专利名称：作为17β－羟基甾体脱氢酶1抑制剂的新型2－取代D－加碳－雌甾－1,3,5(10)－三烯的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯，其制备以及作为药物用于治疗受17β-羟基甾体脱氢酶1的抑制所影响的雌激素依赖性疾病的应用，以及包含这些化合物的药物组合物。
背景技术：
性激素控制着对甾体敏感的正常组织以及癌变组织的增殖过程和功能[E.E.Baulieu，Hormones，A Complex Communication Network.InHormones，eds.E.E.Baulieu和P.A.Kelly，Herman Publisher Paris andChapman and Hall New york，1990，pp.147-149；D.D.Thomas，Cancer53(1984)595-601]。
雌二醇是活性最强的雌性激素，除了已知对于生殖系统的效应之外，它对骨骼和脂质代谢以及心血管系统也产生影响，并且还对中枢神经系统有调节作用。它主要产生于绝经前妇女的卵巢中。另外的活性雌激素大部分是在外周组织由从肾上腺大量释放入血的无活性的甾体前体生成。
绝经之后，血液中雌二醇的水平降到大约绝经前女性含量的1/10[T.Thorsten，M.Tangen，K.F.Stoa，Eur.J.Cancer Clin.Oncol.18(1982)333-337；A.A.van Landeghem等，CancerRes.45(1985)2900-2906]。从这时开始，雌激素主要在外周组织经生物合成获得。[F.Labrie，Intracrinology.Mol.Cell.Endocrinol.78(1991)C113-C118]。
雌激素被肿瘤组织的血液吸收并刺激其生长。
然而，甚至绝经之后，肿瘤内雌二醇的浓度仍然保持和绝经前妇女相差不多的较高水平不变[A.A.van Landeghem等，Cancer Res.45(1985)2900-2906]。绝经后女性肿瘤组织中高浓度的雌二醇是在肿瘤组织中经雌激素的生物合成生成的。
在乳腺癌组织中，雌二醇(E2)通过芳香酶或硫酸酯酶方法合成[Y.J.Abul-Hajj，R.Iverson，D.T.Kiang，Steroids 33(1979)205-222；A.Lipton等，Cancer 59(1987)，779-782；E.Perel等，J.Steroid Biochem.29(1998)393-399]。雄甾烯二酮自血液被肿瘤组织吸收，芳香化成为雌酮(E1)，然后被还原成雌二醇(E2)(芳香酶方法)。在硫酸酯酶方法中，雌激素硫酸酯经甾体硫酸酯酶转化为E1，E1又被还原成E2。
甾体合成的最后决定性步骤是由17β-羟基甾体脱氢酶(17β-HSD)催化，其对应于17β-羟基甾体脱氢酶/17-酮甾体还原酶家族。这些酶将弱活性的17-酮甾体转化为它们的活性17β-羟基甾体，反之亦然。雌激素和雄激素两者当以17β-羟基形式存在时对相应的受体的亲和力最强，即，17β-HSD-酶控制性激素的生物活性[H.Peltoketo等，J.Mol.Endocrinol.23(1999)，1-11；P.Vihko等，Mol.Cell.Endocrinol.171(2001)71-76]。
某些性腺外(extragonadal)组织，例如，乳腺和前列腺组织表达还原性的17β-HSD并因此在靶组织将在血液中循环的低活性的前体转化为活性更高的形式[F.Labrie等，Steroids 62(1997)148-158；H.Peltoketo等，Horm.55(1999)353-398]。
迄今已知11种不同的17β-HSD。它们在组织分布、催化活性、底物特异性、亚细胞定位以及调节机制方面有所不同。许多羟基甾体脱氢酶都可能参与人类疾病的发病机制，例如，假两性畸形[17β-HSD 3，W M.Geissler等，Nat.Genet.7(1994)34-39]、双功能酶缺陷[17β-HSD 4，E.G.van Grunsven等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95(1998)2128-2133]、多囊性肾病[17β-HSD 8，M.M.Maxwell等，J.Bio.Chem.270(1995)25213-25219]、阿尔茨海默病[17β-HSD 10，S.D.Yan et al.，Nature 398(1997)689-695；X.Y.He等，J.Biol.Chem.274(1999)15014-15019]。
人类胎盘的17β-羟基甾体脱氢酶1和2属于同一甾体脱氢酶-还原酶-蛋白家族(SDR)。它们在例如所催化反应的方向上彼此相区别。
17β-HSD 1主要控制雌酮还原成雌二醇[T.Puranen等，Endocrinology 138(1997)3532-3539]，NADPH作为辅因子也参与其中[J.Z.Jin，S.X.Lin，Biochem.Biophys.Res.Commun.259(1990)489-493]。
在培养的细胞中，HSD 1部分地支持雄甾烯二酮和雄甾烷二酮的还原反应。但可以明显地显示，酚类底物更为优选[M.Poutanen等，Endocrinology 133(1993)2639-2644]。
但是与17β-HSD 1相比，17β-HSD 2催化相反的反应，即将雌二醇转化为雌酮，将雄甾烯二酮和二氢睾酮转化为雄甾烷二酮[L.Wu等，J.Biol.Chem.268(1993)12964-12969]，并且优选在辅因子NAD以非磷酸化形式存在时发挥作用[F.Labrie等，Steroids 62(1997)148-158]。
17β-HSD 1和17β-HSD 2在正常的乳腺组织中表达[G.Sderqvist，J.Clin.Endocrinol.Metab.83(1998)1190-1193；M.Miettinen，Breast CancerRes.Treat.57(1999)175-182]。
