抗csf-1r的抗体的制作方法
【专利摘要】本发明提供对CSF-1R特异的抗体、包含该抗体的组合物及使用这类组合物的治疗方法。
【专利说明】抗CSF-1R的抗体
[0001]相关申请的交叉参考
[0002]本申请是2010年9月13日提交的美国申请号12/922,441的部分继续申请，其是2009年3月11日提交的基于PCT/EP2009/001733的美国国家阶段申请，且其要求2008年3月14提交的欧洲申请号08 36 0005.6的优先权及2008年4月10日提交的美国临时申请号61/043，884的权益。
[0003]序列表
[0004]本申请包含已通过EFS-Web提交的序列表，且在此完整引入作为参考。2011年3月30日创建的该ASCII拷贝命名为13026944.txt，大小为56，764字节。
[0005]发明概述
[0006]CSF-1 (集落刺激因子-1)是尤其由多种类型的细胞表达的细胞因子。它是表达CSF-1受体(CSF-1R)的单核吞噬细胞系的细胞的分化、生长和存活因子(SHERR.Colony-stimulating factor-1 receptor, blood.1990,第 75 卷，第 I 期，第 1-12 页)。CSF-1R是由c-fms原癌基因编码的酪氨酸激酶受体，包含组织在五个免疫球蛋白样亚结构域中的细胞内激酶结构域和配体结合胞外区。对CSF-1的响应导致提高的存活、生长、分化和可逆的功能改变。c-fms基因本身是巨噬细胞分化标志。c-fms表达的程度强于包括溶菌酶和巨噬细胞特异性蛋白质酪氨酸磷酸酶的其他巨噬细胞特异性基因表达的程度(HUME 等 Regulation of CSF-1 receptor expression.Molecular reproduction anddevelopment.1997,第 46 卷，第 I 期，第 46-52 页)。
[0007]除单核吞噬细胞系的细胞外，CSF-1R还由许多类型的人肿瘤表达。在乳腺癌中，CSF-1R表达与更大的肿瘤大小和降低的存活相关(KLUGER等Macrophagecolony-stimulating factor-1 receptor expression is associated with poor outcomein breast cancer by large cohort tissue microarray analysis.Clinical cancerresearch.2004，第 10 卷，第 I 期，第 173-7 页；SCH0LL 等 Ant1-colony-stimulatingfactor-1 antibody staining in primary breast adenocarcinomas correlates withmarked inflammatory cell infiltrates and prognosis.Journal of the NationalCancer Institute.1994，第86卷，第2期，第120-6页)。在上皮卵巢癌中，大多数原发性肿瘤和转移灶强烈表达CSF-1R，且转移灶常共表达CSF-1和CSF-1R。CSF-1R还由肿瘤浸润巨嗷细胞表达(CHAMBERS 等 Overexpression of epithelial macrophagecolony-stimulating factor(CSF-1)and CSF-1receptor:a poor prognostic factorin epithelial ovarian cancer, contrasted with a protective effect of stromalCSF-1.Clinical Cancer Research.1997，第 3 卷，第 6 期，第 999-1007 页)。在卵巢和子宫内膜癌中，Northern印迹分析显示，绝大多数肿瘤共表达CSF-1和CSF-1R，而在正常子宫内膜组织样品中仅检测到弱的CSF-1R表达(ΒΑ?Ο(:Χ:Η!等Expressionof the macrophage colony-stimulating factor and its receptor in gynecologicmalignancies.Cancer.1991,第67卷，第4期，第990-6页)。在宫颈癌中，与正常子宫内膜相比，CSF-1R表达在肿瘤间质中和肿瘤上皮中都上调(KIRMA等Elevated expression ofthe oncogene c-fms and its ligand，the macrophage colony-stimulating factor-1, incervical cancer and the role of transforming growth factor—betalin inducingc-fms expression.Cancer res..2007，第 67 卷，第 5 期，第 1918-26 页)。在肾癌中，表达高水平CSF-1R的肿瘤相关巨噬细胞的浸润与肿瘤进展相关(HEMMERLEIN等Expressionof acute and late-stage inflammatory antigens, c-fms, CSF-1, and human monocyticserine esterase I，in tumor-associated macrophages of renal cell carcinomas.Cancer immunology, immunotherapy.2000，第 49 卷，第 9 期，第 485-92 页)。CSF-1R 由接近100%的前列腺上皮内瘤病或癌样品表达(IDE等Expression of colony-stimulatingfactor I receptor during prostate development and prostate cancer progression.Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A..2002，第 99 卷，第 22 期，第 14404-9 页)。还已在急性成粒细胞白血病和B细胞慢性淋巴细胞白血病中检测到了 CSF-1R表达(RAMBALDI等Expressionof the macrophage colony-stimulating factor and c-fms genes in human acutemyeloblastic leukemia cells.Journal of Clinical Investigation.1988，第81卷，第4 期，第 1030-5 页)。
[0008]通过免疫组织化学和原位杂交进行的研究已证明CSF-1在侵入性乳腺癌细胞中表达的特异性，而在管内或非侵入性肿瘤细胞中未观察到这种产生(SCH0LL等 Ant1-colony-stimulating factor-1 antibody staining in primary breastadenocarcinomas correlates with marked inflammatory cell infiltrates andprognosis.Journal of the National Cancer Institute.1994，第 86 卷，第 2 期，第120-6 页；TANG 等 M-CSF (monocyte colony stimulating factor) and M-CSF receptorexpression by breast tumor cells:M~CSF mediated recruitment of tumorinfiltrating monocytes?.Journal of cellular biochemistry.1992，第 50 卷，第 4期，第350-6页)。侵入性肿瘤细胞的CSF-1表达与它在患者血浆中浓度的提高相关，其中与正常个体中的低于300pg/ml相比，它可以超过1000pg/ml。