专利名称：一种类脂质体及其制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及药物制剂及制备方法技术领域，进一步将是提供一种类脂质体及其制 剂的制备方法，同时还公开了银杏叶提取物类脂质体及其制备方法。
背景技术：
类脂质体是在脂质体基础上发展起来的一种新型微粒给药系统。它是以非离子表 面活性剂代替两性表面活性剂磷脂为主要膜材所构成的一种脂质双分子层微型囊泡， 可将药物包封于双分子层中制成单室或多室超微型载体给药系统。类脂质体具有渗透 活性而且稳定，是一种很有发展前途的新型药物载体，正日益引起人们的关注。
类脂质体具有类似脂质体封闭的双层结构，但不易泄漏，粒径较小的的类脂质体 (〈150nm)，不容易被巨噬细胞吞噬，可以延长在体内的循环时间，具有优良的组织 通透性，尤其可在有渗漏性血管组织(肿瘤、炎症区或梗死区等)聚集；类脂质体不 易被肾排泄，粒径大的类脂质体也可在肝、脾浓集，而有被动靶向作用。此外由于类 脂质体具有双分子层结构，既可以包封水溶性药物，又可以包封于脂溶性药物。
类脂质体作为新的靶向药物载体，目前仅到达临床阶段，但现有的研究已经证实 了类脂质体作为药物传递系统具有很大的优势。据文献报道，静脉注射包封药物的类 脂质体在肝中的药物浓度最高。同时，可以通过在类脂质体表面进行一定的修饰，改 变药物在体内的分布状态。
载药类脂质体由于在制备中掺入非离子表面活性剂，而非离子表面活性剂的聚氧 乙烯基可在其表面生成立体位阻屏障，在血液中不易被血浆蛋白识别、摄取，从而在 血液中的驻留时间较普通脂质体有显著延长。
本发明所制备的类脂质体及其制剂，能协助药物通过血脑屏障，降低被肝组织巨 噬细胞的吞噬，延长在体内循环组织的停留时间，减轻中枢神经系统疾病患者的痛苦， 降低其在治疗、应用中出现的全身性副作用，使新型制剂的技术得以应用，同时使对 中枢神经系统疾病有效的中药有效部位的药物又有新的给药途径，扩大中药制剂应用 的范围，创造更大的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明的目的是提供一种类脂质体及其制剂的制备方法，以延长药物在体内的循 环时间，从而增加药物向脑部转运的能力。本发明将类脂质体制成粉末以提高载药类脂质体的稳定性及服用的方便性。 本发明的目的通过以下方案予以实现
本发明的类脂质体由被载药物与载体按(1 68) : 100质量比构成，所述的载体
为非离子表面活性剂和胆固醇组成，其摩尔比值为l: (0.5 1.5)。
本发明所述的被载药类选自苷类、生物碱类、肽类、黄酮类、内酯类化合物任
意一种或多种混合。
本发明所述的非离子表面活性剂选自聚甘油烷烃醚、糖基二烃基醚、冠醚、酯 类表面活性剂、聚氧乙烯基醚、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(普朗尼克)、卞泽、吐温、 司盘、单(双)烷基聚丙三醇醚、胆甾烯三氧乙烯醚、甘油单月桂酸酯中的一种或多种 混合。
在所述的类脂质体中，还可填加有二鲸蜡磷酸酯作稳定剂，与被载药物的质量配
比为1 : (0 1.5)。
在所述的类脂质体中，非离子表面活性剂的HLB值为2 18。 本发明类脂质体的制备方法，包括以下步骤
按上述比例取非离子表面活性剂、胆固醇，加入有机溶剂使其溶解，旋转蒸发形 成薄膜；将干燥的薄膜溶于乙醚中，再加入被载药物溶液和磷酸盐缓冲液，超声处理， 将超声后的溶液中再加入磷酸盐缓冲液，水合，置于3CTC恒温水浴振荡器中振荡过夜， 制成类脂质体混悬液；将类脂质体混悬液通过高压均质机，得粒径为0.05 2pm的类 脂质体。
本发明所述的有机溶剂选自甲醇、二氯甲烷、乙醇、氯仿、乙醚中的一种或多种 混合。
本发明类脂质体粉末的制备方法如下类脂质体混悬液中加入冻干保护剂，其比 例为10: (0.6 l)mL/g，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，得类脂质体粉末；
也可按照类脂质体混悬液与载体质量比为1 : (1 6);出风温度8(TC 12(TC; 进风温度120°C 210°C;进料流量25 40mL . min—',喷雾干燥，得类脂质体粉末。
本发明所述的高压均质机压力为500bar 1000bar。
本发明的积极效果在于是采用改良薄膜分散-匀化法、冷冻干燥法/喷雾干燥法 制备类脂质体。该发明类脂质体具有避免药物被肝组织网状内皮系统的吞噬，延长药 物在体内的滞留时间，协助药物通过血脑屏障的能力。本发明类脂质体具有稳定性好， 工艺简单，适合大工业生产的特点。
图1为银杏叶类脂质体粒径分布图； 图2为银杏叶类脂质体显微镜图3为银杏叶类脂质体在PBS (pH6.8)中的累计释放率。
图4为石杉碱甲脂质体粒径分布图5为石杉碱甲脂质体在PBS (pH6.8)中的累计释放率。 图6为鼠妇镇痛肽脂质体粒径分布图； 图7为鼠妇镇痛肽脂质体在PBS (pH6.8)中的累计释放率。
具体实施例方式
为了便于理解本发明，特例举以下实施例。其作用被理解为是对本发明的阐释而 非对本发明的任何形式的限制。 实施例1
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 1. 0284g，司盘80: 0. 6140g, 胆固醇0.8576g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物 0.3750g)和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷 酸盐缓冲液，水合温度6(TC,置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体 混悬液；将类脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。银杏叶类脂质体粒径分布图见图1;银 杏叶类脂质体显微镜图见图2。