与正常乳腺组织相比，人们发现发生癌变的乳腺上皮细胞(被17β-HSD 1)还原的活性与(被17β-HSD 2)氧化的活性相比有所增高[M.M.Mittinen等，Biochem.J.314(1996)839-845；V.Speirs，J.SteroidBiochem.Mol.Biol.67(1998)267-274]。经观察，雌二醇在癌变的乳腺细胞中聚集，这同样指向17β-HSD 1活性[A.Vermeulen等，Eur.J.CancerClin.Oncol.22(1986)515-525]。此外，研究发现，在17β-HSD 1存在下，给药雌酮以与给药雌二醇本身同样的方式导致乳腺癌细胞的生长。相比之下，在没有17β-HSD 1的情况下，单独给药雌酮并不产生该效应[M.M.Miettinen等，Int.J.Cancer 68(1996)600-604]。
17β-HSD 1在癌变组织中占据优势加速了肿瘤的雌激素依赖性生长和发展，而氧化性17β-HSD 2保护正常乳腺组织不受过度的雌二醇作用的影响[P.Vihko等，Mol.Cell.Endocrinol.171(2000)71-76]。
在子宫内膜异位中，17β-HSD 1和2的平衡发挥着一定的作用。17β-HSD 1在正位组织中表达，但是，激素灭活性酶17β-HSD 2则完全缺失[S.E.Bulun等，J.Mol.Endocrinol.25(2000)35-42]。
同样，在前列腺癌中，17β-HSD 2的含量也减少[J.P.Elo等，Endocrinol.Metab.88(2003)705-712]。
在先前开发的17β-HSD 1抑制剂中，不可逆抑制剂与可逆抑制剂不同。不可逆抑制剂含有活性官能团，它通过与酶的氨基酸残基形成共价键而使酶灭活。上述组中已知的代表为16-亚甲基-雌二醇，乙炔基-取代16位-开环-雌二醇[R.J.Auchus，D.F.Covey，Biochemistry 25(1983)7295-7300；J.L.Thomas等，J.Biol.Chem.258(1983)11500-11504；B.Tobias等，J.Bio.Chem.257(1982)2783-2786]或16α-卤代烷基-雌二醇[K.M.Sam等，Drug Des.Discov.15(1997)157-180；M.R.Tremblay，D.Poirier，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.66(1998)179-191]。
可逆抑制剂包括16，17-吡唑-或16，17-异恶唑-雌酮衍生物[F.sweet等，Biochem.Biophys.Res.Commun.180(1991)，1057-1063]，带有7α-十一烷酰胺长侧链[C.Labrie等，Cancer Res.52(1992)，610-615；S.J.Santner，R.J.Santen，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.45(1993)383-390]或带有6β-硫代庚酰胺侧链[D.Poirier，P.Dionne，S.Auger，J.SteroidBiochem.Mol.Biol.64(1998)，83-90]的雌二醇衍生物。
17β-HSD 1抑制剂中的一个特例是16-氧代雌酮在pH为7.2的中性条件下，它包括可逆抑制剂，在pH为8.5的碱性条件下，它包括不可逆抑制剂[H.Inano，B.Tamaoki，Eur.J.Biochem.129(1983)691-695]。
先前已知的可逆和不可逆抑制剂作为17β-HSD 1抑制剂都只有一种适中的活性。
近来通过建模研究发现了第一种混合抑制剂[M.Tremblay，D.Poirier等，FASEB 13(2002)1829-1831]。在此混合抑制剂中，雌二醇通过在16位由8个亚甲基组成的间隔基与腺苷相连。目前，它是最佳的17β-HSD 1抑制剂，IC50值为52nmol。
由于该分子的大小问题，使得其经口服生物利用比较困难。该分子并非不可能与其它NAD(P)(H)依赖性酶发生交叉反应。
根据已知的现有技术，17β-HSD 1是雌二醇生物合成局部抑制的靶点。与用于防止活性甾体与相应受体结合的抗激素治疗相伴应用，17β-HSD 1抑制剂可用于治疗雌激素依赖性疾病。
发明内容
因此本发明的目的是提供另外的选择性抑制17β-HSD 1的化合物。这些化合物适于治疗能够受17β-羟基甾体脱氢酶1的抑制所影响的雌激素依赖性疾病以及激素依赖性肿瘤疾病。
本发明的另外的目的是这些化合物的制备和作为药物在治疗能够受17β-羟基甾体脱氢酶1的抑制所影响的雌激素依赖性疾病和激素依赖性肿瘤疾病中的应用。
具体实施例方式
本发明的目的通过提供通式I的新型2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯及其药物学可接受的盐实现 其中R2是指饱和或者不饱和的C1-C8-烷基、芳烷基或烷基芳基、C1-C8-烷氧基或卤素原子；R13是指氢原子或甲基；R17是指氢原子或氟原子；其中甾体分子的B-和D-环中的虚线部分可以为另外的双键。
另外，本发明包括作为药物活性成分的新化合物、它们的制备、它们的治疗应用及含有该新物质的药物配制形式(pharmaceutical dispensingforms)。
本发明的通式(I)的化合物或其药物学可接受的盐可用于制备药物，尤其是用于治疗能够受17β-羟基甾体脱氢酶1的抑制所影响的雌激素依赖性疾病和激素依赖性肿瘤疾病。
已测定本发明的低分子的2-取代D-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯在体外对17β-HSD1酶活性产生强于先前已知的17β-HSD1抑制剂的选择性抑制。
