用于癌症治疗的吡唑基氨基取代的喹唑化合物的制作方法

专利名称：用于癌症治疗的吡唑基氨基取代的喹唑化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及这里定义的式(I)或式(I′)化合物及其盐。用于药物组合物的盐应是可药用的盐，但其它的盐可能在式(I)或式(I′)化合物及其可药用盐的制备中有用。本发明的可药用盐可以包括例如具有足够的成盐碱性的本文中定义的式(I)或式(I′)化合物的酸加成盐。这些酸加成盐包括但不限于富马酸盐、甲磺酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、柠檬酸盐和马来酸盐，以及与磷酸和硫酸形成的盐。此外，在式(I)或式(I′)化合物具有足够酸性的情形，形成的盐是碱盐，实例包括但不限于碱金属盐如钠或钾盐，碱土金属盐如钙或镁盐，或有机胺盐，如三乙烯、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、吗啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、二苄基胺或者氨基酸如赖氨酸的盐。
式(I)化合物也可以作为体内可水解的酯的形式提供。含羟基的式(I)化合物的体内可水解的酯是例如可药用的酯，它在人体或动物体内裂解，产生母体酸或醇。这些酯可以通过以例如静脉内的方式向试验动物施用所试验的化合物并随即检验试验动物的体液来鉴定。式(I′)化合物是式(I)化合物的体内可水解的酯的实例。
适合羟基的可药用酯包括无机酯，例如磷酸酯(包括氨基磷酸环酯)和α-乙酰氧基烷基醚，以及由于酯在体内水解而分解形成母体羟基的有关化合物。α-酰氧基烷基醚的实例包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰氧基甲氧基。对于羟基，可选择的形成体内可水解的酯的基团包括C1-10烷酰基，例如甲酰基、乙酰基；苯甲酰；苯乙酰基；取代的苯甲酰和苯乙酰基；C1-10烷氧羰基(给出烷基碳酸酯)，例如乙氧羰基；二C1-4烷基氨基甲酰和N-(二C1-4烷基氨基乙基)-N-C1-4烷基甲酰(给出氨基甲酸酯)；二C1-4烷基氨基乙酰和羧基乙酰基。苯乙酰基和苯甲酰基上的环形取代基的实例包括氨甲基，C1-4烷基氨甲基和二(C1-4烷基)氨甲基，以及从环氮原子出发经由亚甲基连接基团与苯甲酰环的3位或4位连接的吗啉基或哌嗪基。其它有意义的可体内水解的酯包括例如RAC(O)OC1-6烷基-CO-，其中RA是例如苄氧基-C1-4烷基或苯基。这类酯中的苯基上的合适取代基包括例如4-C1-4哌嗪-C1-4烷基，哌嗪-C1-4烷基和吗啉-C1-4烷基。
式(I)化合物也可以以前药的形式服用，前药在人体或动物体内分解形成式(I)化合物。前药的实例包括式(I)化合物的可体内水解的酯。前药的各种形式是本领域已知的。关于这类前药衍生物的实例，参见 a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard编，(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology，Vol.42，p.309-396，K.Widder等编(Academic Press，1985)； b)A Textbook of Drug Design and Development，Krogsgaard-Larsen and H.Bundgaard编，第5章“Design and Application ofProdrugs”，H.Bundgaard p.113-191(1991)； c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38(1992)； d)H.Bundgaard等，Journal of Pharmaceutical Sciences，77，285(1988)；和 e)N.Kakeya等，Chem Pharm Bull，32，692(1984)。
对于式(I)和/或式(I′)化合物，R1、R4、R5、n和X的具体意义如下。这些意义可在适当的情形与本文中确定的任何定义、权利要求或实施方案一起使用。
在本发明的一种情形，R1是任选被甲氧基取代的C1-4烷氧基。在另一情形，R1是甲氧基、乙氧基或甲氧基乙氧基。
在本发明的一种情形，R4是任选被1或2个氟或氯取代的苯基。在另一情形，R4是苯基、3-氟苯基、2，3-二氟苯基、2，4-二氟苯基、2，5-二氟苯基、3，5-二氟苯基、2-氟-3-氯苯基或2-氟-4-氯苯基。在又一情形，R4是3-氟苯基或2，3-二氟苯基。
在本发明的一种情形，R5是氢、甲基、乙基或异丙基、在另一情形，R5是氢或甲基。
在本发明的一种情形，n是0。
在本发明的一种情形，X是CH2、NH或NMe。在另一情形，X是CH2。
对于式(I)化合物，R2和R3的具体意义如下。这些意义可在适当场合与本文中确定的任何定义，权利要求或实施方案一起使用。
在本发明的一种情形，R2是2-羟基乙基、(1S)-2-羟基-1-甲基乙基、(1S)-2-羟基-1-乙基乙基、(1S)-2-羟基-1异丙基乙基或(1S)-2-羟基-1-(甲氧基甲基)乙基。在另一情形，R2是2-羟基乙基或(1S)-2-羟基-1-甲基乙基。
在本发明的一种情形，R3是氢、甲基、乙基或甲氧基乙基。
在本发明的一种情形，R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成
式(IC) 在另一情形，R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成

或
其中*是与式(I)的连接点；或者R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧乙氧基。
在另一情形，R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点；或者R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧乙氧基。
在又一情形，R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点。
对于式(I′)化合物，R2′和R3′的具体含义如下。这些含义可在适当场合与本文中确定的任何定义、权利要求或实施方案一起使用。
在本发明的一种情形，R2′是2-膦酰氧乙基、(1S)-2-膦酰氧基-1-甲基乙基、(1S)-2-膦酰氧基-1-乙基乙基、(1S)-2-膦酰氧基-1-异丙基乙基或(1S)-2-膦酰氧基-1-(甲氧基甲基)乙基。在另一情形，R2′是2-膦酰氧基乙基或(1S)-2-膦酰氧基-1-甲基乙基。
在本发明的一种情形，R3′是氢、甲基、乙基或甲氧基乙基。
在本发明的一种情形，R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成
式(IC’) 在另一情形，R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成

或
其中*是与式(I)的连接点；或者R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧基乙氧基。
在另一情形，R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点；或者R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧乙氧基。
在又一情形，R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点。
一类特别的化合物是式(I)化合物或其盐、酯或前药，其中 R1是任选被甲氧基取代的C1-4烷氧基； R2是式(IA)基团，其中*是与式(I)的连接点；
式(IA) R3是氢或任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷基； 或者R2和R3与它们连接的氮原子一起形成一个式(IB)的环，其中*是与式(I)的连接点；
式(IB) 或者R2和R3与它们连接的氮原子一起形成一个式(IC)的环， 其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是任选被甲氧基取代的C2-4烷氧基；
式(IC) R4是任选被1或2个氟或氯取代的苯基； R5是氢、甲基、乙基或异丙基； n是0或1；和 X是CH2、NH或NMe。
一类特别的化合物是式(I)化合物或其盐、酯或前药，其中 R1是甲氧基、乙氧基或甲氧乙氧基； R2是2-羟基乙基、(1S)-2-羟基-1-甲基乙基、(1S)-2-羟基-1-乙基乙基、(1S)-2-羟基-1-异丙基乙基或(1S)-2-羟基-1-(甲氧基甲氧基)乙基； R3是氢、甲基、乙基或甲氧基乙基； 或者R2和R3与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(1)的连接点；或者R2和R3与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点；条件是，R1是乙氧基或甲氧乙氧基；和 R4是苯基，3-氟苯基，2，3-二氟苯基，2，4-二氟苯基，2，5-二氟苯基，2-氟-3-氯苯基或2-氟-4-氯苯基。
另一类特别的化合物是式(I)化合物或其盐、酯或前药，其中 R1是甲氧基、乙氧基或甲氧乙氧基； R2是2-羟基乙基或(1S)-2-羟基-1-甲基乙基； R3是氢，甲基，乙基或甲氧基乙基；或者 R2和R3与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点；和 R4是3-氟苯基或2，3-二氟苯基。
一类特别的化合物是式(I′)化合物或其盐，其中 R1是任选被甲氧基取代的C1-4烷氧基； R2′是式(IA)基团，其中*是与式(I)的连接点；
式(IA’) R3′是氢或任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷基； 或者R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成一个式(IB)的环，其中*是与式(I)的连接点；
式(IB’) 或者R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成一个式(IC′)的环，其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是任选被甲氧基取代的C2-4烷氧基；
式(IC’) R4是任选被1或2个氟或氯取代的苯基； R5是氢、甲基、乙基或异丙基； n是0或1；和 X是CH2、NH或NMe。
一类特别的化合物是式(I′)化合物或其盐，其中 R1是甲氧基、乙氧基或甲氧乙氧基； R2′是2-膦酰氧乙基或(1S)-2-膦酰氧-1-甲基乙基； R3′是氢、甲基、乙基或甲氧基乙基； 或者R2′和R3′与它们连接的氮原子一起形成
其中*是与式(I)的连接点； R4是3-氟苯基或2，3-二氟苯基。
本发明的具体实施方案是以下化合物的任何一种或其任何组合 N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1 H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟基乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(3-氟苯基)-2-(3-{[5-(2-{[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]氨基}乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟基乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[乙基(2-羟基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[乙基(2-羟乙基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}喹啉唑-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； 或其盐、酯或前药，特别是其可药用的盐。
本发明的另一些具体的实施方案是以下任何化合物或其任何组合 N-(3-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-2羟基-1-甲基乙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-1-(羟甲基)丙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-1-(羟甲基)-2-甲基丙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1R)-2-羟基-1-(甲氧基甲基)乙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； 2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}-N-苯基乙酰胺； N-(2，4-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(3，5-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，5-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺； N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(4-氯-2-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； N-(3-氯-2-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺； 或其盐、酯或前药，特别是其可药用的盐。
本发明的进一步的实施方案是任何以下化合物或其任何组合 2-[(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)(甲基)氨基]乙基磷酸二氢酯； 2-[(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)(乙基)氨基]乙基磷酸二氢酯； [(2S)-1-(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)吡咯烷-2-基]甲基磷酸二氢酯； 2-{[2-({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基](2-甲氧基乙基)氨基}乙基磷酸二氢酯； {(2S)-1-[2-({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基]吡咯烷-2-基}甲基磷酸二氢酯； 2-{[2({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基](甲基)氨基}乙基磷酸二氢酯；和 (2S)-2-{[2-({4-[(5-{2-[(3-氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基]氨基}丙基磷酸二氢酯； 或其盐，特别是其可药用的盐。
本发明还提供了一种制备式(I)化合物或其盐、酯或前药的方法，该方法包括使其中L1是离去基团如卤素(例如氯)的式(II)化合物
式(II) 与式(III)的胺反应
式(III) 其中R1、R2、R3和R4如同本文中的定义，然后如果需要 (i)将式(I)化合物转化成另一式(I)化合物； (ii)除去任何保护基团；和/或 (iii)形成盐、酯或前药。
此方法的合适反应条件包括将式(II)化合物与过量的式(III)的胺在惰性溶剂如二甲基乙酰胺中，在加或不加合适催化剂(例如碘化四丁铵或碘化钾)的条件下于50-100℃的温度反应12至72小时。或者是，式(II)中的离去基团L1可以是甲醛，在这种情形，与胺(III)的反应可以在还原条件下用还原剂例如氰基硼氢化钠进行。
式(III)的胺是本领域已知的，或者可以由专业人员用本领域已知的方法制备。
本发明方法可以进一步包括一种制备式(II)化合物的方法，该方法包括其中L2是一个离去基团例如卤素(例如氯)的式(IV)化合物
式(IV) 与式(V)化合物反应
式(V) 此反应可以在文献中描述的各种条件下进行，例如将式(IV)化合物与式(V)化合物在溶剂如异丙醇或二甲基乙酰胺中，于酸性催化剂如盐酸存在或不存在下，如20-100℃的温度加热2-24小时。
本发明方法也可以是包括一种制备式(II)化合物的方法，该方法包括式(VI)化合物
式(VI) 与式(VII)化合物反应
式(VII) 其中L1如同本文中所述。
此反应可以在文献中所述的各种条件下进行，例如将式(VI)化合物与式(VII)化合物在溶剂如四氢呋喃中，于合适的偶联剂如偶氮二羧酸二叔丁酯及合适的膦如三苯膦在20-60℃的温度下偶联1-5小时。
此方法还可以包括一种制备式(II)化合物的方法，该方法包括式(VIII)化合物
式(VIII) 其中L1如同本文中定义，与式(IX)化合物反应 R4-NH2 式(IX) 此反应可以在文献中所述的各种条件下进行，例如式(VIII)化合物与式(IX)化合物在溶剂如二甲基甲酰胺中，于合适的偶联剂如五氟苯基三氟乙酸和吡啶存在下，在0-60℃下偶联1-24小时。
式(IV)化合物可以由式(X)化合物
与合适的氯化剂例如磷酰氯在合适的溶剂如1，2-二氯乙烷或乙腈中，于合适的碱如二异丙基乙胺存在下，在0-80℃反应2-24小时制备。
式(X)化合物或是已知化合物，或是可以用常规方法制备。特别是，式(X)化合物可以通过式(XI)化合物
其中PG1是合适的保护基团，例如新戊酰氧甲基，与式(XII)化合物反应，随后除去保护基团PG1来制备 R1-OH 式(XII) 其中R1如同本文中的定义。
此反应可以在文献中所述的各种条件下进行，例如式(XI)化合物与式(XII)化合物在溶剂如四氢呋喃中于合适的偶联剂如偶氮二羧酸二叔丁酯和合适的膦如三苯膦存在下，在20-60℃的温度下偶联1-5小时。
式(XI)化合物或是已知化合物，或是可以用常规方法制备。特别是，式(XI)化合物可以通过以下方法来制备式(XIII)化合物
