专利名称：氨基二氮杂作为类toll受体调节剂的制作方法
氛基二氮杂草作为类TOLL受体调节剂本申请根据35U. S. C. § 119要求2005年8月19日提交的美国临 时专利申请60/709,667的权益，其全文通过引用结合到本文中。发明背景发明领域本发明涉及用于调节免疫功能的方法和组合物。更具体地讲，本 发明涉及用于调节TLR8-介导的信号传导的组合物和方法。现有技术描述免疫系统刺激，包括先天免疫和适应性免疫之一或二者的刺激， 是一种能够导致宿主保护性或不利生理后果的复杂现象。近年来，人 们逐渐对先天免疫下的机理产生兴趣，相信其引发和支持适应性免 疫。这种兴趣部分由目前发现一系列高保守图式识别受体蛋白质引 起，这种蛋白质被称为类Toll受体(TLRs)，相信这种受体与病原体相 关性分子图式(PAMPs)的受体的先天免疫相关。因此，用于调节先天 免疫的组合物和方法最令人感兴趣，因为它们可影响包括自身免疫、 炎症、过敏、哞喘、移植排斥、移植物抗宿主疾病(GvHD)、感染、癌症和免疫^:陷的病症的治疗方法。类Toll受体(TLRs)为I型跨膜蛋白质，这种蛋白质允许生物体(包 括哺乳动物)检测微生物，并引发先天免疫反应(Beutler， B.， Nature 2004， 430:257-263)。它们包含同源胞质域和富亮氨酸胞外域，并且一 般生成同源二聚体，同源二聚体感觉胞外(或内化)信号，随后通过衔 接分子如MyD88(髓样分化因子88)引发信号转导级联系统。在TLR 的胞质域中有这种高同源性，以至于最初有人提出，对于所有的TLR均存在相似的信号传导途径(Re, F.， Strominger， J. L.， Immunobiology 2004, 209:191-198)。实际上，所有的TLR均可激活NF-kB和MAP 激酶；然而，由TLR激活衍生的细胞因子/趋化因子释放分布似乎对 各TLR是唯一的。此外，TLR刺激的信号传导途径非常类似于细胞 因子受体IL-1R诱导的途径。这可能是由于这些受体共有的同源物， 即TIR(Toll/IL-lR同源结构)域。 一旦在TLR中激活TIR域并且征集 MyD88，就会激活丝氨酸/苏氨酸激酶的IRAK族，最终促进Ik-B降 解并激活NF-kB(MeansT. K.,等人，Life Sci. 2000, 68:241-258)。尽 管似乎设想此级联允许胞外刺激以增加胞内事件，但有证据表明一些 TLR迁移到细胞内体，在内体也可引发信号传导。此过程允许与被吞 没微生物紧密接触，并且适应这些受体在先天免疫反应中担当的角色 (Unde扁,D.M.， etal.， Nature 1999， 401:811-815)。此过程也可能 允许受损组织(例如，在炎性疾病中)或凋亡细胞释放的宿主核酸通过 内体呈递触发反应。在哺乳动物中，有与此快速反应协同的11种TLR。 数年前曾提出一种假设(Janeway, C. A., Jr., Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. 1989, 54:1-13)，先天免疫反应通过微生物导致的TLR激 活^f莫型引发适应性免疫反应，现在这已得到证实。因此，由不同族感 染生物体呈递的病原体相关性分子图式(PAMP)产生先天免疫反应，包 括某些细胞因子、趋化因子和生长因子，随后引发精确适应性免疫反 应，以通过抗原呈递适应感染性病原体，从而制造抗体并产生细月包毒 素T细胞。格兰氏阴性菌脂多糖(LPS)—直被看作是诱导哺乳动物类似于败 血性休克的炎症反应的辅助物质和免疫刺激物质，也是一种药理学工 具。利用基因方法，识别出TLR4为LPS的受体。LPS是TLR4的激 动剂的这一发现说明TLR调节可用于疫苗和人类疾病的治疗 (Aderem， A.; Ulevitch, R. J., Nature 2000， 406:782-787)。现在已认 识到，各种TLR激动剂可激活B细胞、嗜中性粒细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、内皮细胞和数种上皮细胞，并且调节某些类型细胞的 增殖和凋亡。至今，有些类似的TLR7和TLR8被表征为在内体分室中发现的 单条RNA的受体，因为被认为对病毒攻击的免疫反应重要。咪喹莫 特， 一种被批准的局部抗病毒/抗癌症药物，最近被描述成TLR7激动 剂，已证明这种激动剂对某些皮肤疾病有临床效果(Miller R. L., et al., Int. J. Immunoph讓.1999, 21:1-14)。这种小分子药物^皮描述成ssRNA 的结构沖莫拟。TLR8最初描述于2000(Du， X.， etal., European Cytokine Network 2000 (Sept.), 11(3):362-371)，并且很快被归属与病毒感染先 天免疫反应有关(Miettinen, M. ， et al., Genes and Immunity 2001 (Oct.)， 2(6):349-355)。最近报告具有抗病毒活性的某些咪唑并唾啉化合物是TLR7和 TLR8的配体(Hemmi H., et al.(2002) Nat. Immunol. 3:196-200; Jurk M.， et al.(2002) Nat. Immunol. 3:499)。咪唑并喹啉是具有抗病毒性质和抗 肿瘤性质的免疫细胞的有效合成活化剂。最近，Hemmi等人用野生型 巨噬细胞和MyD88-缺陷的鼠净良告，两种咪唑并p奎啉，咪喹莫特和瑞 喹莫德(R848),诱导肿瘤坏死因子(TNF)和白介素-12(IL-12)，并且只 在野生型细胞中激活NF-kB，与通过TLR激活一致(Hemmi H.， et al.(2002) Nat. Immunol. 3:196-200)。自TLR7缺乏而其他TLR不缺乏咪唑并喹啉诱导脾B细胞剂量依赖性增生，并且在野生但不是71^17-/-鼠的细胞中激活细胞内信号传导级联。荧光素酶分析确定，人胚胎肾 细胞中的人TLR7但不是TLR2或TLR4的表达导致响应瑞会莫德 NF-kB激活。Hemmi等人的发现提示，这些咪唑并卩奎啉化合物为能够 通过TLR7诱导信号传导的TLR7的非天然配体。最近才艮告R848也是 人TLR8的配体(Jurk M.， et al.(2002) Nat. Immunol. 3:499)。发明概述本文所述组合物用于调节体外和体内免疫反应。已发现此类组合 物用于多种临床应用，如用于治疗包括不需要的免疫活性的病症的方 法，包括炎性和自身免疫疾病。更具体地讲，本发明的一个方面提供一种式I的化合物及其代谢物、溶剂化物、互变异构体以及药学上可接受的盐和前药，其中Z、 R1、 R2、 R3、 R4、 R5和n如下限定。 本发明的另一个方面提供一种式II的化合物及其代谢物、溶剂化物、互变异构体以及药学上可接受的盐，其 中Z、 R1、 R2、 R3、 R4和R5如下限定。本发明还涉及药物组合物，该组合物包含式I或式II的化合物或 其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或盐。本发明的化合物可有利与其他已知的治疗剂组合使用。因此，本 发明还涉及药物组合物，该組合物包含治疗有效量的式I或式II的化 合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或盐 以及第二治疗剂。本发明还提供调节TLR8-介导的信号传导的方法，所述方法包括 使表达TLR8的细胞与有效量的式I或式II的化合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或盐接触。在一个方面，所述方法抑制TLR8-介导的免疫刺激信号传导。本发明还提供调节患者TLR8-介导的免疫刺激的方法，所述方法 包括给予有TLR8-介导的免疫刺激发展或有这种风险的患者有效量的 式I或式II的化合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可 接受的前药或盐，以抑制或促进患者TLR8-介导的免疫刺激。本发明还提供治疗可由调节TLR8-介导的细胞活性治疗的病症或 疾病的方法，所述方法包括给予有所述病症或疾病发展或有这种风险 的哺乳动物(例如人)有效量的式I或式II的化合物或其代谢物、互变 异构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或盐，以治疗所述病症或疾病。本发明还提供调节哺乳动物免疫系统的方法，所述方法包括给予 哺乳动物有效量的式I或式II的化合物或其代谢物、互变异构体、溶 剂化物、药学上可接受的前药或盐，以调节所述免疫系统。本发明还提供在为有此类疾病或病症的哺乳动物(例如人)治疗所 述疾病或病症中用作药物的式I或式II的化合物或其代谢物、互变异 构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或盐。本发明还提供式I或式 II的化合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前 药或盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗有此类疾病的人的所 述疾病和病症。本发明还提供试剂盒，所述试剂盒包含一种或多种式I或式II的 化合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或 盐。试剂盒还可包含第二化合物或包含第二药剂的制剂。本发明的其他优点和新颖特征将部分在以下说明中阐明，部分在 详查以下说明时对本领域的技术人员显而易见，或者通过实施本发明 认识。本发明的优点可通过在附加权利要求书中特别指出的手段、组 合、组合物和方法实现和获得。发明详述在某些方面，本发明提供用于调节TLR8-介导的信号传导的组合 物和方法。更具体地讲，本发明的一个方面提供一种式I的化合物及其代谢物、溶剂化物、互变异构体和药学上可接受的前药及盐， 其中Z为H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、 杂芳基、OW或NR6117，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷 基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、 炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7 、 SR6和S02R6的基团取代；R1、 R2、 113和114独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环 烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔 基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个 或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)0R6、 0C(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (d-C6烷基)氨基、 CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团 取代，或者W和W与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的石友 环，其中所述石灰环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 0R6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)0R6、 0C(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (d画C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代；或者113和114共同为氧代；各个R5独立选自H、 F、 Cl、 Br、 I、 OMe、 CH3、 CH2F、 CHF2、 CF*CF2CF3;116和117独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环 烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷 基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独 立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(-O)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代，或者116和f与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的杂 环，其中所述杂环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代;n为0、 1、 2、 3或4。