专利名称：一种治疗骨疾病的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗骨疾病的药物组合物及其制备方法，尤其是一种注射制剂及其制备方法。
背景技术：
临床上常见的骨疾病，如风湿性关节炎、类风湿性关节炎、和退行性骨关节炎等各种关节炎、强直性脊柱炎、颈椎病、腰椎间盘突出以及骨质疏松症等，是困扰患者的常见性疾病，骨疾病不容易治疗，而且容易复发，给患者生理和心理上造成很大负担。
临床上对于风湿性关节炎和类风湿性关节炎导致的关节疼痛，一般采用止痛药、非甾体类抗炎药或激素类药物治疗。这些药物能真正起到改善病情，控制疾病发展的作用，但是有明显的副作用，不良反应事件时有发生，患者耐受性差，且停药后病情易复发。
在《国家基本药物制剂品种目录》中，解热止痛、抗炎、抗风湿化学药品类别中，注射剂剂型少，其中只有对乙酰氨基酚和布洛芬两种注射剂剂型，但是长期使用对乙酰氨基酚对肝、肾均有损害，尤其是肾功能低下者，可能出现肾绞痛或急性肾功能衰竭(少尿，尿毒症)。另外还可发生高铁血红蛋白血症，临床表现主要是止痛，对抗炎抗风湿几乎没有疗效。布洛芬在不良反应考察中发现对肠胃有刺激性，一般表现为肠胃不适、皮疹、头痛、耳鸣，可使既往有过敏史的人支气管痉挛加重，各种皮疹或其他皮肤反应的发生率较高。而其他药品大多是单一的化学合成药品和单一中药提取物，在剂型上多为固体制剂，长期服用对胃肠有刺激性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗骨疾病的药物组合物，尤其是治疗关节炎的药物组合物及其制备方法。该药物优选注射制剂，对患者胃肠没有刺激性，且没有其它副作用。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的。
本发明提出的治疗骨疾病的药物组合物包括以下成分猪四肢骨提取液和甜瓜籽(Cucumis melo L.)提取液。
优选包括将40-60重量份猪四肢骨提取所得的提取液，将10-30重量份甜瓜籽提取所得的提取液。
更优选包括将50重量份猪四肢骨的提取液，20重量份甜瓜籽的提取液。
本发明还提供了上述药物组合物注射液的制备方法，该方法包括以下步骤(1)将清洁的猪四肢骨用水煎煮进行提取，得到猪四肢骨提取液；(2)将甜瓜的干燥成熟的种子用水煎煮进行提取，优选将种子破碎后用水煎煮提取，得到甜瓜籽提取液；(3)将两种提取液按上述重量配比混合，用本领域的常规方法制成注射液。
其中，步骤(1)所得的猪四肢骨提取液还可以经过酸、碱或醇处理，使提取液更纯净；步骤(2)所得的甜瓜籽提取液还可以经过醇或水洗，使该提取液更纯净。
制备该药物组合物注射液的方法优选包括(1)将清洁的猪四肢骨分别用重量为其2倍的水煎煮进行提取，提取2次，每次1小时，合并所得猪四肢骨提取液，然后将提取液体积浓缩至1/3，依次用盐酸、氢氧化钠溶液和乙醇沉淀处理，回收乙醇，然后过滤，滤液备用；(2)将甜瓜的干燥成熟的种子破碎后，依次用重量为其8、6、4倍的水煎煮进行提取，每次50分钟，合并提取液，将提取液体积浓缩至1/3，过滤，将滤液用乙醇洗并回收乙醇，水洗，再次乙醇洗并回收乙醇，水洗，过滤，滤液备用；(3)将两种滤液混合，加热微沸然后冷却，过滤，超滤，加入注射用水，加入活性炭，过滤，调溶液的pH为6.5～7.0之间，取样检测多肽含量，检验，罐装，灭菌，灯检，包装。
