作为mPGES-1抑制剂的2-(苯基或者杂环基)-1H-菲并[9,10-d]咪唑类化合物的制作方法

专利名称：作为mPGES-1抑制剂的2-(苯基或者杂环基)-1H-菲并[9,10-d]咪唑类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的化合物，它们是微粒体前列腺素E合酶-1酶的选择性抑制剂，并且由此可以用于治疗各种疾病或者病症中的疼痛和炎症，比如骨关节炎、类风湿性关节炎和急性或者慢性疼痛。此外，通过选择性抑制前炎性PGE2，可以确信，本发明化合物将具有降低的与常规非甾族抗炎药物抑制其它前列腺素相关的副作用可能性，比如胃肠道和肾毒性。
发明概述 本发明包括新的式I化合物
或者其药学上可接受的盐。这些化合物是微粒体前列腺素E合酶-1(mPGES-1)酶的抑制剂，并且由此它们可以用于治疗由各种疾病或者病症产生的疼痛和/或炎症，比如骨关节炎、类风湿性关节炎和急性或者慢性疼痛。本发明还包括治疗通过mPGES-1酶介导的疾病或者病症的方法和药学组合物。
发明详述 本发明包括式B表示的化合物
或者其前药，或者所述化合物或者前药的药学上可接受的盐，其中 R3是

和 R6选自(1)H；(2)F；(3)Cl；(4)Br；(5)I；(6)-CN；(7)C1-10烷基或C2-10链烯基，其中连接到所述C1-10烷基或C2-10链烯基的一个或多个氢原子可以被氟原子替换，或在相邻碳原子上的两个氢原子可以连接到一起并且由-CH2-替换以形成环丙基基团，或在相同碳原子上的两个氢原子可以被替换并且连接到一起形成螺C3-6环烷基，且其中所述C1-10烷基或C2-10链烯基可以任选地被一个至三个取代基取代，该取代基独立地选自-OH、乙酰基、甲氧基、乙烯基、R11-O-C(O)-、R35-N(R36)-、R37-N(R38)-C(O)-、环丙基、吡咯基、咪唑基(imidiazolyl)、吡啶基和苯基，所述吡咯基、咪唑基、吡啶基和苯基任选地被C1-4烷基或单-羟基取代的C1-4烷基所取代；(8)C3-6环烷基；(9)R12-O-；(10)R13-S(O)k-，(11)R14-S(O)k-N(R15)-；(12)R16-C(O)-；(13)R17-N(R18)-；(14)R19-N(R20)-C(O)-；(15)R21-N(R22)-S(O)k-；(16)R23-C(O)-N(R24)-；(17)Z-C≡C；(18)-(CH3)C＝N-OH或-(CH3)C＝N-OCH3；(19)R34-O-C(O)-；(20)R39-C(O)-O-；和(21)苯基、萘基、吡啶基、哒嗪基(pyradazinyl)、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻吩基或者呋喃基，它们各自任选被独立地选自以下的取代基取代F、Cl、Br、I、C1-4烷基、苯基、甲基磺酰基、甲基磺酰基氨基、R25-O-C(O)-和R26-N(R27)-，所述C1-4烷基任选被1～3个独立地选自卤素和羟基的基团取代； Z各自独立地选自(1)H；(2)C1-6烷基，其中连接在所述C1-6烷基上的一个或者多个氢原子可以替换成氟原子，和其中C1-6烷基任选被1～3个独立地选自以下的取代基取代羟基、甲氧基、环丙基、苯基、吡啶基、吡咯基、R28-N(R29)-和R30-O-C(O)-；(3)-(CH3)C＝N-OH或者-(CH3)C＝N-OCH3；(4)R31-C(O)-；(5)苯基；(6)吡啶基或者其N-氧化物；(7)C3-6环烷基，其任选被羟基取代；(8)四氢吡喃基，其任选被羟基取代；和(9)含有1～3个独立地选自O、N或者S的原子并且任选被甲基取代的五元芳香杂环； R15、R24和R32各自独立地选自(1)H；和(2)C1-4烷基； R11、R12、R13、R14、R16、R23、R25、R30、R31、R34和R39各自独立地选自(1)H；(2)C1-4烷基；(3)C3-6环烷基；(4)C3-6环烷基-C1-4烷基-(5)苯基；(6)苄基；和(7)吡啶基；所述C1-4烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-4烷基-、苯基、苄基和吡啶基各自可以任选被1～3个独立地选自以下的取代基取代OH、F、Cl、Br和I，且其中所述C1-4烷基可以进一步被氧代(oxo)或甲氧基或二者所取代； R17、R18、R19、R20、R21、R22、R26、R27、R28、R29、R35、R36、R37和R38各自独立地选自(1)H；(2)C1-6烷基；(3)C1-6烷氧基；(4)OH和(5)苄基或者1-苯乙基；和R17和R18、R19和R20、R21和R22、R26和R27、以及R28和R29、以及R35和R36、以及R37和R38可以与它们连接的氮原子连接形成5或者6个碳原子的单环，其任选含有一个或者两个独立地选自-O-、-S(O)k-和-N(R32)-的原子；和 k各自独立地为0、1或者2。
在此类中，本发明包括式B化合物的第一亚类，其中R6是R12-O。
在该第一亚类中，本发明包括式B化合物的一类，其中R12选自(1)C1-4烷基，和(2)C3-6环烷基-C1-4烷基-，其中所述C1-4烷基和C3-6环烷基均可任选地被1-3个独立选自OH、F、Cl、Br和I的基团所取代。
也是在此类中，本发明包括式B化合物的第二亚类，其中R6选自F、Cl、Br和I。
本发明包括选自下表的化合物


或任一上述化合物的药学上可接受的盐。
本发明还包括含有式B的化合物和药学上可接受的载体的药学组合物。
在另一实施方案中，本发明包括在需要所述治疗的人类患者中治疗微粒体前列腺素E合酶-1介导的疾病或者病症的方法，该方法包含给药所述患者有效治疗微粒体前列腺素E合酶-1介导的疾病或者病症的量的式B的化合物。在此实施方案中，所述疾病或者症状选自急性或者慢性疼痛、骨关节炎、类风湿性关节炎、粘液囊炎、强直性脊柱炎和原发性痛经。
本发明还包括下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
本发明还包括下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
本发明还包括下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
本发明还包括下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
适当时，本发明包括任何上述化合物的药学上可接受的盐。基于本说明书的目的，标头“R3/R6”是指在该栏中所示的取代基取代在R3或者R6所示的位置上。在相邻栏中，标头“R6/R3”是指所示取代基取代在先前一栏中未被取代的R3或者R6的位置上。例如，实施例6表示R3＝CN和R6＝H或者R3＝H和R6＝CN，代表两种互变异构体。
术语“卤素”或“卤”包括F、Cl、Br和I。
术语“烷基”是指具有所示碳原子数目的直链或者支链结构及其组合。由此，例如，C1-6烷基包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、仲丁基和叔丁基、丁基、戊基、己基和1，1-二甲基乙基。
术语“链烯基”是指具有至少一个碳碳双键的具有所示碳原子数目的直链或支链结构及其组合，其中氢原子可以被另外的碳碳双键替换。例如，C2-6烯基包括乙烯基、丙烯基、1-甲基乙烯基和丁烯基等等。
术语“炔基”是指具有至少一个碳碳三键的具有所示碳原子数目的直链或者支链结构及其组合。例如，C3-6炔基包括丙炔基(propenyl)、1-甲基乙炔基(methylethenyl)和丁炔基(butenyl)等等。
术语“烷氧基”是指具有所示碳原子数目的直链、支链或者环状构型的烷氧基。例如，C1-6烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基和异丙氧基等等。
术语“环烷基”是指具有所示碳原子数目的单、二或者三环结构，其任选结合有直链或者支链结构。环烷基基团的实例包括环丙基、环戊基、环庚基、金刚烷基、环十二烷基甲基、2-乙基-1-二环[4.4.0]癸基、环丁基甲基和环丙基甲基等等。
在此所述的化合物可以含有不对称中心，由此，它们可以作为对映异构体存在。当根据本发明的化合物具有两个或者更多个不对称中心时，它们另外还可以作为非对映异构体存在。本发明包括所有这些可能的为基本上纯的拆分对映异构体的立体异构体、其外消旋混合物以及非对映异构体混合物。以上式I未表明某些位置上的确定立体化学。本发明包括式I的所有立体异构体及其药学上可接受的盐。对映异构体的非对映异构体对可以通过以下方式进行分离，例如，在适宜的溶剂中进行分级结晶，和由此获得的一对对映异构体可以通过常规方法分离成单个立体异构体，例如通过使用旋光活性酸或者碱作为拆分试剂或者在手性HPLC柱上进行分离。此外，通式I化合物的任何对映异构体或者非对映异构体可以通过使用已知构型的光学纯原料或者试剂进行立体特异性合成而得到制备。
一些在此所述的化合物含有烯属双键，除非另有明确说明，是指包括E和Z几何异构体。
一些在此所述的化合物可以存在不同的氢连接点，称之为互变异构体。式I化合物以以下互变异构形式存在
单一互变异构体及其混合物都包括在式I范围内。
本发明在其范围内包括本发明化合物的前药。通常，所述前药将是可以在体内轻易转换成所需要的化合物的本发明化合物的功能性衍生物。因此，在本发明治疗方法中，术语“给药”应该包括使用具体公开的化合物或者使用可能未被具体公开但是在给药患者后体内转化成具体化合物的化合物进行的各种症状的治疗。适宜的前药衍生物的选择和制备的常规方法描述于，例如，“Design of Prodrugs”，主编H.Bundgaard，Elsevier，1985中。这些化合物的代谢产物包括通过将本发明化合物引入生物环境时所产生的活性物种。例证的本发明前药是式C化合物。
术语“治疗微粒体前列腺素E合酶-1介导的疾病或者病症”是指治疗或者预防任何通过抑制微粒体前列腺素E合酶-1(mPGES-1)酶而得到有利治疗或者预防的疾病或者病症。该术语包括缓解各种症状的疼痛、发烧和炎症，包括风湿热、与流行性感冒或者其它病毒感染相关的症状、普通感冒、腰骶部和颈疼痛、痛经、头痛、偏头痛(急性和预防性治疗)、牙痛、扭伤和劳损、肌炎、神经痛、滑膜炎、关节炎(包括类风湿性关节炎、退化性关节疾病(骨关节炎)、痛风和强直性脊柱炎)、急性、亚急性和慢性肌骨胳疼痛综合征(比如粘液囊炎、烧伤、创伤和外科及牙科处理后疼痛)以及外科疼痛的先发治疗。此外，该术语包括抑制细胞的致瘤性转化和转移性肿瘤生长，由此包括治疗癌症。该术语还包括治疗子宫内膜异位症和帕金森氏症以及治疗mPGES-1介导的增殖疾病，比如在糖尿病性视网膜病和肿瘤血管形成中可能存在的增殖疾病。术语“治疗”不仅包括治疗患者以减轻患者的疾病或者病症体征和症状，而且包括预防性治疗无症状患者，从而预防疾病或者病症的发作或者进行。
术语“治疗有效量”是指能够引起组织、系统、动物或者人类的生物反应或者医学响应的药物或者药剂的量，该量由研究人员、兽医、医疗医生或者其他临床医生进行探索。该术语还包括预防或者降低组织、系统、动物或者人类中发生生物学或者医学事故风险的药物量，所述事故研究人员、兽医、医疗医生或者其他临床医生设法进行预防或降低。用于本发明中的式I化合物的适宜剂量水平如下所述。所述化合物可以以每天一次或者两次的方案进行给药。
本发明药学组合物包含作为活性成分的式I化合物或者其药学上可接受的盐，并且还可以含有药学上可接受的载体以及任选含有其它治疗学成分。术语“药学上可接受的盐”包括由形成无毒的药学上可接受的盐的碱制备的盐，所述碱包括无机碱和有机碱。由无机碱衍生得到的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、三价铁盐、二价铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐和锌盐等等。特别优选铵、钙、镁、钾和钠盐。由药学上可接受的有机无毒碱衍生得到的盐包括伯胺盐、仲胺盐、叔胺盐、取代胺盐(包括天然存在的取代胺盐)、环胺盐和碱性离子交换树脂盐，比如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖胺、组氨酸、哈胺、异丙胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤类、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺和氨基丁三醇等等的盐。
当本发明化合物为碱性化合物时，所述盐可以由形成药学上可接受的盐的酸进行制备，所述酸包括无机或者有机酸。所述酸包括乙酸、己二酸、天冬氨酸、1，5-萘二磺酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、1，2-乙二磺酸、乙磺酸、乙二胺四乙酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、氢碘酸、氢溴酸、氢氯酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、2-萘磺酸、硝酸、草酸、扑酸、泛酸、磷酸、特戊酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸、十一烷酸和10-十一碳烯酸等等。
通过本发明化合物的mPGES-1抑制活性，式I化合物可以用于缓解各种病症的疼痛、发烧和炎症，包括风湿热、与流行性感冒或者其它病毒感染相关的症状、普通感冒、腰骶部和颈口疼痛、痛经、头痛、偏头痛(急性和预防性治疗)、牙痛、扭伤和劳损、肌炎、神经痛、滑膜炎、关节炎(包括类风湿性关节炎、青少年类风湿性关节炎、退化性关节疾病(骨关节炎)、急性痛风和强直性脊柱炎)、急性、亚急性和慢性肌骨胳疼痛综合征(比如粘液囊炎、烧伤、创伤和外科与牙科处理后疼痛)以及外科疼痛的先行处理。此外，所述化合物可以抑制细胞的致瘤性转化和转移性肿瘤生长，由此可以用于治疗癌症。式I化合物还可以用于治疗或者预防子宫内膜异位症、血友病性关节病和帕金森氏症。