本发明还提供式II的化合物及其代谢物、溶剂化物、互变异构体和药学上可接受的盐及前药， 其中Z为H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、 杂芳基、ORS或NR6117,其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷 基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、 炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代；R1、 R2、 W和R"独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环 烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔 基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个 或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(-O)R6、 C(=0)NR6R7、 (d-Cs烷基)氨基、 CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团 取代，或者W和112与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的^友 环，其中所述碳环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代；或者113和114共同为氧代；R5为H、 F、 Cl、 Br、 I、 OMe、 CH3、 CH2F、 CHF2、 CFs或CF2CF3;116和117独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环 烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷 基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独 立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(O)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (d誦C6烷基)絲、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代；或者W和R7与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的杂 环，其中所述杂环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)0R6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C-C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代；并且n为0、 1、 2、 3或4。在某些实施方案中，Z为OR6。在某些实施方案中，116为烷基， 如(1-4C)烷基。在特定实施方案中，R"为乙基、丙基、异丙基或异丁基。在某些实施方案中，Z为NR6R7。在某些实施方案中，W和R7 独立为H或烷基，如(1-6C)烷基。在特定实施方案中，116和117为乙基。在某些实施方案中，n为0或1 。在特定实施方案中，R5为CF2CF3。在某些实施方案中，R 为H或烷基，如(1-4C)烷基，并且R"为H。 在某些实施方案中，W为烷基，如(1-4C)烷基。在特定实施方案中， W为曱基。在其他特定实施方案中，R"为H。在某些实施方案中，W为H或烷基，如(1-4C)烷基，并且W为H。 在某些实施方案中，W为烷基。在特定实施方案中，W为甲基。在其 他特定实施方案中，W为H。本文所用术语"烷基"是指具有1至12个碳原子(包括1至10个碳 原子、1至6个碳原子和1至4个碳原子)的饱和线形或支链单价烃基， 其中烷基可任选独立用 一个或多个下述取代基取代。烷基的实例包括 C广d2烃部分，如但不限于甲基(Me， -CH3)、乙基(Et， -CH2CH3)、 l-丙基(n-Pr，正丙基，-CH2CH2CH3)、 2-丙基(i-Pr，异丙基，-CH(CH3)2)、 l-丁基(n-Bu,正丁基，-CH2CH2CH2CH3)、 2-甲基-l-丙基(i-Bu，异丁 基，-CH2CH(CH3)2)、 2-丁基(s-Bu，仲丁基，-CH(CH3)CH2CH3)、 2國 甲基-2-丙基(t-Bu ，叔丁基，-C(CH3)3)、 l-戊基(正戊基， -CH2CH2CH2CH2CH3) 、 2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3) 、 3-戊基 (-CH(CH2CH3)2)、 2-甲基画2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、 3-甲基-2-丁基 (-CH(CH3)CH(CH3)2)、 3-曱基-l國丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、 2画曱基國1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、 1-己基(-012(^12012(^12012。113)、 2誦己 |(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、 3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、 2隱甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3) 、 3-曱基-2-戊基 (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3) 、 4画甲基-2國戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、 3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2) 、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、 2,3-二曱基隱2-丁基(-。(013)201(0 3)2)、 3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、 1-庚基和l-辛基。本文所用术语"烯基"是指具有2至10个碳原子(包括2至6个碳 原子和2至4个碳原子)且具有至少一个双键的线形或支链单价烃基， 包括但不限于乙烯基、丙烯基、l-丁-3-烯基、l-戊-3-烯基、l-己-5-烯 基等，其中烯基可任选独立用一个或多个本文所述取代基取代，并且 包括具有"顺式"和"反式"取向或者"E"和"Z"取向的基团。术语"烯基" 包4舌烯丙基。本文所用术语"炔基"是指2至12个碳原子(包括2至6个碳原子 和2至4个碳原子)的包含至少一个巻键的线形或支化单价烃基。实例 包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔-2-基等，其中炔基可任 选独立用 一个或多个本文所迷取代基取代。本文所用术语"碳环"、"碳环基"或"环烷基"可互换使用，是指具 有3至12个碳原子(包括3至10个碳原子和3至6个碳原子)的饱和 或部分不饱和环状烃基。术语"环烷基"包括单环和多环(例如二环和三 环)环烷基结构，其中多环结构任选包括稠合到饱和或部分不饱和环烷 基或杂环烷基环或芳基或杂芳基环的饱和或部分不饱和环烷基。环烷 基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。 二环碳环具有例如排成二环[4,5]、 [5,5]、 [5,6]或[6,6]系统的7-12个环 原子，具有排成二环[5,6]或[6,6]系统的9或IO个环原子，或排成桥连 系统，如二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛烷和二环[3.2.2]壬烷。环烷基 可任选独立在一个或多个可取代位置用 一个或多个本文所述取代基 取代。此环烷基可任选用例如一个或多个独立选自d-C6烷基、CrC6 烷氧基、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、单(C广C6)烷基氨基、二(d-Q)烷基氨基、CVC6烯基、C2-C6炔基、d-Cs卣代烷基、Q-C6卣代烷氧 基、氨基(C广Q)烷基、单(OC6)烷基氨基(C广C6)烷基和二(d-C6)烷基氨基(CrC6)烷基的基团取代。术语"环烯基"是指具有3至10个碳原子(包括3至6个碳原子)且在碳环内具有至少 一个双键的部分不饱和环状烃基。术语"杂烷基"是指1至12个碳原子(包括1至6个碳原子和1至 4个碳原子)的饱和线形或支链单价烃基，其中至少 一个碳原子用选自 N、 O或S的杂原子代替，并且其中所述基团可以为碳基团或杂原子 基团(即，杂原子可出现于基团的中间或末端)。杂烷基可任选独立用 一个或多个本文所述取代基取代。术语"杂烷基"包括烷氧基和杂烷氧 基。本文所用术语"杂环烷基"、"杂环"和"杂环基"可互换使用，是指3 至8个环原子的饱和或部分不饱和爿暖环基团，其中至少一个环原子为 选自氮、氧和硫的杂原子，其余环原子为C，其中一个或多个环原子 可任选独立用一个或多个下述取代基取代。该基团可以为碳基团或杂 原子基团。术语"杂环"包括杂环烷氧基。该术语还包括包含稠合到芳 族基团的杂环的稠合环系统。"杂环烷基"也包括其中杂环基团与芳族 或杂芳族环稠合的基团。