除非另有进一步的说明，在本发明的范围内，芳基是苯基、1-或2-萘基，其可以任选地被取代，其中优选为苯基。除非另外明确指出，芳基通常也包括杂芳基。杂芳基的实例为2-、3-或4-吡啶基、2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、2-或3-吡咯基、2-、4-或5-咪唑基、吡嗪基、2-、4-或5-嘧啶基或3-或4-哒嗪基。
作为芳基或杂芳基的取代基可以提及例如甲基、乙基、三氟甲基、五氟乙基、三氟甲硫基、甲氧基、乙氧基、硝基、氰基、卤素(氟、氯、溴、碘)、羟基、氨基、单(C1-C8-烷基)或两个烷基为相同或不同的二(C1-C8-烷基)氨基、两个芳烷基为相同或不同的二(芳烷基)氨基。
R2的C1-C8-烷基可以为饱和或不饱和并且可以部分或全部被取代。作为代表性的饱和烷基可以提及甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基、正戊基、异戊基或新戊基、己基、庚基或辛基。优选为甲基、乙基及丙基。
烯丙基和乙烯基是代表性的不饱和烷基。
甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基、正戊氧基、异戊氧基或新戊氧基可代表C1-C5-烷氧基R2。
就R2而言，氯、碘或溴原子可以代表卤素。
根据本发明优选的为其中R2为C1-C5-烷氧基、C1-C5-烷基或C2-C3-烯基或溴或氯并且R13为氢原子的通式I化合物。
优选以下提及的化合物及其应用。
1)2-甲氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇12)2-乙氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇3)2-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇24)2-溴-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇35)2-碘-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇46)2-氯-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5a7)2-氯-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5b8)2-溴-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇9)2-溴-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇10)2-(2-苯基乙基)-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇611)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇712)2-烯丙基-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇13)2-烯丙基-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇14)2-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇15)2-溴-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇816)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇17)2-丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇18)2-甲氧基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇19)2-乙氧基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇20)2-氯-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇21)2-溴-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇
22)2-碘-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇23)2-氯-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇24)2-氯-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇25)2-溴-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇26)2-溴-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇27)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇28)2-烯丙基-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇29)2-烯丙基-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇30)2-氯-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)，1 6-四烯-3-醇31)2-溴-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇32)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇33)2-丙基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇药理数据人类17β-羟基甾体脱氢酶1活性的抑制该试验方法在文献中有详尽的记载[Adamski，J.，Sierralta，W.D.，Jungblut，P.W.，Acta Endocrinol(Copenh.)121(2)(1989)，161-7]，在此叙述如下。
