固体脂质纳米颗粒（i）的制作方法
【专利说明】固体脂质纳米颗粒(I)
[0001]本发明涉及新的(食品级)固体脂质纳米颗粒，以及所述固体脂质纳米颗粒的生产和它们的用途。
[0002]固体脂质纳米颗粒(solid lipid nanoparticle, SLN)例如被用作经口以及肠胃外(parental)亲脂性或两亲性活性成分递送的新途径。目前，用于所述递送的最常见方法是乳剂。
[0003]SLN因一些重要的优点而适合这样的用途，例如
[0004](i)掺入(incorporat1n)亲脂性以及两亲性活性成分，和
[0005](ii)无生物毒性，和
[0006](iii)避免有机溶剂，和
[0007](iv)活性成分受控释放的可行性，和
[0008](V)极好的稳定性(机械的和化学的)，和
[0009](vi)可用于喷雾干燥，和
[0010](vii)良好的光学性质(允许生产非浑浊制剂)，和
[0011](viii)可灭菌。
[0012]SLN具有直径为1-1OOOnm的(大约)球形形状。如果要生产非浑浊制剂，则SLN的直径应该在50-300nm之间。
[0013]SLN具有通过乳化剂被稳定化的固体脂质核。
[0014]SLN 从现有技术例如 Mehnert 等人，Adv.Drug Del.Rev.47(2001), 165-196 中已知。
[0015]SLN的脂质相(脂质核)是固态的(即结晶的)。这种相可包含亲脂性和/或两亲性活性成分(例如，抗微生物剂、抗氧化剂、多酚、维生素、多不饱和脂肪酸(PUFA)、染料等)，它们(如果它们包含在固态中)被保护不受降解。
[0016]这是非常重要的另一优点，它允许以巧妙(sophisticated)的方式延长亲脂性或两亲性活性成分的货架期。
[0017]结晶的脂质通常可形成三种不同的晶体:
[0018]α、β ’ 和 β 晶体。
[0019]α -晶体链具有六方晶排布，在X-射线衍射谱中具有最短的间隔线。此外，这种晶型具有最不紧密组装的脂质结构且其在低于其它晶体的温度下熔化。
[0020]β’_晶体是α-和晶体之间的过渡形式，且其为正交晶。其比α-晶体更为有序且在更高温度下熔化。
[0021]β -晶体被组装为三斜晶排布且具有高度有序的片状结构。其是最稳定的形式，因此其在最高温度下熔化。由于动力学原因，晶体自身由较不有序的α-晶体重新排列成为高度有序的β -晶体，这意味着由球形向平板形颗粒的形状变化(Bunjes, Steiniger, &Richter, 2007)。由此，油-水表面积增加，从而导致聚集和疏水小片的凝胶形成。
[0022]但是，为了将生物活性成分包含在SLN的脂质核而不引发上述相分离，不稳定的α -和/或β ’ -晶体结构是优选的。
[0023]本发明的目标是找到提供具有α -和/或β ’ -晶体结构的SLN的方法，所述结构是稳定的，因此不变形成为晶体结构。SLN必须稳定(贮存)数周。
[0024]出乎意料地，已发现:当使用特定乳化剂(其为至少一种阜素(saponin))时，贝Ij获得稳定的SLN，其中固体脂质具有α-和/或β’_晶体结构。
[0025]因此，本发明涉及固体脂质纳米颗粒(I)，其包含
[0026](a)核，所述核包含
[0027](i)固态的脂质相，和
[0028](ii)任选地，至少一种亲脂性和/或两亲性活性成分，和
[0029](b)乳化剂体系，所述乳化剂体系包含
[0030](i)至少一种乳化剂，
[0031]其特征在于:
[0032]所述乳化剂体系包含至少一种皂素。
[0033]此外，优选地，SLN的乳化剂体系的结晶点低于SLN的核的结晶点。这表示:乳化剂体系应该在核结晶之前结晶。
[0034]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(II)，其是固体脂质纳米颗粒(I)，其中乳化剂体系的结晶点低于核的结晶点。
[0035]脂质相可以是任何油(油的混合物)，其在SLN的贮存温度下为固体。合适的油例如甘油三酯、偏甘油酯、脂肪酸、类固醇和蜡。
[0036]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(III)，其是固体脂质纳米颗粒⑴或
(II)，其中脂质相是油(油的混合物)，其在SLN的贮存温度下为固体。合适的油例如甘油三酯、偏甘油酯、脂肪酸、类固醇和蜡。
[0037]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(III’)，其是固体脂质纳米颗粒(I)、(II)或(III)，其中脂质相是选自如下的油(油的混合物):甘油三酯、偏甘油酯、脂肪酸、类固醇和蜡。
[0038]亲脂性和/或两亲性活性成分可以是例如，抗微生物剂、抗氧化剂、多酚、维生素、PUFA或染料、以及所述成分的混合物。
[0039]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(IV)，其是固体脂质纳米颗粒(I)、(II)、
(III)或(III’)，其中亲脂性和/或两亲性活性成分选自:抗微生物剂、抗氧化剂、多酚、维生素、PUFA或染料、以及所述成分的混合物。
