有亲和性的聚核苷酸、抗体、谷胱甘肽琼脂糖(glutathionesepharose)、组氨酸。作为标记用物质，列举例如萤光物质、发光物质、放射性同位素。作为萤光物质，列举例如SYBR绿I(SYBRGreen1)、SYBR绿II、SYBR金(SYBRGold)、SYPRO宝石红(SYPRORuby)、SYPRO桔色(SYPROOrange)、SYPRO橘色(SYPROTangerine)、FITC、FAM、EGFP、ECFP、AttoPhos、SYPRO红(SYPRORed)、Cy3、TAMRA、ROX、HEX、Alexa荧光532(AlexaFluor532)、Alexa荧光546、深紫(DeepPurple)、Pro-QDiamond、若丹明红、BODIPY576/589、NED、R-藻红蛋白、RFP、HNPP、Alexa荧光633、Alexa荧光635、Alexa荧光647、Cy5、氟硼荧(BODIPY)650/665、DiD、TOTO-3、磷酸DDAO、溴化乙锭、SYPRO玫瑰红(SYPRORose)、Cy7、萤光素。作为发光物质，列举例如鲁米诺(luminol)、虫萤光素(luciferin)、光泽精(Lucigenin)。作为放射性同位素，列举例如3H、"C、32p35g9。y123工125工131工作为酶，列举例如西洋辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶(alkaliphosphatase)。作为药物，例如可以举出抗癌剂。作为抗癌剂，列举例如加利车霉素或迪欧卡霉素(duocarmycin)等导弹(missile)疗法中使用的药物，环磷酰胺、马法兰(merphalan)、异磷酰胺(ifosfamide)或氯乙环磷酰胺(trofosfamide)等氮芥(nitrogenmustard)类似物，三胺硫磷(thio-TEPA)等乙撑亚胺类，卡氮芥(carmustine)等亚硝基脲，替莫唑胺(temozolomide)或达卡巴嗪(dacarbazine)等reast齐U，氨甲喋呤(methotrexate)或雷替曲塞等叶酸类代谢拮抗剂，硫鸟嘌呤(thioguanine)、克拉屈滨(cladribin)或氟达拉滨(fludarabine)等嘌呤类似物，氟尿嘧啶(fluorouracil)、替加氟(tegafUr)或吉西他滨(gemcitabine)等嘧啶类似物，长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)或长春瑞滨(Vinorelbin)等长春生物碱及其类似物，依托泊苷(etoposide)、紫杉醇(taxane)、多西紫杉醇(docetaxel)或紫杉醇(paclitaxel)等鬼臼毒素(podophyllotoxin)衍生物，多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epimbicin)、伊达比星(edambicin)及米托蒽醌(mitoxantrone)等蒽环类抗生素(anthracycline)类及类似物，争光霉素(bleomycin)及丝裂霉素(mitomycin)等其他细胞毒性抗生素，顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)及奥沙利铀(oxaliplatin)等铂化合物，喷司他丁(pentostatin)、米替福新(miltefocin)、雌莫司汀(estramstin)、托泊替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)及比卡鲁胺(bicaltamide)等其他抗肿瘤剂。作为毒素，列举例如蓖麻毒素(Ricin)、利亚毒素(U7毒素)。作为药物传递介质，列举例如核糖体、微球体(microsphere)、聚乙二醇、胆固醇、肽。本发明的适配体及/或本发明的复合体，可作为例如药物或试剂(例如诊断药、检查药(包括实验用试剂))使用。例如本发明的医药或诊断药，例如可用于以异常IgG及/或IgG的过度表达为原因的疾病(例如风湿病、肾炎、卡斯卢曼病(Castleman'sdisease)、韦格纳氏(Wegener's)肉芽肿、肾小球硬化症、肾小球疾病、多发性动脉炎、紫斑病、红斑狼疮(erythematosus).器官移殖的排斥反应)、与IgG产生相关的疾病(例如B细胞淋巴瘤)等包括自身免疫疾病的IgG相关疾病；或者癌的治疗或诊断(例如病情把握、治疗效果的监控)。另外，在癌的治疗中，使用本发明的复合体(例如使结合于抗癌剂或毒素的本发明的适配体结合于抗体药物而得的复合体)，可将癌细胞杀死。本发明的试剂除了使用本发明的适配体代替抗体之外，可通过与免疫学方法相同的方法使用。因此，通过使用本发明的适配体代替抗体，经与酶免疫测定法(EIA)(例如直接竞争ELISA、间接竞争ELISA、三明治法ELISA)、放射免疫测定法(RIA)、萤光免疫测定法(FIA)、免疫层析法、发光免疫测定法、旋转免疫测定法、蛋白质印迹法(例如替代蛋白质印迹法的二次抗体使用)、免疫组织化学染色法、细胞分选法(cellsorting)等方法相同的方法，可进行上述疾病的诊断或后述的IgG检测定量。本发明也提供使用本发明诊断用试剂的方法，此时，也可使用本发明的固相载体。本发明的药物可以掺有医药上可接受的载体。作为医药上可接受的载体，列举例如蔗糖、淀粉、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、葡萄糖、纤维素、滑石、磷酸钙、碳酸钙等赋形剂，纤维素、甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚丙基吡咯烷酮、明胶、阿拉伯胶、聚乙二醇、蔗糖、淀粉等粘合剂，淀粉、羧甲基纤维素、羟丙基淀粉、钠-乙二醇-淀粉、碳酸氢钠、磷酸钙、柠檬酸钙等崩解剂，硬脂酸镁、气溶胶(aerosol)、滑石、十二垸基硫酸钠等润滑剂，柠檬酸、薄荷醇、甘草酸(glycyrrhizin)铵盐、甘氨酸、桔子粉等芳香剂，苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯等保存剂，柠檬酸、柠檬酸钠、乙酸等稳定剂，甲基纤维素、聚乙烯吡咯垸酮、硬脂酸铝等悬浊剂，表面活性剂等分散剂，水、生理盐水、桔子汁等稀释剂，可可脂、聚乙二醇、煤油等基质蜡等，但不限于此。经口给药的理想制剂为使有效量的配体溶解于水、生理盐水、桔子汁之类的稀释液后的液体制剂，含有将有效量的配体作成固体或颗粒的胶囊剂、颗粒剂或片剂，将有效量的有效成分悬浮于适当分散介质中的悬浮液制剂，使溶解有有效量的有效成分的溶液分散于适当分散介质中乳化的乳剂等。非经口给药(例如静脉内注射、皮下注射、肌肉注射、局部注入、腹腔内给药等)的理想制剂为水性及非水性的等渗无菌的注射液体制剂，其中也可含有抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂、等渗剂等。另外，可列举水性及非水性的无菌悬浮液剂，其中也可含有悬浮剂、增溶剂、增粘剂、稳定剂、防腐剂等。可以将该制剂以单位给药量或多次给药量封入安瓿或小瓶之类的容器中。另外，可以将有效成分及医药上可接受的载体冷冻干燥，以在临使用前只要溶解或悬浮于适当的无菌媒介物中即可得的状态保存。本发明的药物的给药量根据有效成分的种类活性、疾病的严重度、给药对象的物种、给药对象的药物耐受性、体重、年龄等的不同而不同，通常成人每日的有效成分量可为约0.0001至约2.0g/kg，例如约0.0001至约0.1g/kg，较好约0.005至约0.05g/kg。本发明还提供固定化有本发明的适配体及/或本发明的复合体的固相载体。作为固相载体，列举例如基板、树脂、板(例如多孔板)、过滤器、筒、柱、多孔质材。