实施例2
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(乙醚40mL，乙醇40mL)使溶解，旋转蒸发形 成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。实施例3
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5631g，司盘80: 0. 2737g， 胆固醇0.4132g，加入混合有机溶剂(乙醇20mL，氯仿60mL)使溶解，旋转蒸发形 成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例4
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂，(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物 0. 1125g)和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷 酸盐缓冲液，水合温度60'C，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体 混悬液；将类脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例5
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 4736g，司盘80: 0. 2827g， 胆固醇0.4937g,加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL，甲醇60mU使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40niL磷酸盐缓冲液， 水合温度60'C，置于30'C恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h,即得。
实施例6
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度80'C，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例7
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 4671g，司盘80: 0. 3390g， 胆固醇0.4439g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-80'C预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例8
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 3780g，司盘80: 0. 3997g， 胆固醇0.4723g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值UL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例9
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇；0.4288g，加入混合有机溶剂(氯仿80mL)使溶解，旋转蒸发形成薄膜。将 干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.050g)和100mL磷 酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液，水合温度 60°C,置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 0.6加入冻干保护剂甘 露醇，于-80'C预冻24h，冷冻干燥24h，即得。 实施例10
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 0. 8加入冻干保护剂甘 露醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例11
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度60。C，置于30。C恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂山梨 醇，于-80。C预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例12
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g,加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 0.6加入冻干保护剂蔗 糖，于-80。C预冻24h，冷冻干燥24h，即得。实施例13
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 0.6加入冻干保护剂氯 化钠，于-80'C预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例14
