专利名称：清开灵制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种清开灵制剂的制备方法，属于药品技术的领域。
背景技术：
清开灵制剂是由安宫牛黄丸化裁而得，为治疗热病神昏，中风偏瘫，神志不清等症状的传统中药制剂，有清热解毒，化痰通络，醒神开窍之功效。清开灵制剂由胆酸、黄芩甙、猪去氧胆酸、栀子、水牛角、珍珠母、板蓝根和金银花共同制成。其中，水牛角为本制剂中起主要作用的药物之一，具有清热解毒，凉血定惊的作用。水牛角主要含有蛋白质，肽类，氨基酸，胆甾醇，强心成分等，其中的蛋白质、肽类经水解后能得多种氨基酸，但由于水牛角中的蛋白质属角蛋白，较难溶于水，煎出率极低。所以目前大多数厂家采用酸或碱单独水解水牛角，但是用酸或碱单独水解的水牛角收得率也不够理想。金银花也是本制剂中起主要作用的药物之一，具有清热解毒、凉散风热之功效，金银花中有效成分绿原酸类化合物是含有羧基和邻二酚羟基的有机酸，易溶于水、醇等溶剂，金银花的提取方法多采用煎煮法、浸渍法、回流法等，精制方法有沉淀法、萃取法、层析法等，但水煮醇沉的提取效果不好，萃取法溶剂用量大，层析法成本高、且操作复杂。本申请人于2005年7月5日向中国专利局提交了申请号为200510003126.5；名称为清开灵冻干粉制剂的制备方法。虽然该专利提供的制备方法解决了一定的问题，但仍然没有达到最佳效果。其中水牛角采用酸水解提取使得药物收得率不高；金银花采用水煮醇沉提取法提取，药物中有效成分含量不高；另外张晴龙于2004.07.16日向中国专利局提交了申请号为200410069316.2；名称为一种清开灵口腔崩解片及其制备方法。在该专利申请中，水牛角采用水煎煮提取，水煎煮后的药渣又用酸来水解，使得水牛角中有效成分提取率不高。由于以上方法中金银花及水牛角的制备工艺上均存在缺点，导致药物有效成分含量不高，使药效降低，还造成资源的浪费。
发明内容
本发明的目的在于提供一种清开灵制剂的制备方法。
针对金银花水煮醇沉的提取效果不好，萃取法溶剂用量大，层析法成本高、且操作复杂的缺点；在进行产品研究过程中发现，金银花采用醇作溶剂比用水作溶剂所得有效成分含量高，所以本发明中采用醇作溶剂提取金银花，另外在醇提得到的药液中加入水，不仅使杂质沉淀，还滤去药物中不溶于水的成分，过树脂柱，可以吸附药物中大分子色素、黏液质等杂质，同时去除药物中的大量杂质，使药物中有效成分含量更高；另外在实验过程中我们惊奇的发现，水牛角采用酸碱混合水解法水解能收到意想不到的效果，无论是从氨基酸的种类，还是氨基酸的含量，均比采用单一的酸水解或碱水解所得收率更高，所以本发明采用酸碱水解法提取水牛角，所得水解液再用乙醇醇沉，可去除药物中大量的杂质，增加药物中有效成分的含量。另外由于目前清开灵常用制剂除注射液、冻干粉外，口服制剂主要为口服液，而口服液却存在着具有稳定性较差，运输不便等问题，随着临床的应用，以上制剂已不能满足病患者的需求。故本发明不仅将本药物制成注射制剂，还将本药物制成软胶囊、崩解片和滴丸，这些制剂与一般口服制剂比较，生物利用度高，起效快，不仅药物稳定性好，还具有携带方便，便于服用等优点。故所以用本发明方法制备的药物，有效成分含量更高，疗效更好，能更好地满足临床需要。
本发明是这样实现的用胆酸10-20重量份、黄芩甙5-50重量份、猪去氧胆酸10-25重量份、栀子50-500重量份、水牛角50-500重量份、珍珠母50-500重量份、板蓝根500-2000重量份、金银花50-4000重量份来制备这种清开灵制剂，包括注射剂、冻干粉针、大容量注射液、软胶囊、崩解片或滴丸剂。
本发明所述制剂的制备方法为珍珠母用酸水解，滤液浓缩，醇沉，冷藏，上清液过滤，回收乙醇，得珍珠母提取物；水牛角用酸碱水解法水解，水解液调PH至中性，浓缩，醇沉，冷藏，过滤，回收乙醇，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味用水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，再加入水，冷藏，滤液PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照不同的常规方法制成不同的制剂。
在产品研究过程中，我们发现，本产品按照以下参数制备，即能达到提高药物收得率，增加药物疗效的目的珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入浸膏量3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照常规方法制成不同的制剂。
在产品研究过程中，我们发现，本产品按照以下参数制备时，产品中有效成分含量更高，药物疗效更好珍珠母粉碎成60-200目的细粉，加入6～15倍量硫酸溶液水解5～10h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉1-3次，含醇量为55-85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成60-200目的细粉，取部分水牛角细粉，用7-15倍量硫酸溶液回流水解4-8小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加8-15倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解4-10小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH6-8，浓缩，加入乙醇醇沉1-3次，含醇量为55-85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1-3次，每次均加入6-10倍量的水煎煮1-5小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉1-3次，含醇量为50-85％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入7-15倍量60-85％的乙醇回流提取1-3次，每次提取2-6小时，提取液回收乙醇，加入4-10倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至6-8，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照常规方法制成不同的制剂。