基板可为DNA芯片或蛋白质芯片等中使用的基板等，例如镍-PTFE(聚四氟乙烯(polytetrafluoroethylene))基板或玻璃基板、磷灰石基板、硅基板、氧化铝基板等，以及在这些基板上实施聚合物等的涂敷后的板。作为树脂，列举例如填充于抗体纯化层析法或将抗体作为配体的亲和层析法等中使用的柱中的树脂及用于以分批法将抗体纯化或固定化的树脂，另外，包括各种浓度的琼脂糖粒子或经高度交联的琼脂糖粒子、二氧化硅粒子、丙烯酰胺与N,N，-亚甲基双丙烯酰胺的共聚物、聚苯乙烯交联二乙烯苯粒子、将葡聚糖用表氯醇交联后的粒子、纤维素纤维、烯丙基葡聚糖与N,N'-亚甲基双丙烯酰胺的交联聚合物、单分散系合成聚合物、单分散系亲水性聚合物、Sepharose(商品名)琼脂糖、Toyopearl(商品名)层析树脂等，还包括使各种官能基团结合到这些树脂后的树脂。本发明的适配体及/或本发明的复合体可由本身已知的方法固定于固相载体。列举例如将亲和性物质(例如上述的亲和性物质)或规定的官能基团导入本发明的适配体及/或本发明的复合体，再利用该亲和性物质或规定的官能基团，固定于固相载体的方法。本发明提供这样的方法。规定的官能基团可以为能供给偶合反应的官能基团，列举例如氨基、硫醇基、羟基、羧基。本发明还提供导入该官能基团的适配体。本发明的固相载体可用于例如IgG的纯化及IgG的检测、定量。本发明的固相载体还可利用于治疗上述的异常IgG或IgG过剩表达为原因的疾病。使用送液泵，从患者血管将血液流入本发明的固相载体(例如筒)，吸附除去规定量的IgG后将净化的血液返回至患者。此时，有益的是添加抗血液凝固剂使血液不凝固。IgG的除去量可根据透过血液量及本发明固相载体的吸附容量来调节。本发明的固相载体可以通过用中性洗脱液清洗，经加热或紫外线照射等进行灭菌，进行再生。在血液的净化中利用本发明的固相载体时，关于详细的使用方法或治疗效果可参考透析疗法或使用作为用了ProteinA的IgG除去剂的Prosorba(商品名，费森尤斯公司制造)及Immunosorba(商品名；费森尤斯公司制造)的血液净化法来进行。因此，本发明还提供可将该血液净化的含有本发明固相载体的医疗用设备。本发明提供抗体的纯化及/或浓縮方法。本发明的纯化及/或浓縮方法可包括将IgG抗体吸附于本发明的固相载体，再通过洗脱液使吸附的IgG抗体洗脱的步骤。本发明的纯化及/或浓縮方法还可为将本发明的固相载体填充于容器(例如烧瓶、试验管、试管)进行纯化或浓缩的静态方法，以及将含有IgG的溶液送至本发明的固相载体(例如柱)进行纯化或浓縮的动态方法。IgG抗体在本发明固相载体的吸附可根据本身已知的方法来进行。例如将含有IgG的试样(例如血液、血浆、血清、腹水、细胞培养上清液、组织提取液)导入至本发明的固相载体或填充有固相载体的容器或载体。静态方法时，为通过边搅拌边在室温放置约1至60分钟左右将IgG结合于本发明的固相载体。动态方法时，为通过以约O.l至20mL/分钟左右的流速导入试样，将IgG结合于本发明的固相载体。也可在被导入至本发明的固相载体前将含有IgG的试样稀释。稀释优选使用含有氯化钠及氯化镁的溶液。IgG结合于本发明的固相载体后，为了除去杂质，用清洗液清洗本发明的固相载体。清洗液优选含有氯化钠及氯化镁的溶液。IgG抗体的洗脱可使用中性溶液进行。在IgG抗体的纯化中，使用ProteinA的以往的方法中，由于必须用酸性溶液进行洗脱，因此有抗体容易变性的缺点。另一方面，本发明的适配体可用中性溶液进行洗脱，因此，与以往的方法不同，具有可防止抗体变性的优点。对于中性洗脱液并无特别限制，可为例如pH约6至约9，较好约6.5至8.5，更好约7至约8。另外，中性溶液包括钾盐(例如氯化钾(KCl))、乙酸钾、甲酸钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸三钾、硝酸钾、硫酸钾、亚硫酸钾、高氯酸钾、柠檬酸钾、苹果酸钾、草酸钾、氰化钾)、镁盐(例如氯化镁、乙酸镁、甲酸镁、硫酸镁、草酸镁)、钙盐(例如氯化钙、乙酸钙、甲酸钙、硫酸钙、草酸钙)、铵盐(例如氯化铵、乙酸铵、甲酸铵、磷酸铵、硝酸铵、硫酸铵、亚硫酸铵、高氯酸铵、柠檬酸铵、氰化铵、草酸铵)、螯合剂(例如乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸钠等柠檬酸盐、苹果酸钠等苹果酸盐、草酸钠等草酸盐、乙二胺、乙酰基乙酰钠、EGTA)、改性剂或表面活性剂(胍、SDS、Tween20、NP-40、TritonX-100)，从成本方面而言，以含有氯化钾较佳。氯化钾溶液的浓度为100至1000mM，较好200至800mM，更好300至600mM。EDTA溶液的浓度为1至100mM，较好5至50mM，更好10至20mM。本发明的纯化方法还可包括在IgG抗体吸附后将固相载体清洗的步骤。清洗液列举例如含有尿素、强碱(例如氢氧化钠、氢氧化钾)、弱碱(例如氨)、强酸(例如盐酸、硝酸、硫酸、三氟乙酸)、弱酸(例如乙酸、甲酸)的溶液。尿素可为例如1至IOM。强碱及弱碱较好为0.01至ION，更好为0.01至1N，再更好为0.01至O.IN。强酸及弱碱较好为0.01至ION，更好为0.01至1N，再更好为0.01至O.IN。本发明的纯化方法还可以包括对固相载体进行加热处理的步骤。通过所述工序，固相载体可再生、灭菌。该加热处理列举例如于约50至约100°C，较好约60至约90°C，更好约65至85。C进行数分钟例如1至30分钟，较好1至20分钟，更好5至15分钟的处理。加热处理可在尿素(例如1至IOM)中进行。本发明还提供纯化抗体的制造方法。本发明的制造方法可以包括制备IgG抗体，利用本发明的适配体及复合体(例如通过使用本发明的固相载体)将制得的IgG抗体纯化的步骤。经本发明的制造方法制备的抗体可为IgG。抗体可以为多克隆抗体或单克隆抗体。多克隆抗体或单克隆抗体可通过本身已知的方法来制备。抗体还可为人化抗体或人抗体，以人化抗体或人抗体较佳。人化抗体可参考例如日本专利特表平4-506458号公报、日本专利特开昭62-296890号公报等制备，人抗体可参照例如"NatureGenetics,Vol.15，p.146-156，1997"、"NatureGenetics,Vol.7，p.13-21,1994"、日本专利特表平4-504365号公报、国际申请公开W094/25585号公报、"日经科学，6月号，第40至第50页、1995年"、"Nature,Vol.368，p.856-859，1994"、日本专利特表平6-500233号公报等来制备。接著，制得的抗体可使用适配体纯化。纯化的详细方法与本发明的纯化方法相同。本发明还提供IgG的检测及/或定量方法。本发明的检测及/或定量方法包括利用本发明的适配体(例如通过使用本发明的复合体及/或固相载体)来测定IgG的步骤。该方法如在本发明的诊断用试剂的内容所述，除了使用本发明的适配体替代抗体之外，通过与免疫学的方法相同的方法进行检测及/或定量。本发明还提供抗体的修饰方法。本发明的修饰方法可包括通过本发明的适配体，使功能性物质与抗体结合的步骤。本发明还提供通过该修饰方法制得的修饰抗体。包含本说明书中列举的专利及专利申请说明书的所有刊物记载的内容通过在本说明书的引用，全部以与明示同程度地引入本说明书中。以下列举实施例更详细地说明本发明，本发明不受下述实施例等的任何限定。[实施例][实施例l]与IgG特异性结合的核酸的制备使用SELEX法制作与IgG特异性结合的核酸。SELEX为将Ellington等人的方法(Ellington和Szostak,Nature346,818-822,1990)及Tuker等人的方法(Tuerk和Gold,Science249，505-510，1990)改良进行。目标物质使用附有组氨酸标记(tag)的人IgGl的Fc部分(Pro100至Lys330)及RANK(NF-kB的受体激活子(Receptoractivator))的嵌合体(IgGl-Fc,安迪生物公司制造)。该嵌合体为使用小鼠骨髓瘤细胞而表达的。