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3CTC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 0.6加入冻干保护剂海 藻糖，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例15
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3CTC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与甘露醇质量比为1 : 1;出风温度9CTC;进风 温度150。C;进料流量30mL . min—''，喷雾干燥，即得。
实施例16
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC,置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与甘露醇质量比为1 : 6;出风温度9(TC;进风 温度150。C;进料流量30mL . mirf'，喷雾干燥，即得。
实施例17
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3CTC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与乳糖质量比为1 : 1;出风温度9(TC;进风温 度15(TC;进料流量30mL . min—''，喷雾干燥，即得。
实施例18
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL，甲醇60raL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与葡萄糖质量比为1 : 1;出风温度9(TC;进风 温度150。C;进料流量30mL . min—1'，喷雾干燥，即得。
实施例19
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与甘氨酸质量比为1 : 1;出风温度9(TC;进风 温度150。C;进料流量30mL . min—",喷雾干燥，即得。
实施例20
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80: 0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与赖氨酸质量比为1 : 1;出风温度90'C;进风 温度15(TC;进料流量30mL min—、喷雾干燥，即得。
实施例21
以银杏叶提取物为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0. 5142g，司盘80:0. 3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0. 050g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与高分子物质质量比为1 : 1;出风温度9(TC; 进风温度15(TC;进料流量30mL . rain—1',喷雾干燥，即得。
实施例22
以石杉碱甲为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0.5142g，司盘80: 0.3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸发 形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.650g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声l(kin，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与乳糖质量比为1 : 4;出风温度9(TC;进风温 度15(TC;进料流量30mL mirf1',喷雾干燥，即得。粒径分布图见图1;实施例23
以石杉碱甲为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0.5142g,司盘80: 0.3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋转蒸发 形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.650g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与乳糖质量比为1 : 6;出风温度9(TC;进风温 度150。C;进料流量30mL . mirf'，喷雾干燥，即得。
实施例24
以石杉碱甲为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 1.0284g，司盘80: 0.6140g， 胆固醇0.8576g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸发 形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.650g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与乳糖质量比为1 : 6;出风温度9(TC;进风温 度150。C;进料流量30mL . min—' ，喷雾干燥，即得。