在产品研究中我们发现如将珍珠母提取物、水牛角提取物、栀子提取物、板蓝根提取物、金银花提取物分别干燥粉碎成浸膏干粉，还具有增强药物贮存时的稳定性，降低成本的优点，所以，本发明制剂的制备方法可以这样珍珠母用酸水解，滤液浓缩，醇沉，冷藏，上清液过滤，回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角用酸碱水解法水解，水解液调PH至中性，浓缩，醇沉，冷藏，过滤，回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味用水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，再加入水，冷藏，滤液PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照不同的方法制成不同的制剂。
在产品研究中我们发现，将栀子、板蓝根分开提取和混合提取所得药物质量差别不大，所以所述栀子、板蓝根的提取方法为A、栀子、板蓝根两味混合，加水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得栀子、板蓝根混合提取物。
B、栀子加入水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得栀子提取物；板蓝根加入水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得板蓝根提取物。
本发明中所述制剂的软胶囊剂这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入药粉量1～3倍食用植物油，30～60％的乙基羟乙基纤维素和0.3～0.8％乙二胺四乙酸，混合，搅匀，滴制法制备软胶囊。
本发明中所述制剂的崩解片这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入占处方量的10～30％的羧甲基淀粉钠、30～80％的填充剂甘露醇和3～20％的阿斯巴甜，直接压片，即得。
本发明中所述制剂的滴丸剂这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入药粉1～6倍已熔化聚乙二醇-4000，混匀，滴制法，将药液滴入甲基硅油中，即得。
本发明所述制剂的冻干粉针这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至1000～2000ml，搅匀，调节PH值至6-8，无菌滤过，分装，冷冻干燥，轧盖，制成1000支，即得。
本发明所述制剂的注射液这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至1000ml，调节药液PH值为3-6，过滤，灌封、灭菌，即得。
本发明所述制剂的大容量注射液这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入最终药液量10％的葡萄糖或0.9％的氯化钠，加注射用水至15-80升，混匀，经小于等于0.65um的滤膜滤过，灌装于50-500ml输液瓶中，密封，灭菌后即得大容量注射液。
实验例1 水牛角提取方法的实验1实验材料水牛角粉。
2实验方法2.1水提取法取水牛角粉加水回流提取，提取液浓缩，冷藏，滤过，调整滤液体积至100ml即浓度为100％(g/ml)，备用。
2.2酸水解法取水牛角粉加入硫酸溶液回流水解，放冷后，调整溶液体积使药液浓度为100％(g/ml)。调至PH4，药液再用10％NaOH溶液调整至PH7，备用。
2.3碱水解法取水牛角粉加Ba(OH)2溶液回流水解，放冷后，调整溶液体积使药液浓度为100％(g/ml)。调至PH4，药液再用10％NaOH溶液调整至PH7，用10％H2SO4检查不含Ba++，备用。
2.4酸碱水解法取1/2牛角粉加入硫酸溶液回流水解；剩下水牛角粉加Ba(OH)2溶液回流水解；将上述酸水解液及碱水解溶液混合，再加固体Ba(OH)2调整至PH4，过滤，滤液用调整至PH7，备用。
3结果取上述四种溶液各0.5ml，用日立835-50型氨基酸分析仪测定，结果见下表。
水牛角四种不同提取方法的氨基酸种类及含量测定结果(g/L)
4结论由结果可以看出，无论从氨基酸的种类，还是从总氨基酸的含量看，都以酸碱水解法的效果为最佳。
实验例2 金银花提取工艺的比较1仪器、试剂积及材料岛津2501UV-PC，实验用试剂均为分析纯。
药材金银花2金银花提取溶剂的选择2.1实验方法2.1.1水提取法称取金银花细粉用水加热，合并提取液，浓缩，备用。
2.1.2乙醇提取称取金银花细粉用不同浓酥的乙醇加热回流提取，提取液过滤，浓缩，备用。
2.2实验结果
2.3结论根据以上实验结果，可见，用乙醇作溶剂的金银花提取液中绿原酸的含量最高。
3金银花提取工艺的比较3.1实验方法2.1.1醇提水沉法称取金银花细粉用不同浓酥的乙醇加热回流提取，提取液过滤，浓缩或加入10倍量水搅拌，冷藏，过滤，备用。
2.1.2醇提水沉树脂法称取金银花细粉用不同浓酥的乙醇加热回流提取，提取液过滤，浓缩或加入10倍量水搅拌，冷藏，过滤，滤液用氢氧化钠调PH至7，过滤，滤液过大孔吸附树脂，备用。
2.1.3水煮醇沉法称取金银花细粉用水加热，合并提取液，浓缩，用70的乙醇醇沉，回收乙醇，备用。
3.2实验结果
3.3结论根据以上实验结果，可知，醇提水沉法与醇提水沉树脂法均比水煮醇沉法的绿原酸含量高；而过树脂后绿原酸的较没有过树脂的金银花提取液含量增加很多，说明过树脂后的去杂效果最好。
实验例3本发明注射制剂对内毒素性发热家兔的解热机制研究一、材料1、药物清开灵冻干粉按照本发明人已经申请的专利“注射用清开灵冻干粉针的制备方法”的方法制备；本发明冻干粉按照本发明的方法制备；本发明注射液按照本发明的方法制备；本发明大容量注射液按照本发明的方法制备；2、动物新西兰家兔。
3、仪器和材料大肠杆菌内毒素(ET)、IL-1β放免试剂盒、CAMP放免试剂盒、AVP放免试剂盒、巡回数字温度计(0～50℃)、标准温度计。
二、方法1、分组及实验雄性家兔，体重2.2～3.0kg，基础直肠温度38.5～39.5℃，随机分成5组，耳缘静脉给药生理盐水(NS)组(1ml/kg)；清开灵冻干粉+内毒素(清开灵冻干粉+ET)组，清开灵1ml/kg，0.5h后静脉注射ET 0.5ug/ml；本发明冻干粉B+ET组，清开灵1ml/kg，0.5h后静脉注射ET 0.5ug/ml；本发注射液+ET组，清开灵1ml/kg，0.5h后静脉注射ET 0.5ug/ml；ET组，用无热原生理盐水稀释ET，0.5ug/ml；分别观察1h和6h。