最初回合使用的RNA是使用DuraScribeT7转录试剂盒(艾匹森特(Epicentre)公司制造)将化学合成获得的DNA转录而得。经该方法获得的RNA，其含有嘧啶碱基的核苷酸的核糖体的2'位被氟化。DNA模板使用在40残基的随机序列两侧具有引物序列的长度90残基的DNA。DNA模板及引物由化学合成制得(博奥公司制造)。DNA模板的序列及引物序列如下所示。DNA模板5'-ctctcatgtcggccgtta-40N-cgtccattgtgtccctatagtgagtcgtatta-3，(序歹!j编号24)弓I物-A:5'-taatacgactcactatagggacacaatggacg-3，(序歹U编号25)引物-B:5'-ctctcatgtcggccgtta-3，(序列编号26)引物A含有T7RNA聚合酶的启动子序列。最初回合使用的RNA池的变异(variation)在理论上为1014。使作为目标物质的IgGl-Fc吸附于Ni-NTA亲和性树脂(洽根(Qiagen)公司制造)或BDTalonTM亲和性树脂(BD生物科学公司制造)而固定，向其中加入RNA池，于室温下保持30分钟后将未结合于IgGl-Fc的RNA用溶液A冲洗。在此的溶液A为145mM氯化钠、5.4mM氯化钾、1.8mM氯化钙、0.8mM氯化镁、20mMpH7.6Tris的混合溶液。对结合于IgGl-Fc的RNA加入洗脱液，回收，通过RT-PCR扩增后，用DuraScribeT7转录试剂盒转录，用于下一回合。洗脱液使用在溶液A中加入250mM咪唑的溶液。第7回合及第10回合完成后，将PCR产物在pGEM-TEasy载体(vector)(普洛麦格公司制造)中克隆(Cloning)，在大肠杆菌株DH5a(东洋纺公司制造)进行转化。从单克隆中将质粒提取后，用DNA定序器(ABIPRISM3100，ABI公司制造)确定核苷酸序列。具有序列编号l所示的序列的克隆为48个克隆中IO个克隆。另外，具有序列编号2、3、4、5、6、7、8所示的序列的克隆在48个克隆中分别存在2个、7个、14个、2个、5个、4个、4个克隆。使用MFOLD程序预测序列编号1至8所示的RNA的二级结构(M.Zuker,Mfoldwebserverofnucleicacidfoldingandhybridizationprediction-NucleicAcidsRes.31(13),3406-15，(2003))。其结构示于图1至图8。如图所示，该RNA含有GGUGCU的共同序列，该共同序列形成突起。改变引物组合，通过与上述相同的方法再次进行SELEX。引物序列如下所述。弓I物C:5，-taatacgactcactatagggccacagcgag-3，(序歹!j编号27)引物D:5'-ccgaccacacgcg-3，(序列编号28)第8回合完成后，序列编号9所示的RNA在考察序列的48个克隆中存在1个克隆。该RNA与人IgGl特异性结合，存在GGUGCU的序列。使用MFOLD程序预测该RNA的二级结构，结果不存在GGUGCU的突起结构。使用vsfold4程序aittp:〃www.ma.it-chiba.ac.b/vsfold4/)预测序歹i」编号9所示的RNA的二级结构，结果发现GGUGCU的突起结构(图9)。另一方面，其他的47个克隆不与IgGl结合。接着，通过氨基偶合进行固定有IgG的Fc片段(IgG-Fc)的SELEX。将100吗的人IgG-Fc(阿森斯研究科技(AthensResearch&Technology)公司制造)固定于30|^L的NHS-活化的琼脂糖珠(activatedSepharosebeads)(安玛西亚生物科学公司(AmershamBioscience)制造)。购买的IgG-Fc溶液由于含有Tris缓冲液，因此要置换为20mMHEPES缓冲液(西格马公司制造)之后再进行偶合。偶合根据说明书来进行。固定化量通过用SDS-PAGE考察固定化前的IgG-Fc溶液与刚固定化后的上清液来确认。如果没有从上清液检测到IgG-Fc的谱带，则认为使用的IgG-Fc几乎全被偶合。RNA使用与上述相同的含有嘧啶碱基的核苷酸的核糖的2'位经氟化后的RNA。作为用于制备RNA初期池的DNA模板，使用利用下述的引物序列夹持40残基的随机序列后的序列。弓l物E:5'-taatacgactcactatagggtacgagtctggacttgcaa-3，(序歹!j编号29)引物F:5'-gcctgttgtgagcctca-3，(序列编号30)第7回合完成后，序列编号19、20、21所示的RNA在考察序列的48个克隆中分别有13个、9个、6个克隆。这些RNA含有GGUGCU的共同序列。使用MFOLD程序预测该二级结构，结果序列编号20及21的RNA含有与序列编号1的RNA相同的突起结构，而序列编号19的RNA则未含有(图19至图21)。接着，对于48个克隆中只存在1个克隆的RNA序列进行详细的考察，结果序列编号22及23所示的RNA含有GGUGCU的共同序列。使用MFOLD程序预测二级结构，结果序列编号22的RNA含有同样的突起结构，序列编号23的RNA则未含有。其他的1个克隆有15个序列。他们全都不含GGUGCU。考察这些序列中8个序列的结合活性，结果均无结合活性。使用由核糖的2'位被氟化的含有嘧啶碱基的核苷酸及天然型的含嘌呤碱基核苷酸而得的RNA，进行3次不同的SELEX，从其中的任一种中选择含有GGUGCU共同序列的RNA。在该共同序列两侧的序列无特别的特征，预测在与IgG的结合中GGUGCU起重要作用。使用MFOLD程序预测二级结构，结果所选择的RNA几乎都含有GGUGCU的突起结构，预测具有共同序列的所有RNA均具有GGUGCU的突起结构。[实施例2]结合活性的评估以表面等离振子共振法研究序列编号1至9所示的RNA对人IgG-Fc的结合活性。测定使用比阿克(BIAcore)公司制造的BIAcore2000。传感芯片使用将链霉抗生物素蛋白固定化的SA芯片。在其上结合1000RU左右的于5'末端结合有生物素的16残基的PolydT。成为配体的RNA在3'末端附加16残基的PolyA，通过dT与A的结合固定于SA芯片上。其固定化量为以0.01^g^L浓度喷射60iiL使之成为约1000RU。分析用的IgG-Fc(阿森斯研究科技公司制造)为将浓度调整为0.6pM的物质喷射70|iL。使用的运行缓冲液(RunningBuffer)的成分与SELEX所用的溶液A相同。固定序列编号1或3所示的RNA喷射IgG-Fc喷射时的传感图分别表示于图24或图25。显示RNA与IgG-Fc结合的状态。对照组进行将含有随机序列的RNA池固定化的测定，结果没有结合IgG-Fc(图26)。对于序列编号2至9所示的RNA进行相同的测定，结果全都与IgG-Fc结合。接着，用同样的方法考察与全长的人IgGl的结合活性。序列编号l至9所示的RNA全都与IgGl结合。另外，含有随机序列的RNA池未显示结合活性。接着，使用浓度不同的IgG(0.6^iM至0.05pM)，进行速度论的分析，求出各RNA适配体的解离常数(Kd)。解离常数通过以下方法求得利用A-dT键将在3'末端附加有16残基的PolyA的RNA固体化于传感芯片，喷射浓度不同的IgG(0.6nM至0.05jim)，经表面等离振子共振法求出。结果示于表l。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>用表面等离振子共振法考察序列编号19至23所示的RNA与人IgGl的结合活性。由结果可知，所有的RNA对IgGl具有结合活性。使用MFOLD程序预测的序列编号19及23所示的RNA的二级结构不含有共同的突起结构，但均对人IgGl具有结合活性。使用Biacore2000(商品名)(比阿克公司制造)测定适配体的结合活性。Biacore2000中组装有速度论的解析软件，通过将获得的传感图的形状与理论式拟合(fitting),可求出解离常数。