式(XIII) 其中PG1和PG2是合适的保护基团，例如分别为新戊酰氧基甲基和苄基，与式(VII)化合物在溶剂例如四氢呋喃中，于合适的偶联剂例如偶氮二羧酸二叔丁酯和合适的膦例如三苯膦存在下，在20-60℃的温度反应1-5小时，然后除去保护基团PG2。
式(XIII)化合物按照文献方法制备，特别是，其中PG1是新戊酰氧基甲基、PG2是苄基的化合物，是文献中已知的化合物。
本发明方法还可以包括一种制备式(VI)化合物的方法，该方法包括式(XIV)化合物
式(XIV) 与合适的去甲基化试剂，例如吡啶盐酸盐，在合适的溶剂例如吡啶中，于90-110℃反应5-8小时。
式(XIV)化合物可以通过式(XV)化合物与式(V)化合物反应制备
式(XV) 其中L3是一个离去基团例如卤素(如氯)。此反应可以在文献中描述的各种条件下进行，例如将式(XV)化合物与式(V)化合物在溶剂例如异丙醇或二甲基乙酰胺中，于酸性催化剂如盐酸存在下，在20-100℃的温度下加热2-24小时。
式(XV)化合物或是已知化合物，或是可以用常规方法制备。特别是，式(XV)化合物可通过以下方法制备式(XVI)化合物
式(XVI) 与合适的氯化剂，例如磷酰氯，在合适的溶剂例如1，2-二氯乙烷或乙腈中，在合适的碱如二异丙基乙胺存在下，于0-80℃的温度反应2-24小时。
式(XVI)化合物是已知化合物，或是可以用常规方法制备。特别是，式(XVI)化合物可以通过式(XVII)化合物
式(XVII) 与甲醇钠在合适的溶剂如二甲基甲酰胺中于例如110℃下反应12-24小时来制备。
式(XVII)化合物或是已知化合物，或是可以用常规方法制备。特别是，式(XVII)化合物可以由其中R1如本文中定义的式(XII)化合物与5，7-二氟喹唑酮在溶剂(例如二甲基甲酰胺)中于例如90℃的温度下反应2-12小时来制备。
本发明方法还可包括一种制备式(V)化合物的方法，该方法包括式(XVIII)化合物
式(XVIII) 与式(IX)化合物，在偶联剂例如三氟乙酸五氟苯基酯和吡啶存在下，在溶剂例如二甲基甲酰胺中，于惰性和无水条件下反应。
式(XVII)化合物按照文献方法制备。
本发明方法还可以包括一种制备式(VIII)化合物的方法，该方法包括式(IV)化合物与式(XVIII)化合物反应。此反应可在文献中描述的各种条件下进行，例如，式(IV)化合物与式(XVIII)化合物在溶剂如异丙醇或二甲基乙酰胺中，于酸性催化剂如盐酸存在或不存在下，在20-100℃的温度进行偶联反应2-24小时。
在另一方面，本发明提供了一种制备式(I′)化合物或其盐的方法，该方法包括将式(I)化合物通过合适的羟基磷酸化，转化成式(I′)化合物，随后如有必要 i)将式(I′)化合物转化成另一种式(I′)化合物； ii)除去任何保护基团；和/或 iii)形成盐。
磷酸化适合用以下方式进行用1-H四唑(或合适的替代物如S-乙基四唑或盐酸吡啶)和二叔丁基二乙基亚磷酰胺在5-35℃于惰性气氛下处理30分钟至4小时，随后用氧化剂例如间氯过苯甲酸(mCPBA)或30％过氧化氢水溶液在-10℃至25℃处理2-18小时。作为使用这些试剂的最后步骤，需要去掉保护基团叔丁基以得到磷酸酯基团，这容易用4.0N盐酸在1，4-二烷中于10-35℃处理12-18小时来完成。
应该理解，本发明化合物中各种环取代基中有一些可以在上述方法之前或紧接其后，利用标准的芳香取代反应引入，或是利用常规的官能基改性法产生，因此被包括在本发明的方法之中。这些反应和改性包括，例如，利用芳香取代反应、取代基的还原、取代基的烷基化和取代基的氧化，引入取代基。这些步骤使用的试剂和反应条件是化学领域所熟知的。芳香取代反应的具体实例包括利用浓硝酸引入硝基；利用酰基卤和Lewis酸(例如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下引入酰基；利用烷基卤化物和Lewis酸(例如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下引入烷基；和引入卤素基团。改性的具体实例包括利用例如镍催化剂进行催化氢化或在盐酸存在下用铁加热处理，将硝基还原成氨基；将烷硫基氧化成烷基亚磺酰或烷基磺酰基。
还应该理解，在本文所述的一些反应中，可能必须/希望保护化合物中的任何敏感基团。需要或者最好是保护的情形以及合适的保护方法是本领域专业人员所了解的。可以根据标准作法使用常规的保护基团(实例见T.W.Green，Protective Groups in Organic Synthesis，JohnWiley and Sons，1991)。因此，如果反应物中包含诸如氨基、羧基或羟基等基团，最好是在所述的一些反应中将该基团保护。
一种适合氨基或烷基氨基的保护基团是例如酰基，如烷酰基，例如乙酰基；烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基；芳基甲氧基羰基，例如苄氧基羰基；或芳酰基，例如苯甲酰基。对以上保护基团的去保护条件，必须随所选择的保护基团而变。例如，酰基如烷酰基或烷氧羰基或芳酰基，可以用合适的碱例如碱金属氢氧化物，如氢氧化锂或钠，水解去除。或者是，酰基例如叔丁氧基羰基，可以例如通过用合适的酸如盐酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸处理来去除，而芳基甲氧基羰基例如苄氧基羰基，可以例如通过在催化剂(如钯、碳)上加氢，或者用Lewis酸例如三(三氟乙酸)硼处理来去除。对于伯氨基，另一种合适的保护基团是例如邻苯二甲酰基团，它可以利用烷基胺，例如二甲基氨基丙胺，或用肼处理来去除。
一种适合羟基的保护基是酰基，例如烷酰基(如乙酰基)，芳酰基(例如苯甲酰基)或芳基甲基(例如苄基)。以上保护基团的去保护条件必然随保护基团的选择而变。例如，酰基，例如烷酰基或芳酰基，可以利用合适的碱，例如碱金属氢氧化物，如氢氧化锂或氢氧化钠，进行水解来去除。或者是，芳基甲基例如苄基，可通过在催化剂如钯/碳上氢化来去除。
一种适合羧基的保护基团是例如酯化基团，例如甲基或乙基，它可以利用例如氢氧化钠等碱通过水解来去除，或叔丁基，它可以利用酸例如有机酸(如三氟乙酸)处理来去除，或例如苄基，它可通过在催化剂如钯/碳上氢化来去除。
保护基团可以在合成的任何合适的阶段用化学领域熟知的常规技术去除。
根据本发明的又一方面，提供了一种药物组合物，其中包含本文中定义的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药和与其结合的可药用的稀释剂或载体。
还提供了一种药物组合物，其中包含一种本文中定义的式(I′)化合物或其可药用的盐，和与其结合的可药用的稀释剂或载体。
本发明的组合物可以是适合口服(例如片剂、锭剂、软或硬胶囊、水基或油基混悬剂、乳剂、可分散的粉剂或粒剂、糖浆剂或酏剂)、局部使用(例如乳膏剂、油膏剂、凝胶、水基或油基溶液或混悬剂)、吸入给药(例如细分的粉末或液体气溶胶)、吹入给药(例如细分的粉末)或非肠道给药(例如无菌的水基或油基溶液，用于静脉内、皮下、肌内给药或以栓剂形式用于直肠给药)的形式。
本发明组合物可以使用本领域熟知的常规药用赋形剂，用通常的步骤得到。例如，计划口服使用的组合物可以含有一种或多种着色剂，甜味剂、风味剂和/或防腐剂。
适合片剂的可药用赋形剂包括，例如，惰性稀释剂，例如乳糖、碳酸钠、磷酸钙或碳酸钙；成粒和崩解剂，例如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石；防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯；以及抗氧化剂，例如抗坏血酸。片剂可以是未包衣的，或者是包衣的，以便改变其在胃肠道内的崩解和随后的活性成分的吸收，或是改善其稳定性和/或外观，在每种情形，均使用本领域熟知的常规包衣剂和步骤。
用于口服的组合物可以是硬明胶胶囊的形式，其中活性成分与一种惰性固体稀释剂，例如碳酸钙，磷酸钙或高岭土混合，或采用软明胶胶囊的形式，其中活性成分与水或与油(例如花生油、液体石蜡、大豆油、椰子油，优选橄榄油)或任何其它的可接受的载液混合。
水基悬浮液通常含有细小的粉状活性成分以及一种或几种悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂，例如卵磷酯或者氧化烯与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十六烷醇聚氧乙烯(17)醚，或环氧乙烷与自脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物，例如山梨醇聚氧乙烯醚单油酸酯，或环氧乙烷与自脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯失水山梨醇醚单油酸酯。水基悬浮液还可含有一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧化剂(例如抗坏血酸)、着色剂、风味剂和/或甜味剂(例如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
油基悬浮液可以通过将活性成分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油(例如液体石蜡)中来配制。油基悬浮液还可含有一种增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或十六烷醇。可以加入例如上面提到的甜味剂以及风味剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可以通过加入烷氧化剂例如抗坏血酸来防腐。
适合通过加水制成水基混悬液或溶液的可分散的或冷冻干燥的粉末和颗粒一般含有活性成分以及分散或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂。合适的分散剂或润湿剂及悬浮剂的实例是上面已提到的那些。还可以存在另外的赋形剂，例如甜味剂、风味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以是水包油型乳状液的形式。油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油，或是矿物油，例如液体石蜡或它们中任何的混合物。合适的乳化剂可以是例如天然存在的树胶，例如阿拉伯树胶或黄蓍胶；天然存在的磷脂，例如大豆磷脂、卵磷脂；以及由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯(例如失水山梨醇单油酸酯)和该偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯失水山梨醇醚单油酸酯。乳剂中还可含有甜味剂、风味剂和防腐剂。
糖浆剂和酏剂可以用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇、天冬甜素或蔗糖酏制，并且还可含有缓和剂、防腐剂、风味剂和/或着色剂。
药物组合物还可以是无菌注射用的水基或油基混悬剂、溶液剂、乳剂或特别体系，它们可以按照已知步骤使用上面提到的一种或多种合适的分散或润湿剂和悬浮剂配制。无菌注射制剂还可以是在无毒的可肠外使用的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如在聚乙二醇中的溶液。
栓剂可以通过活性成分与合适的无刺激性赋形剂混合来制备，该赋形剂在常温下是固体，但在直肠温度为液体，因此会在直肠中熔化并释放出药物。合适的赋形剂包括例如可可脂和聚乙二醇。
局部用制剂，例如乳膏、油膏、凝胶和水基或油基的溶液剂或混悬剂，一般可通过将活性成分与常规的可局部使用的载液或稀释剂用本领域所熟知的常规步骤配制来得到。
用于吹入给药的组合物可以是细分的粉末形式，所含颗粒的平均直径为例如30μm或者小得多，优选5μm或更小，更优选为5-1μm，粉末本身或是只含活性成分，或是被一种或多种生理上可接受的载体例如乳糖稀释。用于吹入给药的粉末宜保存在含例如1-50mg活性成分的胶囊中，与一种特伯吹入器(例如用于吹入已知的色甘酸钠药剂所用的)一起使用。
用于吸入给药的组合物可以是安排成以含细分的固体或液滴的气溶胶形式分送活性成分的常规的喷雾气溶胶的形式。可以使用常用的气溶胶推进剂，例如挥发性的氟化烃或烃，气溶胶装置被方便地安排成分送计量数量的活性成分。
关于配制的进一步信息，读者可参阅Comprehensive MedicinalChemistry(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board，PergamonPress 1990)一书的第5卷第25.2章。
因此，在本发明的另一方面，提供了一种用于治疗的式(I)化合物或其可药用盐、酯或前药。此外还提供了用于治疗的式(I′)化合物或其可药用的盐。
还提供了用来作为药物的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药，以及用来作为药物的式(I′)化合物，或其可药用的盐。本发明的另一方面提供了式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药，用来作为药物用于治疗过度增生性疾病，例如癌症，特别是用于治疗结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或白血病或淋巴癌中的任何一种或任何组合。还提了式(I′)化合物或其可药用的盐，用来作为药物用于治疗过度增生性疾病，例如癌症，特别是用于治疗结直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中的任何一种或其组合。
另外，还提供了用于温血动物例如人的治疗方法的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药。还提供了用于温血动物例如人的治疗方法的式(I′)化合物或其可药用的盐。本发明的另一方面提供了一种式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药，以用于过度增生性疾病例如癌症的治疗方法，特别是结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中的任何一种或任何组合的治疗。还提供了一种式(I′)化合物或其可药用的盐，以用于过度增生性疾病例如癌症的治疗方法，特别是结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中任何一种或任何组合的治疗。
在本发明的另一方面，提供了式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药在制备用于治疗会得益于抑制一种或多种Aurora激酶的疾病的药物中的应用。还提供了式(I′)化合物或其可药用的盐，在制备用于治疗会得益于抑制一种或多种Aurora激酶的疾病的药物中的应用。特别是，预期对Aurora A激酶和/或Aurora B激酶的抑制会是有益的。优选从抑制Aurora B激酶中受益。在本发明的另一方面，提供了式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药在制备药物中的应用，该药物用于治疗过度增生性疾病例如癌症，特别是用于治疗结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中的任何一种或其任何组合。还提供了式(I′)化合物或其可药用的盐在制备药物中的应用，该药物用于治疗过度增生性疾病，例如癌症，特别是用于治疗结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中的任何一种或其任何组合。
根据另一方面，提供了一种式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药，以用于治疗患有会从抑制一种或多种Aurora激酶中受益的疾病的人类的方法，该方法的步骤包括向需要治疗者施用治疗有效量的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药。还提供了式(I′)化合物或其可药用的盐，用于治疗患有某种会从抑制一种或多种Aurora激酶中受益的疾病的人类的方法，该方法的步骤包括向需要治疗者施用治疗有效量的式(I′)化合物或其可药用的盐。特别是，预期对Aurora A激酶和/或Aurora B激酶会有好处。优选的是从抑制Aurora B激酶中受益。还提供了一种式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药，以用于治疗患有过度增生性疾病例如癌症，特别是患有结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中任何一种或任何组合的人的方法，该方法包括对需要治疗者施用治疗有效量的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药。还提供了一种式(I′)化合物，以用于治疗患有过度增生性疾病例如癌症，特别是患有结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中任何一种或任何组合的人的方法，该方法包括对需要治疗者施用治疗有效量的式(I′)化合物或其可药用的盐。式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药在治疗上述人群的任何方法中的应用也构成本发明的几个方面。另外，式(I′)化合物或其可药用盐在治疗上述人群的任何方法中的应用构成了本发明的其它方面。
对于以上所述的治疗应用，服用的剂量将随所用的化合物，给药途径，所希望的治疗，所指示的病症以及动物或患者的年龄和性别而变。因此，剂量的大小应按照熟知的医学原理计算。
在使用式(I)或式(I′)化合物用于治疗或者预防目的时，一般服用的日剂量为例如0.05-50mg/kg体重，如果需要，以均分剂量的方式给药。通常当采用非肠道途径时，施用的剂量较低。例如，对于静脉内注射，一般使用的剂量范围是0.05-25mg/kg体重，特别是0.05-15mg/kg体重)。类似地，对于吸入给药，将使用0.05-25mg/kg体重(特别是0.05-15mg/kg体重)的剂量范围。