人类17β-羟基甾体脱氢酶(17β-HSD)在大肠杆菌(E.coli)中作为His-标签蛋白或GST-融合蛋白过度表达。用菌球(bacterial pellets)在等渗标准盐溶液中的混悬液测定17β-HSD的酶活性或研究潜在的抑制剂(雌激素衍生物)对它们的影响。
以测定两次的方式，如果需要，可在不同的潜在的抑制剂浓度下(例如，在测定IC50值时)进行测量。除了靶酶17β-HSD1之外，其他甾体代谢酶也包括在试验中以研究雌激素衍生物的交叉反应性。
将3H-标记的底物、细菌混悬液、DMSO(对照批次；最终浓度1％)或潜在的抑制剂(在DMSO中的雌酮衍生物)及适宜的辅因子(NADP(H)或NAD(H)；水中5mg/ml)加入到确定体积的100mmol的磷酸钠缓冲液中。将样品在37℃水浴中于振摇下温育，使得在对照组(没有待测物质)中达到约30％的转化率。
在用1ml反相-(RP-18)-筒(cartridge)提取后，通过HPLC在RP18色谱柱上用乙腈∶水1∶1(v/v)作为流动相分离放射标记的底物和产物。借助于流体闪烁计数器检测放射性。
通过对底物和产物峰的积分评价在有和无待测物质的情况下的底物转化。对照的转化标准化为100％的转化率。
表1人类17β-羟基甾体脱氢酶的抑制
剂量通常，在治疗雌激素依赖性疾病和激素依赖性肿瘤疾病中，如果每日剂量包含每公斤体重5μg到50mg范围内的本发明化合物则可预期收到令人满意的结果。对于更大的哺乳动物，例如人，推荐的每日剂量在每千克体重10μg到30mg的范围内。
本发明化合物的适宜剂量为每天每公斤体重0.005至50mg，这取决于患者的年龄及体质，其中必需日剂量可以一次或多次给药。
可以使用本领域已知的方法通过将活性成分与常用于植物制剂的载体、填充剂、影响分解的物质、粘合剂、润湿剂、润滑剂、吸收剂、稀释剂、矫味剂、着色剂等一起加工并转化成预期的给药形式来配制基于该新化合物的药物制剂。就此而言，可参见Remington’s PharmaceuticalScience，15thEd.，Mack Publishing Company，East Pennsylvania(1980)。
对于口服给药，片剂、包衣片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、锭剂、混悬剂、乳剂或溶液尤其适宜。
对于非胃肠道给药，可以为注射剂及输液制剂。
对于关节内注射，可以采用相应地制备的晶体混悬液。
对于肌内内注射，可以采用水性或者油性注射液或者注射混悬液以及相应的储库型制剂。
对于直肠给药，该新化合物可以采用栓剂、胶囊剂、溶液(如以灌肠剂的形式)及软膏剂的形式进行全身及局部治疗。
对于肺部给药，该新化合物可以气雾剂及吸入剂的形式应用。
对于局部给药，可以为凝胶、软膏剂、油膏、乳膏、贴剂、散剂、乳剂及酊剂。要获得足够的药理作用，通式I的化合物在这些制剂中的剂量应为0.01％～20％。
本发明包括通式I的化合物及其在制备药物中的应用，尤其是在制备用于治疗能够受17β-羟基甾体脱氢酶抑制的积极影响的雌激素依赖性疾病。
本发明的通式I的化合物优选用于制备治疗男性及女性生殖腺、男性及女性性器官包括乳腺的激素依赖性肿瘤疾病尤其是前列腺癌或乳腺癌的药物。
另外，本发明的化合物优选用于制备治疗子宫内膜异位的药物。
本发明还涉及含有至少一种任选地以药物学/药理学相容的盐的形式存在的本发明化合物的药物组合物，其包含或者不包含药物学相容性的佐剂和/或载体。
这些药物组合物及药物可以提供为用于口服、直肠、阴道、皮下、经皮、静脉或肌内给药。除了常用的载体和/或稀释剂外，它们含有至少一种本发明的化合物。
以已知的方式适宜的剂量采用常用的固体或者液体载体或者稀释剂以及对应于所需的给药类型的制药技术常用的佐剂制备本发明的药物。优选的制剂在于适于口服给药的配制形式(dispensing form)。这种配制形式例如为片剂、薄膜片剂、包衣片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、溶液剂或者混悬剂或者储库形式。
含有至少一种本发明的化合物的药物组合物优选为经口服给药。
也可以考虑非胃肠道制剂如注射液。另外，例如也可以提及如栓剂及用于阴道施用的制剂。
相应的片剂可以通过例如将活性成分和如下已知的佐剂相混合而制备，例如惰性稀释剂如葡萄糖、糖、山梨醇、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮，崩解剂(explosive)如玉米淀粉、或海藻酸，粘合剂如淀粉或明胶，润滑剂如硬脂酸镁或滑石和/或用于实现储库作用的物质如羧聚乙烯(carboxyl polymethylene)、羧甲基纤维素、纤维素乙酸邻苯二甲酸酯或聚乙酸乙烯酯。该片剂还可以包括若干层。
因此，包衣片剂可以通过采用常用于片剂包衣中的物质如聚乙烯吡咯烷酮、虫胶、阿拉伯胶、滑石、氧化钛、或者糖对与片剂类似地制备的片芯包衣而制备。在这种情况下，该包衣片剂的壳还可以由若干层组成，其中可以使用上述片剂中提及的佐剂。
本发明通式I的化合物的溶液或混悬液可进一步包含味道改进剂，如糖精、环拉酸盐或糖，以及如香料如香草或柑桔提取物。此外，它们还包含混悬佐剂如羧甲基纤维素钠，或防腐剂如对羟基苯甲酸酯。
含有通式I的化合物的胶囊剂可以例如通过将通式I的化合物与惰性载体如乳糖或山梨醇相混合并装入明胶胶囊来制备。