序列编号1至9及19至23所示的长适配体十分符合h1结合模型的理论式，对于序列编号17等短适配体，更适合l:2结合模型的Bivalent模型的理论式。抗体由于为对称性的结构，因此通常认为一个抗体结合两个适配体。由以上确认了，由SELEX法制备的序列编号1至9及19至23所示的RNA具有对人IgG的结合活性。这表示共同序列GGUGCU对与IgG的结合很重要。[实施例3]RNA适配体的小型化序列编号1至9及19至23所示的RNA长度为约70残基，若能縮短至约40残基以下的长度，则RNA适配体可由化学合成制备。尝试了将序列编号1至9及19至23所示的RNA小型化。在此，序列编号1至9及19至23所示的RNA的含有嘧啶碱基的核苷酸(U、C)的核糖2'位被氟化，含有嘌呤碱基的核苷酸(A、G)为天然的RNA型。另外，本实施例中新制备的短RNA的所有嘧啶碱基的核糖2'位被氟化。首先将序列编号1所示的RNA作为基础尝试小型化。序列编号10所示的RNA为将序列编号1所示的RNA的5'末端的GGGACAC以及3'末端的GAGAG切断，再为了转录在5'末端附加GG。序列编号11所示的RNA为将序列编号10所示的RNA的5'末端的GGAAU以及3'末端的ACAU切断而得。序列编号12所示的RNA为将序列编号11所示的RNA的5'末端的GGACGAGUU以及3'末端的AACGGCCG切断，于5'末端附加GG以及在3'末端附加CC而得。序列编号13所示的RNA为在序列编号12所示的RNA的GGUGCU突起的后面的茎环结构换为序列编号2所示的RNA的茎环结构而得。序列编号14所示的RNA为将序列编号13所示的RNA的环部分换为GAAA四核苷酸环而得。序列编号15所示的RNA为从序列编号13所示的RNA最初的茎除去2个碱基对縮短茎而得。序列编号16所示的RNA为从序列编号13所示的RNA的第2个茎除去3个碱基对縮短茎而得。序列编号17所示的RNA为从序列编号16所示的RNA最初的茎除去2个碱基对缩短茎而得。序列编号18所示的RNA为从序列编号17所示的RNA的第2个茎除去1个碱基对縮短茎而得。使用表面等离振子共振法来确认经小型化的RNA的结合活性。测定与实施例1相同，利用A-pT键将附加有16残基的PolyA的RNA固定，在其上喷射IgG。由结果可知，序列编号10至18所示的含有GGUGCU共同序列的RNA对人IgGl具有结合活性。其中，序列编号18所示的RNA由21残基形成。它们的解离常数分别示于表l。制备将序列编号17表示的RNA第8个核苷酸的C置换为U的变异体。该C为共同序列GGUGCU的C。由表面等离振子共振分析的结果可知，该变异体对人IgGl不具有结合活性。该事实表示作为共同序列的GGUGCU对与IgG的结合十分重要。根据上述通过将序列编号1所示的RNA小型化，可制作能化学合成的长度的RNA适配体。另外，只要存在作为共同序列的GGUGCU的突起结构，就可保持与IgG的结合活性。[实施例4]种特异性的评估使用表面等离振子共振法研究所制作的RNA适配体对于人IgGl以外的亚型IgG或人以外的动物的IgG是否也具有结合性。测定与实施例1相同，利用A-pT键将附加有16残基的PolyA的核酸固定，在其上喷射IgG。RNA适配体使用序列编号l及17所示的核酸。抗体使用人IgGl(卡尔生物化学(Calbiochem)公司制造)、人IgG2(卡尔生物化学公司制造)、人IgG3(卡尔生物化学公司制造)、人IgG4(卡尔生物化学公司制造)、小鼠IgGl(卡米康国际(ChemiconInternational)公司制造)、小鼠IgG2a(卡米康国际公司制造)、小鼠IgG2b(孜梅德试验(ZymedLaboratories)公司制造)、小鼠IgG3(倍士尔试验(BethylLaboratories)公司制造)、大鼠IgGl(安迪生物公司制造)、大鼠IgG2a(孜梅德试验公司制造)、大鼠IgG2b(孜梅德试验公司制造)、大鼠IgG2c(英国血清科技(UK-Serotec)公司制造)、兔子IgG(孜梅德试验公司制造)、牛IgGl(倍士尔试验公司制造)、牛IgG2(倍士尔试验公司制造)、鸡IgG(罗克兰(Rockland)公司制造)、狗IgG(罗克兰公司制造)、猫IgG(倍士尔试验公司制造)、豚鼠IgG(生物基因(Biogenesis)公司制造)、仓鼠IgG(罗克兰公司制造)、猪IgG(罗克兰公司制造)。结果表示于表2。序列编号HumanIgGlHrnnanIgG2HumanIgG3HumanIgG4HumanIgAHumanIgDHumanIgEMouseIgGlMouse〖gG2aMouseIgG2bMouseIgG3RatIgGlRatIgG2aRatIgG2bRatIgG2cRabbitIgGBovineIgGlBovineIgG2ChickenIgGDogIgGCatIgGGuineapigIgGHamsterIgGSwineIgG<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>-ProteinA的数据引用安玛西亚生物科学公司的说明书。+表示结合的强度，+多者表示结合强。-表示未结合。nd表示未测定。由表2可知，虽然序列编号1及17所示的RNA对人IgGl、人IgG2、人lgG3、人lgG4、仓鼠IgG、猪IgG具有结合活性，但是对其他种动物则不具有结合活性。另外，序列编号l及17所示的核酸对人IgD(生物基因公司制造)及人IgE(卡尔生物化学公司制造)不具有结合活性。序列编号17所示的核酸虽然对人IgA(倍士尔试验公司制造)不具有结合活性，但是对人IgM(卡米康国际公司制造)显示非常弱的结合活性。由上可知，本发明提供的RNA适配体为与人、仓鼠、猪的IgG特异性结合的RNA。另外，可知关于人IgG与亚型无关，与lgGl至IgG4均结合。这是与作为现在[实施例5]RNA适配体结合部位的考察1(FcyR)IgG的Fc部分结合于在巨噬细胞或中性白细胞等免疫细胞中表达的受体蛋白质(Fc力，促进细胞的活化或抑制。使用表面等离振子共振法考察本发明提供的RNA是否结合在IgG的FcYR结合部位。首先，将附加有16残基的PolyA的RNA适配体用与实施例1相同的方法固定，在其上喷射人IgG使之与RNA适配体结合后，喷射FeyR。若IgG的RNA适配体结合部位与FeyR的结合部位全部或主要部分重复，则可认为R不能结合于与RNA适配体相结合的IgG。另外，当IgG与FcryR的结合力比IgG与RNA适配体的结合力强，引起RNA适配体与FeyR的置换反应时，推测IgG从被固定的RNA适配体解离，与FcyR形成夏合体流出。使用序列编号1所示的RNA作为RNA适配体、人IgG-Fc(阿森斯研究科技公司制造)作为IgG、人FcYRI(R&DSystems公司制造)作为FcYR进行测定。结果观察到IgG-Fc结合后由Fq/RI的结合产生的信号上升(图27)，因此可知，形成RNA适配体、IgG-Fc、Fc7RI三者的复合体。另夕卜，对照组使用含有随机序列的RNA池时，IgG-Fc与FcYRI都没有结合(图28)。由上可知，RNA适配体结合在与IgG的Fc丫RI结合部位所不同的部分。[实施例6]RNA适配体结合部位的考察2(ProteinA)作为结合于IgG-Fc的其他物质，熟知有ProteinA。ProteinA由于与IgG的Fc部分特异性结合，因此被用作抗体纯化用分离剂的配体。通过与实施例5相同的方法考察本发明提供的RNA是否结合于IgG的ProteinA结合部位。首先，将在3'末端附加有16残基的PolyA的序列编号1所示的RNA适配体通过与实施例l相同的方法固定，向其流入人IgGl(卡尔生物化学公司制造)使之结合于RNA适配体后，喷射ProteinA(MPBiomedicals公司制造)。结果观察到IgGl结合后由ProteinA的结合产生的信号上升(图29)，因此可知形成RNA适配体、IgGl、ProteinA三者的复合体。