2、样品采集、处理及测定在无麻醉状态下，穿刺小脑延髓池抽取脑脊液0.6ml后，立即断头处死动物，取出全脑，在冰浴下于视交叉与灰结节之间取出下丘脑，并纵向切为2等份，迅速置于液氮中，将余脑置沸生理盐水中煮5min，分离腹中隔区(VSA)组织50mg。分别测定IL-1β、CAMP、AVP的含量。
3、观察指标及数据处理最大体温上升高度(ΔT℃)；体温反应指数(thermalrespose index，TRI)；IL-1β含量(ng/g)；CAMP含量(分别用nmol/g及nmol/L表示)；AVP含量(ng/g)。
三、结果1、本发明对ET性发热6h体温的影响结果见下表。
注本发明+ET组分别与NS组、ET组、A+ET组、B+ET组进行比较，其中**表示P＜0.01；△△表示P＜0.05。
2、本发明对ET性发热1h下丘脑IL-1β的影响结果见下表。
注本发明+ET组分别与NS组、ET组、A+ET组、B+ET组进行比较，其中**表示P＜0.01；△△表示P＜0.05。
3、本发明对ET性发热1h下丘脑及脑脊液CAMP的影响，及本发明对ET性发热1h腹中隔区AVP的影响，结果见下表。
注本发明+ET组分别与NS组、ET组、A+ET组、B+ET组进行比较，其中**表示P＜0.01；△△表示P＜0.05。
四、讨论通过检测三种清开灵冻干制剂对内毒素性发热家兔的ΔT℃和TRI值，以及中枢IL-1β、CAMP和AVP的含量，可知，本发明制剂比其他两种清开灵冻干粉的疗效更好。
实验例4 本发明口服制剂对家兔感染性退热作用的研究一、实验材料1、药物清开灵口崩片按照专利“一种清开灵口腔崩解片及其制备方法”的方法制备；本发明口崩片按照本发明的方法制备；本发明软胶囊按照本发明的方法制备；本发明滴丸按照本发明的方法制备。
2、动物新西兰家兔。
二、实验方法取新西兰家兔50只，体重2.0±0.2kg，雌雄兼用，随机分为5组，每组10只。禁食不禁水12h。在20±1℃室温下，固定家兔，待安静后，用PD朥型数字温度计连续测2次肛温，实验前均经标准温度计校正。每次隔30min，求平均值作为正常体温。正常体温确定后，各组动物按1.0ml/kg静注伤寒副伤寒甲乙三联菌液。60min时，按上述方法测定致热后体温变化。然后，分别灌服常水及同剂量的清开灵口崩片、本发明软胶囊、本发明崩解片和本发明滴丸。给药后依次测定30、60、180和300min时的体温，并将各组动物的正常体温与该组动物致热后给药前的体温进行配对t检验，求其正常体温与致热后体温的统计学意义。同时将给药动物组体温与对照组进行组间t检验，分别计算并比较致热后的体温变化。
三、实验结果家兔被静注三联菌液1h后，产生致热效应，体温明显增高。与致热前比较，差异有显著性(P＜0.01)。致热后的家兔分别灌喂清开灵口腔崩解片和本发明软胶囊、崩解片和滴丸后，体温明显降低，与致热后给药前体温比较，均有显著性差异(P＜0.01)。且本发明口服制剂与清开灵口腔崩解片比较，差异非常显著(P＜0.05)。
本发明制剂对致热后家兔的影响(x±s)
注#表示给药前致热后1h与正常体温比较P＜0.01；*表示给药后与给药前致热后体温比较P＜0.01；△表示本发明制剂组分别与阴性对照组、清开灵口崩片比较，P＜0.05。
四、讨论结果表明，张晴龙清开灵口腔崩解片和本发明的清开灵口服制剂对家兔感染性退热均有明显作用，但本发明清开灵口服制剂较张晴龙口腔崩解片的疗效更好。
与现有技术相比，本发明采用醇提水沉树脂除杂法提取金银花，可有效去除金银花中的大量杂质，降低其不良反应，提高了药物中有效成分的含量；与水提醇沉法提取的药液比较，金银花中有效成分绿原酸的质量分数可提高39.1％；另外本发明采用酸碱混合水解法水解水牛角，比采用单一的酸水解或碱水解所得氨基酸的种类多，且含量也高，所得水解液再用乙醇醇沉，可去除药物中大量的杂质，增加药物中有效成分的含量。另外本发明不仅将本药物制成注射制剂，还将本药物制成软胶囊、崩解片和滴丸，该制剂与一般口服制剂比较，生物利用度高，起效快，不仅药物稳定性好，还具有携带方便，便于服用等优点。故所以用本发明方法制备的药物，有效成分含量更高，疗效更好，能更好地满足临床需要，达到了发明的目的。
具体实施例方式
本发明的实施例1称取胆酸20g、黄芩甙50g、猪去氧胆酸25g、栀子500g、水牛角500g、珍珠母500g、板蓝根2000g、金银花4000g；制备工艺为珍珠母粉碎60目的细粉，加入10000ml硫酸溶液水解15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为50％、85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成50目的细粉，取水牛角细粉250g，用1250ml硫酸溶液回流水解3小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加1250ml氢氧化钡溶液，加热回流水解3小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子加水煎煮1次，加入7500ml的水煎煮8小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次，含醇量为80％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子提取物；板蓝根加水煎煮1次，加入30000ml的水煎煮8小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次，含醇量为80％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得板蓝根提取物；金银花加入20000ml 70％的乙醇回流提取5小时，提取液回收乙醇，加入2400ml水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至1000ml，调节药液PH值为3，过滤，灌封、灭菌，即得注射液。使用方法肌肉注射，每天两次，每次一支。
