一种抗衰老制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明提出了一种抗衰老制剂，以糖蛋白为主体，配以自体脂肪间充质干细胞，抗衰老效果更好，且制备工艺简单，解决现有抗衰老制剂吸收率不高的问题，本发明还公开了一种抗晒老制剂的制备方法。
【专利说明】
一种抗衰老制剂及其制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及生物医药领域，特别是指一种抗衰老制剂，本发明还涉及一种抗晒老制剂的制备方法。
【背景技术】
[0002]目前，大部分的生物抗衰老制剂存在吸收率不高，甚至有些还受到免疫系统排斥。
[0003]干细胞即为起源细胞。干细胞是具有增殖和分化潜能的细胞，具有自我更新复制的能力，能够产生高度分化的功能细胞。最新的研究表明，组织特异性干细胞同样具有分化成其他细胞或组织的潜能，这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。
[0004]间充质干细胞是一种非常好的可用于移植的成体干细胞。
[0005]首先，它和造血干细胞一样，主要来源于骨髓，易于获得;其次，它也很容易被分离出来，目前有非常经典的方法来分离它;第三，间充质干细胞在体外培养不易自动分化(人的间充质干细胞在12代以内可以保持核型正常，并保持很强的端粒酶活性)；第四，它又不像胚胎干细胞或神经干细胞那样，有永生化的趋势(一个细胞一旦有了永生化趋势，就同时具备了成瘤性，有可能形成畸胎瘤甚至是恶性肿瘤);第五，间充质干细胞的免疫原性很低，在异体移植时不容易发生免疫排斥;第六，间充质干细胞还懂得“策反”，它有免疫调节的作用，可以调节受体的免疫系统，使这些免疫系统不但不排斥它，反而为它所用;最后，作为一种易于获取的成体干细胞，间充质干细胞也完全可以应用于自体移植，从自己的骨髓中分离出来，用于修复自己病变和损伤的组织，完全不存在免疫排斥等问题。
[0006]研究表明采用hCG可诱导人胚胎干细胞分化为卵母细胞，最终有卵母细胞样细胞、卵母细胞样结构和透明带类似物和卵巢的形成，表明所用诱导物对卵母细胞的分化起着一定的促进作用。所以hCG可在抗衰老中广泛应用，防止卵巢早衰；
同时hCG的药理作用与促黄体生成素相似，研究表明对雄性则有促间质细胞激素的作用，使其产生雄激素，并促进精子生成，所以hCG可用于男性ED阴茎勃起障碍。
【发明内容】
[0007]本发明提出一种抗衰老制剂，解决了现有技术中抗衰老制剂吸收率不高的问题。
[0008]本发明的技术方案是这样实现的:一种抗衰老制剂，以糖蛋白为主体，配以自体脂肪间充质干细胞。
[0009]进一步，所述糖蛋白为人绒毛膜促性素。
[0010]进一步，所述脂肪间充质干细胞与所述糖蛋白浓度比例为100万/ml:(1000-5000)单位/ml。
[0011]进一步，所述脂肪间充质干细胞与所述糖蛋白浓度比例为100万/ml:3200单位/ml ο
[0012]所述抗衰老制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)从脂肪组织中提取脂肪间充质干细胞，并进行生物活性验证，纯化以及培养扩增； (2)配制糖蛋白，浓度为1000-5000单位/ml;
(3)将脂肪间充质干细胞与糖蛋白按照100万/ml:(1000-5000)单位/ml浓度比例混合制得，优选按照100万/ml:3200单位/ml浓度比例混合制得。
[0013]本发明的所述抗衰老制剂，以糖蛋白为主体，配以自体脂肪间充质干细胞，充分发挥出间充质干细胞的作用，抗衰老效果更好，且制备工艺简单，解决现有抗衰老制剂吸收率不高的问题，HCG的应用可以更好的诱导间充质干细胞向我们所需的方向分化，其中最为重要的就是卵母细胞及雄激素分泌细胞，可在抗衰老中广泛应用，防止卵巢早衰，同时亦可促进精子的生成，可用于男性H)阴茎勃起障碍。使本制剂可同时应用于男女。
