专利名称：黄芩甙元及其衍生物、类似物在制备抗肿瘤药物中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种黄芩甙元及其衍生物、类似物的制药用途，具体涉及黄芩甙元及其衍生物、类似物在制备抗肿瘤药物中的用途。
背景技术：
中药黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)首载于《(神农本草经》，又名黄文、无芩等。其药理功效味苦、性寒，功能泄实火、除湿热，具有抑菌、除热、解毒、镇静、降压、利胆等作用。
黄芩甙及黄芩甙元是黄芩里所含的主要黄酮类化合物，两者具有共同的黄酮母体结构 黄芩甙元是黄芩的主要活性成分之一。分子量270.25，可由黄芩甙水解而得。其化学结构为黄酮母体结构上5、6、7三个氢基-H被羟基-OH取代。
黄芩甙的化学结构为黄酮母体结构上5、6二个氢基-H被羟基-OH取代，7位上羟基-OH与葡萄糖醛酸缩合，即黄芩甙元-7-O-葡萄糖醛酸。
近年来有文献报道，黄芩甙和黄芩甙元对体外培养的乳腺癌细胞的生长具有抑制作用(So F.V，et al.Cancer Lett.，112127-133，1997)。也有专利文献报道黄芩甙及黄芩甙元对食道癌和胃癌细胞有很明显的杀伤效应(中国专利申请号03109933.5；中国专利申请号03109942.4)。
迄今未见有关黄芩甙和黄芩甙元对其他癌株的抗癌活性的报道。
发明内容
本发明的目的旨在寻找并开发黄芩甙元、其衍生物、类似物以及它们的前药、可药用盐的新的医药用途，提供一种黄芩甙元及其衍生物、类似物以及它们的前药、可药用盐在制备抗肿瘤药物中的用途。
本发明涉及下列通式(I)所示的黄芩甙元、其衍生物、类似物以及它们的前药、可药用盐在制备抗肿瘤药物中的用途 其中，R1代表氢、C1～C10烷基、C1～C10烯基、C1～C10炔基或葡萄糖醛基，R2、R3各自代表氢、C1～C10烷基、C1～C10烯基或C1～C10炔基。
本发明人经研究发现，下述通式(I)的化合物或其前药、可药用盐可明显抑制多种肿瘤细胞的活性，故可用于制备抗肿瘤药物 其中，R1代表氢、C1～C10烷基、C1～C10烯基、C1～C10炔基或葡萄糖醛基，R2、R3各自代表氢、C1～C10烷基、C1～C10烯基或C1～C10炔基。
特别是，当R1、R2、R3各自代表氢时，所述化合物为黄芩甙元，所述肿瘤包括但不限于白血病、肺癌、肝癌、宫颈癌、肾癌或大肠癌。
当R1代表葡萄糖醛基，R2、R3各自代表氢时，所述化合物为黄芩甙，所述肿瘤包括但不限于白血病、肺癌、肝癌、宫颈癌、肾癌或大肠癌。
上述化合物均可按本领域的常规方法从黄芩中提取或者通过商业途径获得。
本发明的化合物的可药用盐包括各种无机或有机酸盐如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、扁桃酸盐和草酸盐；各种无机或有机碱盐如氢氧化钠、三羟甲基氨基甲烷(TRIS，tromethane)和N-甲基-葡萄糖胺。
本发明的化合物的前药包括含有该化合物的羧酸酯(可按本领域的常规方法用C1-4的醇浓缩制得)、含有该化合物的羟基酯(可按本领域的常规方法用C1-4的羧酸，C3-6的二羧酸或其酸酐，如马来酸酐，富马酸酐等浓缩制得)、含有该化合物的烯胺(可按本领域的常规方法用C1-4的醛或酮浓缩制得)或含有该化合物的缩醛或者缩酮(可按本领域的常规方法用氯甲基甲醚或氯甲基乙醚浓缩制得)等(Albert S.Kearney Advanced Drug Reviews.19(1996)229-234).。
本发明的黄芩甙元、黄芩甙及其衍生物、类似物可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成份的黄芩甙元、黄芩甙及其衍生物、类似物及可药用载体。
所述可药用载体为各种常用的药物辅料如填充剂(无水乳糖、淀粉、乳糖珠粒、葡萄糖)、粘合剂(微晶纤维素)、崩解剂(交联羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、交联PVP)、润滑剂(硬酯酸镁)以及吸收促进剂、吸附载体、香味剂、甜味剂、稀释剂、赋形剂、润湿剂等。
所述药物组合物可按本领域常规方法制备并可以通过肠道或非肠道或局部途径给药。口服制剂包括片剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液、溶液等，非肠道给药制剂包括注射液；局部给药制剂包括如霜剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂等。
