专利名称：：相思子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及相思子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
：肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，是我国位居第二的癌症"杀手"，常见于中年男性。因其恶性度高、病情进展快，病人早期一般没有什么不适，但一旦出现症状就诊，就已经属于中晚期。故肝癌的治疗难度大，一般患者发病后生存时间仅为6个月，人称"癌中之王"。根据调査结果表明，目前男性前三位的新发癌症分别是肺癌、结肠癌和鼻咽癌，女性则是乳癌、结肠癌及肺癌，充分说明了肺癌和结肠癌在新发癌症群中的危害性。从植物中寻找高效低毒的抗癌药物，成为国内外抗癌药物研究的重点。有效的抗癌化合物和中草药有效部位的抗癌复方制剂都具有重要的临床价值。相思子"6ruspreca"n》sL.)，又称为相思豆、红豆(广东)，相思藤、猴子眼(广西)，鸡母珠(台湾)，为豆科相思子属植物，产于台湾、广东、广西、云南，生于山地疏林中，广布于热带地区。根据《中国植物志》记载，相思子种子质坚，色泽华美，可做装饰品，但有剧毒，外用治皮肤病；根、藤、入药，可清热解毒和利尿。相思子在制备抗肿瘤药物中的应用未见有报道。
发明内容本发明的目的是提供相思子提取物的一种新用途。本发明所提供的相思子提取物的用途是相思子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用；所述相思子提取物按照如下方法制备用水和/或有机溶剂作为提取剂，从相思子中提取得到相思子提取物。其中，所述有机溶剂具体可为甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯。所述提取剂具体可为体积百分含量为95%的乙醇水溶液。所述提取可为回流提取。所述提取中，提取的温度可为60-10(TC。所述提取至少提取一次，每次提取的时间为1-4小时。在如上任一所述中，所述肿瘤具体可为肝癌、结肠癌或肺癌，优选为肝癌或结肠癌。。根据如上方法所制备的预防和/或治疗肿瘤药物可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织；或是被其他物质混合或包裹后导入机体。需要的时候，在上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。如上制备的预防和/或治疗肿瘤药物可以制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。上述预防和/或治疗肿瘤药物的用量一般为200-800mg相思子提取物/kg体重/天，疗程为10至15天。本发明的制备相思子提取物的方法简单、成本低廉。实验证明，本发明的相思子提取物能够有效的抑制人肿瘤细胞的生长，如人肝癌、结肠癌或肺癌细胞。因此本发明所提供的相思子提取物对制备抗肿瘤药物，尤其是抗肝癌、肺癌、结肠癌药物具有重要的意义。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。实施例l、相思子提取物的制备取相思子(宁波德康生物制品有限公司)200g，将其以1:3(相思子95%乙醇)的重量份数比与95%乙醇(乙醇水=95:5，体积比)混合，在60'C条件下回流提取3h，抽滤，收集第一次回流提取液1和滤渣1;将得到的所有滤渣1与95%乙醇混合，95%乙醇的量与第一次相同，在6(TC条件下提取3h，收集第二次回流提取液2和滤渣2，并将提取液2与提取液1合并；将得到的所有滤渣2与95%乙醇混合，95%乙醇的量与第一次相同，6(TC回流提取3h，抽滤，收集第三次回流提取液3;将提取液l、提取液2和提取液3合并，将所得的提取液进行真空减压浓縮、真空干燥(去除乙醇和水)至恒重，得到0.37g相思子提取物。实施例2、相思子提取物在抑制肿瘤细胞生长中的应用将对数生长的肿瘤细胞(人肝癌细胞HepG-2、人肝癌细胞BEL-7402、人结肠癌细胞HCT-8、人肺癌细胞A-549)用0.25%的胰蛋白酶消化，然后用含10%(体积百分含量)胎牛血清的DMEM完全培养基悬浮细胞，制成细胞悬液，并分别将各肿瘤细胞稀释至1.0xl()S个/mL，再将其接种至96孔培养板中，每孔200uL，各肿瘤细胞分别接种6个孔，于37t，5y。