一种治疗乳腺增生的药物组合物及其制备方法

专利名称：：一种治疗乳腺增生的药物组合物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物组合物及其制备方法，特别涉及一种治疗乳腺增生的药物组合物及其制备方法。乳腺疾病包括乳房发育不良、乳腺炎、乳腺增生、乳腺癌、乳腺纤维瘤、导管瘤等，据统计，乳腺病的发病率占成年女性的48%,若长期得不到治疗，容易引发乳腺癌。5060年代，我国乳腺疾病发病率为10%左右，8090年代上升到30%40%。癌变程度也呈上升趋势，5060年代癌变率为7.9/10万，8090年代为43.4/10万。其中乳腺增生病是中青年妇女常见病、多发病，是一种常见非炎性非肿瘤性疾病，其发病率占育龄妇女的40%左右，占全部乳房病的75%,是最常见的乳房疾病，其中约有2%4%的患者可发生囊性增生而癌变，故不少妇女患了此病后，迫切要求诊治和排除乳腺癌。因此，提高本病疗效至关重要。近年来，对乳腺增生病的实验研究越来越深入，也取得了不少成果，现代医学认为其与内分泌功能紊乱有关，以乳房疼痛和乳房肿块为主要特征。中医则认为乳腺增生病的发生总由肝郁气滞，或肝肾虚损，冲任失调，或痰凝血瘀而成，以乳房有形状大小不一的肿块，疼痛，与月经周期相关为主要表现的乳房病类疾病。本发明的一个目的在于公开一种治疗乳腺增生的药物组合物；本发明的另一个目的在于公开制备一种治疗乳腺增生的药物组合物的方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明药物组合物的原料药组成为
背景技术：
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发明内容柴胡12-18重量份延胡索12-18重量份王不留行12-18重量份白术12-18重量份香附12-18重量份茯苓12-18重量份山慈菇12-18重量份郁.金12-18重量份肉苁蓉2-18重量份2-18重量份。t份t份t份池池:份。7重量份当归19-26重量份皂角剌7-11重量份本发明药物组合物的原料药组成优选为:柴胡15重量份香附延胡索15重量份茯苓王不留行15重量份山慈菇白术15重量份郁金当归22.5重量份肉苁蓉皂角刺9重量份淫羊藿本发明药物组合物的原料药组成优选为柴胡14重量份香附延胡索17重量份茯苓王不留行14重量份山慈菇白术17重量份郁金当归19重量份肉苁蓉皂角刺10重量份淫羊藿本发明药物组合物的原料药组成优选为柴胡17重量份香附延胡索13重量份茯苓王不留行17重量份山慈菇白术13重量份郁金当归25重量份肉苁蓉皂角刺8重量份淫羊藿所述香附优选为醋制香附，王不留行优选为炒王不留行。取上述组合物原料药，加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床接受的剂型，包括但不限于丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。本发明药物组合物的制备方法包括如下步骤取一半量延胡索粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡、香3重量份7重量份7重〗7重二7重]t份t份t份t份t份〖份<附、白术、郁金、当归五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用e-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余延胡索及茯苓、王不留行、山慈菇、肉苁蓉、皂角刺、淫羊藿加6-10倍量水，煎煮l-3次，每次l一3小时，将每次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为1.01.1，加乙醇使含醇量达30_50%，静置40—55小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达40—60%,静置40—55小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.201.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经e-环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成临床接受的丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂、贴剂或冻干粉针剂。