用于治疗的噻唑并嘧啶类的制作方法

专利名称：用于治疗的噻唑并嘧啶类的制作方法
技术领域：
本发明涉及瘗唑并嘧啶类在治疗痛觉过敏性疼痛病症及其症状中的治 疗用途。
背景技术：
痛觉过敏性疼痛病症是由组织损伤引起的痛觉增加的病症。这些病症 是一种受损个体神经系统的自然应答，显然是用于促进受损组织的保护以 获得用于发生组织修复的时间。痛觉过敏性疼痛病症的症状包括痛觉过 敏、异常性疼痛(触觉、热)和感觉异常。痛觉过敏是一种对痛觉刺激的异 常疼痛反应。异常性疼痛是一种在正常刺激引起疼痛的情况下的病症。感 觉异常是一种皮肤的感觉异常，比如麻木、麻刺感、刺痛感、烧灼感、没 有^1观原因的蠕动感。这些病症存在两种已知的基本原因，即感觉神经元 活性的增加和脊髓中存在的感受伤害信息的神经元处理的改变。在慢性炎 症中和当感觉神经损伤已发生(即神经病理性疼痛)时，这些病症可被削弱。 如上所述，痛觉过敏性疼痛病症在大多数组织损伤情况下是一种后果，所 述组织损伤为对感觉神经的直接损伤，或者对某一已知感觉神经支配的組 织的损伤。
涉及包含神经病理性疼痛的组元的感觉神经损伤的疾病包括但不限于 糖尿病神经病变、癌症痛、纤维肌痛、肌筋膜痛综合征、骨关节炎、胰腺 痛、骨盆/会阴痛、疱渗后神经痛、复杂性区域疼痛综合征、坐骨神经痛/
腰部神经根病、推管狭窄、颞颌关节紊乱、HIV痛、三叉神经痛、慢性神 经病理性疼痛、下背部痛、背部手术失败疼痛(failed back surgery pain )、 术后痛、身体创伤后疼痛(包括枪击、RTA、烧伤)、心痛、胸痛、骨盆痛 /pid、关节痛(腱炎、滑嚢炎、急性关节炎)、颈痛、产痛(分^/C-切开)、肾 绞痛、急性带状疱渗痛、急性胰腺炎、爆发性疼痛(breakthrough pain) (癌症)和痛经/子宫内膜异位症。
已知两种主要类型的镇痛药(i)非甾体抗炎药(NSAIDs)及其相关 COX-2抑制剂；和(ii)基于吗啡的麻醉药。两种类型的镇痛药均在控制正常痛、即时痛(immediatepain)或伤害性疼痛中相当有效。然而，它们对于 抗某些类型的痛觉过敏性疼痛(比如神经病理性疼痛)的有效性较低。许 多医师不愿开用于影响神经病理性疼痛所需的高剂量的麻醉剂，这是因为 施用这些化合物引起的副作用及患者可能对其上瘾的可能性。NSAID比麻 醉剂的功效低得多，所以需要更高剂量的这些化合物。然而，这是不想要 的，因为这些化合物引起胃肠道的刺激。
因此，需要有抗痛觉过敏性疼痛和神经病理性疼痛治疗，所述治疗足 以有效控制神经病理性及其它痛觉过敏性综合征中的痛觉，并且没有严重 的副作用或引起患者对其上瘾。
EP國A-0050671描述了式(I)
<formula>formula see original document page 5</formula>(1》
的噻唑并[3，2-a嘧咬衍生物
其显示出免疫调节性质，并可用作治愈自身免疫性疾病比如肾炎和类风湿 性关节炎的药剂。 一种具体的式(I)化合物为6-(对-氯节基)-5H-2，3,6，7-四氢 -5,7-二氧代瘗唑并[3,2-3嘧啶，或者称为奴氯美酮，以下称为化合物l，其 结构式为
化合物1最初是作为用于类风湿性关节炎或肾炎的潜在性治疗而开发 的，但是现在在这些适应症中已经终止了开发。在临床前研究中，奴氯美 酮恢复患有自身免疫性神经病的小鼠的肾功能并抑制脂多糖诱导的多克 隆抗体应答。

发明内容
本发明的第一个方面是式(I)化合物
二o
在制备用于治疗痛觉过敏性疼痛病症及其症状中的用途
其中R为脂环基；芳基乙基；或被卣素、低级烷基、烷氧基、OH、 NH2、 NH烷基、N(烷基)2、 CN或N02取^f戈的苯基或千基。
本发明的可替换的表达方式为用于治疗有此需要的患者中痛觉过敏性 疼痛的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的式(I)化合物。
已经发现，在施用式(I)化合物后，没有观察到对正常的生理学伤害感 受有影响，因此，当使用这样的化合物来治疗痛觉过敏时，不存在正常感 官知觉的减少。
具体实施例方式
本文使用的术语"卣素"包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。
