专利名称：具有α的制作方法
技术领域：
本发明涉及为α2肾上腺素能激动剂的MPV-2426的新的生物可逆的前体药物，尤其是酯衍生物；制备所述前体药物形式的方法；包含这类前体药物形式的药物组合物；以及使用该前体药物形式的方法。
背景技术：
MPV-2426[4-(6-羟基茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物]在US 6,313,311B1中公开，它可作为α2激动剂用于治疗高血压、青光眼、偏头痛、腹泻、局部缺血、化学品成瘾、焦虑例如手术前焦虑以及各种神经学障碍、肌与骨骼障碍、精神病学障碍和认知障碍，也用作镇静剂和止痛剂、鼻减充血剂以及麻醉辅剂。MPV-2426具有间隙(spatially)限制性的和有效的抗伤害感觉作用，且副作用较小。MPV-2426的脊柱内、鞘内或硬膜外施用在WO 00/18400 A1中公开。通过施用MPV-2426治疗低血压、休克和心肺复苏在WO 01/30347 A1中公开。
已知α2激动剂可以降低眼内压(IOP)。关于这些治疗剂降低IOP作用的首次报道在1966年公开[Makabe，R.Dtsch.Med.Wochenschr.，91(1966)1686]。
前体药物是药物分子的在药理学上无活性的衍生物，在化学或酶促转化后其释放出活性药物而发挥治疗作用。设计前体药物的目的是克服与母体药物相关的各种药剂学或生物药剂学问题。具有良好的生物膜穿透性的前体药物应当表现出最佳的亲油性。此外，前体药物应当足够稳定以对抗化学降解，并且在吸收过程中或吸收后通过体内的酶促水解恢复成活性的母体药物。
发明概述本发明提供了MPV-2426的新的生物可逆的酯前体药物，其在无酶介质中是化学稳定的，具有合适的亲油性(能够穿过生物膜)，并且在体内可容易地被水解成母体药物。
本发明还可提供用于制备药物的组合物，所述药物用于治疗高血压、青光眼、偏头痛、腹泻、局部缺血、化学品成瘾、低血压、休克、心肺复苏、排尿障碍、戒断综合征、充血性心力衰竭、焦虑例如手术前焦虑或各种神经学障碍、肌与骨骼障碍、精神病学障碍或认知障碍，或用作镇定剂或止痛剂、鼻减充血剂，或用作麻醉辅剂。此外，本发明提供了药物组合物，其包含本发明的化合物作为活性剂。另外，本发明提供了治疗其中α2激动剂显示有效的疾病或病症的方法，所述方法包括向需要这类治疗的哺乳动物施用有效量的本发明的化合物。
在说明书中将部分阐述本发明的其它实施方案，随后根据说明书另一部分实施方案将变得显而易见，或者可以通过实施本发明而得知。本发明的实施方案将通过所附权利要求中特别指出的元素和组合而被了解和实现。
应当理解的是，上文的概要描述和以下的详细描述仅仅是示例性和解释性的，不是对所要求保护的发明内容的限制。
附图简要说明
图1表示通过其新戊酰基酯(A)于37℃下在80％人血清中水解而形成MPV-2426(□)。
发明详述本发明提供了通式I的新的生物可逆的酯前体药物 或其药学上可接受的盐或水合物，其中R代表未被取代的或被取代的低级烷基、未被取代的或被取代的芳基、未被取代的或被取代的环烷基、未被取代的或被取代的杂芳基、未被取代的或被取代的低级烷基氨基或含1或2个氮原子的饱和的五或六元杂环基。例如，R代表未被取代的或被取代的低级烷基或者末被取代的或被取代的芳基，例如未被取代的或被取代的低级烷基。化合物可能为4-[6-(2，2-二甲基丙酰氧基)茚满-1-基甲基]-1H-咪唑-1-鎓氯化物、4-(6-乙酰氧基茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物或4-(6-丁酰氧基茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物。在R的定义中，术语“低级”表示具有最多10个碳原子、例如最多6个碳原子的基团。单独的或在组合术语如“环烷基”或“氨基烷基”中的术语“烷基”表示直链或支链的烃基。术语“芳基”表示碳环芳族基团，可能是单-或二环基团。术语“杂芳基”表示含有1至3个杂原子、例如1或2个杂原子的单-或二环芳族基团，其中所述的杂原子为氮和/或氧和/或硫。与各种基团连接的术语“被取代的”表示羟基、氰基、硝基、卤素、氨基、低级烷基氨基、二(低级烷基)氨基、低级烷氧基、芳基或三氟甲基取代基。被取代的基团可以含有1至3个所述的取代基，例如1或2个所述的取代基。术语“卤素”表示氟、氯、溴或碘，例如氯或溴。
式I化合物可提供适当的亲油性以及对抗化学水解的稳定性，并且通过酶促水解恢复为活性母体药物。