实施例25
以石杉碱甲为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0.5142g，司盘80: 0.3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋转蒸发 形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.650g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6(TC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
喷雾干燥时按照类脂质体混悬液与乳糖质量比为1 : 6;出风温度9(TC;进风温 度150。C;进料流量30mL . mirr''，喷雾干燥，即得。
上述的石杉碱甲类脂质体粒径分布图见图4;
石杉碱甲脂类质体在PBS (pH6.8)中的累计释放率见图5。
实施例26以鼠妇镇痛肽为药物，制备成类脂质体。取吐温80: L0284g，司盘80: 0.6140g， 胆固醇0.8576g,加入有机溶剂(二氯甲烷20mL，乙醇60mL)使溶解，旋转蒸发形成 薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含银杏叶提取物0.5875g)和 lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度6CTC，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-80'C预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例27
以鼠妇镇痛肽为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0.5142g，司盘80: 0.3070g， 胆固醇0.4288g，加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL，乙醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含鼠妇镇痛肽0. 5875g) 和100mL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度60。C，置于3(TC恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 1加入冻干保护剂甘露 醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
实施例28
以鼠妇镇痛肽为药物，制备成类脂质体。取吐温80: 0.5142g，司盘80: 0.3070g， 胆固醇0.4288g,加入混合有机溶剂(二氯甲垸20mL,乙醇60mL)使溶解，旋转蒸 发形成薄膜。将干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入药物的溶液(含鼠妇镇痛肽0. 5875g) 和lOOmL磷酸盐缓冲液中，超声10min，将超声后的溶液中再加入40mL磷酸盐缓冲液， 水合温度60。C，置于30。C恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类 脂质体混悬液通过高压均质机。
按照类脂质体混悬液与冻干保护剂比值(mL : g)为10 : 0.8加入冻干保护剂甘 露醇，于-8(TC预冻24h，冷冻干燥24h，即得。
上述的鼠妇镇痛肽类脂质体粒径分布图见图6;
鼠妇镇痛肽脂类质体在PBS (p服.8)中的累计释放率见图7。
试验例
银杏叶类脂质体粒径分布图见图1;银杏叶类脂质体显微镜图见图2。以下试验表明本发明银杏叶提取物类脂质体(粒径0.05 2pm)的实施例，可以 延长银杏总黄酮的释放，采用透析法测定其累积释放度。以磷酸盐缓冲液(pH=6.8) 为释放介质，温度为37士rC，转速为75r/min。分别在10min， 20min， 30min， lh， 2h， 3h， 6h， 12h， 24h， 48h时测定银杏总黄酮的累积释放量。其在磷酸盐缓冲液(p^6. 8) 中12h内累计释放率达到80%以上，且可持续释放至48h (见图3)。
体内分布试验
本发明银杏叶提取物类脂质体与银杏叶片进行比较，大鼠灌胃给药后，测定大鼠 心脏、肝、脾、肾、脑及血液中银杏总黄酮的含量，探讨口服给予本发明后大鼠体内 的分布情况。
1. 实验材料
1.1实验动物Wistar雄性大鼠20只，体重200土20g，实验用饲料为鼠专用饲料， 所有实验动物及饲料均购于吉林大学白求恩医学院实验动物中心，合格证号 0010428。
1.2药品与试剂银杏叶提取物类脂质体，采用实例方法制备；槲皮素对照品，中国 药品生物制品检定所，批号10081-200406;山奈素对照品，中国药品生物制品检定
所，批号110861-200406;异鼠李素对照品，中国药品生物制品检定所，批号
110860-200406;银杏叶片(总黄酮醇苷9.6mg/片、萜类内酯2.4mg/片)，石家庄以岭 药业有限公司，批号080801。
1.3仪器BS224S电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；高效液相输液泵 (LC-10ATKP)，日本岛津公司；高效液相检测器(SPD-10AJ^)，日本岛津公司；N2000 色谱工作站，浙江大学智达信息工程有限公司；DY89-I型电动玻璃匀浆机，宁波新 芝科器研究所；Minispin型离心机，德国eppendorf公司。