本文使用的术语"烷基"指直链或支链不饱和脂肪族部分，包括例如曱 基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等。"低级烷基"指 包含1至个6碳原子的烷基。
本文使用的术语"烷氧基"指通过氧原子连接的如上定义的烷基。其包 括但不限于甲錄、乙氧基、丙狄、异丙猛、丁錄、叔丁錄、戊 狄、己錄等。"低级烷氧基"指包含l至6个^f、子的烷錄。
本文使用的术语"芳基"指任选取代的芳香环体系和任选取代的多环体 系，所述多环体系具有两个或多个环状环，其中至少一个为芳香性的。该 术语包括例如苯基。
本文使用的术语"芳基乙基"指芳基取代的乙基。
本文使用的术语"脂环"指其可包含一个或多个非共轭双键的非芳香饱 和的环状部分。该基团可任选地被取代。其包括但不限于环丙基、环丁基、
环戊基、环庚基、环己基、2-甲基环丙基等。
本发明中所用的优选的化合物为6-(对-氯苄基)-5H-2，3，6，7-四氢-5,7-二 氧代噢唑并[3，2-a嘧啶，即化合物1。<formula>formula see original document page 7</formula>
用于本发明的化合物可以以如下的两种互变异构形式存在
用于本发明的化合物可以是手性的。它们可以是单一对映异构体形式，
例如基本上不含相反对映异构体的(R)对映异构体，或者反之亦然，或非对 映体(如果所述R基团为手性的)或外消旋体。
本发明的化合物可以以外消旋形式制备，或者通过特定的合成或拆分 制备成单一的对映异构体形式，正如本领域技术人员理解的。所述化合物 可以例如通过标准技术被拆分成它们的对映异构体，比如通过用光学活性 的酸形成盐，然后分级结晶和再生游离碱，从而形成非对映体对。或者， 所述新化合物的对映异构体可以通过使用手性柱的HPLC进行分离。
为了在本发明中使用，通式的化合物可以作为前药给出。本文使用的 术语"前药，，指作为药物前体的化合物，所述化合物在给药后，在体内经由 某些化学或生理过程释放药物。此外，用于本发明的化合物可以是保护的 氨基、保护的羟基或保护的氛基形式。本文使用的术语"保护的氨基"、"保 护的鞋基，，和"保护的羧基"指以本领域技术人员熟知的方式受到保护的氨 基、羟基和羧基。例如，氨基可以通过千lL&羰基、叔丁g羰基、乙酰
7 基或类似基团保护，或者是邻苯二甲酰亚JtJ^或类似基团的形式。羧基可 以以易于分解的酯的形式进行保护，比如甲酯、乙酯、苄酯或叔丁酯。羟 基可以通过烷基或类似基团保护。
所述通式的某些化合物可以以溶剂化物的形式存在，比如水合物，其 也落入本发明的范围内。
本发明所用的化合物可以是药学可接受的盐的形式，例如无机酸或有 机酸的加成盐。这样的无机酸加成盐包括，例如氢溴酸、盐酸、硝酸、磷 酸和硫酸的盐。有机酸加成盐包括，例如醋酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺
酸、柠檬酸、2-(4-氯苯SJ0-2-甲基丙酸、1，2-乙烷二磺酸、乙磺酸、乙二 胺四乙酸(EDTA)、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、N-羟乙酰基对氨 苯基砷酸、4-己基间^l酚、马尿酸、2-(4-羟基苯曱酰基)苯甲酸、1-羟基 -2-萘甲酸、3-羟基-2-萘曱酸、2-羟基乙磺酸、乳糖酸、正十二烷基硫酸、 马来酸、苹果酸、扁桃酸、曱磺酸、曱基硫酸、粘酸、2-^酸、双羟萘 酸、泛酸、对氨基苯膦酸(phosphanilicacid)((4-tJ^苯基)膦酸)、苦味酸、 水杨酸、硬脂酸、丁二酸、鞣酸、酒石酸、对苯二曱酸、对-曱笨璜酸、10-十一碳烯酸等。
盐也可以是与无机喊形成的。这样的无机喊盐包括，例如，铝、铋、 钙、锂、镁、钾、钠、锌等的盐。有机碱盐包括，例如，N,N-二千基乙二 胺、胆碱(作为平衡离子)、二乙醇胺、乙醇胺、乙二胺、N,N-二(去氬+〉香 基)乙二胺、N-甲基葡糖胺、普鲁卡因、三(羟甲基)氨基乙烷("TRIS，，)等的 盐。
应当理解，这些盐可以在治疗中使用，前提为它们是药学可接受的。制备。
用于本发明的化合物可以通过本领域任意适宜的方法制备。可提及的 参考为EP-A-0050671,将其内容通过引用并入本文。