式I化合物还可以通过预防收缩性前列腺素类的合成而抑制前列腺素类-诱发的平滑肌收缩，由此可以用于痛经、早产和哮喘的治疗中。
通过它们对mPGES-1酶的选择性抑制作用，式I化合物被证实可以作为常规非甾族抗炎药物(NSAID′S)的替代药物，特别是其中所述非甾族抗炎药物可能被禁忌的情形中，比如患有消化性溃疡、胃炎、区域肠炎、溃疡性结肠炎、憩室炎或者具有胃肠道损害再发性历史的患者；GI失血、凝血疾病(包括贫血(比如低凝血酶原血)、血友病或者其它失血疾病(包括那些与降低或者削弱的血小板功能相关的疾病))的患者；肾病(例如受损害的肾功能)患者；手术或者服用抗凝血剂之前的患者；和那些对NSAID诱发的哮喘敏感的患者。
类似地，式I化合物将可以用作制剂中常规NSAIDs的部分或者完全替代品，其中在所述制剂中常规NSAIDs当前与其它试剂或者成分一起给药。由此，在另一方面，本发明包括用于治疗如上所定义的mPGES-1介导的疾病的药学组合物，其中包含无毒的治疗有效量的如上所定义的式I化合物和一种或者多种成分比如其它止痛药，包括醋氨酚或者非那西汀；阿片样物质镇痛药，比如可待因、芬太尼、氢化吗啡酮、左吗南、派替啶、美沙酮、吗啡、氧可酮、脱氢吗啡、右丙氧芬、丁丙诺啡、布托啡诺、地佐辛、纳布啡和戊唑星；增效剂，包括咖啡因；H2-拮抗剂；氢氧化铝或者氢氧化镁；二甲基硅酮；减充血剂，包括苯肾上腺素、苯丙醇胺、伪麻黄碱、羟甲唑啉、肾上腺素、萘唑啉、丁苄唑啉、六氢脱氧麻黄碱或者左旋脱氧麻黄碱；止咳药，包括可待因、氢可酮、卡腊米芬、维静宁或者右美沙芬；利尿剂；镇定或者非镇定抗组胺剂；和质子泵抑制剂，比如奥美拉唑；缓激肽-1拮抗剂；VR1受体拮抗剂；和钠通道阻滞剂(NAV1)。为了治疗或者预防偏头痛，本发明还包括共同给药5-HT激动剂，比如利扎曲坦、舒马普坦、佐米曲坦和那拉曲坦，或CGRP拮抗剂。此外，本发明还包括治疗mPGES-1介导的疾病的方法，该方法包含给药需要所述治疗的患者无毒治疗有效量的式I化合物，任选共同给药一种或者多种就在上面列举的这些成分。
如上所指出，用于治疗如上所定义的mPGES-1介导的疾病的药学组合物可以任选包括一种或者多种如上所列举的成分。
在另一方面，本发明包括共同给药质子泵抑制剂和式I的化合物。在本发明的这方面中可采用的质子泵抑制剂包括奥美拉唑、南索拉唑、雷贝拉唑、泮托拉唑和艾美拉唑，或任一上述的药学上可接受的盐。这些质子泵抑制剂是可商购的，例如奥美拉唑(PRILOSEC，AstraZeneca)，南索拉唑(PREVACID，TAP Pharmaceuticals)，雷贝拉唑(ACIPHEX，Janssen Pharmaceutica)，泮托拉唑(PROTONIX，Wyeth-Ayerst)，和艾美拉唑(NEXIUM，AstraZeneca)。所述质子泵抑制剂可以以常规剂量给药。例如奥美拉唑或奥美拉唑镁可以以10mg，20mg或40mg的剂量给药。南索拉唑的给药剂量可以是15mg或30mg。雷贝拉唑钠的给药剂量可以是20mg。泮托拉唑的给药剂量可以是20mg或40mg。艾美拉唑的给药剂量可以是20mg或40mg。式I化合物和质子泵抑制剂可以以单一药学剂型或作为两个分开的剂型由患者基本在同一时间伴随给药。或者，式I化合物和质子泵抑制剂可以在分别错开的时间顺序给药，只要两种药剂的药学作用被患者在同一时间实现。
含有活性成分的药学组合物可以是适用于口服应用的形式，例如，为片剂、药片、锭剂、水或者油混悬剂、可分散性粉剂或者粒剂、乳剂、硬或者软胶囊、或者糖浆剂或者酏剂。设计用于口服应用的组合物可以根据本领域制造药学组合物的任何已知方法进行制备，并且为了提供药学上精美和可口的制剂，所述组合物可以含有一种或者多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的试剂。片剂含有与适于制造片剂的无毒药学上可接受的赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可以为，例如惰性稀释剂，比如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或者磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或者藻酸；粘合剂，例如淀粉、凝胶或者阿拉伯胶；和润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或者滑石。所述片剂可以无包衣或者它们可以通过已知的工艺进行包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供较长时间的持续作用。例如，可以使用延时物质，比如单硬脂酸甘油酯或者二硬脂酸甘油酯。它们还可以通过U.S.专利4,256,108、4,166,452和4,265,874中所述的工艺进行包衣，从而形成用于控释的渗透治疗学片剂。
用于口服应用的制剂还可以作为硬明胶胶囊存在，其中将活性成分与惰性固体稀释剂(例如碳酸钙、磷酸钙或者高岭土)进行混合，或者作为软明胶胶囊存在，其中将活性成分与水或者油类介质(例如花生油、液体石蜡或者橄榄油)进行混合。本发明的示例性制剂是干填充的胶囊，含有50/50微晶纤维素和乳糖的共混物和1mg、10mg或100mg的式I化合物。
含水混悬剂含有与适用于制造含水混悬剂的赋形剂混合的活性物质。所述赋形剂为助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或者润湿剂可以是天然存在的磷脂(例如卵磷脂)，或者氧化烯与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、或者氧化乙烯与长链脂族醇的缩合产物(例如十七碳亚乙基氧基鲸蜡醇)、或者氧化乙烯与由脂肪酸和己糖醇衍生得到的偏酯的缩合产物(比如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯)、或者氧化乙烯与由脂肪酸和己糖醇酸酐衍生得到的偏酯的缩合产物(例如聚乙烯去水山梨糖醇单油酸酯)。所述水混悬剂还可以含有一种或者多种防腐剂，比如对羟基苯甲酸乙酯或者对羟基苯甲酸酯正丙酯；一种或者多种着色剂；一种或者多种矫味剂；和一种或者多种甜味剂，比如蔗糖、糖精或者阿斯巴特。
液体制剂包括使用自乳化药物递送系统和

工艺。还可以使用环糊精包合配合物。
油混悬剂可以通过将活性成分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或者椰子油)或者悬浮在矿物油(比如液体石蜡)中得到制备。所述油混悬剂可以含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或者鲸蜡醇。可以将比如如上所列举的甜味剂和矫味剂加入其中，从而提供可口的口服制剂。这些组合物可以通过加入抗氧化剂(比如抗坏血酸)进行保存。
适用于通过加入水制备含水悬浮液的可分散性粉剂和粒剂提供与分散剂或者润湿剂、助悬剂和一种或者多种防腐剂混合的活性成分。适宜的分散剂或者润湿剂和助悬剂的例证已经如上所述。还可以存在其它赋形剂，比如甜味剂、矫味剂和着色剂。
本发明的药学组合物还可以为水包油乳化剂的形式。所述油相可以为植物油(比如橄榄油或者花生油)、或矿物油(比如液体石蜡)或者它们的混合物。适宜的乳化剂可以是天然存在的磷脂，比如大豆卵磷脂；由脂肪酸和己糖醇酸酐衍生得到的酯或者偏酯，例如去水山梨糖醇单油酸酯；和所述偏酯与氧化乙烯的缩合产物，例如聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。所述乳剂还可以含有甜味剂和矫味剂。
糖浆剂和酏剂可以用甜味剂(比如甘油、丙二醇、山梨醇或者蔗糖)进行配制。所述制剂还可以含有缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂。本发明的药学组合物可以为无菌可注射含水混悬剂或者油质混悬剂的形式。所述混悬剂可以利用上述的适宜分散剂或者润湿剂和助悬剂根据本领域已知的方法进行配制。所述无菌可注射的制剂还可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或者溶剂中的无菌可注射溶液或者悬浮液，例如为1，3-丁二醇溶液。在可接受的溶媒和溶剂中，可以使用的为水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，通常将无菌、固定油类用作溶剂或者悬浮介质。为此目的，任何无味的固定油都可以使用，包括合成单或者二甘油酯。此外，在可注射制剂中可以应用比如油酸的脂肪酸。
式I化合物还可以以栓剂形式进行给药，用于直肠给药所述药物。这些组合物可以通过将药物与在常温下为固体但是在直肠温度下为液体并且由此将在直肠中熔化从而释放药物的适宜无刺激性赋形剂混合得到制备。所述物质为可可脂和聚乙二醇。
对于外部应用，可以使用含有式I化合物的乳膏剂、膏剂、胶状物、液剂或者混悬剂等等。(基于该应用的目的，外部应用应当包含漱口剂和含漱剂。) 本发明的药学组合物还可以应用吸收增强剂，比如吐温80、吐温20、维生素E TPGS(d-α-生育酚基聚乙二醇1000琥珀酸酯)和

。
在上述症状的治疗中，使用的剂量水平的数量级为约0.01mg～约140mg/kg体重/天，或者为约0.5mg～约7g/患者/天。例如，通过给药约0.01～50mg化合物/Kg体重/天，或者约0.5mg～约3.5g/患者/天，优选2.5mg～1g/患者/天，炎症可以得到有效治疗。
取决于进行治疗的宿主和具体的给药模式，可以与载体物质结合从而形成单一剂型的活性成分的量将会不同。例如，用于人类口服的制剂可以含有0.5mg～5g活性剂，其混合适当和适宜量的载体物质，载体物质的量可以占总组合物的约5～约95％的量之间变化。通常，剂量单元形式含有约1mg～约500mg活性成分，一般为25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg或者1000mg。还可以使用的剂量的量为4mg、8mg、18mg、20mg、36mg、40mg、80mg、160mg、320mg和640mg。还可包括含有1、10或100mg的剂量单元形式。
然而，应当理解，对于任何具体患者的具体剂量水平将取决于各种因素，包括年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物联用和进行治疗的具体疾病的严重程度。
下列化合物举例说明了本发明。这些化合物的合成是遵循下述方案和实施例。














合成方法 本发明的式I化合物可以根据以下方案1和4中表明的合成路线和通过其中所述的方法进行制备。式I的咪唑可以由所需的菲醌i通过多步顺序进行制备。通过在比如乙酸的溶剂中，用比如NH4OAc或者NH4HCO3的试剂处理菲醌i和适当取代的醛ii，菲咪唑iii可以得到制备。在比如DMF或者DMSO的溶剂中，用CuCN处理咪唑iii产生单或者二-腈(M＝CCN)Ia。随后可以在R1～R8的任何位置上进行官能团互变。例如，如果R1～R8取代基中的一个或者多个等于Cl、Br或者I并且如果M不同于CBr或者CI，那么通过在促进交叉偶联反应的条件下(比如，在催化剂(比如Pd(PPh3)4和CuI)存在下，在碱(比如碳酸钠或者二异丙胺)存在下和在适宜的溶剂(比如THF、DMF或者DME)中进行加热)，在单取代炔基、锡烷、硼酸、硼烷或者硼酸酯存在下处理Ia，Ia可以转化为Ib。上述最后例证说明的步骤或者任何其它适当官能团的转化作用，可以在R1～R8上重复进行。
方案1
菲醌i可以根据方案2和3中所表明的顺序进行制备。在碱(比如氢化钠或者甲醇钠)存在下，在比如DMF的溶剂中对磷鎓盐iv(方案2)进行去质子化，随后加入醛v，从而形成为E和Z异构体混合物的stylbenevi。在氧化剂(比如碘)和除酸剂(比如环氧丙烷)存在下，在适宜的溶剂(比如环己烷)中该混合物通过暴露于UV光线进行分子内环化作用，从而形成菲vii。该菲viia可以通过在适宜的溶剂(比如乙酸)中用氧化剂(比如CrO3)进行直接氧化，形成菲醌i，或者任选，菲viia可以通过在适宜的溶剂(比如THF)中，官能团R1～R8中的任何官能团的适当互变(比如，用有机金属试剂(比如丁基锂)进行金属转移作用)，随后加入亲电试剂(比如碘或者二氧化碳)而被进一步处理成菲viib。另外地(方案3)，在比如碳酸钾的碱存在下和在乙酸酐存在下，苯乙酸viii可以与醛ix进行缩合，从而形成硝基stylbene x。然后，在氢氧化铵存在下，在适宜的溶剂(比如乙酸)中，用适当的还原剂(比如铁或者硫酸亚铁)对硝基芳基x进行还原，从而形成胺xi。在氢氧化物(比如氢氧化钠)水溶液存在下，用亚硝酸钠对上述胺xi进行重氮化作用，随后用酸(比如硫酸和氨基磺酸)对其进行酸化，和在催化剂(比如铜或者二茂铁)存在下使其进行环化，从而产生菲羧酸xii。在适宜的溶剂(比如乙酸)中，利用适当的氧化剂(比如三氧化铬)，可以对该菲进行氧化并且同时使其脱羧，从而形成菲醌i。
方案2
方案3