这里所定义的治疗可以涉及单独的疗法，也可以在本发明化合物之外，还涉及常规的外科或放疗或化疗疗法。这些化疗可包括以下的一类或多类抗肿瘤药物 (1)抗增生/抗肿瘤药物及其组合，如在医用肿瘤学中所使用的，例如烷化剂(如，顺铂、卡铂、环磷酰胺、氮芥、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安和亚硝基脲)；抗代谢药(例如叶酸抗代谢物，如，氟嘧啶，例如5-氟尿嘧啶和替加氟，雷替曲塞，甲氨蝶呤，阿糖胞苷和羟基脲)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环霉素如阿霉素、博来霉素、多柔比星、道诺霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素C、放线菌素D和普卡霉素)；抗有丝分裂药(例如长春花属生物碱，如长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞浜，以及紫杉烷类，例如泰素和泰素帝)；和拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素，如，伊托泊苷和替尼泊苷，安吖啶、托泊替康和喜树碱)； (2)细胞抑制剂，例如抗雌激素(例如他昔莫芬，托瑞米芬，雷洛昔芬，屈洛昔芬和iodoxyfene)，雌激素受体下调剂(例如氟维司群)，抗雄激素药(例如比卡鲁胺，氟他胺，尼鲁米特和醋酸环丙孕酮)，LHRH(促黄体激素释放激素)拮抗剂或LHRH激动剂(例如，戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)，孕激素(例如醋酸甲地孕酮)，芳香酶抑制药(例如阿那曲唑，来曲唑，伏曲唑和依西美坦)，和5α-还原酶抑制剂，如非那雄胺)； (3)抑制癌细胞侵袭药(例如金属蛋白酶抑制剂，如，马立马司他，以及尿激酶型纤溶酶原活化剂受体功能抑制剂)； (4)生长因子功能抑制剂，例如，生长因子抗体，生长因子受体抗体(例如抗-erbb2抗体曲妥单抗[HerceptinTM]和抗-erbb1抗体西妥昔单抗[c225])，法呢酰基转移酶抑制剂，酷氨酸激酶抑制剂和丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂，例如表皮生长因子家族的抑制剂(如，EGFR家族酪氨酸激酶抑制剂，例如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，AZD1839)，N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(埃洛替尼，OSI-774)和6-丙烯酰氨基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI1033))，例如血小板衍生的生长因子家族和肝细胞生长因子家族的抑制剂； (5)抗血管生成剂，例如抑制血管内皮生长因子的作用的药物(例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单抗[AvastinTM]，诸如在国际专利申请WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856和WO 98/13354中公开的那些化合物)和通过其它机制起作用的化合物(例如利诺胺，αvβ3整合素功能抑制剂和血管生长抑素)； (6)血管损伤剂，例如考布他汀A4和在国际专利申请WO 99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04 434和WO 02/08 213中公开的化合物； (7)反义治疗剂，例如以上面列出的靶物为目标的那些，如ISIS2503，一种抗-ras反义治疗剂； (8)基团疗法，包括例如替换异常基因例如异常的p53或异常的BRCA1或BRCA2的方法，GDEPT(基因导向的酶前药疗法)法，例如使用胞嘧啶脱氨酶、胸苷激酶或细菌硝基还原酶的那些方法，和提高患者对化疗或放疗的耐性的方法，例如多药耐药性基因疗法；和 (9)免疫疗法，包括例如提高患者肿瘤细胞免疫原性的体外和体内方法，例如用细胞因子如白介素2、白介素4或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转染的方法，减小T细胞无反应性的方法，使用转染的免疫细胞，例如细胞因子转染的树枝状细胞的方法，使用细胞因子转染的肿瘤细胞系的方法和使用抗独特型抗体的方法。
另外，本发明化合物或其可药用的盐、酯或前药，还可以与一种或多种细胞周期抑制剂联合使用。特别是与抑制bub1、bub R1或CDK的细胞周期抑制剂联合使用。
这种联合治疗可以通过同时、顺序或分别地服用各个治疗组分来实现。这种组合产品使用在本文所述的剂量范围内的本发明化合物和在其批准的剂量范围内的其它有药学活性的试剂。
除了在治疗医学上的应用，式(I)化合物及其可药用的盐、酯或前药也可作为药理学的工具，用于体外和体内试验体系的发展和标准化，以便评价细胞周期活性抑制剂对实验室动物例如猫、狗、鼠、猴、大鼠和小鼠的影响，作为新治疗药物寻找工作的一部分。
在以上的其它药物组合物、工艺、方法、应用和药物制造特点中，这里所述的本发明化合物的备择的和优选的实施方案也都适用。
本发明化合物抑制Aurora激酶、特别是Aurora A激酶和/或Aurora B激酶的丝氨酸-苏氨酸激酶活性，从而抑制细胞周期和细胞增生。抑制Aurora B激酶的化合物特别有用。这些化合物还对耐药细胞具有活性，并具有有利的物理性质。这些性质可以用例如以下陈述的一种或几种方法鉴定。
(a)体外Aurora A激酶抑制试验 此试验测定了试验化合物抑制丝氨酸-苏氨酸激酶活性的能力。编码Aurora A的DNA可以通过全基团合成或通过克隆得到。随后此DNA可以表达在合适的表达体系中以得到具有丝氨酸-苏氨酸激酶活性的多肽。在Aurora A的情形，编码顺序是由cDNA通过聚合酶链式反应(PCR)分离出来并克隆到杆状病毒表达载体pFastBac HTC(GibcoBRL/Life Technologies)的Bam H1和Not1的限制性内切核酸酶位点中。5’PCR引物包含一个用于限制性内切核酸酶Bam H15’对AuroraA编码序列的识别序列。这使得有可能在由pFast Bac HTC载体编码的具有6个组氨酸残基、间隔区和rTEV蛋白酶裂解位的框架内插入Aurora A基因。3’PCR引物用另外的编码序列并随后用用于限制性内切核酸酶Not1的终止密码子和识别序列代替Aurora A终止密码子。这一另外的编码序列(5′TAC CCA TAC GAT GTT CCA GAT TACGCT TCT TAA 3′)编码多肽序列YPYDVPDYA5。从流感血凝素蛋白中衍生的这一序列经常作为标记表位序使用，它能用特异性单克隆抗体鉴定。因此，重组的pFast Bac载体编码N端6组氨酸标记的、C端流感血凝素表位标记的Aurora-A蛋白。用来组装重组DNA分子的方法的细节可以在标准教材中找到，例如Sambrook等，1989，MolecularCloning-A Laboratory Manual，第2版，Cold Spring HarborLaboratory press，以及Ausubel等，1999，Current Protocols inMolecular Biology，John Wiley and Sons Inc.。
重组病毒的制备可以按照由Gibco BRL得到的制造商的流程进行。简言之，携带Aurora A基因的pFast Bac-1载体被转移到含杆状病毒基因组(杆粒DNA)的大肠杆菌DH10 Bac细胞中，通过细胞内的转座活动，pFasBac载体中含庆大霉素抗性基因和包括杆状病毒多角体蛋白引物在内的Aurora A基因的区域被直接转座到该杆粒DNA中。通过在庆大霉素、卡那霉素、四环素和5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷上的选择作用，最终形成的白色菌落应含有编码Aurora A的重组杆粒DNA。从几个BH10Bac白色菌落小规模培养物中提取出杆粒DNA，并按照制造商的说明，使用CellFECTIN试剂(Gibco BRL)，转染到生长在含10％血清的TC100培养基(GibcoBRL)中的草地夜蛾Sf21细胞中。在转染后72小时通过收集细胞培养基获取病毒颗粒。使用0.5mL培养基感染100mL含1×107细胞/mL的Sf21s悬浮培养物。感染48小时后收取细胞培养基，按照标准的噬斑试验步骤测定病毒滴度。使用病毒储备液感染Sf9和“High 5”细胞，感染复数(MOI)为3，以确定重组Aurora A蛋白的表达。
为了大规模表达Aurora A激酶活性，Sf 21昆虫细胞在28℃在一台以3rpm旋转的Wheaton滚动试验台上于补充了10％胎牛血清(Viralex)和0.2％F68 Pluronic(Sigma)的TC 100培养基中生长。当细胞密度达到1.2×106细胞/毫升时，利用噬斑纯的Aurora A重组病毒将其感染，感染复数为1，48小时后收取。所有后继的纯化步骤均在4℃下完成。将含总计2.0×108细胞的冷冻的昆虫细胞沉淀物解冻，用裂解缓冲液(25mM HEPES(N-[2-羟乙基]哌嗪-N′-(2-乙磺酸)pH7.4，4℃，100mM KCl，25mM NaF，1mM Na3VO4，1mM PMSF(苯基甲磺酰氟)，2mM 2-巯基乙醇，2mM咪唑，1μg/mL抑蛋白酶肽，1μg/mL抑胃酶肽，1μg/mL亮抑酶肽)稀释，每3×107细胞用1mL。利用一台Dounce均化器实现裂解，随后将裂解液在41000g下离心35分钟。将抽吸出的上清液泵送在一台5mm直径的装有500μLNi NTA(次氮基三乙酸)琼酯糖(Qiagen，产品编号30250)的色谱柱上，该柱已在裂解缓冲液中达到平衡。在用12ml裂解缓冲液，随后用7mL洗涤缓冲液(25mM HEPES pH7.4，4℃，100mM KCl，20mM咪唑，2mM 2-巯基乙醇)洗柱之后，洗出液达到UV吸收的基线水平。结合的Aurora A蛋白用洗脱缓冲液(25mM HEPES pH7.4，4℃，100mM KCl，400mM咪唑，2mM 2-巯基乙醇)洗脱。收集与UV吸收的峰值对应的洗脱级分(2.5mL)。将含有活性Aurora A激酶的洗脱级分相对于渗析缓冲液(25mM HEPES pH7.4，4℃，45％甘油(v/v)，100mM KCl，0.25％乙基酚聚乙二醇醚(v/v)，1mM二硫苏糖醇)进行彻底的渗析。
每批新的Aurora A酶都利用酶稀释液(25mM Tris-HCl pH7.5，12.5mM KCl，0.6mM DTT)稀释，在此试验中滴定。对于典型的一批，将酶储备液用酶稀释液稀释666倍，对于每个测孔使用20μL的稀释酶。试验化合物(10mM的二甲基亚砜(DMSO)溶液)用水稀释，将10μL稀释过的化合物转移至测定板的孔中。“总量”和“空白”对照孔含2.5％DMSO而不含化合物。向所有各孔中加入20μL刚刚稀释的酶，只有“空白”孔除外。在“空白”孔中加入20μL的酶稀释液。然后在所有的试验孔内加入含0.2μCi[γ33P]ATP(AmershamPharmacia，比活性≥2500 Ci/mmol)的20μL反应混合物(25mM Tris-HCl，78.4mM KCl，2.5mM NaF，0.6mM二硫苏糖醇，6.25mMMnCl2，25mM ATP，7.5μM肽底物[生物素-LRRWSLGLRRWSLGLRRWSLGLRRWSLG]以起始反应。将测定板在室温下温育60分钟。向所有孔中加入100μL 20％v/v正磷酸以停止反应。用96孔板收取器(Tom Tek)将肽底物捕集在带正电的硝化纤维素P30过滤器(Whatman)上，然后用Beta板计数器测定33P的结合。“空白”(无酶)和“总量”(无化合物)对照值用来确定抑制酶活性50％的试验化合物稀释范围(IC50值)。本发明化合物的IC50值一般为0.05nM至10μM。
(b)体外Aurora B激酶抑制试验 此试验测定试验化合物抑制丝氨酸-苏氨酸激酶活性的能力。编码Aurora B的DNA可以通过全基因合成或者克隆得到。此DNA随后可表达在合适的表达体系中以得到具有丝氨酸-苏氨酸激酶活性的多肽。在Aurora B的情形，编码顺序是由cDNA通过聚合酶链式反应(PCR)分离出来并按照与以上对Aurora A所述的相似的方式克隆到pFast Bac体系中(即，直接表达6-组氨酸标记的Aurora B蛋白)。
为了大规模表达Aurora B激酶活性，Sf 21昆虫细胞在28℃在一台以3rpm旋转的Wheaton滚动试验台上于补充了10％胎牛血清(Viralex)和0.2％F68 Pluronic(Sigma)的TC 100培养基中生长。当细胞密度达到1.2×106细胞/mL时，用噬斑纯的Aurora B重组病毒将其感染，感染复数为1，48小时后收取。所有的后继纯化步骤均在4℃进行。将总含量为2.0×108细胞的冷冻的昆虫细胞沉淀物解冻，用裂解缓冲液(50mM HEPES(N-[2-羟乙基]哌嗪-N′-[2-乙磺酸])pH7.5，4℃，1mM Na3VO4，1mM PMSF(苯基甲磺酰氟)，1mM二硫代苏糖醇，1μg/mL抑蛋白酶肽，1μg/mL抑胃酶肽，1μg/mL亮抑酶肽)稀释，每2×107细胞使用1.0mL。用超声均化器进行裂解，随后将裂解液在41000g离心35分钟。将抽吸出的上清液泵送至5mm直径的色谱柱中，柱内装有已在裂解缓冲液中平衡的1.0mL CM琼脂糖凝胶Fast Flow(Amersham Pharmacia Biotech)。在依次用12mL裂解缓冲液和7mL洗涤缓冲液(50mM HEPES 4℃下pH7.4，1mM二硫代苏糖醇)洗涤后，洗脱液达到UV吸收的基线水平。利用梯度洗脱缓冲液(50mM HEPES，4℃下pH7.4，0.6M NaCl，1mM二硫代苏糖醇，在15分钟内从0％洗脱缓冲液至100％洗脱缓冲液，流速0.5mL/分)从柱子洗脱结合的Aurora B蛋白。收集与UV吸收峰对应的洗脱级分。将洗脱级分相对于渗析缓冲液(25mM HEPES 4℃下pH7.4，45％甘油(v/v)，100mM KCl，0.05％(v/v)IGEPAL CA 630(Sigma Aldrich)，1mM二硫代苏糖醇)彻底渗析。对渗析的级分测定Aurora B激酶活性。
每批新的Aurora B激酶都利用酶稀释剂(25mM Tris-HCl pH7.5，12.5mM KCl，0.6mM DTT)稀释，在此试验中滴定。对于典型的一批，将酶储备液用酶稀释剂稀释40倍，每个测孔中使用20μl稀释的酶。将试验化合物(10mM的二甲基亚砜(DMSO)溶液)用水稀释，取10μl稀释的化合物转移到测定板的孔中。“总量”和“空白”对照孔含有2.5％DMSO而不含化合物。向所有各孔中加入20μl刚稀释的酶，只有“空白”孔除外。向“空白”孔中加入20μl酶稀释剂。然后向所有试验孔中加入含0.2μCi[γ33P]ATP(Amersham Pharmacia，比活性≥2500Ci/mmol)的反应混合物(25mM Tris-HCl，78.4mMKCl，2.5mM NaF，0.6mM二硫代苏糖醇，6.25mM MnCl2，37.5mMATP，2.5μM肽底物[生物素-LRRWSLGLRRWSLGLRRWSLGLRRWSLG])以起始反应。将测定板在室温下温育60分钟。向所有各孔中加入100μl 20％v/v正磷酸以停止反应。用96孔板收取器(TomTek)将肽底物捕集在带正电的硝化纤维素P30滤器(Whatman)上，然后用Beta板计数器测定33P的结合。“空白”(无酶)和“总量”(无化合物)对照值用来确定对酶活性产生50％抑制作用的试验化合物的稀释范围(IC50值)。本发明化合物的IC50值一般为0.05nM至10μM。
(c)体外细胞表型和底物磷酸化测定 此试验用来测定化合物在体外对SW 620人结肠瘤细胞的作用。化合物通常产生对磷酸组蛋白H3含量的抑制和细胞核面积的增加。
在Costar 96孔板的各孔于100μl DMEM培养基(含10％胎牛血清和1％谷氨酰胺)(DMEM是Dulbecco改性的Eagle培养基(SigmaD6546))中植入104SW 620细胞，在37℃和5％CO2下放置过夜以便黏着。然后向细胞中加入稀释在培养基中的化合物(各孔中加50μl以达到化合物浓度为0.00015μ-1μM)，用化合物处理24小时后，将细胞固定。
首先用光学显微镜检查细胞，注意任何细胞形貌的变化。然后向各孔中加入100μl 3.7％甲醛，将测定板在室温下放置至少30分钟。将板在纸巾上倾析并敲打，除去固定剂，然后用自动洗板器将板在PBS(Dulbecoo磷酸盐缓冲液(Sigma D 8537))中洗一次。加入100μl PBS和0.5％Triton X-100，将板在摇床上放置5分钟。用100μl BPS洗板，倒掉溶液。加入50μl第一抗体(1∶500的兔抗磷酸组蛋白H3在PBS1％BSA(牛血清白蛋白)和0.5％Tween中)。抗磷酸组蛋白H3兔多克隆06-750购自Upstate Biotechnology，将板在室温下于摇床上放置1小时。
次日，将抗体倒走，用PBS洗板2次。在不发光区加入50μl第二抗体(1∶10000的Hoechust和1∶200的Alexa Fluor 488鹅抗兔IgGA(产品编号11008分子探针)在PBS1％BSA、0.5％Tween中)。将板包在锡箔中，室温下摇动1小时。倒出抗体，板用PBS洗2次。向每孔中加200μl PBS，将板摇动10分钟，除去PBS。向每孔中加100μl PBS，将板密封准备分析。利用Arrayscan Target Activation算法进行分析，测定细胞的磷酸组蛋白H3水平和核面积的变化。结果以产生磷酸组蛋白H3水平抑制50％和类似地细胞核面积增加50％所需的有效浓度(EC50值)报道。本发明化合物抑制磷酸组蛋白H3水平的EC50值一般是0.5nM至1μM，特别是表2的化合物9，其EC50值为7.6nM。
(d)体外的抗药细胞表型和底物磷酸化试验 此试验用来测定化合物在体外对抗药的MCF7-ADR人乳腺肿瘤细胞的作用。
MCF7细胞用多剂量的阿霉素(Dr.Hickinson，Molecular Oncologylab，ICRF，University of Oxford Institute of Molecular Medicine，Headington，Oxford)预处理，该步骤造成抗药的蛋白被细胞超量表达。化合物通常引起对磷酸组蛋白H3水平的抑制和所处理的细胞的核面积增加。然而，如果化合物是超量表达的排药蛋白的底物，则它们在此试验中的活性似乎比在先前的SW 620试验中的活性低。
在costar 96孔板的每个孔中，将0.8×104 MCF7-ADR细胞植入100μl DMEM培养基(含10％FCS(胎牛血清)和1％谷氨酰胺)，在37℃和5％CO2下放置过夜以形成黏着。
所有其它的步骤均与使用SW 620细胞的以上试验的步骤相同。
本发明化合物抑制磷酸组蛋白H3水平的EC50值一般为0.5nM至1μM，特别是表2中的化合物9，其EC50值为0.4μM。
(e)血浆蛋白结合试验 此试验用来确定化合物与血浆蛋白结合的程度并因此确定血浆中游离药物含量。
