一种高纯度叶黄素酯组合物及制备工艺的制作方法
【专利摘要】一种的高纯度叶黄素酯组合物及制备工艺，所述制备方法包括将万寿菊浸膏的溶剂A溶液降温至20～30℃，保持0.5～4小时后，再降温至5～20℃并保持0.5～4小时，过滤得滤饼I；在30～70℃条件下，溶解滤饼I于混合溶剂A中，搅拌0.5～5小时后降温至10～28℃并保持0.5～5小时，过滤得滤饼II以及后续步骤；其中所述的混合溶剂A是醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸正丙酯或醋酸丁酯与C1-3醇的混合溶剂。使用本发明上述方法，工艺简单易行、易于工业化，所有操作低温进行，保证了产品的稳定性。所得产品收率高达25％以上，产品的总酯含量大于70％，反式叶黄素含量高达90～93％，大大提升了产品运用时的生物活性。
【专利说明】一种高纯度叶黄素酯组合物及制备工艺
【技术领域】
[0001]本发明涉及从万寿菊浸膏中分离高含量叶黄素酯产品、尤其是具有高反式叶黄素酯含量的组合物的方法。尤其涉及利用直接结晶法获得上述产品的方法。
[0002]
【背景技术】
[0003]叶黄素酯是一种以脂肪酸与叶黄素结合形式存在的类胡萝卜素脂肪酸酯。它广泛存在于南瓜、菠菜、甘蓝、万寿菊花等植物体内。研究表明，摄入叶黄素酯可提高血液和视网膜黄斑中的叶黄素水平，从而预防年龄相关性视黄班退化和白内障，并且能够有效抑制肿瘤生长和防止动脉粥样硬化的发生。叶黄素和玉米黄质是唯一存在于人类视网膜黄斑区的类胡萝卜素，人体自身不能合成叶黄素必须通过日常膳食对其进行补充。自然界中的叶黄素酯有两种构型，分别是反式和顺式，其中以全反式分子构型为主。全反式叶黄素酯又可分为:叶黄素单酯和叶黄素二酯。
[0004]在万寿菊等植物体内，游离的叶黄素含量较少，大多被月桂酸、豆蘧酸、棕榈酸等修饰，其中含量最高的酯为叶黄素棕榈酸二酯(A Subag1 NMorita.FoodReasearchinternat1n,2001,34:315-320)
本项工艺提供了一种高纯度叶黄素酯的制备、稳态化及其污染物脱除方法:先将万寿菊浸膏中的丙酮不溶物脱除，再用脱除杂质的浓缩物进行异丙醇或丁醇结晶，最后再用低级醇洗涤晶体。其中两步结晶所用溶剂不同，存在一定的溶剂交叉，异丙醇或丁醇结晶用时较长，不利于生产效率的提升。最后一步低级醇洗涤与异丙醇或丁醇存在大量溶剂交叉，并且该方法的产品收率很低，仅有11?15%。本发明借鉴了其中污染物脱除和抗氧化剂添加的方法，但对该技术方案中核心的结晶工艺进行了实质性的改进。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种安全、便捷、产品收率高的高纯度叶黄素酯产品的制备方法及相应的叶黄素酯产品。
[0006]本发明所述的含叶黄素酯的组合物的制备方法，包括如下步骤:
a.在30?70°C条件下，将万寿菊浸膏溶解于混合溶剂A中，加入吸附剂搅拌0.5?5小时,过滤,收集滤液；
b.将步骤a的滤液降温至20?28°C，保持0.5?4小时后，再降温至5?18°C并保持0.5?4小时，过滤得滤饼I ;
c.在30?70°C条件下,溶解滤饼I于混合溶剂A中，搅拌0.5?5小时后降温至10?28°C并保持0.5?5小时，过滤得滤饼II ；
d.用C1-3醇洗涤滤饼II，然后加入抗氧化剂，再干燥除去残留的C1-3醇，得到含叶黄素酯的组合物；
其中所述的混合溶剂A是醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸正丙酯或醋酸丁酯与C1-3醇的混合溶剂。
[0007]本发明所述的万寿菊浸膏是万寿菊花粒经有机溶剂萃取得到的浸膏，其中总酯质量百分含量应为18?35%。常使用的有机溶剂是丙烷或六号溶剂(GB16629-19966抽提溶剂油)。
[0008]本发明所述的C1-3醇是指甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇。
[0009]本法的优选的技术方案中，所述方法中的混合溶剂A是醋酸甲酯/甲醇、醋酸乙酯/乙醇或醋酸正丙酯/异丙醇的二元混合溶剂。最为优选的是醋酸甲酯/甲醇或醋酸乙酯/乙醇的混合溶剂。
[0010]上述本发明的方法中，所述的混合溶剂A中酯和醇的质量比为2: 8?9:1。
[0011]本发明的另一优选技术方案中，所述的步骤a中的万寿菊浸膏与混合溶剂A的质量比为1: 0.5?1: 20，优选1: 0.5?1: 15，最优选1:1?1: 10 ;步骤c中滤饼I与混合溶剂A的质量比为1: 0.5?20，优选1: 0.5?1: 15，最优选1:1?I: 10。
[0012]本发明的又一优选技术方案中，所述的步骤b和步骤c的降温速率为5?20°C/小时，更优选5?15°C /小时。