适宜的栓剂可以例如通过与用于此目的的载体如中性脂肪或聚乙二醇或其衍生物相混合来制备。
本发明的化合物可以与一种或几种下列活性成分一起给药用于预防和治疗乳腺癌或前列腺癌或子宫内膜异位1)抗雄激素，如醋酸环丙孕酮、氟他胺、比卡鲁胺(casodex)等2)促性腺激素(GnRH)激动剂如醋酸那法瑞林喷鼻液(synarel)、醋酸亮丙瑞林(lupron)、布舍瑞林(busrelin)3)芳香化酶抑制剂如阿那曲唑、福美坦、来曲唑、依西美坦4)5α-还原酶抑制剂，如非那雄胺5)细胞生长抑制剂，如长春碱、柔红霉素6)VEGF-激酶抑制剂7)抗孕激素(antigestagen)，如奥纳司酮、米非司酮8)抗雌激素如他莫昔芬9)反义寡核苷酸10)EGF抗体此外，本发明通式I的化合物可以用于治疗和预防其他上述未提及的病理症状。
下列实施例用于更详细地阐述本发明的主题，但并不局限于这些实施例。
自17-酮衍生物开始，可制备17-环氧乙烷(M.Hübner，I.Noack，J.prakt.Chem.1972，314，667)及相应的源自其的17a-加碳衍生物(M.Hübner， K.Ponsold，Z.Chem.1982，22，186)。上述反应步骤可以在2-位官能化之前或之后进行。
2-位卤素的引入是通过文献(P.C.Bulman Page等，Tetrahedron 1990，46，2059)中对17-酮衍生物所述的临位铊化(ortho-thallation)来实施。
雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮衍生物的C2原子的官能化优选通过在文献中所述的傅克酰基化反应来进行(T.Nambara等，Chem.Pharm.Bull.1979，18，474)。在改变3-位的保护基之后，通过Baeyer-Villiger氧化来生成2-羧基-雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(M.B.Smith，J.March，March’sAdvanced Organic Chemistry，5thEdition，Wiley Sons 2001，1417-1418)。该酯经皂化并在碱性条件下用相应的卤代烷转化为2-烷基醚。3-位保护基的断裂采用文献中所述来进行(T.W.Greene，P.G.Wuts，protective Groupsin Organic Synthesis，Wiley & Sons，1999，249-275)。该方法或其他方法(P.N.Rao，J.W.Cessac，Steroids 2002，67，1065)可相应地用于17a-加碳衍生物。
相应的2-烷基衍生物可以从2-酰基衍生物通过用硼氢化钠还原、氢化及随后的Oppenauer氧化来制备(C.Djerassi，Org.React.1951，6，207)。
2-烯丙基的引入可以根据文献中所述通过Claisen重排来实施(L.Troisi等，Tetrahedron Lett.1999，40，1771)。也可以如下所述以与T.Buskas等(J.Org.Chem.2000，65，958)所述的相似方法进一步官能化。
2-位的较长、且不饱和或官能化的烷基可以通过较适宜的任选地经相应地保护的炔的Sonogashira偶合以及随后的(部分)氢化获得。
17a-酮的17-氟化可以按照A.C.Stalford等(Steroids 1997，62，750)或S.Stavber等(Synthesis 2002，2609)所述来进行。
16，17-脱氢衍生物的合成也可以用与已知方法(参见P.N.Rao等，Steroids 2002，67，1079)相似的方法来进行。
实施例制备方法实施例12-甲氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇1将3.61g 17α-叠氮甲基-3，17β-二羟基-2-甲氧基-雌甾-1，3，5(10)-三烯和7.5g碘化钠悬浮于250mL乙腈中并于室温下与15ml三甲基甲硅烷基氯缓慢混合。4小时后，加入另外4ml三甲基甲硅烷基氯，又过2.5小时后，将其与饱和硫代硫酸钠溶液及水混合并用二氯甲烷萃取(3×)。将合并的有机相用碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥并在旋转蒸发仪中蒸发浓缩。经快速色谱(环己烷/乙酸乙酯＝10∶1→7∶1→5∶1)得到2.12g(67％)无色晶体2-甲氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇1。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.13(s，3H；18-CH3)，2.62-2.71(m，1H；17-H)，2.77(dd，2H；6-CH2)，3.86(s，3H；2-OCH3)，5.48(s，1H；3-OH)，6.63，6.78(2s，2H；1-H，4-H)。
实施例22-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇2将307mg(851μmol)3-乙酰氧基-2-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯溶于24ml二氯甲烷/甲醇(2∶1)中并与45mg甲醇钠(sodium methanolate)混合。1.5小时后，用Amberlite IR120(H+)中和，过滤并在旋转蒸发仪中蒸发浓缩。经快速色谱(甲苯/乙酸乙酯＝25∶1)得到173mg(64％)无色晶体2-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇2。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(s，3H；18-CH3)，2.62-2.82(m，2H；17-H，6-CH2)，5.39(s，1H；3-OH)，6.72，7.21(2s，2H；1-H，4-H)。
