专利名称：一种治疗食道癌复合注射制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗食道癌的制剂，具体地说是一种治疗食道癌的复合静脉 注射制剂的制备方法及其制备方法。
背景技术：
随着环境污染的加剧和人们饮食结构的变化，食道癌发病率和死亡率逐年增 加，严重危害人民群众健康。在食道癌的治疗方案中，化疗仍然是目前其综合治 疗措施中的主要手段。目前在各种肿瘤的化疗过程中所使用的化疗药物普遍存在 的不足是抗肿瘤的化疗药物缺乏选择性，在杀灭癌细胞的同时也损伤了健康细胞， 降低人体的免疫功能，出现许多毒副作用，影响化疗药物的临床应用，为了提高 抗肿瘤药物的疗效，并减轻对正常细胞的损伤和毒性作用，医学界多次尝试把抗 体、脂质体、激素和其他大分子作为肿瘤化疗药物的载体，以便增加药物的靶向 性，即"靶向治疗"。但在实际临床应用过程中存在的一个主要问题是肝脏和脾 脏的网状内皮系统把血液中的这些复合物作为外来有害物而迅速从血流中清除， 从而减少了药物一大分子复合物对肿瘤细胞的作时间而影响了药物的治疗效果。 因此将药与其他物质结合，使其象导弹一样精确，只杀死肿瘤细胞，对正常肌体 无毒副作用，将是攻克癌症的又一里程碑。
发明内容
本发明的一种治疗食道癌复合注射剂的制备取方法，是按以下方式实现的，根 据不同血型分别取血库原料血浆，通过离心和密度调整处理，从中提取出低密度 脂蛋白，经过对低密度脂蛋白的提纯制得靶向药物的载体，然后与治疗癌症的阿 克拉霉素耙向药物进行复合，将复合后低密度脂蛋白一阿克拉霉素药物注射到与 药物原料血浆血型相同的患者体内达到治疗食道癌的目的。 具体制备步骤如下 1)低密度脂蛋白的制备 (1) KBr—NaEDPA溶液的制备称取KBr 1. 080g，加入0. 0022mol/L的 NaEDPA100ml的水溶液中溶解搅拌均匀；
(2)根据不同血型，分别取血库血桨200ml， 300r/m离心10分钟，取上清液， 用KBr—NaEDPA溶液调密度为1. 01 P ，温度控制在4°C ，用离心机于47000r/m的转速离心18小时，吸除上层的VLDL，剩余部分备用；
(3)将吸除上层的VLDL后的剩余液体混匀，再用KBr—NaEDPA溶液调整密 度为1.063 P，控制温度4r，用离心机于47000r/m的转速，离心20小时，吸取 上面的低密度脂蛋白备用；
2)对低密度脂蛋白进行透析提纯 (1)透析液的制备:称取Na2 HP04. 12H20 179g， NaCl 58. 44g， EDTA1000mg 溶于蒸馏水中调整体积至1000ml ，再用2mol/L HC1调PH=7. 4备用；
(2) 将低密度脂蛋白装入透析袋，再将透析袋浸在500ml透析液中，控制温度 4'C，电磁搅拌透析24—48小时备用，透析过程中要换6次透析液，每次更换透 析液500ml;
(3) 向透析后的溶液中加入20ug/ml凝血酶，温度升至24。C，搅拌处理10 分钟，用0.22um微孔滤膜过滤除菌，分瓶装，每瓶含LDL 40mg，置矿C温度下 保存备用；
3)低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合静脉注射制剂的制备，采用温育交换法， 精称ACM原料药80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸馏水调整总 体积为20ml， 4(TC水浴，恒温振荡3小时，然后将溶液装透析袋屮置于500ml透 析液中，控制温度4t:，避光透析48小时，除去游离ACM，再经0.22um微孔滤 膜过滤除菌后，制成低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合静脉注射制剂，包装瓶上标 注血浆原料血型，置温度4X:下保存备用。 本发明的有益效果如下
通过临床实践证明，低密度脂蛋白 一阿克拉霉素复合注射剂治疗食道癌已获 得满意疗效，且无明显化疗毒副作用。包括食道癌在内的多种肿瘤细胞特别是耐 药性肿瘤细胞膜上，低密度脂蛋白受体的活性明显增强，肿瘤细胞对低密度脂蛋 白的摄取明显增加。低密度脂蛋白作为抗肿瘤药物阿克拉霉素的载体实现治疗肿 瘤的药物靶向作用的可行性引起了广泛的关注。
低密度脂蛋白较其他人工合成的载体具有更多的优点(1)对于具有细胞毒 付作用的高亲脂性药物来说，低密度脂蛋白是一种适合的传输载体；另一方面， 在其内药物也避免了血浆中酶的水解；(2)低密度脂蛋白是一种生理的载体，不