本发明药物组合物的制备方法优选如下取一半量延胡索粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡、香附、白术、郁金、当归五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用3-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余延胡索及其余茯苓、王不留行、山慈菇、肉苁蓉、皂角刺、淫羊藿加8倍量水，煎煮2次，每次2小时，将2次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为1.01.1，加乙醇使含醇量达40%,静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达50%，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.201.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经e-环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成临床接受的丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂、贴剂或冻干粉针剂。本发明药物组合物具有很好的调理冲任、疏肝解郁、散结止痛作用；具有抗炎、镇痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治疗妇女乳腺增生的作用；口服安全，在制剂上，工艺成熟，质量可控。本发明药物组合物能明显地抑制实验性乳腺增生大鼠乳头直径；对实验性乳腺增生大鼠乳头高度、乳房重量和体积具有抑制作用，对实验性乳腺增生大鼠乳腺腺泡直径、乳腺小叶平均直径、乳腺小叶腺泡数量增大和增多具有抑制作用，对实验性乳腺增生大鼠乳腺导管腔分泌物增多和导管上皮增生具有抑制作用，对大鼠慢性增生性炎症有抑制作用，综上，说明本发明药物组合物有抗小鼠急性炎症作用，并对小鼠热刺激引起的疼痛有镇痛作用。实验结果说明，本发明药物组合物具有抗炎、镇痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治疗妇女乳腺增生的作用。以上重量份与体积份的关系是克每毫升的关系。下面实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明实验例l药效学实验1.试验药物本药物组合物胶囊制剂0.38g/粒，相当于生药2.Olg(每克药粉相当于生药5.3g),由陕西中医学院药物研究所提供，批号20071201，以蒸馏水配成所需浓度的溶液。2.对照药和试剂乳癖消片，辽宁好护士药业(集团)有限责任公司国药准字Z21021823，批号070926;苯甲酸雌二醇，上海通用药业股份有限公司，批号070104;黄体酮，浙江仙琚制药股份公司，批号070402;氢化可的松注射液，西安利君制药有限责任公司，国药准字H61021633，批号070531;阿司匹林片，西安利君制药有限公司，国药准字H61021710，批号0712520。雌二醇、孕酮和人垂体泌乳素等测定试剂盒，天津九鼎医学生物工程有限公司，批号分别为TRG60806，TRG50804、TRG30804和TRG40804;雌激素受体(BA0345)、孕激素受体(BA2221)、DAB显色试剂盒(AR1022)和SABC(SA2005)试剂盒，武汉博士德生物工程有限公司。3.试验器材FM-2000Y免疫计数器，西安凯普机电有限责任公司；FA1004型电子天平，上海良平仪器仪表有限公司；HH-4数显恒温水浴锅，国华电器有限公司；DP71型-OLYMPUS光学显微镜(日本)。4.试验动物:ICR品系小白鼠，III级(SPF级)，雌性，体重1822g，质量合格证"SCXK(陕2007-001)";SD品系大白鼠，III级(SPF级)，雌性，体重200250g,质量合格证"SCXK(陕2007_001)"，由西安交通大学医学院实验动物中心提供。动物分笼饲养，食固体饲料，食水自由，词料由西安交通大学医学院实验动物中心提供。室温182(TC,相对湿度60%70%。5、统计处理进行组间比较t检验；自身比较的多次测量的方差分析;等级资料使用非参数检验(Mann-WhitneyU)分析。6、实验方法及结果(1)对乳腺增生模型大鼠的乳腺组织形态学的影响①对乳腺增生模型大鼠乳头直径、高度、乳房体积和重量的影响大鼠60只，雌性，随机分为6组，每组10只。第一组为正常对照组，给等容积蒸馏水；第二组为模型对照组，给等容积蒸馏水；第三组为阳性对照组，给乳癖消片O.96g/kg(成药)；第四、五、六组为本发明药物组合物组，分别给本发明药物组合物1.91、3.82、7.64g生药/kg。试验期间正常对照组大鼠给予等容积蒸馏水，除空白对照组外，其余各组大鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，每天1次，连续25天后改用黄体酮4mg/kg，每天1次，连续5天，在此基础上，用夹尾方式激怒大鼠，制成肝郁脾虚证乳腺增生病大鼠病理模型。