高血清浓度与疾病的晚期和不利的长期预后相关((SCHOLL 等 Circulating levels of colony-stimulatingfactor I as a prognostic indicator in82patients with epithelial ovariancancer.British journal of cancer.1994，第 69 卷，第 2 期，第 342-6 页；SCH0LL.Circulating levels of the macrophage colony stimulating factor CSF-1in primaryand metastatic breast cancer patients.A pilot study.Breast cancer research andtreatment.1996,第39卷，第3期，第275-83页)。此外，已证明，CSF-1剌激肿瘤细胞的移动性和侵袭力(D0RSCH 等 Macrophage colony-stimulating factor gene transferinto tumor cells induces macrophage infiltration but not tumor suppression.European journal of immunology.1993，第 23 卷，第 I 期，第 186-90 页；WANG 等Induction of monocyte migration by recombinant macrophage colony-stimulatingfactor.Journal of immunology.1988，第 141 卷，第 2 期，第 575-9 页；FILDERMAN 等Macrophage colony-stimulating factor (CSF-1)enhances invasiveness in CSF-1receptor-positive carcinoma cell lines.Cancer res..1992，第 52 卷，第 13 期，第3661-6 页)。
[0009] CSF-1还对髓系袓细胞具有趋化作用，其便于单核细胞在肿瘤中浸润。但是，这些单核细胞的存在不足以观察到免疫系统对肿瘤的破坏(DORSCH等Macrophagecolony-stimulating factor gene transfer into tumor cells induces macrophageinfiltration but not tumor suppression.European journal of immunology.1993，第23卷，第I期，第186-90页)。在常见于患有乳腺、卵巢或胰腺肿瘤的患者中的高血清含量下，CSF-1似乎使这些单核细胞向巨噬细胞分化，而不向能够呈递肿瘤抗原，从而起始针对肿瘤细胞的有效的细胞毒性免疫反应的树突细胞分化(SCHOLL.Circulating levels ofthe macrophage colony stimulating factor CSF-1 in primary and metastatic breastcancer patients.A pilot study.Breast cancer research and treatment.1996,第 39卷，第3 期，第275-83 页；BARON 等 Modu I at ion of MHC class II transport and lysosomedistribution by macrophage-colony stimulating factor in human dendritic cellsderived from monocytes.Journal of cell science.2001,第 114 卷，第 pt5 期，第999-1010 页)。
[0010]CSF-1还为破骨细胞的增殖和分化所必需(CECCHINI等Role of CSF-1 in boneand bone marrow development.Molecular reproduction and development.1997,第 46卷，第I期，第75-83页)。破骨细胞是表达CSF-1R的多核细胞，衍生自在骨发育、稳态和修复过程中主要负责降解矿化骨的造血袓细胞。在诸如骨质疏松、恶性高血钙、类风湿性关节炎、肿瘤转移和佩吉特病(Paget' s disease)的骨骼障碍中，破骨细胞的骨吸收超过成骨细胞的骨形成，导致减少的骨质量、骨骼脆性和骨折(BRUZZANITI等Molecular regulationof osteoclast activity.Reviews in endocrine.2006，第 7 卷，第 1-2 期，第 123-39页)。例如，晚期乳腺癌患者常发展骨转移。由于提高的破骨细胞活性引起的肿瘤驱动的骨丢失(骨质溶解)，骨转移导致难治的疼痛和高骨折风险(CICEK等Breast cancer bonemetastasis and current small therapeutics.Cancer metastasis reviews.2006，第25卷，第4期，第635-44页)。已显示，骨质溶解与高水平的循环CSF-1相联系(KITAURA等The journal of clinical investigation.M-CSF mediates TNF—induced inflammatoryosteolysis.2005，第 115 卷，第 12 期，第 3418-27 页)。
[0011]CSF-1途径还涉及介导诸如炎性肠病的疾病中的肠炎(MARSHALL等Blockade ofcolony stimulating factor-1 (CSF-1) leads to inhibition of DSS-1nduced colitis.1nflammatory bowel diseases.2007，第 13 卷，第 2 期，第 219-24 页)，介导急性同种异体移植排斥期间的巨嗷细胞增殖(JOSE等Blockade of macrophage colony-stimulatingfactor reduces macrophage proliferation and accumulation in renal allograftrejection.American journal of transplantation.2003，第 3 卷，第 3 期，第 294-300页)，及感染的巨嗷细胞中的HIV-1复制(KUTZA等Macrophage colony-stimulatingfactor antagonists inhibit replication of HIV-1 in human macrophages.Journal ofimmunology.2000，第 164 期，第 4955-4960 页)。
[0012]由于这些原因，已提出通过多种化合物抑制CSF-1活性来治疗癌症和骨降解。
【背景技术】
[0013]WO 01/30381涉及CSF-1活性的抑制剂在产生用于治疗肿瘤疾病的药物中的用途。所提出的两种用于抑制CSF-1活性的方法是抑制CSF-1活性本身和抑制CSF-1R的活性。优选将抗CSF-1或其受体的中和性抗体作为CSF-1活性的抑制剂。
[0014]WO 03/059395描述用于治疗癌症的组合产品，其包含能够抑制CSF-1活性的物质和具有细胞毒性活性的物质的。
[0015]WO 2005/068503公开了通过对个体施用抗CSF-1的抗体来预防和治疗骨质溶解、
癌转移及与癌转移相关的骨丢失的方法。
[0016]EP 1488792 A涉及通过有效抑制CSF-1R酪氨酸激酶活性来显示选择性抑制分化、增殖或介质释放的单环和/或二环芳基或杂芳基(heteroaryl)喹唑啉化合物的用途。此申请还涉及这类化合物在制备用于抑制异常细胞增殖的药物中的用途。
[0017]US 2005059113涉及特异性结合aCSF-Ι的抗体及其抗原结合部分。该发明还涉及人抗-CSF-1抗体及其抗原结合部分。此发明申请还提供基因疗法，其使用编码包含人抗-CSF-1抗体的重链和/或轻链免疫球蛋白分子的核酸分子。
[0018]Roussel 和 S h e r r，I 9 8 9，P N A S，8 6，7 9 2 4 - 7 9 2 7 及 Ashmun等，1989，Blood, 73，827-837公开抗人CSF-1受体的单克隆抗体(例如12-3A3和2-4A5)，其特异性阻断CSF-1与人受体的结合，从而抑制配体依赖性生长。已将识别的表位定位在349-512位氨基酸之间。