如方案4所示，在碱(比如氢化钠或者二异丙基乙胺)存在下，在适宜的溶剂(比如DMF或者二氯甲烷)中，用适当的保护基团(比如2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基)对卤代菲xiii进行保护，从而提供被保护的菲咪唑xiv。然后，在催化剂(比如Pd(OAc)2)存在下，和在碱(比如三乙胺)存在下，在醇溶剂的混合物(比如甲醇和DMF)中或者任何其它适宜的有机溶剂中，用一氧化碳对上述菲咪唑xiv进行羰基化。在有机溶剂(比如，醚、THF或者二氯甲烷(格氏试剂))中，用亲核试剂(比如有机锂、有机铈或者格氏试剂)对上述所得的酯xv进行处理，从而得到叔醇xvi。除去咪唑保护基，例如通过用无机酸(例如盐酸)处理xvi，或者在氟离子源(比如TBAF)存在下，在比如THF的有机溶剂中进行，从而得到未受保护的咪唑xvii。在比如DMF或者DMSO的溶剂中，用CuCN处理上述菲咪唑xvii，形成单或者二-腈(M＝CCN)Id。随后可以在R1～R8的任何位置上进行官能团互变。例如，如果R1～R8取代基中的一个或者多个等于Cl、Br或者I并且如果M不同于CBr或者CI，那么通过在促进交叉偶联反应的条件下(比如，在催化剂(比如Pd(PPh3)4和CuI)存在下，在碱(比如碳酸钠或者二异丙胺)存在下和在适宜的溶剂(比如THF、DMF或者DME)中进行加热)，在单取代炔基、锡烷、硼酸、硼烷或者硼酸酯存在下处理Id，Id可以转化为Ie。上述最后例证说明的步骤或者任何其它适当官能团的转化作用，可以在R1～R8上重复进行。
方案4
咪唑仲胺可以如方案5所述进行取代，通过在比如氢化钠的碱存在下，在适宜的溶剂(比如DMF)中，用比如酰基化试剂或者烷基化试剂(比如碘代甲烷)的试剂对适当官能化的菲咪唑I进行处理而得到取代。
方案5
实施例 本发明通过以下非限制性实施例进行例证说明 实施例14 2-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]-3-氟苄腈
步骤16，9-二溴-2-(2-氯-6-氟苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 向30g(82mmol)3，6-二溴菲-9，10-二酮(Bhatt，Tetrahedron，1963，20，803)的1.0L乙酸溶液中加入25.9g(328mmol)NH4HCO3，随后向其中加入26g(164mmol)2-氟-6-氯苯甲醛。在130℃下将上述溶液搅拌过夜，然后将其冷却至室温并且倾倒入2.5L水中。对所得混合物进行过滤、用水洗涤和随后用己烷与乙醚洗涤。在1.0L甲苯中用Dean-stark装置对所得固体进行回流，在3小时时间内除去大约100mL水。通过冷却至室温，米黄色固体从溶液中结晶出来。对该固体进行过滤、用甲苯洗涤并且在减压下对其进行抽吸，从而得到32g(80％)6，9-二溴-2-(2-氯-6-氟苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。
步骤22-(6-溴-9-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)-3-氟苄腈 向得自于步骤1的3.0g6，9-二溴-2-(2-氯-6-氟苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑的DMF(10mL)溶液中加入587mg CuCN，并且在130℃下将所得溶液搅拌过夜。将上述溶液冷却至室温，随后向其中加入氢氧化铵水溶液和乙酸乙酯。对各层进行分离，所得有机层用盐水洗涤、用硫酸钠干燥并且在减压下将挥发物除去。通过在硅胶上使用30％～50％乙酸乙酯/己烷的梯度的快速色谱法对所得残余物进行纯化，从而得到500mg2-(6-溴-9-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)-3-氟苄腈。
步骤32-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]-3-氟苄腈 向得自于步骤2的2-(6-溴-9-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)-3-氟苄腈(320mg)的DMF(2mL)溶液中加入5mL三乙胺、0.1mL2-甲基-3-丁炔-2-醇、20mg CuI和82mg Pd(PPh3)4。在80℃下将上述所得混合物搅拌过夜，然后将其冷却至室温并且用乙酸乙酯/水对其进行稀释。所得有机层用盐水洗涤、用硫酸钠干燥并且在减压下将挥发物除去。通过在硅胶上使用30％～50％乙酸乙酯/己烷梯度的快速色谱法对所得残余物进行纯化，从而得到85mg 2-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]-3-氟苄腈。1H NMR(丙酮-d6)δ 8.89(s，2H)，8.71(bs，1H)，8.51(bs，1H)，7.93(d，1H)，8.88-8.72(m，4H)，4.55(s，1H)，1.65(s，6H). 实施例25 2-(6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰
步骤11-(3-菲基)乙酮肟 在200mL绝对乙醇中，合并50g(0.23mol)1-(3-菲基)乙酮和40g盐酸羟胺的混合物。将上述溶液加热至回流，随后向其中加入70mL吡啶。3小时之后，将上述反应冷却至室温并且对所得溶液进行蒸发。将冰/水混合物加入到上述所得残余物中并且将所得混合物搅拌1小时。对所得灰白色固体进行过滤、用水洗涤并且将其风干，在乙醚中进行重结晶之后，得到32g1-(3-菲基)乙酮肟。
步骤23-菲胺 在30分钟时间内，向100℃的385g多磷酸中加入32g(0.14mol)得自于步骤1的1-(3-菲基)乙酮肟。在100℃下将上述混合物搅拌2小时，将其冷却至室温，随后向其中加入水/冰。将其搅拌30分钟、过滤并且用水洗涤。然后，将所得白色固体置入500mL甲醇和40mL浓HCl中。将上述反应回流过夜、冷却至室温并且对其进行浓缩。将乙酸乙酯/水混合物加入到所得残余物中，并且用10N KOH将所得溶液变成碱性。用乙酸乙酯对所得水层进行提取，合并的有机层用水和盐水洗涤、用硫酸钠干燥并且在减压下除去挥发物，从而得到25g为米黄色固体的3-菲胺。
步骤33-氯菲 在高真空下在115℃下将CuCl2(21g)干燥90分钟，然后将其冷却至65℃，随后向其中加入250mL无水乙腈和26g亚硝酸叔丁酯。在30分钟时间内，将得自于步骤2的3-菲胺(25g)的100mL乙腈溶液加入其中。在65℃下将上述反应搅拌45分钟，将其冷却至室温，随后向其中加入1L 1N HCl。用二氯甲烷对所得水层进行提取，合并的有机层用水和盐水洗涤、用硫酸钠干燥并且在减压下除去挥发物。通过在硅胶上使用己烷作为洗脱液的快速色谱法对所得残余物进行纯化，从而得到白色固体，在己烷中对其进行重结晶之后，得到14.4g为白色固体的3-氯菲。
步骤43-氯菲-9，10-二酮 向12.5g(58.7mmol)得自于步骤3的3-氯菲的350mL乙酸溶液中加入23.5g(0.23mol)CrO3。在100℃下将上述反应搅拌2小时，然后将其冷却至室温并且倾倒入2L水中。将所得悬浮液搅拌1小时，对其进行过滤并且用水洗涤。在高真空下对所得残余物进行干燥，从而得到12.5g(88％)3-氯菲-9，10-二酮。
步骤56-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 该咪唑按照实施例14步骤1所述的方法进行制备，但是用3-氯菲-9，10-二酮替换3，6-二溴菲-9，10-二酮和用2，6-二溴苯甲醛替换2-氟-6-氯苯甲醛，从而得到27g为灰白色固体的6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。
步骤62-(6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 向32g(65.7mmol)得自于步骤5的6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑的DMF(300mL)溶液中加入14.7g CuCN。在80℃下将上述反应搅拌过夜，然后将其冷却至室温，倾倒入1.5L水、1.5L乙酸乙酯和200mL浓氢氧化铵的混合物中，并且在室温下将其搅拌1小时。用乙酸乙酯对所得水层进行提取，合并的有机层用10％氢氧化铵、水和盐水洗涤、用硫酸钠干燥并且在减压下除去挥发物。在甲苯(2×200mL)和乙酸乙酯(1L)中对所得残余物进行冲刷。通过在硅胶上以5份使用60％～80％～100％的乙酸乙酯/己烷梯度的快速色谱法对所得固体进行纯化，从而得到19.9g为浅黄色固体的2-(6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。1H NMR(400MHz，DMSO)δ14.32(s，1H)，9.0-8.9(m，2H)，8.55-8.45(m，4H)，7.99(t，1H)，7.85-7.78(m，2H)，7.72(t，1H). 实施例36 2-(6-溴-9-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰
步骤11-溴-4-[2-(4-氯苯基)乙烯基]苯 向0℃的溴化(4-溴苄基)三苯基鏻(396g；0.77mol)的2.5L DMF溶液中，分四份加入37g(0.92mol)NaH(在油中为60％)。在0℃下将上述溶液搅拌1小时，随后向分两份向其中加入109g(0.77mol)4-氯苯甲醛。将上述混合物升温至室温，搅拌1小时，通过将反应倾倒入5℃的10L水和2.5L Et2O的混合物中将反应猝灭。所得水层用Et2O进行提取，用盐水对合并的有机层进行洗涤并且用Na2SO4对其进行干燥。在减压下将挥发物除去，并且将所得残余物溶于1.5L环己烷中和将其滤过硅胶垫片(用环己烷洗涤)。16g为白色固体的一种异构体从溶液中结晶出来，在将挥发物蒸发之后，166g另一种异构体1-溴-4-[2-(4-氯苯基)乙烯基]苯得到分离。
步骤23-溴-6-氯菲 向装配有硼硅酸耐热玻璃内部水冷套层的2L容器中加入5.16g(17mmol)得自于步骤1的1-溴-4-[2-(4-氯苯基)乙烯基]苯、2L环己烷、25mL THF、25mL环氧丙烷和6.7g(26mmol)碘。通过鼓泡氮气对上述搅拌的溶液进行脱气，并且通过将450W中压汞灯插入其内部将其暴露于UV光线下24小时。用10％ Na2S2O3将上述反应猝灭并且用乙酸乙酯对所得水层进行提取。合并的有机层用盐水洗涤、用Na2SO4干燥并且在减压下将挥发物除去。在最少量的乙酸乙酯中对所得残余物进行冲刷，从而得到大约5g为固体的3-溴-6-氯菲。
步骤33-溴-6-氯菲-9，10-二酮 向得自于步骤2的3-溴-6-氯菲(1.71g；5.86mmol)的35mL乙酸溶液中加入2.3g(23.5mmol)CrO3。在100℃下将上述混合物搅拌2小时，然后将其冷却至室温，倾倒入300mL水中并且将其搅拌1小时。对所得悬浮液进行过滤、用水和Et2O洗涤并且在减压下对其进行抽吸，从而得到1.67g为固体的3-溴-6-氯菲-9，10-二酮。
步骤49-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 向15.5g得自于步骤3的3-溴-6-氯菲-9，10-二酮的400mL乙酸溶液中加入74.2g乙酸铵和19.1g2，6-二溴苯甲醛。在120℃下将上述混合物搅拌过夜，然后将其冷却至室温，稀释在4L水中并且对其进行过滤。使用Dean Stark装置，在甲苯中将所得固体回流2小时。冷却至室温之后，对悬浮液进行过滤，用甲苯对所得固体进行洗涤并且在高真空下对所得米黄色固体进行干燥，从而得到26g9-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。
步骤52-(9-溴-6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 向26g得自于步骤4的9-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑的200mL无水DMF溶液中加入14.2g CuCN。在85℃下将上述反应搅拌过夜，然后将其冷却至室温，将盐水加入其中并且将所得混合物搅拌30分钟。在乙酸乙酯中对上述溶液进行稀释，用10％氢氧化铵洗涤、用盐水洗涤、用硫酸钠干燥并且在减压下将挥发物除去，从而得到26g为固体的2-(9-溴-6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。1H NMR(丙酮-d6)9.19(s，1H)，9.02(s，1H)，9.71(bs，1H)，8.49(bs，1H)，8.39(d，2H)，8.07(t，1H)，7.97(d，1H)，8.81(d，1H). 实施例40 2-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤1(2E)-2-(4-溴苯基)-3-(4-氯-2-硝基苯基)丙烯酸 向装配有机械搅拌器的2L烧瓶中加入183g2-硝基-4-氯苯甲醛、212g4-溴苯乙酸和233mL乙酸酐。向上述溶液中加入82g碳酸钾，并且在100℃下将上述反应搅拌过夜。将所得深色混合物冷却至室温，将1.6L水加入其中，随后将800mL 10％ HCl加入其中。将溶液倾析和吸收在水/乙酸乙酯中。对各层进行分离，所得有机相用盐水洗涤、用硫酸镁干燥并且在减压下将挥发物除去。在EtOH中对所得残余物进行研制，并且用EtOH将母液再研制4次，从而得到219g期望的(2E)-2-(4-溴苯基)-3-(4-氯-2-硝基苯基)丙烯酸。
步骤2(2E)-3-(2-氨基-4-氯苯基)-2-(4-溴苯基)丙烯酸 向50℃的135g得自于步骤1的(2E)-2-(4-溴苯基)-3-(4-氯-2-硝基苯基)丙烯酸的1.2L乙酸和80mL水溶液中分份加入98g铁(粉末)，保持温度低于50℃。在50℃下将上述混合物搅拌2小时，将其冷却至室温，用乙酸乙酯(1L)进行稀释并且将其滤过硅藻土塞。将水(1L)加入其中，将各层分离，用水、盐水将所得有机层洗涤两次、用硫酸镁进行干燥和在减压下将挥发物除去。通过将1L H2O加入到上述粗混合物中将剩余的乙酸除去，对溶液进行过滤并且另外用1L H2O对其进行洗涤，最后在高真空下对所得固体进行干燥，从而得到130g(2E)-3-(2-氨基-4-氯苯基)-2-(4-溴苯基)丙烯酸。