然后用游标卡尺测量每只大鼠胸部第2对乳头直径，并开始灌胃给药l次/日，连续30天。实验过程中每天观察动物一般状况，于造模前、给药前、给药后15、30天分别称测量大鼠乳头直径。末次给药后24小时，测量第2对乳头直径、高度；以8mm打孔器取下第2对完整乳房，电子天平称重、计算乳腺体积(最大径X最小径X厚度)。结果见表l、2。表l本发明药物组合物对乳腺增生大鼠乳头直径的影响G±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>与正常对照组比较P〈0.01;与模型对照组比较P<0.05，P<0.01由表1可见，造模后模型对照组和各给药组乳头直径明显增大，与正常对照组比较有显著性的差异(P〈0.01);本发明药物组合物明显地抑制实验性乳腺增生大鼠乳头直径，各给药组与给药前自身比较，各剂量组均有显著性差异(P〈0.05或P〈0.01)，给药15天后大、中剂量组对乳腺增生大鼠乳头直径增大具有抑制作用，给药30天后抑制作用更显著，大、中、小剂量组与给药前比较均有显著性差异((P〈0.05或P〈0.01)。说明本发明药物组合物对实验性乳腺增生大鼠乳头直径增大具有抑制作用。阳性对照药乳癖消片也同样具有抑制作用。表2本发明药物组合物对乳腺增生大鼠乳头高度、乳房重量和体积的影响G土s)组别剂量动物数乳头高度(咖)乳房重量享L房体积(只)(mg)(mm3)正常对照组101.13±0.1963.10±14.33**83.19±18.25"模型对照组101.79±0.23109.40±28.26193.48±20.85乳癖消片0.9691.44±0.22"79.33±17.57*119.04±40.40"本发明药物组合物大剂量7.64101.37±0.20"78.00±14.28**110.88±26.6(T本发明药物组合物中剂量3.82101.43±0.21**88.70±11.31'127.31±32.04**本发明药物组合物小剂量1,91101.54±0.3385.50±17.35'151.57±36.57**与正常对照组比较，〈0.01，与模型对照组比较>〈0.05，**P〈0.01由表2可见，本发明药物组合物明显地抑制实验性乳腺增生大鼠乳头高度、乳房重量和体积，与模型对照组比较，中、大剂量组的乳头高度均有显著性差异(P<0.01)，三个剂量组的乳房重量和体积均有显著性差异(P<0.05或P〈0.01)。说明本发明药物组合物对实验性乳腺增生大鼠乳头高度、乳房重量和体积具有抑制作用。阳性对照药乳癖消片也同样具有抑制作用。②对乳腺增生模型大鼠乳腺腺泡直径、数量和分泌物的影响分组、造模和给药方式与上述相似，末次给药后24小时，乙醚麻醉下手术，取胸部第3对乳房的乳腺，固定于10%中性福尔马林溶液内。实验时将乳腺组织脱水、透明、包埋、切片，OLYMPUS光学显微镜下观察其病理形态学变化，利用图像采集软件DPController采集图像，图像分析软件IPP进行乳腺腺泡直径、乳腺小叶平均直径、乳腺小叶数测量和分析。腺泡和导管腔分泌物按分泌物量分4级"一"为腔内无分泌物；"+"为有分泌物，占腔内体积l/4以下；"++"为分泌物占腔内体积的l/4一l/2;"+++"为有分泌物，占腔内体积l/2以上。导管上皮增生按增生程度分4级"一"为无增生；"+"为上皮细胞层次2层；"++"为导管上皮增生3层以上或呈乳头状突起；"+++"为实性增生，上皮细胞充满腔内。结果表3、4。表3本发明药物组合物对乳腺增生大鼠乳腺腺泡直径、数量的影响(；士s)组别剂量动物数乳腺腺泡直径乳腺小叶腺泡数乳腺小叶平均直径(生药g/kg)(只)(nra)量(个)正常对照组913.83±4.676.22±2.49據86.19±19.68助模型对照组824.81±6.2416.38±3.99169.98±29.95乳癖消片0.96918.98±5.61*9.44±3.32**141.98±36.33本发明药物组合7.641014.33±3.05"9.40±3.11"117.22±19.89"物大剂量本发明药物组合物3.82914.11±3.52"12.00±4.18*144.04±44.67中剂量本发明药物组合物1.91818.91±8,24'11.63±5.55*149.10±21.14小剂量与正常对照组比较，〈0.01，与模型对照组比较卞<0.05，**P〈0.01由表3可见，本发明药物组合物明显地抑制实验性乳腺增生大鼠乳腺腺泡直径、乳腺小叶平均直径，减少乳腺小叶腺泡数量。与模型对照组比较，各剂量组对乳腺腺泡直径、乳腺小叶腺泡数量抑制作用均有显著性差异(P〈0.05或P〈0.01)，大剂量组对乳腺小叶平均直径抑制作用有显著性差异(P〈0.01)。说明本发明药物组合物对实验性乳腺增生大鼠乳腺腺泡直径、乳腺小叶平均直径、乳腺小叶腺泡数量增大和增多具有抑制作用。阳性对照药乳癖消片对乳腺腺泡直径、乳腺小叶腺泡数量也同样具有抑制作用。