[0019]W02009/026303提供抗原结合蛋白质，其能够与CSF-1竞争，从而防止CSF-1与它的受体结合，且在某些实施方案中，该蛋白质抑制IL-34和CSF-1R之间的结合。此外，W02009/026303的实验部分显示，发明人研发的抗体结合这样的表位，该表位主要定位在CSF-1R的SEQ ID NO 29的氨基酸20至223之间的N端(对应于W02009/026303中的Ig样环I和Ig样环2),且需要存在Ig样环I和Ig样环2两个区域。
【发明内容】
[0020]本发明涉及抗体，该抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R。
[0021]除非文中清楚地另有说明，本申请通篇使用的术语“一个”和“该”以这样的含义使用，它们意指“至少一个”、“至少第一个”、“一个或多个”或“多个”所提到的成分或步骤。例如，术语“该细胞”包括多个细胞，包括其混合物。
[0022]无论在本文中的什么地方使用，术语“和/或”包括“和”、“或”及“通过该术语连接的元件的全部或任意其他组合”的含义。
[0023]本文所用的术语“约”或“大约”意指给定的值或范围的20%之内，优选10%之内，且更优选5%之内。
[0024]本文所用的术语“包含”和“包括”旨在意指部分、产品、组合物和方法的组合包括所提到的成分或步骤，但不排除其他成分或步骤。在用来定义产品、组合物和方法时，“基本上由…组成”将意指排除具有任何必须意义的其他成分或步骤。因此，组合物基本上由所引述的成分组成将不排除痕量污染物和可药用载体。“由…组成”将意指排除痕量元素，及其他成分或步骤。
[0025]本文所用的术语“特异性结合”指决定靶蛋白在蛋白质和其他生物制品的异源群体的存在下存在的结合反应。因此，在指定的测定条件下，本发明的抗体优先与CSF-1R的至少部分结合，而不以显著的量与存在于测试样品中的其他成分结合。本发明的抗体和CSF-1R靶标之间的特异性结合意指结合亲和力为至少ΙΟΙ1，且优选IO5M-1UO6M' IO7M'IObW1AO9W1或IOkiM'在尤其有利的实施方案中，结合亲和力为至少ΙΟ、—1或IOiqM'
[0026]本文所用的术语“CSF-1R”指人CSFl受体。人CSF-1受体已测序，且其氨基酸序列显示在SEQ ID NO:29中。
[0027]本文所用的“抗体”或“Ab”以最广泛的含义使用。因此，“抗体”或“Ab”可以是天然存在的或人造的，如通过常规杂交瘤技术、重组技术产生的单克隆抗体(mAb)和/或其功能片段。本发明的抗体意在包括以下二者:完整的免疫球蛋白分子，例如多克隆抗体、单克隆抗体(mAb)、单特异性抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、人抗体、动物抗体(例如骆驼抗体)、嵌合抗体；及其部分、片段、区域、肽和衍生物(通过任意已知的技术提供，如，但不限于酶切割、肽合成或重组技术)，例如，缺乏轻链的免疫球蛋白(见例如US 6，005，079),Fab,Fab\F(ab/ )2、Fv, scFv、抗体片段、双抗体、Fd、⑶R区，或抗体的能够结合抗原或表位的任意部分或肽序列。如果抗体能够与分子特异性反应，从而使分子结合于抗体，则称该抗体“能够结合”该分子。抗体片段或部分可以缺乏完整抗体的Fe片段、更快地从循环清除，且可以具有比完整抗体少的非特异性组织结合。可以用本领域公知的方法来从完整抗体产生抗体的实例，例如通过诸如木瓜蛋白酶(产生Fab片段)或胃蛋白酶(产生F(ab' )2片段)的酶的蛋白酶切割(见例如Wahl等，24J.Nucl.Med.316-25 (1983))。抗体的部分可以通过任意以上方法来制备，或者可以通过表达重组分子的部分来制备。例如，可以分离重组抗体的一个或多个⑶R区，并亚克隆入适当的表达载体。[0028]本文所用的术语“可变区”指轻链(VL)或重链(VH)的可变区或结构域，其包含用于结合识别特异性的决定子。可变结构域涉及抗原识别，并形成抗原结合部位。本文所用的术语“构架区”指在同一物种的不同抗体之间至少85%同源的轻链和重链可变区的部分(即除CDR外)。本文所用的术语“同源”指两条多肽的氨基酸的比较，其在用Smith-Waterman算法(SMITH等 Identification of common molecular subsequences.Journal of MolecularBiology.1981，第147期，第195-7页)比对时，大致具有指定百分比的相同氨基酸。例如，“85%同源”指两条多肽的氨基酸的比较，其在最佳比对时具有85%氨基酸同一性。如Kabat数据库(Kabat等，ο第页cit.)中所定义，重链和轻链的可变区都分为包含被三段高变区序列或互补决定区(⑶R)打断的四个构架亚区(FR1、FR2、FR3和FR4)的区段，⑶Rl位于FRl和FR2之间，CDR2在FR2和FR3之间，CDR3在FR3和FR4之间。不将具体的亚区指定为FRl、FR2、FR3或FR4，通过其他方式提到的构架区代表单条天然存在的免疫球蛋白链可变区内组合的FR。本文所用的单数形式的FR代表四个亚区之一，复数形式的FR代表构成构架区的四个亚区中的两个或多个。不同轻链或重链的构架区的序列在物种内相对保守。抗体的构架区是组成的轻链和重链的组合构架区，且用来定位和排列CDR。CDR主要负责形成赋予对抗原表位的结合特异性和亲和力的抗体结合部位。提供抗原结合区的H或L链的可变区内是由于其在不同特异性的抗体之间的极端变异性而称为“高变”的更小序列。这类高变区还称为“互补决定区”或“⑶R”区。这些⑶R区负责抗体对具体的抗原决定簇结构的基本特异性。⑶R代表可变区内的非连续氨基酸序列，但不考虑物种，已发现这些关键氨基酸序列在可变重链和轻链区内的位置定位在可变链的氨基酸序列内具有相似的定位。所有抗体的可变重链和轻链各具有3个CDR区，对于各轻(L)链和重(H)链，每个CDR区与其他 CDR 区不连续(称为 L1、L2、L3、H1、H2、H3)。Kabat 等，252J.Biol.Chem.6609-16(1977)已描述了公认的CDR区，且可以通过在检查线性氨基酸序列期间应用这些规则来鉴定CDR环。但是，用于定义CDR-H3环的规则可以不同(见Chapter 4, Antibody Engineering:Methods&Protocols, (Lo, ed.Humana Press, Totowa, NJ, 2004)),且一些 CDR-H3 环的实际边界在无诸如圆二色性、核磁共振或X射线晶体分析法的实验技术的情况下不可鉴定。在所有哺乳动物物种中，抗体肽包含恒定(即高度保守)区和可变区，且在后者中，存在CDR及由处于重链或轻链的可变区之内但在CDR之外的氨基酸序列组成的所谓“构架区”。还可以用Chothia 命名(CH0THIA 和 LESK.Canonical structures for the hypervariable regionsof immunoglobulins (1987) J Mol Biol.1987 年 8 月 20 日;196 (4): 901-17)来定义 CDR区。因此，在某些实施方案中，⑶R是Kabat定义的⑶R，在其他实施方案中，⑶R是Chothia定义的CDR。关于抗体的CDR区识别的抗原决定簇，这还称为“表位”。换言之，表位指能够被抗体识别和结合的任意分子的部分(对应的抗体结合区可以称为互补位)。通常，表位由分子的具有化学活性的表面分组(例如氨基酸或糖侧链)组成，且具有特异的三维结构特征以及特异的电荷特征。
[0029]本文所用的术语“单克隆抗体”或“mAb”指衍生自单克隆的抗体。可以用杂交瘤技术来制备单克隆抗体，如 HARLOW.Antibodies: A Laboratory manual.第二版.Cold SpringHarbor:Laboratory 印制，1988 和 HAMMERLING 等 Monoclonal Antibodies and T CellHybridomas.New York:Elsevier, 1981.第 563-681 页中公开的那些。
[0030]本文所用的术语“人抗体”指具有衍生自或密切匹配人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本发明的人抗体可以包含并非由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机诱变或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。因此，本文所用的术语“人抗体”指其中蛋白质的基本上每个部分都基本上类似于人种系抗体的抗体。“基本上类似”指抗体具有与人种系抗体的核酸序列至少80%、优选85%、更优选90%和甚至更优选95%同源的核酸序列。