杂环烷基环的实例包括但不限于吡咯烷基、 四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢谨)分基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、 四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫吗啉代(thiomo卬holino)、噻嗯烷 基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、^克杂环丁烷 基(thietanyl)、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂草基、 二氮杂草基、硫氮杂萆基、1,2,3,6-四氢吡"定基、2-吡咯啉基、3-吡咯 啉基、吲哚啉基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己烷基、1,3-二 氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基、二氢吡喃基、二 氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂二环 [3丄0]己烷基、3-氮杂二环[4丄0]庚烷基、氮杂二环[2.2.2]己烷基、3H-力引哚基喹溱基和N-吡咬基脲。在此定义范围内也可包括螺部分。如果 可能，由上列基团衍生的前述基团可C-连接或N-连接。例如，由吡 咯衍生的基团可以为吡咯-l-基(N-连接)或吡咯-3-基(C-连接)。此外， 由咪唑衍生的基团可以为咪唑-l-基(N-连接)或咪唑-3-基(C-连接)。其中2个环碳原子用氧代(=0)部分取代的杂环基团的实例为l,l-二氧代-硫吗啉基。本文杂环基可不取代，或如规定用不同基团在一个或多个 可取代位置取代。例如，此杂环基可任选用例如一个或多个独立选自 Q-C6烷基、C广C6烷氧基、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、单(C广C6)
烷基氨基、二(C广C6)烷基氨基、(:2-。6烯基、CrC6炔基、Q曙C6卤代烷 基、CrC6卣代烷氧基、氨基(d-C6)烷基、单(C广C6)烷基氨基(C-C6)
烷基或二(d-C6)烷基氨基(Q-C6)烷基的基团取代。
术语"芳基"是指具有单环(例如苯基)、多环(例如联苯)或其中至少
一个为芳族的多个稠合环(例如，1,2，3,4-四氢萘基、萘基等)的单价芳 族碳环基团，该基团任选用一个或多个独立选自例如卣素、低级烷基、 低级烷氧基、三氟曱基、芳基、杂芳基和羟基的取代基取代。
本文所用术语"杂芳基"是指5-、 6-或7-元环且包括5-10个原子的 稠合环系统(至少 一个为芳族)的单价芳族基团，该基团包含至少 一个 且最多4个选自氮、氧和硫的杂原子。杂芳基的实例为吡-先基、咪唑 基、嘧啶基、p比哇基、三唑基、吡漆基、四唑基、呋喃基、蓉p分基、 异嗯哇基、噻唑基、嗯唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、 p引味基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、卩引溱基、2,3-二氮杂萘基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶咬基、嘌呤基、噁二唑 基、三唑基、p塞二唑基、p塞二唑基、呔咱基、苯并呔咱基、幕并p塞p分 基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘吱基和呋喃 并吡咬基(furopyridinyl)。在此定义范围内也可包括螺部分。杂芳基任 选用一个或多个独立选自例如卣素、低级烷基、低级烷氧基、卣代烷 基、芳基、杂芳基和羟基的取代基取代。
术语"卤素"表示氟、溴、氯和碘。
术语"氧代"表示=0。
通常，式I或式II的化合物的各个部分或官能团可任选由一个或 多个取代基取代。适用于本发明的取代基的实例包括但不限于氧代、 卣素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR"S02R'、 -S02NR'R"、誦C(O)R'、誦C(O)OR'、 -OC(O)R'、 -NR"C(O)OR'、 -NR"C(O)R, 、-C(O)置R" 、-NR'R" 、-NR"'C(O)N'R"、 -NR'"C(NCN)NR'R"、 -OR'、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、 杂环基和杂环基烷基，其中R'、 R"和R'"独立为H、烷基、杂烷基、 环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基。
应了解，在连续使用两个或多个基团以限定连接到一个结构的取 代基的情况下，将第一命名的基团认为是末端，而将最后命名的基团 认为是连接到所述结构。因此，例如，芳基烷基通过烷基连接到所述 结构。
本发明的化合物可具有一个或多个不对称中心；因此，此化合物 作为单独(R)-或(S)-立体异构体或其混合物制备。除非另外指明，说明 书和权利要求书中特定化合物的描述或命名旨在包括其两种单独的 对映异构体、非对映异构体混合物、外消旋或其他化合物。因此，本 发明也包括所有此类异构体，包括式I和式II化合物的非对映异构体 混合物、纯非对映异构体和纯对映异构体。可通过本领域的技术人员 已知的方法，例如色谱法或分级结晶，根据物理化学差异将非对映异 构体混合物分离成单独的非对映异构体。可将对映异构体分离，可通 过与适合光学活性化合物(例如，醇)反应将对映异构体混合物转化成 非对映异构体混合物，分离非对映异构体并将单独非对映异构体转化 (例如水解)成相应的纯对映异构体。对映异构体也可用手性HPLC柱 分离。测定立体化学和分离立体异构体的方法在本领域已知(讨论于 "Advanced Organic Chemistry" ， 4th edition, Chapter 4, J.March, John Wiley and Sons, New York, 1992)。
在本文所示结构中，在未规定任何特定手性原子的立体化学时， 则指所有立体异构体，并且所有立体异构体均作为本发明的化合物被 包含。在由表示特定构型的实楔线或虚线指定立体化学结构时，也就 如此规定和确定了这种立体异构体。单一立体异构体，例如实质不含其立体异构体的对映异构体，可 通过用光学活性拆分剂用一种方法(如形成非对映异构体)拆分外消旋
〉'昆合4勿获4寻(Eliel ， E. and Wilen , S. Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994; Lochmuller, C. H., (1975) J. Ch腿atogr.， 113(3):283-302)。本发明的手性化合物 的外消旋混合物可由任何适合方法分离，包括(l)用手性化合物形成 离子、非对映异构盐，并由分级结晶或其他方法分离；(2)用手性衍生 化剂形成非对映异构化合物，分离非对映异构体，并转化成纯立体异 构体；和(3)直接在手性条件下分离实质纯或浓化的立体异构体。参阅 Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology, Irving W. Warner, Ed., Marcel Dekker， Inc., New York(1993)。
在方法(l)下，形成非对映异构盐可使对映异构纯手性碱(如二甲 氧基马钱子碱、奎宁、麻黄碱、马钱子碱、a-甲基-!3-苯基乙基胺(苯异 丙胺)等)与携带酸官能团(如羧酸和磺酸)的不对称化合物反应。可通过 分级结晶或离子色谱诱导非对映异构盐分离。为了分离M化合物的 光学异构体，加入手性羧酸或磺酸(如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳
酸)可使非对映异构盐形成。
或者，通过方法(2)，使待拆分基质与手性化合物的一种对映异构 体反应生成非对映异构对(E. and Wilen， S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322)。形成非对映异
生物)反应，随后分离非对映异构体，并水解得到纯或浓化对映异构体。 测定光学纯度的 一种方法包括在碱存在下制备外消旋混合物的手性 酯，例如薄荷酯(如(-)氯甲酸薄荷酯)或Mosher酯，乙酸a-甲氧基-a-(三 氟甲基)苯基酯(Jacob III, (1982) J. Org. Chem. 47:4165)，并分析存在 两种阻转异构对映异构体或非对映异构体的NMR谱。阻转异构体化 合物的稳定非对映异构体可按照分离阻转异构萘基异喹啉的方法通 过正相和反相色谱法(WO 96/15111)分离。利用方法(3)，可用手性固定相由色谱分离两种对映异构体的外消旋混合物(Chiml Liquid Chromatography (1989) W. J. Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, (1990) J. of Chromatogr. 513:375-378)。利用区分具有不对称 碳原子的其他手性分子的方法，如旋光和圓二色谱，可区分浓化或纯 化的对映异构体。
除了式I和式II的化合物外，本发明还包括此类化合物的溶剂化 物、药学上可接受的前药、药物活性的代谢物、溶剂化物和药学上可 接受的盐。
术语"溶剂化物"是指 一种分子与 一种或多种溶剂分子的聚集物。 "药学上可接受的前药"是可在生理条件下或通过溶剂分解转化成 特定化合物或转化成此类化合物的药学上可接受的盐的化合物。前药 包括其中氨基酸残基或两种或多种(例如二、三或四种)氨基酸残基的
多肽链通过酰胺键或酯键共价结合到本发明化合物的游离氨基、羟基 或羧酸基团的化合物。氨基酸残基包括但不限于一般由三字母符号指 定的20种天然氨基酸，也包括磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸、磷酸酪氨 卧殳、4腸羟基月甫氨卧臾、羟基赖氨酸、demosine、 isodemosine、 y誦羧基谷氨 酸盐、马尿酸、八氢吲哚-2-甲酸、抑胃酶氨酸、1,2,3,4-四氢异会啉-3-曱酸、青霉胺、鸟氨酸、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、P-丙氨酸、Y-氨基 丁酸、瓜氨酸、高胱氨酸、高丝氨酸、曱基丙氨酸、对苯甲酰基苯基 丙氨酸、苯基甘氨酸、炔丙基甘氨酸、肌氨酸、蛋氨酸砜和叔丁基甘 氨酸。本发明的前药的具体实例包括共价结合到磷酸盐残基或缬氨酸 残基的式I或式II的化合物。
前药的其他类型也包含在内。例如，可将游离^衍生化为酰胺 或烷基酯。作为另一实例，可将含游离羟基的本发明的化合物衍生化 为前药,可通过使羟基转化成如但不限于磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲 基氨基乙酸酯或磷酰基氧基曱氧基羰基的基团来衍生，如Advanced Drug Delivery Reviews, (1996)19:115所概述。也可包括羟基和氨基的 氨基甲酸酯前药，羟基的碳酸酯前药、磺酸酯和硫酸酯。也包括羟基衍生化为(酰基氧基)曱基醚和(酰基氧基)乙基醚，其中酰基可以为任选 用包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代的烷基酯，或者酰基
为上述氨基酸酯。此类型前药描述于J.Med. Chem.， (1996)39:10。更 具体的实例包括用以下基团代替醇基团的氢原子，如(C!-C6)烷酰基氧 基甲基、-Q)烷酰基氧基)乙基、l-甲基-l-((C!-Q)烷酰基氧基) 乙基、(C广Cs)烷錄羰基氧基甲基、N-(C广C6)烷氧基羰基M曱基、 琥珀酰基、(d-C6)烷酰基、a-氨基(d-GO烷酰基、芳基酰基和a-氨基 酰基或a-M酰基-a-氨基酰基，其中各a-氨基酰基独立选自天然L-氨基酸、P(0)(OH)2、 -P(0)(0(CVC6)烷基)2或糖基(基团由半缩醛型糖 类去掉羟基产生)。
