专利名称：一种抗肿瘤的中药冻干粉针剂及其制备方法
技术领域：
本发明属中药制药技术领域，具体涉及一种抗肿瘤的中药冻干粉针剂及其制备方法。
背景技术：
肿瘤病严重威胁人类的身体健康，不仅是一个巨大的医疗问题，也是一个巨大的社会问题，由于肿瘤病发病率高且来势凶猛所以一般地说没有特别有效的治疗药物和方法；现有技术中用西药结合放、化疗对此类疾病进行治疗，由于西药的副作用特别大，所以患者身体难于承受，恶性肿瘤的一个特点是肿瘤细胞容易扩散，手术后容易复发，肿瘤之所以难治，与此不无关系。目前应用中医药治疗肿瘤方面已经取得了很大的进展。
得力生注射液是人参、黄芪、斑蝥、蟾酥的全成份提取液，具有益气扶正，消癥散结功效，用于中晚期原发性肝癌气虚瘀滞证，症见右肋腹积块，疼痛不移，腹胀食少，倦怠乏力等。得力生注射液由毒性中药蟾酥、斑蝥和扶正补益药人参、黄芪相须配伍，使抑制杀灭癌细胞和提高人体免疫力功能的功效并存，降低了抗癌中药的毒性，提高了抗癌的疗效。该药具有直接抑制杀伤癌细胞、促进癌细胞再分化、协同化疗增效减毒以及止痛抗应激等药理作用。在给药上采用目前国际医学界流行的锁骨下静脉给药的途径，既提高了药物的生物利用度，又减轻了病人的用药痛苦，使临床用药更加安全可靠。得力生注射液借助组方的优势，以毒攻毒，攻补兼施，含有人参、黄茂等益气固本之品，不但能减轻肿瘤病人因放、化疗所造成的不良反应，而且，能够调整机体免疫功能，固本培元，调动人体自身的防御系统。专利(ZL94101456)公开了一种含有上述药味的中药注射剂及其制备方法。
但是由于该注射液含有斑蝥、蟾酥两味毒性较强的药，两者所含的有效成分同时又是毒性成分，因而使用时不良反应多，除了较强的皮肤血管刺激性外，对肝肾和泌尿系统都也有影响，用药不当甚至会引起死亡；该注射液制备工艺黄芪和斑蝥采用石硫醇法提取精制，由于石硫醇法处理的药液无机盐含量比较高，制成的注射液往往产生疼痛，因而也加大了注射液对肌肉和血管的刺激性。另由于斑蝥素挥发性较强，蟾蜍毒素稳定性差，这些因素使得制剂质量也不易控制；同时由于是注射液，它的携带、使用均不方便，容易受到污染，药品的稳定性比较差、易出现沉淀，同时运输不方便，配制的方法也比较复杂，这些都限制了其在临床上的进一步广泛应用。
发明内容
基于上述原因，为了弥补上述制剂的不足，本发明研究人员经反复研究，对提取工艺进行了改变，确定了本发明的制备方法，并将蟾酥和斑蝥提取物进行包合，大大降低了制剂的毒性。增加了斑蝥和蟾酥提取物的稳定性，人参、黄芪提取物和斑蝥、蟾酥提取物包合物与适宜辅料制备成冻干粉针剂。
本发明的目的是公开一种疗效好、毒性小、稳定性好、方便使用的抗肿瘤的中药冻干粉针制剂。
本发明的另一个目的是提供上述冻干粉针制剂的制备方法。
本发明通过以下技术方案实现。
一、制备方法(1)原料药重量份组成人参50份、黄芪150份、蟾酥1份、斑蝥5份。
(2)取人参、黄芪，加6倍量30-50％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为2-3小时，乙醇回流液减压回收乙醇并浓缩成浸膏，加4-8水稀释，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A；取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并得人参、黄芪提取物。
(3)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物。
(4)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10-25的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物。
(5)制剂处方人参、黄芪提取物35-45重量份， 斑蝥、蟾酥提取物包合物8-12重量份，药用辅料47-102重量份。
(6)取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和药用辅料，加注射用水溶解，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
本发明根据药物有效成分的性质，改变了原制剂的提取方法，使得提取的有效成分更全面，纯度更高，并对黄芪、斑蝥的石硫醇的纯化方法进行了改变，使提取物中无机盐含量减少，降低了制剂的刺激性。
羟丙基-β-环糊精水溶性、稳定性和安全性都比较好，本发明斑蝥、蟾酥提取物用羟丙基-β-环糊精包合，包合率可以达到90％，包合效率高，用本发明方法将斑蝥、蟾酥提取物包合后，不仅可以增加斑蝥、蟾酥提取物的稳定性，且显著降低了斑蝥、蟾酥提取物的刺激性和毒副作用，使临床用药安全性大大提高。药理实验表明，本发明的中药复方冻干粉针剂具有更好的药理作用。
二、斑蝥、蟾酥提取物包合工艺的优选为了进一步筛选本发明羟丙基-β-环糊精包合的最佳用量，根据上述试验用饱和水溶液法以下述试验设计对包合工艺最佳用量进行了进一步确定，分别测定包合率和斑蝥、蟾酥提取物利用率，结果见表1。
表1 不同羟丙基-β-环糊精用量包合效果比较
由以上试验结果可知，羟丙基-β-环糊精包合斑蝥、蟾酥提取物，具有很强的选择性，客体的投入量对包合率有较大的影响，其中斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精比例为1∶10时比1∶8时包合率显著提高，继续增加比例至1∶25时，包合率都在85％以上，且比较稳定，而羟丙基-β-环糊精比例增加至1∶30后包合率反而显著降低，因此说明本发明斑蝥、蟾酥提取物用羟丙基-β-环糊精包合时的最佳用量为1∶10至1∶25，尤其是1∶10-1∶15。