本发明所提出的药物组合物的药理作用如下
猪四肢骨提取液中含有骨多肽类骨代谢因子，可有效促进机体内影响骨形成和吸收的骨源性生长因子的合成，包括骨形态发生蛋白(BMPs)、β-转化生长因子(TGF-β)以及成纤维细胞生长因子(FGF)等，从而具有多种生物活性，可以促进细胞的有丝分裂、分化作用、趋化作用和溶骨活性等。其中BMPs是一组酸性低分子量糖蛋白，作为一种高效骨诱导物质，BMPs是间充质细胞向骨系细胞分化的最初信号分子，能诱导血管周围游动的问充质细胞转化为不可逆性的骨系细胞，即软骨细胞和成骨细胞，从而促进骨痂形成，又到新骨形成，促进骨折修复；此外，BMPs还可调节细胞外基质成分的改变，并通过与TGF-β和FGF相互之间的协调作用更好地诱导新骨形成，使骨组织更成熟。TGF-β则是一组具有多种功能的蛋白多肽，与多种因子如细胞外基质和其他分化调节生长因子一起协同参与对细胞分化的调节；TGF-β可促进细胞外基质合成，可以直接刺进成纤维细胞外基质的合成，并对其新合成的基质降解有显著抑制作用；对于成骨细胞，TGF-β可促进其合成I型胶原、骨粘连素和骨桥蛋白；同时，TGF-β对淋巴细胞和巨噬细胞的作用表明，它既能缓解炎性反应的破坏性，又能协助巨噬细胞来源的某些细胞因子在组织修复中发挥作用。FGF是一组肝素粘合多肽，可刺激细胞的趋向移动、增殖和分化，增加合成胶原细胞的数量，促进骨胶原蛋白及非胶原蛋白的合成，增加骨钙素的合成。
甜瓜籽提取液能降低骨折局部毛细血管通透性，减少炎性渗出，促进局部血运障碍的恢复；同时还能降低全血粘度及细胞聚集程度，改善骨痂局部的血液循环，为骨细胞提供一个良好的供血环境；另外还能抑制前列腺素的释放，达到止痛效果；在促进骨折早期愈合中，甜瓜籽提取液与多肽类骨代谢因子具有协同作用，促进骨源性生长因子的合成。
本发明的药物组合物中还含有多种游离氨基酸，为骨细胞合成BMPs、TGF-β以及FGF等骨源性生长因子提供原料，促进骨源性生长因子的合成。有机钙磷离子可参与该磷代谢，维持骨容量。
使用方法以每毫升本发明药物的注射液含有不低于5.0mg。多肽量计算，肌肉注射每天2次，每次2-5毫升；静脉注射每天1次，每次10-20毫升，加入到250毫升生理盐水或葡萄糖注射液中使用；20-30日为一个疗程。
本发明的药物组合物可以用于治疗对常见骨疾病具有良好的治疗效果，如增生性骨关节疾病，风湿、类风湿性关节炎，骨关节炎，腰腿疼痛，并能促进骨折的早期愈合、创伤恢复等；已经通过临床试验证明该药物组合物的疗效。
本发明药物无不良反应，在急性和慢急性试验中血液及生化指标未见异常，无毒副作用。经临床观察治疗前后病人血、尿、便常规检查及肝肾功能检查均无异常变化，临床试验中亦未发现过敏反应及毒副反应，说明本品疗效确切，无毒性，临床用药安全。本发明药物是复方制剂，在临床治疗过程单一使用此药品可以达到良好的效果，无不良反应，副作用少，不需要其他药物辅助治疗，减少了合并用药。
以下通过本发明药物的临床试验来进一步说明该药物的良好效果。
从临床应用情况来看，本药注射剂对类风湿性关节炎和退行性骨关节炎等的治疗效果明显，总有效率达92.9％和94.87％。