血浆蛋白结合性用平衡渗析法测定。将化合物加到人血浆中至浓度为20nM，在37℃下用等渗的磷酸盐/氯化钠缓冲液渗析18小时。渗析膜两边的血浆和缓冲液用一台通用型LCUVMS(Waters 2795HPLC，带有Micromass ZQ质谱仪)分析，测定游离化合物在100％血浆中的百分含量。
本发明化合物在100％血浆中的游离化合物的百分含量为0.5-50％，特别是表2中的化合物9，其值为3.9％。
本发明现在将用以下实施例加以说明，其中在适当的场合可以使用熟练的化学家已知的标准技术和与这些实施例中所述的类似的技术，并且除非另外说明，其中 (1)蒸发用旋转蒸发仪减压进行，后处理步骤在过滤除去残留固体如干燥剂之后进行； (2)操作在环境温度下进行，通常是在18-25℃，并且除非另外说明，或者除非专业人员在惰性气体例如氩气下操作，通常是在空气中操作； (3)柱色谱法(急骤色谱)和中压液体色谱法(MPLC)是在Merck Kieselgel硅胶(Art.9385)上进行； (4)产率仅用于示例说明，而且不一定是可达到的最大产率； (5)式(I)终产物的结构一般用核(一般是质子)磁共振(NMR)和质谱技术证实；质子核磁共振化学位移值是在氘化的二甲基亚砜(DMSO d6)中(除非另外说明)按δ标度(距四甲基硅烷的低场ppm)测定，使用以下四种仪器之一 -Varian Gemini 2000谱仪，在300MHz的场强下操作 -Bruker DPX 300谱仪，在300MHz的场强下操作 -JEOL EX 400谱仪，在400MHz的场强下操作 -Bruker Avance 500谱仪，在500MHz的场强下操作。
峰的多重性表示如下s，单峰；d，双峰，dd，双重双峰；t，三峰；q，四峰；qu，五重峰；m，多重峰；brs，宽单峰； (6)机器人合成用Zymate XP机器人进行，通过Zymate MasterLaboratory Station加入溶液，利用Stem RS 5000 Reacto-Station在25℃搅拌； (7)机器人合成的反应混合物的后处理和纯化进行如下蒸发在减压下用Genevac HT4进行；柱色谱法用Anachem Sympur MPLC系统使用填充Merck硅胶(60μm，25g)的27mm直径柱在硅胶上进行；最终产物的结构用LCMS(液相色谱质谱)在一台Waters 2890/ZMDmicromass系统上进行，采用以下参数，按着以分为单位的保留时间(RT)报道 柱Waters Symmetry C18，3.5μm，4.6×50mm 溶剂AH2O 溶剂BCH3CN 溶剂CMeOH+5％HCOOH 流速2.5ml/分 运行时间5分钟，4.5分梯度由0至100％C 波长254nm，带宽10nm 质量检测器ZMD micromass 注入体积0.005ml (8)对于未用机器人合成法制备的化合物，在一台Waters AllianceHT系统上进行分析型LCMC测定，采用以下参数，按照以分为单位的保留时间(RT)报道 柱2.0mm×5cm Phenomenex Max-RP 80A 溶剂A水 溶剂B乙腈 溶剂C甲醇/1％甲酸或水/1％甲酸 流速1.1ml/分 运行时间5分钟，4.5分梯度由0-95％B+恒定的5％溶剂C 波长254nm，带宽10nm 注入体积0.005ml 质量检测器Micromass ZMD (9)在以下任一种仪器上进行制备型高效液体色谱(HPLC)分离 -Waters制备型LCMS仪器，测得保留(RT)(分) 柱β-碱性Hypercil(21×100mm)5μm 溶剂A水/0.1％碳酸铵 溶剂B乙腈 流速25ml/分 运行时间10分钟，7.5分梯度由0至100％B 波长254nm，带宽10nm 注入体积1-1.5nm 质量检测Micromass ZMD -Gilson制备型HPLC仪器，测得保留时间(RT)(分) 柱21mm×15cm Phenomenex Luna2 C18 溶剂A水+0.1％三氟乙酸 溶剂B乙腈+0.1％三氟乙酸 流速21ml/分 运行时间20分，10分钟各种不同梯度，由5至100％B 波长254nm，带宽10nm 注入体积0.1-40ml (10)中间体一般未全面鉴定，纯度用薄层色谱法(TLC)、HPLC、红外(IR)、MS或NMR分析法测定。
表1

表2

表3

表4

表5

表6


实施例1表1中化合物1的制备--N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 将2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(0.201g，0.43mmol)、2-(甲基氨基)乙醇(0.50ml，6.2mmol)和碘化钾(0.141g，0.85mmol)在二甲基乙酰胺(4ml)中的溶液在85℃加热3小时。加入三氟乙酸使混合物呈酸性，然后用二甲基亚砜∶乙腈∶水＝7∶3∶1的混合物(6ml)稀释，接着直接用反相色谱法纯化，用在含0.2％三氟乙酸的水中的5-50％含0.2％三氟乙酸的乙腈溶液梯度洗脱。将含产物的级分合并，加入碳酸氢钠使呈碱性，然后减压浓缩。将该混合物过滤，用水洗残留物，然后用乙醚洗，留下表1中的化合物1(0.092g，产率42％) 1H-NMR(DMSO d6，TFA)10.66(s，1H)，10.51(s，1H)，9.90(br s，1H)，8.91(s，1H)，7.65-7.59(m，1H)，7.41-7.29(m，2H)，7.05(d，1H)，6.95(d，1H)，6.93-6.87(m，1H)，6.77(s，1H)，4.81(br s，2H)，4.00(s，3H)，3.99-3.70(m，6H)，3.50-3.28(m，2H)，3.00(s，3H).MS(+ve ESI)510(M+H)+ 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺制备如下 a)5，7-二甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(5.0g，24mmol)(关于合成请参阅Hennequin，Laurent Francois Andre；Ple，Patrick.Preparation of 4-anilinoquinazoline derivatives for the treatment oftumors.PCT国际专利申请(2001)WO 01/094341)、二异丙基乙胺(13.5ml，77.7mmol)和磷酰氯(7.24ml，77.7mmol)在乙腈(125ml)中的溶液加热回流2小时。将该混合物减压蒸发，残余物分配在二氯甲烷和碳酸氢钠饱和溶液之中。分离出有机层，用盐水洗，用硫酸镁干燥，然后蒸发至留下深棕色固体。粗产物在硅胶上用急骤色谱法纯化，用乙酸乙酯洗脱，得到4-氯-5，7-二甲氧基喹唑啉(2.83g，产率52％) 1H-NMR(DMSO d6)8.81(s，1H)，7.01(d，1H)，6.83(d，1H)，3.96(s，3H)，3.95(s，3H).MS(+ve ESI)225/227(M+H)+ b)4-氯-5，7-二甲氧基喹唑啉(2.9g，11.9mmol)和2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(2.72g，11.6mmol)在异丙醇(75ml)中的混合物于90℃加热2小时。将混合物冷却至室温，然后加入乙醚，形成细小的固体。将混合物过滤，用乙醚洗，随后在空气中干燥，得到2-{3-[(5，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}-N-(3-氟苯基)乙酰胺盐酸盐(4.95g，产率91％)。
1H-NMR(DMSO d6)10.72(s，1H)，10.71(s，1H)，8.83(s，1H)，7.66-7.61(m，1H)，7.40-7.32(m，2H)，6.97-6.94(m，2H)，6.92-6.86(m，1H)，6.71(s，1H)，4.16(s，3H)，3.97(s，3H)，3.84(s，2H). MS(+ve ESI)423(M+H)+ c)将2-{3-[(5，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}-N-(3-氟苯基)乙酰胺盐酸盐(4.95g，10.8mmol)和吡啶盐酸盐(6.93g，60mmol)在吡啶(60ml)中的混合物于110℃加热6.5小时。将混合物冷却至室温，然后倒入水(350ml)中，用氨水溶液中和。将形成的悬浮液过滤，残留物用水、乙腈洗，最后用乙醚洗，固体在真空下干燥，得到N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-羟基-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(3.6g，产率82％) 1H-NMR(DMSO d6)10.38(s，1H)，8.20(s，1H)，7.65-7.58(m，1H)，7.39-7.30(m，2H)，6.91-6.84(m，1H)，6.56(br s，1H)，6.10(s，1H)，6.05(s，1H)，3.73(s，3H)，3.69(s，2H).MS(+ve ESI)409(M+H)+ d)向N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-羟基-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(1.9g，4.7mmol)，三苯膦(1.46g，5.59mmol)和2-氯乙醇(0.437ml，6.52mmol)在四氢呋喃(45ml)中的溶液加入偶氮二羧酸二叔丁酯(1.29g，5.59mmol)。将混合物在室温下搅拌20分钟，然后加入另一份三苯膦(1.46g，5.59mmol)和偶氮二羧酸二叔丁酯(1.29g，5.59mmol)。将混合物在室温下搅拌3小是，然后加入又一份三苯膦(1.46g，5.59mmol)和偶氮二羧酸二叔丁酯(1.29g，5.59mmol)，将混合物在室温下搅拌1.5小时。加入乙醚引起产物沉淀。将混合物过滤，残留物依次用乙醚、水和乙腈洗，最后再用乙醚洗，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(1.21g，产率56％) MS(+ve ESI)471/473(M+H)+ 2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺制备如下 (1)在40分钟内向(3-氨基-1H-吡唑-5-基)乙酸(20.0g，142mmol)和吡啶(25.3ml，313mmol)在二甲基甲酰胺(200ml)中的溶液逐滴加入三氟乙酸五氟苯基酯(48.9ml，284mmol)，保持内温低于15℃。然后将该混合物温热至室温，搅拌1.5小时。以单次一批的形式加入3-氟苯胺(31.6g，284mmol)，然后在室温下搅拌混合物1.5小时。将混合物倒入稀盐酸溶液中，滤出形成的固体，用水和乙醚洗，得到2，2，2-三氟-N-(5-{2-[(3-氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(33.3g，产率71％)。
MS(+ve ESI)331(M+H)+ (2)将2，2，2-三氟-N-(5-{2-[(3-氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(33.3g，100mmol)在甲醇(250ml)和盐酸(2M，250ml)中的混合物在40℃加热2.5小时。混合物用碳酸氢钠中和，然后减压浓缩至1/3体积。滤出形成的沉淀，残余物仔细地用冰冷的水洗，在后在空气中干燥，得到2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(12.2g，产率52％) MS(+ve ESI)235(M+H)+ 实施例2表1中化合物2的制备-N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[2-羟基乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与对表1中实施例1所述的类似方式，使用2-[(2-甲氧基乙基)氨基]乙醇(0.252g，2.1mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(0.15g，0.32mmol)制备，得到表1中的化合物2(0.080g，产率45％) 1H-NMR(DMSO d6)12.4(s，1H)，10.18(s，1H)，8.42(s，1H)，7.60(d，1H)，7.35(m，2H)，6.89(t，1H)，6.78(d，1H)，6.71(m，2H)，4.32(t，2H)，3.89(s，3H)，3.71(s，2H)，3.50(t，2H)，3.32(t，2H)，3.10(s，3H)，3.05(t，2H)，2.75(t，2H)，2.69(t，2H). MS(+ve ESI)554(M+H)+ 实施例3表1中化合物3的制备--N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与对表1中实施例1所述的类似方式，用(2S)-吡咯烷-2-基甲醇(0.214g，2.1mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(0.15g，0.32mmol)制备，得到表1中化合物3(0.073g，产率43％) 1H-NMR(DMSO d6)10.15(s，1H)，8.43(s，1H)，7.60(d，1H)，7.35(m，2H)，6.88(t，1H)，6.78(s，1H)，6.72(m，2H)，4.35(m，3H)，3.88(s，3H)，3.72(s，2H)，3.40(m，4H)，2.75(m，1H)，2.52(m，1H)，2.35(m，1H)，1.75(m，1H)，1.55(m，2H). MS(+ve ESI)536(M+H)+ 实施例4表1中化合物4的制备--N-(3-氟苯基)-2-(3-{[5-(2-{[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]氨基}乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与对表1中实施例1所述的类似方式，使用(2S)-2-氨基丙-1-醇(0.159g，2.1mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(0.15g，0.32mmol)制备，得到表1中化合物4(0.050g，产率31％) 1H-NMR(DMSO d6)12.35(s，1H)，10.39(s，1H)，10.30(s，1H)，8.40(s，1H)，7.60(d，1H)，7.35(m，2H)，6.88(t，1H)，6.80(s，1H)，6.75(s，1H)，6.65(s，1H)，4.62(app.s，1H)，4.25(app.s，2H)，3.89(s，3H)，3.75(s，2H)，3.65(m，2H)，3.04(app.s，2H)，1.00(d，3H). MS(+ve ESI)510(M+H)+ 实施例5表2中化合物5的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与对表1中实施例1所述的类似方式，使用2-[(2-甲氧基乙基)氨基]乙醇(0.305g，2.56mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.25g，0.51mmol)制备，得到表2中化合物5(0.080g，产率27％) 1H-NMR(DMSO d6)10.19(s，1 H)，8.45(s，1H)，7.75-7.68(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.79(d，1H)，6.80-6.73(m，1H)，6.74(d，1H)，4.34(t，2H)，3.90(s，3H)，3.83(s，2H)，3.49(t，2H)，3.38(t，2H部分被水遮蔽)，3.35-3.17(水)，3.11(s，3H)，3.06(t，2H)，2.77(t，2H)，2.69(t，2H). MS(+ve ESI)572(M+H)+ 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺制备如下 a)4-氯-5，7-二甲氧基喹唑啉(3.0g，13.4mmol)和2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(3.20g，12.7mmol)在异丙醇(80ml)中的混合物于90℃加热30分钟。加入另一份2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(约0.3g)，将混合物在90℃加热15分钟。将混合物冷却至室温，然后加入乙醚，产生细小的固体。将混合物过滤，用乙醚洗，然后真空干燥，得到N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺盐酸盐(5.79g，产率96％) 1H-NMR(DMSO d6)10.67(s，1H)，10.33(br s，1H)，8.81(s，1H)，7.71-7.64(m，1H)，7.25-7.14(m，2H)，6.98(br s，1H)，6.94(d，1H)，6.73(s，1H)，4.16(s，3H)，3.97(s，3H)，3.91(s，2H). MS(+ve ESI)441(M+H)+ b)将N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺盐酸盐(9.06g，19.0mmol)和盐酸吡啶(12.7g，110mmol)在吡啶(110ml)中的混合物于110℃加热总计8小时。将混合物冷却至室温，然后倒入碳酸氢钠饱和水溶液(1000ml)中。将形成的悬浮液过滤，残余物用水、乙腈洗，最后用乙醚洗，并将固体真空干燥，得到N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-羟基-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(6.78g，产率84％) 1H-NMR(DMSO d6)10.16(s，1H)，8.22(s，1H)，7.75-7.68(m，1H)，7.23-7.14(m，2H)，6.58(br s，1H)，6.15(br s，1H)，6.11(br s，1H)，3.79(s，2H)，3.75(s，3H). MS(+ve ESI)427(M+H)+ c)向N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-羟基-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(4.3g，10.1mmol)、三苯膦(3.17g，12.1mmol)和2-氯乙醇(0.944ml，14.1mmol)在四氢呋喃(100ml)中的溶液加入偶氮二羧酸二叔丁酯(2.79g，12.1mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后加入另一份三苯膦(3.17g，12.1mmol)和偶氮二羧酸二叔丁酯(2.79g，12.1mmol)。将混合物在室温下搅拌3小时，然后加入乙醚使产物沉淀。将混合物过滤，残留物依次用乙醚、水和乙腈洗，最后再用乙醚洗，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(3.54g，产率72％) MS(+ve ESI)489/491(M+H)+ 2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺制备如下 (1)在30分钟内，向(3-氨基-1H-吡唑-5-基)乙酸(10.0g，71mmol)和吡啶(12.6ml，156mmol)在二甲基甲酰胺(100ml)中的溶液滴加三氟乙酸五氟苯基酯(24.4ml，142mmol)，保持内温低于15℃。然后将混合物温热至室温，搅拌30分钟。一次加入18.3g(142mmol)2，3-二氟苯胺，将混合物在室温下搅拌3小时，然后将混合物在90℃加热2小时。将其倒入稀盐酸溶液中，滤出形成的固体，用水洗，然后用甲苯和异己烷洗，得到N-(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)-2，2，2-三氟乙酰胺(18.0g，产率74％)。