本发明的实施例2称取胆酸10g、黄芩甙5g、猪去氧胆酸10g、栀子50g、水牛角50g、珍珠母50g、板蓝根500g、金银花50g、葡萄糖1500g；制备工艺为珍珠母粉碎成70目的细粉，加入750ml硫酸溶液水解10h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉1次，含醇量为85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成60目的细粉，取5g水牛角细粉，用35ml硫酸溶液回流水解4小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加675ml氢氧化钡溶液，加热回流水解10小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH6，浓缩，加入乙醇醇沉3次，含醇量分别为55％、70％、85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1次，加入5500ml的水煎煮3小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉3次，含醇量分别为50％、60％、70％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入350ml60％的乙醇回流提取3次，提取时间分别为5h、3h、2h，提取液回收乙醇，加入100ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至6，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入葡萄糖，加注射用水至15升，混匀，经0.65um的滤膜滤过，灌装于500ml输液瓶中，密封，灭菌后即得大容量注射液。
本发明的实施例3称取胆酸10g、黄芩甙50g、猪去氧胆酸10g、栀子400g、水牛角400g、珍珠母500g、板蓝根500g、金银花4000g、食用植物油330g、乙基羟乙基纤维素198g、乙二胺四乙酸0.1g；制备工艺为珍珠母粉碎成100目细粉，加入2500ml硫酸溶液水解3h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉3次，含醇量为分别为60％、80％、90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成120目的细粉，取80g水牛角细粉，用400ml硫酸溶液回流水解5小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加3200ml氢氧化钡溶液，加热回流水解5小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH7，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子加水煎煮2次，第一次加4000ml的水煎煮10小时，第二次加3200ml水煎煮6小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为40％、90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子提取物；板蓝根加水煎煮2次，第一次加5000ml的水煎煮10小时，第二次加4000ml水煎煮6小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为40％、90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得板蓝根提取物；金银花加入24000ml50％的乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次1小时，提取液回收乙醇，加入3200ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至7，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入食用植物油，乙基羟乙基纤维素和乙二胺四乙酸，混合，搅匀，滴制法制备软胶囊。
本发明的实施例4称取胆酸20g、黄芩甙5g、猪去氧胆酸25g、栀子100g、水牛角250g、珍珠母50g、板蓝根2000g、金银花1500g、氯化钠720g；制备工艺为珍珠母粉碎成200目细粉，加入500ml硫酸溶液水解6h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉四次，含醇量分别为55％、70％、80％、90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成80目细粉，取75g水牛角细粉，用1500ml硫酸溶液回流水解6小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加2100ml氢氧化钡溶液，加热回流水解10小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH8，浓缩，加入乙醇醇沉2次，含醇量为50％、80％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮3次，分别加21000ml、12600ml、10500ml的水煎煮5h、2h、1h，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次，含醇量为70％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入12000ml80％的乙醇回流提取3次，第一次回流8小时，第二次回流6小时，第三次回流5小时，提取液回收乙醇，加入1500ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至8，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入氯化钠，加注射用水至80升，混匀，经0.45um的滤膜滤过，灌装于50ml输液瓶中，密封，灭菌后即得大容量注射液。