2. 实验方法
2. 1动物分组及给药取体重为180 220g雄性大鼠，随机分为二组。 一组按5. 184mg (总黄酮醇苷)*kg—'的剂量灌胃给予GbEN冻干粉末，另一组给予等剂量的市售银杏 叶片。连续给药3天。
2.2组织及血液样品制备连续给药3天后，末次给药lh后，断头处死大鼠，取心、 肝、脾、肺、肾、脑，用生理盐水冲洗干净，用滤纸吸干，称重；精密称定后(其中 肝只取一部分，重量约为2g)置匀浆器中，加25y。HC12mL匀浆，将匀浆液置于50mL 圆底烧瓶中，加8mL甲醇，加热回流30min。放冷，6000r min—1离心5min，精密吸取上清液，蒸干，加甲醇200pL使溶解；于12000r'min—离心10min，精密吸取上清 液20pL，注入液相色谱仪，记录峰面积，计算各组织中总黄酮醇苷的含量。另取大 鼠血液2mL置试管中，加肝素抗凝，加25MHC1 2mL匀桨，将匀浆液置于50mL圆底 烧瓶中，加8mL甲醇，加热回流30min。放冷，6000r min—1离心5min，精密吸取上 清液，蒸干，加甲醇20(^L使溶解，于12000r *min—'离心10min，精密吸取20pL进 样，注入液相色谱仪，记录峰面积，计算血中总黄酮醇苷的含量。结果见表l。
表l大鼠体内各组织中总黄酮醇苷的含量(n=10)
组织及血液 GbEN组大鼠的组织分布 银杏叶片组大鼠的组织分布
(含量昭/mL) (含量吗/mL)
注:口服给予GbEN与市售银杏叶片比较，承为p〈0.05，"为pO.Ol，承"为p0.001
结论从表上可以看出，与银杏叶片相比，本发明银杏叶提取物类脂质体在大鼠 的肝的浓度显著降低，在血液、心脏、肺、肾中的含量显著升高，本发明银杏叶提取 物类脂质体能降低被肝组织巨噬细胞的吞噬，延长在循环组织的停留时间，增加在心
脏、肺和肾中的含量；尤其在脑部检测到银杏叶总黄酮醇苷，本发明银杏叶提取物类 脂质体能够通过血脑屏障。
0.3288±0.0052*** 0.5139±0.0018*** 0.2657±0.0040*** 0.5496±0.0066*** 0.4797±0.0088***
0.3401±0.0047 0.8179±0.0102***
0.0982±0.0178 0.6397±0.0162 0.2309±0.0084 0.2339±0.0036 0.1013±0.0028
0.6948±0.0146
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权利要求
1.一种类脂质体，其特征是由被载药物与载体按(1～68)∶100质量比构成，所述的载体为非离子表面活性剂和胆固醇，其摩尔比值1∶(0.5～1.5)。
2. 权利要求1所述类脂质体，其特征在于被载药类选自苷类、生物碱类、肽类、黄酮类、内酯类化合物任意一种或多种混合。
3. 如权利要求1所述的类脂质体，其特征在于非离子表面活性剂的HLB值为2 18。
4. 权利要求1所述类脂质体，其特征在于所述的非离子表面活性剂选自聚甘油烷烃醚、糖基二烃基醚、冠醚、酯类表面活性剂、聚氧乙烯基醚、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、卞泽、吐温、司盘、单(双)烷基聚丙 三醇醚、胆甾烯三氧乙烯醚、甘油单月桂酸酯中的一种或多种混合。
5. 如权利要求1所述的类脂质体，其特征在于还填加有二鲸蜡磷酸酯作稳定剂，与被载药物的质量配比为1 : (0 1.5)。
6. 如权利要求1所述的类脂质体的制备方法，包括以下步骤取非离子表面活性剂、胆固醇，加入有机溶剂使其溶解，旋转蒸发形成薄膜;将干燥的薄膜溶于乙醚中，加入被载药物溶液和磷酸盐缓冲液中， 超声，将超声后的溶液中再加入磷酸盐缓冲液，水合，置于3(TC恒温水 浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液；将类脂质体混悬液通过高压 均质机，得类脂质体。
7. 权利要求6所述类脂质体的制备方法，其特征在于有机溶剂选自 甲醇、二氯甲烷、乙醇、氯仿、乙醚中的一种或多种混合。
8. 权利要求6所述类脂质体的制备方法，其特征在于高压均质机压力为500bar 1000bar。
9. 权利要求6所述类脂质体的制备方法，其特征在于类脂质体混悬 液中加入冻干保护剂，其比例为10 : (0.6 1)mL g1，于-80。C预冻24h， 冷冻干燥24h，得类脂质体粉末。
10. 权利要求6所述类脂质体的制备方法，其特征在于按照类脂质 体混悬液与载体质量比为1 : (1 6);出风温度80。C 12(TC;进风温度 120°C 210°C;进料流量25 40mL . min—i，喷雾干燥，得类脂质体粉末。
全文摘要
本发明涉及一种类脂质体及其制剂的制备方法，是采用改良薄膜分散-匀化法、冷冻干燥法/喷雾干燥法制备类脂质体。处方组成为药物与载体的质量配比为1～68∶100，非离子表面活性剂(调节HLB值2～18)与胆固醇的摩尔比值1∶0.5～1.5，以及药物与稳定剂(二鲸蜡磷酸酯)的质量比值1∶0～1.5。该制备工艺包括制备空白类脂质体、均质化类脂质体、制备载药类脂质体及其混悬液，冷冻干燥/喷雾干燥制成类脂质体粉末。该发明类脂质体具有避免药物被肝组织网状内皮系统的吞噬，延长药物在体内的滞留时间，协助药物通过血脑屏障的能力。本发明类脂质体具有稳定性好，工艺简单，适合大工业生产的特点。
文档编号A61K9/127GK101612124SQ200910067289
公开日2009年12月30日 申请日期2009年7月15日 优先权日2009年7月15日
发明者孙黎黎, 孟庆繁, 张炜煜, 波 杨, 滕利荣, 王德利, 王贞佐, 逯家辉, 叶 金 申请人:吉林大学