MS(-ve ESI)347(M-H)- (2)将N-(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)-2，2，2-三氟乙酰胺(25.9g，74.5mmol)在甲醇(200ml)和盐酸(2M，200ml)中的混合物在50℃加热3小时。用碳酸氢钠中和该混合物，然后将混合物减压浓缩至约1/3体积。滤出形成的沉淀，残留物仔细地用冰冷的水洗，然后真空干燥，得到2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(14.01g，产率75％) MS(+ve ESI)253(M+H)+ 实施例6表2中化合物6的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[乙基(2-羟乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表2中实施例5所述的类似方式，使用2-(乙基氨基)乙醇(0.182g，2.05mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.20g，0.41mmol)制备，得到表2中化合物6(0.093g，产率42％) 1H-NMR(DMSO d6)10.23(s，1H)，10.18(s，1H)，8.45(s，1H)，7.75-7.67(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.79(d，1H)，6.75(d，1H)，4.34(t，2H)，3.90(s，3H)，3.83(s，2H)，3.49(t，2H)，2.97(t，2H)，2.65(q，2H)，2.62(t，2H)，0.93(t，3H). MS(+ve ESI)542(M+H)+ 实施例7表2中化合物7的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表2中实施例5所述的类似方式，使用(2S)-吡咯烷-2-基甲醇(0.156g，1.54mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.25g，0.51mmol)制备，得到表2中化合物7(0.075g，产率26％) 1H-NMR(DMSO d6)10.19(s，1H)，10.17(s，1H)，8.45(s，1H)，7.76-7.66(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.79(d，1H)，6.81-6.72(m，1H)，6.74(d，1H)，4.43-4.28(m，2H)，3.90(s，3H)，3.83(s，2H)，3.46-3.25(属于水)，3.20-3.12(m，1H)，2.80-2.72(m，1H)，2.60-2.50(属于DMSO)，2.35-2.27(m，1H)，1.82-1.71(m，1H)，1.65-1.48(m，3H). MS(+ve ESI)554(M+H)+ 实施例8表2中化合物8的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表2中实施例5所述的类似方式，使用[(2S)-4-甲基哌嗪-2-基]甲醇(0.333g，2.56mmol)(见Falorni，M；Satta，S；Conti，S；Glacomelli，G，Tetrahedron Asymmetry，1993，4(11)，2389-2398)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.25g，0.51mmol)制备，得到表2中化合物8(0.082g，产率28％) 1H-NMR(DMSO d6)12.38(s，1H)，10.17(s，1H)，10.12(s，1H)，8.43(s，1H)，7.77-7.68(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.83-6.72(m，3H)，4.40-4.32(m，2H)，3.90(s，3H)，3.84(s，2H)，3.66-3.58(m，1H)，3.53-3.37(m，2H)，3.28(s，3H)，2.93-2.84(m，1H)，2.80-2.66(m，1H)，2.53-2.30(m，3H部分属于DMSO)，2.07-1.93(m，3H). MS(+ve ESI)583(M+H)+ 实施例9表2中化合物9的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表2中实施例5中所述的类似方法，使用2-(甲基氨基)乙醇(0.098g，1.3mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.16g，0.33mmol)制备，得到表2中化合物9(0.102g，产率59％) 1NMR(DMSO d6)10.30(s，1H)，8.46(s，1H)，7.72(m，1H)，7.18(m，2H)，6.79(s，1H)，6.77(s，1H)，6.75(m，1H)，4.35(m，2H)，3.90(s，3H)，3.83(s，2H)，3.53(m，2H)，2.91(m，2H)，2.56(m，2H)，2.32(s，3H). MS(+ve ESI)528(M+H)+. 实施例10表3中化合物10的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 将2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.569g，1.0mmol)、2-(甲氨基)乙醇(0.375g，5.0mmol)和碘化钾(0.332g，2.0mmol)在二甲基乙酰胺(4ml)中的溶液在90℃加热6小时。将混合物冷却至室温，然后用二氯甲烷(40ml)稀释，将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物过滤，然后直接在硅胶上用急骤色谱法纯化，先用二氯甲烷∶二甲基乙酰胺(95∶5)、然后用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)、最后用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水溶液(100∶8∶1)洗脱。将含产物的级分合并，减压蒸发，得到表3中化合物10(0.12g，产率21％) 1H-NMR(DMSO d6 at 373°K)12.05(br s，1H)，10.17(s，1H)，9.76(s，1H)，8.43(s，1H)，7.67(m，1H)，7.15(m，2H)，6.8(s，1H)，6.78(s，1H)，4.38(t，2H)，4.27(dd，2H)，3.82(s，2H)，3.73(dd，2H)，3.53(t，2H)，3.36(s，3H)，2.97(t，2H)，2.61(t，2H)，2.36(s，3H). MS(+ve ESI)572(M+H)+ 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺制备如下 a)向新戊酸[7-(苄氧基)-5-羟基-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(15.28g，40mmol)(见Hennequin，Laurent FrancoisAndre；Ple，Patrick，Preparation of 4-anilinogainazoline derivative forthe treatment of tumors.PCT国际申请WO 01/094341)、2-氯乙醇(3.38g，42mmol)和三苯膦(12.58g，48mmol)在四氢呋喃(60ml)中的溶液加入偶氮二羧酸二叔丁酯(11.04g，48mmol)在四氢呋喃(40ml)中的溶液，保持内温低于35℃。将混合物在室温下搅拌1.5小是，然后减压蒸发。残余物用乙醇(150ml)研制，然后过滤。将残余物用冷乙醇洗，然后空气干燥过夜，得到新戊酸[7-(苯甲酰氧基)-5-(2-氯乙氧基)-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(14.15g，产率80％) 1H-NMR(DMSO d6)8.32(s，1H)，7.53-7.31(m，5H)，6.81(d，1H)，6.73(d，1H)，5.81(s，2H)，5.25(s，2H)，4.33(t，2H)，3.95(t，2H)，1.11(s，9H). b)将新戊酸[7-(苄氧基)-5-(2-氯乙氧基)-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(14.1g，31.8mmol)在三氟乙酸(60ml)中的溶液加热回流6小时。将混合物减压蒸发，残余物与甲苯共蒸发2次。残余物用急骤色谱法在硅胶上纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶880氨溶液(100∶8∶1)洗脱，得到新戊酸[5-(2-氯乙氧基)-7-羟基-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(9.54g，产率85％) 1H-NMR(DMSO d6)10.61(s，1H)，8.25(s，1H)，6.54(d，1H)，6.49(d，1H)，5.79(s，2H)，4.28(t，2H)，3.95(t，2H)，1.11(s，9H). MS(+ve ESI)355/357(M+H)+ c)向新戊酸[5-(2-氯乙氧基)-7-羟基-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(9.52g，26.9mmol)、2-甲氧基乙醇(2.14g，28.2mmol)和三苯膦(8.43g，32.2mmol)在四氢呋喃(120ml)中的悬浮液逐滴加入偶氮二羧酸二叔丁酯(7.39g，32.1mmol)在四氢呋喃(20ml)中的溶液。将形成的溶液在室温下搅拌2小时。减压蒸发该混合物，残留物用乙醇(200ml)研制，放置在空气中干燥过夜，得以新戊酸[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(5.33g，产率48％) 1H-NMR(DMSO d6)8.32(s，1H)，6.72(m，1H)，6.65(m，1H)，5.81(s，2H)，4.34(t，2H)，4.23(t，2H)，3.95(t，2H)，3.68(t，2H)，3.31(s，3H)，1.11(s，9H). MS(+ve ESI)413/415(M+H)+ d)将新戊酸[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(6.31g，15.3mmol)在氨/甲醇溶液(7M，160mM)中的悬浮液于40℃搅拌5.5小时。将混合物冷却至室温，然后搅拌过夜。减压蒸发，残留物用急骤色谱法在硅胶上纯化，用二氯甲烷∶甲醇(9∶1)的混合物洗脱，得到5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4(3H)-酮(4.26g，产率93％) 1H-NMR(DMSO d6)11.71(s，1H)，7.89(d，1H)，6.69(d，1H)，6.58(d，1H)，4.32(t，2H)，4.2(m，2H)，3.93(t，2H)，3.68(m，2H)，3.31(s，3H). MS(+ve ESI)299/301(M+H)+ e)向5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4(3H)-酮(4.24g，14.2mmol)和二异丙基乙胺(12.6g，97.7mmol)在于冰浴中冷却的1，2-二氯乙烷(225ml)中的悬浮液加入磷酰氯(7.48g，48.8mmol)。将混合物在0℃搅拌15分钟，然后在80℃加热6小时。将混合物冷却至室温，然后搅拌过夜。减压蒸发，残留物溶在二氯甲烷(175ml)中，依次加入2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(3.6g，14.3mmol)和氯化氢/二烷溶液(4M，7.1ml)。将混合物加热回流1小时，然后冷却至室温。将混合物过滤，残留物用二氯甲烷洗，然后用丙酮洗，得到2-[3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺盐酸盐(4.92g，二步产率61％) 1H-NMR(DMSO d6)10.78(s，1H)，10.36(s，1H)，8.88(s，1H)，7.65(m，1H)，7.19(m，2H)，7.07(dd，2H)，6.79(s，1H)，4.7(t，2H)，4.3(t，2H)，4.17(t，2H)，3.91(s，2H)，3.73(t，2H)，3.32(s，3H). MS(+ve ESI)533/535(M+H)+ 实施例11表3中化合物11的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[乙基(2-羟乙基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表3实施例10中所述的类似方式，使用2-(乙基氨基)乙醇(0.391g，4.4mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.50g，0.88mmol)制备，在反应结束后，将混合物用二氯甲烷稀释，直接用急骤色谱法纯化，得到表3中化合物11(0.21g，产率41％) 1H-NMR(DMSO d6 at 373°K)12.1(br s，1H)，10.07(br s，1H)，9.75(s，1H)，8.45(s，1H)，7.67(m，1H)，7.15(m，2H)，6.8(s，1H)，6.75(s，1H)，4.39(t，2H)，4.27(dt，2H)，3.82(s，2H)，3.73(m，2H)，3.53(t，2H)，3.35(s，3H)，3.07(t，2H)，2.72(m，4H)，1.0(t，3H). MS(+ve ESI)586(M+H)+ 实施例12表3中化合物12的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表3实施例11中所述的类似方式，使用(2S)-吡咯烷-2-基甲醇(0.889g，8.8mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(1.0g，1.8mmol)制备，在色谱分离后，粗产物用乙腈研制，得到表3中化合物2(0.49g，产率46％) 1H-NMR(DMSO d6 at 373°K)10.05(br s，1H)，9.77(s，1H)，8.44(s，1H)，7.67(t，1H)，7.14(m，2H)，6.8(s，1H)，6.76(s，1H)，6.72-6.86(m，1H)，4.43(m，2H)，4.28(dd，2H)，3.82(s，2H)，3.72(dd，2H)，3.37-3.48(m，3H)，3.37(s，3H)，3.2(m，1H)，2.7(宽峰，1H)，1.82(m，1H)，1.65(m，2H)，1.57(m，1H). MS(+ve ESI)598(M+H)+ 实施例13表4中化合物13的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 将2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-乙氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.20g，0.40mmol)、2-甲基氨基乙醇(0.119g，1.59mmol)和碘化钾(0.132g，0.80mmol)在二甲基乙酰胺(2ml)中的混合物在90℃加热3小时。将混合物冷却至室温，然后倒入水(10ml)中。滤出形成的固体，用水洗，空气干燥。粗产物用制备型HPLC(C18硅胶柱)纯化，用乙腈(0.2％三氟乙酸)在水中(0.2％三氟乙酸)的溶液梯度洗脱。将含产物的级分合并，加入固体碳酸氢钠使呈碱性，然后减压浓缩。余下的混合物用异丙醇/二氯甲烷溶液(10％)萃取。萃取液用硫酸镁干燥后蒸发。残余物用乙醚研制，空气干燥，得到表4中化合物13(0.11g，产率52％) 1NMR(DMSO d6)12.44(br s，1H)，10.35(s，1H)，10.26(br s，1H)，8.51(s，1H)，7.78(m，1H)，7.25(m，2H)，6.91(br s，1H)，6.82(s，1H)，6.78(s，1H)，4.69(br s，1H)，4.40(m，2H)，4.24(q，2H)，3.88(s，2H)，3.58(m，2H)，2.96(m，2H)，2.62(m，2H)，2.37(s，3H)，1.44(t，3H). MS(+ve ESI)542(M+H)+. 