步骤33-溴-6-氯菲-9，10-二酮 该醌可以按照实施例36步骤1～3所述的方法获得，或者可以通过使用以下方法获得向0℃的118mL浓硫酸的1.0L水溶液中滴加加入如下进行制备的溶液65g得自于步骤2的(2E)-3-(2-氨基-4-氯苯基)-2-(4-溴苯基)丙烯酸的1L水溶液中，随后向其中加入11gNaOH，在0℃下将其搅拌10分钟，加入NaNO2(15g)并且在0℃下将所得溶液搅拌20分钟。30分钟之后，将氨基磺酸(12.5g)加入到上述混合物中，在气体释放停止之后，将1.3L丙酮加入其中并且在0℃下将所得溶液搅拌10分钟。然后，将上述混合物加入到二茂铁(6.9g)的480mL丙酮溶液中，从而形成绿色沉淀。搅拌20分钟之后，将水(2.0L)加入其中，对固体进行过滤，由此获得6-溴-3-氯菲-9-甲酸，将其风干。将上述所得粗菲置于2.0L乙酸中，随后向其中加入54gCrO3。将该反应放置在110℃下并且将其搅拌1小时之后，将18g CrO3加入其中。通过TLC对上述反应进行监控，每小时加入18g CrO3，保持3小时，此时通过1H NMR观察到100％转化。将所得混合物冷却至室温、稀释在水(2.0L)中、对其进行过滤并且用水(1.0L)对其进行洗涤，在干燥之后，得到37g为黄色固体的3-溴-6-氯菲-9，10-二酮。
步骤49-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑该咪唑按照实施例36步骤4所述的方法获得。
步骤52-(9-溴-6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰该咪唑按照实施例36步骤5所述的方法获得。
步骤62-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 向13g2-(9-溴-6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰的240mL DMF溶液中加入5.5mL2-甲基-3-丁炔-2-醇、2.0g四(三苯基膦)钯、1.1g碘化亚铜和5.6mL二异丙胺。在55℃下将上述混合物搅拌1小时，然后将其冷却至室温并且用乙酸乙酯(250mL)对其进行稀释。将水(250mL)加入其中，将各层分离，所得有机相用盐水洗涤、用硫酸镁进行干燥并且在减压下将挥发物除去。然后，在使用50％己烷/乙酸乙酯的硅胶上对上述粗混合物进行纯化。然后，在THF对产品进行重结晶，并且在热乙酸乙酯/醚混合物中对其进行研制，从而得到5.4g为淡黄色固体的[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰。1H NMR(丙酮-d6)8.93(s，2H)，8.53(m，2H)，8.36(d，2H)，8.01(t，1H)，7.78(d，2H)，4.53(s，1H)，1.61(s，6H). 实施例60 2-(1-{[二羟基(二氧代(oxido))膦基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰
步骤12-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 该咪唑按照实施例36步骤4中所述的方法获得，但是用菲-9，10-二酮替换3-溴-6-氯菲-9，10-二酮，从而得到2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 步骤22-(1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 该化合物通过使用实施例36步骤5中所述的方法进行制备，但是用2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑替换9-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑，从而得到期望的2-(1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。
步骤32-[1-(氯甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 在氯碘甲烷(10mL)中，将得自于步骤2的2-(1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(1g，2.91mmol)与碳酸铯(1.14g，3.49mmol)混合。在80℃下将上述混合物加热过夜。将上述反应冷却至室温，并且将其倾倒入200mL水和500mL乙酸乙酯中。将各层分离，所得有机层用200mL水洗涤、用200mL饱和碳酸氢钠水溶液洗涤、用100mL盐水洗涤并且用无水硫酸镁进行干燥。在减压下将溶剂除去。通过使用40％乙酸乙酯的己烷溶液的快速柱色谱法对所得粗固体进行纯化，从而得到357mg2-[1-(氯甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(31％)加上650mg产品和原料混合物。
步骤42-(1-{[二羟基(二氧代)膦基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 在DMF(5mL)中，将得自于步骤3的2-[1-(氯甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(200mg，0.509mmol)与二(叔丁基)磷酸四甲铵(288mg，1.02mmol)混合，并且在50℃下将其加热8小时。将其冷却至室温，并且将其倾倒入15mL水和35mL乙酸乙酯中。将各层分离，所得有机层用10mL水洗涤(两次)、用10mL饱和碳酸氢钠水溶液洗涤、用盐水洗涤并且用无水硫酸镁进行干燥。在减压下将溶剂除去。通过使用50-70％乙酸乙酯的己烷溶液的快速柱色谱法对所得粗固体进行纯化，从而得到221mg被保护的磷酸盐(77％)。将155mg上述固体溶于10％ TFA/甲苯(3mL)中并且在室温下将其搅拌过夜。在减压下将溶剂除去。通过使用C18柱和用8分钟梯度44-49％乙腈+0.2％ TFA洗脱的半制备RP-HPLC对所得粗产品进行纯化。将含有产品的级分合并并且对其进行冻干，从而得到80mg期望的2-(1-{[二羟基(二氧代)膦基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。
1H NMR(DMSO)9.05(d，1H)，8.95(d，1H)，8.54-8.61(m，2H)，8.47(d，2H)，8.06(t，1H)，8.70-8.85(m，4H)，6.21(d，2H). 实施例87 2-[6-溴-9-(1-羟基-1-甲基乙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤16，9-二溴-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 将二溴苯醌(38.6g，0.1mol)、乙酸铵(165g，2.1mol)和二溴苯甲醛(45g，0.1mol)的乙酸(1.5L)悬浮液加热回流16小时。通过将其倾倒入水(2.2L)中将上述反应混合物猝灭，随后将其搅拌2小时。对所得固体进行过滤并且先后用水和己烷对其进行清洗。然后，用Dean Stark装置在甲苯(600mL)中将所得固体加热回流4小时并且对其进行过滤，从而得到期望的米色粉末6，9-二溴-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑(62.3g，97％)。
步骤26，9-二溴-2-(2，6-二溴苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑 向0℃的得自于步骤1的6，9-二溴-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑(61.8g，0.1mol)的THF(980mL)悬浮液中加入氢化钠(在矿物油中为60％分散体，10g，0.25mol)。在0℃下将上述悬浮液搅拌15分钟，随后将SEMCl(45mL，0.25mol)加入其中。将上述混合物升温至室温并且将其搅拌3小时，在此之后将其倾倒入水中。用乙酸乙酯对水相进行提取，所得有机层用盐水洗涤一次、用Na2SO4进行干燥、进行过滤和浓缩。在己烷/乙醚中将所得粗物质冲刷4小时，然后对其进行过滤，从而得到为米色粉末的6，9-二溴-2-(2，6-二溴苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑(71.5g，95％)。
步骤36-溴-2-(2，6-二溴苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-9-甲酸甲酯 在三颈1L圆底烧瓶中的得自于步骤2的6，9-二溴-2-(2，6-二溴苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑(22.8g，30.8mmol)的DMF(150mL)和MeOH(150mL)溶液中加入Pd(OAc)2(350mg，1.5mmol)和dppf(1.7g，3.0mmol)。将上述混合物脱气三次和用一氧化碳进行回充。然后，将三乙胺(9.5mL，43mmol)加入其中，在一氧化碳气氛下，在60℃下将所得反应混合物加热1小时。通过倾倒入水和乙酸乙酯中将上述反应猝灭。然后，将其滤过硅藻土，所得水相用乙酸乙酯进行提取，所得有机层用盐水洗涤一次、用Na2SO4进行干燥、进行过滤并且进行浓缩。通过在二氧化硅(0-5％乙酸乙酯的甲苯溶液)上进行快速色谱法对所得粗物质进行纯化，从而得到为米色固体的期望的6-溴-2-(2，6-二溴苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-9-甲酸甲酯的异构体(9.8g，44％)。
步骤42-[6-溴-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-9-基]丙-2-醇 经加料漏斗，向-78℃的得自于步骤3的异构6-溴-2-(2，6-二溴苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-9-甲酸甲酯(9.9g，13.8mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中加入溴化甲基镁(3.0M的Et2O溶液，33mL)。然后将上述混合物温热至-40℃，在此温度下将其搅拌0.5小时，然后将其温热至-30～-35℃并且在此温度下将其搅拌2小时。然后将上述反应混合物温热至-25℃，搅拌3小时，然后在0℃下将其搅拌1.5小时。通过倾倒入水和乙酸乙酯中将上述反应猝灭。用乙酸乙酯对所得水相进行提取，所得有机层用盐水洗涤一次、用Na2SO4进行干燥、进行过滤和浓缩。将所得粗产品溶于THF(150mL)中并且将其冷却至0℃。然后，将TBAF(1.0M的THF溶液，35mL)加入其中并且将上述混合物加热回流17小时，然后用25％ NH4OAc将其猝灭，所得水相用乙酸乙酯进行提取，所得有机层用盐水洗涤一次、用Na2SO4进行干燥、进行过滤和浓缩。通过在硅胶上(5-30％ THF的甲苯溶液)进行快速色谱法纯化之后，将获得的物质在甲苯中冲刷5小时，然后对其进行过滤，从而得到为白色粉末的2-[6-溴-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-9-基]丙-2-醇(4.53g，56％，2步骤)。
步骤52-[6-溴-9-(1-羟基-1-甲基乙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 将氰化铜(420mg，4.7mmol)加入到得自于步骤4的2-[6-溴-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-9-基]丙-2-醇(1.25g，2.1mmol)的DMF(100mL)室温溶液中，并且在80℃下将上述混合物加热18小时，此后将其倾倒入NH4OH和乙酸乙酯混合物中并且将其搅拌1小时。用乙酸乙酯对所得水相进行提取，所得有机层用水洗涤一次、用盐水洗涤一次、用Na2SO4进行干燥、进行过滤和浓缩。在硅胶上(20-80％乙酸乙酯的甲苯溶液)进行快速色谱法纯化之后，将上述获得的物质在乙酸乙酯和THF中冲刷2小时，然后将其过滤，从而得到为黄色固体的2-[6-溴-9-(1-羟基-1-甲基乙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(250mg，25％)。