可以基于组分的物理化学差异以已知方法将获得的终产物或中间体的 任意混合物分离成纯的终产物或中间体，所述方法例如通过色谱法、蒸馏、 分级结晶进行或者如果在这种情况下适当或可能的话通过形成盐进行。
所述化合物的活性和选择性可以通过本领域已知的任何合适的方法来 测定。
本发明涉及式(I)的化合物在制备用于预防、治疗或改善痛觉过敏性疼 痛病症及其症状的药物中的用途。
所述痛觉过敏性疼痛病症可以是如下神经病引起的结果，所述神经病 包括但不限于糖尿病神经病变、多神经病、癌症痛、纤维肌痛、肌筋膜痛 综合征、骨关节炎、胰腺痛、骨盆/会阴痛、疱渗后神经痛、复杂性区域疼
痛综合征、坐骨神经痛/腰部神经根病、推管狭窄、颞颌关节紊乱、HIV痛、 三叉神经痛、慢性神经病理性疼痛、下背部痛、背部手术失败疼痛(failed back surgery pain)、术后痛、身体创伤后疼痛(包括枪击、RTA、烧伤)、 心痛、胸痛、骨盆痛/pid、关节痛(腱炎、滑嚢炎、急性关节炎)、颈痛、肠 痛、幻肢痛、产痛(分^/C-切开)、肾绞痛、急性带状疱瘆痛、急性胰炎、 爆发性疼痛(breakthrough pain )(癌症)、疼痛的膀胱综合征/间质性膀胱 炎、前列腺炎和痛经/子宫内膜异位。
式(I)的化合物可以与其它治疗剂或不与其它治疗剂一起施用，所述其 它治疗剂例如为镇痛药和抗炎药(比如阿片类物质、类固醇、NSAID、 M 素类物质、速激肽调节剂或緩激肽调节剂)或抗痛觉过敏药(比如加巴喷丁 、 普瑞巴林、M素类物质、钠或钙离子通道调节剂、抗癫痫药或抗抑郁药)。
通常，式(I)的化合物可通过任意合适的途径在任意合适的制剂中通过 已知的方式施用。本发明的化合物优选口服、肠胃外、舌下、经皮、鞘内 或经粘膜施用。其它合适的途径包,脉内、肌内、皮下、吸入、鼻腔、 直肠、局部和膀胱内。口JIMfe用时施用的药物量将典型地高于例如静脉内 施用时。
所述组合物可以按本领域技术人员已知的方式配制，以便得到控释的 (例如快速释放或持续释放的)本发明化合物。适合在这样的组合物中使 用的药学可接受的载体是本领域众所周知的。本发明的组合物可包含 0.1-99 wt。/。的活性化合物。本发明的组合物通常以单位剂型制备。优选地， 单位剂量包含0.1至1000 mg量的活性成分。在这些组合物的制剂中使用 的赋形剂是本领域已知的赋形剂。
合适的剂量水平可以通过本领域技术人员已知的任意合适的方法确 定。然而，应当理解，任意特定患者的具体剂量水平将取决于多种因素，包括使用的具体化合物的活性、年龄、体重、 一般健康状况、性别、饮食、 施用时间、施用途径、排泄速率、药物组合及痛觉过敏的严重程度。优选
地，结构(I)的化合物以每日l至4次的频率施用。
用于口月l拖用的组合物包括用于这样施用的已知药物形式，例如片剂、
糖锭、锭剂、含7jC或含油混悬液、可分軟的粉末或颗粒、乳剂、,嚢或 皿嚢、或糖浆或酏剂。意欲用于口服应用的组合物可以根据用于制备药 物组合物的领域中已知的任意方法制备，这样的组合物可包含一种或多种 选自甜朱剂、调味剂、着色剂和防腐剂的药剂，以^更提供药学优良的和可 口的制剂。片剂包含与适于制备片剂的无毒的药学可接受的赋形剂混合的 活性成分。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂比如碳酸钓、碳酸钠、
乳糖、磷酸钓或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合 剂，例如淀粉明胶、阿拉伯胶、微晶纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；和润滑剂， 例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。所述片剂可以是未包衣的，或者它们可以 是通过已知的延迟在胃肠道中崩解和吸收的技术包衣的，从而提供较长时 间的持续作用。例如，可以使用延时的物质比如单硬脂酸甘油酯或二硬脂 酸甘油酯。
用于口服的制剂也可以明胶硬胶嚢的形式存在，其中将活性成分与惰 性固体稀释剂例如碳酸钓、磷酸钓或高冷土混合，或者以明胶皿嚢的形 式存在，其中将活性成分与水或油介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油混 合。