本发明的实施例5称取胆酸12g、黄芩甙40g、猪去氧胆酸22g、栀子290g、水牛角350g、珍珠母150g、板蓝根900g、金银花3000g；制备工艺为珍珠母粉碎成50目细粉，加入1200ml硫酸溶液水解7h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为60％、85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成100目细粉，取140g水牛角细粉，用1400ml硫酸溶液回流水解7小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加4200ml氢氧化钡溶液，加热回流水解15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH9，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为70％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮4次，分别加入14280ml、9520ml、7140ml、5950ml的水煎煮3h、2h、1h、0.5h，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次，含醇量为80％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入30000ml85％的乙醇回流提取2次，第一次提取6小时，第二次提取5小时，提取液回收乙醇，加入3600ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至9，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至1000ml，调节药液PH值为6，过滤，灌封、灭菌，即得注射液。
本发明的实施例6称取胆酸15g、黄芩甙10g、猪去氧胆酸12g、栀子200g、水牛角300g、珍珠母200g、板蓝根1000g、金银花3800g、聚乙二醇-4000 335g；制备工艺为珍珠母粉碎成80目细粉，加入2400ml硫酸溶液水解8h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为80％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成150目细粉，取180g水牛角细粉，用2160ml硫酸溶液回流水解6小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加1800ml氢氧化钡溶液，加热回流水解5小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH7，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为60％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子加水煎煮5次，分别加入3000ml、2000ml、1400ml、1200ml、1000ml的水煎煮8h、6h、4h、3h、1h、煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为60％、80％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子提取物；板蓝根加水煎煮5次，分别加入15000ml、10000ml、7000ml、6000ml、5000ml的水煎煮8h、6h、4h、3h、1h，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为60％、80％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得板蓝根提取物；金银花加入45600ml90％的乙醇回流提取4次，分别提取5h、3h、1h 0.5h，提取液回收乙醇，加入5320ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入已熔化聚乙二醇？000，混匀，滴制法，将药液滴入甲基硅油中，即得滴丸剂。
本发明的实施例7称取胆酸17g、黄芩甙20g、猪去氧胆酸14g、栀子250g、水牛角450g、珍珠母350g、板蓝根700g、金银花100g、食用植物油600g、乙基羟乙基纤维素60g、乙二胺四乙酸1.6g；制备工艺为珍珠母粉碎成120目的细粉，加入2100ml硫酸溶液水解5h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉3次，含醇量分别为55％、80％、85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成200目的细粉，取315g水牛角细粉，用4725ml硫酸溶液回流水解8小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加1080ml氢氧化钡溶液，加热回流水解4小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH8，浓缩，加入乙醇醇沉1次，含醇量为80％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮3次，分别加入9500ml、7600ml、5700ml的水煎煮5h、3h、1h，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉1次，含醇量为85％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入1500ml85％的乙醇回流提取1次，每次提取6小时，提取液回收乙醇，加入80ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至8，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入食用植物油，乙基羟乙基纤维素和乙二胺四乙酸，混合，搅匀，滴制法制备软胶囊。
