作为激酶抑制剂的噻吩并吡啶酮衍生物的制作方法

专利名称：作为激酶抑制剂的噻吩并吡啶酮衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一系列噻吩并吡啶酮衍生物、含有它们的组合物、它们的制备方法和它们在医药中的用途。
免疫与炎性应答牵涉多种细胞类型，控制和协调经由细胞-细胞接触(例如整联蛋白与它们的受体之间的相互作用)和借助细胞内信号发送分子发生的各种相互作用。大量不同的信号发送分子都牵涉其中，包括细胞因子、淋巴细胞、趋化因子和生长因子。
细胞借助细胞内信号发送机理对这类细胞内信号发送分子产生反应，它们包括蛋白激酶、磷酸酶和磷脂酶。蛋白激酶有五类，主要是酪氨酸激酶和丝氨酸/苏氨酸激酶[Hunter，T.，Methods inEnzymology(Protein Kinase Classification)p.3，Hunter，T.andSefton，B.M.；eds.Vol.200，Academic Press；San Diego，1991]。
一个丝氨酸/苏氨酸激酶亚类是有丝分裂原活化蛋白(MAP)激酶，它有至少三个在活化环的序列和大小上各不相同的家族[Adams，J.L.et al.，Progress in Medicinal Chemistry，pp.1-60，King，F.D.and Oxford，A.W.eds.，vol.38，Elsevier Science，2001](i)细胞外调节激酶(ERK)；(ii)c-Jun NH2末端激酶或应力活化激酶(JNK或SAP激酶)；和(iii)p38激酶，它们具有苏氨酸-甘氨酸-酪氨酸(TGY)活化基序。JNK和p38 MAP激酶都主要受应力刺激物的活化，包括但不限于促炎性细胞因子，例如肿瘤坏死因子(TNF)和白介素-1(IL-1)；紫外光；内毒素；和化学或渗透压休克。
p38已有四种同工型被描述过(p38α/β/γ/δ)。人p38α酶最初被鉴定为细胞因子抑制性抗炎药(CSAID)的靶，所发现的两种同工酶最初被称为CSAID结合蛋白-1(CSBP-1)和CSBP-2[Lee，J.C.et al.，Nature(London)，1994，372，739-46]。CSBP-2现在被普遍称为p38α，其与CSBP-1在25个氨基酸的内部序列方面有所不同，这是由于两个在小鼠和人类中都保守的外显子的区别剪接所致[McDonnell，P.C.et al.，Genomics，1995，29，301-2]。CSBP-1和p38α被遍在地表达，两种同工型之间在组织分布、活化行为、底物偏好性或CSAID结合方面是没有区别的。第二种同工型是p38β，它与p38α具有70％的同一性。p38β的第二种形式被称为p38β2，也是已知的，在二者中它被相信是主要的形式。p38α和p38β2在很多不同的组织中被表达。不过，在单核细胞和巨噬细胞中，p38α是主要的激酶活性[Lee，J.C.，bid；Jing，Y.et al，J.Biol.Chem.，1996，271，10531-34；Hale，K.K.et al.，J.Immun.，1999，162，4246-52]。p38γ和p38δ(分别也被称为SAP激酶-3和SAP激酶-4)对p38α而言分别具有～63％和～61％同源性。p38γ主要在骨骼肌中被表达，而p38δ见于睾丸、胰腺、前列腺、小肠和某些内分泌组织中。
所有p38同系物和剪接变体都含有12个氨基酸的活化环，它包括Thr-Gly-Tyr基序。TGY基序中Thr-180和Tyr-182二者被双重特异性上游激酶所双重磷酸化是p38的活化所必需的，导致这些酶的比活性增加＞1000倍[Doza，Y.N.et al.，FEBS Lett.，1995，364，7095-8012]。这种双重磷酸化受到MKK6的影响，在某些条件下受到相关酶MKK 3的影响[Enslen，H.et al.，J.Biol.Chem.，1998，273，1741-48]。MKK3和MKK6属于被称为MAPKK(有丝分裂原活化蛋白激酶激酶)的酶家族，它们继而被MAPKKK(有丝分裂原活化激酶激酶激酶)所活化，后者也称为MAP3K。
有若干MAP3K已被鉴定，它们被多种刺激物所活化，包括环境应力、炎性细胞因子和其他因素。MEKK4/MTK1(MAP或ERK激酶激酶/MAP三激酶-1)、ASK1(细胞程序死亡刺激的激酶)和TAK1(TGF-β-活化的激酶)是一些被鉴别为MAPKK上游活化物的酶。MEKK4/MTK1被认为被若干GADD-45-样基因所活化，它们响应于环境刺激物而被诱导，最终引起p38活化[Takekawa，M.and Saito，H.，Cell，1998，95，521-30]。已经显示TAK1响应于转化生长因子-β(TGF-β)而活化MKK6。TNF-刺激的p38活化被相信受到TRAF2(与TNF受体有关的因子)和Fas适配蛋白(adaptor protein)Daxx募集的介导，这导致ASK1、继而p38的活化。
有若干p38底物已被鉴别，包括其他激酶(例如MAPK活化的蛋白激酶2/3/5(MAPKAP2/3/5)、p38调节的/活化的蛋白激酶(PRAK)、MAP激酶-相互作用性激酶1/2(MNK1/2)、有丝分裂原-与应力-活化的蛋白激酶1(MSK1/RLPK)和核糖体S6激酶-B(RSK-B))；转录因子(例如活化转录因子2/6(ATF2/6)、单核细胞-增强因子-2A/C(MEF2A/C)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、E1k1和Sap-1a1)；以及其他底物(例如cPLA2、p47phox)。
MAPKAP K2响应于环境应力而被p38活化。经过工程化加工而缺乏MAPKAP K2的小鼠不会响应于脂多糖(LPS)而产生TNF。若干其他细胞因子、例如IL-1、IL-6、IFN-g和IL-10的产生也受到部分抑制[Kotlyarov，A.et al.，Nature Cell Biol.，1999，1，94-7]。此外，来自p38α无效小鼠的胚胎干细胞的MAPKAP K2没有响应于应力而被活化，这些细胞也没有响应于IL-1而产生IL-6[Allen，M.et al.，J.Exp.Med.，2000，191，859-69]。这些结果表明，MAPKAP K2不仅是TNF和IL-1产生所必需的，而且是由细胞因子诱导的信号发送所必需的。另外，MAPKAP K2/3对热休克蛋白HSP25和HSP27进行磷酸化，从而调节它们，而这二者参与细胞骨架的再组织。
有若干p38小分子抑制剂已被报道，它们在低μM范围内的浓度下抑制人单核细胞中的IL-1和TNF合成[Lee，J.C.et al.，Int.J.Immunopharm.，1988，10，835]，在耐受环加氧酶抑制剂的动物模型中表现活性[Lee，J.C.et al.，Annals N.Y.Acad.Sci.，1993，696，149]。另外，已知这些小分子抑制剂会减少多种促炎性蛋白的合成，包括IL-6、IL-8、粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和环加氧酶-2(COX-2)。TNF-诱导的胞质PLA2磷酸化与活化、TNF-诱导的VCAM-1在内皮细胞上的表达和IL-1刺激的胶原酶与溶基质素的合成也受到p38小分子抑制剂的抑制[Cohen，P.，Trends Cell Biol.，1997，7，353-61]。
包括单核细胞和巨噬细胞在内的各种细胞产生TNF和IL-1。过度或未受调控的TNF产生与大量疾病状态有关，包括克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、pyresis、类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎与其他关节炎病症、中毒性休克综合征、内毒素性休克、脓毒病、脓毒性休克、革兰氏阴性脓毒病、骨吸收疾病、再灌注损伤、移植物对抗宿主反应、同种异体移植物排斥、成人呼吸窘迫综合征、慢性肺炎性疾病、矽肺病、肺肉样瘤病、脑型疟、瘢痕组织生成、瘢痕瘤生成、由感染(例如流感)引起的发热与肌痛、继发于获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的恶病质、继发于感染或恶性肿瘤的恶病质、AIDS或AIDS相关性复合征。
过度或失调的IL-1产生在下列疾病中有牵连类风湿性关节炎、骨关节炎、创伤性关节炎、风疹性关节炎、急性滑膜炎、牛皮癣性关节炎、恶病质、莱特尔氏综合征、内毒素血、中毒性休克综合征、结核、动脉粥样硬化、肌肉退化、和其他急性或慢性炎性疾病(例如由内毒素诱发的炎性反应或炎性肠疾病)。另外，IL-1与糖尿病和胰腺β细胞破坏也有联系[Dinarello，C.A.J.Clinical Immunology，1985，5，287-97]。
IL-8是一种趋化因子，它由多种细胞类型产生，包括内皮细胞、单核细胞、成纤维细胞和角质细胞。IL-1、TNF和LPS都诱导内皮细胞产生IL-8。已经显示体外IL-8具有大量功能，包括是嗜中性粒细胞、T-淋巴细胞和嗜碱性粒细胞的化学诱引剂。也已显示IL-8可增加Mac-1(CD11b/CD18)在嗜中性粒细胞上的表达，而无从头蛋白质合成，这可能有助于增加嗜中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附。很多疾病都是以大量嗜中性粒细胞浸润为特征的。嗜碱性粒细胞的组胺释放(特应性和正常个体二者中)受到IL-8的诱导，嗜中性粒细胞的溶菌酶释放和呼吸性爆发也是如此。
IL-1和TNF以及其他白细胞衍生细胞因子作为重要而关键的炎性介质的中心角色有详细的文献记载。已经显示或者可以预期，抑制这些细胞因子将会有益于控制、缓和或减少这些疾病状态中的许多类型。
p38在信号发送分子-介导的细胞外向细胞内信号传导级联内所占据的中心位置和其不仅对IL-1、TNF与IL-8的产生、而且对其他促炎性蛋白(例如IL-6、GM-CSF、COX-2、胶原酶和溶基质素)的合成和/或作用的影响使其成为被小分子抑制剂抑制的目标，预期这类抑制作用将是一种非常有效的调节过度与破坏性免疫系统活化的机理。针对p38激酶抑制剂所述的有力的多样化抗炎活性支持了这种预期[Adams，ibid；Badger，et al，J.Pharm.Exp.Ther.1996，279，1453-61；Griswold，et al，Pharmacol.Comm.，1996，7，323-29]。
我们现已发现一组化合物，它们是p38激酶(p38α/β/δ/γ)和其同种型与剪接变体(尤其是p38α、p38β和p38β2)的有力的选择性的抑制剂。这些化合物因而可供医用，例如预防和治疗如本文所述的免疫或炎性障碍。
因而，按照本发明的一个方面，我们提供式(1)化合物 其中Y是连接基团-C(O)-或-S(O)2-；n是零或整数1；m是整数1、2、3或4；p是整数1、2、3或4；Rd是-OH、-(Alk2)OH(其中Alk2是直链或支链C1-4亚烷基链)、-OR1(其中R1是直链或支链C1-6烷基)、-(Alk2)OR1、-NR2R3(其中R2和R3可以相同或不同，各自独立地是氢原子或者直链或支链C1-6烷基)、-(Alk2)NR2R3或者直链或支链C1-6烷基；Alk1是直链或支链C1-4亚烷基链；
Cy1是可选被取代的环脂族、芳族或杂芳族基团；Ar是可选被取代的芳族或杂芳族基团；及其盐、溶剂化物、水合物和N-氧化物。
将被领会到的是，式(1)化合物可以具有一个或多个手性中心，并以对映体或非对映体形式存在。本发明被理解为延及所有这类对映体、非对映体及其任意比例的混合物，包括外消旋物。式(1)和下文各式打算代表所有各种异构体及其混合物，另有规定或指示者除外。另外，式(1)化合物可以互变体存在，例如酮(CH2C＝O)-烯醇(CH＝CHOH)互变体。式(1)和下文各式打算代表所有各种互变体及其混合物，另有规定者除外。
本文关于本发明化合物及其中间体所用的下列通用术语具有下列所规定的含义，另有具体定义者除外。
因而，本文所用的术语“烷基”无论作为基团还是作为基团的一部分都包括直链或支链C1-6烷基，例如C1-4烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。类似地，术语“烯基”或“炔基”打算表示直链或支链C2-6烯基或C2-6炔基，例如C2-4烯基或C2-4炔基。可能存在于这些基团上的可选取代基包括一个、两个、三个或更多取代基，其中每个取代基可以相同或不同，并选自卤原子，例如氟、氯、溴或碘原子；-OH；-CO2H；-CO2R4(其中R4是可选被取代的直链或支链C1-6烷基，特别是直链或支链C1-4烷基)，例如-CO2CH3或-CO2C(CH3)3；-CONHR4，例如-CONHCH3；-CON(R4)2，例如-CON(CH3)2；-COR4，例如-COCH3；C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；卤代C1-6烷氧基，例如三氟甲氧基或二氟甲氧基；巯基(-SH)；-S(O)R4，例如-S(O)CH3；-S(O)2R4，例如-S(O)2CH3；C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基；氨基；-NHR4，例如-NHCH3；或者-N(R4)2，例如-N(CH3)2。若两个R4基团存在于任意上述取代基中，则它们可以相同或不同。
另外，当两个R4烷基存在于任意上述可选取代基中时，这些基团可以与它们所附着的N原子一起连接构成杂环。这类杂环可以可选地被另一杂原子或含杂原子的基团所中断，它们选自-O-、-S-、-N(R4)-、-C(O)-或-C(S)-基团。这类杂环的具体实例包括哌啶基、吡唑烷基、吗啉基、硫吗啉基、吡咯烷基、咪唑烷基和哌嗪基环。
术语“卤素”打算包括氟、氯、溴或碘原子。
术语“卤代烷基”打算包括，被一个、两个或三个上述卤原子所取代的如上刚提及的那些烷基。这类基团的具体实例包括-CF3、-CCl3、-CHF2、-CHCl2、-CH2F和-CH2Cl基团。
本文所用的术语“烷氧基”打算包括直链或支链C1-6烷氧基，例如C1-4烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基。本文所用的“卤代烷氧基”包括被一个、两个或三个上述卤原子所取代的任意这些烷氧基。具体实例包括-OCF3、-OCCl3、-OCHF2、-OCHCl2、-OCH2F和-OCH2Cl基团。
本文所用的术语“烷硫基”打算包括直链或支链C1-6烷硫基，例如C1-4烷硫基，例如甲硫基或乙硫基。
本文所用的术语“烷基氨基”或“二烷基氨基”打算包括基团-NHR1a和-N(R1a)(R1b)，其中R1a和R1b各自独立地是可选被取代的直链或支链烷基，或者二者与它们所附着的N原子一起构成可选被取代的杂环烷基，它可以含有另一杂原子或含杂原子基团，例如-O-或-S-原子或者-N(R1a)-基团。这类可选被取代的杂环烷基的具体实例包括可选被取代的吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基和N’-C1-6烷基-哌嗪基。可能存在于这类杂环烷基上的可选取代基包括上文关于术语“烷基”所述的那些可选取代基。
当各自存在于本发明的化合物中时，由Alk1和/或Alk2代表的亚烷基链的具体实例包括-CH2-、-CH2CH2-、-CH(CH3)CH2-、-(CH2)2CH2-、-C(CH3)2-、-(CH2)3CH2-、-CH2CH(CH3)CH2-、-C(CH3)2CH2-或-CH(CH3)CH2CH2-链。
本发明化合物中由基团Cy1代表的可选被取代的环脂族基团包括可选被取代的C3-10环脂族基团。具体实例包括可选被取代的C3-10环烷基，例如C3-7环烷基；或者C3-10环烯基，例如C3-7环烯基。
由基团Cy1代表的环脂族基团的具体实例包括可选被取代的环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、2-环丁烯-1-基、2-环戊烯-1-基和3-环戊烯-1-基，尤其是环丙基。
可能存在于由基团Cy1代表的环脂族基团上的可选取代基包括一个、两个、三个或更多取代基，其选自卤原子；C1-6烷基，例如甲基或乙基；卤代C1-6烷基，例如卤代甲基或卤代乙基，例如二氟甲基或三氟甲基，其可选地被羟基取代，例如-C(OH)(CF3)2；C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；卤代C1-6烷氧基，例如卤代甲氧基或卤代乙氧基，例如二氟甲氧基或三氟甲氧基；巯基；C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基；羰基(＝O)；硫代羰基(＝S)；亚氨基(＝NR4a)(其中R4a是-OH基团或C1-6烷基)；或者-(Alk3)vR5基团，其中Alk3是直链或支链C1-3亚烷基链，v是零或整数1，R5是C3-8环烷基、-OH、-SH、-N(R6)(R7)(其中R6和R7各自独立地选自氢原子或者可选被取代的烷基或C3-8环烷基)、-OR6、-SR6、-CN、-NO2、-CO2R6、-SOR6、-SO2R6、-SO3R6、-OCO2R6、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(S)R6、-C(O)N(R6)(R7)、-OC(O)N(R6)(R7)、-N(R6)C(O)R7、-C(S)N(R6)(R7)、-N(R6)C(S)R7、-SO2N(R6)(R7)、-N(R6)SO2R7、-N(R6)C(O)N(R7)(R8)(其中R8是如R6所定义的)、-N(R6)C(S)N(R7)(R8)、-N(R6)SO2N(R7)(R8)或者可选被取代的芳族或杂芳族基团。
Alk3链的具体实例包括-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-链。
当R5、R6、R7和/或R8作为C3-8环烷基存在时，它例如可以是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。可能存在于这类基团上的可选取代基包括例如一个、两个或三个取代基，它们可以相同或不同，并选自卤原子，例如氟、氯、溴或碘原子；或者羟基或C1-6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基或异丙氧基。
当基团R6和R7或者R7和R8都是烷基时，这些基团可以与它们所附着的N原子一起连接构成杂环。这类杂环可以可选地被选自下述的另一杂原子或含杂原子基团所中断-O-、-S-、-N(R7)-、-C(O)-或-C(S)-基团。这炎杂环的具体实例包括哌啶基、吡唑烷基、吗啉基、硫吗啉基、吡咯烷基、咪唑烷基和哌嗪基环。
当R5是可选被取代的芳族或杂芳族基团时，它可以是下文关于Cy1所述的任意这类基团。
一般而言，由基团Cy1代表的可选被取代的芳族基团例如包括单环或二环稠合的环状C6-12芳族基团，例如苯基、1-或2-萘基、1-或2-四氢萘基、二氢茚基或茚基，尤其是苯基。
由基团Cy1代表的杂芳族基团例如包括C1-9杂芳族基团，其中含有例如一个、两个、三个或四个选自氧、硫或氮原子的杂原子。一般而言，杂芳族基团例如可以是单环或二环稠合的环状杂芳族基团。单环杂芳族基团例如包括五-或六-元杂芳族基团，其中含有一个、两个、三个或四个选自氧、硫或氮原子的杂原子。二环杂芳族基团例如包括八-至十三-元稠合的环状杂芳族基团，其中含有一个、两个或更多个选自氧、硫或氮原子的杂原子。
这些类型的杂芳族基团的具体实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、N-C1-6烷基咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、1，2，4-三嗪基、1，2，3-三嗪基、苯并呋喃基、(2，3-二氢)苯并呋喃基、苯并噻吩基、(2，3-二氢)苯并噻吩基、苯并三唑基、吲哚基、二氢吲哚基、吲唑啉基(indazolinyl)、苯并咪唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并吡喃基、(3，4-二氢)苯并吡喃基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基(naphthyridinyl)、咪唑并[1，5-a]吡啶基、咪唑并[1，5-a]吡嗪基、咪唑并[1，5-c]嘧啶基、吡啶并[3，4-b]吡啶基、吡啶并[3，2-b]吡啶基、吡啶并[4，3-b]吡啶基、喹啉基、异喹啉基、酞嗪基、四唑基、5，6，7，8-四氢喹啉基、5，6，7，8-四氢异喹啉基、酰亚氨基(例如琥珀酰亚氨基、苯二酰亚氨基或萘二酰亚氨基(例如1，8-萘二酰亚氨基))、吡唑并[4，3-d]嘧啶基、呋喃并[3，2-d]嘧啶基、噻吩并[3，2-d]嘧啶基、吡咯并[3，2-d]嘧啶基、吡唑并[3，2-b]吡啶基、呋喃并[3，2-b]吡啶基、噻吩并[3，2-b]吡啶基、吡咯并[3，2-b]吡啶基、噻唑并[3，2-a]吡啶基、吡啶并[1，2-a]嘧啶基、四氢咪唑并[1，2-a]嘧啶基和二氢咪唑并[1，2-a]嘧啶基。
可能存在于由基团Cy1代表的芳族或杂芳族基团上的可选取代基包括一个、两个、三个或更多取代基，其各自选自原子或基团R10，其中R10是R10a或-L6Alk5(R10a)r，其中R10a是卤原子或者氨基(-NH2)、取代的氨基、硝基、氰基、羟基(-OH)、取代的羟基、甲酰基、羧基(-CO2H)、酯化的羧基、巯基(-SH)、取代的巯基、-COR11(其中R11是-L6Alk3(R10a)r、芳基或杂芳基)、-CSR11、-SO3H、-SOR11、-SO2R11、-SO3R11、-SO2NH2、-SO2NHR11、-SO2N(R11)2、-CONH2、-CSNH2、-CONHR11、-CSNHR11、-CON(R11)2、-CSN(R11)2、-N(R12)SO2R11(其中R12是氢原子或者直链或支链烷基)、-N(SO2R11)2、-N(R12)SO2NH2、-N(R12)SO2NHR11、-N(R12)SO2N(R11)2、-N(R12)COR11、-N(R12)CONH2、-N(R12)CONHR11、-N(R12)CON(R11)2、-N(R12)CSNH2、-N(R12)CSNHR11、-N(R12)CSN(R11)2、-N(R12)CSR11、-N(R12)C(O)OR11、-C＝NR12(NR12)、-SO2NHet1(其中-NHet1是可选被取代的C3-7环氨基，其可选地含有一个或多个其他-O-或-S-原子或者-N(R12)-、-C(O)-或-C(S)-基团)、-CONHet1、-CSNHet1、-N(R12)SO2NHet1、-N(R12)CONHet1、-N(R12)CSNHet1、-SO2N(R12)Het(其中-Het是可选被取代的单环C3-7碳环基团，其可选地含有一个或多个其他-O-或-S-原子或者-N(R12)-、-C(O)-、-S(O)-或-S(O)2-基团)、-Het、-CON(R12)Het、-CSN(R12)Het、-N(R12)CON(R12)Het、-N(R12)CSN(R12)Het、-N(R12)SO2N(R12)Het、芳基或杂芳基；L6是共价键或者连接原子或基团；Alk5是可选被取代的直链或支链C1-6亚烷基、C2-6亚烯基或C2-6亚炔基链，其可选地被一个、两个或三个-O-或-S-原子或者-S(O)k-(其中k是整数1或2)或-N(R12)-(例如-N(CH3)-)基团所中断；r是零或整数1、2或3。将被领会到的是，当两个R11或R12基团存在于一个上述取代基中时，R11和R12基团可以相同或不同。
当基团-L6Alk5(R10a)r中的L6是连接原子或基团时，它例如可以是任意二价连接原子或基团。具体实例包括-O-或-S-原子或者-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(S)-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R3)-(其中R3是氢原子或者直链或支链烷基)、-N(R3)O-、-N(R3)N-、-CON(R3)-、-OC(O)N(R3)-、-CSN(R3)-、-N(R3)CO-、-N(R3)C(O)O-、-N(R3)CS-、-S(O)2N(R3)-、-N(R3)S(O)2-、-N(R3)CON(R3)-、-N(R3)CSN(R3)-或-N(R3)SO2N(R3)-基团。若L6含有两个R3基团，则它们可以相同或不同。
当基团-L6Alk5(R10a)r中的r是整数1、2或3时，所要理解的是取代基R10a可能存在于-Alk5中任意适合的碳原子上。当存在一个以上R10a取代基时，它们可以相同或不同，并可能存在于-Alk5中相同或不同的原子上。显然，当r是零且没有取代基R10a存在时，由Alk5代表的亚烷基、亚烯基或亚炔基链变为烷基、烯基或炔基。
当R10a是取代的氨基时，它例如可以是基团-NHR11(其中R11是如上所定义的)或基团-N(R11)2，其中每一R11基团是相同或不同的。
当R10a是卤原子时，它例如可以是氟、氯、溴或碘原子。
当R10a是取代的羟基或取代的巯基时，它例如可以分别是基团-OR11或-SR12。
由基团R10a代表的酯化的羧基包括式-CO2Alk6基团，其中Alk6是可选被取代的直链或支链C1-8烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；C6-12芳基C1-8烷基，例如可选被取代的苄基、苯乙基、苯丙基、1-萘甲基或2-萘甲基；C6-12芳基，例如可选被取代的苯基、1-萘基或2-萘基；C6-12芳氧基C1-8烷基，例如可选被取代的苯氧基甲基、苯氧基乙基、1-萘氧基甲基或2-萘氧基甲基；可选被取代的C1-8烷酰氧基C1-8烷基，例如新戊酰氧基甲基、丙酰氧基乙基或丙酰氧基丙基；或者C6-12芳酰氧基C1-8烷基，例如可选被取代的苯甲酰氧基乙基或苯甲酰氧基丙基。存在于Alk6基团上的可选取代基包括如上所述的R10a原子和基团。
当Alk5存在于取代基中或者作为取代基时，它例如可以是-CH2-、-CH(CH3)-、-C(CH3)2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH(CH3)CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH(CH3)CH2-、-CH(CH3)CH2CH2-、-C(CH3)2CH2-、-CH＝CH-、-CH＝CHCH2-、-CH2CH＝CH-、-CH＝CHCH2CH2-、-CH2CH＝CHCH2-、-CH2CH2CH＝CH2-、-C≡C-、-C≡CCH2-、-CH2C≡C-、-C≡CCH2CH2-、-CH2C≡CCH2-或-CH2CH2C≡C-链，其可选地被一个、两个或三个-O-或-S-原子或者-S(O)-、-S(O)2-或-N(R12)-(例如-N(CH3)-)基团所中断。除了任意可能存在的R10a基团以外，由Alk5代表的脂族链还可以可选地被一个、两个或三个卤原子取代。