含水混悬液包含与适于制^^水混悬液的赋形剂混合的活性物质。这 样的赋形剂为助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤 维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分歉剂或润湿剂 可以是天然存在的磷脂例如卵磷脂，或环氧烷与脂肪酸的缩合产物例如硬 脂酸聚环氧乙烷酯，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物例如十七亚乙基 IL^鲸蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或环氧乙烷与源自脂肪酸的 偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯。所述含水悬浮液也 可含有 一种或多种防腐剂,例如对羟基苯曱酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯， 一种或多种着色剂， 一种或多种调味剂和一种或多种甜，未剂,比如蔗糖或糖 精。
含油悬浮液可以通过将活性成分混悬在植物油或矿物油或其它表面活
性剂或清洁剂中而配制，所述植物油例如为花生油、歉脱油、^M由或椰 子油、聚环氧乙烷氢化蓖麻油，脂肪酸比如油酸，所述矿物油比如液体石 蜡。所述含油悬浮液可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。可以 加入^^未剂(比如上述列出的那些)和调味剂以提供可口的口服制剂。这 些组合物可以通#入抗氧化剂比如抗坏血酸来保存。
适于通过加入水来制^水混悬液制剂的可*粉末和颗粒提供了与 分歉剂或润湿剂、助悬剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。也可存在 适宜的朝，朱剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以为水包油型乳剂的形式。所述油相可以是 植物油，例如橄榄油或花生油，或者矿物油，例如液体石蜡，或其混合物。 适宜的的乳化剂可以是天然存在的胶，如阿拉伯胶或黄蓍胶，天然存在的 磷脂，例如大豆、卵磷脂和衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如单 油酸失水山梨醇酯，以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚环氧乙 烷失水山梨醇单油酸酯。所述乳剂也可包^朱剂和调P未剂。
糖浆剂或酏剂可用甜味剂来配制，所述餘朱剂例如甘油、丙二醇、山 梨醇或蔗糖。这样的制剂也可包含润湿剂、防腐剂和调味剂以及着色剂。 所述药物组合物可以是无菌可注射的含水或油脂性混悬液的形式。该悬浮
剂来制备。所述无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂
或溶剂中无菌可注射溶液或悬浮液，例如作为在l,3-丁二醇中的溶液。可 以在可接受的赋形剂和溶剂中使用的为水、^溶液和等渗氯化钠溶液。 此外，通常使用无菌、不挥发油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使 用任意温和的非挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸 比如油酸在可注射制剂中使用。
本发明中使用的化合物也可以以直肠施用所述药物的形式施用。这些 组合物可以通过将药物与适宜的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂 在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此，将在直肠中溶化以释放 所述药物。这样的物质为可可脂和聚乙二醇类。
用于局部给药的组合物也适用于本发明。药学活性化合物可以*在 药学可接受的乳膏、软膏或凝胶中。适宜的乳膏可以通过将所述活性化合