本发明可提供用于制备药物的化合物，所述药物用于治疗高血压、青光眼、偏头痛、腹泻、局部缺血、化学品成瘾、低血压、休克、心肺复苏、排尿障碍、戒断综合征、充血性心力衰竭、焦虑例如手术前焦虑，或各种神经学障碍、肌与骨骼障碍、精神病学障碍或认知障碍，或用作镇静剂或止痛剂、鼻减充血剂或用作麻醉辅剂。此外，本发明提供了药物组合物，其包含本发明的化合物作为活性剂。另外，本发明提供了治疗其中α2激动剂显示有效的疾病或病症的方法，所述方法包含向需要这类治疗的哺乳动物施用有效量的本发明的化合物。
本发明的化合物可以按照各种文献中已知的方法或与其类似的合成路径使用合适的起始原料来制备。
一般而言，式I化合物或其药学上可接受的盐或水合物可以例如按照流程图1或与其类似的方法制备，其中R如以上所定义。
流程图1
将羟基茚满化合物II或其药学上可接受的盐或水合物溶解于溶剂，例如三氟乙酸(TFA)，加入碳酰氯。将混合物进行搅拌，例如在室温下搅拌，例如搅拌24小时。蒸发溶剂，用常规方法将产物化合物I从反应混合物中分离出来。如果需要，可以用本领域已知的方法将本发明的化合物转化成它们的药学上可接受的盐或水合物。
上述合成路径旨在对本发明化合物的制备方法进行举例说明，制备方法绝不仅限于此，即，还存在属于本领域技术人员知识范围内的其它可能的合成方法。
实施例14-(6-乙酰氧基茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物将4-(6-羟基-茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物(100mg，0.399mmol)溶解在1ml三氟乙酸(TFA)中，加入乙酰氯(0.510mmol)。将混合物在室温下搅拌24小时。蒸发TFA，将残余物溶解于水并用2M NH3(水溶液)调至碱性。用二氯甲烷(DCM)萃取水相。将合并的萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。将残余物溶于乙醚，溶液用干燥HCl气体饱和。过滤沉淀物并在真空下干燥。得到105mg(82％)白色吸湿性固体。1H NMR(CDCl3，TMS)δ1.72(m，1H)，2.18-2.26(m，4H)，2.72-2.87(m，3H)，3.17(dd，1H)，3.56(qui，1H)，6.85(m，2H)，6.92(s，1H)，7.16(d，1H)，8.61(s，1H)，14.44(s，2H)。13C NMR(CDCl3，TMS)δ21.11，29.60，30.46，31.68，43.93，115.72，117.00，120.29，125.33，132.32，132.40，141.37，146.32，149.39，170.11。HPLC-MS(EI)m/z＝257.2((M+H)+-Cl-)。C15H16N2O2·HCl·0.2CH2Cl2的分析计算值C 58.94，H 5.66，N 9.04。实测值C58.66，H 5.78，N 8.83。
实施例24-(6-丁酰氧基茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物使4-(6-羟基-茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物(100mg，0.399mmol)和丁酸氯(510mmol)在TFA(1ml)中反应并如实施例1中所述进行纯化。得到90mg(77％)白色吸湿性固体。1H NMR(CDCl3，TMS)δ1.02(t，3H)，1.70-1.79(m，3H)，2.18-2.24(m，1H)，2.52(t，2H)，2.73-2.86(m，3H)，3.18(dd，1H)，3.53(qui，1H)，6.84(dd，1H)，6.87(s，1H)，6.92(s，1H)，8.66(s，1H)，11.28(s(宽)，2H)。13C NMR(CDCl3，TMS)δ13.66，18.45，29.68，30.52，31.68，36.24，43.98，115.79，117.05，120.36，125.36，132.32，132.59，141.32，146.36，149.51，172.85。HPLC-MS(EI)m/z＝285.2((M+H)+-Cl-)。C17H20N2O2·HCl·0.2CH2Cl2的分析计算值C 61.16，H 6.39，N 8.29。实测值C 61.30，H 6.46，N 8.22。