[0031]本文所用的术语“Fab”指抗体分子的区域，其包含重链和轻链的可变区，且其显示结合活性。“Fab”包含一条重链和一条轻链的聚集(常称为Fab)，以上任一种共价或非共价聚集，只要该聚集能够选择性地与具体的抗原或抗原家族反应。Fab片段是包含VL和第二多肽的异二聚体，该第二多肽包含VH和CHl结构域。在优选实施方案中，该抗体是Fab'片段。Fab'片段与Fab片段 的不同在于，Fab'片段在重链CHl结构域的羧基端包含几个残基，包括来自抗体“铰链区”的一个或多个半胱氨酸。
[0032]“F(ab' )2”指通过胃蛋白酶处理抗体获得的抗体片段，或指通过其他诸如重组技术的技术获得的等同蛋白质。F(ab' )2具有两个抗原结合部位，且仍能够交联抗原。
[0033]“Fv”是包含完整的抗原识别和结合部位的最小抗体片段。此区域由紧密非共价结合的一个重链可变结构域和一个轻链可变结构域的二聚体组成。每个可变结构域的三个CDR正是在此构象中相互作用来定义VH VL 二聚体表面上的抗原结合部位。概括而言，六个CDR赋予抗体抗原结合特异性。但是，甚至单个可变结构域(或仅包含对抗原特异的三个⑶R的Fv的一半)也具有识别和结合抗原的能力，虽然亲和力比整个结合部位低。
[0034]“单链？￥”或“80?￥”包含抗体的VH和VL结构域，其中这些结构域存在于单条多肽链中。优选地，scFv进一步包含VH和VL结构域之间的多肽接头,其使得scFv能够形成希望的用于抗原结合的结构(LENNARD.Standard protocols for the construction of scFvlibraries.Methods in molecular biology.2002,第 178 期,第 59-71 页)。[0035]本文所用的术语“抗体片段”指抗体的一个或多个片段，其保留特异性结合CSF-1R的能力。
[0036]术语“双抗体”指具有两个抗原结合部位的小的抗体片段，该片段包含在同一多肽链(VH VL)中与轻链可变结构域(VL)连接的重链可变结构域(VH)。通过使用太短而不允许同一条链上的两个结构域之间配对的接头，迫使结构域与另一条链的互补结构域配对，并产生两个抗原结合部位。双抗体可以结合一个或一个以上表位。双抗体更充分地描述于 POLJAK.Production and structure of diabodies.Structure.1994,第 2 卷，第 12期，第 1121-3 页；HUDS0N 等 High avidity scFv multimers; diabodies and triabodies.Journal of immunological methods.1999,第 231 卷，第 1-2 期，第 177-89 页；及KIPRIYANOV.Generation of bispecific and tandem diabodies.Methods in molecularbiology.2002，第 178 期，第 317-31 页中。
[0037]已研发了多种技术来产生抗体片段。通常，通过完整抗体的蛋白水解消化来衍生这些片段。但是，这些片段现在可以直接通过重组宿主细胞来产生。Fab、Fv和scFv抗体片段全都可以在大肠杆菌(E.coli)中表达并从大肠杆菌分泌，从而允许这些片段的大量产生。用于产生抗体片段的技术对本领域技术人员而言将显而易见。在其他实施方案中，选择的抗体是单链Fv片段(scFv)。
[0038]本文所用的“结构域抗体”(dAb)存在于抗体的最小功能结合单位中，对应于抗体的重链(VH)或轻链(VL)的可变区。结构域抗体具有大约13kDa的分子量，或不到全抗体大小的十分之一。
[0039]本文所用的“Fd”指由VH和CHl结构域组成的抗体片段。
[0040]术语“抗体”或“Ab”还指本领域技术人员公知的其他抗体片段，例如描述于H0LLIGER等Engineered antibody fragments and the rise of single domains.Naturebiotechnology.2005,第 23 卷，第 9 期，第 1126-36 页和 H00GENB00M 等 Natural anddesigner binding sites made by phage display technology.1mmunology today.2000，第21卷，第8期，第371-8页中的那些。
[0041]根据一个实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含:
[0042](i)至少一个⑶R，其中该⑶R包含SEQ ID NO: 2中起始于45位并结束于54位的序列、SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列或SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列中的至少五个连续氨基酸；
[0043]或
[0044](ii)至少一个CDR，其中该CDR包含SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列、SEQ ID N0:4中起始于66位并结束于76位的序列或SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列中的至少五个连续氨基酸。
[0045]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含至少一个⑶R，其中该⑶R相互独立地在包含如下至少五个连续氨基酸的CDR中选择:
[0046]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0047]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；[0048]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；
[0049]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0050]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列；
[0051]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0052]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含2、3、4或5个，甚至更优选6个⑶R，其中该⑶R相互独立地在包含如下至少五个连续氨基酸的⑶R中选择:
[0053]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0054]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；
[0055]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；
[0056]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0057]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列；
[0058]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0059]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含:
[0060](i )2个，且甚至更 优选3个⑶R，其中该⑶R相互独立地在包含如下至少五个连续氨基酸的⑶R中选择:
[0061]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0062]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；