物加入局部赋形剂比如轻液状石蜡中，4吏用表面活性剂^b^7jc介质中而
制备。软骨可以通过混合活性化合物与局部赋形剂比如矿物油或蜡来制 备。凝胶可以通过混合活性化合物与包括劍欧剂的局部赋形剂来制备。局 部给药的组合物也可包含将本发明的药学活性化合物分散在其中使得所 述化合物与皮肤接触以便经皮施用所述化合物的基质。
式(I)化合物可用于治疗如下神经病或炎性疾病(或两者组合)引起的疼 痛，所述疾病包括但不限于糖尿病神经病变、多神经病、癌症痛、纤维肌 痛、肌筋膜痛综合征、骨关节炎、胰腺痛、骨盆/会阴痛、疱渗后神经痛、 复杂性区域疼痛综合征、坐骨神经痛/腰部神经才艮病、推管狭窄、颞颌关节
紊乱、HIV痛、三叉神经痛、慢性神经病理性疼痛、下背部痛、背部手术 失败疼痛(failed back surgery pain)、 术后痛v身体创伤后疼痛(包括枪 击、RTA、烧伤)、心痛、胸痛骨盆痛/pid、关节痛(腱炎、滑嚢炎、急性 关节炎)、颈痛、肠痛、幻肢痛、产痛(^/C-切开)、肾绞痛、急性带状疱 渗痛、急性腹腺炎穿透痛(acute pancreatitis breakthrough pain )、癌症 痛、痛经/子宫内膜异位、疼痛性膀胱综合征/间质性膀胱炎、前列腺炎、 骨关节炎、类风湿性脊推炎、痛风性关节炎及其它关节炎病症、癌症、HIV、 慢性肺部炎性疾病、矽肺、肺部肉瘤病、骨吸收疾病、再灌注损伤(包括由 于再灌注后缺血发作例如心肌梗死、中风引起的器官损伤)、自身免疫损伤 (包括多发性硬化症、GuiUam-Barre综合征、重症肌无力)、移植体v.宿主 排异反应、同种异体移植物排斥、感染引起的发热和肌痛、AIDS相关综 合征(arc)、瘢痕疙瘩形成、瘢痕组织形成、克罗恩病、溃疡性结肠炎和 pyresis、肠易激综合征、骨质疏爭>症、脑型疟和细菌性脑膜炎。
以下实施例提供了本发明基于的证据。它们利用了在下述参考中报道 的模型
Bennett, GJ和Xie， YK (1988)., "A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man" , Pain 33:87-107。
Brennan TJ, Vandermeulen EP 和Gebhart GF (1996), "Characterization of rat model of incisional pain" , Pain 64:493-501。
实施例1在大鼠慢性缩窄性损伤(CCI)模型中的单口服剂量研究
外科手术
根据标准方案(Bennett和Xie， 1988 )制备大鼠慢性缩窄性损伤(CCI) 模型。筒言之，用5%异氟烷(isofluorane)/95%氧气混合物，然后用戊 巴比妥钠腹腔注射(50 mg/kg)来麻醉雄性Sprague-Dawley大鼠，到达时称 重为150-175克。切下左侧后肢的侧面，用75%的乙醇杀菌。切开约lcm 的切口以暴露坐骨神经。在所述坐骨神经上用4-0缝合线进行四个不牢固 的结扎。用缝线闭合伤口成层，并且将动物置于温度控制在30'C的恢复室 中。然后，在完全意识恢复和自由活动恢复后，将动物放回它们的笼中。 在手术后，常规蒯度内注射一定剂量的阿莫西林(O.l ml， 15mg)以预防感染。
行为测试(机械性异常性疼痛)
在手术后14天开始评价CCI大鼠中对机械性刺激响应的爪撤回阈值 (PWT)。在施用药物前的连续3日和施用药物后的0.5、 1、 2、 3和4小时 测定基线阈值。使用一组分级的von Frey细丝(hairs)测定PWT。在测定 前至少30分钟，将所述动物置于在升高的金属网上的单个的有机玻璃箱 中。从较低力(l g)的细丝开始，将每个细丝垂直地施用于爪垫的中心直到 其稍微弯曲6秒。如果在刺激时所述动物缩回或抬高其爪，然后立即使用 比测定中较低力的细丝。如果没有观察到应答，然后立即使用较高力的细 丝。记录诱导可靠的应答(在5次试验中3次阳性)所需的最低量的力作为 PWT的值。
药物制剂
用在生理盐水(IO mg/ml)中的5% DMSO制备化合物1的悬浮液。施 用前，超声处理所述悬浮液至少20分钟。
结果
在该研究中的所有数据以平均值士S.E.M.给出，并且视情况而定用t检 验和单因素ANOVA分析。显著性水平设定为p<0.05。