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-乙氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺制备如下 a)将5，7-二氟喹唑啉-4(3H)-酮(2.0g，11.0mmol)(见Hennequin，Laurent Francois Andre；Ple，Patrick.Preparation of 4-ani-linoquinazoline derivafives for the treatment of tmors.PCT国际申请WO 01/094341)和乙醇钠(3.7g，54.4mmol)在二甲基甲酰胺中的溶液在90℃加热6小时。将混合物冷却至室温，然后倒入氯化铵溶液(100ml)中。滤出形成的沉淀，用水洗，然后高真空干燥，得到5，7-二乙氧基喹唑啉-4(3H)-酮(1.36g，产率53％) MS(+ve ESI)235(M+H)+. b)将5，7-二乙氧基喹唑啉-4(3H)-酮(0.700g，2.99mmol)和甲醇钠(2.66ml，28％w/v的甲醇溶液，13.8mmol)在二甲基甲酰胺(7ml)中的溶液于110℃加热18小时。将混合物冷却至室温，然后加入浓盐酸使呈酸性，用制备型HPLC(C18硅胶柱)纯化，用乙腈(含0.2％三氟乙酸)在水(0.2％三氟乙酸)中的梯度溶液洗脱。将含产物的级分合并，加入固体碳酸氢钠使呈碱性，然后减压浓缩。滤出形成的沉淀，依次用水、乙腈和乙醚洗，最后空气干燥，得到7-乙氧基-5-甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(0.198g，产率30％) 1NMR(DMSO d6)7.94(s，1H)，6.64(s，1H)，6.53(s，1H)，4.15(q，2H)，3.83(s，3H)，1.37(t，3H). MS(+ve ESI)221(M+H)+. c)向7-乙氧基-5-甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(2.0g，9.1mmol)和二异丙基乙铵(4.26g，33.0mmol)在1，2-二氯乙烷(50ml)中的混合物加入磷酰氯(4.76g，31.0mmol)。将混合物在80℃加热6小时，冷却至室温，然后减压蒸发。残余物分配在二氯甲烷和碳酸氢钠饱和溶液之中，分离出有机层，用硫酸镁干燥，减压蒸发。粗产物在硅胶上用急骤色谱法纯化，用乙酸乙酯洗脱，得到4-氯-7-乙氧基-5-甲氧基喹唑啉(2.0g，产率92％) MS(+ve ESI)239/241(M+H)+. d)将4-氯-7-乙氧基-5-甲氧基喹唑啉(2.0g，8.4mmol)和2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(2.05g，8.13mmol)在异丙醇(40ml)中的混合物在90℃加热1小时。将混合物冷却至室温，然后用乙醚(40ml)稀释。将混合物过滤，残余物用乙醚洗，然后空气干燥，得到N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(3.76g，产率91％) 1NMR(DMSO d6)10.71(s，1H)，10.36(s，1H)，8.83(s，1H)，7.69(m，1H)，7.20(m，2H)，7.01(s，1H)，6.93(s，1H)，6.72(s，1H)，4.24(q，2H)，4.16(s，3H)，3.92(s，2H)，1.42(t，3H).MS(+ve ESI)45 5(M+H)+. e)N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(3.60g，7.34mmol)和盐酸吡啶(5.2g，45.0mmol)在吡啶(45ml)中的混合物在110℃加热5小时。将混合物冷却至室温，然后倒入碳酸氢钠饱和溶液(150ml)中。滤出形成的固体，用水洗，然后在高真空下干燥，得到N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-羟基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(2.48g，产率77％)MS(+ve ESI)441(M+H)+. f)向N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-羟基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(0.80g，1.82mmol)、2-氯乙醇(0.205g，2.55mmol)和三苯膦(0.572g，2.18mmol)在四氢呋喃(20ml)中的悬浮液一次加入0.502g(2.18mmol)的偶氮二羧酸二叔丁酯。将混合物在室温下搅拌1小时，然后加入另一份三苯膦(0.572g，2.18mmol)和偶氮二羧酸二叔丁酯(0.502g，2.18mmol)。将混合物搅拌2小时，然后用甲基叔丁基醚(20ml)稀释，过滤。残余物用甲基叔丁基醚洗，然后空气中干燥，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-乙氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.66g，产率72％) MS(+ve ESI)503(M+H)+. 实施例14表4中化合物14的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2S)-2(羟基甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表4实施例13中所述的类似方式，使用(2S)-吡咯烷-2-基甲醇(0.161g，1.59mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-乙氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.20g，0.40mmol)制备，得到表4中化合物14(0.161g，产率71％) 1NMR(DMSO d6)12.38(s，1H)，10.17(s，2H)，8.44(s，1H)，7.72(m，1H)，7.20(m，2H)，6.83(s，1H)，6.77(s，1H)，6.73(s，1H)，4.65(br s，1H)，4.39(m，1H)，4.34(m，1H)，4.18(q，2H)，3.84(s，2H)，3.39(m，2H)，3.34(m，1H)，3.17(m，1H)，2.76(m，1H)，2.56(m，1H)，2.32(m，1H)，1.77(m，1H)，1.58(m，3H)，1.39(t，3H). MS(+ve ESI)568(M+H)+. 实施例15表4中化合物15的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2-羟基乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表4实施例13中所述的类似方式，使用2-[(2-甲氧基乙基)氨基]乙醇(0.190g，160mmol)和2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-乙氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.20g，0.40mmol)制备，得到表4中化合物15(0.127g，产率54％) 1H-NMR(DMSO d6)12.37(s，1H)，10.18(s，2H)，8.44(s，1H)，7.72(m，1H)，7.18(m，2H)，6.83(s，1H)，6.76(s，1H)，6.73(s，1H)，4.61(br s，1H)，4.34(t，2H)，4.18(q，2H)，3.84(s，2H)，3.49(m，2H)，3.38(m，2H)，3.11(s，3H)，3.05(t，2H)，2.77(t，2H)，2.69(t，2H)，1.39(t，3H).MS(+ve ESI)586(M+H)+. 实施例16表5中化合物16的制备--2-[(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)(甲基)氨基]乙基磷酸二氢酯 向N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺(0.275g，0.44mmol)在二甲基乙酰胺(4ml)中的溶液加入四唑(0.092g，1.3mmol)，将混合物在室温搅拌30秒。逐滴加入二乙基亚氨基磷酸二叔丁酯(0.436g，1.75mmol)，将混合物在室温下搅拌90分钟，然后在冰浴中冷却，加入过氧化氢水溶液(30％，2mmol)。将混合物温热至室温并搅拌2小时。将其在冰浴中冷却，在保持内温低于20℃的条件下加入偏亚硫酸氢钠水溶液(10％，2.2mmol)。将混合物搅拌5分钟，然后加入20％碳酸氢钠水溶液使呈碱性。混合物用二氯甲烷萃取，有机萃取液用硫酸钠干燥，然后减压蒸发。残余物用急骤色谱法在硅胶上纯化，使用100∶5∶0.5至100∶15∶1的二氯甲烷∶甲醇∶880氨水溶液梯度洗脱。将含产物的级分合并，减压蒸发，得到2-[(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)(甲基)氨基]乙基磷酸二叔丁酯。此中间体溶在二烷(8ml)中，然后加入氯化氢/二烷溶液(4M，0.66ml，2.6mmol)，将混合物在室温下搅拌18小时。过滤，残余物用二烷洗，然后用乙醚洗，将固体于氮气氛下干燥，然后在60℃真空干燥过夜，得到表5中化合物16，为二盐酸盐(0.285g，产率86％) 1H-NMR(DMSO-d6)10.34(s，1H)，8.79(s，1H)，7.67(m，1H)，7.19(m，2H)，7.01(s，2H)，6.77(s，1H)，4.82(m，2H)，4.31(m，2H)，4.26(m，2H)，3.91(s，2H)，3.79(m，2H)，3.74(m，2H)，3.55(m，2H)，3.34(s，3H)，2.99(s，3H). MS(+ve ESI)652(M+H).+ 实施例17表5中化合物17的制备--2-[(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)(乙基)氨基]乙基磷酸二氢酯 与实施例16中所述的反应相似，但是从N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[乙基(2-羟乙基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺(0.59g，1.0mmol)出发，得到表5中化合物17(0.25g，产率32％) 1H-NMR(DMSO d6)10.35(br s，1H)，10.3(s，1H)，8.95(br s，1H)，8.65(s，1H)，7.67(m，1H)，7.16(m，2H)，6.92(dd，2H)，6.73(s，1H)，4.73(t，2H)，4.23(m，2H)，4.18(m，2H)，4.07(m，1H)，3.87(s，2H)，3.7(m，4H)，3.5(t，2H)，3.3(s，3H)，3.1(t，1H)，1.26(t，3H). MS(+ve ESI)666(M+H)+ 实施例18表5中化合物18的制备--[(2S)-1-(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)吡咯烷-2-基]甲基磷酸二氢酯 与实施例16中所述的反应类似，但是从N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺(0.49g，0.82mmol)出发，得到表5中化合物18(0.305g，产率47％) 1H-NMR(DMSO d6)10.65(br s，1H)，10.38(s，1H)，8.88(s，1H)，7.66(t，1H)，7.18(m，2H)，7.0(dd，2H)，6.72(5，1H)，4.75-4.9(m，2H)，4.15-4.3(m，4H)，3.7-4.05(m，8H)，3.3(s，3H)，2.2(m，1H)，1.75-2.1(m，3H). MS(+ve ESI)678(M+H)+ 实施例19表5中化合物19的制备--2-[[2-({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基](2-甲氧基乙基)氨基]乙基磷酸二氢酯 与实施例16中所述的反应类似，但是从N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-{[5-(2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(0.35g，0.61mmol)出发，得到表5中的化合物19(0.36g，产率78％) 1NMR(DMSO d6)10.70(br s，1H)，10.40(s，1H)，8.88(s，1H)，7.67(m，1H)，7.21(m，2H)，7.12(s，1H)，7.05(s，1H)，6.75(s，1H)，4.86(m，2H)，4.31(m，2H)，3.99(s，3H)，3.94(s，2H)，3.89(m，2H)，3.80(m，2H)，3.65(m，2H)，3.60(m，2H)，3.27(s，3H). MS(+ve ESI)652(M+H)+. 实施例20表5中化合物20的制备--{(2S)-1-[2-({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基]吡咯烷-2-基}甲基磷酸二氢酯 与实施例16中所述的反应相似，但是从N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-{(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(0.35g，0.63mmol)出发，得到表5中化合物20(0.382g，产率82％) 1NMR(DMSO d6)10.69(br s，1H)，10.40(s，1H)，8.88(s，1H)，7.66(m，1H)，7.19(m，2H)，7.10(s，1H)，7.06(s，1H)，6.75(s，1H)，4.91(m，1H)，4.86(m，1H)，4.34(m，1H)，4.25(m，1H)，4.02(m，1H)，3.99(s，3H)，3.93(s，2H)，3.86(m，4H)，2.22(m，1H)，2.04(m，1H)，1.96(m，1H)，1.83(m，1H). MS(+ve ESI)634(M+H)+. 实施例21表5中化合物21的制备--2-[[2-({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基](甲基)氨基]乙基磷酸二氢酯 与实施例1 6中所述的反应相似，但是从N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺(0.38g，0.72mmol)出发，得到表5中化合物21(0.32g，产率62％) 1NMR(DMSO d6)10.67(br s，1H)，10.36(s，1H)，8.87(s，1H)，7.67(m，1H)，7.19(m，2H)，7.06(s，1H)，7.03(s，1H)，6.76(s，1H)，4.85(m，2H)，4.28(m，2H)，3.99(s，3H)，3.93(s，2H)，3.82(m，2H)，3.58(m，2H)，3.01(s，3H). 实施例22表5中化合物22的制备--(2S)-2-{[2-({4-[(5-{2-[(3-氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基]氨基}丙基磷酸二氢酯 与实施例16中的反应类似，但是从N-(3-氟苯基)-2-(3-{[5-(2-{[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]氨基}乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺(0.48g，0.94mmol)出发，得到表5中化合物22(0.556g，产率85％) 1H-NMR(DMSO d6+CD3COOD)8.87(s，1H)，7.64(m，1H)，7.34(m，2H)，7.05(s，2H)，6.87(m，1H)，6.74(s，1H)；4.78(m，2H)，4.12(m，2H)，4.26(m，2H)，3.98(s，3H)；3.86(s，2H)，3.79(m，2H)，3.66(m，1H)，3.56(m，2H)，1.35(d，3H). MS(+ve ESI)590(M+H).+ 实施例23表6中化合物23的制备--N-(3-氟苯基)-2-(3-{[5-(2-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 将2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(185mg，0.36mmol)、2-(甲基氨基)乙醇(108mg，1.44mmol)和碘化钾(120mg，0.72mmol)在二甲基乙酰胺(2ml)中的混合物在搅拌下于90℃加热4小时。将混合物冷却至室温，然后直接用HPLC在C18硅胶上纯化，使用水/乙腈/TFA梯度洗脱，得到表6中化合物23(113mg，产率57％) 1H-NMR(DMSO d6)12.38(s，1H)，10.41(s，1H)，10.29(s，1H)，8.45(s，1H)，7.61(d，1H)，7.39-7.31(m，2H)，6.91-6.85(m，2H)，6.77(d，2H)，4.65(s，1H)，4.36(t，2H)，4.25(m，2H)，3.75-3.71(m，4H)，3.52(m，2H)，3.34(s，3H)，2.91(t，2H)，2.56(t，2H)，2.32(s，3H). MS(+ESI)554(M+H+) 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺制备如下 a)室温下向5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4(3H)-酮(500mg，1.68mmol)和N，N-二异丙基乙胺(992μl，5.70mmol)在1，2-二氯乙烷(12ml)中的混合物于搅拌下逐滴加入磷酰氯(532μl，5.70mmol)。将形成的橙色溶液于搅拌下在80℃加热6.5小时，然后蒸发大部分1，2-二氯乙烷。将残余物溶在二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发形成橙色胶状物。该胶状物用色谱法在硅胶上纯化，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到4-氯-5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉(402mg，产率76％)，为浅黄色固体。