三、稳定性比较实验药物本发明冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；市售得力生注射液(北京凯环制药厂)。
实验方法采用加速实验方法进行稳定性实验，将市售得力生注射液和本发明冻干粉针剂放置在室温37℃，相对湿度为75％的条件保存，由于制剂中所含药物斑蝥素具有挥发性、稳定性相对较差，因此以斑蝥素的含量为指标对制剂的稳定性进行考察进行了测定。实验结果见表2。
表2 各组制剂的含量变化(mg/支)
结论通过上述稳定性实验我们可以观察到本发明冻干粉针剂的斑蝥素含量在6个月内基本没有变化较小，而得力生注射液的斑蝥素含量稍有下降，充分说明本发明冻干粉针剂稳定性更好。
三、药理毒理实施例试药与动物得力生注射液(北京凯环制药厂)；本发明冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供，按本发明制备方法制备)；昆明种小鼠，体重18-22g，由上海实验动物室提供；小鼠肉瘤S180、小鼠腹水型肝癌HepA小鼠移植性肝癌H22等瘤株，由中科院上海药物研究所引进；1.对小鼠S180肉瘤的影响实验方法取健康、肿瘤生长旺盛的肉瘤S180荷瘤小鼠，处死后取出瘤块，在匀浆器中加入生理盐水，制成肿瘤匀浆液，再以生理盐水1∶3稀释，然后取0.2ml注入小鼠左腋下皮下，24小时称重，取实验药物，注射给药剂量为5g生药/kg，每日小鼠尾静脉给药一次，对照组尾静脉给药注射0.2ml生理盐水，连续给药10天。停药次日处死小鼠，称体重并小心剥离皮下瘤块，于EM50电子天平称取瘤重。结果见表3。
表3 对小鼠肉瘤S180的生长抑制作用
注与生理盐水组比较**P＜0.01，与阳性对照组比较ΔP＜0.052.对移植性肝癌H22的抑瘤作用无菌抽取接种后第7d的H22荷瘤小鼠腹水，加4倍量生理盐水混匀，立即接种于小鼠右前肢腋窝处皮下，每只接种0.2ml，接种后24h随机分组，尾静脉注射给药，给药剂量同上，每日给药1次，连续给药10d，于末次给药后24h脱颈处死小鼠，剥取肿瘤称重，按照公式(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)×100％/对照组瘤重，求出抑瘤率，所用小鼠均为雄性。结果见表4。
表4 对移植性肝癌H22的抑瘤作用
注与生理盐水组比较**P＜0.01，与阳性对照组比较ΔP＜0.053.对小鼠腹水型肝癌HepA的影响无菌抽取HepA腹水，以生理盐水1∶2倍稀释，每鼠腹腔接种0.2ml，24h后分组称体重并给药，分组和给药剂量同前，连续10d，以后观察小鼠的死亡时间(以天计算)，结果用平均存活天数和生命延长率表示。试验结果见表5。
表5 对移植性肝癌H22的抑瘤作用
注*p＜0.05，**p＜0.01结论由上述实验结果表明本发明冻干粉针剂具有比得力生注射液更显著的抗肿瘤作用。
4.长期毒性试验取健康大鼠60只(wistar种)，分得力生注射液组、本发明冻干粉针剂组和空白对照组3组，每组20只，雌雄各半，每天尾静脉给药一次，给药7天后停一天，继续给药，连续给药7周，对照组给予生理盐水，观察给药前期、中期、后期、停药15天后的外观行为、活动、毛皮、食量、分辩等变化，并进行血常规化验及肝、肾功能检查，记录心电图、每隔10天称重，调整给药剂量，各组实验大鼠分批处死，第一批停药后2天处死一半，其余停药后15天处死，处死后取心肝脾胃肺肾肾上腺淋巴结胰胸腺和睾丸或子宫、卵巢等器官，并常规石蜡切片，HE染色的病理切片进行光镜检查，结果表明，本发明冻干粉针剂组血液生化指标、肝肾功能及各器官组织切片与对照组比较，均属正常范围，未见明显中毒病变，而得力生注射液组与对照组比较，其中3只小鼠肝肾组织有明显病变。
四、刺激性试验血管刺激性试验取家兔8只，随机均分2组，每组4只，分别于左耳把家兔置于固定器中，且头用兔头固定仪固定，耳缘静脉滴注得力生注射液和本发明冻干粉，滴注速度为20滴/min，每天上午滴注1次(相当于60kg人1次静滴量的3倍)，连续1周。观察耳缘静脉反应，每日观察注射部位血管有无发红、水肿、周围有无渗血，触摸血管有无变硬现象，左右耳比较观察。于末次给药后24h，将动物处死，取下左耳，进行组织切片检查，切片部位为进针部位的向心端，距进针部位1-4cm，分1-2.5cm和2.5-4cm两段取样。
观察指标及评分标准观察方法包括肉眼观察和显微镜下病理观察。观察给药血管及其周围组织的变化，显微镜下观察耳缘静脉有无血栓形成、内皮损伤及血管周围组织的病理变化情况。对各项指标评分。①血管变化。肉眼观察无明显充血记0分，轻度充血发红、纹路清晰记1分，充血发红、纹路不清记2分，重度充血、呈紫红色记3分；显微镜观察血管内皮及血管壁完整记0分，有内皮损伤记1分，有血栓栓塞记2分，血管破裂记3分。②血管周围组织变化。肉眼观察无明显水肿记0分，轻微水肿记1分，明显水肿记2分，严重水肿记3分；显微镜观察周围组织正常记0分，水肿记1分，出血记2分，有炎症细胞浸润记3分。将每组4只家兔各项观察指标得分累加，计算各组平均得分值。
表6 刺激性试验结果
由以上实验结果可知本发明冻干粉针剂与得力生注射液比较刺激性具有明显改善。
五、制备实施例实施例1(1)原料药组成人参100g、黄芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人参、黄芪，加6倍50％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为2小时，乙醇回流液减压回收乙醇并浓缩，浓缩液加4倍量水稀释，搅匀，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A。