可使游离胺衍生为酰胺、磺酰胺或膦酰胺。所有这些前药部分可 结合包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团。例如，前药可通过用 以下基团代替胺基团中的氢原子生成，如R-羰基、RO-,g、 NRR'-羰基(其中R和R'分别独立为(C广do)烷基、(C3-C7)环烷基、苄基，或 者R-羰基为天然a-氨基酰基或天然a-氨基酰基-天然a-氨基酰基)、 -C(OH)C(O)OY(其中Y为H、 (C!-C6)烷基或苄基)、-C(OYq)Y!(其中 Y0为(C广C4)烷基，Y为(d-C6)烷基、狻基(d-C6)烷基、氨基(C广Q) 烷基或单-N-或二-N,N-(d-C6)烷基氨基烷基)、-C(Y2)Y3(^t Y2为H 或甲基，Y3为单-N-或二-N,N-(C!-C6)烷基氨基)、吗啉代、哌啶-l-基或 p比咯烷曙l-基。
对于前药衍生物的其他实例，参阅，例如，a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985)和Methods in Enzymology， Vol.42, p. 309-396， edited by K. Widder ， et al.(Academic Press, 1985);
A Textbook of Drug Design and Development ， edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs" by H. Bundgaard p. 113-191(1991); c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews， (1992); 8:1-38 d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, (1988) 77:285;禾口 e) N. Kakeya,etal.， Chem.Pharm. Bull, (1984)32:692，各文献明确通过引用结合到 本文中。
"药物活性代谢物"为通过指定化合物或其盐在体内代谢产生的药 理学活性产物。化合物的代谢物可用本领域已知的常规技术鉴定，其 活性用如本文所述的检验方法测定。
化合物的前药和活性代谢物可用本领域已知的常规技术鉴定。
除非另外指明，"药学上可接受的盐"包括保持指定化合物的游离 酸和碱的生物学效力且不在生物学上或在其他方面不合乎需要的盐。 本发明的化合物可具有足够酸性、足够碱性或两种官能团，因此可与 多种无机或有积"喊和无机和有机酸的任何一种反应生成药学上可接 受的盐。药学上可接受的盐的实例包括由本发明的化合物与无机或有 机酸或无机碱反应制备的盐，这些盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氬 盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏 磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸 酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙 炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马 酸盐、马来酸盐、丁炔-l,4-二酸盐、己炔-l,6-二酸盐、苯甲酸盐、氯 苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基 苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二曱苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯 基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、"羟基丁酸盐、乙醇酸 盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-l-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁 桃酸盐。由于本发明的单一化合物可包括多于一个酸性或碱性部分， 因此本发明的化合物可包括单一化合物中的单、二或三盐。
如果本发明的化合物为碱，则可由本领域可利用的任何适合方法 制备所需的药学上可接受的盐，例如用酸性化合物处理游离碱，尤其 用无机酸处理，如盐酸、氢溴酸、^琉酸、硝酸、^畴酸等，或者用有机 酸处理，如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮 酸、草酸、乙醇酸、水杨酸，吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、(X-轻基酸如柠檬酸或酒石酸、氨基酸如天冬氨酸或谷 氨酸、芳族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如对甲苯磺酸或乙磺酸等。
如果本发明的化合物为酸，则可由任何适合方法制备所需的药学 上可"f妄受的盐，例如用无机或有机碱处理游离酸。适合的无机盐的实 例包括用碱金属和碱土金属(如锂、钠、钾、钡和钙)生成的盐。适合
的有机碱盐的实例包括例如铵、二千基铵、千基铵、2-羟基乙基铵、 双(2-羟基乙基)铵、苯基乙基千基胺、二千基乙二胺等盐。酸性部分 的其他盐包括例如用普鲁卡因、奎宁和N-甲基葡糖胺生成的盐与用碱 性氨基酸如甘氨酸、鸟氨酸、组氨酸、苯基甘氨酸、赖氨酸和精氨酸 生成的盐。
利用本领域可用技术且使用易得原料，可用如以下所述的反应路 线和合成方案制备本发明的化合物，或者可用本领域已知的方法合成 本发明的化合物。
<formula>formula see original document page 24</formula>方案I
在方案I中，通过在还原剂(如NaCNBH3)存在下用适当取代的氨 基乙腈处理，可由式III的芳基醛制备式IV的化合物。反应可在约0 。C至IO(TC的温度在适合溶剂(如MeOH或EtOH)中进行约0.1至100小时(例如约1小时)。可在适合碱(如吡咬)存在下，用酰化或磺酰化剂
由式IV的化合物制备式V的化合物。可使反应在约0'C至200'C进行 约0.1至100小时(例如约5小时)。将式V的化合物还原，随后环化， 提供式I的化合物。环化反应可在约0。C至IO(TC的温度在金属(例如 Fe)和酸(例如，乙酸)存在下进行约0.5至72小时(例如5小时)。
应注意到，制备本文所述式I和式II的化合物可能需要保护远处 的官能团。这种保护需要根据官能性质和制备方法所用条件而变化， 并且可很容易由本领域的技术人员确定。这种保护/脱保护方法为本领 域的技术人员所熟悉。
本发明的化合物可用于多种应用。例如，在某些方面，本发明提 供用于调节TLR8-介导的信号传导的方法。例如，在需要响应适合 TLR8配体或TLR8信号传导激动剂改变TLR8-介导的信号传导时， 本发明的方法有用。本文所用术语"TLR8配体"和相当术语"用于TLR8 的配体"和"TLR8信号传导激动剂，，是指通过TIR8域以外的TLR8域 直接或间接与TLR8作用且诱导TLR8-介导的信号传导的式I或式II 的化合物以外的分子。在某些实施方案中，TLR8配体为天然配体， 即天然发现的TLR8配体。在某些实施方案中，TLR8配体是指TLR8 天然配体以外的分子，例如由人类活动制备的分子。
本文所用与TLR8受体相关的术语"调节"是指介导患者药效反 应，可通过(i)抑制或激活受体，或(ii)直接或间接影响受体活性的正常 调节。调节受体活性的化合物包括激动剂、拮抗剂、混合激动剂/拮抗 剂以及直接或间接影响受体活性调节的化合物。
本文所用术语"激动剂"是指与受体(例如TLR)组合能够产生细胞 反应的化合物。激动剂可以为直接结合到受体的配体。或者，通过例 如(a)与直接结合到受体的另一种分子形成复合体或(b)另外改变另一 种化合物以便另 一种化合物直接结合到所述受体，激动剂可与受体间 接结合。可将激动剂称为特定TLR的激动剂(例如TLR8激动剂)。本文所用术语"拮抗剂"是指与激动剂或逆激动剂竟争结合到受 体，从而阻止激动剂或逆激动剂作用于受体的化合物。然而，拮抗剂 (也被称为"中性"拮抗剂)对组成性受体活性没有作用。更具体地讲，
拮抗剂是在TLR8受体处抑制TLR8活性的化合物。
本文所用术语"抑制"是指生物活性可测降低。因此，在本文中"抑 制，，或"抑制作用"可以为正常活性水平的百分率。
在本发明的一个方面，治疗可由调节患者TLR8-介导的细胞活性
疗所述病症或疾病的量的式I或式II的化合物。术语"TLR8-介导的" 是指由TLR8功能产生的生物或生物化学活性。
可由本发明方法治疗的病症和疾病包括但不限于癌症、免疫复合 物相关性疾病、炎性疾病、免疫缺陷、移植排斥、移才直物抗宿主疾病、 过敏、哮喘、感染及脓毒。更具体地讲，用于治疗包括自身免疫、炎 症、过敏、哞喘、移植排斥和GvHD的病症的方法一般利用响应适合 TLR8配体或适合TLR8信号传导激动剂抑制TLR8-介导的信号传导 的式I或式II的化合物。或者，用于治疗包括感染、癌症和免疫缺陷 的疾病的方法一般利用响应适合TLR8配体增强TLR8-介导的信号传 导的式I或式II的化合物。在某些情况下，可用组合物响应TLR8配 体或TLR8信号传导激动剂抑制或促进TLR8-介导的信号传导。在其 他情况下，可用组合物在患者中抑制或促进TLR8-介导的免疫刺激。
除非另外指明，本文所用术语"治疗"是指哺乳动物(如人)的疾病 病症的至少緩解，包括但不限于调节和/或抑制这些疾病病症，和/或 减轻这些术语适用的疾病病症或者此疾病或病症的一种或多种症状。 除非另外指明，本文所用术语"治疗"是指以上定义的"治疗"的治疗行 为。
本文所用术语"自身免疫疾病"、"自身免疫病症"和"自身免疫"是 指免疫介导的对宿主组织或器官的急性或慢性伤害。该术语包括细胞 和抗体介导的自身免疫现象以及器官特异和器官非特异自身免疫。自身免疫疾病包括胰岛素依赖性糖尿病、类风湿性关节炎、系统性红斑 狼疮、多发性硬化、动脉硬化和炎性肠疾病。自身免疫疾病还包括但 不限于关节强硬性脊推炎、自身免疫溶血性贫血、贝赫切特综合征、 古德帕斯彻综合征、格雷夫斯病、急性热病性多神经炎、桥本甲状腺 炎、自发性血小板减少、重症肌无力、恶性贫血、结节性多动脉炎、 多肌炎/皮肤肌炎、原发性胆道硬化、银屑病、结节病、硬化性胆管炎、
斯耶格伦综合征、全身性硬化症(硬皮病和肢端硬皮综合征(CREST syndrome))、高安氏动脉炎(Takayssu，s arteritis)、颞动脉炎和韦格纳肉 芽肿。自身免疫疾病也包括某些免疫复合物相关性疾病。
本文所用术语"癌，，和"肿瘤"是指其中在患者中存在可测量量的宿 主起源的异常复制细胞的病症。癌可以是恶性癌或良性癌。癌或肺瘤 包括但不限于胆道癌、脑癌、乳腺癌、子宫颈癌、绒毛膜癌、结肠癌、 子宫内膜癌、食道癌、胃癌、上皮内瘤、白血病、淋巴瘤、肝癌、肺 癌(例如，小细胞和非小细胞)、黑素瘤、成神经细胞瘤、口腔癌、卵 巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肾癌、肉瘤、皮肤癌、睾丸癌、 甲状腺癌以及其他癌和肉瘤。癌可以为原发性或转移性。