[0040]皂素为两亲性糖苷，其根据以下被归类，在现象学方面，当在含水溶液中摇晃时其产生皂状泡沫；以及在结构方面，其组成为一种或多种亲水糖苷部分(moiety)与亲脂性三萜的组合。
[0041]历史上认为皂素来源于植物，但其也已从海洋生物中分离。皂素确实发现于许多植物中，它们的名字源自肥皂草植物(肥皂草属，石竹科)，其根在历史上被用作皂。
[0042]阜素还发现于无患子植物学科，其定义属为无患子属(无患子(soapberry或soapnut)，以及密切相关的槭树科(槭树)和七叶树科(马栗；需要参考)中。
[0043]它还在五小叶绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)(绞股蓝属，葫芦科)中以被称为绞股蓝皂苷的形式被大量发现，并在人参或红参(人参属，五加科)中以被称为人参皂苷的形式被大量发现。在这些科中，这类化学化合物发现于植物的多个部分:叶、茎、根、球茎、花和果实。
[0044]植物源性阜素的商业制剂来自例如阜皮树Quillaja saponaria。
[0045]阜素可商购自例如Desert King Internat1nal 和 Nat1nal Starch。
[0046]在本发明的语境中，优选的阜素化合物是quillaja saponaria(E999)。E数(即，E999)是在欧盟和瑞士( “E”代表“欧洲”)内可用作食品添加剂的化学物质的代码。
[0047]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(V)，其是固体脂质纳米颗粒(I)、(II)、(III)、(III，)或(IV)，其中阜素是 quillaja saponaria。
[0048]本发明的一个实施方式的乳化剂体系还可包含其它乳化剂(=助乳化剂)。如果使用这样的一种或多种助乳化剂。则乳化剂体系仍然应在核结晶之前结晶。
[0049]合适的助乳化剂即，聚山梨醇酯(聚山梨醇酯是来源于被脂肪酸酯化的PEG-化山梨聚糖(山梨糖醇的衍生物)的油状液体)，例如聚山梨醇酯40(聚氧乙烯(20)山梨聚糖单棕榈酸酯)、聚山梨醇酯60(聚氧乙烯(20)山梨聚糖单硬脂酸酯)和聚山梨醇酯80(聚氧乙烯(20)山梨聚糖单油酸酯)；磷脂，例如磷脂酸(磷脂酸盐/酯)、磷脂酰乙醇胺(脑磷脂)、磷脂酰胆碱(卵磷脂)、氢化卵磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇磷酸、磷脂酰肌醇二磷酸、磷脂酰肌醇三磷酸、神经酰胺磷酰胆碱(鞘磷脂)、神经酰胺磷酰乙醇胺(鞘磷脂)和神经酰胺磷酰甘油；硬脂酰-2-乳酸酯/盐，例如硬脂酰-2-乳酸钠(E 481);以及单-和二 -甘油酯的柠檬酸酯，优选地脂肪酸的单-和二 -甘油酯的柠檬酸酯(E472c)。
[0050]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(VI)，其是固体脂质纳米颗粒(I)、(II)、(III)、(III’)、(IV)或(V)，其中乳化剂体系包含至少一种助乳化剂。
[0051]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(VI’)，其是固体脂质纳米颗粒(I)、(II)、(III)、(III’)、(IV)、(V)或(VI)，其中乳化剂体系包含至少一种助乳化剂，所述助乳化剂选自:聚山梨醇酯、磷脂、硬脂酰-2-乳酸酯/盐(stearoyl-2-lactylate)以及单-和二-甘油酯的朽1 檬酸酯(citric acid ester of mono-and d1-glycerides) 0
[0052]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(VI”)，其是固体脂质纳米颗粒⑴、(II)、(III)、(III’)、(IV)、(V)、(VI)或(VI’)，其中乳化剂体系包含至少一种助乳化剂，所述助乳化剂选自:聚山梨醇酯40(聚氧乙烯(20)山梨聚糖单棕榈酸酯)、聚山梨醇酯60(聚氧乙烯(20)山梨聚糖单硬脂酸酯)、聚山梨醇酯80 (聚氧乙烯(20)山梨聚糖单油酸酯)、磷脂酸(磷脂酸盐/酯)、磷脂酰乙醇胺(脑磷脂)、磷脂酰胆碱(卵磷脂)、氢化卵磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇磷酸、磷脂酰肌醇二磷酸、磷脂酰肌醇三磷酸、神经酰胺磷酰胆碱(鞘磷脂)、神经酰胺磷酰乙醇胺(鞘磷脂)、神经酰胺磷酰甘油、硬脂酰-2-乳酸酯/盐，以及单-和二-甘油酯的柠檬酸酯。
[0053]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(VI”’)，其是固体脂质纳米颗粒(I)、
(II)、(III)、(III’)、(IV)、(V)、(VI)或(VI’)，其中乳化剂体系包含至少一种助乳化剂，所述助乳化剂选自:卵磷脂、氢化卵磷脂、硬脂酰-2-乳酸钠(E 481)以及脂肪酸的单-和二-甘油酯的柠檬酸酯(E472c)。
[0054]基于SLN的总重量，至少一种皂素的浓度为0.1-30重量(wt~% )，优选地0.5_20wt_% ο
[0055]因此，本发明还涉及固体脂质纳米颗粒(VII)，其是固体脂质纳米颗粒(I)、(II)、
(III)、(III’)、