(3)取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并，得人参、黄芪提取物38g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.8g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8.2g。
(6)制剂处方人参、黄芪提取物38g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8.2g，甘露醇53.8g。
(7)取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和甘露醇，加注射用水溶解，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
实施例2(1)原料药组成人参100g、黄芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人参、黄芪，加6倍量40％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为2.5小时，乙醇回流液减压回收乙醇并浓缩，浓缩液加6倍量水稀释，搅匀，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A。
(3)取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并，得人参、黄芪提取物39.5。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.78g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精＝1∶12的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8.5g。
(6)制剂处方人参、黄芪提取物39.5g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8.5g，乳糖52g。
(7)取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和乳糖，加注射用水溶解，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
实施例3(1)原料药组成人参100g、黄芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人参、黄芪，加6倍30％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为3小时，乙醇回流液减压回收乙醇并浓缩，浓缩液加8倍量水稀释，搅匀，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A。
(3)取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并，得人参、黄芪提取物35g。
(4)称取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.82g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精＝1∶15的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物12g。
(6)制剂处方人参、黄芪提取物35g，斑蝥、蟾酥提取物包合物12g，右旋糖酐53g。
(7)取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和右旋糖酐，加注射用水溶解，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
实施例4(1)原料药组成人参100g、黄芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人参、黄芪，加6倍量50％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为2-小时，乙醇回流液减压回收乙醇并浓缩，浓缩液加4倍量水稀释，搅匀，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A。
(3)取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并，得人参、黄芪提取物45g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.75g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8.0g；(6)制剂处方人参、黄芪提取物45g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8.0g，葡聚糖47g。
(7)取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和葡聚糖，加注射用水溶解，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