[0063]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；
[0064]或
[0065](ii) 2个，且甚至更优选3个⑶R，其中该⑶R相互独立地在包含如下至少五个连续氨基酸的CDR中选择:
[0066]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0067]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列；
[0068]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0069]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含:
[0070](i)相互独立地在以下所示的⑶R中选择的至少一个⑶R:
[0071]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0072]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；和
[0073]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；
[0074]或
[0075](ii)相互独立地在以下所示的⑶R中选择的至少一个⑶R:
[0076]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0077]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列；
[0078]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0079]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含相互独立地在以下所示的⑶R中选择的至少一个⑶R:[0080]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0081]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；
[0082]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；
[0083]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0084]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列；
[0085]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0086]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含相互独立地在以下所示的⑶R中选择的2、3、4或5个，甚至更优选6个⑶R:
[0087]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0088]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；
[0089]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；
[0090]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0091]-SEQ ID N0:4中起始于66位并结束于76位的序列；
[0092]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0093]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含:
[0094](i) 2个，且甚至更优选3个⑶R，其中该⑶R相互独立地在以下所示的⑶R中选择:
[0095]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0096]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；
[0097]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；
[0098]或
[0099](ii) 2个，且甚至更优选3个⑶R，其中该⑶R相互独立地在以下所示的⑶R中选择:
[0100]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0101]-SEQ ID N0:4中起始于66位并结束于76位的序列；
[0102]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0103]根据一个实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含:(i)至少一个含有SEQ ID NO: 11、12或13中任一个所示的氨基酸序列的⑶R ;或(^)至少一个含有SEQ ID NO: 14,15或16中任一个所示的氨基酸序列的⑶R。
[0104]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含至少一个含有SEQ ID NO: 11、12、13、14、15或16中任一个所示的氨基酸序列的CDR。
[0105]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含2、3、4、5个和甚至更优选6个含有SEQ ID NO: 11、12、13、14、15或16中任一个所示的氨基酸序列的CDR。
[0106]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含(i)至少一个SEQ ID NO: 11、12或13中任一个所示的CDR ;或(ii)至少一个SEQ ID NO: 14、15或16中任一个所示的CDR。[0107]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含至少一个SEQ ID NO: 11、12、13、14、15或16中任一个所示的CDR。
[0108]根据一个优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含2、3、4、5个和甚至更优选6个SEQ ID NO: 11、12、13、14、15或16中任一个所示的⑶R。
[0109]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含(i)至少一个含有SEQ ID NO: 17、18或19中任一个所示的氨基酸序列的⑶R ;或(^)至少一个含有SEQ ID N0:20、21或22中任一个所示的氨基酸序列的⑶R。
[0110]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含至少一个含有SEQ ID NO: 17、18、19、20、21或22中任一个所示的氨基酸序列的CDR。
[0111]根据一个优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含2、3、4、5个和甚至更优选6个含有SEQ ID NO: 17、18、19、20、21或22中任一个所示的氨基酸序列的CDR。
[0112]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含(i)至少一个SEQ ID NO: 17、18或19中任一个所示的CDR ;或(ii)至少一个SEQ ID N0:20、21或22中任一个所示的CDR。
[0113]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含至少一个SEQ ID NO: 17、18、19、20、21或22中任一个所示的CDR。