1.本发明药物注射液联合布洛芬治疗类风湿性关节炎和退行性骨关节炎的临床研究采用随机对照试验，选用布洛芬作为基础用药。试验组共94例，其中类风湿性关节炎55例，退行性骨关节炎39例。对照组共58例，其中类风湿性关节炎37例，退行性骨关节炎21例。试验组与对照组从年龄、性别、病程、关节功能分级等均相匹配，增加了资料的可比性。
试验结果显示试验组和对照组治疗类风湿性关节炎和退行性骨关节炎均有效，但加用本发明药物注射液的疗效明显优于布洛芬，治疗类风湿性关节炎总有效率分别为92.9％和86.49％，退行性骨关节炎总有效率分别为94.87％和76.19％。试验组和对照组的不良反应发生率分别为10.85％和19.66％。尤其在关节压痛数、关节肿胀数、握力增加、15m步行时间缩短、血沉及C反应蛋白有效率改善等方面均有明显疗效。而在两组间各项指标改善的比较中关节压痛数、握力的增加两方面加用本发明药物注射液更优于布洛芬单独使用(P＜0.01)，这与本发明药物注射液改善血液粘度、减轻关节渗出，镇痛作用直接有关，使关节疼痛缓解，关节功能也会有所改善。
2.本发明药物注射液治疗类风湿性关节炎和强直性脊柱炎50例临床观察类风湿性关节炎和强直性脊柱炎均属于常见病、多发病。此病缠绵难愈，严重者导致终身残疾，严重危害人民的身体健康。试验将患者治疗前后的晨僵时间，整体功能，化验室检查及反映受累关节局部症状的疼痛、压痛、肿胀和关节活动障碍等变化作为疗效观察指标。试验结果显示，本发明药物注射液有以下优点①显效快，多数患者在服药后7～10d即可显现出治疗效果；②有效率高，本组病例显示该药有效率为88％，临床控制及显效率为48％，优于西药二、三线抗风湿药及某些中成药；③不良反应少，本组50例患者，短时间内用药无不良反应发生；④用药范围广泛，由于本发明药物注射液同时具有抗炎、镇痛及免疫抑制及调节等作用，该药可广泛用于类风湿性关节炎和强直性脊柱炎早、中、晚各期患者，且有一定病因治疗作用。
3.本发明药物注射液与雷公藤多甙片治疗活动期风湿性关节炎的临床研究风湿性关节炎是一种以关节症状为主的自身免疫性疾病，具有反复发作、致残率高的特点，属常见而难治性疾病。
本试验通过153例(随机分为本发明药物注射液治疗组92例和雷公藤治疗组61例)活动期风湿性关节炎患者临床观察，结果显示本发明药物注射液治疗组临床治愈显效率为80.4％，总有效率91.3％，主要症状及体征均有显著性改善；红外线热图像检测显示患者双手指关节表面温度显著下降；炎性标志物检测显示血沉、C反应蛋白均有显著性下降；血液流变学检测显示各项指标均有显著性降低。本发明药物注射液各疗效指标均明显优于雷公藤组(临床治愈显效率为68.5％，总有效率为76.2％)。结论骨瓜提取物注射液对风湿性关节炎活动期具有显著的治疗作用。试验结果揭示本发明药物注射液能有效地改善患者的症状、体征及ESR、CRP、红外线热图像、血流变各项检测指标，消炎镇痛，抑制滑膜炎性病变，达到控制病情活动、缓解临床症状、改善关节功能、提高生活质量的目的，是治疗活动期RA较为理想的药物。
4.本发明药物注射液治疗类风湿性关节炎近年来，国际抗风湿联盟对RA的治疗区分为改善症状的抗风湿治疗(SMARDS)及控制病情的抗风湿治疗(DCART)两大类。DCART是指某治疗方法能有效作用于关节滑膜，阻止骨质侵袭，改善关节功能。至今尚未发现一种药物真正属于DCART，因为目前的药物最终未能有效阻止骨质侵袭。阻止骨质侵袭是RA的治疗重点。