[0013]本发明的再一优选技术方案中，所述的步骤d中的醇是乙醇或异丙醇，优选乙醇；醇的用量是滤饼II质量的3?30倍，优选3?20倍，最优选4?15倍。
[0014]上述本发明的任一技术方案中，所述及的吸附剂选自活性炭、白土、硅藻土、EDTA、EDTA 二钠盐以及上述两种或两种以上的吸附剂以任意比例组成的混合物；优选以活性炭、白土、硅藻土中I?3种以任意比例组成的混合物；最优选活性炭、硅藻土或二者以任意比例组成的混合物。其中所述的活性炭是以果壳和木屑为原料，经炭化、活化、精制加工而成；硅藻土主要是90%以上的硅藻壳组成。
[0015]上述本发明的任一技术方案中，所述步骤d中的抗氧化剂选自维生素E、维C钠、异维C钠、维C棕榈酸酯、茶多酚以及上述两种或两种以上的抗氧化剂以任意比例混合而成的混合物；优选维生素E、异维C钠、维C棕榈酸酯或茶多酚以及上述两种或两种以上的抗氧化剂以任意比例混合而成的混合物；最优选维生素E、维C棕榈酸酯或二者以任意比例混合而成的混合物。
[0016]本发明进一步的优选技术方案中，所述步骤d中干燥温度30?70°C，干燥至溶残< Ippn1
[0017]本发明的又一优选的技术方案，是整个制备过程中全程N2气保护。
[0018]本发明的另一方面的目的是提供由上述方法制备的含叶黄素酯的组合物。
[0019]使用本发明上述方法制备含叶黄素酯的组合物，整个工艺简单易行、易于工业化， 所有操作均在低温下进行，最大程度上保证了产品的稳定性。所得产品收率高，重量收率能达到25%以上，而且在保证收率的同时还能保证产品的总酯含量大于70%，反式叶黄素含量高达90?93%，大大提升了产品运用时的生物活性。
[0020]另外所选用的吸附剂能够有效地脱除万寿菊浸膏中残留的重金属和农药残留，并且混合溶剂也有脱除有害物质的效果，从而保证了最终得到的叶黄素酯产品的高品质。在低碳醇类溶剂洗涤滤饼后加入抗氧化剂，可以防止叶黄素酯产品在烘干过程中被氧化，实验证明在叶黄素酯产品中加入适量的抗氧化剂，可以保证其在室温真空包装条件下，3年内不变质。并且本发明所用溶剂均为食品级溶剂，制备出的产品符合食品卫生安全。
[0021]4、
【具体实施方式】
本发明中所采用的活性炭符合GB/T 13803.4-1999标准；白土符合GB25571-2010标准，硅藻土符合GB 24265-2009标准。
[0022]本发明使用JP 2003201497 (A)中所公开的方法测算叶黄素酯总酯含量；使用 AOAC Offical Method 970.64(Carotenes and Xanthophylls in DriedPlantMaterialsand Mixed Feeds)测定叶黄素酯中全反式叶黄素和全反式玉米黄质的含量及组成。
[0023]下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
[0024]其中所述的“总酯含量”是叶黄素酯总酯含量，按照质量百分比计。
[0025]实施例1
称取10g总酯含量为28wt%的万寿菊浸膏，与醋酸甲酯/甲醇(重量比为
2: 8) IlOOg混合,加入7g娃藻土于60°C下加热搅拌3.5小时后过滤,得到母液I。将母液I经Ih降温至27°C后保持3h，再经Ih降温至9°C保持4h后过滤得到滤饼I。
[0026]在55°C下加入滤饼I质量4倍的醋酸甲酯/甲醇(重量比为2: 8)溶解滤饼I，加热搅拌5h后缓慢降温至11°C保持3.5h后过滤得到滤饼II，加入其质量12倍的甲醇搅拌洗涤滤饼II，甲醇洗涤后的固体中加入1.2g茶多酚和0.6g维生素C，45°C下烘干5h，得到产品27g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为67%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=91: 5。
[0027]实施例2
称取10g总酯含量为27wt %的万寿菊浸膏与醋酸甲酯/乙醇(重量比为
2.5: 7.5) 1800g混合，加入6.5gEDTA和0.5g白土于48°C下加热搅拌3小时后过滤，得到母液I。将母液I缓慢降温经Ih降温至23.5°C后保持lh，再经Ih降温降温至13°C保持2.5h后过滤得到滤饼I。
[0028]在60°C下加入滤饼I质量0.5倍的醋酸甲酯/异丙醇(重量比为5: 5)溶解滤饼I，加热搅拌2h后缓慢降温至11.5°C保持4h后过滤得到滤饼II，加入其质量8倍的甲醇搅拌洗涤滤饼II，甲醇洗涤后的固体中加入0.5g维生素E和0.3g维C棕榈酸酯，32°C下烘干17h，得到产品26g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为66%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=91: 6。
[0029]实施例3