[0114]根据一个优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含2、3、4、5个和甚至更优选6个SEQ ID NO: 17、18、19、20、21或22中任一个所示的⑶R。
[0115]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含(i)至少一个含有SEQ ID N0:23、24或25中任一个所示的氨基酸序列的⑶R ;或(^)至少一个含有SEQ ID N0:26、27或28中任一个所示的氨基酸序列的⑶R。
[0116]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含至少一个含有SEQ ID NO: 23、24、25、26、27或28中任一个所示的氨基酸序列的CDR。
[0117]根据一个优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含2、3、4、5个和甚至更优选6个含有SEQ ID NO: 23、24、25、26、27或28中任一个所示的氨基酸序列的CDR。
[0118]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含(i)至少一个SEQ ID NO: 23、24或25中任一个所示的CDR ;或(ii)至少一个SEQ ID N0:26、27或28中任一个所示的CDR。
[0119]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含至少一个SEQ ID NO: 23、24、25、26、27或28中任一个所示的CDR。
[0120]根据一个优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含2、3、4、5个和甚至更优选6个SEQ ID NO: 23、24、25、26、27或28中任一个所示的⑶R。[0121]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有以下所示的⑶R:
[0122]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0123]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；和
[0124]-SEQ ID N0:2中起始于117位并结束于126位的序列。
[0125]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有以下所示的⑶R:
[0126]-SEQ ID N0:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0127]-SEQ ID N0:4中起始于66位并结束于76位的序列；和
[0128]-SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列。
[0129]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID N0:ll、12和13所示的三个⑶R。
[0130]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID N0:14、15和16所示的三个CDR。
[0131]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID N0:17、18和19所示的三个CDR。
[0132]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID NO: 20、21和22所示的三个CDR。
[0133]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID NO: 23、24和25所示的三个CDR。
[0134]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，更具体而言，结合人CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID NO: 26、27和28所示的三个CDR。
[0135]在优选实施方案中，该可变区进一步包含一个，更优选两个，甚至更优选三个，且明确优选四个构架区，且更优选人FR。本文所用的“人FR”是与天然存在的人抗体的构架区至少75%同源的构架区。
[0136] 根据一个优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID N0:6所示的氨基酸序列。
[0137]在一个更优选的实施方案中，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区如SEQ ID N0:6所示。
[0138]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区含有SEQ ID N0:9所示的氨基酸序列。
[0139]在另一更优选的实施方案中，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含可变区，其中该可变区如SEQ ID N0:9所示。
[0140]在另一实施方案中，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含两个可变区，其中该可变区相互独立地在以下中选择:
[0141](i)含有以下所示的⑶R的可变区:
[0142]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列；
[0143]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列；和
[0144]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列；[0145](ii)含有以下所示的⑶R的可变区:
[0146]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列；
[0147]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列；和
[0148]-SEQ ID NO:4中起始于109位并结束于117位的序列；
[0149](iii)含有SEQ ID NO: 11、12和13所示的三个CDR的可变区；
[0150](iv)含有SEQ ID NO: 14、15和16所示的三个CDR的可变区；
[0151](V)含有SEQ ID NO: 17、18和19所示的三个CDR的可变区；
[0152](vi)含有SEQ ID NO: 20、21和22所示的三个CDR的可变区；
[0153](vii)含有SEQ ID NO: 23、24和25所示的三个CDR的可变区；
[0154]和
[0155](viii)含有SEQ ID NO: 26、27和28所示的三个CDR的可变区。
[0156]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含:
[0157]( i )第一可变区，其中该第一可变区含有:
[0158]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列所示的CDR ；
[0159]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列所示的CDR ;和
[0160]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列所示的⑶R ；
[0161]和
[0162](ii)第二可变区，其中该第二可变区含有:
[0163]-SEQ ID N0:4中起始于44位并结束于56位的序列所示的CDR ；
[0164]-SEQ ID N0:4中起始于66位并结束于76位的序列所示的CDR ;和
[0165]-SEQ ID NO:4中起始于109位并结束于117位的序列所示的CDR。