所述药物的给药途径可以为口服、舌下、皮下、肌肉、粘膜、尿道、阴道、静脉等。
本发明的黄芩甙元、黄芩甙及其衍生物、类似物或其药物组合物的用量可根据给药途径，患者的年龄和体重，所治疗肿瘤的类型及严重程度的不同而不同，其日剂量可以是0.001～100mg/kg，可一次或多次给药。
具体实施例方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。但并不意味着本发明仅限于此。
实施例1黄芩甙及黄芩甙元对体外肿瘤细胞生长抑制作用的实验受试药物黄芩甙及黄芩甙元(现有商品)溶于二甲基亚砜(DMSO)，实际测试时按1/1000稀释使用。
阳性对照药物5-氟脲嘧啶，溶于DMSO，实际测试时按1/1000稀释使用。
方法与结果通过MTT测定法来测定出黄芩甙及黄芩甙元对人肺癌细胞株A549、人白血病细胞株HL60、人宫颈癌细胞株Hela、人大肠癌细胞株HCT116、人肝癌细胞株HepG2、人肾癌细胞株RXF-631L的增殖抑制来测出各IC50浓度，以及阳性对照药物5-氟脲嘧啶的IC50浓度。同时将人正常纤维细胞作为对照。
测定方法将上述各细胞株悬浮在含有10％(小)牛胎儿血清的细胞培养液中，以2×104/孔播种于96孔细胞培养盘。在培养24小时后，加入黄芩甙或黄芩甙元于培养液里，最终浓度黄芩甙元0.3-200μg/ml，黄芩甙0.6-350μg/ml，5-氟脲嘧啶0.01-10μg/ml。培养3天后作MTT测定。以未加黄芩甙及黄芩甙元的各细胞作为对照，测试出对各肿瘤细胞50％增长阻止浓度(IC50)。
结果见表1表1
结果显示黄芩甙及黄芩甙元对受试肿瘤细胞都有很明显的抑制作用。而与阳性对照药物5-氟脲嘧啶相比，黄芩甙及黄芩甙元对人正常纤维细胞无任何毒性作用。
实施例2黄芩甙元抑制移植在活体动物上肺癌的生长实验材料BALB/cnu/nu鼠，雄性，6周大，体重在20克左右。
受试药物黄芩甙元(现有商品)溶解于glycofurol使用。
实验方法和结果先将人肺癌细胞A549接种于的BALB/cnu/nu鼠皮下，并将动物分成对照组及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)剂量组以及阳性药物组，每组6只。接种两周后将以溶解于glycofurol黄芩甙元0.1ml注入动物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出肿块测出体积。以对照组的平均体积和给药组相比较。
肿瘤体积的测定方法；{短径2×长径}×0.5肿瘤缩小率＝{1-(给药组的平均体积/对照组的平均体积)}×100％结果见表2表2
表2显示黄芩甙元对移植肺癌细胞有明显的抑杀作用，其中以高剂量组最为明显。
实施例3黄芩甙元抑制移植在活体动物上大肠癌的生长实验材料BALB/cnu/nu鼠，雄性，6周大，体重在20克左右。
受试药物黄芩甙元(现有商品)溶解于glycofurol。
实验方法和结果先将人大肠癌细胞HCT116接种于的BALB/cnu/nu鼠皮下，并将动物分成对照组及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)剂量组，每组6只。接种两周后将以溶解于glycofurol黄芩甙元0.1ml注入动物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出肿块测出体积。以对照组的平均体积和给药组相比较。
肿瘤体积的测定方法；{短径2×长径}×0.5肿瘤缩小率＝{1-(给药组的平均体积/对照组的平均体积)}×100％结果见表3
表3
表3显示黄芩甙元对移植大肠癌细胞有明显的抑杀作用，其中以高剂量组最为明显。
实施例4黄芩甙元抑制移植在活体动物上肝癌的生长实验材料；BALB/cnu/nu鼠，雄性，6周大，体重在20克左右。
受试药物；黄芩甙元(现有商品)溶解于glycofurol。
实验方法和结果；先将人肝癌细胞HepG2接种于的BALB/cnu/nu鼠皮下，并将动物分成对照组及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)剂量组，每组6只。接种两周后将以溶解于glycofurol黄芩甙元0.1ml注入动物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出肿块测出体积。以对照组的平均体积和给药组相比较。