另外，对照组进行将序列编号l所示的RNA适配体固定后喷射ProteinA的测定，结果未见ProteinA的结合(图30)。由上可知，RNA适配体结合于与IgG-Fc的ProteinA结合部位所不同的部分。[实施例7]RNA适配体的2'修饰方法及对IgG的结合活性实施例1制备的RNA适配体的含有嘧啶碱基的核苷酸的核糖2'位被氟化。本实施例中，制备与核糖2'位的修饰方法不同的RNA，使用表面等离振子共振法考察对IgG的结合活性。首先，制作序列编号11及13所示的天然型RNA，考察对IgG的结合活性。天然型RNA通过化学合成模板DNA(欧贝隆公司制造)、使用T7RNA聚合酶(宝生物公司制造)进行转录而制得。结合活性与实施例1相同，由表面等离振子共振法测定。使用人IgGl(卡尔生物化学公司制造)作为IgG。由结果可知，IgGl的结合量降低，序列编号11及13表示的天然型RNA对IgG具有结合活性。接着，以序列编号17为基础，制作如下所述修饰不同的序列编号17-1至17-14所示的RNA。序列编号17H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)序列编号17-1(23F1)H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)序列编号17-2(23F2)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula>G(OMe)G(OMe)A(OH)G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(F)U(F)C(F〉C(F)G(OMe)A(OMe)A(OMe)A(OMe)G(OH)G(OH)A(OH)A(OH)C(F)U(F〉C(OMe)C(OMe)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)序列编号17-9(23F32)(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)序列编号I7-10(23F33)(OMe(H〉A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)序列编号17-11(23F41)G(OMe)G(OMe)A(OH)G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(F)U(OMe)C(F)C(F)G(OMe)A(OMe)A(OMe)A(OMe)G(OH)G(OH)A(OH)A(OH)C(F)U(F)C(OMe)C(OMe)A(H)A(H〉A(H)A(H)A(H〉A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)序列编号17-12(23F42)G(OMe)G(OMe)A(OH)G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(F)U(F〉C(OMe)C(F)G(OMe)A(OMe)A(OMe)A(OMe)G(OH)G(OH)A(OH)A(OH)C(F)U(F)C(OMe)C(OMe)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A00序列编号17-13(23F43)G(OMe)G(OMe)A(OH)G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(F)U(F)C(F)C(OMe)G(OMe)A(OMe)A(OMe)A(OMe)G(OH)G(OH)A(OH)A(OH)C(F)U(F)C(OMe)C(OMe)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)A(H)序列编号17-14(23F31)200680032429.2说明书第42/53页G(H〉G(H)A(OH)G(OH)G(0H〉U(F)G(OH)C(H)U(OMe)C(H)C(H)G(H)A(H)A(H)A(H)G(OHA(H)A(H)A(H)A(H〉A(H)A(H)RNA由化学合成制得(GeneDesign公司制造)。结合活性与实施例1相同，由表面等离振子共振法测定。IgG使用人IgGl(卡尔生物化学公司制造)。测定结果为序列编号17-1所示的RNA与序列编号17所示的RNA显示相同程度的结合活性。另外，序列编号17-2、17-4至17-14所示的RNA的结合活性比序列编号17所示的RNA更高。另一方面，序列编号17-3所示的RNA的结合活性比序列编号17所示的RNA低。以序列编号15所示的核酸为基础同样操作制备修饰改变体，考察其对人IgG的结合活性。序列编号15序列编号15-1(30F-1)C(H)C(H)A(H)C(F)G(OH)C(F)G(OH)G(OH)A卿A(OH)C(F)U(F)C(H)C(H)序列编号15-2(30F-2)C(H)C(H)A(H)C(H)G(OH)C(H)G(OH)G(OH)A(OH)A(OH)C(F)U(F)C(H)C(H)序列编号15-3(30F-3)C(H)C(H)A(H)C(H)G(OH)C(H)G(OH)G(OH)A(OH)A(OH)C(F)U(F)C(H)C(H)序列编号15-4(30F-4)A(H)A(H)C(H)G(OH)C(H)G(OH)G(OH)A(OH)A(OH)C(F〉U(F)C(H)C(H)由用表面等离振子共振法测定的结果可知，序列编号15-1至15-3所示的核酸具有与序列编号15所示的核酸同等的结合活性。总结以上结果并示于表3-1及表3-2。表3中用+表示结合活性的高度，+数越多表示活性越高。另外，将序列编号17-2表示的RNA与IgG结合的状态示于图31。表3-l<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>表3-2<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>[实施例8]GGUGCU的突起结构为了考察GGUGCU以外的序列是否为与IgG具有亲和性的序列，进行最适化SELEX。最初的池使用将GGUGCU的部分随机排列的RNA。该RNA池由以下述所示的化学合成制得的DNA为模板，使用DUraSCribeTMT7转录试剂盒(艾匹森特公司制造)进行转录而制得。DNA模板5，-tgtcggccgttacagttccggtttcccgg-6N-tgtaactcgtccattgtccc画3，(序列编号31)弓I物G:5，-taatacgactcactatagggacaatggacgagttac-3，(序歹ll编号32)引物H:5'-tgtcggccgttacagttc-3，(序列编号33)RNA池的理论上的变异为4096。以说明书为基础，将40吗的人IgG(孜梅德试验)固定于40)iL的NHS-活化的琼脂糖珠(安玛西亚生物科学公司制造)。SELEX与实施例l相同地进行。考察3回合完成后的序列，结果48序列中36序列含有GGUGCU。使用MFOLD程序考察二级结构，不存在以与GGUGCU不同序列形成与GGUGCU相同的突起结构。另外，使用表面等离振子共振法考察结合活性，结果不存在为与GGUGCU不同的序列、且对人IgG具有结合活性的序列。接着，对于第2回合完成后的序列考察48个序列。含有GGUGCU的序列存在1个序列。使用MFOLD程序预测所有序列的二级结构，结果含有GGUGAU的序列形成与GGUGCU相同的突起结构。使用表面等离振子共振法考察该克隆与IgG的亲和性，结果可知该克隆对IgG具有结合活性。另外，ACCGAC序列虽可见于2个克隆，但该序列未结合于IgG。若使用MFOLD程序，则发现除了GGUGCU及GGUGAU以外还形成与GGUGCU相同的突起结构的序列。