专利名称：C的制作方法
技术领域：
本发明涉及的是C60的衍生物富勒醇在制备滋养毛发制剂中的应用。
背景技术：
碳的第三种同素异型体C60及其家族-富勒烯于1985年被发现，发现富勒烯的三位化学家因此而分享了1996年诺贝尔化学奖。富勒烯中典型成员C60是由60个碳原子组成的具有特殊的中空笼状结构球形分子，包括12个五元环和20个六元环，其直径为0.71nm。特殊结构赋予它们许多奇异的物理和化学性质。1990年用电弧放电的方法能制备克量级C60的方法之后，富勒烯在物理学、化学和材料科学的研究和应用迅速蓬勃发展起来，已在世界范围内成为令人瞩目的一个研究热点。尽管富勒烯的生物活性及其应用研究明显迟后于物理学和化学，但是其他学科的研究者都一致认为富勒烯在医学和药学领域有着巨大的应用潜力。已经知道，C60极易与自由基反应，被喻为“吸收自由基的海绵”；C60体积与HIV病毒活性中心的孔穴大小相配，有可能堵住洞口，切断的营养供给，使病毒失活；富勒烯阳离子铵衍生物能抑制细菌对分子氧的消耗，通过能量代谢抑制而产生抑菌效应；还有人证明了富勒烯衍生物能穿透外部细胞膜，优先定位于线粒体等等。所有这些研究结果都支持了富勒烯作为药物或药物载体的潜在应用前景。另一方面，从化学上看，C60有30个双键，可以发生Diels-Alder反应、Bingel反应、和1，3-偶极环加成反应等，是药物设计的理想载体，人们把C60喻为药物设计中的“化学针插”，可以根据需要“插”上多种特定的药物或功能性基团，为C60作为载体的复合药物研制开拓了广阔的空间。
Yamago等发现用14C标记的水溶性C60的羧酸衍生物给老鼠静脉注射后，小鼠皮毛有相当多的摄取，但未揭示上述富勒烯衍生物在皮毛中的高摄取率是否能改善活体动物的毛发状态，即C60及其衍生物在改善毛发制剂中的应用，还未有相关报道。
C60的羟基化合物又称富勒醇，一般含多个羟基的富勒醇易溶于水，而水溶性C60化合物的合成则是非极分子C60能否在生物化学领域得以真正应用的关键所在。因此富勒醇的合成对研究生物活性材料及生命化学有着重大的理论及实践意义。迄今为止国内外化学研究人员已通过多种途径合成得到含不同羟基数(6-34)的富勒醇(请参见余伯承等，化学通报，1997，(5)，25；Kelly A et，Bioorganic&Medicinal Chemistry.2002，10，1991-1997；以及专利号为01109496.6的中国专利)。
发明内容
我们课题组从事C60的生物活性及其作为药物载体的应用研究已有多年。在研究中，我们发现将放射性核素67Ga和99mTc标记的C60(OH)x注射到小鼠静脉中，通过动物解剖-γ射线测量研究了标记物在小鼠体内的摄取、分布和代谢，结果表明小鼠皮毛有相当多的摄取，这个结果和Yamago的研究结果有相似之处。
而且，最近在富勒烯衍生物对小鼠受60Co的γ射线辐照损伤的防护作用的实验研究中，意外发现，给小鼠静脉注射C60的一种简单的水溶性衍生物富勒醇几天后注射组与空白对照组相比，注射组小鼠毛色更光亮，蓬松，柔顺，鼠毛的生长状态更好。
因而，本发明的目的就是解决上述课题，提供一种C60的衍生物富勒醇在滋养毛发方面的应用。
本发明的目的是这样实现的一种C60的衍生物富勒醇在制备滋养毛发制剂中的应用。
上述的富勒醇为C60(OH)x，其中x＝6-34；优选的是x＝23-24。
其中，所述的滋养毛发制剂包括护发剂、生发剂和防脱发剂等。
由于C60及其衍生物对哺乳动物的皮毛有一定的趋向浓集效应，并且能使毛生长良好，可用于脱发症的治疗及护理毛发应用。此外，由于C60及其衍生物的吸收自由基、抑制细菌生长、透过细胞膜等活性，使该类药物具有更独特的生理活性，开扩了C60及其衍生物，特别是其羟基衍生物富勒醇C60(OH)x作为防脱发、生发和护发药物的应用前景。
具体实施例方式
为了更好的理解本发明，下面以实施例说明之以下所用C60购自武汉大学，其余试剂均为市售。