赋形剂对照在口服(p.o.)赋形剂之前和之后0.5、 1、 2、 3和4小时测 定爪撤回阈值(PWT)。在观察的时间点，在不同的赋形剂对照组中没有观 察到显著性变化。在6小时时间点进行无赋形剂对照的PWT测定。
口服应用20 mg/kg剂量的化合物1显著地增加了给药后多个时间点、 给药后第2、 3和4小时的CCI大鼠的PWT。在2、 3和4小时，与在赋
形剂处理组的相同的时间点的PWT相比，PWT为2.6+0.7 g、 3.0±0.7 g 和6.3±0.8 g， p<0.05、 0.01和0.001。所述化合物的效果持续超过6小时 (4.0+0.5 g，与月良药前对照相比，P<0.001)。
上述结果表明化合物l是口服生物可利用的，并且在CCI模型中以20 mg/kg 口服(p.o.)的剂量具有緩解神经病理性疼痛状态的显著效果。
实施例2在CCI模型中的剂量-反应研究
制备CCI动物和使用von Frey细丝评价机械性异常性疼痛的方法如在 实施例l中所描述。口月良给予四种剂量的化合物l(l、 3、 10、 30mg/kg), 在给药后30、 60、 120、 180、 240和360分钟再评价PWT。
发现化合物1剂量依赖性地增加CCI大鼠中的PWT。单因素ANOVA 分析表明在120 (P<0.05)、 180、 240和360分钟(PO.001)不同剂量组之间 存在显著性差异。事后分析表明口服给药化合物1后在180、 240和360 分钟在不同剂量组之间存在显著性差异。
结果表明化合物1以剂量依赖的方式逆转了在CCI大鼠中产生的异常 性疼痛。结果表明该化合物可用于治疗神经损伤诱导的神经病理性疼痛状 态。
实施例3A快速给药对CCI大鼠中异位放电(Ect叩ic discharge)的影响
在周围神经中的自发性异位放电是神经病理性疼痛动物模型的特征性 现象。认为其是产生和保持脊柱致敏作用和神经病理性状态的原因。因此， 如果化合物具有抑制异位放电的作用，则其可用于治疗神经病理性疼痛病 症。
CCI模型大鼠的制备和神经病理性疼痛状态的评价如实施例1所描述。 在具有通过如前所述的von Frey细丝测定证实的神经病理性疼痛状态的 CCI大鼠上进行电生理学试验。在包含l。/。的DMSO、 66。/。的PEG200和 33%的盐水的赋形剂中制备5 mg/ml的化合物1的混悬液。
用仲丁硫巴比妥钠(inactin，120 mg/kg,i.p.用于谦导，和随后60 mg/kg， i.p.用于保持，如有必要)麻醉具有神经病理性疼痛的大鼠。常规监测动脉 血压和心率，并使用热毯系统(thermo-blanket system)连续监测直肠温度并 保持在生理范围内。 切开左后肢皮肤，缝合到不锈钢"o"环上以形成油池。仔细地暴露腓
肠神经，重复地梳理成包含仅仅一个或几个纤维的小维管束，检查自发性
活动。在急性实验中，当发现活性纤维时，获得至少20分钟的对照记录。 随后，监测赋形剂和化合物1(5 mg/kg， i.v)的作用。在施用所述药物后监 测至少40分钟的活性。联机监测自发性活动的频率，并在试验后脱机分析。
为静脉内(i.v.)注射，使用由1%的DMSO、 66。/o的聚乙二醇(PEG 200) 和33%的生理盐水制备的化合物1的悬浮液(5 mg/ml)。然后，在施用前 30分钟超声处理所述悬浮液。
在两个单独的CCI制剂中测定赋形剂和化合物1 (5 mg/kg i.v)的作用。 在第一制剂中，所述赋形剂将异位放电从682imps/分钟降低至591,同时 化合物1 (5 mg/kg i.v)将异位放电从682 imps/分—降低至426。在第二制剂 中，在分别iv注射赋形剂和15mg/kg的化合物后，异位放电从298 imps/ 分4中降^f氐至215和104。
在四个纤维中，在药物应用前的平均异常放电发出率为489.7±125.8 imps/分钟(从248至730 imps/分钟)。在注射赋形剂后，其稍微但不统计学 上地降低至440士129.0imps/分钟(对照的87.6±5.8%， P>0.05);在施药后， 异位放电的发出率显著地降低至307.6+113.4 imps/分钟(对照的 57.1±9.00/0， PO.Ol)。