【具体实施方式】
[0014]下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0015]—种抗衰老制剂，以糖蛋白为主体，配以自体脂肪间充质干细胞，制备方法如下:
(1)从脂肪组织中提取脂肪间充质干细胞，并进行生物活性验证，纯化以及培养扩增。具体的如下:
取人脂肪进行常规检测，用磷酸缓冲液冲洗涤后，静至分层，去除下层脂质;上层细胞加入胶原酶I消化30分钟;将上述所获得的细胞混合物离心，弃上清，用磷酸缓冲液冲洗涤后，再离心，弃上清，即可获得脂肪间充质干细胞。将间充质干细胞扩大培养，进行形态学，扩增能力，分化能力检测;将扩大培养后的脂肪间充质干细胞收集备用。
[0016]其中，脂肪间充质干细胞的分离可采用以下方法:
油脂/脂质部分的初步去除:取5g脂肪组织，先用无菌的手术剪刀或者小刀剪碎，长度要求不大于3毫米，然后收集于15毫升离心管，加入等体积的磷酸盐缓冲液，剧烈震荡后室温静至5分钟，等分为两层后小心收集上层部分(包含有间充质干细胞、脂肪细胞、磷酸盐缓冲液及红细胞)，去掉下层的油脂/脂质，收集的上层部分采用磷酸盐缓冲液洗涤3遍。
[0017]胶原酶I的消化可采用以下方法:
加入等体积的0.075%的胶原酶I，37°C水浴30分钟；加入等体积的含10%胎牛血清的DMEM终止消化，充分混均后室温静至10分钟分层；去掉上层(脂质/碎片)，20°C，280g离心5min收集下层部分(基质血管部分、干细胞、红细胞)；红细胞裂解，采用160 mM NH4C1重悬3分钟，40微米虑膜过滤到含5 mL DMEM,10% FBS的管中；20°C，280g离心5min收集细胞，并于1%青霉素/链霉素、10% FBS的DMEM中培养，即获得间充质干细胞。
[0018]此外，如涉及到脂肪间充质干细胞库的构建，则可以采用以下方法:
将脂肪间充质干细胞置液氮冷冻，按AB0/RH分型和HLA分型进行保存，建立可供检索的细胞信息档案，即构建出人脂肪间充质干细胞库
(2)配制糖蛋白，人绒毛膜促性素1000-5000单位/ml，优选3200单位/ml;
(3)将步骤I制备收集的细胞与步以骤2所得人绒毛膜促性素按a:b=100万/ml:3200单位/ml浓度比例混合得到干细胞制剂。
[0019]上述全部过程均在无菌环境下操作。
[0020]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种抗衰老制剂，其特征在于:以糖蛋白为主体，配以自体脂肪间充质干细胞。2.如权利要求1中所述抗衰老制剂，其特征在于:所述糖蛋白为人绒毛膜促性素。3.如权利要求3中所述抗衰老制剂，其特征在于:所述脂肪间充质干细胞与所述糖蛋白浓度比例为10万/ml: (1000-5000)单位/ml。4.如权利要求4中所述抗衰老制剂，其特征在于:所述脂肪间充质干细胞与所述糖蛋白浓度比例为100万/ml: 3200单位/ml。5.如权利要求1-5中任一所述抗衰老制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)从脂肪组织中提取脂肪间充质干细胞，并进行生物活性验证，纯化以及培养扩增； (2)配制糖蛋白，浓度为1000-5000单位/ml;(3)将脂肪间充质干细胞与糖蛋白按照100万/ml:(1000-5000)单位/ml浓度比例混合制得。6.如权利要求5中所述抗衰老制剂的制备方法，其特征在于:步骤(3)中，将脂肪间充质干细胞与糖蛋白按照100万/ml: 3200单位/ml浓度比例混合制得。
【文档编号】A61P39/06GK105963684SQ201610342638
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月23日
【发明人】冯文峰, 黄鹏, 昌芒
【申请人】广州思丹福生物科技有限公司