1H NMR δ(ppm)(DMSO，加有TFA)9.08(1H，s)，8.90(1H，s)，8.45-8.39(4H，m)，7.99-7.91(3H，m)，1.61(6H，s). 实施例88 2-[6-(环丙基乙炔基)-9-(1-羟基-1-甲基乙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤12-[6-(环丙基乙炔基)-9-(1-羟基-1-甲基乙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 用氮气将含有得自于实施例87的2-[6-溴-9-(1-羟基-1-甲基乙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(1.26g，2.62mmol)、Pd(PPh3)4(190mg，0.27mmol)和碘化亚铜(100mg，0.52mmol)的圆底烧瓶吹扫15分钟，随后向其中加入DMF(50mL)、环丙基乙炔(1.4mL，21mmol)和二异丙胺(560μL，4mmol)。在60-65℃下将上述所得混合物加热3.5小时，将其冷却至室温，然后将其倾倒入NH4OH和乙酸乙酯混合物中并且将其搅拌1小时。用乙酸乙酯对所得水相进行提取，所得有机层用水洗涤一次、用盐水洗涤一次、用Na2SO4进行干燥、进行过滤和浓缩。在硅胶上(30-100％乙酸乙酯的甲苯溶液)进行快速色谱法纯化之后，将上述获得的物质在甲苯中冲刷2小时，然后将其过滤，从而得到为黄色固体的2-[6-(环丙基乙炔基)-9-(1-羟基-1-甲基乙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(350mg)。将母液与混合的级分合并并且在二氧化硅上(3-40％乙腈的甲苯溶液)通过快速色谱法再次对其进行纯化，从而得到286mg二腈(总收率52％)。
1H NMR δ(ppm)(DMSO，加有TFA)8.92(1H，s)，8.87(1H，s)，8.43-8.39(4H，m)，7.96(1H，t)，7.90(1H，d)，7.71(1H，d)，1.60(7H，s)，0.90(2H，t)，0.84(2H，d). 实施例117 2-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤12-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 向9-BBN的THF(24ml，12mmol，0.5M)溶液中加入2-甲基-3-丁烯-2-醇(345mg，4.0mmol)，并且在室温下，在N2下将所得溶液搅拌过夜。向已经加有PdCl2(dppf)(324mg，0.40mmol)、Cs2CO3(2.4g，8.0mmol)和Ph3As(124mg，0.4mmol)的第二烧瓶中加入得自于实施例36的2-(6-溴-9-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰、DMF(24ml)和H2O(0.88ml)，并且在N2下将所得混合物搅拌5分钟。然后，将硼氢化反应混合物转入到第二烧瓶中，并且在室温下，在N2下将所得反应悬浮液搅拌5天。在用盐水处理之后，用EtOAc对水相进行提取，合并的有机溶液用水和盐水洗涤、用MgSO4进行干燥。通过过滤除去干燥剂之后，在减压下对溶液进行浓缩，并且通过硅胶色谱法(50％ EtOAc/己烷)对所得残余物进行纯化，从而得到600mg为黄色固体的2-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰。
1H NMR(400MHz，丙酮)δ 13.10(s br，1H)；8.94(s，1H)；8.77(s，1H)；8.70-8.60(m br，2H)；8.39(d，2H)；8.03(t，1H)；7.75(dd，1H)；7.69(dd，1H)；4.92(s，1H)；3.05(m，2H)；1.95(m，2H)；1.33(s，6H). 实施例123 (±)-2-[9-氯-6-(3，4-二羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤12-[6-氯-9-(3-甲基丁-3-烯-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 向得自于实施例40的2-[9-氯-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(120mg，0.26mmol)的苯(4mL)搅拌悬浮液中加入Burgess试剂(70mg，0.29mmol)，并且在N2下将其回流2小时。用EtOAc(20mL)对上述所得反应混合物进行稀释。用水和盐水对该EtOAc溶液进行洗涤并且用MgSO4对其进行干燥。在经过滤除去干燥剂之后，在减压下对该有机溶液进行干燥。通过硅胶柱色谱法(用50/50 EtOAc/己烷洗脱)对所得残余物进行纯化，从而得到90mg为黄色固体的2-[6-氯-9-(3-甲基丁-3-烯-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰。
步骤2(±)-2-[9-氯-6-(3，4-二羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 在0℃下，向搅拌的得自于步骤1的2-[6-氯-9-(3-甲基丁-3-烯-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(22mg，0.05mmol)的50/50t-BuOH/H2O(0.5mL)悬浮液中加入AD-mix-α(70mg)。在0℃下将上述混合物放置搅拌24小时。用饱和Na2S2O3水溶液对所得反应混合物进行处理，将其搅拌10分钟、用水稀释并且用EtOAc对其进行提取。用水和盐水对该EtOAc溶液进行洗涤并且用MgSO4对其进行干燥。在经过滤除去干燥剂之后，在减压下对该有机溶液进行浓缩。通过硅胶柱色谱法(用50/50 EtOAc/己烷～95/5EtOAc/甲醇洗脱)对所得残余物进行纯化，从而得到19mg黄色固体。用AD-mix-β重复上述相同工艺，从而另外得到19mg黄色固体。将上述两种黄色固体合并，从而得到外消旋2-[9-氯-6-(3，4-二羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰。
1H NMR(400MHz，丙酮)δ 8.84(d，1H)；8.80(s，1H)；8.57(d，1H)；8.47(d，1H)；8.39(d，2H)；8.03(t，1H)；7.77(dd，8.6Hz，1H)；7.71(dd，1H)；4.56(s，1H)；4.30(s，1H)；3.67(q，2H)；1.56(s，3H). 实施例135 2-[9-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤12-(6-溴-9-氯-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 向来自实施例36的2-(6-溴-9-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(5g，10.9mmol)在THF(30mL)中的溶液加入NaH(在油中60％分散体，1.31g，32.7mmol)。反应混合物在室温搅拌10分钟，此后加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(5.8mL，32.7mmol)。1小时后，通过缓慢添加水将反应猝灭。含水层用乙酸乙酯萃取，有机层用水洗涤一次，盐水洗涤一次，经无水MgSO4干燥并浓缩以提供粗2-(6-溴-9-氯-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(6.06g)。
步骤22-(9-氯-6-(2-氧代丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 向三丁基(甲氧基)锡烷(4.5mL，15.5mmol)、异丙烯基乙酸酯(1.7mL，15.5mmol)、2-(6-溴-9-氯-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(来自以上步骤1)(6.06g，10.3mmol)、乙酸钯(II)(0.232g，1.03mmol)和三-邻甲苯基膦(0.628g，2.07mmol)在甲苯(50mL)中的溶液于100℃加热过夜。用水和乙酸乙酯猝灭反应混合物。常规后处理并且在硅胶上(50％乙酸乙酯，在己烷中)的色谱法之后，分离出黄橙色固体的2-(9-氯-6-(2-氧代丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(2.8g)。
步骤32-(9-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 向在-78℃的填充了TiCl4(1M，在CH2Cl2中，20mL)的圆底烧瓶中加入甲基锂(1.6M，在乙醚中，12.5mL)。所得深红色溶液在-78℃搅拌15分钟，然后通过插管加入到0℃的2-(9-氯-6-(2-氧代丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(2.8g，5.0mmol)(来自以上步骤2)在乙醚(10mL)中的溶液。将所得混合物在0℃搅拌3h，然后用饱和氯化铵猝灭。用乙酸乙酯萃取含水层。有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶上的快速色谱法(50％乙酸乙酯，在己烷中)纯化得到2-(9-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(1.94g)， 步骤42-[9-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 2-(9-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(1.94g)(来自以上步骤3)溶解于TBAF(1M，在THF中，20mL)。混合物加热回流5h，然后用水猝灭。含水层用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶上的快速色谱法(50％乙酸乙酯，在己烷中)纯化以提供2-[9-氯-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(500mg)，为黄色固体。1H NMR δ(ppm)(400MHz，丙酮-d6)13.13(1H，bs)，8.87(1H，s)，8.77(1H，s)，8.58(1H，m)，8.43(1H，m)，8.35(2H，d，J＝7.9Hz)，7.99(1H，t，J＝7.9Hz)，7.73(2H，dd，J＝1.9，8.6Hz)，3.51(1H，bs)，3.08(2H，s)，1.26(6H，s)。
实施例160 2-[9-(环丙基甲氧基)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤11-溴-4-[2-(4-甲氧基苯基)乙烯基]苯 该苯乙烯的制备如实施例36步骤1所述，用p-茴香醛代替4-氯苯甲醛。
步骤23-溴-6-甲氧基菲 该菲的制备如实施例36步骤2所述，用来自上述步骤1的1-溴-4-[2-(4-甲氧基苯基)乙烯基]苯代替1-溴-4-[2-(4-氯苯基)乙烯基]苯并进行照射4天。
步骤33-溴-6-甲氧基菲-9，10-二酮 该醌的制备如实施例36步骤3所述，用来自上述步骤2的3-溴-6-甲氧基菲代替3-溴-6-氯菲。
步骤43-溴-6-羟基菲-9，10-二酮 来自上述步骤3的3-溴-6-甲氧基菲-9，10-二酮和过量的在CH2Cl2中的BBr3的混合物在室温搅拌以提供3-溴-6-羟基菲-9，10-二酮，其直接用于下一步骤(以下步骤5)。
步骤53-溴-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮 来自步骤4的3-溴-6-羟基菲-9，10-二酮在丙酮中的溶液用过量碳酸钾、碘化钾和(溴甲基)环丙烷处理。混合物加热回流过夜，随后进行标准后处理以提供3-溴-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮。
步骤66-溴-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 该咪唑的制备如实施例36步骤4所述，用来自以上步骤5的3-溴-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮代替3-溴-6-氯菲-9，10-二酮 步骤72-[6-溴-9-(环丙基甲氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 该咪唑的制备如实施例36步骤5所述，用来自以上步骤6的6-溴-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑代替9-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。产物中存在的杂质通过Sharpless二羟基化来除去。
步骤82-[9-(环丙基甲氧基)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 该咪唑的制备如实施例40步骤6所述，用来自以上步骤7的2-[6-溴-9-(环丙基甲氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰代替2-(9-溴-6-氯-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。1H NMR δ(ppm)(400MHz，丙酮-d6)13.04(1H，bs)，8.88(1H，d，J＝5.7Hz)，8.49(2H，m)，8.33(3H，m)，7.99(1H，t，J＝8.0Hz)，7.73(1H，d，J＝8.2Hz)，7.43(1H，d，J＝8.8Hz)，4.54(1H，bs)，4.17(2H，d，J＝6.8Hz)，1.63(6H，s)，1.48-1.36(1H，m)，0.68(1H，m)，0.49-0.45(1H，m)。
