专利名称：肺表面活性液的制作方法
技术领域：
本发明属于生物制品，特别涉及一种肺表面活性液。
技术背景目前，大多数动物细胞的体外培养，都不同程度的依赖血清。血清除了供给细胞的营养成分外，还能促使细胞开始合成DNA，对细胞的增殖有很大 的作用。实验证明，提高血清的浓度，细胞生长的最大密度也随之增加。最 近一些研究表明血清在体外培养细胞中的作用，主要是提供了细胞增殖所必 需的生长因子。但是，由于血清的成分复杂，特别是在一些基础理论研究中， 往往影响实验结果。同时血清中也含有一定的细胞毒性物质和抑制物质，对 细胞有去分化作用，影响细胞功能的表达。特别是细胞生长因子、单克隆抗 体的制备以及细胞分泌产物的研究，都希望用无血清培养基来培养细胞。无 血清培养技术日益受到人们的重视。发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种肺表面活性液。是一种品质量 可靠，性能稳定的无血清培养基。本发明的技术方案是 一种肺表面活性液，其特征在于本肺表面活性液主要制作过程根据《中国生物制品操作规程》中无菌 提取法提取制成；主要技术路线无菌采取的新鲜牛肺，经过反复洗涤后得到洗涤液，在将得到的洗涤液离心，离心转数2000转/分钟，离心时间20分钟后，得到清液，在将清液除菌过滤即得到肺表面活性液，在将得到的肺表面活性液冷冻储存。 制作工艺方法过程(l)原料的选择选择健康未吃过初乳的黑白花小公牛；测得其IGg(抗体)低于0.02%;经抽血致死，在15分钟之内经金星消毒液、洛合碘消毒液 交替消毒后，在无菌的条件下采取新鲜牛肺；(2)提取将采取到的新鲜牛肺，用灭菌生理盐水约2000毫升，无菌反复 洗涤，收取洗涤液；(3) 离心将收集到的洗涤液于室温下振荡30分钟，离心2000转/分钟，20 分钟，收集清液；(4) 将收集到的清液用除菌滤芯过滤，除菌后得肺表面活性液，将其于 "8'C保存。本发明效果是-肺表面活性液是一种无血清培养基。肺表面活性液含有丰富的营养物质， 包括大分子的蛋白质和核酸等。动物细胞的生长增殖，可补加部分肺表面活 性液代替血清。实验证明肺表面活性液对细胞附着和保护尚有明显作用，且 能中和有毒物质的毒性，使细胞不受伤害。肺表面活性液被全国数十个科研院所和生产单位用于实验和生产，该产 品质量可靠，性能稳定。如在支持细胞增殖方面，Sp2/0-Ag14细胞的倍增时 间不超过15小时，而血清做培养基的倍增时间是20小时。
具体实施方式
肺表面活性液，是我单位通过十来年的小试、中试研究出来的一种现已 用于生产的新的生物制品。目前全国仅我单位独家生产。肺表面活性液，是从出生不超过8小时未吃过初乳的健康黑白花小公牛 中精选出来的，是从低抗体的健康小公牛身上提取的一种肺表面活性剂。一、 主要原料精选健康未吃初乳的黑白花小公牛。 辅料灭菌生理盐水注射液，灭菌、消毒药。二、 制作方法主要制作过程根据《中国生物制品操作规程》中无菌提取法提取制成。1、 主要技术路线无菌采取的新鲜牛肺——反复洗涤——得洗涤液——离心(2000转/分钟， 20分钟)——得清液——除菌过滤——得肺表面活性液——冷冻储存。2、 工艺过程(1)原料的选择选择健康未吃过初乳的黑白花小公牛。测得其IGg(抗体)低于0.02%。经抽血致死，在15分钟之内经金星消毒液、洛合碘消毒液 交替消毒后，在无菌的条件下采取新鲜牛肺。(2)提取将采取到的新鲜牛肺，用灭菌生理盐水约2000毫升，无菌反复 洗涤，收取洗涤液。(3) 离心:将收集到的洗涤液于室温下振荡30分钟，离心2000转/分钟，20 分钟，收集清液。(4) 将收集到的清液用除菌滤芯过滤，除菌后得肺表面活性液，于-18 "C保存。
权利要求
1. 一种肺表面活性液，其特征在于本肺表面活性液主要制作过程根据《中国生物制品操作规程》中无菌提取法提取制成；主要技术路线无菌采取的新鲜牛肺，经过反复洗涤后得到洗涤液，在将得到的洗涤液离心，离心转数2000转/分钟，离心时间20分钟后，得到清液，在将清液除菌过滤即得到肺表面活性液，在将得到的肺表面活性液冷冻储存。
2、 根据权利要求1所述的肺表面活性液，其特征在于制作工艺方法过程(l)原料的选择选择健康未吃过初乳的黑白花小公牛；测得其IGg(抗 体)低于0.02%;经抽血致死，在15分钟之内经金星消毒液、洛合碘消毒液 交替消毒后，在无菌的条件下采取新鲜牛肺；(2)提取将采取到的新鲜牛肺，用灭菌生理盐水约2000毫升，无菌反复 洗涤，收取洗涤液；(3) 离心:将收集到的洗涤液于室温下振荡30分钟，离心2000转/分钟，20 分钟，'收集清液；(4) 将收集到的清液用除菌滤芯过滤，除菌后得肺表面活性液，将其于 -18匸保存。
全文摘要
本肺表面活性液主要制作过程无菌采取的新鲜牛肺，经过反复洗涤后得到洗涤液，在将得到的洗涤液离心，得到清液，在将清液除菌过滤即得到肺表面活性液，在将得到的肺表面活性液冷冻储存。肺表面活性液是一种无血清培养基。肺表面活性液含有丰富的营养物质，包括大分子的蛋白质和核酸等。动物细胞的生长增殖，可补加部分肺表面活性液代替血清。实验证明肺表面活性液对细胞附着和保护尚有明显作用，且能中和有毒物质的毒性，使细胞不受伤害。肺表面活性液经全国数十个科研院所和生产单位用于实验和生产，该产品质量可靠，性能稳定。如在支持细胞增殖方面，Sp2/0-Ag14细胞的倍增时间不超过15小时，而血清做培养基的倍增时间是20小时。
文档编号C12N5/06GK101270348SQ200710056979
公开日2008年9月24日 申请日期2007年3月22日 优先权日2007年3月22日
发明者康志强, 燕 陈 申请人:天津市正江高科技有限公司