从这两个试验中，看出化合物1(5 mg/kg i.v)在降低自发异位放电中有 效，所述异位放电为在确定CCI诱导的神经病后在大鼠周围神经中测定 的。
实施例3B长期服药对CCI大鼠中产生异位放电的作用
在手术后16天证实神经病理性疼痛状态后，给予动物(赋形剂组4只， 药物处理组4只)赋形剂(在生理盐水中的5% DMSO)或者化合物1 (30 mg/kgp.o.),每天两次，共8天。在给药方案结束时，在电生理学试验前 再评价PWT。
将腓肠神经重复梳理成用于检查的细束。对于自发性活动的纤维，记
录持续至少i分钟；对于没有明显的自发性活动的纤维，记录持续至少30 秒。在每个腓肠神经中，梳理并记录尽可能多的纤维(在每只动物中平均超
过150束)。
4只CCI大鼠在用化合物1处理8天后，PWT明显高于赋形剂处理的 那些。
在赋形剂处理组中，检查了来自4只大鼠的602个纤维。在这些纤维 中，197个纤维具有自发性活动。相反，在用化合物1处理的4只大鼠中 记录的633个纤维中，仅存在48个具有自发性活动的纤维。在DRP处理 组中的"活性纤维，，的比例显著地低于在赋形剂处理组中的那些(P〈0.001，x2 检验)。
在赋形剂处理的大鼠中，自发性活动为从15至3卯5/分钟，平均频率 为1123.5±69.4。在化合物1处理组中，自发性活动的频率从13至3532/ 分钟(平均频率为888.9±148.5/分钟)。然而，自发性活动的平均频率的比较 不能揭示赋形剂和化合物1组之间的显著性差异。
用化合物1长期处理CCI大鼠显著地降低了具有自发性活动的纤维的 比例。结果表明化合物1可防止CCI大鼠中异位放电的产生和保持，从而 导致神经病理性疼痛病症的緩解。
实施例4在CCI模型中的耐受性倾向
CCI模型大鼠的制备和使用von Frey细丝的神经病理性疼痛状态的评 价如实施例1中所描述。在手术前连续3天的早晨和在手术后第6、 14、 15和16天评价PWT。从第16天开始，给予所述动物赋形剂(在生理盐水 中的5。/。DMSO， lml/kg)或化合物l (30 mg/kg p.o.)，每天两次，共7 天。从第16天开始，在每个早晨和在给药后4小时评价PWT ，直至手 术后第23天。
在手术后第16天，基线PWT显著地降低至手术前测定的水平(赋形剂 组手术前11.86±0.43 g， n=7，化合物1组手术前10.75±0.35， 11=8)至16 天手术后的1.23±0.03 g(赋形剂组)和在1.15±0.07 g。在第一天处理后的基 线PWT比在赋形剂组中观察的高，并且在整个7天试验服给期间保持在 较高水平上。有趣的是，在7天处理期间，化合物l组的基线提高了。因 此，与基线相比，PWT的值增加了，与在第一天的处理中看到的相比， 在化合物l组中降低了。
在整个7天的处理中，化合物1在逆转降低的PWT中的功效没有明 显的损失。而且，在该试验过程中，在给予第一次每日剂量前每天早上的
基线测量值提高了。
W明，在整个该长期服药研究过程中非但不损失功
效，而且在重复服药时，化合物1还能緩解CCI诱导的机械性异常性疼痛 长ii^药后12小时。
实施例5在患有糖尿病神经病变的大鼠中对PWT的作用
在异氟烷麻醉后，给予成年雄性Sprague-Dawley大鼠(150-200 g)^^ 内注射链脲霉素(75mg/kg,Calbiochem)。注射后，A取特别护理以保证水 和食物可随时获得，并经常更换草垫(bedding)。注射链佐霉素后一周，使 用Advantage II与Accutech strips (Roche)检查血糖含量。仅选择血糖高于 12 mM/L (216 mg/DL)的大鼠用于行为研究。
使用von Frey细丝对神经病理性疼痛状态的评价如实施例1所描述。 使用具有较低PWT(<4 g)的大鼠给予赋形剂(l ml/kg, p.o.)或化合物1 (1、 3、 10和30mg/kgp.0)。在口月良给药后1、 2、 3、 4和6小时再评价PWT。
在PWT中，赋形剂或1 mg/kg的化合物1均未产生显著的变化。然而， 在高于3 mg/kg p.o.的剂量下，化合物1显著地增加了患有糖尿病神经病变 的大鼠中的PWT。该效果是剂量依赖性的。所述结果表明化合物1在治 疗糖尿病神经病变中可具有潜在的治疗效果。