本文所用术语"免疫复合物相关性疾病"是指任何具有免疫复合物 (包含抗体和由抗体特异结合的抗原的任何缀合物)产生和/或组织沉积 特征的疾病，包括但不限于系统性红斑狼疮(SLE)和相关结締组织疾 病、类风湿性关节炎、丙肝和乙肝相关性免疫复合物疾病(例如，冷球 蛋白血病)、贝赫切特综合征、自身免疫肾小球肾炎和与存在LDL/抗 -LDL免疫复合物相关的血管病变。
本文所用术语"免疫缺陷"是指 一种疾病或病症，其中患者的免疫 系统不以正常能力起作用，或者有用提高患者的免疫反应例如以消除 患者的肺瘤或癌(例如，脑、肺(例如小细胞和非小细胞)、卵巢、乳腺、 前列腺、结肠的肺瘤以及其他癌和肉瘤)或感染。免疫缺陷可以是获得 的，或者可以是先天的。本文所用术语"移植排斥"是指由宿主以外的源产生的对组织或器 官的免疫介导的超急性、急性或'隄性伤害。因此，该术语包括细胞和 抗体介导的排斥以及同种异体移植和异种移植两者的排斥。
"移植物抗宿主疾病，，(GvHD)是移植的骨髓对抗患者自身组织的 反应。GVHD最常见于血髓给体与患者不相关或者给体与患者相关但 不完全匹配的情况。GVHD有两种形式 一种早期形式^f皮称为急性 GVHD，在移植后不久出现白细胞增多时发生， 一种为晚期形式，被 称为慢性GVHD。
渗、嗜曙红细胞增多、哮喘、过敏、过敏性鼻炎和奥曼综合征(Ommen，s syndrome)。
本文所用术语"过敏"是指对物质(过敏原)的获得的过敏性。过敏 病症包括湿瘆、过敏性鼻炎或鼻炎、花粉症、哮喘、荨麻瘆和食物过 每文及其他特应性病症。
本文所用术语"哮喘"是指一种呼吸系统疾病，其特点是炎症、呼 吸道变窄并且呼吸道对吸入剂的反应性增加。哮喘是经常性的，虽然 不排除与特应性或过敏症状有联系。例如，哞喘可能由暴露于过敏原、
暴露于冷空气、呼吸感染和活动突发。
本文所用术语"感染"和相当术语"感染性疾病，，是指其中在患者血 液或正常无菌组织或正常无菌腔室中存在可测量量的感染性生物体 或感染物的病症。感染性生物体和感染物包括病毒、细菌、真菌和寄 生虫。此术语包括急性和慢性感染及脓毒。
本文所用术语"脓毒"是指在血液(败血症)或其他身体组织中存在 细菌(菌血症)或其他感染性生物体或其毒素。
本发明还提供在为有此类疾病或病症的温血动物(如哺乳动物，例
如人)治疗上述疾病或病症中用作药物的式i或式n的化合物或其代谢 物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或盐。本发明还提 供式i或式n的化合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前药或盐在制备药物中的用途，所述药物用于为有此类疾病 的温血动物(如哺乳动物，例如人)治疗上述疾病和病症。
本发明还包括含式I或式II的化合物或其代谢物、互变异构体、 溶剂化物或药学上可接受的前药或盐的药物组合物，和治疗可通过调
节TLR8-介导的细胞活性治疗的病症和疾病的方法，所述方法通过给
予需要的患者一种包含式I或式II的化合物或其代谢物、互变异构体、 溶剂化物或药学上可接受的前药或盐的药物组合物进行。
为了用式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、 代谢物或前药治病性治疗(包括预防性治疗)包括人的哺乳动物， 一般 根据标准药物规范配制成药物组合物。本发明的这一方面提供一种药 物组合物，该组合物包含如前所述的式I或式II的化合物或其药学上 可接受的盐、溶剂化物、代谢物或前药以及药学上可接受的稀释剂或 载体。
为了制备本发明的药物组合物，将治疗或预防有效量的式I或式 n的化合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上可接受的前 药或盐(单独或与本文所述其他治疗剂一起)与例如药学上可接受的载 体根据常规药物混合技术紧密混合，以产生一定剂量。载体可根据给 药(例如口服或肠胃夕卜)所需的制剂形式采取多种形式。适合载体的实 例包括任何及所有溶剂、分散介质、佐剂、包衣料、抗菌和抗真菌剂、 等渗和吸收延迟剂、甜味剂、稳定剂(用于促进长期储存)、乳化剂、 粘合剂、增稠剂、盐、防腐剂、溶剂、分散介质、包衣料、抗菌和抗 真菌剂、等渗和吸收延迟剂、增香剂及为了制备特定治疗组合物所需 的混杂物质，如緩沖剂和吸收剂。此类介质和剂与药物活性物质的使 用在本领域是熟知的。除了常规介质或剂与式I或式II的化合物不相 容外，其在治疗组合物和制剂中的使用均为本发明所包含。也可将辅 助活性成分加入本文所述的组合物和制剂中。
本发明的组合物可以为适用于口服使用(例如，作为片剂、锭剂、
硬或软胶嚢、水性或油性混悬剂、乳剂、可分散4分剂或颗粒剂、糖浆剂或酏剂)、局部使用(例如，作为乳膏剂、软膏剂、凝胶或水性或油 性溶液或混悬剂)、吸入给药(例如，作为精细粉剂或液体气雾剂)、吹 入给药(例如，作为精细粉剂)或肠胃外给药(例如，作为无菌水或油溶 液用于静脉、皮下或肌内给药或作为栓剂用于直肠给药)的形式。例如， 口服使用的组合物可包含例如一种或多种着色剂、甜味剂、增香剂和 /或防腐剂。
适用于片剂制剂的药学上可接受的赋形剂包括例如惰性稀释剂，
如乳糖、碳酸钠、磷酸钙或碳酸钙；粒化剂和崩解剂，如玉米淀粉或 藻酸(algenic acid);粘合剂，如淀粉；润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸 或滑石粉；防腐剂，如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯；和抗氧化剂，如抗 坏血酸。片剂可不包衣，或者用本领域熟知的常规包衣剂和方法包衣， 以改进其崩解和随之活性成分在胃肠道内的吸收，或者改善其稳定性 和/或外7见。
适合口服使用的组合物可以为其中活性成分与惰性固体稀释剂 (例如碳酸钩、磷酸钩或高岭土)混合的硬明胶胶嚢的形式，或者作为 其中活性成分与水或油(如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合的软明胶 胶嚢。
含水混悬剂一般包含细粉状活性成分与一种或多种悬浮剂，如羧 甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡 咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂，如卵磷脂或环氧烷与 脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、或环氧乙烷与长链脂肪 醇的缩合产物(例如十七(亚乙氧基)鲸蜡醇 (heptadecaethyleneoxycetanol))、或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇 的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)、或环氧乙烷与 衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如聚乙烯脱水山梨糖 醇单油酸酯)。含水混悬剂也可包含一种或多种防腐剂(如对羟基苯曱 酸乙酯或丙酯)、抗氧化剂(如抗坏血酸)、着色剂、增香剂和/或甜味剂 (如蔗糖、糖精或阿斯巴甜)。油性混悬剂可通过在植物油(如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油) 或在矿物油(如液体石蜡)中悬浮活性成分配制。油性混悬剂也可包含 增稠剂，如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。也可加入如上所述的甜味剂和增 香剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂如抗坏 血酸防腐。
适合通过加水制备含水混悬剂的可分散粉末和颗粒一般包含活 性成分与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂。适合的分散 剂或湿润剂和悬浮剂由以上已提到的那些作为示例。也可存在其他赋 形剂，如甜味剂、增香剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以为水包油型乳剂形式。油相可以为植 物油(如橄榄油或花生油)或矿物油(例如液体石蜡)或任何这些油的混 合物。适合的乳化剂可以为例如天然胶(如阿拉伯胶或黄芪胶)、天然 磷脂(如大豆、卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如脱 水山梨糖醇单油酸酯)和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物(如聚氧乙烯
脱水山梨糖醇单油酸酯)。乳剂也可包含甜味剂、增香剂和防腐剂。
糖浆剂和酏剂可用甜"未剂如甘油、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜
或蔗糖配制，并且也可包含緩和剂、防腐剂、增香剂和/或着色剂。
药物组合物也可以为无菌可注射的水性或油性混悬剂的形式，可
根据已知方法用 一种或多种以上已提到的适合分散剂或湿润剂和悬
浮剂配制。对于胃肠外制剂，载体通常包含无菌水、含水氯化钠溶液、
1,3-丁二醇或任何其他适合的无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂。可 包含帮助分散的其他成分。当然，在无菌水待用并且保持为无菌时， 也必须使组合物和载体无菌。也可以制备可注射混悬剂，在此情况下 可利用适合的液体载体、悬浮剂等。
可通过混合活性成分与适合的非刺激性赋形剂制备栓剂，所述赋 形剂在常温为固体，但在直肠温度为液体，因此在直肠中将融化释放 药物。适合的赋形剂包括例如可可豆脂和聚乙二醇。局部用药制剂，如乳膏剂、软膏剂、凝胶和水性或油性^^液或混 悬剂， 一般用本领域熟知的常规方法配制活性成分与常规局部用药可 接受的媒剂或稀释剂获得。
由吹入给药的组合物可以为包含例如30MJ11或更小平均直径的颗 粒的精细粉末剂型，粉末可自身包含单独活性成分或用一种或多种生 理可接受的载体(如乳糖)稀释。然后，可方便地将用于吹入的粉末保
持在包含例如l-50mg活性成分的嚢中供涡轮吸入器使用，如用于已 知剂色甘酸钠的吹入。
用于吸入给药的组合物可以为常规加压气雾剂的形式，这种形式 布置成将活性成分分散为含微细固体或液体微滴的气雾剂。可使用常 规气雾剂抛射剂，如挥发性氟化烃或烃，并且可很方便地将气雾剂装 置布置成能够分散计量活性成分。
用于透皮给药的组合物可以为本领域的技术人员熟知的透皮皮 肤贴剂形式。
其他递药系统可包括定时释药、延迟释药或緩释递药系统。此类 系统可避免化合物重复给药，为患者和医生增加便利。这些递药系统 的很多类型可以利用，并且为本领域的技术人员所熟悉。它们包括聚 合物基系统，如聚(丙交酯-乙交酯)、共聚草酸酯、聚己内酯、聚酯酰 胺、聚原酸酯、聚羟基丁酸和聚酐。含药物的前述聚合物的微嚢描述 于例如美国专利5,075,109中。递药系统也可包括非聚合物系统，这 些系统为脂类，包括甾醇(如胆甾醇)、胆甾醇酯和脂肪酸或中性脂 肪如甘油单酯、二酯和三酯；水凝胶释药系统；硅橡胶系统；肽基系 统；蜡包衣料；利用常规粘合剂和赋形剂的压制片剂；部分融合的植 入物等。具体实例包括但不限于(a)其中本发明的剂以基质内形式包 含的腐蚀系统，如美国专利4,452,775、 4,675,189和5,736,152所述， 和(b)其中活性组分以控制速率从聚合物渗透的扩散系统，如美国专利 3,854,480、 5,133,974和5,407,686所述。此外可使用基于泵的硬件递 药系统，其中一些适用于植入。关于制齐寸的其4也资 一十，参见 Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board) ， Volume 5, Chapter 25.2, Pergamon Press 1990，此文献明确通过引用结合到本文 中。