实施例5(1)原料药组成人参100g、黄芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人参、黄芪，加6倍量50％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为2.5小时，乙醇回流液减压回收乙醇并浓缩，浓缩液加4倍量水稀释，搅匀，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A。
(3)取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并，得人参、黄芪提取物40g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.73g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精＝1∶10的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8g。
(6)制剂处方人参、黄芪提取物40g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8g，葡萄糖102g。
(7)取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和葡萄糖，加注射用水溶解，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
实施例6(1)原料药组成人参100g、黄芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人参、黄芪，加6倍量50％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为2.5小时，乙醇回流液减压回收乙醇并浓缩，浓缩液加4倍量水稀释，搅匀，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A。
(3)取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并，得人参、黄芪提取物40g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.72g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羟丙基-β-环糊精＝1∶25的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物20g。
(6)制剂处方人参、黄芪提取物40g，斑蝥、蟾酥提取物包合物20g，葡萄糖90g。
(7)取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和葡萄糖，加注射用水溶解，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
权利要求
1.一种抗肿瘤的中药冻干粉针剂，其特征在于它是由人参、黄芪提取物35-45重量份，斑蝥、蟾酥提取物包合物8-20重量份和药用辅料47-102重量份制成。
2.根据权利要求1所述的一种抗肿瘤的中药冻干粉针剂，其制备方法包括以下步骤(1)原料药重量份组成人参50份、黄芪150份、蟾酥1份、斑蝥5份。(2)取人参、黄芪，用6倍量30％-50％的乙醇回流提取三次，每次回流时间为2-3小时，回流液减压回收乙醇并浓缩成浸膏，浸膏加4-8倍量水稀释，静置，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得干浸膏A；取人参、黄芪药渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小时，合并三次水煎液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达60％，过滤，沉淀加水溶解，离心，离心液减压浓缩，加乙醇使含醇量达80％，低温静置，过夜，倾出上清液，沉淀加乙醇搅拌，过滤，醇洗，真空干燥，与干浸膏A合并得人参、黄芪提取物。(3)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小时以上，过滤，弃去残渣，然后挥发尽乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物。(4)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，称取羟丙基-β-环糊精，加蒸馏水加热溶解，配成饱和溶液，冷至室温，按照斑蝥、蟾酥提取物羟丙基-β-环糊精＝1∶10-25的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，边加边搅拌，搅拌时间1小时，温度控制30℃-45℃，静置，离心，滤过，低温干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物。(5)按处方取上述人参、黄芪提取物与斑蝥、蟾酥提取物包合物和药用辅料，加注射用水适量溶解，调pH值至6.0-7.0，微孔滤膜滤过，灌装，冷冻干燥，即得。
全文摘要
本发明公开了一种抗肿瘤的中药冻干粉针剂及其制备方法。它是由人参、黄芪提取物，斑蝥、蟾酥提取物包合物和药用辅料制备而成，人参、黄芪先醇提再水提，斑蝥和蟾酥分别提取后用羟丙基－β－环糊精进行包合得到包合物，本发明制剂稳定性好，刺激性和毒副作用小，药理实验证明本发明冻干粉针剂药理作用更强。
文档编号A61K9/19GK1682826SQ20051000876
公开日2005年10月19日 申请日期2005年2月25日 优先权日2005年2月25日
发明者张海峰 申请人:张海峰