称取10g总酯含量为26wt %的万寿菊浸膏与醋酸乙酯/甲醇(重量比为
2: 8) 1350g混合，加入15g白土于32°C下加热搅拌4.5小时后过滤，得到母液I。将母液I缓慢降温经Ih降温至26.5°C后保持3h，再经Ih降温至8.5°C保持1.5h后过滤得到滤饼I。
[0030]在65°C下加入滤饼I质量20倍的醋酸乙酯/异丙醇(重量比为6: 4)溶解滤饼I，加热搅拌0.5h后缓慢降温至28°C保持Ih后过滤得到滤饼II，加入其质量30倍的异丙醇搅拌洗涤滤饼II，异丙醇洗涤后的固体中加入1.5g维生素E，30°C下烘干24h，得到产品20g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为70%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=91 6。
[0031]实施例4
称取10g总酯含量为28wt%的万寿菊浸膏与醋酸正丙酯/丙醇(重量比为3: 7)800g混合，加入3g活性炭和2g EDTA于40°C下加热搅拌3小时后过滤，得到母液
1
[0032]将母液I缓慢降温经40min降温至28°C后保持4h，再经40min降温至18°C保持4h后过滤得到滤饼I。
[0033]在60°C下加入滤饼I质量8倍的醋酸正丙酯/丙醇(重量比为3: 7)溶解滤饼I，加热搅拌2.5h后缓慢降温至10°C保持0.5h后过滤得到滤饼II，加入其质量10倍的异丙醇搅拌洗涤滤饼II，异丙醇洗涤后的固体中加入1.2g维生素C棕榈酸酯和0.6g异维C钠，50°C下烘干lh，得到产品24g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为71 %，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=90: 5。
[0034]实施例5
称取10g总酯含量为28wt %的万寿菊浸膏与醋酸乙酯/乙醇(重量比为
3: 7) 100g混合,加入7g娃藻土和Ig白土于30°C下加热搅拌5小时后过滤,得到母液
1
[0035]将母液I缓慢降温经40min降温至20°C后保持4h，再经40min降温至11 °C保持4h后过滤得到滤饼I。
[0036]在30°C下加入滤饼I质量I倍的醋酸乙酯/乙醇(重量比为3: 7)溶解滤饼I，加热搅拌5h后缓慢降温至10°C保持0.5h后过滤得到滤饼II，加入其质量3倍的异丙醇搅拌洗涤滤饼II，异丙醇洗涤后的固体中加入Ig异维C钠，70°C下烘干3h，得到产品26g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为68%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=92: 6。
[0037]实施例6
称取10g总酯含量为26wt%的万寿菊浸膏与醋酸正丙酯/异丙醇(重量比为
3: 7)2000g混合，加入3g白土和7gEDTA于38°C下加热搅拌4.5小时后过滤，得到母液
1。将母液I缓慢降温经40min降温至27.5°C后保持4h，再经40min降温至6.5°C保持3h后过滤得到滤饼I。
[0038]在60°C下加入滤饼I质量12倍的醋酸正丙酯/异丙醇(重量比为3: 7)溶解滤饼I，加热搅拌4.5h后缓慢降温至25.5°C保持2.5h后过滤得到滤饼II，加入其质量30倍的甲醇搅拌洗涤滤饼II，异丙醇洗涤后的固体中加入0.2g茶多酚和Ig异维C钠，44°C下烘干10h，得到产品22g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为70%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=92: 6。
[0039]实施例7
称取10g总酯含量为27wt%的万寿菊浸膏与醋酸丁酯/异丙醇(重量比为
4: 6) 1300g混合,加入3gEDTA 二钠盐和4g娃藻土于60°C下加热搅拌I小时后过滤,得到母液I。将母液I缓慢降温经Ih降温至26°C后保持2h，再经40min降温至12°C保持
2.5h后过滤得到滤饼I。
[0040]在45°C下加入滤饼I质量I倍的醋酸丁酯/乙醇(重量比为6: 4)溶解滤饼I，加热搅拌1.5h后缓慢降温至13°C保持2h后过滤得到滤饼II，加入其质量20倍的乙醇搅拌洗涤滤饼II，乙醇洗涤后的固体中加入0.4g维生素E和1.4g维生素C棕榈酸酯，40°C下烘干12h，得到产品28g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为67%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=92: 5。