由基团R10a或R11代表的芳基或杂芳基包括可选被取代的单-或二-环C6-12芳族或C1-9杂芳族基团，如上关于基团Cy1所述。芳族和杂芳族基团可以酌情通过任意碳原子或杂原子(例如氮原子)附着于式(1)化合物中的基团Cy1上。
将被领会到的是，当-NHet1或-Het构成取代基R10的一部分时，可能存在于环-NHet1或-Het内的杂原子或含杂原子基团代替了母体碳环内的碳原子。
因而，当-NHet1或-Het构成取代基R10的一部分时，它们各自例如可以是可选被取代的吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、哌啶基或噻唑烷基。另外，Het例如可以代表可选被取代的环戊基或环己基。可能存在于-NHet1上的可选取代基包括上文针对Cy1是杂环脂族基团时所述的那些取代基。
特别有用的由R10代表的原子或基团包括氟、氯、溴或碘原子；或者C1-6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或叔丁基；可选被取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、呋喃基、噻唑基或噻吩基；羟基C1-6烷基，例如羟甲基或羟乙基；羧基C1-6烷基，例如羧乙基；C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基；羧基C1-6烷硫基，例如羧甲硫基、2-羧基乙硫基或3-羧基丙硫基；C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；羟基C1-6烷氧基，例如2-羟基乙氧基；可选被取代的苯氧基、吡啶氧基、噻唑氧基、苯硫基或吡啶硫基；C3-7环烷基，例如环丁基、环戊基；C3-7环烷氧基，例如环戊氧基；卤代C1-6烷基，例如三氟甲基；卤代C1-6烷氧基，例如三氟甲氧基；C1-6烷基氨基，例如甲氨基、乙氨基、-CH(CH3)NH2或-C(CH3)2NH2；卤代C1-6烷基氨基，例如氟代C1-6烷基氨基，例如-CH(CF3)NH2或-C(CF3)2NH2；氨基(-NH2)；氨基C1-6烷基，例如氨甲基或氨乙基；C1-6二烷基氨基，例如二甲氨基或二乙氨基；C1-6烷基氨基C1-6烷基，例如乙氨基乙基；C1-6二烷基氨基C1-6烷基，例如二乙氨基乙基；氨基C1-6烷氧基，例如氨基乙氧基；C1-6烷基氨基C1-6烷氧基，例如甲氨基乙氧基；C1-6二烷基氨基C1-6烷氧基，例如二甲氨基乙氧基、二乙氨基乙氧基、二异丙氨基乙氧基或二甲氨基丙氧基；酰亚氨基，例如苯二酰亚氨基或萘二酰亚氨基，例如1，8-萘二酰亚氨基；硝基；氰基；羟基(-OH)；甲酰基(HC(O)-)；羧基(-CO2H)；-CO2Alk6(其中Alk6是如上所定义的)；C1-6烷酰基，例如乙酰基；可选被取代的苯甲酰基；巯基(-SH)；硫代C1-6烷基，例如硫甲基或硫乙基；磺酰基(-SO3H)；C1-6烷基磺酰基，例如甲磺酰基；氨基磺酰基(-SO2NH2)；C1-6烷基氨基磺酰基，例如甲氨基磺酰基或乙氨基磺酰基；C1-6二烷基氨基磺酰基，例如二甲氨基磺酰基或二乙氨基磺酰基；苯氨基磺酰基；酰氨基(-CONH2)；C1-6烷基氨基羰基，例如甲氨基羰基或乙氨基羰基；C1-6二烷基氨基羰基，例如二甲氨基羰基或二乙氨基羰基；氨基C1-6烷基氨基羰基，例如氨基乙氨基羰基；C1-6二烷基氨基C1-6烷基氨基羰基，例如二乙氨基乙氨基羰基；氨基碳酰氨基；C1-6烷基氨基碳酰氨基，例如甲氨基碳酰氨基或乙氨基碳酰氨基；C1-6二烷基氨基碳酰氨基，例如二甲氨基碳酰氨基或二乙氨基碳酰氨基；C1-6烷基氨基羰基C1-6烷基氨基，例如甲氨基羰基甲氨基；氨基硫代碳酰氨基；C1-6烷基氨基硫代碳酰氨基，例如甲氨基硫代碳酰氨基或乙氨基硫代碳酰氨基；C1-6二烷基氨基硫代碳酰氨基，例如二甲氨基硫代碳酰氨基或二乙氨基硫代碳酰氨基；C1-6烷基氨基硫代羰基C1-6烷基氨基，例如乙氨基硫代羰基甲氨基；-CONHC(＝NH)NH2；C1-6烷基磺酰氨基，例如甲磺酰氨基或乙磺酰氨基；C1-6二烷基磺酰氨基，例如二甲磺酰氨基或二乙磺酰氨基；可选被取代的苯磺酰氨基；氨基磺酰氨基(-NHSO2NH2)；C1-6烷基氨基磺酰氨基，例如甲氨基磺酰氨基或乙氨基磺酰氨基；C1-6二烷基氨基磺酰氨基，例如二甲氨基磺酰氨基或二乙氨基磺酰氨基；可选被取代的吗啉磺酰氨基或吗啉磺酰基C1-6烷基氨基；可选被取代的苯氨基磺酰氨基；C1-6烷酰氨基，例如乙酰氨基；氨基C1-6烷酰氨基，例如氨基乙酰氨基；C1-6二烷基氨基C1-6烷酰氨基，例如二甲氨基乙酰氨基；C1-6烷酰氨基C1-6烷基，例如乙酰氨甲基；C1-6烷酰氨基C1-6烷基氨基，例如乙酰氨基乙氨基；C1-6烷氧基碳酰氨基，例如甲氧基碳酰氨基、乙氧基碳酰氨基或叔丁氧基羰基氨基；或者可选被取代的苄氧基、吡啶基甲氧基、噻唑基甲氧基、苄氧基羰基氨基、苄氧基羰基氨基C1-6烷基(例如苄氧基羰基氨基乙基)、苄硫基、吡啶基甲硫基或噻唑基甲硫基。
当存在于芳族或杂芳族基团上时，进一步特别有用的由R10代表的取代基包括式-L6Alk5R10a取代基，其中L6优选地是共价键或者-O-或-S-原子或者-N(R3)-、-C(O)-、-C(O)O-、-O-C(O)-、-N(R3)CO-、-CON(R3)-或-N(R3)S(O)2-基团，Alk5是可选被取代的C1-6烷基，其可选地被一个或两个-O-或-S-原子或者-N(R12)-、-C(O)-、-C(S)-、-CON(R12)-或-N(R12)CO-基团所中断，R10a是如本文所定义的可选被取代的Het基团或者如上关于Cy1所述的可选被取代的杂芳族基团。
若需要的话，两个R10取代基可以一起连接构成环状基团，例如环状醚，例如C1-6亚烷二氧基，例如亚甲二氧基或亚乙二氧基。
将被领会到的是，若存在两个或更多R10取代基，则它们不必是相同的原子和/或基团。一般而言，取代基可能存在于由Cy1代表的芳族或杂芳族基团上任意可供利用的环位置处。
本发明化合物中由Ar代表的取代的芳族或杂芳族基团可以是上文关于Cy1所述的任意芳族或杂芳族基团。可能存在的可选取代基包括关于Cy1芳族与杂芳族基团所一般或确切描述的那些R10原子和基团。
式(1)化合物中某些取代基的存在可以使化合物能够生成盐。适合的盐包括药学上可接受的盐，例如从无机或有机酸衍生的酸加成盐和从无机与有机碱衍生的盐。
酸加成盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、烷基磺酸盐(例如甲磺酸盐、乙磺酸盐或异硫羰酸盐(isothionates))、芳基磺酸盐(例如对-甲苯磺酸盐、苯磺酸盐或萘磺酸盐)、磷酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、草酸盐、酒石酸盐和苯甲酸盐。
从无机或有机碱衍生的盐包括碱金属盐，例如钠或钾盐；碱土金属盐，例如镁或钙盐；和有机胺盐，例如吗啉、哌啶、二甲胺或二乙胺的盐。
特别有用的根据本发明的化合物的盐包括药学上可接受的盐，尤其是药学上可接受的酸加成盐。
在一种实施方式中，Y是-C(O)-。在另一种实施方式中，Y是-S(O)2-。
在一类式(1)化合物中，n是整数1。当式(1)化合物中的n是整数1时，Alk1优选地是-CH2CH2-链，或者尤其是-CH2-。
在一类式(1)化合物中，n是零。
特别优选的Cy1可选被取代的环脂族基团包括可选被取代的C3-7环烷基，尤其是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。Cy1特别地是环丙基。
每一这些优选的Cy1环烷基都可以是未取代的。当存在取代基时，它们可以确切地包括卤原子(尤其是氟、氯或溴原子)或者C1-6烷基(尤其是C1-3烷基，特别是甲基)或卤代C1-6烷基(尤其是氟代C1-6烷基，更特别地是-CF3基团)或C1-6烷氧基(尤其是甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基)或卤代C1-6烷氧基(尤其是氟代C1-6烷氧基，更特别地是-OCF3基团)或者氰基(-CN)、酯化的羧基(尤其是-CO2CH3或-CO2C(CH3)3)、硝基(-NO2)、氨基(-NH2)、取代的氨基(尤其是-NHCH3或-N(CH3)2)、-COR6(尤其是-C(O)CH3)或-N(R6)C(O)R7(尤其是-NHCOCH3)基团。
特别优选的Cy1芳族基团包括可选被取代的苯基。特别优选的杂芳族基团包括可选被取代的单环杂芳族基团，尤其是可选被取代的五-或六-元杂芳族基团，其中含有一个、两个、三个或四个选自氧、硫或氮原子的杂原子。特别优选的可选被取代的单环杂芳族基团包括可选被取代的呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基和三嗪基。在进一步的优选方案中，杂芳族基团可以是八至十三元二环稠合的环，其中含有一个或两个氧、硫或氮原子。特别有用的这种类型基团包括可选被取代的吲哚基。
特别优选的可能存在于Cy1芳族或杂芳族基团上的可选取代基包括一个、两个或三个如上所定义的原子或基团-R10a或-L6Alk5(R10a)r。特别有用的可选取代基包括卤原子(尤其是氟、氯或溴原子)或者C1-6烷基(尤其是C1-3烷基，更特别地是甲基)或卤代C1-6烷基(尤其是氟代C1-6烷基，更特别地是-CF3基团)或C1-6烷氧基(尤其是甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基)或卤代C1-6烷氧基(尤其是氟代C1-6烷氧基，更特别地是-OCF3基团)或者氰基(-CN)、羧基(-CO2H)、酯化的羧基(-CO2Alk6)(尤其是-CO2CH3、-CO2CH2CH3或-CO2C(CH3)3)、硝基(-NO2)、氨基(-NH2)、取代的氨基(尤其是-NHCH3或-N(CH3)2)、-COR11(尤其是-COCH3)或-N(R12)COR11(尤其是-NHCOCH3)基团。
进一步优选的可能存在于Cy1芳族或杂芳族基团上的可选取代基包括式-L6Alk5(R10a)r基团，其中r是整数1或2，L6是共价键或者-O-或-S-原子或者-N(R3)-(尤其是-NH-或-N(CH3)-)、-C(O)-、-C(S)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-N(R3)CO-(尤其是-NHCO-)或-CON(R3)-(尤其是-CHNH-)基团，Alk5是C1-6亚烷基链，尤其是-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-或-CH2CH2CH2CH2-链，R10a是羟基或取代的羟基(尤其是-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2)或者-NH2或取代的氨基(尤其是-N(CH3)2或-N(CH2CH3)2)或者-Het基团，尤其是如前文所述的可选被取代的单环C5-7碳环基团，其在环结构内含有一个、两个或三个-O-、-S-、-N(R12)-(尤其是-NH-或-N(CH3)-)或-C(O)-基团，更特别地是可选被取代的吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基(例如N-甲基哌啶基)、吗啉基、硫吗啉基或哌嗪基，或者R10a是可选被取代的杂芳族基团，尤其是五-或六-元单环杂芳族基团，其中含有一个、两个、三个或四个选自氧、硫或氮原子的杂原子，例如可选被取代的吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、哒嗪基或吡嗪基。特别优选的就在此前所述的-Het基团上的可选取代基包括羟基(-OH)和羧基(-CO2H)或者刚才关于基团Cy1所述的那些优选的可选取代基，尤其是当Cy1是环烷基时。
在一组特别优选的式(1)化合物中，Cy1是可选被取代的苯基，尤其是可选地被一个、两个或三个取代基取代的苯基，其中至少一个、优选两个取代基位于连接Cy1与式(1)化合物其余部分的键的邻位。特别优选的邻位取代基包括卤原子(尤其是氟或氯原子)或者C1-3烷基(尤其是甲基)、C1-3烷氧基(尤其是甲氧基)、卤代C1-3烷基(尤其是-CF3)、卤代C1-3烷氧基(尤其是-OCF3)或氰基(-CN)。在这类化合物中，第二或第三可选取代基当存在于除环Cy1邻位以外的其他位置时，可以优选地是原子或基团-R10a或-L6Alk5(R10a)r，正如本文所一般和确切描述的。在另一种优选方案中，Cy1苯基可以具有连接Cy1与式(1)化合物其余部分的键的对位取代基。具体的对位取代基包括刚才所述的那些特别优选的邻位取代基。若需要的话，对位取代基可以与刚才提到的其他邻位或间位取代基共存。
Cy1上具体取代基的实例包括卤素(尤其是氟或氯)和C1-4烷基(尤其是甲基)。
具体Cy1基团包括苯基、氟苯基、氯苯基、甲基苯基和环丙基。
式(1)化合物中特别优选的Ar芳族基团包括可选被取代的苯基。特别优选的杂芳族基团包括可选被取代的单环杂芳族基团，尤其是可选被取代的五-或六-元杂芳族基团，其中含有一个、两个、三个或四个选自氧、硫或氮原子的杂原子。特别优选的可选被取代的单环杂芳族基团包括可选被取代的呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基和三嗪基。
特别优选的可能存在于Ar芳族或杂芳族基团上的可选取代基包括如上所定义的原子或基团-R10a或-L6Alk5(R10a)r。特别有用的可选取代基包括卤原子(尤其是氟、氯或溴原子)或者C1-6烷基(尤其是C1-3烷基，更特别地是甲基)或卤代C1-6烷基(尤其是氟代C1-6烷基，更特别地是-CF3基团)或C1-6烷氧基(尤其是甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基)或卤代C1-6烷氧基(尤其是氟代C1-6烷氧基，更特别地是-OCF3基团)或者氰基(-CN)、酯化的羧基(尤其是-CO2CH3或-CO2C(CH3)3)、硝基(-NO2)、氨基(-NH2)、取代的氨基(尤其是-NHCH3或-N(CH3)2)、-COR11(尤其是-COCH3)或-N(R12)COR11(尤其是-NHCOCH3)基团。
式(1)化合物中特别有用的Ar基团包括苯基和单-或二-取代的苯基，其中每一取代基具体地是刚才所定义的-R10a或-L6Alk5(R10a)r原子或基团，尤其是卤原子或者C1-3烷基、C1-3烷氧基或-CN基团。
Ar上具体取代基的实例包括卤素(尤其是氟或氯)、氰基和C1-4烷基(尤其是甲基)。
具体Ar基团包括苯基、二氟苯基、(氯)(氟)苯基、(氟)(甲基)苯基、氯苯基、氰基苯基和甲基苯基。
当存在于本发明化合物中时，Alk2的具体实例包括-CH2-、-CH2CH2-、-C(CH3)2-和-CH(CH3)CH2-。在一种实施方式中，Alk2是-CH2-。在另一种实施方式中，Alk2是-C(CH3)2-。
适宜地，R1是甲基。
适宜地，R2是氢或甲基。适宜地，R3是氢或甲基。在一种实施方式中，R2和R3都是氢。在另一种实施方式中，R2和R3都是甲基。
本发明化合物中，可以选择m以改变环的大小，其中除了氮原子以外，环中还具有最少3个碳原子至多达6个碳原子。特别有利的环是其中m是整数1或2的那些。
在优选的实施方式中，m是整数2。在另一种实施方式中，m是整数1。在进一步的实施方式中，m是整数3。
在确切的实施方式中，p是整数1。在另一种实施方式中，p是整数2。
每一取代基Rd可以存在于任意环碳原子上。在一类确切的本发明化合物中，存在一个或两个Rd取代基。
适合的Rd值包括-OH、-(Alk2)OH、-(Alk2)OR1、-NR2R3和-(Alk2)NR2R3。
详细的Rd值包括-OH、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-CH2OCH3、-NH2、-N(CH3)2和-CH2NH2。
代表性Rd值包括-OH、-(Alk2)OH和-(Alk2)OR1。
说明性Rd值包括-OH、-CH2OH、-C(CH3)2OH和-CH2OCH3。
确切的Rd取代基包括-OH、-CH2OH、-CH(CH3)OH和-C(CH3)2OH基团。
特别有用的本发明化合物包括下文实施例所述每一化合物及其盐、溶剂化物、水合物和N-氧化物。
根据本发明的化合物是p38激酶、包括其所有同种型和剪接变体的有力的选择性抑制剂。更具体地，本发明化合物是p38α、p38β和p38β2的抑制剂。采用试验可以简单地测定化合物以这种方式发挥作用的能力，例如下文实施例所述那些试验。
式(1)化合物可用于调控p38激酶的活性，尤其是可用于预防和治疗人类或其他哺乳动物中p38激酶-介导的任意疾病或障碍。本发明延及这样一种用途和这些化合物用于制造治疗这类疾病或障碍的药物的用途。进一步地，本发明延及对人给予有效量的p38抑制剂，用于治疗任意这类疾病或障碍。
本发明还延及预防或治疗人类或其他哺乳动物中p38激酶在其中扮演角色的任意疾病或障碍，包括由过度或未受调控的促炎性细胞因子产生(例如包括过度或未受调控的TNF、IL-1、IL-6和IL-8产生)所导致的病症。本发明延及这样一种用途和这些化合物用于制造治疗这类细胞因子-介导的疾病或障碍的药物的用途。进而，本发明延及对人类给予有效量的p38抑制剂，用于治疗任意这类疾病或障碍。
p38激酶在其中直接或者经由促炎性细胞因子(包括细胞因子TNF、IL-1、IL-6和IL-8)扮演角色的疾病或障碍非限制性地包括自体免疫疾病、炎性疾病、破坏性骨障碍、增殖性障碍、神经变性障碍、病毒疾病、变态反应、感染性疾病、心脏病发作、血管生成障碍、中风中的再灌注/局部缺血、血管增生、器官缺氧、心肌肥大、凝血酶-诱导的血小板聚集和与前列腺素内过氧化物酶合成酶-2(COX-2)有关的病症。
可以预防或治疗的自体免疫疾病包括但不限于类风湿性关节炎、炎性肠疾病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、多发性硬化、糖尿病、肾小球性肾炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫氏病、溶血性贫血、自体免疫性胃炎、自体免疫性嗜中性粒细胞减少、血小板减少、慢性活动型肝炎、重症肌无力、特应性皮炎、移植物抗宿主疾病或者牛皮癣。
本发明进一步延及确切的自体免疫疾病类风湿性关节炎。
可以预防或治疗的炎性疾病包括但不限于哮喘、变态反应、呼吸窘迫综合征和急性或慢性胰腺炎、可以预防或治疗的破坏性骨障碍包括但不限于骨质疏松、骨关节炎和多发性骨髓瘤-相关性骨障碍。
可以预防或治疗的增殖性疾病包括但不限于急性或慢性粒细胞白血病、卡波西肉瘤、转移性黑素瘤和多发性骨髓瘤。
可以预防或治疗的神经变性疾病包括但不限于帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、脑缺血以及由创伤性损伤所导致的神经变性疾病。
可以预防或治疗的病毒疾病包括但不限于急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、HIV感染和CMV视网膜炎。
可以预防或治疗的感染性疾病包括但不限于脓毒性休克、脓毒病和志贺氏菌病。
另外，本所导致的病症发明p38抑制剂也表现对诱导性促炎性蛋白表达的抑制作用，例如前列腺素内过氧化物酶合成酶-2，也称为环加氧酶-2(COX-2)，因此可用在治疗中。从花生四烯酸衍生的环加氧酶途径的促炎性介质是由诱导性COX-2酶产生的。COX-2的调节将可调节这些促炎性介质，例如前列腺素，它们影响多种细胞，是多种疾病状态和病症的重要与关键的炎性介质。确切而言，这些炎性介质在疼痛或水肿中有牵连，例如疼痛受体的敏感化。因此，另外的可以预防或治疗的p38-介导病症包括水肿、痛觉缺失、发热和疼痛，例如神经肌肉疼痛、头痛、牙痛、关节炎疼痛和由癌症所导致的疼痛。
作为p38抑制活性的结果，本发明化合物可用于预防和治疗与细胞因子产生有关的疾病，包括但不限于与TNF、IL-1、IL-6和IL-8产生有关的那些疾病。
因而，TNF-介导的疾病或病症例如包括类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎与其他关节炎性病症、脓毒病、脓毒性休克综合征、成人呼吸窘迫综合征、脑型疟、慢性肺炎性疾病、矽肺、肺肉样瘤病、骨吸收疾病、再灌注损伤、移植物抗宿主反应、同种异体移植物排斥、由感染引起的发热与肌痛、继发于感染、AIDS、ARC或恶性肿瘤的恶病质、瘢痕瘤生成、瘢痕组织生成、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、pyresis、病毒感染(例如HIV、CMV、流感和疱疹)与兽病毒感染(例如慢病毒感染，包括但不限于马感染性贫血病毒、山羊关节炎病毒、绵羊脱髓鞘性病毒或呼吸困难病毒)或者逆病毒感染(包括猫免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒和犬免疫缺陷病毒)。
本发明化合物还可以用于治疗病毒感染，其中这类病毒引发体内TNF产生或者对TNF的增量调节作用是敏感的。这类病毒包括因感染的结果而产生TNF的那些和例如因减少复制的结果而对被本发明TNF抑制性化合物直接或间接抑制敏感的那些。这类病毒包括但不限于HIV-1、HIV-2与HIV-3、巨细胞病毒(CMV)、流感病毒、腺病毒和疱疹族病毒(例如带状疱疹和单纯性疱疹病毒)。
IL-1-介导的疾病或病症例如包括类风湿性关节炎、骨关节炎、牛皮癣性关节炎、创伤性关节炎、风疹性关节炎、炎性肠疾病、中风、内毒素血和/或中毒性休克综合征、由内毒素诱发的炎性反应、糖尿病、胰腺β-细胞疾病、阿尔茨海默氏病、结核、动脉粥样硬化、肌肉退化和恶病质。
IL-8-介导的疾病和病症例如包括以大量嗜中性粒细胞浸润为特征的那些，例如牛皮癣、炎性肠疾病、哮喘、心、脑与肾再灌注损伤、成人呼吸窘迫综合征、血栓形成和肾小球性肾炎。与这些疾病中每一种有关的IL-8产生增加负责嗜中性粒细胞向炎性部位的趋化性。这是由于IL-8促进嗜中性粒细胞趋化性和活化的独特性质(相对于TNF、IL-1和IL-6而言)。因此，抑制IL-8产生将引起嗜中性粒细胞浸润的直接减少。
已知IL-6和IL-8都是在鼻病毒(HRV)感染期间产生的，它们有助于与HRV感染有关的感冒发病和哮喘加重[Turner et al，Clin.Infec.Dis.，1997，26，840；Grunberg et al，Am.J.Crit.Care Med.1997，155，1362；Zhu et al，J.Clin.Invest.1996，97，421]。也已经体外证明，肺上皮细胞被HRV感染(代表被HRV感染的原始部位)导致IL-6和IL-8的产生[Sabauste et al，J.Clin.Invest.1995，96，549]。因此，本发明p38抑制剂可以用于治疗或预防由人鼻病毒感染(HRV)、其他肠病毒、冠状病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒或腺病毒感染所导致的感冒或呼吸病毒感染。
就预防或治疗p38-或促炎性细胞因子-介导的疾病而言，可以以药物组合物形式对人类或哺乳动物给予根据本发明的化合物，按照本发明的进一方面，我们提供药物组合物，它包含式(1)化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
根据本发明的药物组合物可以采取适合于口服、口腔、肠胃外、鼻用、局部、眼用或直肠给药的剂型，或者适合于通过吸入或吹入给药的剂型。
就口服给药而言，药物组合物例如可以采取片剂、锭剂或胶囊剂的剂型，它们可借助常规手段用药学上可接受的赋形剂制备，例如粘合剂(例如预胶凝化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)、填充剂(例如乳糖、微晶纤维素或磷酸氢钙)、润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石或二氧化硅)、崩解剂(例如马铃薯淀粉或羟乙酸钠)或湿润剂(例如月桂基硫酸钠)。可以按照本领域熟知的方法将片剂包衣。口服给药用液体制备物例如可以采取溶液、糖浆剂或悬液的剂型，或者它们可以呈现干燥产物的形式，在使用前用水或其他适合的载体再生。这类液体制备物可以借助常规手段用药学上可接受的添加剂制备，例如悬浮剂、乳化剂、非水性载体和防腐剂。制备物还可以酌情含有缓冲盐、矫味剂、着色剂和甜味剂。
可以适当地配制口服给药用制备物，以便控制性释放活性化合物。
就口腔给药而言，组合物可以采取片剂或锭剂的剂型，其按常规方式配制。
式(1)化合物可以被配制成肠胃外注射给药的剂型，例如大丸剂注射或输注。注射用制剂可以呈现单元剂型，例如在玻璃安瓿或多剂容器内，例如玻璃小瓶。注射用组合物可以采取在油性或水性载体中的悬液、溶液或乳液等剂型，并且可以含有配制试剂，例如悬浮剂、稳定剂、防腐剂和/或分散剂。作为替代选择，活性成分可以是粉末形式，在使用前用适合的载体再生，例如无菌无热原的水。
除了上述制剂以外，式(1)化合物还可以被配制成药库制备物。这类长效制剂可以通过植入或肌内注射给药。
就经鼻给药或者通过吸入给药而言，按照本发明使用的化合物可方便地以气雾剂喷雾呈递方式从加压包装或雾化器中递送，并使用适合的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟代甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适合的气体或者气体混合物。
如果需要的话，组合物可以在包装或分配装置中被呈递，其中可以含有一个或多个含有活性成分的单元剂型。包装或分配装置可以附有给药说明书。
就局部给药而言，按照本发明使用的化合物可以方便地被配制成适合的软膏剂，其中活性组分悬浮或溶解在一种或多种药学上可接受的载体中。确切的载体例如包括矿物油、液体石油、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、乳化蜡和水。作为替代选择，按照本发明使用的化合物可以被配制成适合的洗剂，其中活性组分悬浮或溶解在一种或多种药学上可接受的载体中。确切的载体例如包括矿物油、脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚山梨酸酯60、鲸蜡基酯蜡、鲸蜡基醇、苯甲醇、2-辛基十二烷醇和水。
就眼给药而言，按照本发明使用的化合物可以方便地被配制成在等渗的、经过pH调节的无菌盐水中的微粉化悬液，其中含有或者没有防腐剂，例如杀细菌剂或杀真菌剂，例如硝酸苯汞、苯扎氯铵或乙酸洗必泰。作为替代选择，就眼给药而言，化合物可以被配制成软膏剂，例如矿脂。