实施例168 2-[9-(环丙基甲氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
该化合物通过下述两种途径制备 途径A 步骤16-溴菲-3-醇 向在0℃的含有BBr3(1M，在CH2Cl2中，17mL)的烧瓶加入来自实施例160步骤2的3-溴-6-甲氧基菲(1g，3.5mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液。将反应混合物温热到室温且搅拌30分钟，此后用水猝灭。用CH2Cl2萃取含水层。有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩以得到粗6-溴菲-3-醇。
步骤23-溴-6-(环丙基甲氧基)菲 来自以上步骤1的6-溴菲-3-醇(0.823g，3.02mmol)，(溴甲基)环丙烷(0.5mL，5.4mmol)，碳酸钾(2.5g，18mmol)和碘化钾(5mg)在丙酮(50mL)中的混合物在回流加热3天。随后加入水且用乙酸乙酯萃取反应混合物。有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗物质通过硅胶上的快速色谱法(100％己烷)纯化以提供3-溴-6-(环丙基甲氧基)菲(0.859g，87％)。
步骤31-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]丙酮 该菲的制备如实施例135步骤2所述，用来自上述步骤2的3-溴-6-(环丙基甲氧基)菲代替2-(6-溴-9-氯-1-([2-{三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。
步骤41-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-2-甲基丙烷-2-醇 该菲的制备如实施例135步骤3所述，用来自以上步骤3的1-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]丙酮代替2-(9-氯-6-(2-氧代丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。粗产物直接用于下一反应。
步骤5叔-丁基(2-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-1，1-二甲基乙氧基)二甲基甲硅烷 向来自以上步骤4的粗1-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-2-甲基丙烷-2-醇在THF中(10mL)的溶液中加入氢化钠(60％分散体，在油中，0.27g，6.79mmol)。混合物加热回流2分钟，然后冷却到室温。加入叔-丁基二甲基甲硅烷基氯(0.512g，3.39mmol)并且反应混合物加热回流2h。在通常的反应后处理之后，获得叔-丁基(2-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-1，1-二甲基乙氧基)二甲基甲硅烷(0.5g)，其用作下一步的粗物质。
步骤63-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮 向来自以上步骤5的叔-丁基(2-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-1，1-二甲基乙氧基)二甲基甲硅烷(0.5g，1.15mmol)在乙酸(10mL)中的溶液中加入CrO3(0.346g，3.46mmol)。反应混合物在50℃搅拌30min，冷却到室温，倾入水并搅拌15分钟。过滤悬浮液，水洗并在减压下抽吸以提供3-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮。
步骤76-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 向以上步骤6的3-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮(1.15mmol)在乙酸(10ml)中的溶液中加入乙酸铵(1.78g，23mmol)和二溴苯甲醛(0.42g，1.5mmol)。将混合物在70℃搅拌1h，冷却到室温，倾入水并且搅拌5分钟。将所得固体用水和乙醚洗涤。粗物质通过硅胶上的快速色谱法(30％乙酸乙酯，在己烷中)纯化以提供6-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑(0.223g)，为黄色固体。
步骤81-[9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-6-基]-2-甲基丙烷-2-醇 在室温将TBAF(1M，在THF中，10mL)加入含有来自以上步骤7的6-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑(0.223g，0.31mmol)的烧瓶。所得溶液加热回流36h，此后将水加入该反应混合物。用乙酸乙酯萃取含水层，有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗产物直接用于下一反应(以下步骤9)。
步骤92-[9-(环丙基甲氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 该咪唑的制备如实施例36步骤5所述，用来自以上步骤8的粗1-[9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-6-基]-2-甲基丙烷-2-醇代替9-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。1H NMRδ(ppm)(400MHz，丙酮-d6)12.96(1H，bs)，8.70(1H，m)，8.59(1H，m)，8.32(3H，d，J＝8.0Hz)，8.28(1H，m)，7.95(1H，t，J＝7.9Hz)，7.67(1H，d，J＝8.1Hz)，7.38(1H，d，J＝8.7Hz)，4.09(2H，d，J＝6.9Hz)，3.46(1H，bs)，3.05(2H，s)，1.38-1.34(1H，m)，1.25(6H，s)，0.67-0.63(2H，m)，0.45-0.41(2H，m). 途径B 步骤13-溴-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮 该醌的制备如实施例160步骤5所述，或通过遵循实施例36步骤3中所述工序，用来自以上途径A的步骤2的3-溴-6-(环丙基甲氧基)菲代替3-溴-6-氯菲。
步骤26-溴-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑该咪唑的制备如实施例160步骤6所述。
步骤32-[6-溴-9-(环丙基甲氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰该咪唑的制备如实施例160步骤7所述。
步骤42-(6-溴-9-(环丙基甲氧基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 该SEM-保护的咪唑的制备如实施例87步骤2所述，用来自以上步骤3的2-[6-溴-9-(环丙基甲氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰代替6，9-二溴-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。
步骤52-(9-(环丙基甲氧基)-6-(2-氧代丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 该咪唑的制备如实施例135步骤2所述，用来自以上步骤4的2-(6-溴-9-(环丙基甲氧基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰代替2-(6-溴-9-氯-1-([2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。
步骤62-(9-(环丙基甲氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰 该咪唑的制备如实施例135步骤3所述，用来自以上步骤5的2-(9-(环丙基甲氧基)-6-(2-氧代丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰代替2-(9-氯-6-(2-氧代丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰。
步骤72-[9-(环丙基甲氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 来自以上步骤6的粗2-(9-(环丙基甲氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基)间苯二氰(1.37mmol)溶解于TBAF(1M，在THF中，10mL)中，且该混合物加热回流1.5h。加入水，用乙酸乙酯萃取含水层。有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过在硅胶(70％乙酸乙酯，在己烷中)上的快速色谱法纯化该物质以提供2-[9-(环丙基甲氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰(240mg)。
实施例172 2-[9-(2-环丙基乙氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]-5-氟间苯二氰
步骤13-溴-6-(2-环丙基乙氧基)菲 向来自实施例168的途径A的步骤1的6-溴菲-3-醇(3g，11mmol)、2-环丙基乙醇(2.85g，33mmol)和三苯基膦(5.78g，22mmol)在THF(50mL)中的混合物中加入二-叔-丁基偶氮二羧酸酯(5.08g，22mmol)。反应混合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭。含水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过在硅胶(100％己烷)上的快速色谱法纯化该物质以提供3-溴-6-(2-环丙基乙氧基)菲。
步骤21-[6-(2-环丙基乙氧基)-3-菲基]-2-甲基丙烷-2-醇 该菲可以经实施例168的途径A的步骤3和4中所述的两步工艺来制备，用来自以上步骤1的3-溴-6-(2-环丙基乙氧基)菲代替3-溴-6-(环丙基甲氧基)菲，或者通过以下工序来制备 向来自以上步骤1的3-溴-6-(2-环丙基乙氧基)菲(11mmol)在THF(75mL)中的-78℃溶液中顺序加入甲基锂(1.6M，在乙醚中，1mL)和丁基锂(2.5M，在己烷中，5.3mL)。该混合物在-78℃搅拌30分钟，此后加入环氧异丁烷(2.9mL，33mmol)，然后加入BF3.OEt2(4.2mL，33mmol)。在-78℃搅拌反应混合物1h，然后用1M HCl猝灭。含水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过在硅胶上的快速色谱法(10％乙酸乙酯，在己烷中)纯化该物质以提供1-[6-(2-环丙基乙氧基)-3-菲基]-2-甲基丙烷-2-醇(1.33g)，为黄色油。
步骤3叔-丁基(2-[6-(2-环丙基乙氧基)-3-菲基]-1，1-二甲基乙氧基)二甲基甲硅烷 该菲的制备如实施例168途径A步骤5所述，用来自以上步骤2的1-[6-(2-环丙基乙氧基)-3-菲基]-2-甲基丙烷-2-醇代替1-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-2-甲基丙烷-2-醇。
步骤43-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(2-环丙基乙氧基)菲-9，10-二酮 该醌的制备如实施例168途径A步骤6所述，用来自以上步骤3的叔-丁基(2-[6-(2-环丙基乙氧基)-3-菲基]-1，1-二甲基乙氧基)二甲基甲硅烷代替叔-丁基(2-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-1，1-二甲基乙氧基)二甲基甲硅烷。
步骤56-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-9-(2-环丙基乙氧基)-2-(2，6-二溴-4-氟苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 该咪唑的制备如实施例168途径A步骤7所述，用来自以上步骤4的3-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(2-环丙基乙氧基)菲-9，10-二酮代替3-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮和2，6-二溴-4-氟苯甲醛代替二溴苯甲醛。
步骤61-[9-(2-环丙基乙氧基)-2-(2，6-二溴-4-氟苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-6-基]-2-甲基丙烷-2-醇 该咪唑的制备如实施例168途径A步骤8所述，用来自以上步骤5的6-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-9-(2-环丙基乙氧基)-2-(2，6-二溴-4-氟苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑代替6-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。