表4本发明药物组合物对乳腺增生大鼠导管分泌物和上皮细胞增生的影响组别剂量动物数分泌物导管上皮增生(只)_++++++P—++++++P正常对照组9110*"7110**模型对照组803410251乳癖消片0.9691341171o料本发明药物组合物大剂量7.64102710*3700承求本发明药物组合物中剂量3.82925021440本发明药物组合物小1.9180332.0530剂量与正常对照组比较,〈0.01，与模型对照组比较卞<0.05，**P<0.0112由表4可见，本发明药物组合物明显地抑制实验性乳腺增生大鼠乳腺导管腔分泌物和导管上皮的增生。与模型对照组比较，大剂量组均有显著性差异(P〈0.05或P〈0.01)，说明本发明药物组合物对实验性乳腺增生大鼠乳腺导管腔分泌物增多和导管上皮增生具有抑制作用。阳性对照药乳癖消片仅对导管上皮增生具有抑制作用。(2)抗炎试验①大鼠慢性增生性炎症试验大鼠50只，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积蒸馏水；第二组为阳性对照组，给氢化可的松注射液皮下注射20mg/kg;第三、四、五组为本发明药物组合物组，分别给本发明药物组合物1.91、3.82、7.64g生药/kg。在乙醚浅麻下，剪毛消毒，于下腹部正中切开皮肤，将重50mg的灭菌棉球植入两侧腹股沟皮下，然后缝合皮肤，消毒，整个过程为无菌操作。从手术前3天开始按2ml/100g体积灌胃给药，每天1次，连续10天。第ll天处死大鼠，小心剥离取出棉球及包裹的肉芽组织，6(TC干燥12小时后称重，减去原棉球重量即为肉芽组织重量，结果表示为每100g体重所含肉芽组织重量(双侧)。以肉芽组织重量代表慢性炎症程度，结果见表5。表5本发明药物组合物对大鼠慢性增生性炎症的影响(；士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>与阴性对照组比较**P<0.01由表5可见，本发明药物组合物抑制棉球剌激的大鼠肉芽组织增生，减轻肉芽组织的重量，与阴性对照组比较，中、大剂量组有显著性差异(P〈0.01),说明本发明药物组合物对大鼠慢性增生性炎症有抑制作用。阳性对照药氢化可的松能显著性抑制棉球剌激的大鼠肉芽组织增生。②小鼠急性炎症的试验(小鼠耳壳肿胀法)小鼠50只，雌性，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积蒸馏水；第二组为阳性对照组，给阿司匹林片0.2g/kg;第四、五、六组为本发明药物组合物组，分别给本发明药物组合物2.76、5.52、11.04g生药/kg。每天以0.2ml/10g体积灌胃给药l次/日，连续7天。末次给药后0.5小时在每只动物左耳廓内外以二甲苯均匀涂抹一遍(约0.2ml)，以引起耳廓急性渗出性炎症，每只动物右耳廓不加处理作为自身对照。致炎30min后处死小鼠，用直径9mm的打孔器取下双侧耳片，分别称其重量，以两耳片重量之差作为肿胀度，按下式计算抑制率。结果见表6。对照组肿胀度_给药组肿胀度抑制率(%)xlOO对照组肿胀度表6本发明药物组合物对小鼠急性炎症的影响G士s)组别剂量(g/kg)动物数(只)肿胀度(mg)抑制率(％)阴性对照组1011.81±1.86阿司匹林片0.2104.48±1.23"62.07本发明药物组合物大剂量11.04108.78±1.23**25.66本发明药物组合物中剂量5.521010.37±2.2012.19本发明药物组合物小剂量2.761010.89±1.817.79与阴性对照组比较林P〈0.01由表6可见，本发明药物组合物抑制二甲苯刺激小鼠耳部诱发的急性渗出性炎症反应，使肿胀度减小，与阴性对照组比较，大剂量组有显著性差异(p〈o.oD，说明本发明药物组合物有抗小鼠急性炎症作用。阳性对照药阿司匹林片也能抑制二甲苯刺激小鼠耳部诱发的急性炎症反应。(3)镇痛试验①物理剌激引起的镇痛试验(热板法)用恒定水温55"C，以小鼠舔后足作为疼痛表现，从小鼠接触热板到舔后足所需时间为痛阈指标。预先测定二次痛阈，取平均痛阈为1030s的小鼠参加实验。取雌性小鼠50只，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积蒸馏水；第二组为阳性对照组，给阿司匹林片0.2g/kg，第三、四、五组为本发明药物组合物小、中、大剂量组，分别给本发明药物组合物2.76、5.52、11.04g生药/kg。各药物组每天.以O.2ml/10g体积灌胃给药l次，连续7天。给药前及灌胃给药后0.5、1、1.5、2、4小时(腹腔注射30min后)分别测定小鼠痛阈，如痛阈大于60s，以60s计算。结果见表7。表7本发明药物组合物对小鼠痛阈的影响G土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>物小剂量_给药前后自身比较*P〈0.05，**P〈0.01由表7可见，本发明药物组合物可轻度提高小鼠痛阈，给药前后自身比较，中剂量30分钟、大剂量3090分钟给药后有显著性差异(P〈0.05或P〈0.01),说明本发明药物组合物对小鼠热刺激引起的疼痛有镇痛作用。