实施例32-溴-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇3根据与P.C.Bulman Page等，Tetrahedron 1990，46，2059所述的用于17-酮衍生物的相似的方法来制备3。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(s，3H；18-CH3)，2.62-2.82(m，2H；17-H，6-CH2)，5.41(s，1H；3-OH)，6.73，7.34(2s，2H；1-H，4-H)。
实施例42-碘-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇4根据与P.C.Bulman Page等，Tetrahedron 1990，46，2059所述的用于17-酮衍生物的相似的方法来制备4。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(s，3H；18-CH3)，2.62-2.71(ddd，J＝6.8，14.1，14.1Hz，1H；17-H)，2.77-2.81(m，2H；6-CH2)，5.29(s，1H；3-OH)，6.71，7.52(2s，2H；1-H，4-H)。
实施例52-氯-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5a和2-氯-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5b在10ml甲醇中在氧化铝上将60mg(188μmol)2-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇2与约190mg 1-氟-4-羟基-1，4-二氮鎓-二环[2，2，2]-辛烷双(四氟硼酸盐)回流5小时，冷却至室温，与1N盐酸混合并用二氯甲烷萃取。将有机相干燥并在旋转蒸发仪中蒸发浓缩。经HPLC纯化(Chiracel OJ-H，正庚烷/2-丙醇＝6∶4)得到各自约为10mg的无色固体2-氯-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5a和2-氯-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5b。
5a1H-NMR(CDCl3)δ＝1.13(s，3H；18-CH3)，5.32(ddd，JHF＝48.8，JHH＝7.4，12.5Hz，1H；17β-H)，6.72，7.21(2s，2H；1-H，4-H)-19F-NMR(CDCl3)δ＝-192.20(dd，J＝48.9，12.8Hz)。
5b1H-NMR(CDCl3)δ＝1.21(d，J＝3.1Hz，3H；18-CH3)，4.86(ddd，JHF＝49.2，JHH＝3.9，6.6Hz，1H；17α-H)，6.73，7.20(2s，2H；1-H，4-H)-19F-NMR(CDCl3)δ＝-183.02～-183.28(m)。
实施例62-(2-苯基乙基)-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇6将56mg(123μmol)3-乙酰氧基-2-碘-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯溶于8ml三乙胺/THF(3∶1)中，并与3mg醋酸钯(II)、5mg碘化亚铜(I)、6.5mg三苯基膦及26μl苯基乙炔混合并在室温下于氩气下搅拌45分钟。然后用乙酸乙酯稀释，用1N盐酸、饱和碳酸氢钠溶液及标准盐溶液洗涤，干燥并在旋转蒸发仪中蒸发浓缩后，经快速色谱纯化(环己烷/乙酸乙酯10∶1→5∶1)得到42mg(80％)棕黑色晶体3-乙酰氧基-2-(2-苯基乙炔基)-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(s，3H；18-CH3)，2.35(s，3H，COCH3)，6.82，7.50(2s，2H；1-H，4-H)，7.31-7.48(m，5H；Ph)-13C-NMR(CDCl3)δ＝16.79，20.84，22.87，25.59，25.80，26.22，29.75，32.33，37.08，38.14，42.89，48.17，50.17，84.58，92.92，114.101，121.64，122.91，128.12，129.82，131.24，137.92，138.52，148.90，168.97，215.83。
将27mg(63μmol)3-乙酰氧基-2-(2-苯基乙炔基)-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯溶于10ml乙酸乙酯/THF(9∶1)中，并与3滴乙酸和55mg钯/活性碳(10％)混合，氢化3小时。然后，将催化剂滤出，在旋转蒸发仪中蒸发浓缩并与甲苯共蒸发数次。将残余物溶于6ml二氯甲烷中，与20ml甲醇及100mg甲醇钠混合并搅拌2小时。然后用Amberlite IR120(H+)中和，过滤并在旋转蒸发仪中蒸发浓缩。经快速色谱(环己烷/乙酸乙酯＝5∶1)得到16mg(65％)无色针状物2-(2-苯基乙基)-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇6。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.13(s，3H；18-CH3)，2.85-2.89(m，4H，PhCH2)，4.46(s，1H；OH)，6.48，7.02(2s，2H；1-H，4-H)，7.19-7.30(m，5H；Ph)。