实施例1 C60的简单的水溶性衍生物富勒醇C60(OH)x(x＝14-16)的制备将500mg C60溶于10ml甲苯，加入反应瓶B，通氮气脱氧5分钟。反应瓶A中加入10g亚硝酸钠，滴加浓硝酸，产生的气体通入反应瓶B中，15分钟后，反应2小时后，停止反应，减压蒸去溶剂得到黑色硝基C60化合物，加入25ml 3N的氢氧化钠溶液中得悬浊液，40℃加热4小时。加入80ml甲醇得到黑色沉淀，离心分出沉淀，用甲醇洗3遍，所得固体真空干燥得到富勒醇C60(OH)x(x＝14-16)。
实施例2 C60的简单的水溶性衍生物富勒醇C60(OH)x(x＝23-24)的制备将100mg C60溶于100ml精制甲苯中，加入4ml 4M的氢氧化钠水溶液，64滴10％的四丁基氢氧化铵，10ml 30％的H2O2，110℃加热回流，25分钟后又加入10ml 30％的H2O2，2小时后，甲苯层由紫色变为无色，水层呈淡黄色，停止加热，分出水层，用甲醇沉淀，所得固体用水溶解后，80℃加热水解，100℃烘干得到富勒醇C60(OH)x(x＝23-24)。
实施例3 C60的简单的水溶性衍生物富勒醇C60(OH)x(x＝30)的制备20mg C60溶于20ml甲苯溶液中，加入10ml(1g/ml)的KOH溶液，3滴四丁基氢氧化铵，搅拌12小时，分出水层，用甲醇沉淀得褐色固体，用甲醇洗3遍，所得固体真空干燥得富勒醇C60(OH)x(x＝30)。
实施例467Ga-C60(OH)x(x＝23-24)的合成按照67Ga标记C60(OH)x的最佳实验条件，合成了67Ga-C60(OH)x标记物。其具体实验条件如下把0.8ml的67GaCl3溶液加到装有6.5ml浓度为5.88mg/ml C60(OH)x(x＝23-24)的反应器中，调pH为7.0，在沸水浴中反应60min。放射性浓度为26.3MBq/ml，C60(OH)x浓度为5.88mg/ml，放射性比活度为4.473MBq/mgC60(OH)x，以0.1M NH4Ac为层析液，聚酰胺薄膜为载体测定标记率。
试验实施例1 本发明的富勒烯衍生物富勒醇动物体内分布实验67Ga-C60(OH)x(x＝23-24)在小白鼠体内的分布取体重为18～20g的雌性昆明小白鼠35只，随机分成7组，每组5只，取标记物，按200μl/只，从小白鼠尾静脉中注入实施例4所得的67Ga-C60(OH)x(浓度为5.88mg/ml)，在给药后的1、3、10、24、72、168小时(h)时各处死一组，取皮毛、肝脏、脾、肾、颅骨、股骨等重要脏器，分别称重并测量其放射性计数，计算每克脏器所摄取的放射性占注射放射性的百分比(％ID/g)，得到67Ga-C60(OH)x在小鼠体内的生物分布。
结果如下表所示，注射67Ga-C60(OH)x1-24天皮毛的摄取率Ig值为注入剂量的4-1.94％/克，考虑到小鼠整体皮毛的重量约占其体重的2.5％，从而估计得到C60(OH)x的皮毛摄取率大约接近10％。
表167Ga-C60(OH)x在小鼠体内的生物分布(％ID/g)
试验实施例2 富勒醇滋养毛发实验按200μl/只，给小鼠静脉注射实施例2所得的水溶性衍生物富勒醇C60(OH)x(x＝23-24)(浓度为5.88mg/ml)，约一周后注射组与空白对照组相比，注射组小鼠毛色更光亮，蓬松，柔顺，鼠毛的生长状态更好。
权利要求
1.一种C60的衍生物富勒醇在制备滋养毛发制剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的富勒醇为C60(OH)x，其中x＝6-34。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述的富勒醇C60(OH)x，其中x＝23-24。
4.根据权利要求1-3任一权利要求所述的应用，其特征在于所述的滋养毛发制剂是指护发剂、生发剂或防脱发剂。
全文摘要
本发明公开了C
文档编号A61K33/44GK1695636SQ20041001837
公开日2005年11月16日 申请日期2004年5月14日 优先权日2004年5月14日
发明者刘瑞丽, 蔡小青, 李文新 申请人:中国科学院上海应用物理研究所