肿瘤体积的测定方法；{短径2×长径}×0.5肿瘤缩小率＝{1-(给药组的平均体积/对照组的平均体积)}×100％结果见表4表4
表4显示黄芩甙元对移植肝癌细胞有明显的抑杀作用，其中以高剂量组最为明显。
实施例5黄芩甙元抑制移植在活体动物上宫颈癌的生长实验材料BALB/cnu/nu鼠，雄性，6周大，体重在20克左右。
受试药物黄芩甙元(现有商品)溶解于glycofurol。
实验方法和结果先将人宫颈癌细胞株Hela接种于的BALB/cnu/nu鼠皮下，并将动物分成对照组及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)剂量组，每组6只。接种两周后将以溶解于glycofurol黄芩甙元0.1ml注入动物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出肿块测出体积。以对照组的平均体积和给药组相比较。
肿瘤体积的测定方法{短径2×长径}×0.5肿瘤缩小率＝{1-(给药组的平均体积/对照组的平均体积)}×100％结果见表5表5
表5所显示黄芩甙元对移植肾癌细胞有明显的抑杀作用，其中以高剂量组最为明显。
实施例6黄芩甙元抑制移植在活体动物上肾癌的生长实验材料BALB/cnu/nu鼠，雄性，6周大，体重在20克左右。
受试药物黄芩甙元(现有商品)溶解于glycofurol。
实验方法和结果先将人肾癌细胞株RXF-631L接种于的BALB/cnu/nu鼠皮下，并将动物分成对照组及高(20mg/kg)中(10mg/kg)低(5mg/kg)剂量组，每组6只。接种两周后将以溶解于glycofurol黄芩甙元0.1ml注入动物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出肿块测出体积。以对照组的平均体积和给药组相比较。
肿瘤体积的测定方法{短径2×长径}×0.5肿瘤缩小率＝{1-(给药组的平均体积/对照组的平均体积)}×100％结果见表6
表6
表6显示黄芩甙元对移植肾癌细胞有明显的抑杀作用，其中以高剂量组最为明显。
实施例7黄芩甙元抑制移植在活体动物上白血病细胞的生长实验材料BALB/cnu/nu鼠，雄性，6周大，体重在20克左右。
受试药物黄芩甙元(现有商品)溶解于glycofurol。
实验方法和结果先将白血病细胞HL601×108接种于BALB/cnu/nu鼠的腹腔内，接种48小时后，将动物分成对照组及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)剂量组，每组6只。将溶解于glycofurol黄芩甙元0.1ml注入动物腹腔内。每四日注射一次，共注射三次。以对照组的平均生存日数和给药组相比较。
延命率(ILS)＝(给药组的平均生存日数/对照组的平均生存日数)×100％结果见表7表7
表7显示黄芩甙元对移植白血病细胞鼠的生存有延长作用，其结果表明黄芩甙元有明显的抗白血病作用。
权利要求
1.下述通式(I)的化合物或其前药、可药用盐在制备抗肿瘤药物中的用途 其中，R1代表氢、C1～C10烷基、C1～C10烯基、C1～C10炔基或葡萄糖醛基，R2、R3各自代表氢、C1～C10烷基、C1～C10烯基或C1～C10炔基；所述肿瘤选自白血病、肺癌、肝癌、宫颈癌、肾癌或大肠癌。
2.权利要求1的用途，其中当R1、R2、R3各自代表氢时，所述化合物为黄芩甙元。
3.权利要求1的用途，其中当R1代表葡萄糖醛基，R2、R3各自代表氢时，所述化合物为黄芩甙。
4.黄芩甙元在制备抗白血病药物中的用途。
5.黄芩甙元在制备抗肺癌药物中的用途。
6.黄芩甙元在制备抗肝癌药物中的用途。
7.黄芩甙元在制备抗宫颈癌药物中的用途。
8.黄芩甙元在制备抗肾癌药物中的用途。
9.黄芩甙元在制备抗大肠癌药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种黄芩甙元及其衍生物、类似物的制药用途，具体涉及黄芩甙元及其衍生物、类似物在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明开发了黄芩甙元及其衍生物、类似物新的医药用途。
文档编号A61K31/7048GK1568966SQ200410018368
公开日2005年1月26日 申请日期2004年5月14日 优先权日2004年5月14日
发明者吴一心 申请人:吴一心