MS(+ESI)317(M+H+). b)将4-氯-5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉(2.01g，6.34mmol)、(3-氨基-1H-吡唑-5-基)乙酸(0.89g，6.31mmol)和氯化氢(1.6ml在1，4-二烷中的4M溶液，6.4mmol)在二甲基乙酰胺(20ml)中的混合物于室温下搅拌4小时。形成的浓稠的悬浮液加到水(100ml)中，然后加入40％的氢氧化钠水溶液至pH12。接着加入2N盐酸，重新调节pH至4.8。滤出形成的浅橙色固体，用水洗，在五氧化二磷上于高真空干燥，得到(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基}乙酸(2.45g，产率92％)。
MS(+ESI)422(M+H+). c)在室温和搅拌下，向(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酸(160mg，0.38mmol)和吡啶(61μl，0.76mmol)在DMF(1.5ml)中的溶液逐滴加入三氟乙酸五氟苯基酯(212mg，0.76mmol)。将形成的溶液搅拌15分钟，然后加入3-氟苯胺(73μl，0.76mmol)。将反应混合物在室温下搅拌90分钟，然后在90℃加热2小时。冷却至室温后，将混合物加到乙醚(15ml)中。滤出形成的浅棕色固体，用乙醚洗，干燥，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氟苯基)乙酰胺(185mg，产率95％)。
MS(+ESI)515(M+H+). 实施例24表6中化合物24的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 将2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-乙氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，3-二氟苯基)乙酰胺(0.25g，0.50mmol)、(2S)-2-氨基丙-1-醇(0.15g，2.0mmol)和碘化钾(0.165g，1.0mmol)在二甲基乙酰胺(2.5ml)中的混合物在90℃加热4小时。将混合物冷却至室温，然后倒入水中。形成的沉淀用制备型HPLC纯化，用乙腈(含0.2％三氟乙酸)在水(含0.2％三氟乙酸)中的梯度洗脱液洗脱。将含产物的级分合并，用碳酸氢钠碱化，然后减压浓缩。混合物用10％的异丙醇/二氯甲烷混合物萃取，萃取液用硫酸镁干燥。将萃取液蒸发，残余物用乙醚研制，得到表6中化合物24(0.111g，产率52％) 1H-NMR(DMSO d6)12.36(s，1H)，10.24(s，1H)，10.18(s，1H)，8.45(s，1H)，7.75-7.68(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.84(s，1H)，6.76(s，1H)，6.70(s，1H)，4.61(s，1H)，4.37-4.28(m，2H)，4.18(q，2H)，3.84(s，2H)，～3.4-～3.3(m，峰属于DMSO)，3.18-3.05(m，2H)，2.82-2.71(m，1H)，1.39(t，3H)，0.98(d，3H). MS(+ESI)542(M+H+) 实施例25表6中化合物25的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-1-(羟甲基)丙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表6实施例24中所述的类似步骤，使用(2S)-2-氨基丁-1-醇(0.142g，1.6mmol)制备，得到表6中化合物25(0.133g，产率60％) 1H-NMR(DMSO d6)12.36(br s，1H)，10.27(br s，1H)，10.17(s，1H)，8.45(s，1H)，7.75-7.68(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.85(br s，1H)，6.76(s，1H)，6.70(s，1H)，4.55(br s，1H)，4.34-4.27(m，2H)，4.18(q，2H)，3.84(br s，2H)，3.47-3.89(m，1H)，～3.4-～3.3(m，峰属于DMSO)，3.18-3.07(m，2H)，1.39(t，3H)，0.87-0.77(m，2H). MS(+ESI)556(M+H+) 实施例26表6中化合物26的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-1-(羟甲基)-2-甲基丙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表6实施例24中所述的类似步骤，使用(2S)-2-氨基-3-甲基丁-1-醇(0.164g，1.6mmol)制备，得到表6中化合物26(0.148g，产率65％) 1H-NMR(DMSO d6)12.35(br s，1H)，10.26(br s，1H)，10.17(br s，1H)，8.45(s，1H)，7.76-7.67(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.86(br s，1H)，6.76(s，1H)，6.70(s，1H)，4.51(br s，1H)，4.34-4.25(m，2H)，4.18(q，2H)，3.84(br s，2H)，3.52-3.43(m，1H)，3.40-～3.3(m，1H部分峰属于DMSO)，3.23-3.14(m，1H)，3.13-3.05(m，1H)，2.40-2.31(m，1H)，1.81-1.70(m，1H)，1.39(t，3H)，0.82(d，6H). MS(+ESI)570(M+H+) 实施例27表6中化合物27的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1R)-2-羟基-1-(甲氧基甲基)乙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表6实施例24中所述的类似步骤制备，使用(2R)-2-氨基-3-甲氧基丙-1-醇[Meyers，A.I；Schmidt，Wolfgang；McKennon，Marc J.Asymmetric addition to chiral aromatic andunsaturated oxazolines using a novel chiral auxiliary. Synthesis(1993)，(2)，250-62](0.167g，1.6mmol)，得到表6中化合物27(0.124g，产率55％) 1H-NMR(DMSO d6)12.36(br s，1H)，10.26(br s，1H)，10.18(br s，1H)，8.44(s，1H)，7.77-7.67(m，1H)，7.24-7.14(m，2H)，6.84(br s，1H)，6.76(s，1H)，6.70(s，1H)，4.65-4.56(m，1H)，4.35-4.26(m，2H)，4.18(q，2H)，3.84(br s，2H)，3.50-～3.3(m，2H部分峰属于DMSO)，3.22-3.10(m，5H)，2.82-2.74(m，1H)，2.51(t，3H). MS(+ESI)572(M+H+) 实施例28表6中化合物28的制备--2-{3-[(5-{2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基}-1H-吡唑-5-基}-N-苯基乙酰胺 将2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-苯基乙酰胺、2-[(2-甲氧基乙基)氨基]乙醇(0.21g，1.8mmol)和碘化钾(0.14g，0.84mmol)在二甲基乙酰胺(2ml)中的混合物于90℃加热4小时。冷却至室温后，直接用制备型HPLC纯化，用乙腈(含0.2％三氟乙酸)在水(含0.2％三氟乙酸)中的梯度洗脱液洗脱。将含产物的级分合并，用碳酸氢钠碱化，然后用二氯甲烷萃取。萃取液用硫酸镁干燥后蒸发，残留物用乙醚研制，得到表6中化合物28(0.118g，产率52％) 1H-NMR(DMSO d6)12.38(br s，1H)，10.19(br s，1H)，8.45(br s，1H)，7.61(d，2H)，7.36-7.28(m，2H)，7.10-7.02(m，1H)，6.82(br s，1H)，6.79(s，1H)，6.74(s，1H)，4.62(br s，1H)，4.37-4.30(m，2H)，3.90(s，3H)，3.74(br s，2H)，3.53-3.46(m，2H)，3.41-3.34(m，2H)，3.11(s，2H)，3.06(t，2H)，2.77(t，2H)，2.69(t，2H). MS(+ESI)536(M+H+) 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-苯基乙酰胺制备如下 a)向新戊酸[5-(2-氯乙氧基)-7-羟基-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲基酯(3.96g，11.2mmol)、甲醇(0.39g，12.2mmol)和三苯膦(3.50g，13.4mmol)在四氢呋喃(25ml)中的溶液逐滴加入偶氮二羧酸二叔丁酯(3.08g，13.4mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液，将混合物在室温下搅拌75分钟。加入另一份三苯膦(3.5g，13.4mmol)，随后加入偶氮二羧酸二叔丁酯(3.08g，13.4mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液，将混合物在室温下搅拌90分钟。再加入一份三苯膦(3.5g，13.4mmol)，随后加入偶氮二羧酸二叔丁酯(3.08g，13.4mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液，将混合物在室温下搅拌60分钟。将混合物蒸发，残余物置于乙酸乙酯(50ml)中，用盐酸(4N)处理。滤出得到的沉淀，用乙酸乙酯洗。将残留物溶在甲醇中，蒸发该混合物。将残留物分配在二氯甲烷和碳酸氢钠饱和溶液中。分离出有机相，用硫酸镁干燥后蒸发，残留物用乙醚研制，得到新戊酸[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲酯(3.0g，产率75％)，它不作进一步纯化，直接用于下一步骤MS(+ESI)369(M+H+) b)将新戊酸[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基-4-氧喹唑啉-3(4H)-基]甲基酯(3.0g，8.14mmol)在氨/甲醇溶液(7N，60ml)中的混合物温热至50℃，得到透明的溶液，然后室温下搅拌24小时。将该混合物用甲基叔丁基醚(60ml)稀释后过滤。残留物用甲基叔丁基醚洗，然后干燥，得到5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(1.62g，产率78％) 1H-NMR(DMSO d6)11.73(br s，1H)，7.92(s，1H)，6.71(d，1H)，6.58(d，1H)，4.32(t，2H)，3.95(t，2H)，3.87(s，3H). MS(+ESI)255/257(M+H+) c)在搅拌下向5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(0.40g，1.57mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.689g，5.34mmol)在1，2-二氯乙烷(10ml)中的悬浮液逐滴加入磷酰氯(0.819g，5.34mmol)。将混合物在80℃加热5小时。蒸发后，将残余物溶于二氯甲烷，用饱和碳酸氢钠水溶液洗。分离出有机相，用硫酸镁干燥，蒸发。残留物用硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯洗脱，得到4-氯-5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉(0.30g，产率70％) MS(+ESI)273/275/277(M+H+) d)向4-氯-5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉(0.30g，1.1mmol)和(3-氨基-1H-吡唑-5-基)乙酸(0.155g，1.1mmol)在二甲基乙酰胺(3ml)中的混合物加入氯化氢/二烷溶液(4N，0.27ml)，室温下搅拌5小时。将该混合物倒入水(15ml)中，加入40％NaOH溶液使呈碱性(pH12)。向此透明的溶液中加入稀盐酸至pH为4.8。滤出形成的沉淀，残留物用水洗，然后在高真空下于P2O5上干燥，得到(3-[{5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酸(0.362g，产率87％) MS(+ESI)378/380(M+H+) e)在搅拌下向(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酸(0.16g，0.42mmol)和吡啶(0.067g，0.84mmol)在二甲基甲酰胺(1.5ml)中的悬浮液逐滴加入三氟乙酸五氟苯基酯(0.237g，0.84mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟，然后加入苯胺(0.079g，0.84mmol)。室温下搅拌混合物45分钟，再加入一份苯胺(0.01ml)，将混合物在90℃加热3小时。冷却至室温后，用乙醚(15ml)稀释。形成的沉淀物用乙醚研制，空气干燥，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-苯基乙酰胺(0.193g，产率100％)，它在用于下一步骤前不作进一步的纯化 MS(+ESI)453/455(M+H+) 实施例29表6中化合物29的制备--N-(2，4-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表6实施例28中所述的类似的步骤，使用2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，4-二氟苯基)乙酰胺(0.15g，0.31mmol)制备，得到表6中化合物29(0.068g，产率39％) 1H-NMR(DMSO d6)12.37(br s，1H)，10.18(s，1H)，9.99(br s，1H)，8.45(s，1H)，7.90-7.82(m，1H)，7.37-7.28(m，1H)，7.10-7.03(m，1H)，6.83(br s，1H)，6.79(s，1H)，6.75(s，1H)，4.61(br s，1H)，4.37-4.30(m，2H)，3.90(s，3H)，3.81(br s，2H)，3.53-3.45(m，2H)，3.41-3.34(m，2H)，3.11(s，3H)，3.08-3.02(m，2H)，2.77(t，2H)，2.69(t，2H). MS(+ESI)572(M+H+) 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，4-二氟苯基)乙酰胺制备如下 a)按照与表6实施例28(e)中所述类似的步骤，使用2，4-二氟苯胺(0.137g，1.1mmol)制备，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，4-二氟苯基)乙酰胺(0.15g，产率72％) MS(+ESI)489/491(M+H+) 实施例30表6中化合物30的制备--N-(3，5-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表6实施例28中所述类似的步骤，使用2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3，5-二氟苯基)乙酰胺(0.15g，0.31mmol)制备，得到表6中化合物30(0.072g，产率41％) 1H-NMR(DMSO d6)12.40(br s，1H)，10.59(s，1H)，10.19(s，1H)，8.45(s，1H)，7.38-7.30(m，2H)，6.96-6.87(m，1H)，6.83(br s，1H)，6.79(s，1H)，6.74(s，1H)，4.64-4.58(m，1H)，4.38-4.30(m，2H)，3.90(s，3H)，3.77(br s，2H)，3.52-3.45(m，2H)，3.41-3.34(m，2H)，3.11(s，3H)，3.08-3.02(m，2H)，2.77(t，2H)，2.69(t，2H). MS(+ESI)572(M+H+) 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3，5-二氟苯基)乙酰胺制备如下 a)按照与表6实施例28(e)中所述类似的步骤，使用3，5-二氟苯胺(0.137g，1.1mmol)制备，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3，5-二氟苯基)乙酰胺(0.15g，产率72％) MS(+ESI)489/491(M+H+) 实施例31表6中化合物31的制备--N-(2，5-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟基乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺 按照与表6实施例28中所述类似的步骤，使用2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，5-二氟苯基)乙酰胺(0.18g，0.37mmol)制备，得到表6中化合物31(0.048g，产率23％) 1H-NMR(DMSO d6)12.37(br s，1H)，10.19(br s，2H)，8.45(s，1H)，7.96-7.88(m，1H)，7.38-7.29(m，1H)，7.03-6.94(m，1H)，6.83(br s，1H)，6.79(s，1H)，6.75(s，1H)，4.61(br s，1H)，4.34(t，2H)，3.90(s，3H)，3.89-3.82(m，2H)，3.53-3.46(m，2H)，3.41-3.34(m，2H)，3.11(s，3H)，3.06(t，2H)，2.77(t，2H)，2.69(t，2H). MS(+ESI)572(M+H+) 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，5-二氟苯基)乙酰胺制备如下 a)按照与表6实施例28(e)中所述类似的步骤，使用2，5-二氟苯胺(0.137g，1.1mmol)制备，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(2，5-二氟苯基)乙酰胺(0.18g，产率87％) MS(+ESI)489/491(M+H+) 实施例32表6中化合物32的制备--N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表3实施例10中所述类似的步骤，使用(2R)-吡咯烷-2-基甲醇(0.296g，2.93mmol)制备，得到表6中化合物32(0.243g，产率10％) 1H-NMR(DMSO d6)12.1-12.0(br s，1H)，10.08(s，1H)，9.75(s，1H)，8.42(s，1H)，7.70-7.66(m，1H)，7.20-7.10(m，2H)，6.85-6.76(m，3H)，4.45-4.33(m，2H)，4.29-4.26(m，2H)，4.18-4.08(br s，1H)，3.86-3.78(br s，1H)，3.76-3.73(m，2H)，3.38(s，3H)，3.43-3.32(m，3H)，3.19-3.14(m，1H)，2.89-2.84(m，1H)，2.68-2.60(m，1H)，2.45-2.39(m，1H)，1.85-1.77(m，1H)，1.68-1.60(m，2H)，1.60-1.50(m，1H) MS(+ESI)598(M+H+) 实施例33表6中化合物33的制备--N-(4-氯-2-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表6实施例23中所述类似的步骤，使用2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(4-氯-2-氟苯基)乙酰胺(0.19g，0.35mmol)和2-(甲基氨基)乙醇(0.104g，1.39mmol)制备，得到表6中化合物33(0.102g，产率50％) 1H-NMR(DMSO d6)12.36(s，1H)，10.28(s，1H)，10.09(br s，1H)，8.44(s，1H)，8.1-7.92(m，1H)，7.53-7.45(m，1H)，7.30-7.23(m，1H)，6.85(br s，1H)，6.78(s，1H)，6.76(s，1H)，4.68-4.61(m，1H)，4.40-4.31(m，2H)，4.28-4.22(m，2H)，3.83(br s，2H)，3.74-3.69(m，2H)，3.56-3.49(m，2H)，3.34(s，3H)，2.94-2.88(m，2H)，2.56(t，2H)，2.32(s，3H). MS(+ESI)588/590(M+H+) 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(4-氯-2-氟苯基)乙酰胺制备如下 a)按照与实施例23(c)中所述类似的步骤，使用4-氯-2-氟苯胺(0.110g，0.76mmol)制备，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(4-氯-2-氟苯基)乙酰胺(0.19g，产率91％) MS(+ESI)549(M+H+) 实施例34表6中化合物34的制备--N-(3-氯-2-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺 按照与表6实施例23中所述类似的步骤，使用2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氯-2-氟苯基)乙酰胺(0.20g，0.36mmol)和2-(甲基氨基)乙醇(0.109g，1.45mmol)制备，得到表6中化合物34(0.108g，产率50％) 1H-NMR(DMSO d6)12.37(s，1H)，10.29(s，1H)，10.16(br s，1H)，8.45(s，1H)，7.88(t，1H)，7.35(t，1H)，7.20(t，1H)，6.86(br s，1H)，6.79(s，1H)，6.77(s，1H)，4.69-4.61(m，1H)，4.39-4.32(m，2H)，4.28-4.22(m，2H)，3.84(br s，2H)，3.75-3.69(m，2H)，3.56-3.49(m，2H)，3.34(s，3H)，2.91(t，2H)，2.57(t，2H)，2.32(s，3H). MS(+ESI)588/590(M+H+) 作为起始物使用的2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氯-2-氟苯基)乙酰胺制备如下 a)按照与实施例23(c)中所述类似的步骤，使用3-氯-2-氟苯胺(0.110g，0.76mmol)制备，得到2-(3-{[5-(2-氯乙氧基)-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)-N-(3-氯-2-氟苯基)乙酰胺(0.20g，产率96％) MS(+ESI)549(M+H+)
权利要求
1.一种式(I)化合物
或其盐、酯或前药；
其中
R1是氢或是任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷氧基；
R2是式(IA)基团，其中*是与式(I)的连接点；
R3是氢，或是任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷基；
或者R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成一个式(IB)的环，其中*是与式(I)的连接点；
或者R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成一个式(IC)的环，其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是任选被C1-4烷氧基取代的C2-4烷氧基；
R4是任选被1或2个卤素取代的苯基；
R5是氢或是任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷基；
n是0或1；和
X是CH2、NH，N(C1-4烷基)，O或S。
2.权利要求1的一种化合物，或其盐、酯或前药，其中R2是2-羟基乙基，(1S)-2-羟基-1-甲基乙基，(1S)-2-羟基-1-乙基乙基，(1S)-2-羟基-1-异丙基乙基或(1S)-2-羟基-1-(甲氧基甲基)乙基。
3.权利要求2的化合物或其盐、酯或前药，其中R2是2-羟基乙基或(1S)-2-羟基-1-甲基乙基。
4.前述任一项权利要求的化合物，或其盐、酯或前药，其中R3是氢、甲基、乙基或甲氧基乙基。
5.权利要求1的化合物，或其盐、酯或前药，其中R2和R3与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点；或者R2和R3与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧基乙氧基。
6.权利要求5的化合物，或其盐、酯或前药，其中R2和R3与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点；或者R2和R3与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧基乙氧基。
7.权利要求6的化合物，或其盐、酯或前药，其中R2和R3与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点。
8.权利要求1的式(I’)化合物
或其盐；
其中
R1是氢或任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷氧基；
R2′是一个式(IA′)基团，其中*是与式(I′)的连接点；
R3′是氢或是任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷基；
或者R2′和R3′与它们所连接的氮原子一起形成一个式(IB′)的环，其中*是与式(I′)连接的点；
或者R2′和R3′与它们所连接的氮原子一起形成一个式(IC′)的环，其中*是与式(I′)的连接点，条件是，在这种情形，R1是任选被C1-4烷氧基取代的C2-4烷氧基；
R4是任选被1或2个卤原子取代的苯基；
R5是氢，或是任选被C1-4烷氧基取代的C1-4烷基；
n是0或1；和
X是CH2，NH，N(C1-4烷基)，O或S。
9.权利要求8的化合物或其盐，其中R2’是2-膦酰氧乙基，(1S)-2-膦酰氧基-1-甲基乙基，(1S)-2-膦酰氧基-1-乙基乙基，(1S)-2-膦酰氧基-1-异丙基乙基或(1S)-2-膦酰氧基-1-(甲氧基甲基)乙基。
10.权利要求9的化合物或其盐，其中R2’是2-膦酰氧乙基或(1S)-2-膦酰氧基-1-甲基乙基。
11.权利要求8至10中任一项的化合物或其盐，其中R3’是氢、甲基、乙基或甲氧基乙基。
12.权利要求8的化合物或其盐，其中R2’和R3’与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点；或者R2’和R3’与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧基乙氧基。
13.权利要求12的化合物或其盐，其中R2’和R3’与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点；或者R2’和R3’与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点，条件是，在这种情形，R1是乙氧基或甲氧基乙氧基。
14.权利要求13的化合物或其盐，其中R2’和R3’与它们所连接的氮原子合起来形成
其中*是与式(I)的连接点。
15.前述任一项权利要求的化合物，或其盐、酯或前药，其中R1是任选被甲氧基取代的C1-4烷氧基。
16.权利要求15的化合物，或其盐、酯或前药，其中R1是甲氧基、乙氧基或甲氧基乙氧基。
17.前述任一项权利要求的化合物，或其盐、酯或前药，其中R4是任选被1或2个氟或氯取代的苯基。
18.权利要求17的化合物，或其盐、酯或前药，其中R4是苯基、3-氟苯基、2，3-二氟苯基、2，4-二氟苯基、2，5-二氟苯基、2-氟-3-氯苯基或2-氟-4-氯苯基。
19.权利要求18的化合物，或其盐、酯或前药，其中R4是3-氟苯基或2，3-二氟苯基。
20.权利要求1的化合物，选自
N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟基乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(3-氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(1S)-2-羟基-1-甲基乙基]氨基}乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟基乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[乙基(2-羟基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[乙基(2-羟乙基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}喹啉唑-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-{3-[(7-乙氧基-5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(3-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-2羟基-1-甲基乙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-1-(羟甲基)丙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1S)-1-(羟甲基)乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[7-乙氧基-5-(2-{[(1R)-2-羟基-1-(甲氧基甲基)乙基]氨基}乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}-N-苯基乙酰胺；
N-(2，4-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(3，5-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，5-二氟苯基)-2-{3-[(5-{2-[(2-羟乙基)(2-甲氧基乙基)氨基]乙氧基}-7-甲氧基喹唑啉-4-基)氨基]-1H-吡唑-5-基}乙酰胺；
N-(2，3-二氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(4-氯-2-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
N-(3-氯-2-氟苯基)-2-(3-{[5-{2-[(2-羟乙基)(甲基)氨基]乙氧基}-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-基]氨基}-1H-吡唑-5-基)乙酰胺；
2-[(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)(甲基)氨基]乙基磷酸二氢酯；
2-[(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)(乙基)氨基]乙基磷酸二氢酯；
[(2S)-1-(2-{[4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-5-基]氧}乙基)吡咯烷-2-基]甲基磷酸二氢酯；
2-{[2-({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基](2-甲氧基乙基)氨基}乙基磷酸二氢酯；
{(2S)-1-[2-({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基]吡咯烷-2-基}甲基磷酸二氢酯；
2-{[2({4-[(5-{2-[(2，3-二氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基](甲基)氨基}乙基磷酸二氢酯；和
(2S)-2-{[2-({4-[(5-{2-[(3-氟苯基)氨基]-2-氧乙基}-1 H-吡唑-3-基)氨基]-7-甲氧基喹唑啉-5-基}氧)乙基]氨基}丙基磷酸二氢酯；
或其可药用的盐。
21.一种药物组合物，其中含有前述任一项权利要求中定义的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药，和与其结合的一种可药用的稀释剂或载体。
22.作为药物使用的权利要求1至20中任一项定义的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前药。
23.作为治疗过度增生性疾病例如癌症的药物使用的权利要求22的化合物，或其可药用的盐、酯或前药。
24.权利要求1至20中任一项中定义的式(I)化合物或其可药用盐、酯或前药在制备用于治疗过度增生性疾病的药物中的应用。
25.权利要求24的应用，其中过度增生性疾病是结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或胰腺癌或者白血病或淋巴癌中的任何一种。
26.一种治疗患者有某种会从抑制一种或多种Aurora激酶中受益的疾病的人的方法，其中的步骤包括向有需要的患者施用治疗有效量的权利要求1至20中任一项定义的化合物或其可药用的盐。
27.一种治疗患有结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、膀胱癌或者肾癌或者白血病或淋巴癌的人的方法，其步骤包括向有需要的患者施用治疗有效量的权利要求1至20中任一项定义的化合物或其可药用的盐。
28.一种制备式(I)化合物或其盐、酯或前药的方法，该方法包括其中L1是一个离去基团的式(II)化合物
与式(III)的胺反应
其中R1、R2、R3和R4与权利要求1中的定义相同，随后如有必要
(1)将式(I)化合物转化成另一式(I)化合物；
(2)除去保护基团；和/或
(3)形成盐、酯或前药。
29.一种制备式(I’)化合物或其盐的方法，该方法包括权利要求1中定义的化合物的磷酸化，随后如有必要
(1)将式(I’)化合物转化成另一式(I’)化合物；
(2)除去任何保护基团；和/或
(3)形成盐。
全文摘要
本发明提供了一种式(I)化合物，用于治疗疾病，特别是增生性疾病，例如癌症，和用于制备在治疗增生性疾病中使用的药物；本发明还提供了制备这类化合物的方法，以及含有这类化合物作为活性成分的药物组合物。
文档编号A61K31/517GK101115738SQ200580047834
公开日2008年1月30日 申请日期2005年12月16日 优先权日2004年12月21日
发明者K·M·富特 申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司