[0041]实施例8
称取10g总酯含量为27wt %的万寿菊浸膏与醋酸甲酯/甲醇(重量比为
4: 6) 10g混合,加入2g白土和2g娃藻土于45°C下加热搅拌4小时后过滤,得到母液
I。将母液I缓慢降温经40min降温至21°C后保持0.5h，再经Ih降温降温至TC保持Ih后过滤得到滤饼I。
[0042]在55°C下加入滤饼I质I倍的醋酸甲酯/甲醇(重量比为4: 6)溶解滤饼I，加热搅拌3h后缓慢降温至17°C保持5h后过滤得到滤饼II，加入其质量8倍的异丙醇搅拌洗涤滤饼II，异丙醇洗涤后的固体中加入0.4g维C棕榈酸酯，30°C下烘干24h，得到产品26g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为72%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=92: 5。
[0043]实施例9
称取10g总酯含量为27wt%的万寿菊浸膏与醋酸正丙酯/异丙醇(重量比为
4.5: 5.5) 1600g混合,加入Ig娃藻土和12g活性炭于65°C下加热搅拌1.5小时后过滤，得到母液I。将母液I缓慢降温经Ih降温至25°C后保持1.5h，再经Ih降温降温至6°C保持Ih后过滤得到滤饼I。
[0044]在30°C下加入滤饼I质量17倍的醋酸正丙酯/异丙醇(重量比为4.5: 5.5)溶解滤饼I，加热搅拌4.5h后缓慢降温至14°C保持3.5h后过滤得到滤饼II，加入其质量8倍的异丙醇搅拌洗涤滤饼II，甲醇洗涤后的固体中加入0.5g维C棕榈酸酯和Ig维生素C，54°C下烘干llh，得到产品25g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为73%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=91: 6。
[0045]实施例10
称取10g总酯含量为28wt%的万寿菊浸膏与醋酸甲酯/乙醇(重量比为5: 5) 100g混合，加入1g白土于701:下加热搅拌0.5小时后过滤，得到母液I。将母液I缓慢降温经Ih降温至20°C后保持3h，再经40min降温降温至I (TC保持1.5h后过滤得到滤饼I。
[0046]在60°C下加入滤饼I质量10倍的醋酸甲酯/乙醇(重量比为5: 5)溶解滤饼I，加热搅拌2h后缓慢降温至22°C保持5h后过滤得到滤饼II，加入其质量15倍的甲醇搅拌洗涤滤饼II，甲醇洗涤后的固体中加入0.5g维生素C钠盐，70°C下烘干4h，得到产品26g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为74%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=93: 6。
[0047]实施例11
称取10g总酯含量为28wt %的万寿菊浸膏与醋酸甲酯/甲醇(重量比为
5: 5)700g混合，加入Ig硅藻土和8gEDTA于70°C下加热搅拌0.5小时后过滤，得到母液I。将母液I缓慢降温经Ih降温至23°C后保持3.5h，再经40min降温降温至13°C保持2h后过滤得到滤饼I。
[0048]在70°C下加入滤饼I质量20倍的醋酸甲酯/甲醇(重量比为2: 8)溶解滤饼I，加热搅拌2h后缓慢降温至5.5°C保持3.5h后过滤得到滤饼II，加入其质量4倍的甲醇搅拌洗涤滤饼II，甲醇洗涤后的固体中加入1.2g茶多酚和0.4g维C钠盐，63°C下烘干lh，得到产品27g，经检测含叶黄素酯的质量百分含量为68%，其中全反式叶黄素:玉米黄质(摩尔比)=91: 5。
【权利要求】
1.高纯度叶黄素酯组合物及制备工艺，包括如下步骤: a.在30?70°C条件下，将万寿菊浸膏溶解于混合溶剂A中，加入吸附剂搅拌0.5?5小时，过滤，收集滤液； b.将步骤a的滤液降温至20?30°C，保持0.5?4小时后，再降温至5?20°C并保持0.5?4小时，过滤得滤饼I ; c.在30?70°C条件下，溶解滤饼I于混合溶剂A中，搅拌0.5?5小时后降温至10?28°C并保持0.5?5小时，过滤得滤饼II ； d.用C1-3醇洗涤滤饼II，然后加入抗氧化剂，再干燥除去残留的C1-3醇，得到含叶黄素酯的组合物； 其中所述的混合溶剂A是醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸正丙酯或醋酸丁酯与C1-3醇的混合溶剂。
【文档编号】A23L1/29GK104432003SQ201310431363
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2013年9月22日 优先权日:2013年9月22日
【发明者】谭超智 申请人:青岛中人智业生物科技有限公司