就直肠给药而言，按照本发明使用的化合物可以方便地被配制成栓剂。它们可以这样制备，将活性组分与适合的无刺激性赋形剂混合，所述赋形剂在室温下是固体，但是在直肠温度下是液体，因此将在直肠中融化，释放出活性组分。这类材料例如包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
预防或治疗确切病症所需的本发明化合物的量将因所选择的化合物和所治疗患者的病症而异。不过一般而言，每日剂量可以从约100ng/kg至100mg/kg，例如约0.01mg/kg至40mg/kg体重(就口服或口腔给药而言)；从约10ng/kg至50mg/kg体重(就肠胃外给药而言)；和从约0.05mg至约1000mg，例如约0.5mg至约1000mg(就经鼻给药或者通过吸入或吹入给药而言)。
本发明化合物可以借助大量方法制备，正如下列一般性描述和下文实施例的具体描述。在下列方法说明中，符号Ar、Cy1、Alk1、n、Rd、p、m和Y当用在所描绘的结构式中时被理解为代表上面关于式(1a)所述那些基团，另有指定者除外。在下述反应中，若在最终产物中是所需要的，则可能有必要保护反应性官能团，例如羟基、氨基、巯基或羧基，以避免它们参与反应。可以按照标准的实践使用常规的保护基团(例如参见Green，T.W.in″Protective Groups in OrganicSynthesis″，John Wiley and Sons，1999)。在有些情形中，去保护可能是式(1)化合物合成中的最终步骤，下文所述根据本发明的方法被理解为延及这类保护基团的除去。
因而，按照本发明的进一方面，其中Y是-C(O)-基团的式(1)化合物可以按照本领域技术人员熟知的酰胺键生成反应从式(2)羧酸或式(5)酯制备。这类反应列在参考文献中，例如March′s AdvancedOrganic Chemistry(John Wiley and Sons 1992)、Larock′sComprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc.，1992)和Comprehensive Organic Functional Group Transformations，ed.Katritzky et al.，volumes 1-8，1984与volumes 1-11，1994(Pergamon)。可以用于得到式(1a)化合物的这类方法的实例列在下列流程1和流程2中，但是不限于这些反应。
流程1
因而，式(1a)酰胺可以这样生成，即在偶联试剂(例如碳二亚胺，如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)或N，N’-二环己基碳二亚胺)的存在下，可选地在碱(例如胺，如三乙胺或N-甲基吗啉)的存在下，使式(2)羧酸盐(其中M+是金属抗衡离子，例如钠或锂离子，或者作为替代选择是铵或三烷基铵抗衡离子)与式(3)胺反应。这些反应可以在溶剂中进行，所述溶剂例如是酰胺溶剂，例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，或者醚，例如环状醚，如四氢呋喃或1，4-二噁烷，或者卤代溶剂，例如二氯甲烷，反应温度为约环境温度至60℃。在另一种工艺中，式(4)五氟苯基酯可以这样制备，即在偶联试剂(例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)的存在下，在溶剂(例如酰胺溶剂，例如DMF)中，在约环境温度下，使式(2)羧酸与五氟苯酚反应。式(1a)酰胺然后可以这样制备，即在有机溶剂(例如卤代烃，如二氯甲烷)中，在约环境温度下，可选地在叔胺碱(例如三乙胺或二异丙基乙胺)的存在下，使五氟苯基酯与式(3)胺反应。式(2)中间体酸可以这样制备，即在水和溶剂(例如四氢呋喃或醇，如乙醇)中，在约环境温度至回流下，将式(5)酯用碱(例如碱金属氢氧化物，如氢氧化钠或氢氧化锂)水解。
式(1a)酰胺也可以这样直接从式(5)酯制备，即可选地在溶剂(例如2-乙氧基乙醇)的存在下，在大气压下或者在密封试管中在压力下，与式(3)胺加热直至胺的回流温度(流程2)。
流程2 式(5)中间体酯可以借助下列流程3所列方法制备。该流程中，具体显示了乙酯的制备，但是将被领会到的是，通过简单地改变酯原料以及酌情地改变任意反应条件，可以得到其他酯。
流程3 因而在流程3中，式(5a)或(5b)化合物可以这样制备，即在钯催化剂的存在下，使式(6)或(7)化合物与胺ArNH2反应。反应可以简便地在溶剂(例如甲苯)中进行，温度为高温，例如回流温度，并使用催化剂(例如三(二亚苄基丙酮)二钯(0))，膦配体(例如2，2’-双(二苯膦基)-1，1’-联萘)和碱(例如碳酸铯)。若需要的话，可以采用可供替代的反应条件，例如文献所述[Luker et al.Tet.Lett.(2001)41，7731；Buchwald S.L.J.Org.Chem.(2000)65 1144；Hartwig J.F.Angew.Chem.In.Ed.Engl.(1998)37，2046]。
式(7)中间体可以这样制备，即使式(8)化合物与式Cy1(Alk1)nZ烷基化剂反应，其中Z是离去基团，例如卤原子，例如氯、溴或碘原子，或者磺酰氧基，例如烷基磺酰氧基，例如三氟甲磺酰氧基，或芳基磺酰氧基，例如苯磺酰氧基。
反应可以这样进行，即在溶剂(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)的存在下，可选地在碱(例如无机碱，例如氢化钠，或者有机碱，例如有机胺，例如环状胺，例如1，5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯，或者与树脂键合的有机胺，例如与树脂键合的2-叔丁基亚氨基-2-二乙氨基-1，3-二甲基-全氢-1，3，2-二氮杂磷杂环己三烯(phosphorine)(PS-BEMP))的存在下，在高温下，例如80至100℃。
式(6)中间体可以这样制备，即使式(8)化合物与式Cy1B(OH)2代硼酸反应，其中Cy1是芳基或杂芳基。反应可以这样进行，即在有机溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷或二氯乙烷)中，在铜试剂(例如铜(I)盐，例如CuI，或者例如铜(II)试剂，例如乙酸铜(II))的存在下，可选地在氧化剂(例如2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧化物或吡啶-N-氧化物)的存在下，可选地在碱(例如有机胺，例如烷基胺，例如三乙胺，或芳族胺，例如吡啶)的存在下，在约环境温度至回流温度的温度下进行(例如参见Chan，D.T.et al Tetrahedron Letters，1998，2933；Lam，P.Y.S.et al，Tetrahedron Letters，2001，3415)。
其中Cy1是芳基或杂芳基的式(6)中间体还可以这样制备，即适当被活化的芳基或杂芳基卤化物与式(8)化合物进行亲核芳族取代。反应可以这样进行，即在二烷基酰胺溶剂(例如二甲基甲酰胺)中，在碱(例如金属氢化物，例如氢化钠)的存在下，在约环境温度至100℃的温度下。适当被活化的芳基或杂芳基卤化物是具有吸电子取代基的那些，所述取代基例如硝基、氰基或酯基，例如氯-或氟-硝基苯或2-氯-5-硝基吡啶。作为替代选择，含氮杂芳基卤化物可以被N-氧化作用活化以进行亲核取代，例如2-氯吡啶N-氧化物。
将被领会到的是，如果需要的话，刚才所述反应可以按相反顺序进行，从而首先用ArNH2与式(8)中间体进行胺化，继之以烷基化/芳基化，得到式(5)化合物。可能有必要在这些反应过程期间保护式(8)化合物的氮官能团。这类保护可以借助O-烷基化作用实现，其中使用烷基卤化物，例如环丙基甲基溴，或芳基烷基溴化物，例如苄基溴，如流程4所示。
流程4 O-烷基化反应可以这样进行，即在有机溶剂、例如二甲基甲酰胺中，在碱(例如无机碱，例如Cs2CO3，或者有机碱，例如胺，例如环状胺，例如1，5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯)的存在下，在高温下，例如80℃至100℃进行，得到式(13)化合物。然后可以如前文所述在钯催化下进行被保护的化合物(13)与ArNH2的反应，得到式(14)化合物。然后可以这样实现去保护，即在高温、例如回流温度下，将这种化合物在醇、例如甲醇中的溶液用无机酸(例如浓HCl)处理，得到式(15)化合物。
作为替代选择，若采用苄基保护，则该基团可以这样被还原性除去，即在高压氢下，在约环境温度至60℃的温度下，将化合物(14)在有机溶剂、例如EtOH中的溶液用钯或铂催化剂(例如披钯碳或PtO2)处理。式(15)化合物然后可以如前文所述经历烷基化/芳基化反应，得到式(5)化合物。
式(8)吡啶酮中间体可以这样从式(9)吡啶N-氧化物制备，即先后在高温、例如回流温度下，与酸酐(例如乙酸酐)反应，继之以在溶剂(例如醚，例如环状醚，例如四氢呋喃)中，在约环境温度下，与无机碱(例如碳酸盐，例如含水碳酸钾)反应。作为替代选择，反应可以这样进行，即在0℃至环境温度条件下，使用含三氟乙酸酐的二甲基甲酰胺(例如参见Konno et al.，Heterocycles(1986)24，2169)。
式(9)吡啶N-氧化物可以这样生成，即在酸、例如乙酸的存在下，在高温、例如约70℃至80℃下，使用氧化剂、例如过氧化氢氧化式(10)吡啶，或者作为替代选择，可以在溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷，或者醇，例如叔丁醇)中，在环境温度至回流温度的温度下，与过酸(例如过乙酸或间-氯过苯甲酸)反应。
流程3中的式(10)中间体吡啶可以借助标准方法得到，例如通过Sandmeyer反应。因此，例如，式(10)溴化物可以这样制备，即在溶剂(例如腈，例如乙腈)的存在下，在约0至约65℃的温度下，将式(11)芳基胺用一种亚硝酸烷基酯和铜盐处理，前者例如亚硝酸叔丁酯，后者例如溴化铜(II)。
式(11)胺可以这样生成，从式(12)2-卤代吡啶-3-甲腈开始，与试剂、例如2-巯基乙酸乙酯反应。反应可以这样进行，即在溶剂(例如取代的酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺，或者醚，例如环状醚，例如四氢呋喃，或者醇，例如乙醇)的存在下，在碱(例如无机碱，例如碳酸钠或氢化物，例如氢化钠，或者有机碱，例如1，5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯或三烷基胺，例如三乙胺)的存在下，在约0℃与100℃之间的温度下进行。甲腈原料是容易获得的，或者可以利用标准工艺从已知化合物得到。
在另一种方法中，式(5a)中间体酯可以借助流程5所列反应制备。在下列流程中，R20代表酯或腈，LG代表离去基团，例如卤原子，例如氯或溴，或者磺酰氧基，例如烷基磺酰氧基，例如三氟甲磺酰氧基，或芳基磺酰氧基，例如对-甲苯磺酰氧基。
流程5 因而在反应流程的步骤(A)中，可以使式(17)或(18)化合物与式(19)硫代酰胺反应，其中Rx是可选被取代的烷基，例如甲基，W是氢原子、金属离子或胺盐。反应可以在碱的存在下进行。适当的碱可以包括但不限于锂碱，例如正丁基或叔丁基锂或者二异丙氨基锂(LDA)；硅氮烷，例如六甲基二硅氮烷基锂(LiHMDS)或六甲基二硅氮烷基钠(NaHMDS)；碳酸盐，例如碳酸钾；醇化物，例如乙醇钠、甲醇钠或叔丁醇钾；氢氧化物，例如NaOH；氢化物，例如氢化钠；有机胺，例如三乙胺或二异丙基乙胺；或者环状胺，例如N-甲基吗啉或吡啶。反应可以在有机溶剂(例如酰胺，例如取代的酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺；醚，例如环状醚，例如四氢呋喃或1，4-二噁烷；醇，例如甲醇、乙醇或丙醇；或者乙腈)中进行，温度为从环境温度至回流温度。在该方法的一个确切方面，反应是这样实现的，即使用醇化物碱，尤其是乙醇钠或甲醇钠，在醇溶剂、尤其是乙醇中，在回流温度下进行。
式(17)中间体若不是商业上可获得的，则可以利用标准方法制备(例如参见Mir Hedayatullah，J.Heterocyclic Chem.，18，339(1981))。类似地，式(18)中间体若不是商业上可获得的，也可以利用标准方法制备。例如，它们可以这样就地制备，即使乙酸酯、例如乙酸乙酯与碱、例如甲醇钠反应，继之以加入甲酸酯，例如甲酸甲酯。
按照相似的方式，式(19)中间体如果不是商业上可获得的，那么可以利用本领域技术人员已知的方法制备(例如参见Adhikari et al，Aust.J.Chem.，52，63-67，(1999))。例如，可以在碱、例如NaHMDS的存在下，在适合的溶剂、例如四氢呋喃中，可选地在低温下，例如约-78℃，使式Cy1NCS异硫氰酸酯与乙腈反应。根据基团Cy1的属性，式(19)中间体可以是就地制备的，例如利用本文所述方法，随后加入式(17)或(18)化合物。
在这种方法的过程期间，可能生成式(20)中间体。如果需要的话，可以在步骤(A)结束时分离该中间体，随后与中间体(21)反应，生成所需的胺(22)。不过在有些情形中，不分离式(20)中间体可能是有利的，利用步骤(A)的反应混合物可以直接进行反应(B)。
如果在该方法第二阶段期间使用不同的溶剂，那么可能有必要在进行第二阶段之前在真空中蒸发来自该方法第一阶段的溶剂。一旦蒸发，则来自步骤(A)的粗固体可以直接用于下一阶段，或者可以纯化，例如结晶，得到分离的中间体，例如式(20)化合物。
在该方法的步骤(B)期间，可以向反应混合物或者来自步骤(A)的粗固体或纯化产物在适合溶剂中的溶液加入式(21)中间体。适合的溶剂包括但不限于酰胺，例如取代的酰胺，例如二甲基甲酰胺；醇，例如乙醇、甲醇或异丙醇；醚，例如环状醚，例如四氢呋喃或1，4-二噁烷；或者乙腈。反应可以在环境温度至回流温度的温度下进行。
在步骤(B)的过程期间，可以观察到式(24)中间体 或者甚至分离出来，这取决于基团R20的属性。式(24)中间体可以利用上述方法转化为式(22)化合物。在这种情形中，可能有必要加入碱，目的是使反应进行完全。适当的碱包括碳酸盐，例如碳酸铯或碳酸钾；醇化物，例如叔丁醇钾；氢化物，例如氢化钠；或者有机胺，例如三乙胺或二异丙基乙胺；或者环状胺，例如N-甲基吗啉或吡啶。
式(22)胺可以借助标准方法转化为式(23)溴化物，例如通过Sandmeyer反应，如前文关于式(11)化合物所述。然后可以借助已经描述过的钯催化胺化反应从这些溴化物制备式(5a)化合物。
将被领会到的是，式(21)中间体若不是商业上可获得的，则可以利用本领域技术人员已知的标准方法加以制备。例如，利用技术人员已知的条件可以将醇基团转化为离去基团，例如卤原子或磺酰氧基。例如，可以在卤代烃、例如二氯甲烷中，使醇与亚硫酰氯反应，得到对应的氯化物。还可以在反应中使用碱，例如三乙胺。
只要R20是-CN，可以从流程5所描绘的反应流程制备的式(23a)腈是可用于合成式(25a)中间体羧酸的中间体。该反应可以这样进行，即在醇溶剂、例如甲醇或乙醇中，在回流下，将腈(23a)用碱(例如碱金属氢氧化物，例如2M氢氧化钠水溶液)进行水解。
将被领会到的是，诸如(17)、(18)、(19)或(21)等中间体如果不是商业上可获得的，那么也可以借助本领域技术人员已知的方法、按照例如下述参考文献所述工艺加以制备Rodd′s Chemistry of CarbonCompounds，Volumes 1-15 and Supplementals(Elsevier SciencePublishers，1989)，Fieser and Fieser′s Reagents for OrganicSynthesis，Volumes 1-19(John Wiley and Sons，1999)，Comprehensive Heterocyclic Chemistry，Ed.Katritzky et al，Volumes 1-8，1984 and Volumes 1-11，1994(Pergamon)，Comprehensive Organic Functional Group Transformations，Ed.Katritzky et al，Volumes 1-7，1995 Pergamon)，ComprehensiveOrganic Synthesis，Ed.Trost and Flemming，Volumes 1-9，(Pergamon，1991)，Encyclopedia of Reagents for OrganicSynthesis Ed.Paquette，Volumes 1-8(John Wiley and Sons，1995)，Larock′s Comprehensive Organic Transformations(VCH PublishersInc.，1989)和March′s Advanced Organic Chemistry(John Wiley andSons，1992)。
在另一种方法中，式(1a)酰胺可以借助下列流程6所述反应制备。
流程6 因而，式(25)或(25a)酸可以这样转化为式(27)酰胺，即按照与前面关于化合物(2)向式(1a)酰胺转化所述相同的方式，在偶联试剂的存在下，与式(3)胺反应。作为替代选择，该羧酸可以这样转化为式(26)酰氯，即可选地在催化量DMF的存在下，在溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷，或者醚，例如环状醚，例如四氢呋喃)中，在约环境温度下，与氯化剂、例如草酰氯反应；或者通常在溶剂中，例如甲苯，在回流温度下，与氯化剂反应，例如亚硫酰氯。所得酰氯然后可以与式(3)胺在溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷)中，在胺碱、例如三乙胺的存在下，在约环境温度下反应，得到式(27)酰胺。然后可以利用前面流程1所述钯催化的芳基化工艺，从式(27)酰胺制备式(1a)酰胺。
在上述反应过程期间，可能有利或必要的是保护可能存在的Rd取代基。可以按照标准的实践使用常规的保护基团(例如参见Green，T.W.in″Protective Groups in Organic Synthesis″，John Wiley and Sons，1999)。在有些情形中，去保护可能是式(1a)化合物合成中的最终步骤，下文所述根据本发明的方法被理解为延及这类保护基团的除去。
按照本发明的进一方面，其中Y是-S(O)2-基团的式(1)化合物可以借助流程7所列途径制备。
流程7 因而，式(29)化合物可以这样得到，即在溶剂(例如醚，例如环状醚，例如四氢呋喃)中，在约0℃的温度下，使式(28)化合物与金属氨基化物碱、例如双(三甲代甲硅烷基)氨基钠反应，然后加入二碳酸二叔丁酯在溶剂、例如四氢呋喃中的溶液，在环境温度下搅拌。然后可以借助下列反应顺序制备式(1)化合物。在溶剂(例如醚，例如环状醚，例如四氢呋喃)中，在约-78℃的温度下，将式(29)化合物用碱(例如烷基锂，例如正丁基锂)处理。向反应混合物通入二氧化硫气体，然后使反应物升温至室温。在真空中除去溶剂，将粗产物溶于溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷)中，在约环境温度下将混合物用氯化试剂、例如N-氯琥珀酰亚胺处理。然后可以向反应混合物加入式(3)胺，生成式(30)化合物，其中R＝叔丁氧羰基。式(1)磺酰胺然后可以这样制备，即在溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷)中，将式(30)化合物用酸(例如无机酸，例如HCl，或者有机酸，例如三氟乙酸)处理。式(28)中间体可以这样得到，即在溶剂(例如醚，例如环状醚，例如四氢呋喃或1，4-二噁烷)中，在50℃直至回流温度的温度下，用酸(如无机酸，例如HCl)对式(2)化合物进行脱羧基作用。
若在上述通用方法中，本发明化合物合成所需的式Cy1(Alk1)nZ烷基化剂、式HSCH2CO2Et试剂和任意其他中间体不是商业上可获得的或文献上已知的，则它们可以容易地借助一种或多种采用取代、氧化、还原或裂解反应的标准合成方法从更简单的已知化合物得到。确切的取代方法包括常规的烷基化、芳基化、杂芳基化、酰化、硫代酰化、卤化、磺酰化、硝化、甲酰化和偶联工艺。将被领会到的是，这些方法也可以用于得到或者修饰其他中间体，尤其是式(1)化合物，其中在这些化合物中存在适当的官能团。下文实施例给出了这类方法的具体实例。
因此，例如，可选地在低温下，例如约-78℃，在溶剂、例如四氢呋喃中，化合物中的芳族卤素取代基可以用碱(例如锂碱，例如正丁基锂或叔丁基锂)进行卤素-金属置换作用，然后用亲电试剂猝灭，以引入所需的取代基。因而，例如，使用N，N-二甲基甲酰胺作为亲电试剂可以引入甲酰基，使用二甲基二硫化物作为亲电试剂可以引入硫甲基，使用醛作为亲电试剂可以引入醇基团，使用二氧化碳作为亲电试剂可以引入酸。将式ArMgHal格丽雅试剂用二氧化碳猝灭，也可以生成式ArCO2H芳族酸。
借助这种方法生成的式ArCO2H芳族酸和含有酸的化合物一般可以这样转化为活化衍生物，例如酰卤，即可选地在惰性溶剂，(例如芳族烃，例如甲苯，或氯代烃，例如二氯甲烷)中，在约0℃至回流温度的温度下，与卤化剂(例如亚硫酰卤，例如亚硫酰氯；三卤化磷，例如三氯化磷；五卤化磷，例如五氯化磷)反应，或者可以这样转化为式ArC(O)N(OMe)Me Weinreb酰胺，即先如刚才所述转化为酰卤，随后可选地在碱(例如有机胺，例如三乙胺)的存在下，在惰性溶剂(例如芳族烃，例如甲苯，或氯代烃，例如二氯甲烷)中，在约0℃至环境温度的温度下，与式HN(OMe)Me胺或其盐反应。
式(1)化合物及其中间体中的酯基、例如-CO2Alk6和-CO2R4可以借助酸-或碱-催化的水解作用转化为对应的酸(-CO2H)，这依赖于基团Alk6或R4的属性。酸-或碱-催化的水解作用例如可以这样实现，即在有机溶剂(例如二氯甲烷)中用有机或无机酸(例如三氟乙酸)处理，或者在溶剂(例如1，4-二噁烷)中用无机酸、例如盐酸处理，或者在含水醇(例如含水甲醇)中用碱金属氢氧化物、例如氢氧化锂处理。
在进一步的实例中，式(1)化合物及其中间体中的-OR6(其中R6代表烷基，例如甲基)可以这样裂解为对应的醇-OH，即在溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷)中，在低温、例如约-78℃下，与三溴化硼反应。
醇(-OH)基团也可以这样得到，即在溶剂、例如乙醇中，在甲酸铵、环己二烯或氢的存在下，在约环境温度至回流温度下，使用支持物(例如碳)上的金属催化剂(例如钯)氢化对应的-OCH2R31基团(其中R31是芳基)。在另一种实例中，-OH基团可以这样生成，即在溶剂、例如甲醇中，使用例如复合金属氢化物(例如氢化铝锂或硼氢化钠)还原对应的酯(例如-CO2Alk6)或醛(-CHO)。
在另一种实例中，化合物中的醇(-OH)基团可以这样转化为对应的-OR6基团，即在溶剂、例如四氢呋喃中，在膦(例如三苯膦)和活化剂(例如偶氮二羧酸二乙酯、二异丙酯或二甲酯)的存在下，与试剂R6OH偶联。
在另一种实例中，化合物中的氨基磺酰氨基(-NHSO2NH2)可以这样得到，即在有机碱、例如吡啶的存在下，在高温、例如回流温度下，使对应的胺(-NH2)与磺酰胺反应。
在另一种实例中，含有-NHCSR7或-CSNHR7基团的化合物可以这样制备，即在无水溶剂(例如环状醚，例如四氢呋喃)中，在高温、例如回流温度下，将对应的含有-NHCOR7或-CONHR7基团的化合物用硫杂化试剂、例如Lawesson试剂或P2S5处理。
在进一步的实例中，可以使用醛和还原剂，利用还原性烷基化方法将胺(-NH2)基团烷基化。适合的还原剂包括硼氢化物，例如三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠。还原作用可以这样进行，即在溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷；酮，例如丙酮；或者醇，例如乙醇)中，若必要的话则在酸、例如乙酸的存在下，在大约环境温度下进行。作为替代选择，可以首先在溶剂(例如芳族烃，例如甲苯)中使胺和醛反应，然后在支持物(例如碳)上的金属催化剂(例如钯)的存在下，在溶剂(例如醇，例如乙醇)中进行氢化。
在进一步的实例中，式(1)化合物及其中间体中的胺(-NH2)基团可以这样得到，即在溶剂(例如醇，例如乙醇)中，在环境温度下，使对应的酰亚胺与肼进行水解反应。
在另一种实例中，硝基(-NO2)可以这样被还原为胺(-NH2)，例如在支持物(例如碳)上的金属催化剂(例如钯)的存在下，在溶剂(例如醚，例如四氢呋喃，或者醇，例如甲醇)中使用氢进行催化氢化，或者在酸、例如盐酸的存在下，使用金属、例如锡或铁进行化学还原。
在进一步的实例中，式(1)化合物及其中间体中的胺(-CH2NH2)基团可以借助腈(-CN)的还原作用得到，例如在金属催化剂(例如支持物如碳上的钯，或阮内镍)的存在下，在溶剂(例如醚，例如环状醚，例如四氢呋喃，或者醇，例如甲醇或乙醇)中，可选地在氨溶液的存在下，在环境温度至回流温度的温度下，使用例如氢或者例如在溶剂(例如醚，例如环状醚，例如四氢呋喃)中，在0℃至回流温度的温度下，使用金属氢化物、例如氢化铝锂进行化学还原。
在另一种实例中，化合物中的硫原子、例如当存在于基团L1或L2中时，可以在惰性溶剂(例如卤代烃，例如二氯甲烷)中，在约环境温度下，使用氧化剂(例如过酸，例如3-氯过苯甲酸)被氧化为对应的亚砜或砜。
在进一步的实例中，式(1)化合物的N-氧化物一般可以通过例如如上关于式(5)中间体的制备所述氧化对应的含氮碱而加以制备。
利用常规工艺，式(1)化合物的盐可以借助式(1)化合物与适当的碱在适合的溶剂或溶剂混合物(例如有机溶剂，例如醚，例如二乙醚，或者醇，例如乙醇)中的反应加以制备。
若需要得到式(1)化合物的特定对映体，则可以利用任意适合于拆分对映体的常规工艺从对应的对映体混合物生成所述对映体。
因而，例如，非对映体衍生物、例如盐可以通过使式(1)对映体混合物(例如外消旋物)和适当的手性化合物(例如手性碱)反应而制得。然后可以借助任意常规手段、例如结晶分离非对映体，回收所需对映体，例如用酸处理，在这种情形中非对映体是一种盐。
在另一种拆分方法中，可以利用手性高效液相色谱分离式(1)外消旋物。作为替代选择，如果需要的话，可以使用适当的手性中间体在上述方法之一中得到特定的对映体。作为替代选择，特定的对映体可以这样得到，即进行对映体特异性酶促生物转化作用，例如使用酯酶的酯水解，然后仅从未反应的酯对映体中纯化对映体纯的酸水解产物。
色谱、重结晶和其他常规分离工艺也可以用于中间体或终产物，只要这是得到特定的本发明几何异构体所需要的。
下列实施例阐述本发明。所有温度均以℃计。