阳性对照药阿司匹林片也能提高小鼠痛阈。②化学刺激引起的镇痛试验(扭体法)小鼠50只，雌性，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给等容积蒸馏水；第二组为阳性对照组，给阿司匹林片0.2g/kg;第三、四、五组为本发明药物组合物小、中、大剂量组，分别给本发明药物组合物2.76、5.52、11.04g生药/kg。各组皆以0.2ml/10g体积灌胃给药，每天1次，连续7天。末次给药lh后腹腔注射iy。冰醋酸溶液0.lml/10g，观察记录15min内小鼠扭体反应(小鼠腹部贴地、内凹、伸展后肢、扭曲)次数，结果见表8。表8本发明药物组合物对小鼠扭体反应的影响G土s)组别剂量动物数扭体反应扭体反应率(g/kg)(只)(次/15min))阴性对照组1020.9±5.36阿司匹林片0.2102.5士0.97"88.04本发明药物组合物大剂量11.04103.5±1.27—83.25本发明药物组合物中剂量5.52105.8士1.93"72.25本发明药物组合物小剂量2.76109.7士2.2广53.59与阴性对照组比较**P<0.01由表8可见，本发明药物组合物明显地抑制醋酸剌激的小鼠扭体反应，与阴性对照组比较，各剂量组均有显著性差异(P〈0.01)，说明本发明药物组合物对醋酸刺激的疼痛有较强的镇痛作用。阳性对照药阿司匹林片也能抑制醋酸刺激的小鼠扭体反应。7、试验结论本发明药物组合物灌胃给药，明显抑制醋酸刺激的小鼠扭体反应，对小鼠热刺激引起的疼痛有镇痛作用；抑制二甲苯刺激小鼠耳部诱发的急性炎症反应；抑制乳腺增生模型大鼠乳头直径、乳头高度、乳房重量、乳房体积、乳腺腺泡直径、乳腺小叶平均直径、乳腺小叶腺泡数量、乳腺导管腔分泌物的增多和导管上皮的增生；抑制乳腺增生模型大鼠雌二醇受体和孕酮受体表达和血清雌二醇浓度，提高血清孕酮水平，并增加乳腺增生大鼠的胸腺系数；抑制乳腺增生模型大鼠全血粘度、血浆粘度。结果说明，本发明药物组合物具有抗炎、镇痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治疗妇女乳腺增生的作用。实验例2本发明药物组合物制剂毒性研究一急性毒性试验急性毒性研究结果表明，本发明药物组合物小鼠灌胃给药后，未发现明显急性毒性，小鼠一日最大给药量为540.6g生药/kg，相当于临床成人每日用量1790倍。.二长期毒性试验用本发明药物组合物大、中、小三个剂量(42.45、14.15、4.72g生药/kg/日，分别相当于成人用量的140.35、46.84、15.61倍)给大鼠连续灌胃六个月，对大鼠的一般状况、血液学、血液生化学、尿常规、心电图、系统解剖、脏器系数和组织病理学均无明显影响，未发现毒性反应，恢复期亦无延迟性毒性反应，提供大鼠无毒性反应剂量为42.45g生药/kg/日。实验例3制剂优选工艺研究一、挥发油包合工艺研究1、试验设计本工艺拟采用e-环糊精为包合材料，以饱和水溶液法，选取对e-环糊精包合的影响大如P-环糊精与水之比、3-环糊精与油之比、包合温度和搅拌时间为考察因素，并结合预试验和生产实际，每个因素选择3个水平，用L9(34)正交表安排试验，并以挥发油转移率与包合物收率的综合评分为考察指标。油转移率是衡量包合效果的重要指标，油转移率越高，包合效果越好，可作为主要筛选指标，权重系数定为0.7。收得率在实际生产中也有意义，也作为次要筛选指标，权重系数定为O.3。因素水平见表9。表9因素水平表因素水平P-环糊精油(g/ni1)e-环糊精:水(g/g)包合温度('C)搅拌时间(h)ABcD14:11:10601.026:11:20501.538:11:30402.0注综合评分=(0.7X油转移率/最大油转移率)+(0.3X包合物收率/最大包合物收率)2、试验方法与结果称取柴胡、白术、香附、郁金各lkg及当归1.5kg，共5.5kg，用上述优选的最佳工艺提取挥发油，备用。根据表4选择U(34)正交设计、安排试验，采用饱和水溶液法，取一定量P-环糊精共9份，分别加入相应量的水，加热溶解制成饱和溶液，自然冷却至一定温度，置平底烧瓶内，以恒定的转速(1000转/分钟)搅拌,缓缓滴入相应量的挥发油，搅拌一定时间(从滴加完挥发油开始计时)，然后置冰箱冷藏放置24h，抽滤至干，用少量蒸馏水洗涤，40"C真空干燥3h，即得白色疏松状包合物粉末，称重，用下式计算包合物收率;同时，取各包合物10g，精密称定，置500ml烧瓶中，加水300ml连接挥发油测定器，按《中国药典》2005版(一部)附录XD(附录57)项下方法提取挥发油。放置lh后，读取挥发油的体积，按包合物中实际包油含量，用下式计算即得油转移率。结果见表IO。油转移率(％)二包合物中实际含油量(ml)/投油量(ml)X10(F。