会被网状内皮系统清除，从而延长了抗肿瘤药物的血浆半衰期；(3)肿瘤细胞通 过低密度脂蛋白受体途径内在化和代谢细胞外的低密度脂蛋白，这种高效的过程 可以引起不同的药理性作用，可是消除一些抗药性的机制。
具体实施例方式
4本发明的治疗食道癌的复合注射剂的制备方法，其制备步骤如下 1)低密度脂蛋白的制备-
(1)制备KBr — NaEDPA溶液称取KBrl.080g，加入0.0022mol/L的 NaEDPA100ml的水溶液中溶解搅拌均匀备用。
(2) 根据血库存放的血浆原料血型，分别取血浆200ml， 300r/m离心10分钟， 取上清液，用KBr—NaEDPA溶液调密度为1. 01 P ，温度控制在4'C，用离心机于 47000r/m的转速离心18小时，吸除上层的VLDL溶液，留下剩余部分备用；
(3) 将吸除上层的VLDL后的剩余液体混匀，再用KBr—NaEDPA溶液调整密 度为1.063P,控制温度4i:，用离心机于47000r/m的转速，离心20小时，吸取
上面的低密度脂蛋白备用；
2)对低密度脂蛋白进行透析提纯 (1)透析液的制备称取Na2 HP(k. 12H2 0 179g， NaCl 58. 44g， EDTA1000mg 溶于蒸馏水调整体积至1000ml ，用2mol/L HCl调ra二7.4备用；
(2) 将低密度脂蛋白装入透析袋，再将透析袋浸在500ml透析液中，加电磁搅 拌，控制温度4。C，搅拌透析24—48小时，透析过程中更换6次透析液500ml;
(3) 向透析后的溶液中加入20ug/ml凝血酶，温度升至24。C，搅拌处理10 分钟，用0.22um微孔滤膜过滤除菌，分瓶包装，每瓶含低密度脂蛋白40mg，置 4'C温度下保存备用，
3)低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂的制备采用温育交换法精称阿 克拉霉素原料药80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸馏水调整总 体积为20ml，置4(TC水浴恒温振荡3小时，然后将溶液装透析袋中于温度4'C避 光透析48小时，除去游离阿克拉霉素，再经0. 22 u m微孔滤膜过滤除菌后，制 成本发明的低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合静脉注射，包装瓶上标注血浆原料血 型，置温度4'C下保存备用。
临床应用每天静脉输射低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂一次，20天 为一疗程，需要3 — 5个疗程，疗程之间间隔10天。 临床典型病例
1、 杨x x ，男，72岁，食道癌中晚期，行手术切除，术中发现腹腔内淋巴 结广泛转移，术后15天，给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂静脉注射每 天一次，治疗3个疗程，随访3年，未复发。
2、 崔xx ，女，食道癌晚期，给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂静 脉注射治疗3个疗程，肿瘤组织逐渐缩小，治疗5个疗程，肿瘤组织逐渐消失，随访3年，未复发。
3、 刘xx ，男，66岁，食道癌中晚期，行手术切除，术中发现纵膈及主动脉 转移，术后15大给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂静脉注射治疗3个疗 程，随访3年，未复发。
4、 李xx ，女，75岁，食道癌中晚期，行手术切除，术中发现广泛腹腔淋巴 结转移，术后15天低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂静脉注射治疗3个疗程， 随访3年，未复发。
5、 李xx ，男，57岁，食道癌中晚期，行手术切除，术中发现腹膜后转移， 术后15天给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂静脉注射治疗3个疗程，随 访3年，未复发。
6、 张xx ，男，78岁，食道癌晚期，给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注 射剂静脉注射治疗3个疗程，肿瘤组织逐渐缩小，治疗5个疗程，肿瘤组织逐渐 消失，随访3年，未复发。