实施例34-[6-(2，2-二甲基丙酰氟基)茚满-1-基甲基]-1H-咪唑-1-鎓氯化物使4-(6-羟基-茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物(100mg，0.399mmol)和2，2-二甲基丙酰氯(510mmol)在TFA(1ml)中反应并且如实施例1中所述进行纯化。得到74mg(56％)白色固体。熔点176-177℃。1H NMR(CDCl3，TMS)δ1.33(s，9H)，1.69-1.78(m，1H)，2.16-2.25(m，1H)，2.74-2.88(m，3H)，3.23(dd，1H)，3.57(qui， 1H)，6.83(dd，1H)，6.89(s，1H)，6.93(s，1H)，7.16(d，1H)，8.85(s，1H)，14.38(s，1H)，14.47(s，1H)。13C NMR(CDCl3，TMS)δ27.17，29.64，30.55，31.57，39.07，43.95，115.69，116.96，120.24，125.33，132.12，132.66，141.20，146.30，149.30，177.87。HPLC-MS(EI)m/z＝297.7(M+-2H+-Cl-)。C18H22N2O2·HCl的分析计算值C 64.57，H 6.92，N8.37。实测值C 64.05，H 7.00，N 8.24。
实验对生物膜具有良好穿透性的前体药物应当具有最佳的亲油性(一般描述为辛醇-水分配系数，logPapp)。此外，前体药物应当足够稳定以对抗化学降解，并且在吸收过程中或吸收后通过体内酶促水解恢复成活性母体药物。
实验1.亲油性通过在室温下测定在1-辛醇和pH 5.0或7.4的磷酸盐缓冲液之间的表观分配系数(logPapp)来评价亲油性。一般而言，对于吸收和膜穿透性，认为logPapp值在2-3之间最佳。
方法由供试化合物在1-辛醇和磷酸盐缓冲液(0.16M，pH 5.0或pH 7.4，μ＝0.5)之间的分配来评估表观分配系数(Papp)。缓冲液相和1-辛醇相在使用前通过在室温下剧烈搅拌24小时而被饱和。将在磷酸盐缓冲液中的已知浓度的化合物与适宜体积的1-辛醇一起振摇至达到平衡。振摇1小时后，通过离心分离各相，然后用HPLC测定缓冲液中化合物的浓度。
结果化合物的logPapp值在表1中给出。化合物的亲油性大大高于母体药物。亲油性的增加可导致膜穿透性增强以及更长的作用持续时间，其原因是药动学性质的改变(在体内的滞留时间更长)。
实验2.化学稳定性方法将适量的供试化合物(初始浓度为0.1-0.4mM)溶解在预热的磷酸盐缓冲液(0.16M，μ＝0.5，pH 7.4或pH 5.0)中。将溶液置于恒温水浴中、37℃下，以合适的时间间隔取等分试样并用HPLC分析以测定化合物的降解速率。由随时间变化的剩余化合物的半对数图的线性斜率计算出假一级半衰期(t1/2)。
结果化合物在pH 5.0和7.4的水性溶液中的降解遵循假一级动力学。降解的半衰期(t1/2)如表2所示。化合物在pH 5.0下的稳定性大大高于在7.4下的稳定性。
表1.MPV-2426和其酯的表观分配系数(logPapp，平均值±SD，n＝3)
实验3.酶促水解为了在体内发挥药理学作用，前体药物应当被酶降解成母体药物。因此，评价了化合物对血清酯酶的敏感性。
方法在37℃下，将适量的供试化合物溶解在一体积(例如1ml)磷酸盐缓冲液(0.16M，μ＝0.5，pH 7.4)中。加入4体积(例如4ml)预热的人血清，将所得溶液于37℃下在水浴中混合(初始浓度为0.2-0.5mM)。以合适的时间间隔取出300μl等分试样，用600μl乙睛除蛋白。混合并离心后，将600μl上清液在40℃、空气流下蒸发至干。将残余物重新溶解在300μl流动相中，用HPLC分析。由随时间变化的剩余化合物的半对数图的线性斜率计算出假一级半衰期(t1/2)。还测定了母体药物的形成。
结果前体药物在80％人血清中的水解遵循假一级动力学。降解的半衰期(t1/2)如表2所示。MPV-2426的所有前体药物均通过在80％人血清(pH 7.4)中的酶促水解定量释放出母体药物MPV-2426。图1表示通过其新戊酰基酯于37℃下在80％人血清中水解而形成MPV-2426。
表2.37℃下在磷酸盐缓冲溶液(pH 5.0和7.4)和80％人血清中的水解速率
实验4.家兔的IOP研究进行家兔的IOP研究以证明本前体药物能够释放出母体药物并且因此在体内具有药理学活性。还将前体药物的降低IOP作用与MPV-2426的作用进行了比较。