与 一种或多种赋形剂组合制备单一剂型的本发明化合物的量当 然要根据要治疗的患者、疾病或病症的严重性、给药速率、化合物的 处置和开方医生的判断变化。然而，在单剂量或分开剂量中，有效剂 量为约0.001至约100mg/kg体重/天，例如约0.5至约35mg/kg体重/ 天。对于70kg的人，这将是约0.0035至2.5g/天，例如约0.05至约 2.5g/天。在某些情况下，低于前述范围下限的剂量可能足够，而在其 他情况下，可使用更大量剂量而不产生任何有害副作用，其条件为首 先将此较大剂量分成供一天给药的数个小剂量。关于给药途径和剂量 方案的其他资料，参见Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Volume 5， Chapter 25.3, Pergamon Press 1990，此文献明确通过引用结合到本文中。
根据熟知的医学原理，用于治疗或预防的式I或式II化合物的剂 量大小当然要根据病症的性质和严重性、动物或患者的年龄和性别以 及给药途径而变化。应了解，对于任何特定患者的具体剂量和给药频 率可以变化，并且取决于多种因素，包括具体式I或式II化合物的活 性、物种、患者的年龄、体重， 一般健康状况、性别和饮食、给药方 式和时间、排泄率、药物组合以及特定病症的严重性，然而可由本领 域的技术人员按常规确定。
在一些实施方案中，式I或式II的化合物可与另 一种治疗剂组合 ("组合治疗")给予个体患者(例如，在同一制剂或在单独制剂中)。式I 或式II的化合物可与另一种治疗剂混合给药，或者可在单独的制剂中 给药。当在单独的制剂中给药时，式I或式II的化合物与另一种治疗 剂可基本同时或顺序给药。除了本发明的化合物外，这种组合治疗可包括常规手术或放射治 疗或化学治疗。此类化学治疗可包括一种或多种以下抗肿瘤剂种类
(i)抗增殖活性/抗肿瘤药物及其组合；(ii)细胞生长抑制剂；(iii)癌细胞 侵入抑制剂；(iv)生长因子功能抑制剂；(v)抗血管形成剂；(vi)血管损 伤剂；(vii)反义治疗药；(viii)基因治疗剂；(ix)干扰素；和(x)免疫治疗剂。
可与题述方法中式I或式II化合物组合给药的用于治疗呼吸疾病 的治疗剂包括但不限于P-肾上腺素能药物，包括支气管扩张药，包括 沙丁胺醇、硫酸异丙肾上腺素、硫酸奥西那林、硫酸特布他林、乙酸 吡布特罗和沙美特罗、福莫特罗；类固醇，包括丙酸倍氯米^K氟尼 缩松、氟替卡松、布地奈德和曲安奈德。与治疗呼吸疾病结合使用的 抗炎药物包括类固醇，如丙酸倍氯米松、曲安奈德、氟尼缩松和氟替 卡松。其他抗炎药物包括色甘酸盐，如色甘酸二钠。获准成为支气管 扩张药的其他呼吸药物包括抗胆碱能药，包括异丙托溴铵。抗组胺药 包括但不限于苯海拉明、卡比沙明、氯马斯汀、茶苯海明、美吡拉敏、 曲吡那敏、氯苯那敏、溴苯那敏、羟嗪、赛克力嗪、美克洛嗪、氯环 力嗪、异丙嗪、多西拉敏、氯雷他定和特非那定。具体的抗组胺药包 才舌氮卓^/f 、汀(rhinolast)(Astelin ) 、 claratyne(Claritin ) 、 claratyne D(ClaritinD⑧)、telfast(Allegra⑧)、Zyrtec⑧和伯克纳。
在一些实施方案中，式I或式II的化合物与"干扰素(IFN-Y)、皮 质甾类如泼尼松、泼尼松龙、曱泼尼龙、氢化可的松、可的松、地塞 米松、倍他米松等或其组合作为组合治疗给药用于治疗间质性肺病， 例如特发性肺纤维变性。
在一些实施方案中，式i或式n的化合物与一种已知治疗剂在组
合疗法中给药用于治疗CF。治疗CF使用的治疗剂包括但不限于抗生 素；抗炎剂；DNAse(例如，重组人DNAse;阿法链道酶、氯化钙和 氯化钠溶液；阿法链道酶)；溶粘蛋白剂(例如，N-乙酰基半胱氨酸；Mucomyst ; Mucosil );减充血剂；支气管扩张剂(例如，茶碱、异 丙托溴铵)等。
在本发明的另一个实施方案中提供包含用于治疗上述疾病的物 质的制品或"试剂盒"。在一个实施方案中，试剂盒包括容器，容器包
含式i或式n的组合物或其代谢物、互变异构体、溶剂化物或药学上
可接受的前药或盐。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗TLR8-介导的疾病的试剂盒。在另一个实施方案中，本发明提供适用于可由 调节患者免疫系统治疗的病症或疾病的试剂盒。试剂盒可进一步包含 在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。适合的容器包括例如 瓶、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可用多种材料制成，如玻璃或 塑料。容器容纳治疗病症有效量的式I或式II的化合物或其药物制剂， 并且可具有无菌入口(例如，容器可以为具有塞子的静脉注射液袋或 瓶，塞子可被皮下注射针头穿透)。标签或包装说明书标明用组合物治 疗所选择的病症。在一个实施方案中，标签或包装说明书标明可用包 含式I或式II的化合物的组合物例如治疗可由调节TLR8-介导的细胞 活性治疗的疾病。标签或包装说明书也可标明可用组合物治疗其他疾 病。作为选择或另外，试剂盒可进一步包含第二容器，第二容器包含 药学上可接受的緩冲剂，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐緩冲盐水、 林格氏液和葡萄糖溶液。从商业和用户的观点，可进一步包含其他所 需物质，包括其他緩沖剂、稀释剂、滤器、针头和注射器。
试剂盒还可包含式i或式n化合物和(如果存在)第二药物制剂的 给药说明。例如，如果试剂盒包括含有式i或式n化合物的第一组合 物和第二药物制剂，则试剂盒还可以包含第 一和第二药物组合物同
时、顺序或单独给予需要的患者的说明。
在另一个实施方案中，试剂盒适用于式i或式n的化合物的固体 口服剂型的递药，例如片剂或胶嚢。这种试剂盒包括例如一些单位剂 量。这种试剂盒可包括具有以预期使用顺序导向的剂量的卡。这种试 剂盒的实例为"泡罩包装"。泡罩包装在包装工业上熟知，并且广泛用于包装药物单位剂型。如果需要，可提供记忆帮助，例如，以数字、 字母或其他标志形式，或者使用日程说明，指定其中能够给予剂量的 治疗日程中的天数。
根据一个实施方案中，试剂盒包含(a)其中含有式I或式II的化合
物的第一容器；和任选的(b)其中含有第二药物制剂的笫二容器，其中
第二药物制剂包含第二化合物，第二化合物可有效治疗可由选择性调
节TLR8-介导的细胞活性治疗的病症或疾病。作为选择或另外，试剂 盒可进一步包含第三容器，第三容器包含药学上可接受的緩沖剂，如 注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐緩冲盐水、林格氏液和葡萄糖溶液。从 商业和用户的观点，可进一步包含其他所需物质，包括其他緩冲剂、 稀释剂、滤器、针头和注射器。
在试剂盒包含式I或式II化合物的药物制剂和包含第二治疗剂的 第二制剂的某些其他实施方案中，试剂盒可包含容纳单独制剂的容 器，如分开的瓶或分开的箔小包装；然而，也可在单一不分开的容器 中容纳单独的组合物。通常，试剂盒包含单独组分给药的说明。在单 独组分以不同剂型给药(例如，口服和胃肠外)，以不同用药间隔给药 时，或者在处方医生需要滴入组合的单独组分时，试剂盒形式特别有 利。
实施例
为说明本发明包含以下实施例。然而，应了解，这些实施例并不 限制本发明，只意味建议实施本发明的方法。本领域的技术人员应认 识到，可很容易地改变所述化学反应制备本发明的一些其他化合物，
通过对本领域技术人员显而易见的修改，例如，适当保护干扰基团， 利用本领域已知的所述那些以外的其他适合试剂，和/或常规改变反应 条件，可成功地合成本发明的非示例性化合物。作为选择，应认为本 文公开或本领域已知的其他反应也可用于制备本发明的其他化合物。在下述实施例中，除非另外指明，所有温度均为摄氏度。试剂购
自供应商，如Aldrich Chemical Company, Lancaster, TCI或Maybridge，
使用无需纯化，除非另外指明。
下述反应一般在氮或氩正压下或利用干燥管(除非另外说明)在无 水溶剂中进行，反应烧瓶通常配有橡胶塞，用于通过注射器引入底物 和试剂。玻璃器亚经烘箱干燥和/或加热干燥。
柱层析在具有珪胶柱的Biotage系统(制造商Dyax Corporation) 或在氧化硅SepPak柱体(Waters)上进行。在以400MHz操作的Varian 仪器上记录^ NMR镨图。HNMR谱作为CDC13或DMSO-d6溶液获 得(以ppm报告)，用氯仿作为参比标准C7"ppm)。如需要，使用其他 NMR溶剂。在报告峰多重性时，使用以下略语s(单峰)、d(二重峰)、 t(三重峰)、m(多重峰)、br(增宽)、dd(双二重峰)、dt(双三重峰)。给出 时，偶合常数以赫兹(Hz)报告。
实施例1
合成(E)-2-gJ^-3H-苯并[el [1，4]二氮杂草-4(511)-甲酸乙酯(3)
CN CN O
步骤A:制备2-(2-硝基苄基M)乙腈(l)
将2-氨基乙腈盐酸盐(3.67g, 39.7mmol)加入到溶于无水 MeOH(30mL)的2-硝基苯甲醛(5.00g, 33.1mmol)的溶液中。将反应在 室温搅拌5分钟，以得到溶液。加入NaCNBH3(2.08g, 33.1),并将反 应混合物在室温搅拌过夜。在减压下将反应混合物浓缩，然后用 EtOAc(50mL)稀释。将有机相用饱和NaHCO3(30mL)和盐水(30mL)洗 涤，经Na2S04干燥，浓缩得到4.20g(22.0mmo1， 66%收率)2-(2-硝基苄基氨基)乙腈(l),为一种棕褐色油4.20g(22.0mmo1， 66%收率)。所 得物质无需进一步纯化即可用于下一步骤。
步骤B:制备2-硝基卡基(氰基曱基)氨基甲酸乙酯(2) 将吡啶(lMmg, 1.91mmol)加入到包含2-(2-硝基苄基氨基)乙腈 (1)(122mg， 0.638mmol)的CH2C12溶液(20mL)中。在氮气气氛下使反 应混合物冷却到0。C，并滴加氯曱酸乙酯(0.182mL， 1.914)。在室温搅 拌反应混合物1小时，然后用1N HCl(50mL)和盐水(50mL)洗涤。有 机层经Na2S04干燥，并在减压下浓缩。所得油通过柱层析(Biotage 40m, 100。/。CH2Cl2)纯化，得到97mg(0.37mmo1, 58%收率)2-硝基千 基(氰基甲基)氨基曱酸乙酯(2)，为一种黄色油。
步骤C:制备(E)-2-絲-3H-苯并[e][l,4j二氮杂草-4(5H)-曱酸乙 酯(3)
在氮气气氛下将Fe(289mg, 5.17mmol)加入到溶于乙酸(5mL)的 2-硝基千基-(氰基曱基)氨基曱酸乙酯(2)(227mg, 0.862mmol)的溶液 中。将反应混合物加热到90。C经历4小时，然后冷却至室温，并在减 压下浓缩。用EtOAc(20ml)稀释得到的棕色油，通过GF/F纸过滤(用 10mL EtOAc清洗)。将有机相用饱和Na2CO3(20mL)和盐水(20mL)洗 涤，经Na2S04干燥并浓缩。所得棕色油通过柱层析(5。/。MeOH/CH2Cl2， 然后200/oMeOH/CH2Cl2)纯化，得到52mg(0.223mmol，26Q/o收率)(E)-2國 氨基-3H-苯并[e][l,4]二氮杂蕈-4(5H)-曱酸乙酯(3)，为一种棕褐色固 体。
'HNMR
(400 MHz, DMSO-d6) S 1.17-1.25 (m, 3H), 3.81 (s, 2H), 4.024.12 (m, 2H), 4.23 (s, 2H), 6.79 (br s, 1H), 6.85-6.92 (m, 2H)， 7.18-7.24 (m, 2H).