本发明的实施例8称取胆酸16g、黄芩甙15g、猪去氧胆酸15g、栀子150g、水牛角200g、珍珠母400g、板蓝根1600g、金银花3500g、羧甲基淀粉钠42g、甘露醇334g、阿斯巴甜13g；制备工艺为珍珠母粉碎成900目细粉，加入5200ml硫酸溶液水解9h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为50％、85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成300目细粉，取160g水牛角细粉，用2240ml硫酸溶液回流水解9小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加520ml氢氧化钡溶液，加热回流水解7小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH6，浓缩，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为55％、85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮2次，第一次加14000ml的水煎煮5小时，第二次加10500ml的水煎煮3小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次，含醇量为90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入49000ml55％的乙醇回流提取5次，分别提取8h、6h、3h、1h、1h，提取液回收乙醇，加入5600ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至7，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入羧甲基淀粉钠、甘露醇和阿斯巴甜，直接压片，即得口腔崩解片。
本发明的实施例9称取胆酸18g、黄芩甙30g、猪去氧胆酸24g、栀子500g、水牛角50g、珍珠母300g、板蓝根1800g、金银花2000g；制备工艺为珍珠母粉碎成200目细粉，加入4200ml硫酸溶液水解11h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉三次，含醇量分别为50％、85％、90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成400目细粉，取45g水牛角细粉，用720ml硫酸溶液回流水解10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加70ml氢氧化钡溶液，加热回流水解8小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5，浓缩，加入乙醇醇沉三次，含醇量分别为55％、85％、90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子加水煎煮2次，第一次加入5000ml的水煎煮3小时，第二次加入4000ml的水煎煮1小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉三次，含醇量分别为60％、70％、85％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子提取物；板蓝根加水煎煮2次，第一次加入18000ml的水煎煮3小时，第二次加入14400ml的水煎煮1小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉三次，含醇量分别为60％、70％、85％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得板蓝根提取物；金银花加入30000ml65％的乙醇回流提取2次，每次2小时，第二次提取2小时，提取液回收乙醇，加入3600ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至1000ml，搅匀，调节PH值至8，无菌滤过，分装，冷冻干燥，轧盖，制成1000支，即冻干制剂。
本发明的实施例10称取胆酸14g、黄芩甙25g、猪去氧胆酸20g、栀子500g、水牛角500g、珍珠母250g、板蓝根800g、金银花1000g、羧甲基淀粉钠86g、甘露醇86g、阿斯巴甜58g；制备工艺为珍珠母粉碎成300目细粉，加入3750ml硫酸溶液水解12h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉2次，含醇分别量为50％、70％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成500目细粉，取250g水牛角细粉，用4250ml硫酸溶液回流水解5小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加4000ml氢氧化钡溶液，加热回流水解9小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH8，浓缩，加入乙醇醇沉四次，含醇量分别为50％、70％、80％、85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1次，每次均加入19500ml的水煎煮10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉四次，含醇量分别为40％、60％、70％、90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入18000ml75％的乙醇回流提取3次，每次分别提取4h、3h、1h，提取液回收乙醇，加入2000ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至6，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入羧甲基淀粉钠、甘露醇和的阿斯巴甜，直接压片，即得口腔崩解片。
本发明的实施例11称取胆酸19g、黄芩甙35g、猪去氧胆酸18g、栀子50g、水牛角100g、珍珠母450g、板蓝根1200g、金银花2500g；制备工艺为珍珠母粉碎成400目细粉，加入2250ml硫酸溶液水解13h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为60％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成150目细粉，取30g水牛角细粉，用540ml硫酸溶液回流水解7小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加1260ml氢氧化钡溶液，加热回流水解12小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH9，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为75％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮2次，第一次加入11250ml的水煎煮5小时，第二次加入6250ml的水煎煮1小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉2次，含醇量分别为50％、70％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入47500ml85％的乙醇回流提取1次，每次提取7小时，提取液回收乙醇，加入4000ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至2000ml，搅匀，调节PH值至6，无菌滤过，分装，冷冻干燥，轧盖，制成1000支，即冻干制剂。