包合物收率(％)二包合物重(g)/(P-环糊精+挥发油)重(g)X1009()表10正交试验表及结果因素试验号e-环糊精:油e-环糊精:水包合温度搅拌时间油转移率包合物收率综合(g/ml)A(g/g)B('C)C(h)D(%)(%)评分111■1164.571.60.7732122266.275.80.8023133374.372.30.8554212381.774.00.9205223183.676.90.9466231278.078.90.908313281.985.30.9628321386.683.30.9939332179.977.50.918、2.4302.6552.6742.637k22.7742.7412.6402.672G=8.077k32.8732.6812.7632.768CT=7,2487R0.14770.02870.0410.04373、方差分析.将正交实验结果进行方差分析，结果见表ll。_表11挥发油提取正交试验方差分析表_误差来源_^_^_^_^_^_A0.0360020.0180028.125<0.05B误差0.0012620.00064C0.0026520.001332.078〉0.05D_0.00303_^_0.00152_2.375_〉0.05注F。.。5(2，2)=19.00，F0.01(2，2)=99.00以挥发油转移率与包合物收率的综合评分为考察指标，由表10中极差R值大小显示，各因素作用主次为A>D>C>B。对各因素进行直观分析，A因素K3>K2〉K1;B因素K2>K3〉K1;C因素K3〉Id〉K2;D因素K3〉K2〉Id。而表ll方差分析结果表明A因素各水平之间差异具有显著性(P<0.05)，B、C、D因素各水平之间差异无显著性(P>0.05)，故挥发油e-环糊精包合的最佳工艺为A3B2C3D3，即挥发油与e-环糊精比例为1:8，P-环糊精与水的比例为1:20，包合温度为4(TC，搅拌时间2小时。4、包合工艺验证实验精密量取挥发油5ml，按优选最佳包合工艺条件进行验证实验，结果测得包合物的收得率为78.2%，挥发油的转移率为84.7%。结果表明，最佳工艺具有可行性。5、包合物包合效果考察O)薄层色谱鉴别法取挥发油0.5ml，，加2ml乙醚溶解制成供试液A;取包合物8g加乙醇25ml，超声处理15分钟，滤过，滤液置4(TC水浴上蒸干，残渣加乙醚lml，溶解，取上清液作供试液B;取3-环糊精4g，加乙醚15ml，超声处理15分钟，制成供试液C;取包合物8g，加乙醚25ml，超声处理15分钟，滤过，滤液置4(TC水浴上蒸干，残渣加乙醚lml，溶取上清液作供试液D。吸取上述各供试液，分别点样于硅胶G薄层板，以醋酸乙酯-正己烷-三氯乙烷(1:9:5)为展开剂，展开，取出晾干，喷以5%香草醛浓硫酸溶液，在105'C加热至斑点显色清晰。结果，供试液A和B图谱挥发油在包合前后斑点几乎一致，说明成分也未发生变化，而供试液C和D图谱未见斑点，说明挥发油已形成稳定的包合物。②紫外可见分光光度法将上述挥发油、挥发油和P-环糊精混合物、0-环糊精、挥发油e-环糊精包合物的石油醚溶液做紫外扫描，扫描范围200400nm。结果表明，该挥发油已与P-环糊精形成包合物，纯挥发油的紫外吸收峰在其P-环糊精包合物中己消失。综上所述，本工艺采用P-环糊精对其挥发油进行包合，其工艺稳定、可行，能达到预期目的。下述实施例均能实现上述实验例的效果。具体实施例方式实施例l:本发明药物组合物丸剂柴胡15kg香附15kg延胡索15kg茯苓15kg王不留行15kg山慈菇15kg白术15kg郁金15kg当归22.5kg肉苁蓉15kg皂角刺9kg淫羊藿15kg;取7.5kg延胡索粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡15kg、香附15kg、白术15kg、郁金15kg、当归22.5kg五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用3-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余的延胡索7.5kg及茯苓15kg、王不留行15kg、山慈菇15kg、肉灰蓉15kg、皂角刺9kg、淫羊藿15kg加8倍量水，煎煮2次，每次2小时，将每次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为l.O，加乙醇使含醇量达40%，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达50%，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.20的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成丸剂。