化学合成含有这样的序列来代替序列编号17-7所示的核酸的GGUGCU的核酸，使用表面等离振子共振法测定与人IgGl的结合活性。代替GGUGCU使用的序列如下所述。序列编号17-7突起部分的序列g(oh)g(oh)u(f)g(oh)c(h)u(oh;)序列编号17-7-1突起部分的序列G(OH)A(OH)U(F)G(OH)C(H)U(OH)序列编号17-7-2突起部分的序列G(OH)C(F)U(F)G(OH)C(H)U(OH)序列编号17-7-3突起部分的序列G(OH)G(OH)C(F)G(OH)C(H)U(OH)序列编号17-7-4突起部分的序列G(OH)G(OH)U(F)A(OH)C(H)U(OH)序列编号17-7-5突起部分的序列G(OH)G(OH)U(F)U(F)C(H)U(OH)序列编号17-7-1至17-7-5中不存在对人IgG具有结合活性的序列。序列编号17-7所示的核酸的GGUGCU如G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(F)U(F)所示，含有嘧啶碱基的核苷酸的核糖2'位被氟化。考察利用其他修饰方法是否存在对人IgG具有结合活性的序列。实验使用的核酸如下所述，经化学合成制得。使用表面等离振子共振法考察对人IgGl的结合活性。序列编号17-7突起部分的序列G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(H)U(F)序列编号17-7-101突起部分的序列G(OH)G(F)U(F)G(OH)C(H)U(F)序列编号17-7-102突起部分的序列G(OH)G(OH)U(OH)G(OH)C(H)U(巧序列编号17-7-103突起部分的序列G(OH)G(OH)U(H)G(OH)C(H)U(F)序列编号17-7-104突起部分的序列G(OH)G(OH)U(F)G(F)C(H)U(F)序列编号17-7-105突起部分的序列G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(OH)U(F)序列编号17-7-106突起部分的序列G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(H)U(OH)序列编号17-7-107突起部分的序列G(OH)G(OH)U(F)G(OH)C(H)U(OMe)由结合活性的测定结果可知，17-7-101、17-7-104至107具有与17-7同等的结合活性。另外，17-7-102及17-7-103不具有结合活性。将以上归纳于表4。表4中用+表示结合活性的高度，+数越多表示活性越高。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table>由上可知，GGUGCU及GGUGAU的突起结构对于与IgG的结合很重要。另外，还可知，天然的核糖核苷酸(核糖的2'位为OH)或去氧核糖核苷酸(核糖的2'位为H)时，GGUGCU的第3个的U的结合活性消失。[实施例9]使用了RNA适配体的IgG纯化法的相关实验将序列编号15及17所示的RNA固定于珠上，进行人IgGl的下拉(pull-down)实验。在各200pL的管(爱思进公司制造)中放入低聚(dT)-纤维素珠(Oligo(dT)-Cellulosebeads)(安玛西亚生物科学公司制造)10u1，用牛血清白蛋白(博凌特曼海姆(BoehringetMannheim)公司制造)涂敷。向其中加入在3'末端附有16个A的RNA约10|ig进行固定。RNA通过化学合成DNA模板及引物(博奥公司制造)，再使用DuraScribeT7转录试剂盒(艾匹森特公司制造)对其转录而制得。通过用溶液A清洗将未结合的RNA除去后，加入20吗的人IgGl(卡尔生物化学)，于室温下保持30分钟。用溶液A将未结合于RNA的人IgGl清洗除去。接着，在珠中加入试样缓冲液，于65'C下加热15分钟，利用SDS-PAGE进行分析。6x试样缓冲液是混合1.3g十二垸基硫酸钠(SDS)、3mL2-巯基乙醇、4.2mL丙三醇、1.5mg溴苯酚蓝而制备。SDS-PAGE的结果表示于图32。泳道1为配体使用序列编号15的适配体的情况，泳道2使用序列编号17的适配体的情况。上面的带为IgG的重链(H链)的带，下面的带为轻链(L链)的带。可知，通过将序列编号15或17表示的RNA作为抗体纯化用分离剂的配体使用，可将IgG下拉。取结合有ProteinA的珠(安玛西亚生物科学公司制造)以及结合有由基因重组除去了白蛋白结合区域的ProteinA(rProteinA)的珠(安玛西亚生物科学公司制造)10pL，加入20吗的人IgGl，同样地进行IgG的纯化。使用pH3甘氨酸缓冲液作为洗脱液。利用SDS-PAGE分析洗脱液的结果示于图32。泳道3为将ProteinA作为配体的情况，泳道2为将rProteinA作为配体的情况。适配体能够以与ProteinA同等的性能将IgG下拉。考察是否可使用序列编号15表示的RNA从人血清纯化人IgG。另外，还考察中性洗脱液是否可将IgG洗脱。向每个200pL的管(爱思进公司制造)中放入结合有链霉抗生物素蛋白的琼脂糖珠(安玛西亚生物科学公司制造)10^L，以牛血清白蛋白涂敷。向其中加入在5'末端结合有生物素的RNA(基因设计公司制造)约lO)ag进行固定。除去未结合的RNA后加入20pL的人血清(卡米康国际公司制造)，于室温保持30分钟。用氯化钠-氯化镁缓冲液清洗除去未结合于RNA的人血清成分。氯化钠-氯化镁缓冲液为150mM氯化钠、2.5mM氯化镁、pH7.6的20mMTris缓冲液。用中性洗脱液洗脱结合于RNA的IgG。中性洗脱液使用(l)200mM氯化钾+10mMEDTA的混合溶液、(2)200mM氯化钾+10mMEDTA+10X甘油的混合溶液、(3)600mM氯化钾+10mMEDTA+10X甘油的混合溶液。为了研究回收的IgG量，利用SDS-PAGE分析洗脱液。另外为了考察没有被洗脱而结合于珠的IgG量，向去除洗脱液后的珠中加入试样缓冲液，于65。C加热15分钟，利用SDS-PAGE进行分析。将SDS-PAGE的结果示于图33。由泳道2至4可知使用适配体树脂，可从血清将人IgG以高纯度下拉。另外，由泳道6至8几乎未检测到IgG可知，通过使用中性洗脱液可以洗脱人IgG。取结合有rProteinA的珠10pL，加入人血清20iiL，同样进行IgG的纯化。洗脱液使用pH3的甘氨酸缓冲液。将利用SDS-PAGE分析洗脱液及珠的结果示于图33。可知，IgG的吸附容量虽有差异，但适配体树脂能够以与rProtdnA树脂同程度的纯度将IgG纯化。从使用适配体树脂时可在中性洗脱IgG的方面来看，适配体树脂比rProteinA树脂优越。使用小鼠血清(卡米康国际公司制造)进行同样的实验。使用rProteinA时IgG可下拉，而使用序列编号15所示的RNA时则不能下拉。可知，本发明的抗体纯化用RNA配体只能够以高纯度纯化人抗体。对于序列编号15所示的RNA是否可反复作为抗体纯化用分离剂的配体使用进行试验。如上所述，将结合有生物素的约10pig的RNA固定于lO(iL的链霉抗生物素蛋白的珠上，加入人血清，用中性溶液洗脱IgG。之后，用50pL6M尿素将珠清洗3次，为了除去尿素，用氯化钠-氯化镁缓冲液再将珠清洗3次后，再次加入人血清204L，用中性溶液洗脱IgG。将此步骤再进行一次，利用SDS-PAGE确认3次的抗体纯化中IgG的回收量(图34)。由其结果可知，经下拉的IgG的量在3次的抗体纯化中并无大差异。由此表示抗体纯化用的RNA配体可以用尿素清洗、再生。同样地用0.1M氢氧化钠进行清洗。重复操作3次进行纯化，IgG的回收量并无大幅度减少。接着，在序列编号16所示的RNA与序列编号17-2表示的RNA的5'末端结合生物素，如上所述，从人血清将IgG纯化。由其结果可知使用该RNA配体，可高纯度纯化IgG(图35)。