步骤72-[9-(2-环丙基乙氧基)-6-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]-5-氟间苯二氰 该咪唑的制备如实施例36步骤5所述，用来自以上步骤6的1-[9-(2-环丙基乙氧基)-2-(2，6-二溴-4-氟苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-6-基]-2-甲基丙烷-2-醇代替9-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。1H NMR δ(ppm)(400MHz，丙酮-d6)12.95(1H，bs)，8.70(1H，m)，8.58(1H，m)，8.28(4H，m)，7.67(1H，d，J＝8.1Hz)，7.40(1H，d，J＝9.1Hz)，4.31(2H，t，J＝6.5Hz)，3.43(1H，bs)，3.05(2H，s)，1.78(2H，q，J＝6.7Hz)，1.26(6H，s)，0.98(1H，m)，0.54-0.48(2H，m)，0.20-0.18(2H，m)。
实施例180 2-[6-(2-羟基-2-甲基丙基)-9-(4，4，4-三氟丁氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰
步骤13-溴-6-(4，4，4-三氟丁氧基)菲 该菲的制备如实施例168途径A步骤2所述，用4，4，4-三氟-1-碘丁烷代替(溴甲基)环丙烷。
步骤22-甲基-1-[6-(4，4，4-三氟丁氧基)-3-菲基]丙烷-2-醇 该菲的制备如实施例172步骤2所述，用来自以上步骤1的3-溴-6-(4，4，4-三氟丁氧基)菲代替3-溴-6-(2-环丙基乙氧基)菲。
步骤3叔-丁基(1，1-二甲基-2-[6-(4，4，4-三氟丁氧基)-3-菲基]乙氧基)二甲基甲硅烷 该菲的制备如实施例168途径A步骤5所述，用来自以上步骤2的2-甲基-1-[6-(4，4，4-三氟丁氧基)-3-菲基]丙烷-2-醇代替1-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-2-甲基丙烷-2-醇。
步骤43-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(4，4，4-三氟丁氧基)菲-9，10-二酮 该醌的制备如实施例168途径A步骤6所述，用来自以上步骤3的叔-丁基(1，1-二甲基-2-[6-(4，4，4-三氟丁氧基)-3-菲基]乙氧基)二甲基甲硅烷代替叔-丁基(2-[6-(环丙基甲氧基)-3-菲基]-1，1-二甲基乙氧基)二甲基甲硅烷。
步骤56-(2-([叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基)-2-甲基丙基)-2-(2，6-二溴苯基)-9-(4，4，4-三氟丁氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑 该咪唑的制备如实施例168途径A步骤7所述，用来自以上步骤4的3-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(4，4，4-三氟丁氧基)菲-9，10-二酮代替3-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-6-(环丙基甲氧基)菲-9，10-二酮。
步骤61-[2-(2，6-二溴苯基)-9-(4，4，4-三氟丁氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-6-基]-2-甲基丙烷-2-醇 该咪唑的制备如实施例168途径A步骤8所述，用来自以上步骤5的6-(2-([叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基)-2-甲基丙基)-2-(2，6-二溴苯基)-9-(4，4，4-三氟丁氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑代替6-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-甲基丙基)-9-(环丙基甲氧基)-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。
步骤72-[6-(2-羟基-2-甲基丙基)-9-(4，4，4-三氟丁氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-基]间苯二氰 该咪唑的制备如实施例36步骤5所述，用来自以上步骤6的1-[2-(2，6-二溴苯基)-9-(4，4，4-三氟丁氧基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑-6-基]-2-甲基丙烷-2-醇代替9-溴-6-氯-2-(2，6-二溴苯基)-1H-菲并[9，10-d]咪唑。1HNMR δ(ppm)(400MHz，丙酮-d6)12.95(1H，bs)，8.72(2H，m)，8.33(4H，m)，7.96(1H，t，J＝7.9Hz)，7.68(1H，d，J＝8.1Hz)，7.42(1H，d，J＝9.5Hz)，4.36(2H，t，J＝6.0Hz)，3.45(1H，bs)，3.05(2H，s)，2.57-2.51(2H，m)，2.20-2.12(2H，m)，1.25(6H，s). 确定生物活性的测定法 前列腺素E合酶活性的抑制 在微粒体前列腺素E合酶、全细胞和体内测定中，对作为前列腺素E合酶活性抑制剂的化合物进行测试。这些测定法利用酶促免疫测定(EIA)或者质谱测量前列腺素E2(PGE2)的合成。用于微粒体制备的细胞是用编码人类mPGES-1 cDNA的质粒短暂转染的CHO-K1细胞。用于细胞基实验的细胞是人类A549(其表达人类mPGES-1)。豚鼠用于测试选择的化合物的体内活性。在所有这些测定法中，将在溶媒处理的样品中的PGE2形成定义为100％活性。IC50和ED50表示同未受抑制的对照组相比，抑制50％ PGE2合成所需要的抑制剂的浓度或者剂量。
微粒体前列腺素E合酶测定 前列腺素E合酶微粒体片断由编码人类mPGES-1 cDNA的质粒短暂转染的CHO-K1细胞进行制备。然后，对微粒体进行制备，和PGES测定开始于在室温下，用化合物或者DMSO(最终1％)培养5μg/ml微粒体PGES-120-30分钟。在200mM KPi pH7.0，2mM EDTA和2.5mM GSH-还原形式中进行酶反应。然后，通过加入1μM在异丙醇中制备的最终PGH2基质(在测试孔中最终为3.5％)引发酶反应，并且在室温下将其培养30秒钟。通过加入SnCl2的1N HCl溶液(1mg/ml最终浓度)将上述反应终止。通过EIA，利用标准市售试剂盒(Cat#901-001，得自于Assay Designs)对酶反应等份试样中形成的PGE2进行测量。
由该测定法得到的代表性化合物的数据示于下表中。效力表示为IC50，并且所示的数值表示至少n＝3的平均值。
人类A549全细胞前列腺素E合酶测定 基本原理(Rationale) 全细胞提供了研究抗炎化合物(比如前列腺素E合酶抑制剂)的细胞渗透性和生化特异性的完整细胞环境。为了研究这些化合物的抑制活性，用10ng/ml重组人类IL-1β刺激人类A549细胞24小时。在培养结束时通过EIA对PGE2和PGF2α的形成进行测量，将其作为对mPGES-1-依赖型PGE2形成的选择性和有效性的结果读数(readouts)。
方法 在用IL-1β处理24小时后，人类A549细胞特异性表达人类微粒体前列腺素E合酶-1并且诱发其表达。将2.5×104个细胞播种于100ul/孔(96-孔板)中，并且在标准条件下将其培养过夜。然后，将100ul含有10ng/ml IL-1β的细胞培养介质加入到细胞中，随后向其中加入含有RPMI的2％ FBS或者含有RPMI的50％ FBS。然后，将2μl药物或者溶媒(DMSO)加入其中，并且立即对样品进行混合。将细胞培养24小时，在培养之后，对175μl介质进行采集并且通过EIA测定其PGE2和PGF2α的含量。
人类全血前列腺素E合酶测定 基本原理 全血提供了研究抗炎化合物(比如前列腺素E合酶抑制剂)的生化效力的蛋白质和富集细胞环境。为了研究这些化合物的抑制活性，用脂多糖(LPS)将人类血液刺激24小时，从而诱发mPGES-1表达。在培养结束时通过EIA对前列腺素E2(PGE2)和凝血噁烷B2(TxB2)的形成进行测量，将其作为对mPGES-1-依赖型PGE2形成的选择性和有效性的结果读数。
方法 报道的mPGES-1活性的人类全血测定(Brideau等人，Inflamm.Res.，vol.45，p.68，1996)按照如下所述进行。
将从人类志愿者新近分离的静脉血液收集在肝素化试管中。在血液收集前至少7天时间内，这些对象没有明显的炎症并且没有出现任何NSAIDs。用1ul溶媒(DMSO)或者1ul测试化合物对250μl血液进行预培养。然后，将100μg/ml(稀释在0.1％ w/v牛血清蛋白的磷酸盐缓冲盐水中的大肠杆菌血清型0111:B4)的细菌LPS加入其中，并且在37℃下将所得样品培养24小时。将时间为0时未刺激的对照血液(没有LPS)用作空白组。在24小时培养结束时，在4℃下，在3000rpm下将血液离心10分钟。利用如上所述的EIA试剂盒对血浆进行测定，以测定PGE2和TxB2。
抗炎活性的体内测定 基本原理 完整动物提供了证实体外表征的测试化合物的抗炎活性的综合生理系统。为了确定前列腺素E合酶抑制剂的体内活性，在炎性刺激之前或者之后，向动物给药化合物LPS。将LPS注射入豚鼠的后爪中，在注射后4.5和/或6小时时对其痛觉过敏测定进行记录。
配制用于口服给药的测试化合物 用球磨系统研磨测试化合物并且制备成无定形。将该化合物放置于含有玛瑙球的玛瑙罐中并且在例如Planetary Micro Mill Pulverisette 7体系的装置中高速旋转10分钟。然后打开该罐并且将0.5％甲基纤维素制剂溶液加入研磨的固体中。再次在高速旋转该混合物10分钟。将所得悬浮液转移到闪烁小管中，用合适量的0.5％甲基纤维素制剂溶液稀释，超声波处理2分钟并且搅拌直到悬浮液均质。或者，可以采用通过任何适当的化学或机械技术获得的无定形物质来配制测试化合物。然后该无定形固体，在给药之前，与合适的溶媒(例如具有0.02-0.2％的十二烷基硫酸钠的0.5％甲基纤维素制剂)混合并搅拌一定时间，例如12小时。
方法 在此使用重量为200-250克的雄性Hartley豚鼠。将LPS(30mg/kg)足下注射入豚鼠的左后爪中，从而在注射的爪上产生痛觉过敏。在LPS注射之前，对其直肠温度和爪退缩执行时间，对疼痛的超敏性(痛觉过敏)的测度进行测量并且将其用作基准。使用热痛觉过敏仪器(UgoBasile Corp.)对爪退缩执行时间进行确定。在此测定期间，将动物置于位于玻璃底座上部的8＂×8＂有机玻璃固定箱中。用温和(223mW/cm2)的红外光直接照射后爪的下侧。对动物撤回它的爪(表明它感觉到了由热引起的疼痛)所花费的时间进行记录。当动物从该区域中撤回它的爪时，立即切断红外光。并且，当时间达到20秒钟时，也自动切断该光线。
前剂量范例(predose paradigm) 使用规格18的进料针，以5ml/kg的剂量口服给药测试化合物。在化合物给药后1小时，使用规格26的针，以100μl的体积将LPS(血清型0111:B4，10μg)或者0.9％盐水注射入左后爪的足底区域。在LPS给药之后，直肠温度和受热爪退缩执行时间(latency)是4.5小时。在测定之后，使用CO2对动物实施安乐死，并且对其腰椎脊髓、后爪和血液样品进行收集。
逆转范例 在足底注射LPS之前和之后3小时，对各只动物受热爪退缩进行确定。将已经接受LPS并且在3小时时间点未显示缩回执行时间缩短的动物从研究中除去并且对其实施安乐死。以5ml/kg的剂量p.o.给药测试化合物，随后立即对其进行受热爪缩回测定。在给药化合物后受热缩回执行时间是1.5和3小时(在LPS给药后是4.5和6小时)。在最终读数之后，利用CO2对动物实施安乐死，收集腰椎脊髓和血液样品以分别通过质谱进行前列腺素测定和测定药物水平。
制备实施例40的供替换方法如下 供替换的实施例40
试验工序
向圆底烧瓶中充填碳酸钾(65g，469.7mmol)，H2O(400mL)，MTBE(800)和二乙胺(81mL，861.1mmol)。然后在30分钟内加入p-氯苯甲酰氯(100mL，782.8mmol)，保持在25℃下的温度。在添加之后，分离各相且用盐水(200mL)洗涤有机物。然后将溶液进行溶剂转换为DME以得到酰胺的粗溶液，其直接用于下一步骤。

向在7.5mL/g DME(75mL)中的酰胺(10g，47.3mmol)的粗溶液中加入硼酸三异丙基酯(19.5mL，85.1mmol)，所得溶液被冷却到-25℃。然后将刚制备的二乙基酰胺锂(45.6mL，66.2mmol)的1.45M溶液在30分钟内滴加。[注二乙基酰胺锂的制备是通过用在己烷中的正丁基锂的2.5M溶液处理THF中的二乙胺，在添加期间保持温度低于0℃]。在添加结束时，将混合物再老化15分钟，在此所有的原料已经被消耗以得到相应的硼酸，区域选择性>98％。然后将粗溶液直接用于下一步骤。