使用下列缩写NMM-N-甲基吗啉EtOAc-乙酸乙酯MeOH-甲醇BOC-叔丁氧羰基DCM-二氯甲烷AcOH-乙酸DIPEA-二异丙基乙胺EtOH-乙醇Pyr-吡啶Ar-芳基DMSO-二甲基亚砜iPr-异丙基Et2O-二乙醚Me-甲基THF-四氢呋喃h-小时MCPBA-3-氯过苯甲酸NBS-N-溴琥珀酰亚胺
FMOC-9-芴基甲氧羰基r.t.-室温DBU-1，8-二氮杂二环[5，4-0]十一碳-7-烯EDC-1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐HOBT-1-羟基苯并三唑水合物BINAP-2，2’-双(二苯膦基)-1，1’-联萘DMF-N，N-二甲基甲酰胺dba-二亚苄基丙酮DME-乙二醇二甲醚p.s.i.-磅每平方英寸MTBE-甲基叔丁基醚m.p.-熔点所有NMR都是在300MHz或400MHz下得到的。
化合物的命名借助于Beilstein Autonom，供应商为MDLInformation Systems GmbH，Theodor-Heuss-Allee 108，D-60486Frankfurt，Germany，或者借助于ACD Labs Name(v.5.0或v.6.0)，供应商为Advanced Chemical Development，Toronto，Canada。
所引用的LCMS保留时间(RT)是在Hewlett Packard 1100 LC/MS上、采用下列方法生成的Phenomenex Luna 3μC18(2)50×4.6mm柱；移动相A＝含0.1％甲酸的水；移动相B＝含0.1％甲酸的MeCN；流速0.9mL/min，柱温40℃。
梯度
若另有规定，采用替代LCMS条件(条件B)所引用的LCMS保留时间(RT)是在Hewlett Packard 1100/ThermoFinnigan LCQ DuoLC/MS系统上、采用电子喷射电离和下列方法生成的Phenomenex Luna5μC18(2)100×4.6mm柱；移动相A＝含0.08％甲酸的水；移动相B＝含0.08％甲酸的MeCN；流速3.0mL/min，柱温35℃。
梯度
中间体13-氨基噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯将2-氯-3-氰基吡啶(330g，2.3mol)、2-巯基乙酸乙酯(361.2g，3.0mol)、碳酸钠(265g，2.5mol)与EtOH(1.2L)的混合物加热至回流达4.5小时。然后将反应混合物冷却至环境温度，加入到水(15L)中。将所得沉淀物搅拌30分钟，然后过滤。将滤饼用两份水洗涤(2×2.5L)，在45℃真空下干燥至恒重，得到标题化合物，为褐色固体(493.1g，93.2％)。
δH(CDCl3)8.68(1H，dd，J4.7，1.2Hz)，7.93(1H，dd，J8.5，1.2Hz)，7.29(1H，dd，J8.5，4.7Hz)，5.90(2H，b)，4.38(2H，q，J7.0Hz)，1.40(3H，t，J7.0Hz).LCMS RT 2.9 minutes，223(M+H)+.
中间体23-溴噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯将中间体1(363.6g)历经两小时分批加入到在20至25℃温度下搅拌着的溴化铜(II)(403.3g)、亚硝酸叔丁酯(220.6g)与乙腈(3.6L)的混合物中。将混合物在20℃下搅拌2小时，然后缓慢加入到2M HCl(aq)(4.2L)中。将反应混合物浆液过滤，固体用水(500mL)洗涤。合并滤液，用乙酸乙酯(8L)萃取，该乙酸乙酯溶液用2M HCl(aq)(2.2L)洗涤。将固体溶于乙酸乙酯(6L)，该溶液用2M HCl(aq)洗涤两次(4.4L和2.2L)。然后合并两份乙酸乙酯溶液，用2M HCl(aq)(2.2L)洗涤，用水洗涤两次(2×2L)。然后将该乙酸乙酯溶液干燥(MgSO4)，过滤，在40mbar真空和60℃下浓缩，得到固体残余物。将其打碎，在45℃真空下干燥至恒重，得到标题化合物，为褐色固体(458.5g，97.9％)。
δH(DMSO-d6)8.89(1H，d，J4.7Hz)，8.47(1H，d，J8.6Hz)，7.71(1H，dd，J8.6，4.7Hz)，4.46(2H，q，J7.2Hz)，1.40(3H，t，J7.2Hz).LCMS RT 3.8 minutes，288(M+H)+.
中间体33-溴噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯N-氧化物在氮下，向中间体2(214g，0.747mol)的DCM(2140mL)浆液历经0.5小时分批加入70％mCPBA(240g，0.97mol)。然后将反应物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水(800mL)猝灭，用10％w/v碳酸钠溶液(1250mL)调节pH至8.5。除去碱性水层，有机层用水洗至pH7。在真空中浓缩有机层，回收粗标题产物，为黄褐色固体。将粗产物悬浮在MTBE(600mL)中制成浆液，在0-5℃下经过1小时进行纯化，得到标题化合物(174g，77％)。δH(CDCl3)8.44(1H，dd，J6.2，0.8Hz)，7.87(1H，dd，J8.3，0.8Hz)，7.48(1H，dd，J8.3，6.2Hz)，4.49(2H，q，J7.1Hz)，1.48(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 2.61 minutes，302(M+H)+.
中间体43-溴-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯向在室温下搅拌的中间体3(95g，0.32mol)的DMF(950mL)悬液历经30分钟滴加三氟乙酸酐(198g，131mL，0.94mol)(观察到轻微放热)。完全加入后，将反应物在室温下搅拌另外45分钟。在真空下除去过量三氟乙酸酐，浓缩反应混合物至原始体积的大约一半。然后将所得深色溶液倒在水(1L)与甲苯(400mL)的混合物上。混合物放置约10分钟，然后过滤收集沉淀。将沉淀用甲苯洗涤(3×50mL)，然后在50-60℃真空烘箱中干燥。得到标题化合物，为米色固体(68.5g，72.1％)。δH(DMSO-d6)12.20(1H，brs)，7.75(1H，d，J9.0Hz)，6.50(1H，d，J9.0Hz)，4.15(2H，q，J7.1Hz)，1.12(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 2.86 minutes，302(M+H)+.m.p.261.7-268.1℃.
中间体53-溴-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯方法A向3L夹套容器装入中间体4(100g，0.332mol)、CuI(15.8g，0.083mol)、苯基代硼酸(80g，0.664mol)、吡啶(104g，1.32mol)和乙腈(2.0L)，将混合物在40℃下搅拌。向反应混合物剧烈吹入压缩空气达6小时。然后关闭压缩空气，将反应混合物在40℃下搅拌过夜。第二天重复相同的过程。大约36小时后，HPLC指示原料向产物的转化率＞97％。将所得深色反应混合物倒在水(1.2L)与浓盐酸(300mL)的混合物上。混合物用二氯甲烷萃取(2×1.5L)，合并有机层，用2M HCl(aq)洗涤(2×1.5L)。分离有机层，穿过MgSO4垫，在真空中浓缩。使粗残余物从甲苯(600mL)中重结晶，得到标题化合物，为米色固体(93.85g，75.0％)。δH(CDCl3)7.82(1H，d，J8.5Hz)，7.70-7.62(3H，m)，7.54-7.42(2H，m)，6.70(1H，d，J8.5Hz)，4.15(2H，q，J7.1Hz)，1.14(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.75 minutes，378(M+H)+.MP＝201.6-206.0℃.
方法B(替代工艺)向2-颈圆底烧瓶按顺序加入中间体4(302mg，1.00mmol)、乙酸铜(II)(278mg，1.50mmol)、苯基代硼酸(488mg，4.00mmol)、DCM(5mL)和吡啶(158mg，2.00mmol)。将反应物在室温下搅拌18小时，排除水分。然后将反应物用DCM(50mL)稀释，用2M HCl(aq)(50mL)洗涤，水层用DCM(50mL)反萃取。合并有机层，然后用水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。将粗产物悬浮在甲醇(12mL)中进行纯化，得到标题化合物，为米色固体(270mg，72％)。
δH(CDCl3)7.82(1H，d，J8.5Hz)，7.70-7.62(3H，m)，7.54-7.42(2H，m)，6.70(1H，d，J8.5Hz)，4.15(2H，q，J7.1Hz)，1.14(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT3.75 minutes，378(M+H)+.
中间体63-溴-7-(4-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯向烧瓶装入中间体4(15.1g，0.05mol)、乙酸铜(II)(13.62g，0.075mol)、4-甲苯基代硼酸(14.0g，0.1mol)、DCM(500mL)和吡啶(25mL，0.3mol)，将混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用2M HCl(2×200mL)、5％NaOH(aq)(200mL)、盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)。在真空中除去溶剂，所得固体用甲醇研制，得到标题化合物，为固体(15.7g)。
δH(CDCl3)7.76(1H，d，J9.7Hz)，7.33(2H，d，J8.3Hz)，7.18(2H，d，J8.3Hz)，6.64(1H，d，J9.7Hz)，4.24(2H，q，J7.1Hz)，2.39(3H，s)，1.26(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.86 minutes，394(M+H)+中间体73-溴-7-(4-氟苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体4和4-氟苯基代硼酸开始，借助中间体6的方法。白色固体。δH(CDCl3)7.84(1H，d，J 9.7Hz)，7.41-7.37(2H，m)，7.32-7.25(2H，m)，6.72(1H，d，J 9.7Hz)，4.33(2H，q，J 7.1Hz)，1.34(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.729 minutes，397.8(M+H)+.
中间体83-溴-7-(4-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体4和4-氯苯基代硼酸开始，借助中间体6的方法。
δH(CDCl3)7.86(1H，d，J 9.6Hz)，7.60(2H，d，J 8.5Hz)，7.37(2H，d，J 8.5Hz)，6.74(1H，d，J 9.6Hz)，4.35(2H，q，J 7.1Hz)，1.36(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.937 minutes，413(M+H)+.
中间体9
3-溴-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体4和3-甲基苯基代硼酸开始，借助中间体6的方法。
δH(CDCl3)7.85(1H，d，J 9.6Hz)，7.51-7.48(1H，m)，7.38-7.27(1H，m)，7.29(2H，br m)，6.75(1H，d，J 9.6Hz)，4.34(2H，q，J 7.1Hz)，2.46(3H，s)，1.35(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.865 minutes，393(M+H)+.
中间体113-溴-7-(环丙基甲基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯在0℃下，将氢化钠(60％矿物油分散体)(3.27g，81.4mmol)分批加入到中间体4(22.3g，74mmol)的DMF(300mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后缓慢加入环丙基甲基溴(10g，74mmol)，将混合物在60℃下加热过夜。在真空中除去DMF，使残余物在EtOAc与盐水之间分配。将有机相干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。经过柱色谱纯化(二氧化硅，含0-10％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为黄色固体(12.5g，47％)。δH(CDCl3)7.57(1H，d，J 9.5Hz)，6.47(1H，d，J 9.5Hz)，4.22(2H，q，J 7.0Hz)，3.87(2H，d，J7.1Hz)，1.26-1.19(4H，m)，0.43-0.37(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.80 minutes，357(M+H)+.
中间体123-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯将中间体5(1.00g，2.64mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.121g，0.132mol)和BINAP(0.164g，0.264mmol)在甲苯(12mL)中搅拌5分钟。加入4-氟-3-甲基苯胺(0.397g，3.172mmol)和碳酸铯(1.205g，3.701mmol)，在N2下将混合物在回流下加热24小时。将混合物溶于THF(100mL)，用水洗涤。合并有机层，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。残余物用MeOH研制，得到标题化合物，为白色固体(0.754g)。
δH(DMSO-d6)8.72(1H，s)，7.67-7.60(3H，m)，7.51-7.49(2H，m)，7.18-7.10(3H，m)，7.09-6.99(1H，m)，6.39(1H，d，J 9.7Hz)，4.15(2H，q，J 7.07Hz)，2.22(3H，s)，1.72(3H，t，J 7.08Hz).LCMS(ES+)423(M+H)+.
中间体133-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯将三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(1.21g，1.32mmol)加入到中间体5(10g，26.4mmol)、碳酸铯(12.05g，37.0mmol)、2，4-二氟苯胺(4.1g，3.23mL，31.7mmol)与BINAP(1.65g，2.64mmol)在无水甲苯(80mL)中的混合物中，在氮下将反应物加热至回流达4天。将反应物冷却，在DCM与水之间分配，将有机相干燥(MgSO4)，在真空中蒸发。粗残余物用甲醇研制，得到标题化合物，为白色固体(9.87g)。
δH(CDCl3)8.49(1H，bs)，7.58-7.40(3H，m)，7.32-7.25(2H，m)，7.13-7.04(1H，m)，7.01(1H，d，J9.8Hz)，6.93-6.86(1H，m)，6.82-6.75(1H，m)，6.31(1H，d，J，9.8Hz)，4.20(2H，q，J7.1Hz)，1.23(3H，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.06 minutes，427(M+H)+.
3-苯胺基-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯中间体的通用制备工艺中间体酯14-26是按照与中间体13所述相似的工艺制备的。因此，向经过烘箱干燥的反应烧瓶加入磁搅拌器、适当的取代的苯胺(1.2equiv.)、无水甲苯、中间体5(1.0equiv.)、碳酸铯(1.4equiv.)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(5mol％)和BINAP(10mol％)。在氮下将反应物加热至回流，同时磁搅拌24-48小时。然后将每一反应物用DCM稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过二氧化硅纯化，用含EtOAc的DCM梯度洗脱，或者作为替代选择，可以用甲醇或乙酸乙酯研制，得到标题化合物，为固体。
中间体143-苯胺基-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体5和苯胺得到标题化合物，为白色固体。
δH(CDCl3)8.70(1H，bs)，7.57-7.47(3H，m)，7.33-7.25(4H，m)，7.20-7.10(4H，m)，6.27(1H，d，J9.7Hz)，4.19(2H，q，J7.1Hz)，1.22(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.10 minutes，391(M+H)+.
中间体153-[(2-氯苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从2-氯苯胺和中间体5得到标题化合物，为固体。
δH(CDCl3)8.60(1H，bs)，7.56-7.48(3H，m)，7.40-7.38(1H，m)，7.36-7.32(2H，m)，7.20-7.15(2H，m)，7.14-7.05(1H，m)，7.05-6.98(1H，m)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.21(2H q，J7.1Hz)，1.23(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.38minutes，425(M+H)+.
中间体163-[(3-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从3-氰基苯胺和中间体5得到标题化合物，为灰白色固体。
δH(CDCl3)8.58(1H，bs)，7.61-7.43(3H，m)，7.40-7.20(6H，m)，7.14(1H，d，J9.8Hz)，6.38(1H，d，J9.8Hz)，4.19(2H，q，J7.1Hz)，1.23(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.78 minutes，416(M+H)+.
中间体173-[(2-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从2-氰基苯胺和中间体5得到标题化合物。
δH(CDCl3)8.72(1H，bs)，7.61-7.47(4H，m)，7.43-7.40(1H，m)，7.36-7.31(2H，m)，7.22-7.15(1H，m)，7.11-7.00(2H，m)，6.40(1H，d，J9.8Hz)，4.22(2H，q，J7.1Hz)，1.24(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.80 minutes，416(M+H)+.
中间体203-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体5和3-氯-4-氟苯胺得到标题化合物，为固体。
δH(CDCl3)8.70(1H，s)，7.67-7.59(3H，m)，7.44-7.41(2H，m)，7.24-7.02(4H，m)，6.43(1H，d，J 9.8Hz)，4.28(2H，q，J 7.1Hz)，1.31(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.245 minutes，443(M+H)+.
中间体223-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体8和4-氟-3-甲基苯胺得到标题化合物，为固体。
δH(CDCl3)8.72(1H，br s)，7.58-7.38(2H，m)，7.35-7.28(2H，m)，6.99-6.98(4H，m)，6.34(1H，d，J 9.8Hz)，4.28(2H，q，J 7.1Hz)，2.29(3H，s)，1.32(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.57minutes，457(M+H)+.
中间体233-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体9和4-氟-3-甲基苯胺得到标题化合物，为固体。
δH(CDCl3)8.63(1H，br s)，7.40-7.15(1H，m)，7.30-7.27(1H，m)，7.18-7.10(2H，m)，7.04-6.90(4H，m)，6.27(1H，d，J 9.7Hz)，4.18(2H，q，J7.1Hz)，2.21(3H，s)，2.20(3H，s)，1.21(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT4.469 minutes，437(M+H)+.
中间体243-[(3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体9和3-甲基苯胺得到标题化合物，为固体。
δH(CDCl3)8.55(1H，br s)，7.32-7.28(1H，m)，7.27-7.17(1H，m)，7.08-7.00(4H，m)，7.88-7.75(3H，m)，6.15(1H，d，J 9.8Hz)，4.08(2H，q，J 7.1Hz)，2.27(3H，s)，2.17(3H，s)，1.12(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.543minutes，419(M+H)+.
中间体263-苯胺基-7-(环丙基甲基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯从中间体11和苯胺得到标题化合物。淡黄色固体。
δH(CDCl3)8.71(1H，br s)，7.29-7.22(2H，m)，7.10-6.97(4H，m)，6.18(1H，d，J 9.7Hz)，4.27(2H，q，J 7.1Hz)，3.94(2H，d，J 7.2Hz)，1.40-1.33(1H，m)，1.32(3H，t，J 7.1Hz)，0.53-0.48(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.79 minutes，369.0(M+H)+.
中间体273-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸锂将中间体12(0.494g，1.170mmol)溶于EtOH/THF/H2O(2∶1∶1)(20mL)，加热至80℃，用LiOH.H2O(0.054g，1.287mmol)处理。继续反应，直至没有原料剩余(根据TLC判断)。在真空中除去溶剂，使残余物与甲苯共沸，得到标题化合物，为米色固体(0.284g)。
δH(DMSO-d6)7.81-7.75(3H，m)，7.64-7.62(2H，m)，7.41-7.38(1H，d，J 9.55Hz)，7.20-7.15(1H，t，J 9.01Hz)，7.04-7.03(1H，br m)，6.93-6.90(1H，br m)，6.48-6.46(1H，d，J 9.54Hz)，2.35(3H，s).LCMS(ES+)395(M+H)+.
中间体283-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸锂按照中间体27的方法，从中间体13(6.34g，14.9mmol)和氢氧化锂一水合物(686mg，16.4mmol)制备标题化合物。
δH(DMSO-d6)10.04(1H，bs)，7.81(3H，m)，7.69(2H，m)，7.50(1H，m)，7.48(1H，d，J9.6Hz)，7.16(2H，m)，7.56(1H，d，J9.6Hz).
中间体296-氧代-3-(苯基氨基)-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸铵将氢氧化钠(339mg，8.5mmol，1.1equiv.)的水(20mL)溶液加入到中间体14(3.0g，7.7mmol，1.0equiv.)的乙醇(50mL)悬液中，将混合物在回流下加热2小时。在真空中除去大部分乙醇，残余物用饱和氯化铵溶液(aq)(30mL)处理。过滤收集所得固体，用水(2×20mL)、Et2O(2×20mL)洗涤，在室温真空中干燥，得到标题化合物，为白色固体，定量收率。
δH(DMSO-d6)9.60(1H，bs)，7.65-7.57(3H，m)，7.49-7.46(2H，m)，7.29-7.18(3H，m)，6.97-6.91(3H，m)，6.34(1H，d，J9.6Hz).LCMS(ES+)RT 3.24minutes，363(M+H)+.
中间体307-(4-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸钠按照类似于中间体29所用的工艺，从中间体22(1.0g，2.1mmol)和氢氧化钠(100mg，2.6mmol，1.2equiv.)制备标题化合物。不用饱和氯化铵溶液处理，在真空中除去挥发物，残余物用EtOAc研制，得到标题化合物，为固体(800mg)。
δH(DMSO-d6)9.74(1H，bs)，7.67(2H，dd，J6.6，2.1Hz)，7.54(2H，dd，J6.6，2.1Hz)，7.24(1H，d，J9.6Hz)，7.20-7.01(1H，m)，6.90-6.80(1H，m)，6.85-6.75(1H，m)，6.31(1H，d，J9.5Hz)，4.68(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.51minutes，429(M+H)+.
