一种促进提取鱼皮胶原蛋白的方法
【专利摘要】鱼皮胶原蛋白制备方法主要有五种：酸法、碱法、盐法、酶法和热水抽提法，本发明进一步用超声波作用，提高胶原蛋白的得率，缩短了提取时间。
【专利说明】一种促进提取鱼皮胶原蛋白的方法
【技术领域】
[0001]鱼皮胶原蛋白制备方法主要有五种:酸法、碱法、盐法、酶法和热水抽提法，本发明进一步用超声波作用，提高胶原蛋白的得率，缩短了提取时间，使其得到更好的利用于食品、化妆品、医药和保健品等领域。
【背景技术】
[0002]胶原蛋白由于其独特的生理功能及特性，被广泛应用与食品、化妆品、医药和保健品等领域。传统的胶原蛋白主要从陆生动物如猪、牛等的结缔组织中提取，近些年，但因疯牛病、口蹄疫等疾病的爆发，陆生动物来源的胶原蛋白在应用方面受到了极大的限制。另外，由于宗教和习俗等原因，有些地区也不能使用猪等牲畜来源的胶原蛋白制品。因此，寻找提取胶原蛋白原料的新来源就显得非常迫切了。鱼类加工后产生大量的废弃物，如皮、骨、鳞和鳍等含有丰富的胶原蛋白，具有开发和利用的价值。
[0003]我国是一个海洋大国，渔业资源极其丰富，但是我们国家对于渔业副产品的利用还处于初级阶段。鱼皮是渔业加工的副产品，蛋白质含量很高，较鱼肌肉中蛋白质还要高，其中胶原蛋白的含量占其蛋白质总量的80%以上，因此鱼皮可以作为一种新型的胶原资源来利用。目前胶原蛋白已经在医药、化妆品、保健品等高附加值领域得到应用。胶原及水解胶原，由于富含羟基、氨基等亲水基团而具有良好的保湿性，可以作为化妆品行业的一种保湿剂。动物实验表明胶原蛋白能促进皮肤胶原蛋白的代谢，起到美容作用。韩国的Hee-GukByun等人采用复合酶水解的方法从阿拉斯加鳕鱼皮中得到了具有血管紧张素抑制作用的活性肽。由于鱼皮胶原蛋白具有变性温度低、可溶性高、易被蛋白酶水解等特性，使它更适合用于开发分子量小的活性 肽。
[0004]鱼皮胶原蛋白制备方法主要有以下五种:酸法、碱法、盐法、酶法和热水抽提法，其基本原理都是根据胶原蛋白的特性改变蛋白质所在的外界环境，把胶原蛋白从其它蛋白质中分离出来，同时，在实际提取过程中，不同提取方法之间往往相互结合，以取得较好的提取效果。
【发明内容】
[0005]鱼皮胶原蛋白制备方法主要有五种:酸法、碱法、盐法、酶法和热水抽提法，本发明进一步用超声波作用，提高胶原蛋白的得率，缩短了提取时间。
【具体实施方式】
[0006]实施例一
[0007]对照组:热水提取法
[0008]原料的预处理:将鱼皮解冻后放入0.1M NaOH(l:30, W/V)中(4°C下)，轻轻搅拌6h，每隔2h更换I次溶液，之后用蒸馏水洗涤至中性，浙干，以去除非胶原蛋白。随后将鱼皮放到10% (V/V) 丁醇(I:30, W/V)中(4°C下)，轻轻搅拌24h，每隔8h更换I次溶液，之后用蒸馏水洗涤至中性，浙干，以去除脂肪。
[0009]热水提取:料比10倍，pH6.0，温度90°C，提取4h，提取液取出，浓缩，喷雾干燥，得到胶原蛋白产品，并计算提取率。
[0010]超声波组:热水提取过程中，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，提取时间缩短为对照组的一半。
[0011]结果:对照组提取率为39.2 %，而超声波组为55.7%，超声波组取得了更好的提取效果，且缩短了提取时间。
[0012]实施例二
[0013]对照组:酸法提取法
[0014]原料的预处理:将鱼皮解冻后放入0.1M NaOH(l:30, W/V)中(4°C下)，轻轻搅拌6h，每隔2h更换I次溶液，之后用蒸馏水洗涤至中性，浙干，以去除非胶原蛋白。随后将鱼皮放到10% (V/V) 丁醇(I:30, W/V)中(4°C下)，轻轻搅拌24h，每隔8h更换I次溶液，之后用蒸馏水洗涤至中性，浙干，以去除脂肪。
[0015]酸法提取:料比I倍，加入0.5%盐酸，温度75°C，提取4h，提取液NaOH中和至中性，提取液取出，浓缩，喷雾干燥，得到胶原蛋白产品，并计算提取率。
[0016]超声波组:酸法提取过程中，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，提取时间缩短为对照组的一半。
[0017]结果:对照组提取率为52.3 %，而超声波组为72.1 %，超声波组取得了更好的提取效果，且缩短了提取时间。
`[0018]实施例三
[0019]对照组:酶法提取法
[0020]原料的预处理:将鱼皮解冻后放入0.1M NaOH(l:30, W/V)中(4°C下)，轻轻搅拌6h，每隔2h更换I次溶液，之后用蒸馏水洗涤至中性，浙干，以去除非胶原蛋白。随后将鱼皮放到10% (V/V) 丁醇(I:30, W/V)中(4°C下)，轻轻搅拌24h，每隔8h更换I次溶液，之后用蒸馏水洗涤至中性，浙干，以去除脂肪。
[0021]酶法提取:将底物与水1:10(W/W)的比例于酶解反应器中，调温度40°C和pH9.0至酶最适反应条件，然后将碱性蛋白酶酶按酶量1200U/g加入反应器中反应，酶解6h。在酶解过程中，保证恒定的温度和pH，酶解完成后在沸水浴中灭活lOmin，冷却后用0.1M NaOH调pH至7.0，离心(20000 X g，4°C，40min)，上清液取出，浓缩，喷雾干燥，得到胶原蛋白产品，并计算提取率。
[0022]超声波组:酶解提取过程中，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，提取时间缩短为对照组的一半。
[0023]结果:对照组提取率为55.2 %，而超声波组为77.8%，超声波组取得了更好的提取效果，且缩短了提取时间。
【权利要求】
1.选择合适的方法提取鱼皮胶原蛋白。
2.选择合适的权利I中的热水法和酸法提取条件。
3.选择合适的蛋白酶种类。
4.选择合适权利3中的酶解条件。
5.在权利1-4的方法中，同时用超声波发生器施加20kHz超声波以提高提取胶原蛋白的得率和缩短 提取时间。
【文档编号】C12P21/06GK103601801SQ201310582130
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年11月15日 优先权日:2013年11月15日
【发明者】宋健 申请人:江南大学