实施例6对手术痛的大鼠Brennan模型中PWT的作用
按照Brennan等人(1996)的描述制备手术痛模型。简言之，在手术前， 用在氧气(2 L/分钟)中的5%异氟烷诱导，然后通过静脉注射戊巴比妥钠 (50 mg/kg)来麻醉大鼠。在无菌途径下进行手术。用75。/。的乙醇溶液灭菌 左后爪。用解剖刀从朝着脚趾的踵缘约0.5 cm处切开1.5 cm的纵切口。 提高并纵向切开跖肌和筋膜，但保持这些组织的结构完整。在用压力完成 止血后，用5-0缝合线缝合来闭合皮肤。在手术后，常规给予所述动物腹 腔内注射阿莫西林15 mg/kg以预防手术后感染。手术后在返回其家笼之 前，将所述动物置于温度控制的恢复室中，直至意识和自主运动完全恢复。
赋形剂(n-8)或以3 mg/kg的化合物1(11=7)在PWT中产生了显著的变 化(PX).05)。然而，在高于3mg/kgp.o.的剂量下，化合物l显著地增加了 在那些已经受过手术痛诱导的大鼠中的PWT。该作用为剂量依赖性的。 在手术后4小时，以10 mg/kg和30mg/kg的化合物1分别将PWT从对照 7K平(分别为1.50±0.36 g和1.82±3.8 g)显著地提高至2.60+0.48 g和
3.80±0.44 g (分别为PO.05和0.001)。 10 mg/kg剂量的镇痛效果在6小时 后结束。然而，30 mg/kg剂量的作用在给药后8小时仍然明显(6小时， 5.28±0.66 g， 8小时，4.16±0.79 g，与同一时间点的赋形剂组相比，pO.OOl)。
在该手术痛模型研究中观察到的特征性现象为化合物1在增加PWT 中的效果，其似乎比在CCI模型或在糖尿病模型中的那些更迟。直到服药 后4小时才能观察到所述效果，并持续至给药后8小时。
因此，化合物1剂量依赖性地增加了在手术痛的Brennan模型中的 PWT。所述结果表明化合物1可在治疗临床手术痛中具有潜在的治疗效 果。在该模型中观察到的延迟镇痛作用的原因是未知的。
权利要求
1.式(I)化合物在制备用于治疗痛觉过敏性疼痛病症及其症状中的用途，其中R为脂环基；芳基乙基；或被卤素、低级烷基、烷氧基、OH、NH2、NH烷基、N(烷基)2、CN或NO2取代的苯基或苄基。
2. 根据权利要求l的用途，其中所述病症为神经病理性疼痛。
3. 根据权利要求2的用途，其中所述神经病理性疼痛由糖尿病神经病 变引起。
4. 根据权利要求2的用途，其中所述神经病理性疼痛为背痛。
5. 根据权利要求2的用途，其中所述疼痛为纤维肌痛。
6. 根据权利要求2的用途，其中所述疼痛为HIV痛。
7. 根据权利要求2的用途，其中所述疼痛为复杂性区域疼痛综合征。
8. 根据权利要求2的用途，其中所述疼痛为三叉神经痛或颞颌关节紊乱。
9. 根据权利要求2的用途，其中所述疼痛为疱渗后神经痛。
10. 根据权利要求2的用途，其中所述疼痛为疼痛性膀胱综合征/间质 性膀胱炎、前列腺炎或痛经/子宫内膜异位。
11. 根据权利要求2的用途，其中所述疼痛选自肠痛、癌症痛、幻肢 痛、术后痛、多神经病、肌筋膜痛综合征、骨关节炎、胰腺痛、骨盆/会阴 痛、坐骨神经痛/腰部神经根病、推管狭窄、慢性神经病理性疼痛、背部手 术失败疼痛、身体创伤后疼痛(包括枪击、rta、烧伤)、术后痛、心痛、胸痛、骨盆痛/pid、关节痛(腱炎、滑嚢炎、急性关节炎)、颈痛、产痛(^/c-切开)、肾绞痛、急性带状疱渗痛、急性胰腺炎和^^发性疼痛。
12. 根据任一前述权利要求的用途，其中R为脂环、芳基乙基、或被 卣素、烷基或烷lL^取代的苯基或节基。
13. 根据权利要求12的用途，其中所述化合物为6-(对-氯代千 基)-5H-2,3，6，7-四氢-5，7-二氧代噢唑并[3，2-a]嘧啶。
全文摘要
式(I)化合物在制备用于治疗痛觉过敏性疼痛病症及其症状中的用途，其中R为脂环基；芳基乙基；被卤素、低级烷基、烷氧基、OH、NH₂、NH烷基、N(烷基)₂、CN或NO₂取代的苯基或苄基。
文档编号A61P29/00GK101355947SQ200680021999
公开日2009年1月28日 申请日期2006年6月19日 优先权日2005年6月20日
发明者乔纳森·马克·特里赫恩, 古关千寿子, 赵飞跃, 阿利斯泰尔·凯尔·狄克逊 申请人:索塞有限公司;尼若瑟鲁有限公司