中间体313-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸钠按照中间体30的工艺，从中间体23(1.0g，2.2mmol)和氢氧化钠(183mg，4.4mmol)制备标题化合物，为固体(1.0g)。
δH(DMSO-d6)7.56(1H，t，J7.7Hz)，7.44(1H，d，J7.7Hz)，7.38-7.24(3H，m)，7.07(1H，t，J9.1Hz)，6.96-6.91(1H，m)，6.88-6.75(1H，m)，6.37(1H，d，J9.6Hz)，2.47(3H，s)，2.25(3H，s).
中间体323-[(3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸钠按照中间体30的工艺，从中间体24(1.0g，2.3mmol)和氢氧化钠(140mg，3.5mmol)制备标题化合物，为固体(842mg)。
δH(DMSO-d6)9.81(1H，bs)，7.55(1H，t，J7.6Hz)，7.47(1H，d，J12Hz)，7.42-7.24(3H，m)，7.18(1H，t，J7.7Hz)，6.80-6.75(3H，m)，6.37(1H，J9.5Hz)，2.46(3H，s)，2.31(3H，s).
中间体333-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸钠按照中间体30的工艺从中间体20(1.0g，2.2mmol)和氢氧化钠(100mg，2.69mmol)制备标题化合物，为固体(680mg)。δH(DMSO-d6)9.78(1H，bs)，7.61-7.59(3H，m)，7.55-7.46(2H，m)，7.30-7.24(2H，m)，7.09-7.06(1H，m)，6.90-6.88(1H，m)，6.34(1H，d，J9.4Hz).LCMS(ES+)RT3.41 minutes，414(M+H)+.
中间体343-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸五氟苯基酯将EDC(0.163g，0.852mmol)加入到中间体27(0.284g，0.710mmol)的DMF(10mL)溶液中，将混合物在室温下搅拌30分钟。加入五氟苯酚(0.196g，1.065mmol)，将混合物在室温下搅拌24小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶于DCM，然后用水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。经过柱色谱纯化(二氧化硅，50％己烷/EtOAc)，得到标题化合物，为白色固体(0.226g)。δH(DMSO-d6)8.96(1H，s)，7.07-6.95(5H，br m)，7.55-7.39(4H，br m)，6.29(1H，d，J 9.86Hz)，2.08(3H，s).LCMS(ES+)561(M+H)+.
中间体35
3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸五氟苯基酯按照中间体34的方法从中间体28制备标题化合物，得到该产物，为白色固体。δH(CDCl3)8.66(1H，bs)，7.76(3H，m)，7.58(2H，m)，7.47(1H，m)，7.14(3H，m)，6.54(1H，d，J9.9Hz).LCMS(ES+)RT 4.57 minutes，565(M+H)+.
中间体363-溴-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸在室温下，将氢氧化钠(1.83g，45.8mmol，1.1equiv.)加入到中间体(15.75g，41.6mmol，1.0equiv.)的乙醇(78mL)与水(78mL)悬液中。然后将反应混合物加热至回流。一旦达到回流，固体产物已进入溶液，HPLC分析表明完全转化为酸。然后将反应混合物冷却至～70℃，历经10分钟加入浓盐酸(46mL)。使反应物冷却至室温，过滤收集所得固体，用水洗涤(3×25mL)，在真空中干燥，得到标题化合物，为米色固体(13.81g，97％)。
δH(DMSO-d6)8.13(1H，d，J9.6Hz)，7.92-7.80(3H，m)，7.78-7.74(2H，m)，6.92(1H，d，J9.6Hz).
中间体373-溴-7-(4-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸按照中间体36的方法，从中间体6(16.0g，40.3mmol)制备标题化合物，得到该产物，为固体(13.84g)。
δH(DMSO-d6)7.85(1H，d，J9.6Hz)，7.45-7.38(4H，m)，6.65(1H，d，J9.6Hz)，2.42(3H，s).
中间体383-溴-7-(4-氟苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸将氢氧化锂一水合物(0.87g，20.8mmol)的水(30mL)溶液加入到中间体7(5.5g，13.9mmol)的二噁烷(100mL)溶液中，将反应物在室温下搅拌4小时。滴加浓盐酸，直至产物已经沉淀出来。过滤收集所得固体，用水(2×30mL)、二乙醚(2×30mL)洗涤，在真空烘箱中干燥，得到标题化合物，为固体(4.65g，91％)。
δH(DMSO-d6)7.66(1H，d，J9.6Hz)，7.43-7.38(2H，m)，7.30-7.24(2H，m)，6.46(1H，d，J9.6Hz).
中间体393-溴-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体36(10.0g，28.6mmol)与DMF(2滴)的THF(150mL)溶液历经30分钟经由注射器加入草酰氯(3.26mL，37.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌另外30分钟，然后在真空中除去溶剂和过量试剂，得到中间体酰氯，为米色固体。将该酰氯溶于DCM(150mL)，历经45分钟加入到(R)-2-吡咯烷甲醇(2.88g，28.5mmol)与三乙胺(4.36mL，31.3mmol)在100mL二氯甲烷中的混合物中。完全加入后，将反应物在环境温度下搅拌1小时。将反应混合物倒在水(200mL)上，分离DCM层，水层用DCM(100mL)反萃取。合并有机层，然后用水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发，得到标题化合物，为亮褐色固体(12.83g)。
δH(CDCl3)7.70(1H，d，J9.6Hz)，7.50-7.60(3H，m)，7.35-7.45(2H，m)，6.75(1H，d，J9.6Hz)，4.25-4.35(1H，m)，4.00(1H，br s)，3.45-3.80(4H，m)，1.52-2.55(4H，m).LCMS(ES+)RT2.52 minutes，433.1(M+H)+.
中间体403-溴-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体37(6.4g，17.5mmol)的DCM(80mL)悬液加入EDC(5.04g，26mmol)，将反应物在室温下搅拌1小时。加入(R)-2-吡咯烷甲醇(2.6mL，26mmol)，将反应物在室温下搅拌18小时。将反应物用DCM(10mL)稀释，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗残余物经过色谱纯化(二氧化硅，含30-50％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为白色固体(3.44g，43％)。δH(CDCl3)7.65(1H，d，J9.6Hz)，7.37(2H，d，J8.2Hz)，7.20-7.19(2H，m)，6.66(1H，d，J9.6Hz)，4.25-4.23(1H，m)，3.80-3.40(4H，m)，2.37(3H，s)，2.13-2.04(1H，m)，1.79-1.53(3H，m).LCMS(ES+)RT 2.92 minutes，449(M+H)+.
中间体413-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体40所述方法，从中间体38和(R)-2-吡咯烷甲醇制备标题化合物，得到该产物，为固体。LCMS(ES+)RT 2.83分钟，452(M+H)+.
中间体423-溴-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向1L圆底烧瓶加入中间体39(12.5g，28.8mmol)、二氢吡喃(12.1g，144.8mmol)、对-甲苯磺酸(55mg，0.29mmol)和二氯甲烷(5000mL)。然后将反应混合物在室温下搅拌5小时。将反应混合物倒在水(200mL)、饱和盐水(100mL)和碳酸氢钠溶液(100mL)上。分离各层，水层用二氯甲烷(100mL)反萃取。合并有机层，然后用上述含水混合物洗涤，干燥(MgSO4)，蒸发至干。经过柱色谱纯化(270g硅胶)，用乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物，为亮褐色固体/泡沫(12.73g)。
δH(DMSO-d6)7.80(1H，d，J9.6Hz)，7.70-7.45(5H，m)，6.60(1H，d，J9.6Hz)，4.50(1H，m)，4.15(1H，br s)，3.35-3.80(6H，m)，1.30-2.00(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.65 minutes，519.1(M+H)+.
中间体433-溴-7-(4-甲基苯基)-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体42所用工艺，从中间体40(3.44g，7.6mmol)制备标题化合物。得到标题化合物，为亮褐色固体(4.85g)。
δH(CDCl3)7.63(1H，d，J9.6Hz)，7.28(2H，d，J7.8Hz)，7.17(2H，m)，6.63(1H，d，J9.6Hz)，4.48-4.28(2H，m)，3.85-3.30(6H，m)，2.36(3H，s)，2.15-1.70(7H，m)，1.48-1.46(3H，m).LCMS(ES+)RT 3.69 minutes，533(M)+.
中间体443-溴-7-(4-氟苯基)-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体42所用工艺，从中间体41(1.0g，2.21mmol)制备标题化合物。得到标题化合物，为亮褐色油(0.95g)。
δH(CDCl3)7.90(1H，d，J9.6Hz)，7.69(2H，m)，7.56(2H，t，J8.7Hz)，6.73(1H，d，J9.6Hz)，4.61-4.57(1H，m)，3.97-3.37(8H，m)，1.97-1.50(9H，m).LCMS(ES+)RT 3.51 minutes，560(M+Na)+.
中间体453-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向装有氮入口/出口的干燥500mL 2颈圆底烧瓶加入Cs2CO3(11.2g，31.7mmol)、(+/-)-BINAP(1.53g，2.46mmol)、中间体42(12.73g，24.6mmol)和Pd2(dba)3(1.12g，1.22mol)。向该混合物加入已充分脱气的无水甲苯(200mL)，然后加入2，4-二氟苯胺(3.49g，27.0mmol)，在氮下将反应物在回流下加热48小时。将反应混合物冷却至环境温度，然后倒在1.0M HCl(aq)(300mL)上。用二氯甲烷萃取(2×100mL)，合并有机层，用1.0M HCl(aq)洗涤(2×300mL)，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到褐色的油。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，3∶2乙酸乙酯∶庚烷)，得到标题化合物，为亮黄色固体(7.32g)。
δH(DMSO-d6)8.75(1H，s)，7.75(1H，d，J8.3Hz)，7.70-7.60(3H，m)，7.55-7.43(2H，m)，7.35-7.22(1H，m)，7.05-6.88(2H，m)，6.50(1H，d，J9.6Hz)，4.62(1H，bs)，4.45-4.30(1H，m)，3.65-2.75(6H，m)，1.90-1.20(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.01minutes，566(M+H)+.
中间体463-[(3-甲基苯基)氨基]-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体45的方法，从中间体42(2.5g，4.84mmol)和间-甲苯胺(0.62mL，5.8mmol)制备标题化合物，得到该产物，为橙色固体(2.27g)。δH(CDCl3)7.76(3H，m)，7.66(3H，m)，7.30(1H，m)，7.00(3H，m)，6.54(1H，d，J9.7Hz)，4.68(1H，m)，4.65(1H，m)，3.90-3.50(6H，m)，2.46(3H，s)，2.10-1.50(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.99 minutes，544(M+H)+.
中间体473-[(3-氯苯基)氨基]-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体45的方法，从中间体42(1.7g，3.3mmol)和3-氯苯胺(0.42mL，3.9mmol)制备标题化合物，得到该产物，为褐色固体(900mg)。δH(CDCl3)7.66(3H，m)，7.35(3H，m)，7.19(1H，m)，6.94(2H，m)，6.93(1H，m)，6.42(1H，d，J9.67Hz)，4.53(1H，m)，4.48(1H，m)，3.75-3.36(6H，m)，2.00-1.4(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.90 minutes，564(M+H)+.
中间体483-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-甲基苯基)-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体45的方法从中间体43(1.5g，2.8mmol)和2，4-二氟苯胺(0.35mL，3.3mmol)制备标题化合物，得到该产物，为固体(1.14g，69％)。δH(CDCl3)9.33(1H，bs)，7.39-7.30(2H，m)，7.19-7.14(3H，m)，6.96(1H，dd，J14.6，9.1Hz)，6.84(1H，t，J2.6Hz)，6.73(1H，t，J8.2Hz)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.48-4.38(2H，m)，3.75-3.30(6H，m)，2.39(3H，s)，1.97-1.50(4H，m)，1.49-1.25(6H，m).
中间体493-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-甲基苯基)-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体45的方法，从中间体43(1.5g，2.8mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(0.42mL，3.3mmol)制备标题化合物，得到该产物，为固体(879mg)。δH(CDCl3)9.41(1H，bs)，7.48-7.38(2H，m)，7.28-7.13(4H，m)，6.84-6.74(3H，m)，6.30(1H，d，J9.8Hz)，4.46-4.36(2H，m)，3.71-3.25(6H，m)，2.37(3H，s)，2.15(3H，s)，1.96-1.54(6H，m)，1.45-1.40(3H，m).LCMS(ES+)RT 4.21 minutes，576(M+H)+.
中间体507-(4-甲基苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体45的方法，从中间体43(1.5g，2.8mmol)和间-甲苯胺(0.37mL，3.3mmol)制备标题化合物，得到该产物，为固体(1.0g，63％)。
δH(CDCl3)9.29(1H，m)，7.30-7.19(5H，m)，7.09(1H，t，J8.3Hz)，6.78-6.76(3H，m)，6.32(1H，d，J9.7Hz)，4.48-4.36(2H，m)，3.76-3.32(6H，m)，2.39(3H，s)，2.23(3H，s)，1.97-1.58(6H，m)，1.54-1.42(4H，m).
中间体513-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体45的方法，从中间体44(0.48g，0.896mmol)和2，4-二氟苯胺(0.11mL，1.08mmol)制备标题化合物，得到该产物，为黄色固体(206mg，39％)。LCMS RT 3.87分钟，606(M+Na)+。
中间体52
3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体45的方法，从中间体44(0.48g，0.896mmol)和3-甲基-4-氟苯胺(0.135g，1.08mmol)制备标题化合物，得到该产物，为固体(90mg)。δH(CDCl3)LCMS RT 3.94分钟，581(M+H)+。
中间体533-氨基-7-(2-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-甲腈在-78℃下，将乙腈(10mL)加入到双(三甲代甲硅烷基)氨基化钠(100mL，1.0M THF溶液，100mmol)的THF(50mL)溶液中，产生密集的白色沉淀。加入异硫氰酸2-氯苯基酯(7.72g，45.45mmol)，形成褐色溶液。使混合物历经1小时温热至室温，然后用EtOH(50mL)稀释。加入N，N-二甲基尿嘧啶(6.4g，45mmol)，将混合物在回流下加热24小时。在真空中除去挥发物，将残余物溶于乙腈(100mL)。加入氯乙腈(2.85mL，45mmol)，将混合物在50℃下加热1小时，加入第二批氯乙腈(2.85mL，45mmol)，继续加热1.5小时。在真空中除去一些乙腈(～50mL)，加入水，以沉淀出产物。滤出褐色固体，用水(50mL)和Et2O(50mL)洗涤，干燥，得到标题化合物，为褐色固体(14.3g，定量)。
δH(DMSO-d6)8.10(1H，d，J 9.7Hz)，7.75-7.73(1H，m)，7.65-7.54(3H，m)，7.14(2H，br s，NH2)，6.54(1H，d，J 9.7Hz).LCMS(ES+)RT 2.97 minutes，302(M+H)+.
中间体543-溴-7-(2-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-甲腈将中间体53(1.17g，3.88mmol)悬浮在乙腈(20mL)中。加入溴化铜(II)(953mg，4.27mmol)，继之以亚硝酸叔丁酯(0.64mL，5.43mmol)。将混合物在室温下搅拌3小时，然后在2M HCl aq(100mL)与EtOAc(100mL)之间分配。将有机层用2M HCl aq(50mL)、2M NaOHaq(50mL)和水(25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。经过柱色谱纯化(二氧化硅，含0-5％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为淡褐色固体(980mg，67％)。
δH(CDCl3)7.70(1H，d，J 9.7Hz)，7.61(1H，dd，J 1.7，7.7Hz)，7.52-7.44(2H，m)，7.34(1H，dd，J 1.7，7.7Hz)，6.70(1H，d，J 9.7Hz).LCMS(ES+)RT 3.56 minutes，365(M+H)+.
中间体553-溴-7-(2-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸将中间体54(1.86g，5.0mmol)在甲醇(50mL)与2M NaOH aq(30mL)中的混合物在回流下加热1.5小时。在真空中除去挥发物，残余物用2M HCl aq(75mL)处理。将混合物在室温下搅拌过夜，得到微细的灰白色沉淀。滤出固体，干燥，得到标题化合物，为灰白色固体(1.80g，92％)。δH(DMSO-d6)13.53(1H，br s)，7.75(1H，d，J 9.7Hz)，7.64-7.62(1H，m)，7.56-7.54(1H，m)，7.51-7.42(2H，m)，6.52(1H，d，J 9.7Hz).LCMS(ES+)RT 3.13 minutes，384(35Cl79Br)(M+H)+.
中间体563-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将亚硫酰氯(0.66mL，9.1mmol)加入到中间体55(1.75g，4.55mmol)的氯仿(50mL)悬液中。将混合物在50℃下加热1小时。加入第二批亚硫酰氯(0.66mL，9.1mmol)，将混合物在50℃下加热另外1小时，然后在室温下搅拌过夜，最后在回流下加热另外1小时，得到溶液。在真空中除去挥发物，将残余物溶于DCM(30mL)。加入三乙胺(0.25mL，9.1mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.540mL，5.46mmol)，将溶液在室温下搅拌3小时。加入DCM(50mL)，将混合物用2M HCl aq(100mL)和2M NaOH aq(100mL)洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩，得到标题化合物，为淡褐色泡沫(2.15g，定量)。
δH(CDCl3)7.70(1H，d，J 9.6Hz)，7.60-7.55(1H，m)，7.48-7.32(3H，m)，6.66(1H，d，J 9.6Hz)，4.28-4.16(1H，br s)，3.70-3.48(5H，m)，2.13-2.09(1H，m)，1.92-1.81(1H，m)，1.79-1.59(2H，m).LCMS(ES+)RT2.91 minutes，467(M+H)+.
中间体573-溴-7-(2-氯苯基)-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将3，4-二氢-2H-吡喃(2.0mL，22.4mmol)和对-甲苯磺酸一水合物(45mg，5mol％)加入到中间体56(2.10g，4.48mmol)的DCM(25mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌48小时，然后用DCM(50mL)稀释，用Na2CO3aq(50mL)与盐水(50mL)的混合物洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。经过柱色谱纯化(二氧化硅，含70％EtOAc的己烷)，得到标题化合物，为黄色固体(2.08g，84％)。
δH(CDCl3)7.69(1H，m)，7.60-7.55(1H，m)，7.50-7.32(3H，m)，6.65(1H，m)，4.50(1H，br m)，4.29(1H，br m)，3.70-3.31(6H，m)，2.06-1.80(4H，m)，1.69-1.40(6H，m).LCMS(ES+)RT 3.61 minutes，551(M+H)+.
中间体587-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮从中间体57和4-氟-3-甲基苯胺开始，借助中间体45的方法。黄色固体。
δH(CDCl3)9.57(1H，br s)，7.67-7.63(1H，m)，7.54-7.40(3H，m)，7.25(1H，dd，J 1.0，9.8Hz)，6.95-6.85(3H，m)，6.37(1H，dd，J 1.0，9.8Hz)，4.56-4.50(1H，m)，4.48-4.43(1H，m)，3.84-3.40(6H，m)，2.24(3H，s)，2.02-1.45(10H，m).LCMS(ES+)RT 4.05 minutes，596(M+H)+.
中间体597-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-({(2R)-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮从中间体57和2，4-二氟苯胺开始，借助中间体45的方法。灰白色固体。δH(CDCl3)9.45-9.40(1H，m)，7.64-7.61(1H，m)，7.52-7.39(3H，m)，7.26(1H，d，J 9.8Hz)，7.07-7.01(1H，m)，6.92-6.87(1H，m)，6.82-6.77(1H，m)，6.40(1H，d，J 9.8Hz)，4.53-4.41(2H，m)，3.81-3.37(6H，m)，2.00-1.85(3H，m)，1.82-1.67(1H，m)，1.65-1.32(6H，m).LCMS(ES+)RT4.017 minutes，622.1(M+Na)+.
中间体603-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体28(～4.20g)的1，4-二噁烷(10mL)溶液加入2M HCl(aq)(10mL)，将反应混合物在70℃下加热1小时。将反应物用水(30mL)稀释，用EtOAc萃取(3×30mL)，将EtOAc萃取液干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗残余物经过二氧化硅色谱纯化(含0-5％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为淡黄色固体(2.13g)。δH(CDCl3)7.94(1H，d，J 9.4Hz)，7.64-7.53(3H，m)，7.46(2H，m)，7.45(1H，m)，7.20(1H，m)，6.99(1H，m)，6.48(1H，d，J 9.4Hz)，5.74(1H，s).LCMS(ES+)RT 3.54 minutes，354.9(M+H)+.
中间体61(2，4-二氟苯基)(6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁基酯在0℃下，将双(三甲代甲硅烷基)氨基化钠(6.0mL，1.0M THF溶液，6mmol)加入到中间体60(2.0g，5.65mmol)的THF(50mL)溶液中。30分钟后，加入二碳酸二叔丁酯(1.36g，6.22mmol)，将混合物在室温下搅拌1小时。使反应混合物在EtOAc与盐水之间分配。水相用EtOAc萃取(x3)，合并有机萃取液，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。经过柱色谱纯化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到标题化合物(1.2g，47％)。δH(CDCl3)7.45(1H，d，J 9.5Hz)，7.43-7.30(3H，m)，7.22-7.19(2H，m)，7.08-7.03(1H，m)，6.76-6.65(2H，m)，6.49-6.45(2H，m)，1.26(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.79 minutes，455(M+H)+.
中间体62
(2，4-二氟苯基)(2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]磺酰基}-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁基酯在-78℃下，将正丁基锂(0.54mL 2.5M己烷溶液，1.35mmol)加入到中间体61(600mg，1.32mmol)的THF(30mL)溶液中。20分钟后，向溶液通入二氧化硫气体达5分钟。使反应混合物升温至室温，在真空中除去溶剂。将残余物溶于DCM(40mL)，加入N-氯琥珀酰亚胺(210mg，1.45mmol)。在室温下90分钟后，加入(R)-2-吡咯烷甲醇(146mg，1.45mmol)的DCM(5mL)溶液，将混合物搅拌另外30分钟。将混合物用DCM稀释，用盐水洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。经过柱色谱纯化(二氧化硅，含5％至15％EtOAc的DCM)，得到标题化合物(340mg，42％)。δH(CDCl3)7.40-7.34(4H，m)，7.18-7.10(3H，m)，6.74-6.67(1H，m)，6.65-6.58(1H，m)，6.49(1H，d，J 9.7Hz)，3.95(1H，br m)，3.92-3.24(4H br m)，1.77-1.58(5H，br m)，1.27(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.55 minutes，618(M+H)+.
中间体633-[(2-氯苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸钠按照中间体30的工艺，从中间体15(1.5g，3.52mmol)和氢氧化钠(150mg)制备标题化合物，得到标题化合物，为固体(1.47g)。
δH(DMSO-d6)9.97(1H，bs)，9.56(1H，d，J9.6Hz)，7.23-7.01(2H，m)，7.26(1H，t，J7.0Hz)，7.34(1H，d，J9.5Hz)，7.47-7.13(3H，m)，7.72-7.64(3H，m).LCMS(ES+)RT 3.42 minutes，399(M+H)+.
中间体64外消旋-[1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯向中间体35(300mg，0.53mmol)的DCM(5mL)溶液加入吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(300mg，1.6mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18小时。在真空中浓缩反应混合物，粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含60％乙酸乙酯的异己烷)，得到标题化合物，为黄色的胶(277mg)。NMR δH(CDCl3)7.53(3H，m)，7.19(2H，m)，7.17(1H，d，J9.5Hz)，6.98(1H，m)，6.85(1H，m)，6.73(1H，m)，6.38(1H，d，J9.7Hz)，4.50(1H，bm)，3.76(1H，m)，3.61(2H，m)，3.58(1H，m)，2.10(1H，m)，1.80(1H，m)，1.35(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.50 minutes，567(M+H)+.
中间体65[(3S)-1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基)6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯向中间体35(1g，1.77mmol)的DCM(30mL)溶液加入(S)-吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(363mg，1.95mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18小时。在真空中浓缩反应混合物，粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，乙酸乙酯)，得到标题化合物，为白色固体(700mg)。LCMS(ES+)RT 3.56分钟，567(M+H)+.
中间体66[(3S)-1-({3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯向中间体34(1.0g，1.79mmol)的DCM(30mL)溶液加入(S)-吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(372mg，2.0mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18小时。在真空中浓缩反应混合物，粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为灰白色固体(1.2g)。NMRδH(CDCl3)9.61(1H，bs)，7.65-7.55(3H，m)，7.44-7.41(2H，m)，7.25(1H，d，J9.7Hz)，6.99-6.85(3H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，4.62(1H，m)，4.23(1H，m)，3.86-3.81(1H，m)，3.70-3.66(2H，m)，3.47(1H，dd，J10.3，4.2Hz)，2.27(3H，d，J1.9Hz)，2.18-2.12(1H，m)，1.91-1.85(1H，m)，1.44(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.64 minutes，563(M+H)+.