实施例2:本发明药物组合物片剂柴胡14kg香附17kg延胡索17kg茯苳13kg王不留行14kg山慈菇17kg白术17kg郁金13kg当归19kg肉苁蓉17kg皂角刺10kg淫羊藿13kg;取延胡索8.5kg粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡14kg、香附17kg、白术17kg、郁金13kg、当归19kg五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用P-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余的延胡索8.5kg及茯苓13kg、王不留行14kg、山慈菇17kg、肉灰蓉17kg、皂角刺10kg、淫羊藿13kg加6倍量水，煎煮3次，每次1小时，将每次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为1.1，加乙醇使含醇量达30%,静置40小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达60%，静置40小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经0-环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成片剂。实施例3:本发明药物组合物胶囊剂柴胡17kg延胡索13kg王不留行17kg白术13kg当归25kg皂角刺8kg香附13kg茯苳17kg山慈菇13kg郁金17kg肉灰蓉13kg淫羊藿17kg;取延胡索6.5kg粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡17kg、香附13kg、白术13kg、郁金17kg、当归25kg五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用e-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余的延胡索6.5kg及茯苓17kg、王不留行17kg、山慈菇13kg、肉灰蓉13kg、皂角刺8kg、淫羊藿17kg加10倍量水，煎煮3次，每次3小时，将每次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.1，加乙醇使含醇量达50%,静置50小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达50%，静置50小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成胶囊剂。实施例4:本发明药物组合物颗粒剂柴胡15kg延胡索15kg王不留行15kg白术15kg当归22.5kg皂角刺9kg香附15kg茯苳15kg山慈菇15kg郁金15kg肉苁蓉15kg淫羊藿15kg;取上述原料药，加入常规辅料按照常规工艺制成颗粒剂。21实施例5:本发明药物组合物口服液柴胡14kg香附17kg延胡索17kg茯苓13kg王不留行14kg山慈菇17kg白术17kg郁金13kg当归19kg肉苁蓉17kg皂角刺10kg淫羊藿13kg;取上述原料药，加入常规辅料按照常规工艺制成口服液。实施例6:本发明药物组合物冻干粉针剂柴胡17kg延胡索13kg王不留行17kg白术13kg当归25kg皂角剌8kg香附13kg茯苓17kg山慈菇13kg郁金17kg肉苁蓉13kg淫羊藿17kg;取上述原料药，加入常规辅料按照常规工艺制成冻干粉针剂,2权利要求1、一种治疗乳腺增生的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为柴胡12-18重量份香附12-18重量份延胡索12-18重量份茯苓12-18重量份王不留行12-18重量份山慈菇12-18重量份白术12-18重量份郁金12-18重量份当归19-26重量份肉苁蓉12-18重量份皂角刺7-11重量份淫羊藿12-18重量份。2、如权利要求1所述的药物l药组成为柴胡15重量份延胡索15重量份王不留行15重量份白术15重量份当归22.5重量份皂角刺9重量份物，其特征在于该药物组合物的原料香附15重量份茯苳15重量份山慈菇15重量份郁金15重量份肉苁蓉15重量份淫羊藿15重量份。3、如权利要求1所述的药物乡」药组成为柴胡14重量份延胡索17重量份王不留行14重量份白术17重量份当归19重量份皂角刺10重量份物，其特征在于该药物组合物的原料香附17重量份茯苓13重量份山慈菇17重量份郁金13重量份肉苁蓉17重量份淫羊藿13重量份。4、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料组成为5、如权利要求1-4任一所述的药物组合物，其特征在于所述香附为醋制香附，王不留行为炒王不留行。