实施例2
合成(E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[el[l，4I二氮杂草-4(5H)-甲 酸乙酯(6)步骤A:制备2-(2-硝基-4-(全氟乙基)节基Jt^)乙腈(4):
用2-硝基-4-(全氟乙基)苯曱醛代替2-硝基苯曱醛，以类似于实施 例1步骤A所述的方式制备化合物(4),得到83mg(0.27mmo1, 42%收
率)所需产物。
步骤B:制备2-硝基-4-(全氟乙基)苄基(氛基曱基)氨基甲酸乙酯
(5》
用2-(2-硝基-4-(全氟乙基)苄基氨基)乙腈(4)代替2-(2-硝基苄基氨 基)乙腈(l),以类似于实施例1步骤B所述的方式制备化合物(5),得 到69mg(0.18mmo1， 68%收率)所需产物。
步骤C:制备(E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[e[l，4I二氮杂萆 -4(5H)-甲酸乙酯(6):
用2-硝基-4-(全氟乙基)千基(氰基甲基)氨基甲酸乙酯(5)代替2-硝 基苄基-(氰基甲基)氨基甲酸乙酯(2)，以类似于实施例1步骤C所述的 方式制备化合物(6)，得到2.5mg(4。/。收率)所需产物。
'HNMR
(400 MHz, CDCl]) S 1.26-1.37 (m, 3H)， 3.94-3.99 (叫2H)， 4.21-4.22 (m, 2H), 4.39-4.45 (m， 2H), 5.00 (br s, 1H), 7.24-7.36 (叫3H).
实施例3
合成(E)-2-氨基-5.甲基-3H-苯并[e] [1，4二氮杂草-4(5印-甲酸乙酯
(9)CN CN O
步骤A:制备2-(l-(2-硝基苯基)乙基M)乙腈(7):
用l-(2-硝基苯基)乙酮代替2-硝基苯曱醛，以类似于实施例1步 骤A所述的方式制备此化合物，得到2.40g(11.7mmo1, 56%收率)所需 产物。
步骤B:制备M甲基(l-(2-硝基苯基)乙基)J^甲酸乙酯(8):
用2-(1-(2-硝基苯基)乙基氨基)乙腈(7)代替2-(2-硝基苄基氨基)乙 腈(l)，以类似于实施例1步骤B所述的方式制备此化合物，得到 75mg(27mmo1， 32%收率)所需产物。
步骤C:制备(￡)-2-#^-5-曱基-311-苯并[6[1，4二氮杂蕈-4(511)-
甲酸乙酯(9):
用氰基甲基(l-(2-硝基苯基)乙基)氨基甲酸乙酯(8)代替2-硝基千 基-(氰基曱基)氨基曱酸乙酯(2),以类似于(E)-2-氨基-3H-苯并[e][1,4] 二氮杂草-4(5H)-甲酸乙酯(3)的方式制备此化合物，得到 2.6mg(0.011mmo1， 13%收率)所需产物。
NMR (400 MHz,
CDC13) S 1,26 (br s， 3H), 1.40 (d， 3H)， 3.45-3.58 (br s, 1H), 4*15-4.29 (迈,2H)， 4.44 (br s, 1H), 4.97 (br s, 1H), 7.03-7.06 (m, 2H)， 7.18-7.31 (m, 2H).
实施例4
合成(E)-2-氨基-3H-苯并[el[l，41二氮杂萆-4(5H)-甲酸异丙酯(11)<formula>formula see original document page 41</formula>
步骤A:制备2-(2-硝基千基#^)乙腈(l)
如实施例1步骤A制备化合物(l)。 步骤B: 2-硝基千基(M曱基)J^曱酸异丙酯(10) 用氯甲酸异丙酯代替氯甲酸乙酯，以类似于实施例1步骤B所述 的方式制备化合物(l)，得到270mg(0.974mmo1， 41%收率)所需产物。 步骤C: (E)-2-絲-3H-笨并e[l，4二氮杂萆-4(5H)-甲酸异丙酯
(11)
用2-硝基千基(氰基甲基)氨基甲酸异丙酯(10)代替2-硝基苄基(氰 基曱基)氨基甲酸乙酯(2)，以类似于实施例1步骤C所述的方式制备 此化合物，得到3.2mg(0.013mmo1， 1%收率)所需产物。
'H NMR (400 MHz^ CDC13) 5 1.35 (br s， 6H), 3.86-3.97 (m, 2H), 4.36-4.45 (m, 2H)， 4.98-5.02 (m, 1H), 7.02-7.08 (m, 2H), 7.20-7.38 (m, 2H).,.
实施例5
合成(E)-2-氨基-3H-苯并lell，41二氮杂草-4(5H)-甲酸丙酯(13)
步骤A:制备2-(2-硝基千基#^)乙腈(l)
如实施例1步骤A制备化合物(l)。步骤B:制备2-硝基千基(氰基甲基)氨基甲酸正丙酯(12)
用氯曱酸正丙酯代替氯甲酸乙酯，以类似于实施例1步骤B所述 的方式自化合物(1)制备化合物(12),得到64mg(0.23mmo1, 36%收率) 所需产物。
步骤C:制备(E)-2-氨基-3H-苯并[ejl，4二氮杂草-4(5H)-甲酸丙
酯(13)
用2-硝基千基(氰基曱基)氨基曱酸正丙酯(12)代替2-硝基苄基(氰 基甲基)氨基甲酸乙酯(2)，以类似于实施例1步骤C所述的方式制备 化合物(13),得到6.8mg(0.028mmo1, 13%收率)所需产物。
& NMR (400 MHz, CDC13) S 0.87-0.94 (m， 3H), 1.59-1.66 (m, 2H), 4.034.05 (m, 2H), 4.35 (s, 1H), 4.50 (br s， 2H) 4.59 (s, 1H), 6.89 (4 1H), 7,09-7.15 (m, 1H), 7.22-7.33 (m, 2H), 7.62 (br d, 1H).
实施例6
合成(E)-2-氨基-3H-苯并eHl，4二氮杂罩-4(5H)-曱酸异丁酯(15)
<formula>formula see original document page 42</formula>
步骤A:制备2-(2_硝基千基#^)乙腈(l)
如实施例1步骤A制备化合物(l)。
步骤B:制备2-硝基苄基(氰基甲基)氨基甲酸异丁酯(14)
用氯曱酸异丁酯代替氯甲酸乙酯，以类似于实施例1步骤B所述 的方式制备化合物(14),得到43.2mg(0.148mmo1， 14%收率)所需产物。
步骤C:制备(E)-2-氨基-3H-苯并[el[l，4二氮杂草-4(5H)-甲酸异 丁酯(15)用2-硝基千基(氰基曱基)氨基甲酸异丁酯(14)代替2-硝基苄基-(氰 基曱基)氨基甲酸乙酯(2),以类似于实施例1步骤C所述的方式制备
化合物(15)，得到2.8mg(0.011mmo1, 7%收率)所需产物。
NMR (400 MHz, CDC13) 5 0,95-1.10 (m, 6H)， 2.00 (m, 1H)， 3.90-3.97 (m, 4H), 4.37-4,41 (叫2H), 7.03-7.06 (m, 2H), 7.20-7.39 (m, 2H). .