中间体673-[(2-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸五氟苯基酯将LiOH一水合物(390mg，9.27mmol)的水(50mL)溶液加入到中间体17(3.5g，8.42mmol)的THF(50mL)与EtOH(100mL)悬液中，将混合物加热至回流达5小时。在真空中除去溶剂，使残余物与甲苯共蒸发(x3)，得到中间体3-[(2-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸锂，为褐色固体。将该固体溶于DMF(100mL)，加入EDC(2.41g，12.6mmol)。将反应物在室温下搅拌20分钟，然后加入五氟苯酚(2.89g，15.7mmol)，然后搅拌另外18小时。在真空中除去DMF，使残余物在DCM与水之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含30-100％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为固体(1.35g)。LCMS(ES+)RT 4.06分钟，554(M+H)+.
中间体683-溴-7-(4-氟苯基)-6-氧代-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-碳酰氯将亚硫酰氯(5.2mL，71mmol)滴加到中间体38(5.2g，14mmol)的甲苯(150mL)悬液中。然后将反应物在回流下加热3小时，然后使反应物冷却至室温。在真空中除去溶剂和残余亚硫酰氯，使所得固体与甲苯共蒸发(x3)。得到标题化合物，为橙色固体(4.9g)，无需进一步纯化即可使用。NMR δH(CDCl3)7.77(1H，d，J9.7Hz)，7.29(4H，m)，6.68(2H，d，J9.7Hz).
中间体693-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体68(2.5g，6.5mmol)与二异丙基乙胺(1.7mL，9.7mmol)的DCM(100mL)溶液加入(R)-3-羟基吡咯烷(850mg，9.7mmol)，将反应物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水和盐水洗涤，分离DCM层，干燥(MgSO4)，然后在真空中浓缩，得到标题化合物，为橙色固体(2.65g)。LCMS RT 2.67分钟，439(M+H)+.
中间体703-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体68(2.5g，6.5mmol)与二异丙基乙胺(1.7mL，9.7mmol)的DCM(100mL)溶液加入(S)-3-羟基吡咯烷(850mg，9.7mmol)，将反应物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水和盐水洗涤，分离DCM层，干燥(MgSO4)，然后在真空中浓缩，得到标题化合物，为橙色固体(2.84g)。LCMS RT 2.67分钟，439(M+H)+.
中间体713-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体69(2.65g，6.0mmol)的DCM(80mL)溶液加入对-甲苯磺酸(10mg，0.06mmol)和3，4-二氢-2H-吡喃(2.8mL，30mmol)，将反应物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用饱和NaHCO3(aq)(x2)、然后用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含80％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(2.40g)。LCMS RT 3.28分钟，523(M+H)+.
中间体723-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体70(2.65g，6.0mmol)的DCM(80mL)溶液加入对-甲苯磺酸(10mg，0.06mmol)和3，4-二氢-2H-吡喃(2.8mL，30mmol)，将反应物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用饱和NaHCO3(aq)(x2)、然后用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含80％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(2.74g)。LCMS RT 3.28分钟，523(M+H)+.
中间体733-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向经过脱气的中间体71(1.2g，2.30mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(210mg，0.23mmol)与(+/-)-BINAP(290mg，0.46mmol)的甲苯(15mL)溶液加入2，4-二氟苯胺(281μL，2.76mmol)和碳酸铯(1.0g，3.22mmol)。将反应物在110℃氮下加热2天。将反应混合物用EtOAc(80mL)稀释，用水、盐水(x2)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含50％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为褐色固体(876mg)。LCMS RT 3.76分钟，570(M+H)+.
中间体743-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向经过脱气的中间体72(1.37g，2.63mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(120mg，0.13mmol)与(+/-)-BINAP(160mg，0.26mmol)的甲苯(15mL)溶液加入2，4-二氟苯胺(321μL，3.16mmol)和碳酸铯(1.20g，3.68mmol)。在氮下将反应物在110℃下加热18小时。加入另外当量的Pd2(dba)3(60mg，0.065mmol)和(+/-)-BINAP(80mg，0.13mmol)，将反应物在回流下加热另外2天。将反应混合物用EtOAc(80mL)稀释，用水、盐水(x2)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含50％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为褐色固体(767mg)。LCMS RT 3.74分钟，570(M+H)+.
中间体753-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向经过脱气的中间体72(1.37g，2.63mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(120mg，0.13mmol)与(+/-)-BINAP(160mg，0.26mmol)的甲苯(15mL)溶液加入4-氟-3-甲基苯胺(400mg，3.16mmol)和碳酸铯(1.20g，3.68mmol)。在氮下将反应物在110℃下加热18小时。加入另外当量的Pd2(dba)3(60mg，0.065mmol)和(+/-)-BINAP(80mg，0.13mmol)，将反应物在回流下加热另外2天。将反应混合物用EtOAc(80mL)稀释，用水、盐水(x2)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含50％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为褐色固体(980mg)。LCMS RT 3.84分钟，566(M+H)+.
中间体763-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体56的方法，从中间体55和(S)-3-羟基吡咯烷制备标题化合物。
中间体773-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3S)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体57的方法，从中间体76和3，4-二氢-2H-吡喃制备标题化合物。NMRδH(CDCl3)7.77(1H，d，J9.6Hz)，7.66-7.61(1H，m)，7.54-7.41(3H，m)，6.73(1H，d，J9.6Hz)，4.69-4.53(1H，m)，4.45-4.43(1H，m)，3.86-3.49(6H，m)，2.17-2.14(2H，m)，1.87-1.69(2H，m)，1.55-1.40(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.45 minutes，539(M+H)+.
中间体787-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体75的方法，从中间体77(883mg，1.64mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(267mg，2.13mmol)制备标题化合物。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为黄色固体(623mg)。NMR δH(CDCl3)9.70(1H，s)，7.68-7.64(1H，m)，7.55-7.41(3H，m)，7.27-7.24(1H，m)，6.96-6.85(3H，m)，6.37(1H，d，J9.8Hz)，4.654.63(1H，m)，4.42-4.40(1H，m)，3.84-3.64(5H，m)，3.51-3.47(1H，m)，2.24(3H，s)，2.16-2.01(1H，m)，1.99-1.92(1H，m)，1.80-1.70(1H，m)，1.68-1.67(1H，m)，1.56-1.49(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.94 minutes，582(M+H)+.
中间体797-(2-氯苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体75的方法，从中间体77(883mg，1.64mmol)和间-甲苯胺(0.28mL，2.62mmol)制备标题化合物。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为淡黄色固体(509mg)。
NMRδH(CDCl3)9.65(1H，m)，7.68-4.65(3H，m)，7.39(1H，d，J9.7Hz)，7.11(1H，t，J7.5Hz)，6.90-6.84(3H，m)，6.40(1H，d，J9.8Hz)，4.634.60(1H，m)，4.40-4.38(1H，m)，3.81-3.67(5H，m)，3.65-3.63(1H，m)，2.31(3H，s)，2.17-1.57(5H，m)，1.53(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.91 minutes，564(M+H)+.
中间体807-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体75的方法，从中间体77(883mg，1.64mmol)和2，4-二氟苯胺(0.28mL，2.75mmol)制备标题化合物。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为褐色固体(750mg)。NMRδH(CDCl3)9.66(1H，d，J4.4Hz)，7.68-7.64(1H，m)，7.56-7.41(3H，m)，7.27(1H，d，J8.8Hz)，7.07-7.04(1H，m)，6.94-6.89(1H，m)，6.84-6.80(1H，m)，6.42(1H，d，J9.7Hz)，4.65-4.63(1H，m)，4.40-4.38(1H，m)，3.86-3.61(5H，m)，3.51-3.44(1H，m)，2.07-1.89(2H，m)，1.79-1.77(1H，m)，1.71-1.68(1H，m)，1.59-1.49(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.83 minutes，586(M+H)+.
中间体813-溴-7-(4-甲基苯基)-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体56的方法，从中间体37和(S)-3-羟基吡咯烷制备标题化合物。NMRδH(CDCl3)7.66(1H，d，J9.6Hz)，7.30(2H，d，J8.1Hz)，7.18(2H，d，J8.1Hz)，6.65(1H，d，J9.6Hz)，4.44(1H，bm)，3.80-3.25(4H，m)，2.37(3H，s)，2.20-1.93(3H，m).LCMS(ES+)RT 2.65 minutes，433(M+H，79Br)+，435(M+H，81Br)+.
中间体82
3-溴-7-(4-甲基苯基)-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中间体56的方法，从中间体37(6.0g，18.0mmol)和(R)-3-羟基吡咯烷(2.0g，27.0mmol)制备标题化合物。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20％THF的DCM)，得到标题化合物，为白色固体(5.36g)。
δH 7.68(1H，d，J9.6Hz)，7.32(2H，m)，7.20(2H，m)，6.66(1H，d，J9.6Hz)，4.49(1H，bs)，3.78-3.60(3H，m)，2.39(3H，s)，1.97(2H，bs)，1.82(2H，bs).LCMS(ES+)RT 2.64 minutes，433(M+H，79Br)+，435(M+H，81Br)+.
中间体833-溴-7-苯基-2-[(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)羰基]-7H-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-酮将中间体36(17.6g，50mmol)悬浮在DCM(150mL)中，向其中加入亚硫酰氯(30mL，411mmol)和DMF(0.5mL)。将混合物在回流下加热1小时，在此期间固体溶解形成深色溶液。冷却至环境温度后，将溶液在真空中蒸发至干(30℃/150mBar)。用新鲜的DCM重复该步骤两次(2×100mL)。得到中间体酰氯，为斑驳的褐色固体。
在单独的烧瓶中，将3-羟基氮杂环丁烷盐酸盐(10.9g，100mmol)和二异丙基乙胺(50mL，360mmol)在20-25℃下在1∶1 DCM∶DMF(400mL)中搅拌1小时，然后冷却至0-5℃。历经1小时向该制备物加入酰氯(19.9g)的DCM(200mL)溶液，将所得橙色-褐色溶液搅拌另外1小时。蒸发至干(5-100mBar/40℃)后，在40℃下使残余物在EtOAc(500mL)与水(150mL)之间分配。将有机相用水洗涤两次(2×100mL)，然后重新蒸发。在40℃下将残余物重新悬浮在新鲜的EtOAc(200mL)中，然后过滤。用EtOAc洗涤(3×30mL)和在50℃真空中干燥后，得到标题化合物，为褐色粉末(16.5g，81.5％收率，m.p.199.1℃)。
δH(DMSO-d6)7.87(1H，d，J9.8Hz)，7.65(3H，m)，7.55(2H，m)，6.69(1H，d，J9.8Hz)，5.62(1H，d，J6.5Hz)，4.46(1H，m)，4.30(2H，m)，3.87(2H，br m).LCMS(ES+)RT 2.19 minutes，405(M+H)+.
中间体843-溴-7-苯基-2-[3-(四氢吡喃-2-基氧基)-氮杂环丁烷-1-羰基]-7H-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-酮将对-甲苯磺酸一水合物(0.28g，1.47mmol)加入到中间体83(11.9g，29mmol)的DCM(100mL)悬液中，其中含有3，4-二氢-2H-吡喃(7.5g，89mmol)。搅拌该混合物，直至全部原料溶解，得到橙色溶液，然后在20-25℃下放置过夜。加入饱和NaHCO3(aq)(20mL)以猝灭反应，随后将有机相用水(25mL)洗涤。干燥(Na2SO4)和在真空中除去溶剂后，得到粗产物，为褐色玻璃状物(22.8g)。在40℃下将该残余物溶于EtOAc(100mL)，所得溶液冷却至25℃后接种。一旦已经开始结晶，则进一步降低温度至0-5℃，搅拌该浆液达1小时。滤出褐色固体，用EtOAc洗涤(2×25mL)，在40℃真空中干燥，得到标题化合物(14.1g，71.2％收率，m.p.162℃)。δH(CDCl3)7.78(1H，d，J9.8Hz)，7.67(3H，m)，7.48(2H，m)，6.73(1H，d，J9.8Hz)，4.70(1H，m)，4.68(1H，m)，4.40(2H，dd)，4.19(2H，m)，3.81(1H，m)，3.50(1H，m)，1.42-1.90(6H，br m).LCMS(ES+)RT 3.31 minutes，489(M+H)+.
中间体853-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-7-苯基-2-[3-(四氢吡喃-2-基氧基)氮杂环丁烷-1-羰基]-7H-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-酮将中间体84(2.00g，4.21mmol)、4-氟-3-甲基苯胺(0.58g，4.64mmol)、rac-BINAP(0.26g，0.42mmol)、Pd2(dba)3(0.19g，0.21mmol)、碳酸铯(2.01g，6.17mmol)和甲苯(20mL)装入经过烘箱干燥的烧瓶，在氮气氛下加热至回流达2小时。冷却至室温后，加入水(20mL)，将该混合物搅拌10分钟。此时经由过滤分离固体，用甲苯(2×5mL)和水(2×5mL)洗涤，在真空中干燥，得到标题化合物(1.89g，84％)。δH(CDCl3)9.62(1H，s)，7.53-7.64(3H，m)，7.38-7.41(2H，m)，7.16-7.20(1H，d)，6.87-6.98(3H，m)，6.36-6.39(1H，d)，4.51-4.60(2H，m)，4.32-4.49(2H，m)，4.04-4.16(2H，m)，3.78-3.85(1H，m)，3.47-3.51(1H，m)，2.25(3H，s)，1.51-1.81(6H，m).LCMS(ES+)，RT 4.19 minutes，534(M+H)+.
中间体86[1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁基酯将中间体35(800mg，1.42mmol)、Et3N(0.5mL)与哌啶-4-基氨基甲酸叔丁基酯(354mg，1.70mmol)在DCM(20mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。在真空下浓缩反应物，用Et2O研制。经过色谱纯化(二氧化硅，含2％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为灰白色固体(267mg，32％)。δH(DMSO-d6)8.40(1H，s)，7.87(1H，d，J9.6Hz)，7.7-7.6(3H，m)，7.57-7.53(2H，m)，7.33-7.26(1H，m)，6.98-6.9(2H，m)，6.86-6.83(1H，m)，6.57(1H，d，J9.6Hz)，3.85-3.80(2H，m)，3.40-3.30(1H，m)，2.55-2.50(2H，m)，1.65-1.60(2H，m)，1.38(9H，s)，1.18-1.14(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.50 minutes，581(M+H)+.
中间体87[1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)氮杂环丁烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯将中间体35(483mg，0.85mmol)、Et3N(0.5mL)与氮杂环丁烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(175mg，1.02mmol)在DCM(20mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。在真空下浓缩反应混合物，用Et2O研制。得到标题化合物，为黄色固体(386mg，82％)。
δH(DMSO-d6)9.32(1H，s)，7.71-7.62(3H，m)，7.57-7.50(2H，m)，7.45-7.38(1H，m)，7.36(1H，d，J9.7Hz)，7.17-7.10(1H，m)，7.09-7.00(1H，m)，6.47(1H，d，J9.7Hz)，4.60-4.30(3H，m)，3.90-3.80(2H，m)，3.35-3.30(1H，m)，1.40(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.58 minutes，553(M+H)+.
中间体883-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮从中间体(4.7g，12.2mmol)和(R)-3-羟基吡咯烷(1.13g，13mmol)开始，借助中间体56的方法得到标题化合物，为黄色固体(5.70g，定量)。
δH(CDCl3)7.77(1H，d，J9.6Hz)，7.63-7.60(1H，m)，7.51-7.37(3H，m)，6.70(1H，d，J9.6Hz)，4.51(1H，br m)，3.78-3.53(4H，m)，2.20-1.70(2H，m)，1.60(1H，br s).LCMS(ES+)RT 2.70 minutes，453(M+H)+.
中间体893-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3R)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮从中间体88(5.35g，11.8mmol)和3，4-二氢-2H-吡喃(3.3mL，35.4mmol)开始，借助中间体57的方法得到标题化合物，为橙色固体(6.70g，定量)。δH(DMSO-d6)7.91-7.60(5H，m)，6.70(1H，d，J9.6Hz)，4.85-4.83(1H，m)，4.78-4.67(1H，m)，4.34-4.27(1H，m)，3.93-3.40(5H，m)，2.10-1.95(2H，m)，1.85-1.40(6H，m).LCMS(ES+)RT 3.46minutes，537(M+H)+.
中间体907-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮从中间体89(6.35g，11.8mmol)和2，4-二氟苯胺(1.45mL，14.1mmol)开始，借助中间体75的方法得到标题化合物，为淡褐色固体(3.0g，43％)。δH(DMSO-d6)8.99-8.94(1H，m)，7.83-7.79(1H，m)，7.74-7.59(4H，m)，7.39-7.26(1H，m)，7.06-6.93(2H，m)，6.51(1H，d，J9.7Hz)，4.62-4.54(1H，m)，4.23-4.18(1H，m)，3.73-3.50(6H，m)，1.95-1.35(8H，m).LCMS(ES+)RT 3.85 minutes，586(M+H)+.
实施例13-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体45(7.3g，12.9mmol)的乙醇(300mL)悬液加入10％HCl(aq)(40mL)，将反应物在室温下搅拌16小时。然后在真空中浓缩反应混合物，得到橙色/褐色油。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，EtOAc)，继之以第二支柱处理(二氧化硅，含10％THF的DCM)，得到标题化合物，为亮黄色固体(4.05g)。
δH(CDCl3)9.36(1H，bs)，7.68-7.36(3H，m)，7.33-7.18(2H，m)，7.14-7.06(1H，m)，7.04-7.00(1H，m)，6.97-6.73(2H，m)，6.35(1H，d，J9.7Hz)，4.36-4.28(1H，m)，3.74-3.47(4H，m)，2.00-1.68(3H，m)，1.60-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.19 minutes，482(M+H)+.
实施例22-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例1的方法从中间体46(2.0g，3.68mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(747mg)。
δH(CDCl3)7.77(3H，m)，7.71(2H，m)，7.51(1H，d，J9.73Hz)，7.36(1H，m)，7.07(3H，m)，6.58(1H，d，J9.75Hz)，4.57(1H，m)，4.00-3.75(4H，m)，2.51(3H，s)，2.25-2.00(3H，m)，1.81(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.18 minutes，460(M+H)+.
实施例33-[(3-氯苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例1的方法从中间体47(0.85g，1.5mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(545mg)。
δH(CDCl3)7.60(3H，m)，7.55(3H，m)，7.37(1H，m)，7.03(2H，m)，6.95(1H，m)，6.49(1H，d，J9.7Hz)，4.38(1H，m)，3.80(1H，m)，3.76(1H，m)，3.62(2H，m)，2.18(1H，s)，1.96(3H，m)，1.66(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.15 minutes，480(M+H)+.
实施例43-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例1的方法从中间体48(1.14g，2.0mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(470mg，46％)。
δH(CDCl3)7.31-7.29(2H，m)，7.19-7.13(3H，m)，6.95-6.84(1H，m)，6.83-6.80(1H，m)，6.74(1H，t，J7.7Hz)，6.34(1H，d，J9.7Hz)，4.31-4.25(1H，m)，3.72-3.48(4H，m)，2.37(3H，s)，1.96-1.73(3H，m)，1.62-1.51(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.24 minutes，496(M+H)+.
实施例53-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例1的方法从中间体49(879mg，1.52mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(410mg，54％)。
δH(CDCl3)9.35(1H，bs)，7.30(2H，m)，7.21-7.12(3H，m)，6.86-6.75(3H，m)，6.29(1H，d，J9.7Hz)，4.30-4.25(2H，m)，3.72-3.70(1H，m)，3.69-3.63(1H，m)，3.62-3.49(2H，m)，2.174(3H，s)，2.170(3H，s)，1.96-1.74(3H，m)，1.58-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.30 minutes，492(M+H)+.
实施例62-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例1的方法从中间体50(1.0g，1.8mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为黄色固体(492mg，56％)。
δH(CDCl3)9.20(1H，bs)，7.31-7.18(5H，m)，7.09(1H，t，J8.0Hz)，6.80-6.75(3H，m)，6.30(1H，d，J9.6Hz)，4.29-4.19(2H，m)，3.71-3.67(1H，m)，3.65-3.59(1H，m)，3.52-3.46(2H，m)，2.37(3H，s)，2.23(3H，s)，1.96-1.73(3H，m)，1.69-1.56(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.27 minutes，474(M+H)+.
实施例73-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例1的方法从中间体51(206mg，0.35mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为灰白色固体(155mg)。
δH(DMSO-d6)8.92(1H，s)，7.92(1H，d，J9.6Hz)，7.79(2H，m)，7.66(2H，t，J8.6Hz)，7.51-7.46(1H，m)，7.20-7.10(2H，m)，6.68(1H，d，J9.6Hz)，4.82(1H，m)，4.10(1H，bs)，3.54(1H，m)，3.44(1H，m)，3.11(1H，m)，1.98-1.87(3H，m)，1.80(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.15 minutes，500(M+H)+.
实施例83-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例1的方法从中间体52(90mg，0.16mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(63mg)。
δH(DMSO-d6)8.80(1H，s)，7.81(1H，d，J9.6Hz)，7.66(2H，m)，7.52(2H，t，J8.5Hz)，7.05(1H，t，J9.1Hz)，6.87-6.85(1H，m)，6.82-6.78(1H，m)，6.56(1H，d，J9.6Hz)，4.67(1H，t，J5.5Hz)，3.96(1H，m)，3.36-3.32(2H，m)，2.87(1H，m)，2.20(3H，s)，1.72-1.69(3H，m)，1.63-1.58(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.22 minutes，496(M+H)+.
实施例97-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将1M HCl aq(2mL)加入到中间体58(500mg，0.84mmol)的EtOH(20mL)溶液中，将混合物在室温下搅拌过夜。加入饱和Na2CO3aq(50mL)，混合物用EtOAc萃取(先50mL，再10mL)。合并有机层，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。残余的胶用DCM(5mL)处理，然后在真空中除去溶剂，得到标题化合物，为黄色固体(400mg，93％)。
δH(CDCl3)9.47(1H，br d，J 7.7Hz)，7.60-7.56(1H，m)，7.49-7.33(3H，m)，7.18(1H，dd，J 0.5，9.8Hz)，6.89-6.79(3H，m)，6.30(1H，dd，J 0.5，9.8Hz)，4.33-4.31(1H，m)，4.29(1H，br s)，3.74-3.37(4H，m)，2.19(3H，d，J 1.5Hz)，1.99-1.64(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.28 minutes，512(M+H)+.
实施例107-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮从中间体59开始，借助实施例9的方法。褐色固体。
δH(CDCl3)9.40(1H，s)，7.65-7.62(1H，m)，7.53-7.39(3H，m)，7.24(1H，d，J 9.9Hz)，7.10-7.04(1H，m)，6.84-6.80(1H，m)，6.41(1H，d，J 9.8Hz)，4.40-4.34(1H，m)，4.17-4.18(1H，m)，3.79-3.54(4H，m)，1.98-1.75(3H，m)，1.55-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.247 minutes，516(M+H)+.
实施例113-[(2-氯苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体63(1.0g，2.4mmol)的DCM(15mL)悬液加入EDC(0.73g，3.7mmol，1.5equiv.)、HOBT(0.33g，3.7mmol，1.5equiv.)，将混合物在室温下搅拌15分钟。加入(R)-2-吡咯烷甲醇(0.25mL，3.7mmol)，将反应物在室温下搅拌18小时。将反应物用DCM(10mL)稀释，用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗残余物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为灰白色固体(492mg)。δH(DMSO-d6)9.00(1H，bs)，7.77-7.68(7H，m)，7.38(1H，m)，7.07(2H，m)，6.64(1H，d，J9.6Hz)，4.78(1H，t，J5.9Hz)，4.22-4.15(1H，m)，3.55-3.53(2H，m)，3.46-3.39(1H，m)，3.26-3.18(1H，m)，1.99-1.77(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.28 minutes，(Cl37)482(M+H)+.
通过EDC偶联制备酰胺实施例的通用工艺下列实施例都是按照实施例11所述方法从适当的羧酸中间体和胺原料制备的。
实施例123-[(2-氯苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体63(500mg，1.24mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(0.12mL，1.86mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为灰白色固体(40mg)。δH(CDCl3)7.57-7.42(3H，m)，7.39-7.29(4H，m)，7.14-7.05(1H，m)，6.95-6.84(2H，m)，6.39(1H，d，J9.7Hz)，4.32-4.24(1H，m)，3.70-3.58(2H，m)，3.52-3.38(2H，m)，1.97-1.49(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.27 minutes，(Cl37)482(M+H)+.
实施例133-苯胺基-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体29和(R)-2-吡咯烷甲醇制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体。
δH(CDCl3)7.56-7.47(3H，m)，7.36-7.33(2H，m)，7.27-7.19(3H，m)，7.02-6.99(3H，m)，6.34(1H，d，J9.7Hz)，4.34-4.29(1H，m)，3.73-3.69(1H，m)，3.65-3.62(1H，m)，3.57-3.48(2H，m)，2.06-1.70(3H，m)，1.60-1.45(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.10 minutes，446(M+H)+.