向如上获得的硼酸的粗溶液中加入脱气的水(90mL)(在0℃)和固体Na2CO3(13.5g，127.7mmol)。向所得悬浮液中顺序加入PPh3(223mg，0.85mmol)、2-碘代甲苯(5.4mL，42.6mmol)和Pd(OAc)2(95.5mg，0.43mmol)并将该混合物脱气，加热到70℃并老化6小时，在此通常观测到2-碘代甲苯的完全消耗。在反应末期，加入MTBE(75mL)并且过滤所得浆料。将氯化钠加入双相滤液中以便于分离并且分割各层。有机相用水(20mL)洗涤一次和盐水洗涤(2 x 30mL)。然后浓缩粗溶液，将溶剂切换成DME且直接用于下一步。典型测验收率90-94％。

在15分钟内向保持在-45℃的酰胺(13.9g，46.2mmol)在7.5mL/gDME(104mL)中的粗溶液中加入刚制备的LiNEt2在THF(41.7mL，60mmol中的1.44M溶液。将所得棕色溶液老化75分钟，在此通过HPLC观测到原料的完全消耗。加入MTBE(120mL)，随后缓慢加入6N HCl(30.8mL，184.7mmol)。将所得混合物温热到RT且分离各层(含水层的pH应当为2-3)。有机层用H2O(55mL)、盐水(60mL)洗涤一次，浓缩且溶剂转换为甲苯以结晶。当获得3:1的甲苯:DME混合物的大约4mL/g产品时，回流浆料以溶解所有固体，缓慢冷却到60℃并且用5mL/g甲基环己烷(通常在75-80℃形成晶体)处理1小时，同时将混合物冷却到RT。随后浓缩浆料以得到一定体积的3.5mL/g产品，然后用2mL/g的甲基环己烷再处理0.5小时。在0℃老化浆料0.5小时，过滤且用3:1的甲苯:甲基环己烷的冷混合物洗涤湿滤饼，然后在恒流N2下干燥。以81％收率获得浅褐色固体的所需产品。

在20分钟内向15℃的氯代邻二氮杂菲(41g，179.8mmol)在干燥DME(600mL，KF＝25ppm，溶液KF＝1000ppm)中的溶液中加入Br2(32.3mL，629.4mmol)，在此在添加期间15℃的放热曲线是很明显的。然后将所得悬浮液温热到40-45℃并且老化4小时以得到清澈的红色溶液。加入30mL H2O中的Na2SO3(4.4g，36mmol)溶液，随后加入Na2CO3(57g，539.4mmol)的250mL H2O中的溶液。将所得悬浮液温热到55℃并且老化5小时，在此获得完全水解(可能需要额外H2O来再溶解沉淀的Na2CO3)。然后在35-40℃(35-40torr)浓缩反应混合物至其体积的大约三分之一并且过滤浆料，H2O(80-100mL)洗涤，随后用1:1DME:H2O(100mL)并且在恒流的N2下干燥。所得固体通常足够纯来用于下一步骤，典型收率93％。

将氯溴二酮(4.54g，14.12mmol)、二氟苯甲醛(1.5mL，14.12mmol)、和乙酸铵(21.77g，282.38mmol)在氮气下装入250mL圆底三颈烧瓶。搅拌加入乙酸(90mL)，将浆料加热到120℃达1小时。然后将浆料冷却到室温并且在30分钟内加入水(90mL)。一旦完成水的添加之后，过滤反应混合物，用水洗涤(45mL)，在氮气和真空下干燥过夜，得到黄色固体的乙酸盐。
为了获得游离碱，将粗产品溶解在1:1 THF/MTBE(90mL)中并且用1N NaOH(45mL)装入250mL烧瓶。然后将混合物加热到40℃达1小时。在40℃分割各相，然后用1N NaOH(45mL)洗涤有机层。然后浓缩有机层，溶剂转换为MTBE，然后至45mL的最终容积。在35℃浆化反应混合物达1小时，冷却到室温，过滤，用MTBE(23mL)洗涤并且在氮气下干燥。获得二氟咪唑游离碱(5.97g)，为浅黄色固体，95％分离收率。

方法A在氮气下将二氟咪唑(6.79g，13.39mmol)和氰化钠(3.28g，66.95mmol)装入500mL圆底烧瓶。搅拌加入N-甲基吡咯烷酮(NMP，60mL)，且将浆料加热到175℃达28小时。然后将反应混合物冷却到室温。在2小时内加入水(240mL)，将浆料搅拌48小时。将氯化钠(36g)加入浆料并且再搅拌2小时。将浆料冷却到0℃，搅拌1小时，过滤，用水(30mL)洗涤。然后在氮气下干燥湿滤饼以得到所需作为NMP溶剂的产物。
在THF(42mL，7.5mL/g)中于65℃浆化固体1小时。然后将混合物冷却到室温，随后在1小时内加入水(14mL，2.5mL/g)。在真空下浓缩浆料，除去14mL的溶剂并且将所得浆料过滤。用1:1 THF/H2O(14mL)洗涤湿滤饼，氮气下干燥。获得作为THF溶剂的所需产物(3.83g)，以54％分离收率。
方法B
合并1.0g三溴代咪唑游离碱(1.8mmol)、260mg NaCN(5.3mmol)、135mg CuI(0.71mmol)和7mL DMF，并且脱气，然后加热到120℃达45h。加入7mL的6:1水:NH4OH，通过过滤分离粗产物。干燥之后，从1:1 THF:MTBE(16mL)重结晶该物质以提供870mg的二氰基产物，为THF溶剂合物(97％)。
方法C用在DMF(5.7mL)中K4[Fe(CN)6]·3H2O(845mg，2mmol，细粉化)，CuI(76.2mg，0.4mmol)，和1，2-苯二胺(43.3mg，0.4mmol)处理三溴代咪唑AcOH盐(1.30g，87wt％，作为游离碱，2mmol)。将反应混合物加热到135℃达36h，DMF(5.7mL)稀释且在热的时候过滤。用丙酮彻底洗涤固体，洗液与滤液合并。有机溶液被浓缩以除去丙酮，在RT在15分钟内加入H2O(2.8mL)。将所得固体通过过滤收集，用H2O洗涤以提供棕色固体(1.06g)。然后在60℃在THF(4mL)中搅拌粗固体1小时并冷却到RT。通过过滤收集所得固体，用己烷洗涤，并干燥以提供dicanide THF溶剂，作为米白色粉末(864mg，89.5wt％)。
对于以上方法B和C，三溴代咪唑化合物的制备是遵循上述制备二溴代咪唑化合物的工序，但是用二溴代苯甲醛代替二氟代苯甲醛。

向装有搅拌棒和隔膜螺帽的7ml小瓶装入6.2mg在碳上的20wt％Pd(OH)2(含有约16wt％水(约1.0mg Pd(OH)2校正用于固体载体和水))、69mg化合物7、8mg三苯基膦和6mg碘化铜(I)。将小瓶放入氮气填充的手套箱，在此加入剩余的氮气吹扫的反应物质。充入N，N-二甲基甲酰胺(0.68mL)，随后是2-甲基-3-丁炔-2-醇(0.022mL)和三乙胺(0.031mL)。密封小瓶，从手套箱中取出，放入装配有氮气吹扫罩的加热器(heating block)，温热到52℃的外部温度。加热搅拌该反应约17h。在此时反应的HPLC分析表明约95％ LCAP转化为实施例40，采用@210nm溴化物7的>99LCAP转化率的外标。
下述实施例描述了制备作为无定形物质的实施例40的方法。
实施例A 在室温将2g实施例40固体和10ml二甲基亚砜(DMSO)溶剂装入玻璃烧瓶。溶解所有固体。采用冲击喷射装置(类似于1994年5月24日授权的US5314506中所公开的一种)快速混合该溶液与20-30ml水(作为反溶剂)，以作为无定形物质沉淀实施例40。DMSO与水在冲击时的比例为1/2至1/3。将所得浆料搅拌送入带夹套的含有30-20ml水的结晶器。最终DMSO/水比例保持在1/5。将批料温度维持在-5℃到5℃以保持实施例40的无定形固体在浆料中的稳定性。过滤浆料并且在0℃-5℃用水洗涤。真空干燥湿滤饼。滤饼的结晶度通过X-射线衍射分析和光学显微镜来检查。在滤饼中残余溶剂经GC分析。
光学显微镜图像的无定形固体主要是非双折射的，具有一些双折射晶体。无定形固体的GC分析表明固体中<0.5wt％的残余DMSO。
实施例B 向配有作为搅拌器的IKA-Works转子/定子均质器的125mL带夹套的结晶器(具有精细分散元件(element)的T25型)中装入50mL DI水。在9.1m/s的顶端速度(tip speed)打开该均质器并且调节夹套温度直到容器中水温为0℃到2℃。在分开的50ml玻璃烧瓶中溶解1g在5ml THF中的实施例40，然后在5分钟内将该溶液加入以上125ml的结晶器。在装入之后，调节以上结晶器的夹套温度以获得0-2℃批料温度。过滤批料并且用冷水洗涤。通过XRD分析干燥样品，其确认了该材料是无定形的。
权利要求
1.根据式B的根据权利要求1的化合物
或者其前药，或者所述化合物或者前药的药学上可接受的盐，其中
R3是
和
R6选自(1)H；(2)F；(3)Cl；(4)Br；(5)I；(6)-CN；(7)C1-10烷基或C2-10链烯基，其中连接到所述C1-10烷基或C2-10链烯基的一个或多个氢原子可以被氟原子替换，或在相邻碳原子上的两个氢原子可以连接到一起并且由-CH2-替换以形成环丙基基团，或在相同碳原子上的两个氢原子可以被替换并且连接到一起形成螺C3-6环烷基，且其中所述C1-10烷基或C2-10链烯基可以任选地被一个至三个取代基取代，该取代基独立地选自-OH、乙酰基、甲氧基、乙烯基、R11-O-C(O)-、R35-N(R36)-、R37-N(R38)-C(O)-、环丙基、吡咯基、咪唑基、吡啶基和苯基，所述吡咯基、咪唑基、吡啶基和苯基任选地被C1-4烷基或单-羟基取代的C1-4烷基所取代；(8)C3-6环烷基；(9)R12-O-；(10)R13-S(O)k-，(11)R14-S(O)k-N(R15)-；(12)R16-C(O)-；(13)R17-N(R18)-；(14)R19-N(R20)-C(O)-；(15)R21-N(R22)-S(O)k-；(16)R23-C(O)-N(R24)-；(17)Z-C≡C；(18)-(CH3)C＝N-OH或-(CH3)C＝N-OCH3；(19)R34-O-C(O)-；(20)R39-C(O)-O-；和(21)苯基、萘基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻吩基或者呋喃基，它们各自任选被独立地选自以下的取代基取代F、Cl、Br、I、C1-4烷基、苯基、甲基磺酰基、甲基磺酰基氨基、R25-O-C(O)-和R26-N(R27)-，所述C1-4烷基任选被1～3个独立地选自卤素和羟基的基团取代；
Z各自独立地选自(1)H；(2)C1-6烷基，其中连接在所述C1-6烷基上的一个或者多个氢原子可以替换成氟原子，和其中C1-6烷基任选被1～3个独立地选自以下的取代基取代羟基、甲氧基、环丙基、苯基、吡啶基、吡咯基、R28-N(R29)-和R30-O-C(O)-；(3)-(CH3)C＝N-OH或者-(CH3)C＝N-OCH3；(4)R31-C(O)-；(5)苯基；(6)吡啶基或者其N-氧化物；(7)C3-6环烷基，其任选被羟基取代；(8)四氢吡喃基，其任选被羟基取代；和(9)含有1～3个独立地选自O、N或者S的原子并且任选被甲基取代的五元芳香杂环；
R15、R24和R32各自独立地选自(1)H；和(2)C1-4烷基；
R11、R12、R13、R14、R16、R23、R25、R30、R31、R34和R39各自独立地选自(1)H；(2)C1-4烷基；(3)C3-6环烷基；(4)C3-6环烷基-C1-4烷基-(5)苯基；(6)苄基；和(7)吡啶基；所述C1-4烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-4烷基-、苯基、苄基和吡啶基各自可以任选被1～3个独立地选自以下的取代基取代OH、F、Cl、Br和I，且其中所述C1-4烷基可以进一步被氧代或甲氧基或二者所取代；
R17、R18、R19、R20、R21、R22、R26、R27、R28、R29、R35、R36、R37和R38各自独立地选自(1)H；(2)C1-6烷基；(3)C1-6烷氧基；(4)OH和(5)苄基或者1-苯乙基；和R17和R18、R19和R20、R21和R22、R26和R27、以及R28和R29、以及R35和R36、以及R37和R38可以与它们连接的氮原子连接到一起形成5或者6个碳原子的单环，其任选含有一个或者两个独立地选自-O-、-S(O)k-和-N(R32)-的原子；和
k各自独立地为0、1或者2。
2.根据权利要求1的化合物，其中R6是R12-O。
3.根据权利要求2的化合物，其中R12选自(1)C1-4烷基，和(2)C3-6环烷基-C1-4烷基-，其中所述C1-4烷基和C3-6环烷基均可任选地被1-3个独立选自OH、F、Cl、Br和I的取代基所取代。
4.根据权利要求1的化合物，其中R6选自F、Cl、Br和I。
5.选自下表的化合物
或任一上述化合物的药学上可接受的盐。
6.一种药学组合物，其包含结合药学上可接受的载体的根据权利要求1的化合物。
7.一种在需要这种治疗的人类患者中治疗微粒体前列腺素E合酶-1介导的疾病或者病症的方法，该方法包括给药所述患者治疗微粒体前列腺素E合酶-1介导的疾病或者病症有效量的根据权利要求1的化合物。
8.根据权利要求7的方法，其中所述疾病或者病症选自急性或者慢性疼痛、骨关节炎、类风湿性关节炎、粘液囊炎、强直性脊柱炎和原发性痛经。
9.下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
10.下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
11.下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
12.下式的化合物
或其药学上可接受的盐。
全文摘要
本发明包括新的式I化合物，或者其药学上可接受的盐。这些化合物是微粒体前列腺素E合酶-1(mPGES-1)酶的抑制剂，并且由此它们可以用于治疗由各种疾病或者病症产生的疼痛和/或炎症，比如骨关节炎、类风湿性关节炎和急性或者慢性疼痛。本发明还包括治疗由mPGES-1酶介导的疾病或者病症的方法和药学组合物。
文档编号A61K31/4184GK101370787SQ200680043636
公开日2009年2月18日 申请日期2006年11月21日 优先权日2005年11月23日
发明者A·肖, B·科特, Y·迪沙姆, R·弗雷内特, R·弗里森, M·加农, A·吉鲁瓦, E·马丁斯, H·于, 吴耀祥 申请人:默克弗罗斯特加拿大有限公司