[0166]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含:
[0167]-含有SEQID NO: 11、12和13所示的三个⑶R的可变区；和
[0168]-含有SEQID NO: 14、15和16所示的三个CDR的可变区。
[0169]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含:
[0170]-含有SEQID NO: 17、18和19所示的三个CDR的可变区；和
[0171]-含有SEQID NO: 20、21和22所示的三个CDR的可变区。
[0172]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含:
[0173]-含有SEQID NO: 23、24和25所示的三个CDR的可变区；和
[0174]-含有SEQID NO: 26、27和28所示的三个CDR的可变区。
[0175]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含:
[0176]-SEQ ID N0:6所示的可变区；和
[0177]-SEQ ID N0:9所示的可变区。
[0178]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含:
[0179](i)含有以下的重链可变区:
[0180]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列所示的CDR ；
[0181]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列所示的CDR ;和
[0182]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列所示的⑶R ；
[0183]和[0184](ii)含有以下的轻链可变区:
[0185]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列所示的CDR ；
[0186]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列所示的CDR ;和
[0187]-SEQ ID NO:4中起始于109位并结束于117位的序列所示的CDR。
[0188]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含(i)含有SEQ IDNO: 11、12和13所示的三个CDR的重链可变区jP(ii)含有SEQ ID N0:14、15和16所示的三个⑶R的轻链可变区。
[0189]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含(i)含有SEQ IDNO: 17、18和19所示的三个CDR的重链可变区jP(ii)含有SEQ ID NO: 20、21和22所示的三个⑶R的轻链可变区。
[0190]根据另一实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含(i)含有SEQ IDNO:23、24和25所示的三个CDR的重链可变区jP(ii)含有SEQ ID NO:26、27和28所示的三个⑶R的轻链可变区。
[0191]根据优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含(i)SEQ ID NO:6所示的重链可变区；和(ii) SEQ ID N0:9所示的轻链可变区。
[0192]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0193](i)含有以下的可变区:
[0194]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列所示的CDR ；
[0195]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列所示的CDR ;和
[0196]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列所示的⑶R ；
[0197] 和
[0198](ii)含有以下的可变区:
[0199]-SEQ ID N0:4中起始于44位并结束于56位的序列所示的CDR ；
[0200]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列所示的CDR ;和
[0201]-SEQ ID NO:4中起始于109位并结束于117位的序列所示的CDR。
[0202]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0203]-含有SEQID NO: 11、12和13所示的三个CDR的可变区；和
[0204]-含有SEQID NO: 14、15和16所示的三个CDR的可变区。
[0205]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0206]-含有SEQID NO: 17、18和19所示的三个CDR的可变区；和
[0207]-含有SEQID NO: 20、21和22所示的三个CDR的可变区。
[0208]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0209]-含有SEQID N0:23、24和25所示的三个CDR的可变区；和
[0210]-含有SEQID NO: 26、27和28所示的三个CDR的可变区。
[0211]根据更优选的实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0212]-SEQ ID N0:6所示的可变区；和
[0213]-SEQ ID N0:9所示的可变区。
[0214]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0215](i)含有以下的重链可变区:
[0216]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列所示的CDR ；
[0217]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列所示的CDR ;和
[0218]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列所示的⑶R ；
[0219]和
[0220](ii)含有以下的轻链可变区:
[0221]-SEQ ID N0:4中起始于44位并结束于56位的序列所示的CDR ；
[0222]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列所示的CDR ;和
[0223]-SEQ ID NO:4中起始于109位并结束于117位的序列所示的CDR。
[0224]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0225]-含有SEQID NO: 11、12和13所示的三个CDR的重链可变区；和
[0226]-含有SEQID NO: 14、15和16所示的三个CDR的轻链可变区。
[0227]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0228]-含有SEQID NO: 17、18和19所示的三个CDR的重链可变区；和
[0229]-含有SEQID NO: 20、21和22所示的三个CDR的轻链可变区。
[0230]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0231]-含有SEQID N0:23、24和25所示的三个CDR的重链可变区；和
[0232]-含有SEQID NO:26、27和28所示的三个CDR的轻链可变区。
[0233]根据更优选的实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且是scFv，其中该scFv包含:
[0234]-SEQ ID N0:6所示的重链可变区；和
[0235]-SEQ ID N0:9所示的轻链可变区。