本发明的实施例12称取胆酸13g、黄芩甙45g、猪去氧胆酸19g、栀子300g、水牛角50g、珍珠母100g、板蓝根600g、金银花500g、聚乙二醇-4000 1368g；制备工艺为珍珠母粉碎成500目细粉，加入1000ml硫酸溶液水解14h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次，含醇量为75％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成60目细粉，取15g水牛角细粉，用300硫酸溶液回流水解8小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加665ml氢氧化钡溶液，加热回流水解14小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH7，浓缩，加入乙醇醇沉2次或，含醇量分别为50％、80％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1次，加入10800ml的水煎煮2小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次，含醇量为85％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入10000ml70％的乙醇回流提取1次，每次提取8小时，提取液回收乙醇，加入500ml的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至4，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入聚乙二醇-4000，混匀，滴制法，将药液滴入甲基硅油中，即得滴丸剂。
本发明的实施例13称取胆酸16g、黄芩甙5g、猪去氧胆酸25g、栀子300g、水牛角100g、珍珠母100g、板蓝根900g、金银花3000g、聚乙二醇-4000 23g；制备工艺为珍珠母用酸水解，滤液浓缩，醇沉，冷藏，上清液过滤，回收乙醇，得珍珠母提取物；水牛角用酸碱水解法水解，水解液调PH至中性，浓缩，醇沉，冷藏，过滤，回收乙醇，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味用水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，再加入水，冷藏，滤液PH至10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入已熔化聚乙二醇？000，混匀，将药液滴入植物油中，即得滴丸剂。
权利要求
1.一种清开灵制剂的制备方法，其特征在于用胆酸10-20重量份、黄芩甙5-50重量份、猪去氧胆酸10-25重量份、栀子50-500重量份、水牛角50-500重量份、珍珠母50-500重量份、板蓝根500-2000重量份、金银花50-4000重量份按照以下方法制备珍珠母用酸水解，滤液浓缩，醇沉，冷藏，上清液过滤，回收乙醇，得珍珠母提取物；水牛角用酸碱水解法水解，水解液调PH至中性，浓缩，醇沉，冷藏，过滤，回收乙醇，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味用水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，再加入水，冷藏，滤液PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照不同的方法制成不同的制剂。
2.按照权利要求1所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于具体的制备方法为珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入浸膏量3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照不同的方法制成不同的制剂。
3.按照权利要求1或2所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于更具体的制备方法为珍珠母粉碎成60-200目的细粉，加入6～15倍量硫酸溶液水解5～10h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉1-3次，含醇量为55-85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎成60-200目的细粉，取部分水牛角细粉，用7-15倍量硫酸溶液回流水解4-8小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加8-15倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解4-10小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH6-8，浓缩，加入乙醇醇沉1-3次，含醇量为55-85％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1-3次，每次均加入6-10倍量的水煎煮1-5小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉1-3次，含醇量为50-85％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入7-15倍量60-85％的乙醇回流提取1-3次，每次提取2-6小时，提取液回收乙醇，加入4-10倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至6-8，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照不同的方法制成不同的制剂。