7、 马xx ，女，64岁，食道癌中晚期，行手术切除，术中发现腹腔淋巴结 转移，术后15天给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂静脉注射治疗3个疗 程，随访3年，未复发。
8、 吴xx ，男，72岁，食道癌中晚期，行手术切除，术中发现胸腔内转移， 术后15天给予低密度脂蛋白—阿克拉霉素复合注射剂静脉注射治疗3个疗程，随 访3年，未复发。
9、 马xx ，女，74岁，食道癌晚期，给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注 射剂静脉注射治疗3个疗程，肿瘤组织逐渐縮小，治疗5个疗程，肿瘤组织逐渐 消失，随访3年，未复发。
10、 曹xx ，男，72岁，食道癌中晚期，行手术切除，术中发现纵膈转移， 术后15天给予低密度脂蛋白一阿克拉霉素复合注射剂静脉注射治疗3个疗程，随 访3年，未复发。
疗效统计使用本发明的低密度脂蛋白 一 阿克拉霉素复合注射剂静脉注射治 疗，共治疗食道癌患者252人，有效率达100%， 3年存活率达96%以上。
权利要求
1、一种治疗食道癌复合注射制剂的制备方法，其特征在于根据不同血型分别取血库原料血浆，通过离心和密度调整处理，从中提取出低密度脂蛋白，经过对低密度脂蛋白的提纯制得靶向药物的载体，然后与治疗癌症的阿克拉霉素靶向药物进行复合，将复合后低密度脂蛋白—阿克拉霉素药物注射到与药物原料血浆血型相同的患者体内达到治疗食道癌的目的，制备步骤如下1)低密度脂蛋白的制备(1)KBr—NaEDPA溶液的制备称取KBr 1.080g，加入0.0022mol/L的NaEDPA100ml的水溶液中溶解搅拌均匀；(2)根据不同血型，分别取血库血浆200ml，300r/m离心10分钟，取上清液，用KBr—NaEDPA溶液调密度为1.01ρ，温度控制在4℃，用离心机于47000r/m的转速离心18小时，吸除上层的VLDL，剩余部分备用；(3)将吸除上层的VLDL后的剩余液体混匀，再用KBr—NaEDPA溶液调整密度为1.063ρ，控制温度4℃，用离心机于47000r/m的转速，离心20小时，吸取上面的低密度脂蛋白备用；2)对低密度脂蛋白进行透析提纯(1)透析液的制备称取Na2HPO4.12H2O 179g，NaCl 58.44g，EDTA1000mg溶于蒸馏水中调整体积至1000ml，再用2mol/L HCl调PH＝7.4备用；(2)将低密度脂蛋白装入透析袋，再将透析袋浸在500ml透析液中，控制温度4℃，电磁搅拌透析24—48小时备用，透析过程中要换6次透析液，每次更换透析液500ml；(3)向透析后的溶液中加入20μg/ml凝血酶，温度升至24℃，搅拌处理10分钟，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分瓶装，每瓶含低密度脂蛋白40mg，置4℃温度下保存备用；3)低密度脂蛋白—阿克拉霉素复合注射制剂的制备，采用温育交换法，精称阿克拉霉素原料药80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸馏水调整总体积为20ml，40℃水浴，恒温振荡3小时，然后将溶液装透析袋中置于500ml透析液中，控制温度4℃，避光透析48小时，除去游离阿克拉霉素，再经0.22μm微孔滤膜过滤除菌后，制成低密度脂蛋白—阿克拉霉素复合注射制剂，包装瓶上标注血浆原料血型，置温度4℃下保存备用。
全文摘要
本发明提供一种治疗食道癌复合注射制剂的制备方法，该方法是根据不同血型分别取血库原料血浆，通过离心和密度调整处理，从中提取出低密度脂蛋白，经过对低密度脂蛋白的提纯制得靶向药物的载体，然后与治疗癌症的阿克拉霉素靶向药物进行复合，将复合后低密度脂蛋白-阿克拉霉素药物注射到与药物原料血浆血型相同的患者体内达到治疗食道癌的目的。通过临床实践证明，本发明的低密度脂蛋白-阿克拉霉素复合注射剂在临床治疗食道癌上已获得满意疗效，且无明显化疗毒副作用，共治疗食道癌患者252人，有效率达100％，3年存活率达96％以上，具有很好的推广使用价值。
文档编号A61K47/42GK101428146SQ20081023779
公开日2009年5月13日 申请日期2008年12月10日 优先权日2008年12月10日
发明者曹莹莹 申请人:曹莹莹