[0236]在甚至更优选的实施方案中，提供scFv，其中在SEQ ID NO 6和9所示的氨基酸序列内取代(按照表1和表2)至少一个氨基酸。在明确优选的实施方案中,提供人抗体,其中在SEQ ID NO 6和9所示的氨基酸序列内取代(按照表1和表2)表1和表2中所示的所有
氨基酸。
[0237]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含SEQ ID NO: 2所示的重链。
[0238]根据另一优选实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含SEQ ID NO: 4所示的轻链。
[0239]根据更优选的实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含SEQ ID NO: 2所示的重链和SEQ ID N0:4所示的轻链。
[0240]根据甚至更优选的实施方案，本发明的抗体特异性结合CSF-1R，且包含两条SEQID NO:2所示的重链和两条SEQ ID N0:4所示的轻链。此具体的抗体将在本申请通篇中命名为 CXIIG6。
[0241]根据另一优选实施方案，本发明涉及特异性结合CSF-1R的人抗体，其包含:
[0242](i)含有以下的重链可变区:
[0243]-SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列所示的CDR ；
[0244]-SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列所示的CDR ;和
[0245]-SEQ ID NO:2中起始于117位并结束于126位的序列所示的⑶R ；
[0246]和
[0247](ii)含有以下的轻链可变区:
[0248]-SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列所示的CDR ；
[0249]-SEQ ID NO:4中起始于66位并结束于76位的序列所示的CDR ;和
[0250]-SEQ ID NO:4中起始于109位并结束于117位的序列所示的CDR。
[0251]根据另一实施方案，本发明涉及特异性结合CSF-1R的人抗体，其包含: [0252]-含有SEQID NO: 11、12和13所示的三个CDR的重链可变区；和
[0253]-含有SEQID NO: 14、15和16所示的三个CDR的轻链可变区。
[0254]根据另一实施方案，本发明涉及特异性结合CSF-1R的人抗体，其包含:
[0255]-含有SEQID NO: 17、18和19所示的三个CDR的重链可变区；和
[0256]-含有SEQID NO: 20、21和22所示的三个CDR的轻链可变区。
[0257]根据另一实施方案，本发明涉及特异性结合CSF-1R的人抗体，其包含:
[0258]-含有SEQID N0:23、24和25所示的三个CDR的重链可变区；和
[0259]-含有SEQID NO:26、27和28所示的三个CDR的轻链可变区。
[0260]根据优选实施方案，本发明涉及特异性结合CSF-1R的人抗体，其包含:
[0261]-SEQ ID N0:6所示的重链可变区；和
[0262]-SEQ ID N0:9所示的轻链可变区。
[0263]在更优选的实施方案中，提供人抗体，其中在SEQ ID NO: 6和9所示的氨基酸序列内取代(按照表1和表2)至少一个氨基酸。在甚至更优选的实施方案中，提供人抗体，其中在SEQ ID N0:6和9所示的氨基酸序列内取代(按照表1和表2)表1和表2中所示的所有氨基酸。
[0264]表1[0265]
【权利要求】
1.分离的、重组的或纯化的抗体，其特异性结合CSF-1R，更优选特异性结合人CSF-1R，其特征在于: (i)其包含: Ca)通过下式定义的第一可变区 FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4 其中: FR1、FR2、FR3和FR4各为构架区； ⑶R1、⑶R2和⑶R3各为互补决定区； 其中: ⑶Rl具有SEQ ID NO:2中起始于45位并结束于54位的序列中的至少五个连续氨基酸； ⑶R2具有SEQ ID NO:2中起始于66位并结束于87位的序列中的至少五个连续氨基酸；和 ⑶R3具有SEQ ID N0:2中起始于117位并结束于126位的序列中的至少五个连续氨基酸； 和 (b)通过下式定义的 第二可变区 FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4 其中: FR1、FR2、FR3和FR4各为构架区； ⑶R1、⑶R2和⑶R3各为互补决定区； 其中: ⑶Rl具有SEQ ID NO:4中起始于44位并结束于56位的序列中的至少五个连续氨基酸； ⑶R2具有SEQ ID N0:4中起始于66位并结束于76位的序列中的至少五个连续氨基酸；和 ⑶R3具有SEQ ID N0:4中起始于109位并结束于117位的序列中的至少五个连续氨基酸； 和 (ii)其具有以下有利特性中的至少一种: -其结合定位在SEQ ID NO:29的20至41位氨基酸之间的一个表位； -其不结合定位在42至90位氨基酸之间和/或91至104位氨基酸之间的表位； -其不结合定位在105至199位氨基酸之间的表位； -其不结合定位在SEQ ID NO:29的200至298位氨基酸之间的表位； -其结合构建体PTG18016。
2.权利要求1的抗体，其具有以下其他有利特性中的至少一种: -其不与IL-34配体竞争结合CSF-1R受体； -其与CSF-1配体部分竞争结合CSF-1R受体。
3.权利要求2的抗体，其具有所述有利特性中的两种。
4.权利要求1的抗体，其中在正常人外周血单核细胞的存在下，其对表达CSFl-R的人细胞、尤其是表达CSFl-R的人癌细胞发挥抗体依赖性细胞毒作用(ADCC)。
5.权利要求1的抗体，其中其对具有表达CSFl-R的人癌细胞的非人动物发挥抗肿瘤作用。
6.权利要求1的抗体，其中其对具有表达CSFl-R的人癌细胞的动物发挥抗肿瘤作用，所述动物包括人类。
7.权利要求1的抗体，其中其抑制AML5细胞的CSF-1依赖性增殖。
8.权利要求1的抗体，其中其部分抑制CSF-1R的CSF-1依赖性磷酸化。
9.权利要求1的抗体，其中其包含: -选自 SEQ ID NO:37 和 SEQ ID NO:38 的重链；和 -选自 SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:40 和 SEQ ID NO:41 的轻链。
10.权利要求1的抗体，其中其包含: -选自SEQ ID NO:42和SEQ ID NO:43的第一可变区；和 -选自 SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45 和 SEQ ID NO:46 的第二可变区。
11.权利要求1的抗体 ，其中其包含(a)存在于SEQID NO: 37中的重链和(b)存在于SEQ ID NO:39中的轻链。
12.权利要求1的抗体，其中其包含(a)存在于SEQID NO: 38中的重链和(b)存在于SEQ ID NO:40中的轻链。
13.权利要求1的抗体，其中其包含(a)存在于SEQID NO: 37中的重链和(b)存在于SEQ ID NO:41中的轻链。
14.权利要求1的抗体，其中其包含(a)存在于SEQID NO:42中的第一可变区和(b)存在于SEQ ID N0:44中的第二可变区。
15.权利要求1的抗体，其中其包含(a)存在于SEQID NO:43中的第一可变区和(b)存在于SEQ ID N0:45中的第二可变区。
16.权利要求1的抗体，其中其包含(a)存在于SEQID NO:42中的第一可变区和(b)存在于SEQ ID N0:46中的第二可变区。
17.权利要求1的抗体，其中其具有小于InM的Ki。
【文档编号】C12N15/63GK103476794SQ201280008872
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2012年2月7日 优先权日:2011年2月14日
【发明者】H·埃热尔, C·蒂乌德雷, M·盖斯特, B·格雷利耶, J-B·马钱德 申请人:特朗斯吉有限公司