4.一种清开灵制剂的制备方法，其特征在于用胆酸10-20重量份、黄芩甙5-50重量份、猪去氧胆酸10-25重量份、栀子50-500重量份、水牛角50-500重量份、珍珠母50-500重量份、板蓝根500-2000重量份、金银花50-4000重量份按照以下方法制备珍珠母用酸水解，滤液浓缩，醇沉，冷藏，上清液过滤，回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角用酸碱水解法水解，水解液调PH至中性，浓缩，醇沉，冷藏，过滤，回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味用水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，再加入水，冷藏，滤液PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，然后按照不同的方法制成不同的制剂。
5.按照权利要求1-4中任意一项所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于按照上述方法制成软胶囊、崩解片、滴丸剂、注射剂、冻干粉针或大容量注射液。
6.按照权利要求4所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于软胶囊剂这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入药粉量1～3倍食用植物油，30～60％的乙基羟乙基纤维素和0.3～0.8％乙二胺四乙酸，混合，搅匀，滴制法制备软胶囊。
7.按照权利要求4所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于崩解片这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入占处方量的10～30％的羧甲基淀粉钠、30～80％的填充剂甘露醇和3～20％的阿斯巴甜，直接压片，即得。
8.按照权利要求4所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于滴丸剂这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，真空干燥，粉碎成60目以上的细粉，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入药粉1～6倍已熔化聚乙二醇-4000，混匀，滴制法，将药液滴入甲基硅油中，即得。
9.按照权利要求1或2所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于冻干粉针这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至1000～2000ml，搅匀，调节PH值至6-8，无菌滤过，分装，冷冻干燥，轧盖，制成1000支，即得。
10.按照权利要求1或2所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于注射液这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加注射用水至1000ml，调节药液PH值为3-6，过滤，灌封、灭菌，即得。
11.按照权利要求1或2所述的清开灵制剂的制备方法，其特征在于大容量注射液这样制备珍珠母粉碎，加入5～20倍量硫酸溶液水解3～15h，滤过，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得珍珠母提取物；水牛角先粉碎，取部分水牛角细粉，用5-20倍量硫酸溶液回流水解3-10小时，过滤，另取剩下的水牛角细粉，加5-20倍量氢氧化钡溶液，加热回流水解3-15小时，过滤，合并上述酸水解液及碱水解液，用氢氧化钠溶液调至PH5-9，浓缩，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为50-90％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，滤过，得水牛角提取物；栀子、板蓝根两味加水煎煮1～5次，每次均加入5-15倍量的水煎煮0.5-10小时，煎液滤过，浓缩成浸膏，加入乙醇醇沉一次或一次以上，含醇量为40-90％，冷藏放置，滤过，滤液回收乙醇，得栀子、板蓝根提取物；金银花加入5～20倍量50～90％的乙醇回流提取1～5次，每次提取0.5～8小时，提取液回收乙醇，加入3-15倍量的水，冷藏，滤液用氢氧化钠调PH至5-10，过滤，滤液过大孔吸附树脂，即得金银花提取物；另取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉与上述提取物混合，加入最终药液量10％的葡萄糖或0.9％的氯化钠，加注射用水至15-80升，混匀，经小于等于0.65um的滤膜滤过，灌装于50-500ml输液瓶中，密封，灭菌后即得大容量注射液。
12.如权利要求1-11中任意一项所述清开灵制剂的制备方法，其特征在于栀子、板蓝根的提取方法为栀子、板蓝根两味混合，加水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得栀子、板蓝根混合提取物或者是栀子加入水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得栀子提取物；板蓝根加入水煎煮，煎液滤过，浓缩，醇沉，冷藏，回收乙醇，得板蓝根提取物。
全文摘要
本发明涉及一种清开灵制剂的制备方法，由胆酸、黄芩甙、猪去氧胆酸、栀子、水牛角等制成，发明采用醇提水沉树脂除杂法提取金银花、采用酸碱混合水解法水解水牛角，可有效去除杂质，降低不良反应，提高有效成分的含量；本发明将本药物制成注射制剂，还将本药物制成软胶囊、崩解片和滴丸，该制剂与一般口服制剂比较，生物利用度高，起效快，不仅药物稳定性好，还具有携带方便，便于服用等优点，所以用本发明方法制备的药物，有效成分含量更高，疗效更好，能更好地满足临床需要。
文档编号A61K9/20GK1781520SQ200510200500
公开日2006年6月7日 申请日期2005年8月29日 优先权日2005年8月29日
发明者叶湘武, 韦莹, 张梅 申请人:贵州益佰制药股份有限公司