实施例143-苯胺基-2-{[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体29和(S)-2-吡咯烷甲醇制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体。
δH(CDCl3)9.31(1H，bs)，7.55-7.46(3H，m)，7.35-7.32(2H，m)，7.26-7.18(3H，m)，7.01-6.98(3H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.32-4.29(1H，m)，4.14(1H，bs)，3.73-3.64(2H，m)，3.61-3.50(2H，m)，1.97-1.71(3H，m)，1.58-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.11 minutes，446(M+H)+.
实施例153-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体28(1.0g，2.58mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(390mg，3.87mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(300mg)。δH(CDCl3)7.65-7.48(3H，m)，7.35-7.32(2H，m)，7.15(1H，d，J9.7Hz)，7.04-7.01(1H，m)，6.99-6.72(2H，m)，6.36(1H，d，J9.7Hz)，4.37-4.29(1H，m)，3.74-3.47(4H，m)，1.95-1.74(3H，m)，1.61-1.53(1H，m).LCMS(ES+)RT3.18 minutes，482(M+H)+.
实施例183-苯胺基-2-{[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体29和(S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体。
δH(CDCl3)9.50(1H，bs)，7.55-7.46(3H，m)，7.40-7.30(2H，m)，7.27(1H，d，J9.7Hz)，7.25-7.18(2H，m)，6.99-6.95(3H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.35-4.30(1H，m)，3.62-3.56(1H，m)，3.51-3.43(2H，m)，3.41-3.30(1H，m)，3.23(3H，s)，1.92-1.73(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.49 minutes，460(M+H)+.
实施例193-苯胺基-2-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体29和(R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体。
δH(CDCl3)9.45(1H，bs)，7.55-7.46(3H，m)，7.40-7.30(2H，m)，7.27(1H，d，J9.7Hz)，7.25-7.18(2H，m)，6.99-6.95(3H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.35-4.30(1H，m)，3.62-3.56(1H，m)，3.51-3.43(2H，m)，3.41-3.30(1H，m)，3.23(3H，s)，1.92-1.73(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.49 minutes，460(M+H)+.
实施例207-(4-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-([(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体30(800mg，1.87mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.28mL，2.81mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(251mg)。
δH(CDCl3)9.43(1H，bs)，7.51-7.48(2H，m)，7.39-7.19(2H，m)，7.13(1H，d，J9.8Hz)，6.80-6.76(3H，m)，6.28(1H，d，J9.8Hz)，4.36-4.25(2H，m)，3.75-3.50(4H，m)，2.18(3H，s)，1.98-1.73(3H，m)，1.60-1.52(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.39 minutes，512(M+H)+.
实施例213-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羟甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-(3-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体31(1.0g，2.4mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(0.36mL，3.6mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(212mg)。δH(CDCl3)9.38(1H，bs)，7.45-7.40(1H，m)，7.38-7.27(1H，m)，7.18-7.12(3H，m)，6.87-6.76(3H，m)，6.30(1H，d，J9.8Hz)，4.36-4.28(2H，m)，3.75-3.48(4H，m)，2.37(3H，s)，2.18(3H，s)，1.97-1.82(3H，m)，1.70-1.59(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.34 minutes，492(M+H)+.
实施例222-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(3-甲基苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体32(842mg，2.15mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.32mL，3.23mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(179mg)。δH(CDCl3)9.21(1H，bs)，7.40-7.35(1H，m)，7.27-7.24(2H，m)，7.18-7.07(3H，m)，6.81-6.76(3H，m)，6.31(1H，d，J9.7Hz)，4.30-4.22(2H，m)，3.70-3.46(4H，m)，2.37(3H，s)，2.25(3H，s)，1.98-1.66(3H，m)，1.58-1.47(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.30 minutes，474(M+H)+.
实施例233-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-(3-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体31(640mg，1.54mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.25mL，2.3mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(112mg)。
δH(CDCl3)7.49-7.35(1H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.24-7.23(3H，m)，6.98-6.91(3H，m)，6.88(1H，d，J9.8Hz)，4.39-4.35(1H，m)，3.83-3.56(4H，m)，2.45(3H，s)，2.26(3H，s)，1.99-1.81(3H，m)，1.68-1.60(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.34 minutes，492(M+H)+.
实施例243-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体33(340mg，0.77mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.12mL，1.16mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为黄色固体(71mg)。δH(CDCl3)7.58-7.51(3H，m)，7.34-7.21(2H，m)，7.19-7.17(1H，m)，7.05-6.98(2H，m)，6.88-6.82(1H，m)，6.38(1H，d，J9.7Hz)，4.34-4.30(1H，m)，3.72-3.48(4H，m)，1.99-1.53(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.21 minutes，498(M+H)+.
实施例253-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羟甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例11的方法从中间体33(340mg，0.77mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(0.12mL，1.16mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为黄色固体(65mg)。δH(CDCl3)7.66-7.59(3H，m)，7.44-7.31(2H，m)，7.28-7.26(1H，m)，7.14-7.08(2H，m)，6.98-6.93(1H，m)，6.47(1H，d，J9.8Hz)，4.43-4.40(1H，m)，3.81-3.57(4H，m)，2.06-1.62(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.21 minutes，498(M+H)+.
实施例263-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将(R)-2-吡咯烷甲醇(0.398mL，4.037mmol)加入到中间体34(1.5g，2.69mmol)的DCM(20mL)溶液中，将混合物在室温下搅拌24小时。在真空中除去挥发物，残余物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含1-10％ THF的DCM)，得到标题化合物，为橙色固体(0.737g)。
δH(DMSO-d6)8.45(1H，s)，7.65-7.55(4H，br m)，7.49-7.46(2H，m)，6.98-6.93(1H，m)，6.88-6.86(1H，m)，6.80-6.76(1H，m)，6.42(1H，d，J 9.63Hz)，4.06(1H，m)，3.45-3.36(3H，m)，3.21-3.17(2H，m)，2.08(3H，s)，1.85-1.74(3H，m)，1.68-1.60(1H，m).LCMS(ES+)478(M+H)+.HPLC Chiralpak AS 80∶20 Isohexane/EtOH.RT19.62 minutes.
实施例273-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羟甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将(S)-2-吡咯烷甲醇(0.198mL，2.007mmol)加入到中间体34(0.750g，1.338mmol)的DCM(10mL)溶液中，将混合物在室温下搅拌24小时。在真空中除去挥发物，残余物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含1-10％ THF的DCM)，得到标题化合物，为橙色固体(0.369g)。
δH(DMSO-d6)8.46(1H，s)，7.65-7.55(4H，br m)，7.49-7.46(2H，m)，6.98-6.93(1H，m)，6.88-6.86(1H，m)，6.80-6.76(1H，m)，6.42(1H，d，J 9.63Hz)，4.05(1H，m)，3.46-3.35(3H，m)，3.20-3.16(2H，m)，2.19(3H，s)，1.84-1.72(3H，m)，1.68-1.60(1H，m).LCMS(ES+)478(M+H)+.HPLC Chiralpak AS 80∶20 Isohexane/EtOH.RT15.37 minutes.
实施例283-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将(S)-3-羟基吡咯烷(107mg，1.23mmol)加入到中间体35(400mg，0.709mmol)的DCM(8mL)溶液中，将反应物在室温下搅拌24小时。在真空中除去挥发物，粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含5-15％THF的DCM；和二氧化硅，含20-80％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为淡黄色固体(156mg)。δH(CDCl3)7.46-7.53(3H，m)，7.33(2H，m)，7.19(1H，d，J10.2Hz)，6.95-7.01(1H，m)，6.82-6.87(1H，m)，6.72-6.76(1H，m)，6.35-6.38(1H，m)，4.22(1H，m)，3.64-3.69(2H，m)，3.62(1H，m)，3.55(1H，m)，1.89-1.94(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.98 minutes，468(M+H)+.
实施例293-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将(R)-3-羟基吡咯烷(107mg，1.23mmol)加入到中间体35(232mg，0.411mmol)的DCM(4mL)溶液中，将反应物在室温下搅拌24小时。在真空中除去挥发物，粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含5-15％THF的DCM)，得到标题化合物，为淡黄色固体(91mg)。δH(CDCl3)7.48(3H，m)，7.31(2H，m)，7.15(1H，d，J9.7Hz)，6.95(1H，m)，6.82(1H，m)，6.72(1H，m)，6.34(1H，d，J9.7Hz)，4.41(1H，m)，3.67-3.59(3H，m)，3.53(1H，m)，1.90(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.95 minutes，468(M+H)+.
实施例303-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例28的方法从(S)-3-羟基吡咯烷(100mg，1.10mmol)和中间体34(200mg，0.36mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(55mg)。δH(CDCl3)7.51(3H，m)，7.34(2H，m)，7.19(1H，m)，6.84(2H，m)，6.80(1H，m)，6.33(1H，d，J9.75Hz)，4.44(1H，m)，3.66(4H，m)，2.18(3H，s)，1.91(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.02 minutes，464(M+H)+.
实施例313-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例28的方法从(R)-3-羟基吡咯烷(100mg，1.10mmol)和中间体34(200mg，0.36mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(73mg)。δH(CDCl3)7.65(3H，m)，7.60(2H，m)，7.29(1H，m)，6.90(3H，m)，6.48(1H，d，J9.73Hz)，4.58(1H，m)，3.80(3H，m)，3.76(1H，m)，2.31(3H，s)，2.07(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.02 minutes，464(M+H)+.
实施例323-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S，4S)-3，4-二羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例28的方法从(S，S)-3，4-二羟基吡咯烷(110mg，1.10mmol)和中间体35(200mg，0.35mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(144mg)。
δH(CDCl3)9.49(1H，s)，7.51(3H，m)，7.34(2H，m)，7.18(1H，m)，6.93(1H，m)，6.84(1H，m)，6.82(1H，m)，6.36(1H，d，J9.72Hz)，4.15(2H，m)，3.83(2H，m)，3.57(2H，d，J12.4Hz).LCMS(ES+)RT 2.74 minutes，484(M+H)+.
实施例333-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例28的方法从盐酸3-羟基氮杂环丁烷(110mg，1.05mmol)和中间体35(200mg，0.35mmol)制备标题化合物，其中加入二异丙基乙胺(0.195mL，1.12mmol)，得到标题化合物，为白色固体(64mg)。
δH(CDCl3)9.48(1H，s)，7.53(3H，m)，7.32(2H，m)，7.10(1H，d，J9.7Hz)，6.86(1H，m)，6.83(1H，m)，6.74(1H，m)，6.33(1H，d，J9.8Hz)，4.58(1H，s)，4.34(2H，m)，3.94(2H，m)，2.07(1H，s).LCMS(ES+)RT 3.06 minutes，454(M+H)+.
实施例343-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(1-羟基-1-甲基乙基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例28的方法从2-[(2S)-吡咯烷-2-基]丙烷-2-醇(140mg，1.05mmol)和中间体35(200mg，0.35mmol)制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色固体(140mg)。
δH(CDCl3)8.95(1H，s)，7.51(3H，m)，7.49(2H，m)，7.19(1H，m)，6.87(1H，m)，6.84(1H，m)，6.76(1H，m)，6.37(1H，d，J9.7Hz)，4.36(1H，m)，3.90(1H，m)，3.34(1H，m)，1.93(1H，m)，1.84(1H，m)，1.67(2H，m)，1.13(3H，s)，1.00(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.47minutes，510(M+H)+.
实施例353-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(1-羟基-1-甲基乙基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例28的方法从2-[(2R)-吡咯烷-2-基]丙烷-2-醇盐酸盐(165mg，1.05mmol)和中间体35(200mg，0.35mmol)制备标题化合物，其中加入二异丙基乙胺(0.20mL，1.12mmol)，得到标题化合物，为灰白色固体(89mg)。δH(CDCl3)8.96(1H，s)，7.63(3H，m)，7.32(2H，m)，7.23(1H，m)，7.01(1H，m)，6.83(1H，m)，6.74(1H，m)，6.38(1H，d，J9.7Hz)，5.00(1H，s)，4.32(1H，m)，3.90(1H，m)，3.33(1H，m)，2.00(2H，m)，1.92(2H，m)，1.15(3H，s)，1.00(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.47 minutes，510(M+H)+.
实施例363-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体17(400mg，0.96mmol)的2-乙氧基乙醇(5mL)悬液加入(S)-2-吡咯烷甲醇(0.48mL，4.81mmol)，将反应物在78℃下加热2天。在真空中除去溶剂，残余物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含30-80％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为固体(123mg)。
δH(CDCl3)9.26(1H，bs)，7.57-7.48(4H，m)，7.40-7.36(3H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.00-6.95(2H，m)，6.44(1H，d，J9.7Hz)，4.29-4.33(1H，m)，3.68-3.61(2H，m)，3.52-3.46(2H，m)，1.97-1.83(2H，m)，1.81-1.73(1H，m)，1.60-1.53(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.98 minutes，471(M+H)+.
实施例373-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体17(400mg，0.96mmol)的2-乙氧基乙醇(5mL)悬液加入(R)-2-吡咯烷甲醇(0.48mL，4.81mmol)，将反应物在78℃下加热2天。在真空中除去溶剂，残余物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含30-80％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(105mg)。
δH(CDCl3)9.25(1H，bs)，7.57-7.48(4H，m)，7.45-7.36(3H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.00-6.95(2H，m)，6.44(1H，d，J9.7Hz)，4.30(1H，m)，3.71-3.61(2H，m)，3.52-3.47(2H，m)，2.00-1.87(2H，m)，1.80-1.70(1H，m)，1.65-1.60(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.94 minutes，471(M+H)+.
实施例383-苯胺基-7-(环丙基甲基)-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮在密封的Schlenk试管中，将中间体26(500mg，1.4mmol)与(R)-2-吡咯烷甲醇(2mL，20mmol)的混合物在130℃下加热6小时。将反应物冷却至室温，在EtOAc(50mL)与水(50mL)之间分配。将EtOAc层用水洗涤(2×20mL)，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。粗残余物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20-50％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为黄色固体(405mg，70％)。δH(CDCl3)9.31(1H，bs)，7.23-7.14(3H，m)，6.99-6.94(3H，m)，6.24(1H，d，J9.7Hz)，4.40-4.34(1H，m)，4.18-4.16(1H，m)3.98-3.88(3H，m)，3.76-3.58(3H，m)，2.04-1.93(3H，m)，1.90-1.81(1H，m)，1.67-1.61(1H，m)，0.62-0.58(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.12 minutes，424(M+H)+.
实施例393-[(3-氰基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体16(224mg)的2-乙氧基乙醇(2mL)悬液加入(R)-2-吡咯烷甲醇(1.0mL)，在密封试管中将反应物在110℃下加热18小时。在真空中除去溶剂，残余物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含70％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(112mg)。
δH(DMSO-d6)9.18(1H，s)，7.90(1H，dd，J9.6，1.3Hz)，7.80-7.62(5H，m)，7.51(1H，t，J7.9Hz)，7.37-7.25(3H，m)，6.69(1H，d，J9.6Hz)，4.75(1H，m)，4.00(1H，m)，3.50-3.28(3H，m)，2.90(1H，m)，1.95-1.65(4H，m).LCMS(ES+)RT 2.99 minutes，471(M+H)+.
实施例403-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-([(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]磺酰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体62(340mg)、三氟乙酸(5mL)与DCM(20mL)的混合物在室温下搅拌过夜。在真空中除去溶剂，使残余物与甲苯共沸(x3)。将残余物溶于DCM，用三乙胺(10mL)处理，在真空中浓缩混合物。经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到标题化合物(160mg，23％)。δH(CDCl3)7.58-7.49(3H，m)，7.36-7.31(3H，m)，7.02(1H，d，J9.9Hz)，6.99-6.78(3H，m)，6.38(1H，d，J9.9Hz)，3.73-3.69(1H，m)，3.65-3.45(2H，m)，3.35-3.28(1H，m)，3.25-3.17(1H，m)，2.15(1H brm)，1.97-1.60(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.34 minutes，518(M+H)+.
实施例412-{[(3R)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体35(1g，1.77mmol)和二盐酸(R)-3-氨基吡咯烷(309mg，1.95mmol)溶于二氯甲烷(50mL)，用三乙胺(360mg，3.0mmol)处理。在室温下搅拌18小时后，反应混合物用水洗涤，分离有机相，干燥(硫酸钠)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含0-100％THF的DCM)，得到标题化合物，为白色固体(300mg)。
NMRδH(DMSO)9.08(1H，brs)，7.67-7.50(6H，m)，7.35-7.27(1H，m)，7.06-6.93(2H，m)，6.47(1H，d，J9.7Hz)，3.43-3.32(2H，m)，3.31-3.28(1H，m)，3.00(1H，dd，J4.0，10.5Hz)，1.89-1.77(1H，m)，1.65-1.53(1H，m)，1.52-1.45(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.25 minutes，467(M+H)+.
从五氟苯基酯制备酰胺实施例的通用工艺下列实施例42-53都是按照实施例41所述方法从适当的五氟苯基酯中间体和胺原料制备的。若必要的话，反应是在叔胺碱(例如三乙胺)的存在下进行的，以中和原料的酸盐。
实施例422-{[(2S)-2-(氨甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法，从中间体35(1g，1.77mmol)、(S)-2-(氨甲基)-吡咯烷(192mg，1.95mmol)和三乙胺(360mg，3.0mmol)制备。色谱纯化(二氧化硅，含0-100％THF的DCM)得到标题化合物，为白色固体(296mg)。NMR δH(DMSO)8.73(1H，brs)，7.74(1H，d，J9.3Hz)，7.66-7.56(3H，m)，7.52-7.50(2H，m)，7.29(1H，dt，J2.6，8.9Hz)，6.996.89(2H，m)，6.42(1H，d，J9.6Hz)，3.88-3.78(1H，m)，2.43(1H，dd，J3.7，12.6Hz)，2.12(1H，dd，J7.9，12.5Hz)，1.75-1.56(4H，m)，1.30-1.11(2H，brm).LCMS(ES+)RT 2.32 minutes，481(M+H)+.
实施例432-{[(2R)-2-(氨甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法，从中间体35(1g，1.77mmol)、(R)-2-(氨甲基)-吡咯烷(350mg，1.95mmol)和三乙胺(2mL，14.3mmol)制备。色谱纯化(反相二氧化硅，60％乙醇∶40％水)得到标题化合物，为白色固体(390mg)。NMRδH(CDCl3)9.38(1H，s)，7.64-7.54(3H，m)，7.50-7.31(2H，m)，7.32-7.24(1H，m)，7.11-7.03(1H，m)，6.97-6.90(1H，m)，6.87-6.81(1H，m)，6.44(1H，d，J9.7Hz)，4.33-4.27(1H，m)，3.77-3.67(1H，m)，3.61-3.54(1H，m)，2.95(1H，dd，J 5.1，12.9Hz)，2.83(1H，dd，J 6.1，12.9Hz)，2.08-1.74(4H，m).LCMS(ES+)RT 2.32 minutes，481(M+H)+.
实施例443-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体35(0.75g，1.33mmol)和(R)-3-(二甲氨基)吡咯烷(166mg，1.46mmol)制备。色谱纯化(反相二氧化硅，60％乙醇∶40％水)得到标题化合物，为白色固体(440mg)。
NMRδH(DMSO)8.82(1H，s)，7.67-7.59(4H，m)，7.52-7.49(2H，m)，7.35-7.27(1H，m)，7.03-6.91(2H，m)，6.48(1H，d，J 9.7Hz)，3.50-3.21(4H，m)，3.00(1H，t，J 8.9Hz)，2.06(6H，s)，1.96-1.92(1H，m)，1.59-1.49(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.266 minutes，495(M+H)+.
实施例453-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[(4-羟基哌啶-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体35(200mg，0.36mmol)和4-羟基哌啶(110mg，1.1mmol)制备，得到标题化合物，为白色粉末(100mg)。
NMRδH(CDCl3)7.93(1H，s)，7.51(3H，m)，7.35(2H，m)，7.24(1H，d，J9.7Hz)，6.81-6.93(2H，m)，6.75(1H，m)，6.41(1H，d，J9.7Hz)，3.86(3H，m)，3.22(2H，m)，1.77(2H，m)，1.40(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.90 minutes，482(M+H)+.
实施例46外消旋-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[(3-羟基哌啶-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体35(200mg，0.36mmol)、盐酸3-羟基哌啶(98mg，0.70mmol)和二异丙基乙胺(101mg，0.78mmol)制备。色谱纯化(二氧化硅，含15％THF的DCM)得到标题化合物，为白色固体(137mg)。NMRδH(CDCl3)7.46-7.55(3H，m)，7.33-7.35(2H，m)，7.23(1H，d，J9.7Hz)，6.82-6.93(2H，m)，6.70-6.75(1H，m)，6.41(1H，d，J9.7Hz)，3.72-3.77(1H，m)，3.56-3.60(1H，m)，3.38-3.49(3H，m)，1.70-1.80(2H，m)，1.53-1.59(1H，m)，1.38-4.42(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.02 minutes，482(M+H)+.
实施例472-{[(3R)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体34(1.0g，1.79mmol)、二盐酸(R)-3-氨基吡咯烷(311mg，1.96mmol)和三乙胺(1mL，7.2mmol)制备。色谱纯化(二氧化硅，含10％异丙醇的DCM)得到标题化合物，为黄色固体(620mg)。NMRδH(CDCl3)9.54(1H，bs)，7.56-7.44(3H，m)，7.34-7.31(2H，m)，7.19-7.14(1H，m)，6.88-6.75(3H，m)，6.31(1H，d，J10.2Hz)，3.73-3.65(2H，m)，3.59-3.52(2H，m)，3.29(1H，dd，J11.0，4.5Hz)，2.37-2.06(2H，bm)，2.17(3H，d，J2.3Hz)，2.04-1.95(1H，m)，1.70-1.62(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.33 minutes，463(M+H)+.
实施例482-{[(2S)-2-(氨甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体34(1.0g，1.79mmol)、(S)-2-(氨甲基)-吡咯烷(200mg)和三乙胺(1mL)制备。色谱纯化(反相二氧化硅，含60％MeCN的水)得到标题化合物，为白色固体(260mg)。
NMRδH(CDCl3)9.57(1H，bs)，7.64-7.55(3H，m)，7.43-7.31(2H，m)，7.28-7.24(1H，m)，6.98-6.84(3H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，4.30-4.23(1H，m)，3.75-3.69(1H，m)，3.61-3.54(1H，m)，2.94(1H，ddJ11.8，4.4Hz)，2.75(1H，dd，J12.8，7.0Hz)，2.27(3H，d，J1.8Hz)，2.04-1.74(4H，m).LCMS(ES+)RT 2.36 minutes，477(M+H)+.
实施例493-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-(二甲氨基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体34(1.0g，1.79mmol)、(R)-3-(二甲氨基)-吡咯烷(245mg，2.15mmol)和三乙胺(1mL)制备。色谱纯化(二氧化硅，含50-100％MeCN的DCM)得到标题化合物，为淡黄色固体(610mg)。NMRδH(CDCl3)9.50(1H，bs)，7.55-7.45(3H，m)，7.34-7.32(2H，m)，7.17(1H，d，J9.8Hz)，6.89-6.75(3H，m)，6.31(1H，d，J9.8Hz)，3.81-3.68(2H，m)，3.52-3.42(1H，m)，3.31-3.24(1H，m)，2.67-2.57(1H，m)，2.17(9H，s)，2.06-1.93(1H，m)，1.80-1.70(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.34 minutes，491(M+H)+.
实施例503-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R，4R)-3，4-二羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体35(196mg，0.35mmol)和(3R，4R)-3，4-二羟基吡咯烷(107mg，1.04mmol)制备。柱色谱纯化(二氧化硅，含0-8％MeOH的DCM)，得到标题化合物，为黄色固体(111mg)。
NMRδH(CDCl3)7.33-7.41(3H，m)，7.20(2H，bm)，7.02(1H，m)，6.82-6.88(1H，m)，6.68-6.74(1H，m)，6.58-6.63(1H，m)，6.23(1H，d，J9.7Hz)，4.02(2H，m)，3.69(2H，m)，3.43(2H，d，J12.5Hz).LCMS(ES+)RT 2.79 minutes，484(M+H)+.
实施例513-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R*，4S*)-3，4-二羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体35(250mg，0.44mmol)、盐酸顺式-3，4-二羟基吡咯烷(130mg，0.94mmol)和二异丙基乙胺(127mg，0.98mmol)制备。柱色谱纯化(二氧化硅，含5-15％THF的DCM)得到标题化合物，为黄色固体(98mg)。
NMRδH(CDCl3)7.48-7.56(3H，m)，7.31-7.34(2H，m)，7.15(1H，m)，6.96-7.02(1H，m)，6.82-6.88(1H，m)，6.72-6.78(1H，m)，6.36(1H，d，J9.7Hz)，4.20-4.22(2H，m)，3.77(2H，m)，3.53(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.84minutes，484(M+H)+.
实施例523-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体67(340mg，0.61mmol)和(S)-3-羟基-吡咯烷(227mg，2.60mmol)制备。柱色谱纯化(二氧化硅，含30-100％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(210mg)。
NMRδH(DMSO)9.68(1H，s)，7.86(1H，m)，7.72-7.81(4H，m)，7.63-7.71(3H，m)，7.19(1H，m)，7.12(1H，d)，6.64(1H，d，J9.7Hz)，5.07(1H，bs)，4.34(1H，bs)，3.59(3H，m)，3.39(1H，m)，1.88-1.97(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.81 minutes，457(M+H)+.