使用本发明药物注射液治疗后，通过治疗前后的X线片征象对比，骨质疏松改善率69.6％，骨质侵蚀改善率45.5％，关节狭窄改善率18.9％。显示出本药在阻止骨质侵袭方面有肯定的作用。
5.本发明药物注射液治疗椎动脉型颈椎病本发明药物注射液辅助颈椎牵引治疗椎动脉型颈椎病53例，男23例，女30例，年龄28岁～56岁，平均年龄42岁。病程3个月以内42例，3个月～1年2个月11例，合并高血压、动脉粥样硬化8例。旋颈诱发试验阳性49例，眩晕伴一侧头痛41例，耳鸣伴视力减退12例，恶心、呕吐伴上肢肌张力减退5例，因剧烈眩晕而猝倒2例。患侧锁骨上听见椎动脉血流受阻杂音6例。放射线检查C2～C7(第2到第7颈椎骨)均有程度不同的颈曲变直、椎间隙变窄、椎体后缘骨质增生，关节突关节旋转移位、钩椎关节增生、横突孔矢状径及横径变窄。本组53例痊愈34例，显效12例，进步6例，无效1例。总有效率98.2％。本发明药物注射液的疗效不仅与其改善骨关节的骨质增生、减少炎症渗出、软组织水肿有关，而且其中甜瓜籽提取物改善血液循环，降低血黏度，对椎动脉压迫缺血造成的眩晕、耳鸣有良好的改善。
6.本发明药物注射液治疗腰椎间盘突出80例腰椎间盘突出患者，男58例，女22例；年龄19～65岁；病程7天～10年。CT结果腰椎间盘突出71例，膨出9例；硬膜囊、神经根受压70例；L4，5(第四腰椎到第五腰椎)突出56例，L5S1(第五腰椎到第一骶椎)突出22例，L3，4突出2例(第三腰椎到第四腰椎)；其中两个椎间盘均见突出17例，三个椎间盘突出或/和膨出10例。既往有手术史5例。治疗后按腰椎间盘突出症新药指导原则中的疗效标准痊愈45例，显效24例，有效8例，无效2例。
7.本发明药物注射液治疗绝经后妇女骨质疏松症选择45岁以上，绝经1～10年的骨质疏松患者14例，其腰椎或髋骨的骨密度低于正常绝经前妇女骨密度平均值两个标准差。所有患者在用药前及用药6周后各进行1次肝肾功能，血钙、磷、碱性磷酸酶，血沉，血常规，尿钙、磷、Ca/Cr检查。采用双能X线吸收法测量腰椎及右髋骨的骨密度。有效骨密度维持不变或上升；无效患者的骨密度持续下降。结果显示14例患者中有效12例。除1例患者自诉用药2周出现面部潮红外无其他不适。结论本发明药物注射液是一种较好的用于治疗绝经后骨质疏松症的药物，可有效维持、增加骨密度，耐受性好，副作用少。
具体实施例方式
实施例1将50kg洁净猪四肢骨分别用100升纯净水各提取1小时，共提取两次，合并提取液，将提取液体积浓缩至1/3，依次用稀盐酸溶液调节PH值到3.5±0.2，10％氢氧化钠溶液调整PH到9.0±0.2，80％乙醇洗涤并沉淀，回收乙醇，然后过滤，滤液备用。
将20kg干燥的甜瓜籽洗净，破碎，依次用160、120、80升纯净水提取3次，每次50分钟，合并提取液，将提取液体积浓缩至1/3，过滤，将滤液用乙醇洗并回收乙醇，水洗，再次乙醇洗并回收乙醇，水洗，过滤，滤液备用。
将两种滤液混合，加热微沸然后冷却，过滤，超滤，加入注射用水22500mL，加入0.2％的活性炭45g，过滤，调溶液的pH为6.5～7.0之间，取样检测多肽含量，按6mg/ml进行稀配搅拌，进行半成品检验，罐装，灭菌，灯检，包装。
规格每支注射液体积为5mL，含多肽30mg/支。