方法为了进行IOP试验，将家兔置于位于安静的室内的塑料控制盒中。将一滴(25μl)供试溶液从上侧角膜巩膜缘单侧滴入左眼。在滴入过程中，上眼睑被轻微地从眼球拉开。用BioRad(Cambridge，MA)Digilab Modular OnePneumatonometer测量IOP。每次测量前，将一或两滴奥布卡因(0.06％)在测量眼压前应用于角膜以消除不适。然后轻微缩回上眼睑和下眼睑，使扁平传感器与角膜中心接触。对于每次测定，由每只被处理的(同侧的)眼和未被处理的(对侧的)眼至少读取两个读数，使用这些读数的平均值。分别在施用滴眼剂前2、1和0小时以及施用滴眼剂后0.5、1、2、3、4和5小时测量家兔的IOP。将施用滴眼剂时(0小时)的IOP用作基线值。所有研究均用隐蔽的(masked)和随机交叉的设计进行。在每次给药之间每只家兔应经过至少72小时的洗脱期。
结果局部单侧施用三个不同剂量(0.1μg，1.0μg和2.5μg)MPV-2426的新戊酰基酯后眼内压(IOP)的变化如表3所示。降低IOP的作用从1小时持续到整个5小时的实验期间。未被处理的眼观察到较不显著的改变。
与等摩尔剂量的MPV-2426相比，所示的MPV-2426的新戊酰基酯增加降低IOP的效力(表3)。用MPV-2426的新戊酰基酯还观察到延长的作用持续时间。
表3.单侧施用25μl MPV-2426或其新戊酰基酯(PIV)在磷酸盐缓冲液pH 5.0中的溶液后压力正常的家兔被处理的和未被处理的眼在预定时间(小时)的眼内压(IOP)变化(平均值mmHg±SE，n＝5-6)
a与2.5μg MPV-2426等摩尔的*在95％的置信水平下与MPV-2426的数值显著不同的数据(ANOVA，Fisher’sPLSD检验)
权利要求
1.通式I的化合物 或其药学上可接受的盐或水合物，其中R代表未被取代的或被取代的低级烷基、未被取代的或被取代的芳基、未被取代的或被取代的环烷基、未被取代的或被取代的杂芳基、未被取代的或被取代的低级烷基氨基或含1或2个氮原子的饱和的五或六元杂环基。
2.权利要求1的化合物，其中R表示未被取代的或被取代的低级烷基或者未被取代的或被取代的芳基。
3.权利要求2的化合物，其中R表示未被取代的或被取代的低级烷基。
4.权利要求3的化合物，所述化合物为4-[6-(2，2-二甲基丙酰氧基)茚满-1-基甲基]-1H-咪唑-1-鎓氯化物。
5.权利要求3的化合物，所述化合物为4-(6-乙酰氧基茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物。
6.权利要求3的化合物，所述化合物为4-(6-丁酰氧基茚满-1-基甲基)-1H-咪唑-1-鎓氯化物。
7.式I化合物或其药学上可接受的盐或水合物在制备药物中的用途， 其中R如权利要求1中所定义，所述药物用于治疗高血压、青光眼、偏头痛、腹泻、局部缺血、化学品成瘾、低血压、休克、心肺复苏、排尿障碍、戒断综合征、充血性心力衰竭、焦虑或各种神经学障碍、肌与骨骼障碍、精神病学障碍或认知障碍，或用作镇定剂或止痛剂、鼻减充血剂，或用作麻醉辅剂。
8.权利要求7的用途，其中化合物为4-[6-(2，2-二甲基丙酰氧基)茚满-1-基甲基]-1H-咪唑-1-鎓氯化物。
9.一种药物组合物，其包含作为活性剂的式I化合物或其药学上可接受的盐或水合物， 其中R如权利要求1中所定义，和任选地药学上可接受的赋形剂。
10.权利要求9的药物组合物，其中化合物为4-[6-(2，2-二甲基丙酰氧基)茚满-1-基甲基]-1H-咪唑-1-鎓氯化物。
11.治疗其中α2激动剂显示有效的疾病或病症的方法，所述方法包括给需要这类治疗的哺乳动物施用有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或水合物， 其中R如权利要求1中所定义。
12.权利要求11的方法，其中化合物为4-[6-(2，2-二甲基丙酰氧基)茚满-1-基甲基]-1H-咪唑-1-鎓氯化物。
全文摘要
本发明涉及MPV－2426的新前体药物、制备所述前体药物形式的方法、包含这类前体药物形式的药物组合物以及使用该前体药物形式的方法。通式(I)的化合物(见图)或其药学上可接受的盐或水合物，其中R表示未被取代的或被取代的低级烷基、未被取代的或被取代的芳基、未被取代的或被取代的环烷基、未被取代的或被取代的杂芳基、未被取代的或被取代的低级烷基氨基或含有1或2个氮原子的饱和的五或六元杂环基。
文档编号A61P3/10GK1735409SQ200380105132
公开日2006年2月15日 申请日期2003年12月5日 优先权日2002年12月5日
发明者T·耶尔维宁, R·尼米, J·胡斯科宁 申请人:奥赖恩公司