实施例533-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例41的方法从中间体67(340mg，0.61mmol)和(R)-3-羟基-吡咯烷(227mg，2.60mmol)制备。柱色谱纯化(二氧化硅，含30-100％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(225mg)。
NMRδH(DMSO)9.59(1H，s)，7.70(1H，m)，7.62-7.73(4H，m)，7.54-7.60(3H，m)，7.10(1H，m)，7.03(1H，m)，6.56(1H，d，J9.7Hz)，4.98(1H，bs)，4.25(1H，bs)3.51(3H，m)，3.30(1H，m)，1.79-1.88(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.81 minutes，457(M+H)+.
实施例54外消旋-2-{[3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体64(270mg，0.48mmol)溶于4M HCl的二噁烷(30mL)溶液，在室温下搅拌18小时。在真空中浓缩反应混合物，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO3(aq)洗涤(x2)。分离有机层，干燥(MgSO4)，粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含2-6％MeOH的DCM)，得到标题化合物，为白色固体(89mg)。NMRδH(DMSO)9.01(1H，s)，7.42-7.59(6H，m)，7.25(1H，m)，6.98(2H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，5.50(1H，bm)，3.45(3H，m)，3.20(1H，m)，1.86(1H，m)，1.65(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.23 minutes，467(M+H)+.
实施例552-{[(3S)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体65(0.7g，1.24mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，用三氟乙酸(5mL)处理，在室温下搅拌2小时。在真空中浓缩反应混合物，与庚烷共沸除去残余的三氟乙酸。将所得黄色的油重新溶于二氯甲烷，用碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在真空中浓缩。色谱纯化(反相二氧化硅，60％乙醇∶40％水)得到标题化合物，为白色固体(336mg)。
NMRδH(DMSO)9.08(1H，s)，7.66-7.50(6H，m)，7.35-7.27(1H，m)，7.08-6.94(2H，m)，6.47(1H，d，J9.7Hz)，3.43-3.35(2H，m)，3.02-2.98(1H，m)，1.83-1.76(1H，m)，1.68-1.48(3H，m).LCMS(ES+)RT 2.239 minutes，467(M+H)+.
实施例562-{[(3S)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体66(1.2g，1.79mmol)溶于二噁烷(20mL)，用浓HCl(5mL)处理，在室温下搅拌20分钟。将反应混合物用DCM(100mL)稀释，用饱和NaHCO3(aq)中和。水层用若干份DCM萃取，合并萃取液，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含50-100％MeCN的DCM；然后含15％异丙醇的DCM)，得到标题化合物，为淡黄色固体(520mg)。
NMRδH(CDCl3)9.57(1H，bs)，7.56-7.46(3H，m)，7.35-7.32(2H，m)，7.19-7.15(1H，m)，6.89-675(3H，m)，6.31(1H，d，J9.7Hz)，3.74-3.66(2H，m)，3.61-3.53(2H，m)，3.24(1H，dd，J10.9，4.6Hz)，2.17(3H，d，J1.6Hz)，2.03-1.97(1H，m)，1.89-1.67(1H，m).LCMS(ES+)RT2.32 minutes，463(M+H)+.
实施例573-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体73(876mg，1.54mmol)的EtOH(45mL)溶液加入10％HCl(aq)(5mL)，将反应物在室温下搅拌18小时。将反应物用EtOAc(100mL)稀释，用饱和NaHCO3(aq)(x2)、然后用盐水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含80％EtOAc的异己烷，在DCM中装载产物)，得到标题化合物，为黄色固体(270mg)。NMRδH(CDCl3)7.36(2H，m)，7.19(3H，m)，6.99(1H，m)，6.76(1H，m)，6.72(1H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.45(1H，m)，3.62(4H，m)，1.85(2H，m).LCMS(ES+)RT3.04 minutes，486(M+H)+.
实施例583-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体74(767mg，1.35mmol)的EtOH(45mL)溶液加入10％HCl(aq)(5mL)，将反应物在室温下搅拌18小时。将反应物用EtOAc(100mL)稀释，用饱和NaHCO3(aq)(x2)、然后用盐水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含80％EtOAc的异己烷，在DCM中装载产物)，得到标题化合物，为黄色固体(304mg)。
NMRδH(CDCl3)7.27(2H，m)，7.20(3H，m)，6.99(1H，m)，6.85(1H，m)，6.74(1H，m)，6.36(1H，d，J9.7Hz)，4.46(1H，m)，3.75-3.50(4H，m)，1.97(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.05 minutes，486(M+H)+.
实施例593-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中间体75(980mg，1.35mmol)的EtOH(45mL)溶液加入10％HCl(aq)(5mL)，将反应物在室温下搅拌18小时。将反应物用EtOAc(100mL)稀释，用饱和NaHCO3(aq)(x2)、然后用盐水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含50-100％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为淡黄色固体(654mg)。
NMRδH(CDCl3)7.27(2H，m)，7.14(3H，m)，6.84-6.72(3H，m)，6.26(1H，d，J9.7Hz)，4.39(1H，m)，3.62(4H，m)，2.12(3H，s)，1.88(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.12 minutes，482(M+H)+。
实施例607-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例58所用工艺从中间体78(623mg，1.07mmol)制备标题化合物，得到亮黄色固体(253mg)。
NMRδH(CDCl3)9.60(1H，s)，7.64-7.57(1H，m)，7.52-7.37(3H，m)，7.25(1H，d，J9.8Hz)，6.98-6.70(3H，m)，6.34(1H，d，J9.8Hz)，4.34(1H，bs)，3.72-3.50(4H，m)，3.08(1H，bs)，2.22(3H，s)，1.86(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.17 minutes，498(M+H)+.
实施例617-(2-氯苯基)-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(3-甲基苯基)氨基]噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例58所用工艺从中间体79(509mg，0.90mmol)制备标题化合物。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为亮黄色固体(253mg)。NMRδH(CDCl3)9.62(1H，bs)，7.72-7.60(1H，m)，7.58-7.25(4H，m)，7.23-7.20(1H，m)，7.02-6.86(3H，m)，7.46(1H，d，J7.3Hz)，4.35(1H，bs)，3.74-3.50(4H，m)，3.13(1H，bs)，2.40(3H，s)，1.96(2H，bs).LCMS(ES+)RT 3.12 minutes，480(M+H)+.
实施例627-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例58所用工艺从中间体80(750mg，1.28mmol)制备标题化合物，得到亮黄色固体(367mg)。
NMRδH(CDCl3)9.56(1H，s)，7.69-7.58(1H，m)，7.43-7.38(3H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.07-6.97(1H，m)，6.95-6.87(1H，m)，6.80-6.78(1H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，4.35(1H，s)，3.77-3.52(4H，m)，3.00(1H，bs)，1.90(2H，s).LCMS(ES+)RT 3.10 minutes，502(M+H)+.
实施例633-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮在氮下，向中间体81(1.0g，2.31mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(212mg，0.23mmol，10mol％)与(+/-)-BINAP(288mg，0.46mmol，20mol％)的甲苯(50mL)溶液加入2，4-二氟苯胺(300μL，2.77mmol)和碳酸铯(1.05g，3.23mmol，1.4equiv.)。将反应物在100℃氮下加热4天。将反应混合物用EtOAc(80mL)稀释，用水、盐水(x2)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(123mg)。
NMRδH(CDCl3)9.49(1H，s)，7.33-7.30(2H，m)，7.22-7.18(2H，m)，7.16(1H，d，J9.7Hz)，6.97(1H，dd，J9.0，5.7Hz)，6.86-6.81(1H，m)，6.75-6.72(1H，m)，6.35(1H，d，J9.7Hz)，4.42(1H，bs)，3.70-3.62(3H，m)，3.56-3.53(1H，m)，2.39(3H，s)，1.97-1.85(3H，m).LCMS(ES+)RT3.13minutes，482(M+H)+.
实施例643-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例63的方法从中间体81(1.0g，2.3mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(347mg)制备标题化合物。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到标题化合物，为白色团体(60mg)。
NMRδH(CDCl3)9.56(1H，bs)，7.33-7.30(2H，m)，7.22-7.13(3H，m)，6.89-6.78(3H，m)，6.31(1H，d，J9.7Hz)，4.44(1H，m)，3.71-3.67(3H，m)，3.63-3.57(1H，m)，2.39(3H，s)，2.17(3H，d，J1.8Hz)，1.96-1.90(2H，m)，1.59(1H，bs).LCMS(ES+)RT 3.20 minutes，478(M+H)+.
实施例653-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例63的方法从中间体82和2，4-二氟苯胺制备标题化合物，得到白色固体。
NMRδH(CDCl3)7.44-7.21(2H，m)，7.19-7.16(3H，m)，6.99-6.97(1H，m)，6.96-6.94(1H，m)，6.92-6.87(1H，m)，6.98(1H，d，J9.8Hz)，4.44(1H，bs)，3.71-3.63(3H，m)，3.57-3.54(1H，m)，2.39(3H，s)，1.99-1.96(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.14 minutes，482(M+H)+.
实施例663-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照实施例63的方法从中间体82(1.0g，2.3mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(0.34mL，2.7mmol)制备标题化合物。粗产物经过柱色谱纯化(二氧化硅，含70％EtOAc的异己烷)，得到标题化合物，为白色固体(80mg)。
NMRδH(CDCl3)7.32-7.30(2H，m)，7.27-7.15(3H，m)，6.88-6.77(3H，m)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.42(1H，bs)，3.73-3.62(4H，m)，2.39(3H，s)，2.17(3H，s)，1.98-1.89(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.17 minutes，478(M+H)+.
实施例673-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-[(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体85(1.89g，3.55mmol)悬浮在EtOH(76mL)和10％HCl(10mL)中，在40℃下搅拌36小时。在减压下浓缩混合物，将残余物重新溶于DCM/MeOH。加入脱色木炭(0.09g)，将悬液搅拌30分钟，过滤，重新浓缩，得到粗产物(1.58g，99％)。将该粗产物悬浮在EtOH(8mL)中，在室温下搅拌4小时。过滤分离固体，用EtOH洗涤(3×2mL)，在真空中干燥，得到纯的标题化合物(1.49g，94％)。
δH(CDCl3)9.60(1H，s)，7.52-7.63(3H，m)，7.38-7.41(2H，m)，7.16-7.19(1H，d)，6.86-6.98(3H，m)，6.35-6.39(1H，d)，4.36-4.42(2H，m)，3.97-4.03(2H，m)，2.33-2.43(1H，m)，2.25(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.09 min，(M+H)+450.
实施例682-[(4-氨基哌啶-1-基)羰基]-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体86(326mg，0.46mmol)溶于HCl的1，4-二噁烷溶液(4.0N)，在室温N2下搅拌18小时。在真空中浓缩粗产物，用Et2O研制。经过色谱纯化(二氧化硅，含5％MeOH的DCM)，得到标题化合物，为亮橙色固体(175mg，80％)。
δH(DMSO-d6)8.41(1H，s)，7.86(1H，d，J9.6Hz)，7.68-7.59(5H，m)，7.31-7.26(1H，m)，7.00-6.91(2H，m)，6.89-6.53(3H，m)，3.90-3.87(2H，m)，3.10-2.95(1H，m)，2.70-2.66(2H，m)，1.75-1.72(2H，m)，1.20-1.11(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.17 minutes，481(M+H)+.
实施例692-[(3-氨基氮杂环丁烷-1-基)羰基]-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例68的方法从中间体87(386mg，0.70mmol)得到标题化合物，为灰白色固体(303mg，95％)。δH(DMSO-d6)9.29(1H，s)，8.20-7.80(2H，br s)，7.70-7.63(3H，m)，7.57-7.53(2H，m)，7.46-7.40(1H，m)，7.32(1H，d，J9.7Hz)，7.22-7.16(1H，m)，7.12-7.05(1H，m)，6.48(1H，d，J9.7Hz)，4.33-4.25(2H，m)，4.05-3.90(3H，m).LCMS(ES+)RT2.23 minutes，453(M+H)+.
实施例703-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[4-(二甲氨基)哌啶-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将实施例68(111mg，0.23mmol)、低聚甲醛(70mg，0.56mmol)与氰基硼氢化钠(36mg，0.54mmol)的MeOH(10mL)溶液在室温下搅拌18小时。将反应混合物用aq HCl(2N)酸化，搅拌20分钟。将酸性混合物用10％aq.NaOH中和，用DCM萃取。将DCM萃取液干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。粗产物经过色谱纯化(二氧化硅，含2％MeOH的DCM)，得到标题化合物，为灰白色固体(30mg，25％)。
δH(CDCl3)8.00(1H，s)，7.63-7.52(3H，m)，7.42-7.40(2H，m)，7.32(1H，d，J9.7Hz)，7.00-6.90(2H，m)，6.82-6.75(1H，m)，6.48(1H，d，J9.7Hz)，4.42-4.35(2H，m)，2.95-2.80(2H，m)，2.35-2.25(1H，m)，1.90-1.75(2H，m)，1.54(6H，s)，1.40-1.30(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.20 minutes，509(M+H)+.
实施例713-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[3-(二甲氨基)氮杂环丁烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例70的方法从实施例69(168mg，0.37mmol)、低聚甲醛(103mg，0.82mmol)和氰基硼氢化钠(52mg，0.82mmol)得到标题化合物，为灰白色固体(130mg，70％)。
δH(DMSO-d6)11.23(1H，s)，7.71-7.62(3H，m)，7.56-7.54(2H，m)，7.44-7.39(2H，m)，7.18-7.12(1H，m)，7.08-7.04(1H，m)，6.48(1H，d，J9.7Hz)，4.15-3.95(2H，m)，3.85-3.75(2H，m)，3.10-3.00(1H，m)，2.07(6H，s).LCMS(ES+)RT 2.26 minutes，481(M+H)+.
实施例723-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮将中间体35(1.0g，1.77mmol)和(S)-3-二甲氨基吡咯烷(222mg，1.95mmol)溶于DCM，在室温下搅拌18小时。将溶液用aq NaHCO3溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。色谱纯化(60∶40乙醇∶水，反相二氧化硅)得到标题化合物(387mg，44％)。
δH(DMSO-d6)8.82(1H，br s)，7.67-7.59(4H，m)，7.51(2H，dd，J1.78，8.15Hz)，7.36-7.28(1H，m)，7.00-6.91(2H，m)，6.48(1H，d，J9.6Hz)，3.50-3.24(3H，m)，2.98(1H，t，J9.7Hz)，2.50-2.44(1H，m)，2.03(6H，s)，1.97-1.91(1H，m)，1.50(1H，t，J9.7Hz).LCMS(ES+)RT 2.214 minutes，495(M+H)+.
实施例732-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例72的方法从中间体34(1g，1.77mmol)和(S)-3-二甲氨基吡咯烷(222mg，1.94mmol)开始。
δH(DMSO-d6)8.78(1H，s)，7.67-7.56(4H，m)，7.51(2H，dd，J8.2，1.9Hz)，7.00(1H，t，J9.11Hz)，6.83-6.80(1H，m)，6.75-6.70(1H，m)，6.49(1H，d，J9.6Hz)，3.44-3.20(3H，m)，2.97(1H，t，J9.9Hz)，2.42-2.35(1H，m)，2.15(3H，s)，1.99(6H，s)，1.91-1.87(1H，m)，1.47-1.40(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.282 minutes，491(M+H)+.
实施例747-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助实施例62的方法从中间体90(3.0g，5.1mmol)得到标题化合物，为淡黄色固体(1.61g，63％)。δH(CDCl3)7.60-7.57(1H，m)，7.48-7.33(3H，m)，7.19(2H，m)，7.00(1H，dt，J9.0，5.7Hz)，6.87-6.82(1H，m)，6.77-6.73(1H，m)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.43-4.40(1H，m)，3.69-3.52(4H，m)，1.97-1.91(3H，m).LCMS(ES+)RT 3.10 minutes，502(M+H)+.
用于抑制剂测定法的活化人p38α的制备人p38α的纯化按照厂商指导，在杆状病毒-感染的High-FiveTM细胞(Invitrogen)中表达掺入了N-末端(His)6标记的人p38α。在感染后72小时收获细胞，溶解在含有1％(w/v)β-辛基葡糖苷和Complete，EDTA-freeTM蛋白酶抑制剂(Roche Molecular Biochemicals)的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。在4℃下将裂解物在35,000xg下离心30分钟，将上清液上NiNTATM柱(Qiagen)。(在用15mM咪唑的PBS溶液洗涤后)用150mM咪唑的PBS溶液洗脱所结合的蛋白质，直接装上HiTrap QTM柱(APBiotech)。使用20个柱体积的0至1M NaCl梯度洗脱所结合的蛋白质。等量分配含有(His)6-p38的级分，在活化之前贮存在-70℃下。
含有GST-MKK6EE的裂解物的制备通过离心收获表达与N-末端谷胱苷肽-S-转移酶标记融合的人MKK6(GST-MKK6EE)的组成型活化形式的大肠杆菌(BL21 pLysS)，贮存在-70℃下。如下使细胞溶解重新悬浮在1/10培养体积的含有Complete，EDTA-freeTM蛋白酶抑制剂的PBS中，继之以在冰上用超声处理4×15sec。在35,000xg下离心除去细胞碎片，将所得上清液的等分试样贮存在-70℃下。
(His)6-p38的活化在1mM β-甘油磷酸盐、10mM MgCl2和9mM ATP的存在下，将0.45mL纯化(His)6-p38与50μL含有GST-MKK6EE的裂解物在23℃下培育30分钟。借助(His)6-p38的双重磷酸化形式的质谱检测来监测活化程度，所述形式通常占最终(His)6-p38制备物的90％以上。然后将活化的(His)6-p38在PBS中稀释10倍，利用上述方法重新纯化。使用A280，0.1％＝1.2，借助280nm下的UV吸光度测量经过纯化的活化(His)6-p38的浓度，在用于抑制剂测定法之前将制备物的等分试样贮存在-70℃下。
p38抑制测定法对生物素基化髓鞘碱性蛋白(MBP)磷酸化的抑制作用利用DELFIA类格式测量对p38催化的生物素化MBP磷酸化的抑制作用。该测定法是在包含20mM HEPES(pH7.4)、5mM MgCl2和3mM DTT的缓冲液中进行的。就典型的IC50测定而言，在一定浓度范围抑制剂的存在下(DMSO的最终浓度为2％)，在涂有链霉抗生物素的微量滴定平板中，将生物素化MBP(2.5μM)与活化的GST-p38(10nM)和ATP(1μM)一起在室温下培育。15分钟后，加入EDTA(75mM)终止反应。然后将微量滴定平板用Tris缓冲盐水(TBS)洗涤，然后加入100μM抗磷酸MBP抗体(小鼠)以及铕-标记的抗小鼠IgG抗体。在室温下1小时后，将平板再次用TBS洗涤，继之以加入强化溶液(Perkin Elmer Wallac)。在室温下放置另外15分钟后进行荧光测量。
利用log10抑制剂浓度(x-轴)对由没有抑制剂存在的对照样本所产生的荧光的抑制百分比(y-轴)作图，由此测定IC50值。
人外周血单核细胞的纯化从正常的健康志愿者分离外周血单核细胞(PBMC)。利用肝素化真空容器(Becton Dickinson)借助静脉穿刺取全血，按1∶4稀释在RPMI1640(Gibco，UK)中，历经Ficoll-paque梯度(Amersham-PharmaciaBiotech，UK)在400g下离心35分钟。除去界面处的细胞，洗涤一次，继之以低速旋转(250g)，以除去血小板。然后将细胞重新悬浮在含有10％FCS、青霉素100单位/mL、链霉素50μg/mL和谷氨酰胺2mM的DMEM(Gibco，UK)中。
抑制剂的稀释抑制剂储备液(20mM)是保存在DMSO中的冷冻溶液(-20℃)。从250倍浓度的储备液，在DMSO中进行抑制剂的系列稀释。将抑制剂按1∶250稀释在组织培养基中，预温热至37℃，转移至含有PBMC的平板上。在加入LPS之前，将PBMC和抑制剂一起培育30分钟。用在全血测定法中的抑制剂是按照不同的方案制备的。使用相同的储备溶液，在DMSO中进行抑制剂的系列稀释。然后将抑制剂按1∶500直接稀释在1L全血中。在加入LPS之前，将抑制剂与全血培育30分钟。
PBMC的LPS刺激将PBMC按2×105细胞/孔的密度重新悬浮在平底96孔组织培养平板中。加入抑制剂后，将细胞用最佳剂量的LPS(大肠杆菌菌株B5055，Sigma，最终浓度1μg/mL)刺激，在37℃5％CO2/95％空气中培育18小时。借助夹心ELISA(BioSource #CHC1751)测量无细胞上清液中的TNF-α水平。
全血的LPS刺激利用肝素化真空容器(Becton Dickinson)，借助静脉穿刺取全血，将500μL血液等量分配在24孔组织培养平板的每孔中。加入抑制剂后，将细胞用最佳剂量的LPS(大肠杆菌菌株B5055，Sigma，最终浓度1μg/mL)刺激，在37℃无CO2下培育18小时。借助夹心ELISA(BioSource #CHC1751)测量无细胞上清液的TNF-α水平。
大鼠LPS诱导的TNF释放将雄性Lewis大鼠(180-200g)用Isofluor麻醉，i.v.注射LPS*在0.5mL无菌盐水中的溶液。90分钟后，将血液收集在EDTA试管中，用于制备血浆样本。在用商业化ELISA测定TNFα之前，将血浆贮存在-70℃下。
大鼠CIA将雌性Lewis大鼠(180-200g)用Isofluor麻醉，用2×100μL乳剂在尾巴基部i.d.免疫接种，所述乳剂含有4mg/mL牛胶原II在0.01M乙酸中的溶液和Freund不完全佐剂，二者比例为1∶1。形成多关节炎，开始于致敏化之后约13天。该疾病主要限于踝部，借助器官充满度测量法进行量化。结果以爪子体积随时间的变化表示。
在上述p38抑制剂测定法中，本发明化合物具有约1μM和更低的IC50值。本发明化合物显然是p38激酶、尤其是p38α激酶的有力抑制剂。
权利要求
1.式(1)化合物 其中Y是连接基团-C(O)-或-S(O)2-；n是零或整数1；m是整数1、2、3或4；p是整数1、2、3或4；Rd是-OH、-(Alk2)OH(其中Alk2是直链或支链C1-4亚烷基链)、-OR1(其中R1是直链或支链C1-6烷基)、-(Al k2)OR1、-NR2R3(其中R2和R3可以相同或不同，各自独立地是氢原子或者直链或支链C1-6烷基)、-(Alk2)NR2R3或者直链或支链C1-6烷基；Alk1是直链或支链C1-4亚烷基链；Cy1是可选被取代的环脂族、芳族或杂芳族基团；Ar是可选被取代的芳族或杂芳族基团；及其盐、溶剂化物、水合物和N-氧化物。
2.如权利要求1所要求保护的化合物，其中Rd是-OH、-(Alk2)OH、-(Alk2)OR1、-NR2R3或-(Alk2)NR2R3，其中Alk2、R1、R2和R3是如权利要求1所定义的。
3.如权利要求1或权利要求2所要求保护的化合物，其中Alk2是-CH2-或-C(CH3)2-。
4.如在先权利要求任意一项所要求保护的化合物，其中R1是甲基。
5.如在先权利要求任意一项所要求保护的化合物，其中R2是氢或甲基。
6.如在先权利要求任意一项所要求保护的化合物，其中R3是氢或甲基。
7.如在先权利要求任意一项所要求保护的化合物，其中Cy1是苯基、氟苯基、氯苯基、甲基苯基或环丙基。
8.如在先权利要求任意一项所要求保护的化合物，其中Ar是苯基、二氟苯基、(氯)(氟)苯基、(氟)(甲基)苯基、氯苯基、氰基苯基或甲基苯基。
9.如本文具体公开在任意一个实施例中的、如权利要求1所要求保护的化合物。
10.药物组合物，其中包含如权利要求1所定义的式(1)化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或N-氧化物，以及药学上可接受的载体。
11.如权利要求1所定义的式(1)化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或N-氧化物制造药物的用途，该药物用于治疗和/或预防适用p38 MAP激酶抑制剂的障碍。
12.治疗和/或预防适用p38MAP激酶抑制剂的障碍的方法，包括对需要这类治疗的患者给予如权利要求1所定义的式(1)化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或N-氧化物。
全文摘要
一系列噻吩并[2，3－b]吡啶－6(7H)－酮衍生物，在2－位被羰基－或磺酰基－连接的吡咯烷－1－基或相关部分取代，是p38MAP激酶的抑制剂，因此可用在医药中，例如用于治疗和/或预防免疫或炎性障碍。
文档编号A61P29/00GK1809575SQ200480017320
公开日2006年7月26日 申请日期2004年6月18日 优先权日2003年6月20日
发明者D·C·布鲁金斯, J·M·戴维斯, B·J·兰厄姆 申请人:塞尔技术R&D有限公司