实施例72-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇7将315mg(1.11mmol)17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇溶于5ml无水DMF中，并与1.8g碳酸铯及1ml烯丙基溴混合并加热至60℃ 3小时。然后与乙酸乙酯混合并用水及标准盐溶液洗涤。分离有机相，干燥并在旋转蒸发仪中蒸发浓缩。经快速色谱(环己烷/乙酸乙酯＝40∶1→20∶1→10∶1)得到322mg(89％)无色晶体3-烯丙氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(d，3H；18-CH3)，2.62-2.71(m，1H，17-H)，2.83-2.86(m，2H；6H)，4.50(d，J＝5.0Hz，2H；OCH2)，5.26(dd，J＝1.2，10.5Hz，＝CHH)，5.37(dd，J＝1.2，17.2Hz，＝CHH)，5.99-6.07(m，1H；CH＝CH2)，6.63(d，J＝2.3Hz，1H；4-H)，6.72(dd，J＝2.3，8.2Hz，1H；2-H)，7.20(d，J＝8.6Hz，1H；1-H)。
于氩气下将315mg(971μmol)3-烯丙氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯溶于25ml二乙基苯胺中并回流8小时。然后将其与乙酸乙酯混合并用1N盐酸及标准盐溶液洗涤。分离有机相、干燥并在旋转蒸发仪中蒸发浓缩。经快速色谱(环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)得到312mg(99％)两种无色泡沫的区位异构体混合物。经HPLC分离(ChirapakAD-H，正庚烷/2-丙醇＝8∶2)得到108mg无色晶体2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇7。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(d，3H；18-CH3)，2.62-2.71(m，1H，17-H)，2.78-2.82(m，2H；6H)，3.37(d，J＝6.3Hz，2H；OCH2CH＝)，4.89(s，1H；OH)，5.12-5.18(m，2H；＝CH2)，5.94-6.05(m，1H；CH＝CH2)，6.54，7.02(2s，2H；1-H，4-H)。
实施例82-溴-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇81H-NMR(CDCl3)δ＝1.05(d，3H；18-CH3)，2.62-2.71(m，1H；17-H)，5.95(dd，J＝2.5，10.0Hz，1H；＝CH)，6.87-6.91(m，1H，＝CH)，6.74，7.36(2s，2H；1-H，4-H)-13C-NMR(CDCl3)δ＝15.63，25.64，25.85，27.13，29.28，32.08，38.81，42.34，44.45，45.32，107.42，115.37，127.56，128.61，133.76，137.46，147.25，149.79，205.04。
权利要求
1.通式I的2-取代D-加碳-雌甾三烯及其药物学可接受的盐 其中R2是指C1-C8-烷基、芳烷基或烷基芳基、C1-C8-烷氧基或卤素原子；R13是指氢原子或甲基，R17是指氢原子或氟原子，其中该甾体分子的B-和D-环中的虚线部分可以为另外的双键。
2.如权利要求1所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯，其特征在于R2是C1-C5-烷氧基、C1-C5-烷基或C2-C3-烯基或溴或氯。
3.如权利要求1所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯，其中R2是甲氧基或乙氧基、甲基、乙基或丙基以及烯丙基。
4.如权利要求1所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯，其中R13是氢原子。
5.如权利要求1所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯，即1)2-甲氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇12)2-乙氧基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇3)2-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇24)2-溴-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇35)2-碘-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇46)2-氯-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5a7)2-氯-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇5b8)2-溴-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇9)2-溴-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇10)2-(2-苯基乙基)-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇611)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇712)2-烯丙基-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇13)2-烯丙基-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇14)2-氯-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇15)2-溴-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇816)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇17)2-丙基-17a-氧代-17a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇18)2-甲氧基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇19)2-乙氧基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇20)2-氯-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇21)2-溴-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇22)2-碘-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇23)2-氯-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇24)2-氯-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇25)2-溴-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇26)2-溴-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇27)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇28)2-烯丙基-17α-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇29)2-烯丙基-17β-氟-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇30)2-氯-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇31)2-溴-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇32)2-烯丙基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇33)2-丙基-17a-氧代-17a-加碳-18a-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇。
6.如权利要求1至5之一所述的2-取代D-加碳雌甾-1，3，5(10)-三烯在制备药物中的应用。
7.如权利要求6所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯的应用，其用于制备预防和治疗能够受17β-羟基甾体脱氢酶抑制的积极影响的雌激素依赖性疾病的药物。
8.如权利要求6或7的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯的应用，其中至少一种其他的活性成分联合用于制备药物。
9.如权利要求8的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯的应用，其中所述其他的活性成分为抗雄激素、抗孕激素、芳香化酶抑制剂或抗雌激素。
10.如权利要求6至9之一所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯的应用，其用于制备预防和治疗男性及女性生殖腺、男性及女性性器官包括乳腺的激素依赖性肿瘤疾病的药物。
11.如权利要求10所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯的应用，其用于制备预防和治疗乳腺癌的药物。
12.如权利要求10所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯的应用，其用于制备预防和治疗前列腺癌的药物。
13.如权利要求10所述的2-取代D-加碳-雌甾-1，3，5(10)-三烯的应用，其用于制备治疗子宫内膜异位的药物。
14.一种药物组合物，其包含至少一种如权利要求1至5之一所述的通式I的化合物和任选的至少一种其他的活性成分以及药物学相容性佐剂和/或载体，其中所述其他的活性成分为抗雄激素、抗孕激素、芳香化酶抑制剂或抗雌激素。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的新型2－取代D－加碳－雌甾－1，3，5(10)－三烯及其药物学可接受的盐，其制备以及作为预防和治疗受17β－羟基甾体脱氢酶1抑制所影响的雌激素依赖性疾病的药物制剂的应用，其中R
文档编号A61P5/00GK1980949SQ200580022571
公开日2007年6月13日 申请日期2005年7月4日 优先权日2004年7月2日
发明者克里斯蒂安·格格, 韦尔科·雷根哈特, 奥拉夫·彼得斯, 亚历山大·希尔利施, 泽西·阿达姆斯基, 加布里埃莱·穆尔勒, 多明加·德鲁卡, 瓦尔特·埃尔格, 伯吉特·施奈德 申请人:舍林股份公司