C02的培养箱内培养24h;然后倾去各孔培养液。将实施例1制得的相思子提取物溶解于DMSO中，然后用DMEM完全培养基进行稀释，得到相思子提取物的溶液，相思子提取物的终浓度为50ug/mL，其中，DMSO的浓度为10%(体积百分含量)。同时设实验组、对照组进行实验实验组将相思子提取物溶液依次分别加入上述肿瘤细胞HepG-2、BEL-7402、HCT-8、A-549的培养孔内，各自接种3个孔，每孔加入200ul;对照组向上述各肿瘤细胞的培养孔内加入含10%(体积百分含量)DMSO的DMEM完全培养基，各自接种3个孔，每孔加入200ul;将以上各组的培养板同时置于37i:、5%<:02的培养箱内培养2天。2天后向每孔加入20ul新鲜配制的5mg/ml四甲基偶氮唑盐(MTT)溶液，并在37t:、5。/。C02的条件下继续培养4h;小心弃上清，每孔加入200uLDMSO，室温放置15-20min，每5min振荡一次；在酶标仪上测定各孔在波长490nm处的光密度值(OD值)，按公式计算肿瘤细胞生长抑制率。抑制率(％)=(OD对照-OD实验)/OD对照x100%。实验设三次重复，结果取平均数。相思子提取物对人不同肿瘤细胞HepG-2、BEL-7402、HCT-8、A-549的抑制作用的结果如表1所示。表l、相思子提取物对人不同肿瘤细胞的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>相思子提取物的对多种肿瘤细胞的抑制作用实验结果表明(表l)，相思子提取物在浓度为50ug/mL时对人肝癌细胞H印G-2、肝癌细胞BEL-7402、结肠癌细胞HCT-8和肺癌细胞A-549均有不同程度的抑制作用，对人肝癌细胞H印G-2和肺癌细胞A-549抑制作用不明显，但是对肝癌细胞BEL-7402和结肠癌细胞HCT-8的抑制率很高。因此，相思子提取物可以用于制备抗肝癌和结肠癌的药物。权利要求1、相思子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用；所述相思子提取物按照如下方法制备用水和/或有机溶剂作为提取剂，从相思子中提取得到相思子提取物。2、根据权利要求l所述的应用，其特征在于所述有机溶剂为甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯。3、根据权利要求l所述的应用，其特征在于所述提取剂为体积百分含量为95%的乙醇水溶液。4、根据权利要求l-3中任一所述的应用，其特征在于所述提取为回流提取。5、根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述提取的温度为60-10(TC。6、根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于所述提取中，至少提取一次，每次提取的时间为1-4小时。7、根据权利要求1至6中任一所述的应用，其特征在于所述肿瘤为肝癌、结肠癌或肺癌，优选为肝癌或结肠癌。8、一种相思子提取物，所述相思子提取物是以体积百分含量为95%的乙醇水溶液作为提取剂，从相思子中提取得到的。9、根据权利要求8所述的相思子提取物，其特征在于所述提取为回流提取;所述提取的温度为60-100°C。10、根据权利要求9所述的相思子提取物，其特征在于所述提取中，至少提取一次，每次提取的时间为l-4小时。全文摘要本发明公开了相思子提取物的新用途。该新用途是相思子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。所述提取物是按照如下方法制备的以相思子为原料，用水和/或有机溶剂提取得到的。本发明所提供的相思子提取物对制备抗肿瘤药物，尤其是抗肝癌、肺癌、结肠癌药物具有重要的意义。文档编号A61P35/00GK101352477SQ20081011970公开日2009年1月28日申请日期2008年9月5日优先权日2008年9月5日发明者岩刘,向俊锋,唐亚林,玮戴,莉谭申请人:中国科学院化学研究所