由上可知，通过将RNA适配体作为配体使用，可以在中性条件下从人血清高效且高纯度地纯化IgG。[实施例10]使用了由硫醇偶合剂固定的RNA适配体的IgG纯化法的相关实验将序列编号15所示的RNA以硫醇偶合剂固定于珠，进行与实施例9相同的下拉实验。在序列编号15所示的RNA的5'末端C18的连接基，使之与硫醇基结合(基因设计公司制造)。将该RNA约20吗固定于活化的琼脂糖珠(安玛西亚生物科学公司制造)10pL。固定根据说明书来进行。固定量通过利用吸光度计测定固定前的RNA量与刚固定后的上清液中RNA量来估计。由其结果可知，偶合使用的RNA中90%以上的RNA被固定。使用该RNA适配体珠，进行与实施例9相同的下拉实验。向珠IO吗加入人血清5pL及l(HiL，进行清洗、基于中性洗脱液的洗脱，利用SDS-PAGE进行分析(图36)。由其结果可知IgG被高纯度下拉(图36泳道2、3)。与实施例9同样操作，进行使用rProteinA珠的下拉实验。向rProteinA珠10|iL加入人血清5|iL，清洗后加入SDS-PAGE用试样缓冲液，于65'C加热15分钟，利用SDS-PAGE进行分析(图36泳道5)。由该下拉实验的结果可知，通过使用经硫醇偶合剂固定的RNA适配体珠，可以在中性条件下，从人血清中高效且高纯度地纯化IgG。[实施例ll]使用了经氨基偶合而固定的RNA适配体的IgG纯化法的相关实验在RNA的5'末端插入C12的连接基，使之与氨基结合，由氨基偶合将RNA固定在树脂上。结合有氨基的RNA经由化学合成制作(基因设计公司制造)。RNA的固定使用Tresyl-TOYOPEARL树脂(东曹公司制造)。每lmL树脂使用10mg的RNA，将约8mg的RNA固定。固定量通过吸光度计测定偶合前后的上清液中RNA的量而求得。使用该适配体树脂，与实施例9同样操作，进行从人血清下拉IgG的实验。配体使用序列编号15(图37)及序列编号17-7、17-8、17-7-107、15所示的RNA(图38)。其结果显示从这些的任何适配体树脂，均以与rProteinA树脂同等的纯度将IgG下拉(图37、38)。当实施例9中使用适配体树脂时，显示出以200mM氯化钾+10mMEDTA的中性洗脱液可将IgG洗脱。在此，使用经氨基偶合而固定的序列编号17-7表示的适配体树脂，进行基于不同成分的中性洗脱液的IgG洗脱实验。洗脱液使用(l)200mM氯化钾+10mMEDTA+pH7.6的10mMTris、(2)200mM氯化钾+pH7.6的10mMTris、(3)300mM氯化钠+10mMEDTA+pH7.6的10mMTris、(4)10mMEDTA+pH7.6的10mMTris。与实施例9同样操作，将IgG从人血清下拉，使用SDS-PAGE分析用上述洗脱液洗脱的洗脱物。由其结果可知，只用氯化钾或EDTA可将IgG洗脱(图39)。考察用lM氯化钠溶液是否可将IgG洗脱。由于核酸带有负电荷，因此一般认为在与蛋白质的结合中主要是离子键。因而，要将与蛋白质的结合分开只要使用高盐浓度的溶液即可。使用1M氯化钠溶液作为洗脱液，进行与上述相同的实验，但洗脱液中未检测到IgG，几乎全吸附于适配体树脂。为了确认高浓度的氯化钠存在下适配体与IgG的结合，进行使用表面等离振子共振法的实验。运行缓冲液使用500mM氯化钠+2mM氯化镁+10mMpH7.6的Tris混合液。由其结果可知，即使存在500mM的氯化钠，所有结合活性均未降低。由上可知，结合于适配体树脂的IgG可以用200mM氯化钾溶液洗脱，但不能用1M氯化钠溶液洗脱。接着，进行适配体树脂经加热的再生及灭菌的相关实验。将已经使用3次的序列编号17-17或17-18所示的适配体树脂(l)加入超纯水，于85"C加热5分钟或(2)加入6M尿素，于65"C加热15分钟，再次进行下拉的实验。使用10pL的人血清，洗脱液使用200mM氯化鉀+10mMEDTA+pH7.6的10mMTris溶液。利用SDS-PAGE分析洗脱液，结果可知，经(1)及(2)的加热处理，适配体树脂几乎未恶化(图40)。考察在动的状态下是否可纯化IgG。将适配体树脂100|aL填充于小型柱(摩比科技公司(MoBiTec)的mobicols),加入人血清100|_iL。之后马上用注射筒加入溶液A，清洗树脂(溶液A:4mL，流速约lmL/分钟)。接着，使用中性洗脱液，将结合于适配体配体的IgG洗脱(中性洗脱液2mL，流速约lmL/分钟)。用SDS-PAGE考察洗脱的级分，结果确认IgG被洗脱。另外，测定各级分的吸光度，求出IgG的动态纯化量，结果可知，通过1次纯化，每lmL树脂可纯化3.5mg的IgG。[实施例12]使用树脂结合型oligo的IgG下拉实验至此为止，将化学合成制作的适配体经由polyA-polydT结合、生物素-链霉抗生物素蛋白结合、硫醇偶合、氨基偶合固定于树脂上使用。核酸以固定于树脂的状态合成，合成后从树脂分离再使用。以縮短从树脂分离和再结合到树脂的过程为目的，合成完成后不将核酸从树脂分离，而直接用于下拉实验(树脂结合型oligo)。树脂结合型oligo使用将序列编号15所示的RNA在低亲和性支持物(Oligoaffinitysupport)(高恩研究(GlenResearch)公司制造)上合成的(基因设计公司制造)。在树脂lOpL中加入人血清10pL将IgG下拉，用中性洗脱液洗脱，结果IgG以高纯度被纯化(图41)。[实施例13]评估对嵌合体抗体的结合活性使用表面等离振子共振法确认本适配体对于使用基因重组技术制得的医药品用的抗体是否具有结合活性。抗体使用作为医药品使用的利妥昔单抗(罗氏公司制造)，配体使用序列编号17-7所示的核酸。由测定的结果可知，序列编号17-7所示的核酸对利妥昔单抗具有结合活性(图42)。[工业上的可利用性]本发明提供对IgG具有结合能的核酸配体。本发明提供的核酸配体对IgG保持高结合活性及特异性。另外，由于可以化学合成，因此可容易地改变核苷酸序列，或者增加修饰。因而，将抗体利用于医药*试剂*诊断药时，可容易地根据各种需要，改变结合活性或稳定性，或者使之结合萤光物质或抗癌剂等增加新的功能。近年来将人化的单克隆抗体作为分子靶向药物而实用化，进行世界性抗体制剂的开发。因此，期待开发替代现在抗体纯化使用的ProteinA树脂分离剂的高功能性分离剂，该分离剂市场预测达到约500亿日元左右。本发明提供的核酸配体可作为抗体纯化用分离剂的配体使用，在中性条件下可简便高纯度地纯化目标抗体。这与以往的使用ProteinA的在酸性条件下的纯化大大不同，纯化中抗体失活的可能性小。另外，本发明提供的核酸配体可广泛用作用于结合抗体与萤光物质或酶的新型连接基、用于将抗体固定于基板或树脂的新型固定化剂、用于将抗体与抗癌剂或毒素结合的新型连接基。本发明可期待广泛用作与抗体相关的新型分离剂、试剂、医药产业化及研究用工具，其经济效果也大。本专利申请以2005年7月5日在日本提出专利申请的2005-195717及2005年12月12日在美国提出申请的美国临时申请US60/749026为基础，其内容援用于本说明书中。权利要求1.一种适配体，其特征在于，结合于IgG的Fc部分。2.如权利要求1所述的适配体，其特征在于，与作为IgG的Fc部分的人IgG的Fc部分特异性结合。3.如权利要求1或2所述的适配体，其特征在于，构成适配体的总核苷酸数为40个以下。4.如权利要求1至3中任一项所述的适配体，其特征在于，所述适配体含有的至少一种核苷酸为于核糖的2'位含有选自氢原子、氟原子、羟基及-O-Me基的至少2种基团的核苷酸。5.如权利要求3所述的适配体，其特征在于，所述适配体含有GGUG(C/A)(U/T)所示的核苷酸序列。6.如权利要求5所述的适配体，其特征在于，所述GGUG(C/AXU/T)中第3个的U为于核糖的2'位的羟基被氟原子取代的核苷酸。7.如权利要求6所述的适配体，其特征在于，所述GGUG(C/A)(U/T)中的除第3个的U之外的各核苷酸分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。