实施例7
合成(E)-2-絲-N，N-二乙基-3H-苯并[el[l，4二氮杂萆-4(5H)-甲酰 胺(17)
CN CN O
(16) (17)
步骤A:制备2-(2-硝基爷基#^)乙腈(l)
如实施例1步骤A制备化合物(l)。
步骤B:制备l-(2-硝基苄基)-l-(氰基甲基)-3，3-二乙基脲(16)
用二乙基氨基曱酰氯代替氯甲酸乙酯，以类似于实施例1步骤B 所述的方式制备化合物(16)，得到24.9mg(0.0858mmo1, 19%收率)所
需产物。
步骤C:制备(E)-2-氨基-N，N-二乙基-3H-苯并[e[l，41二氮杂萆 -4(5H)"甲酰胺(n):
用l-(2-硝基苄基)-l-(氰基曱基)-3,3-二乙基脲(16)代替2-硝基苄基
(氰基甲基)氨基曱酸乙酯(2)，以类似于实施例1步骤C所述的方式制
备化合物(17)，得到2.6mg(0.01mmo1， 11%收率)所需产物。
，HNMR (400 MHz, CDC13) S U9 (、 6H)， 3.33 (q， 4H), 3.66 (s， 2H), 4.i;i (s, 2H), 7.01-7.05 (m, 2H)， 7.]S (d， 1H), 7.31 (X 1H).实施例8
合成(E)-2-絲-3-曱基-3H-苯并e[l，4二氮杂草-4(5H)-甲酸乙酯
(20)
CN CN O
步骤A:制备2-(l-(2-硝基苯基)乙基M)乙腈(18)
在氮气气氛下，将2-硝基苄基胺(513mg， 3.37mmol)加入到包含 K2C03(932mg， 6.74mmol)和2-溴丙腈(677mg， 5.06mmol)的乙腈(40mL) 中。将反应混合物加热到65。C经历14小时。所得产物(18)无需純化或 浓缩即可用于下一步骤。
步骤B:制备氰基甲基(l-(2-硝基苯基)乙基)氨基甲酸乙酯(19):
将饱和NaHC03(5mL)和氯曱酸乙酯(1.83g, 16.86mmol)加入到从 前面步骤得到的包含2-(l-(2-硝基苯基)乙基氨基)乙腈(18)的乙腈溶 液。在室温剧烈搅拌反应混合物14小时。用EtOAc(50ml)稀释反应， 随后用盐水(40ml)洗涂。分离的有机相经Na2S04干燥，过滤并浓缩。 纯化(Biotage 40s , 3:1 CH2C12:己烷，然后100%CH2C12)得到 37.1mg(0.134mmo1， 4%收率)氰基曱基(1-(2-硝基苯基)乙基)氨基曱酸 乙酯(19)，为一种浅黄色油。
步骤C:制备(￡)-2-氨基-3-甲基-311-苯并[6[1，41二氮杂草-4(511)-甲酸乙酯(20)
用氰基甲基(l-(2-硝基苯基)乙基)氨基曱酸乙酯(l9)代替2-硝基苄
基-(氰基曱基)氨基甲酸乙酯(2),以类似于实施例1步骤C所述的方式
制备此化合物，得到3.1mg(0.013mmo1， 9%收率)所需产物。
& NMR (400顧z， CDC13) S 1.01 (d, 3H), 1.25-1.34 (m， 3H)， 4.13-4.23 (m, 3H)， 4,70 (br d, 2H), 6.95-7.03 (m, 2H), 7.20 (d, 1H)， 7.30 (t, 1H).用以下试验测定本发明化合物的活性。
实施例9 HEK/TLR试验
用不同浓度的化合物过夜培育人胚胎肾(HEK)细胞，这种细胞稳 定表达不同的人TLR基因，包括TLR8以及NFkB-荧光素酶^Jl基因。 通过在650nm读取吸光度确定诱导的荧光素酶的量。本发明的化合物 具有100pM或更小的MC5o,其中MCs(^皮定义为见到50%最大诱导 的浓度。
实施例10
1XR8的PBMC试验
用具有柠檬酸钠的BD Vacutainer Cell Preparation Tube(细胞制备 管)从人血分离外周血单核细胞(PBMC)。细胞用化合物培育过夜。 TLR8活性通过由ELISA检测上清液中TNFa的量测定。本发明的化 合物具有100pM或更小的MC5G,其中MCso为见到50%最大诱导的 浓度。
前述说明d义为本发明原理的示例。此外，由于许多改进和变化对 本领域的技术人员显而易见，因此本发明不限于上述确切结构和所示
的范围内。
在说明书和以下权利要求中使用时，"包括"和"包含"旨在说明所 述特征、整数、组分或步骤的存在，但它们不排除一个或多个其他特 征、整数、组分、步骤或组的存在或加入。
权利要求
1. 一种下式的化合物及其代谢物、溶剂化物、互变异构体和药学上可接受的盐id="icf0001" file="S2006800381346C00011.gif" wi="43" he="30" top= "62" left = "92" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>其中Z为H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、OR6或NR6R7，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代；R1、R2、R3和R4独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代，或者R1和R2与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和碳环，其中所述碳环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代；或者R3和R4共同为氧代；各个R5独立选自H、F、Cl、Br、I、OMe、CH3、CH2F、CHF2、CF3和CF2CF3；R6和R7独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R6、SR6和SO2R6的基团取代；或者R6和R7与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和杂环，其中所述杂环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代；并且n为0、1、2、3或4。
2. 权利要求1的化合物，其中Z为OR6。
3. 权利要求2的化合物，其中RS为烷基。
4. 权利要求3的化合物，其中W为乙基、丙基、异丙基或异丁基。
5. 权利要求l的化合物，其中Z为NR6117。
6. 权利要求5的化合物，其中116和117独立为H或烷基。
7. 权利要求6的化合物，其中116和117为乙基。
8. 权利要求1至7中任一项的化合物，其中n为0或1。
9. 权利要求8的化合物，其中W为CF2CF3。
10. 权利要求1至9中任一项的化合物，其中W为H或烷基，并 且R4为H。
11. 权利要求10的化合物，其中R 为甲基。
12. 权利要求1至11中任一项的化合物，其中W为H或烷基， 并且R2为H。
13. 权利要求12的化合物，其中Ri为甲基。
14. 权利要求1的化合物，所述化合物选自 (E)-2-氨基-3H-苯并[e] [ 1,4]二氮杂萆-4(5印-甲酸乙酯； (E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[e][1,4]二氮杂萆-4(5印-甲酸乙酯；(E)-2-tt-5-甲基-3H-苯并[e][l,4]二氮杂萆-4(5H)-甲酸乙酯； (E)-2-氨基-3H-苯并[e][1,4]二氮杂草-4(5H)-甲酸异丙酯； (E)-2-絲-SH-苯并[e][l^]二氮杂草4。H)-甲酸丙酯； (E)-2-氨基-3H-苯并[e][l,4]二氮杂草-4(5H)-甲酸异丁酯； (E)-2-氨基-N,N-二乙基-3H-苯并[e][l,4]二氮杂萆-4(5H)-曱酰胺；和(E)-2-氨基-3-甲基-3H-苯并[e][l,4]二氮杂草-4(5H)-曱酸乙酯；及其药学上可接受的盐。
15. —种下式的化合物及其代谢物、溶剂化物、互变异构体和药 学上可接受的盐<formula>formula see original document page 4</formula>Z为H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、 杂芳基、ORS或NRSr7，其中所述烷基、烯基、火緣、杂烷基、环烷 基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、 炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (d誦C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CHr、 nr6s02r7、 SR6和s02r6的基团取代；R1、 R2、 113和114独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环 烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(-O)OR6、 OC(-O)R6、 C(=0)NR6R7、 (d-C6烷基)^J^、 CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团 取代，或者W和W与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的碳 环，其中所述碳环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(:O)OR6、 OC(O)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代，或者113和114共同为氧代；R5为H、 F、 Cl、 Br、 I、 OMe、 CH3、 CH2F、 CHF2、 CFg或CF2CF3;RS和R"虫立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环 烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷 基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独 立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C陽C6烷基)M、 CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代；或者116和R7与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的杂 环，其中所述杂环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (d-Q烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代；并且n为0、 1、 2、 3或4。
16. 权利要求15的化合物，其中Z为OR6。
17. 权利要求16的化合物，其中W为烷基。
18. 权利要求17的化合物，其中116为乙基、丙基、异丙基或异 丁基。
19. 权利要求15的化合物，其中Z为NR6R7。
20. 权利要求19的化合物，其中W和R卩独立为H或烷基。
21. 权利要求20的化合物，其中116和117为乙基。
22. 权利要求15至21中任一项的化合物，其中RS为H或CF2CF3。
23. 权利要求22的化合物，其中115为CF2CF3。
24. 权利要求15至23中任一项的化合物，其中R1为H或烷基， 并且R2为H。
25. 权利要求24的化合物，其中W为曱基。
26. 权利要求15至25中任一项的化合物，其中113为H或烷基， 并且R4为H。
27. 权利要求26的化合物，其中W为曱基。
28. —种用于治疗TLR8-介导的病症的试剂盒，所述试剂盒包含a) 包含权利要求1至27中任一项的化合物的第一药物组合物；和b) 任选的使用说明书。
29. 权利要求28的试剂盒，所述试剂盒进一步包含(c)第二药物组 合物，其中所述第二药物组合物包含具有抗过度增殖活性的第二化合物。
30. 权利要求29的试剂盒，所述试剂盒进一步包含用于对需要的 患者同时、顺序或单独给予所述第 一药物组合物和第二药物组合物的 说明书。
31. —种药物组合物，所述组合物包含权利要求1至27中任一项 的化合物以及药学上可接受的稀释剂或载体。
32. 权利要求1至27中任一项的化合物，所述化合物用作治疗人 或动物的TLR8-介导的病症的药物。
33. 权利要求1至27中任一项的化合物用于制备药物的用途，所 述药物用于治疗人或动物的TLR8-介导的病症。
34. —种治疗TLR8-介导的病症的方法，所述方法包括给予需要 的患者有效量的权利要求1的化合物。
35. —种调节患者的免疫系统的方法，所述方法包括给予需要的 患者有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明提供用于通过类Toll受体TLR8调节信号传导的组合物和方法。所述组合物和方法用于治疗自身免疫、炎症、过敏、哮喘、移植排斥、移植物抗宿主疾病、感染、脓毒、癌症和免疫缺陷。
文档编号A61K31/5513GK101287716SQ200680038134
公开日2008年10月15日 申请日期2006年8月17日 优先权日2005年8月19日
发明者G·A·多赫蒂, Z·琼斯 申请人:阿雷生物药品公司