实施例2取60kg洁净猪四肢骨和30kg干燥的甜瓜籽，按实施例1的方法制备注射液。其中，酸为稀盐酸，调节PH值到3.5±0.2；碱为10％氢氧化钠，调整PH到9.0±0.2；用75％乙醇乙醇洗涤并沉淀，回收乙醇，然后过滤，滤液备用；加入注射用水29100mL，加入0.2％的活性炭58g，过滤，调溶液的pH加为6.5～7.0之间，取样检测多肽含量，按6mg/ml进行稀配搅拌，进行半成品检验，灌装，灭菌，灯检，包装。每支注射液体积为2mL，含多肽12mg/支。
实施例3取40kg洁净猪四肢骨和10kg干燥的甜瓜籽，按实施例1的方法制备注射液。其中，酸为稀盐酸，调节PH值到3.5±0.2；碱为10％氢氧化钠，调整PH到9.0±0.2；用85％乙醇洗涤并沉淀，回收乙醇，然后过滤，滤液备用；洗甜瓜籽提取液的乙醇浓度分别为[(含醇量达70％)和(含醇量达80％)]；加入注射用水16200mL，加入0.2％的活性炭32g，过滤，调溶液的pH为多少6.5～7.0之间，取样检测多肽含量，按6mg/ml进行稀配搅拌，进行半成品检验，灌装，灭菌，灯检，包装。每支注射液体积为5mL，含多肽30mg/支。
权利要求
1.一种治疗骨疾病的药物组合物，该药物组合物包括以下成分猪四肢骨提取液和甜瓜籽提取液。
2.如权利要求1的治疗骨疾病的药物组合物，其特征在于，各成分的重量配比为将40-60重量份猪四肢骨提取所得的提取液，将10-30重量份甜瓜籽提取所得的提取液。
3.如权利要求1的治疗骨疾病的药物组合物，其特征在于，各成分的重量配比为将50重量份猪四肢骨提取所得的提取液，将20重量份甜瓜籽提取所得的提取液。
4.如权利要求1的治疗骨疾病的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的剂型为注射液。
5.一种制备权利要求4的治疗骨疾病药物组合物注射液的方法，该方法包括(1)将清洁的猪四肢骨进行提取，得到猪四肢骨提取液；(2)将甜瓜的干燥成熟的种子进行提取，得到甜瓜籽提取液；(3)将两种提取液混合，用本领域的常规方法制成注射液。
6.如权利要求5的制备治疗骨疾病的药物组合物注射液的方法，其特征在于，步骤(1)所得的猪四肢骨提取液还可以经过酸、碱或醇处理。
7.如权利要求5的制备治疗骨疾病的药物组合物注射液的方法，其特征在于，步骤(2)所得的甜瓜籽提取液还可以经过醇或水洗。
8.如权利要求1的药物组合物在制备治疗骨科疾病的药物中的应用。
9.如权利要求1的药物组合物在制备治疗增生性骨关节、骨关节炎疾病的药物中的应用。
10.如权利要求1的药物组合物在制备治疗风湿、类风湿性关节炎、促进骨折的早期愈合、治疗创伤和恢复的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种治疗骨科疾病的药物组合物，尤其是该药物组合物的注射液及其制备方法。该药物包括猪四肢骨提取液和甜瓜籽提取液。其注射液的制备方法包括(1)将清洁的猪四肢骨进行提取，得到猪四肢骨提取液；(2)将甜瓜的干燥成熟的种子进行提取，得到甜瓜籽提取液；(3)将两种提取液混合，用本领域的常规方法制成注射液。该药物组合物对于常见的骨疾病，如增生性骨关节疾病，风湿、类风湿性关节炎，骨关节炎，腰腿疼痛等有很好疗效，并能促进骨折的早期愈合、创伤恢复等。
文档编号A61K35/32GK1806816SQ20051000239
公开日2006年7月26日 申请日期2005年1月19日 优先权日2005年1月19日
发明者高翔 申请人:哈尔滨圣泰制药股份有限公司