8.如权利要求5所述的适配体，其特征在于，所述GGUG(C/A)(U/T)为GGUGCU或GGUGAU。9.如权利要求5所述的适配体，其特征在于，还含有ANC所示的核苷酸序列，其中N为选自A、G、C、U及T的核苷酸。10.如权利要求9所述的适配体，其特征在于，ANC中的各核苷酸分别相同或不同，为于核糖的2，位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2，位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。11.如权利要求9所述的适配体，其特征在于，所述适配体为以下(i)至(iii)中的任一者(i)于GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGA，且于ANC的3，侧含有UCC;(ii)于GGUG(C/AXU/T)的5'侧含有GGNxlA，且于ANC的3'侧含有UNx2CC，其中，Nxl、Nx分别为选自A、G、C、U及T的核苷酸；或，(iii)于GGUG(C/A)(U/T)的5'侧含有GGNx3Nx4A，且于ANC的3，侧含有UNxsNx6CC，其中，Nx3、Nx4、Nx5、Nx6分另U为选自A、G、C、U及T的核苷酸。12.如权利要求11所述的适配体，其特征在于，所述GGA、GGNxlA或GGNx3Nx4A中含有的GG，以及所述UCC、UNx2CC或UNx5Nx6CC中含有的CC分别为于核糖的2'位的羟基被氢原子取代的核苷酸。13.如权利要求6所述的适配体，其特征在于，具有以下(I)至(III)表示的潜在性二级结构式中，N1、N2、N3、N4、N5分别相同或不同，为选自A、G、C、U及T的核苷酸，NZ及NS为互相互补的核苷酸，W及NS为互相互补的核苷酸，(i)GGUG(C/A)(U/T)中的除第3个的U之外的各核苷酸、(ii)AN'C中的各核苷酸、(iii^至N5的各核苷酸分别为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。14.如权利要求11所述的适配体，其特征在于，环结构中的所有核苷酸于核糖的2'位的羟基被氢原子取代。15.如权利要求13所述的适配体，其特征在于，具有(I)至(III)中任一项所示的潜在性二级结构的适配体具有以下(r)至(m')中任一项所示的潜在性二级结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage0</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage0</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage0</formula>式中，N1、N2、N3、N4、NS的意义分别与权利要求13的相同。16.如权利要求3所述的适配体，其特征在于，含有AGGUG(C/A)(U/T)C所示的核苷酸序列，AGGUG(C/A)(U/T)C中第4个的U为于核糖的2'位的羟基被氟原子取代的核苷酸，AGGUG(C/A)(U/T)C中的除第4个的U之外的各核苷酸分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。17.如权利要求16所述的适配体，其特征在于，还含有GANCU所示的核苷酸序列，GANCU中的各核苷酸分别相同或不同，为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸，其中，N为选自A、G、C、U及T的核苷酸。18.如权利要求6所述的适配体，其特征在于，具有以下(Ia)至(IIIa)表示的潜在性二级结构:式中，N1、N2、N3、N4、N5、N6、N7分别相同或不同，为选自A、G、C、U及T的核苷酸，W及NS为互相互补的核苷酸，W及N5为互相互补的核苷酸，NS及N〒为互相互补的核苷酸，(i)GGUG(C/A)(U/T)中的除第3个的U之外的核苷酸、(ii)AN10的各核苷酸、(iii)NZ至N〒的各核苷酸分别为于核糖的2'位含有羟基的核苷酸，或于核糖的2'位的羟基被氢原子、氟原子或-O-Me基取代的核苷酸。19.如权利要求18所述的适配体，其特征在于，具有(Ia)至(IIIa)中任一项所示的潜在性二级结构的适配体具有以下(Ia')至(IIIa')中任一项所示的潜在性二级结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>Ga')式中，N1、N2、N3、N4、NS的意义与权利要求18的相同。20.如权利要求19所述的适配体，其特征在于，所述N4、NS分别为于2'位的羟基被氢原子取代的核苷酸，所述N5、:^分别为于2'位含有羟基的核苷酸。21.如权利要求19的适配体，其特征在于，具有(Ia')至(IIIa')中任一项所示的潜在性二级结构的适配体具有以下(Ia"')至(IIIa"')中任一项所示的潜在性二级结构22.如权利要求3所述的适配体，其特征在于，为以下(a)至(c)中的任一者(a)由序列编号1至23中任一项所示的核苷酸序列组成的适配体，其中，尿嘧啶也可为胸腺嘧啶；(b)由序列编号1至23中任一项所示的核苷酸序列所示的核苷酸序列中的1个或数个核苷酸经取代、缺失或附加后的核苷酸序列所组成的适配体，其中，尿喷啶也可为胸腺嘧啶；(c)选自所述(a)的连结物、所述(b)的连结物及所述(a)与(b)的连结物的连结物。23.—种复合体，其特征在于，含有权利要求1至22中任一项所述的适配体及与所述适配体结合的功能性物质。24.如权利要求23所述的复合体，其特征在于，所述功能性物质为亲和性物质、标记用物质、酶、药物、毒素或药物传递介质。25.—种固相载体，其特征在于，固定有权利要求1至22中任一项所述的适配体或者权利要求23或24所述的复合体。26.如权利要求25所述的固相载体，其特征在于，所述固相载体为基板、树脂、板、过滤器、筒、柱或多孔质材。27.—种医疗用设备，其特征在于，含有权利要求25或26所述的固相载体。28.如权利要求27所述的设备，其特征在于，所述医疗用设备为血液净化用设备。29.—种诊断用或检查用试剂，其特征在于，含有权利要求1至22中任一项所述的适配体、权利要求23或24所述的复合体或者权利要求25或26所述的固相载体。30.—种药物，其特征在于，含有权利要求1至22中任一项所述的适配体或者权利要求23或24所述的复合体。31.—种抗体纯化或浓縮方法，其特征在于，包括使IgG抗体吸附至权利要求25或26所述的固相载体，再用洗脱液使所吸附的IgG抗体洗脱的步骤。32.如权利要求31所述的方法，其特征在于，洗脱液为中性溶液。33.—种纯化抗体的制造方法，其特征在于，包括制备IgG抗体，再将制备的IgG抗体通过权利要求25或26所述的固相载体纯化的步骤。34.—种IgG的检测及/或定量方法，其特征在于，包括使用权利要求1至22中任一项所述的适配体、权利要求23或24所述的复合体或者权利要求25或26所述的固相载体，测定试样中有无IgG及/或IgG的量的步骤。全文摘要本发明提供了针对IgG的新型适配体及其利用方法等。更详细地说，本发明提供了与IgG(例如人IgG)的Fc部分结合的适配体；含有适配体和与其结合的功能性物质(例如，亲和性物质、标记用物质、酶、药物、药物传递介质)的复合体；固定有适配体或复合体的固相载体；含有固相载体的医疗器械；抗体纯化方法，其中包括使IgG抗体吸附到固相载体，再用洗脱液使吸附的IgG抗体洗脱的步骤；纯化抗体的制造方法，其中包括制备IgG抗体，再通过固相载体将制得的IgG抗体纯化的步骤。文档编号C12N15/09GK101258241SQ200680032429公开日2008年9月3日申请日期2006年7月5日优先权日2005年7月5日发明者中村义一,宫川伸申请人:力博美科股份有限公司