6、如权利要求1-4任一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为取一半量延胡索粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡、香附、白术、郁金、当归五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用0-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余延胡索及茯苓、王不留行、山慈菇、肉苁蓉、皂角刺、淫羊藿加6-10倍量水，煎煮l-3次，每次l一3小时，将每次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为1.01.1，加乙醇使含醇量达30—50%，静置40—55小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达40—60%，静置40—55小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.201.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经e-环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成临床接受的丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂、贴剂或冻干粉针剂。柴胡延胡索王不留行白术当归皂角刺17重i13重i17重|13重j25重i8重量:份:份份份份香附13重量份茯茶17重量份山慈菇13重量份郁金17重量份肉苁蓉13重量份淫羊藿17重量份。7、如权利要求5所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为取一半量延胡索粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡、香附、白术、郁金、当归五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用P-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余延胡索及茯茶、王不留行、山慈菇、肉苁蓉、皂角刺、淫羊藿加6-10倍量水，煎煮l-3次，每次l一3小时，将每次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为1.01.1，加乙醇使含醇量达30—50%，静置40—55小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达40—60%，静置40—55小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.201.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成临床接受的丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂、贴剂或冻干粉针剂。8、如权利要求6所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为取一半量延胡索粉碎，过100目筛，得延胡索细粉，备用；取柴胡、香附、白术、郁金、当归五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用3-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余延胡索及其余茯苓、王不留行、山慈菇、肉苁蓉、皂角刺、淫羊藿加8倍量水，煎煮2次，每次2小时，将2次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为1.01.1，加乙醇使含醇量达40%，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达50%，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.201.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经e-环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成临床接受的丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂、贴剂或冻干粉针剂。9、如权利要求7所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为取一半量延胡索粉碎，过IOO目筛，备用；取柴胡、香附、白术、郁金、当归五味药材蒸馏提取挥发油，收集挥发油，挥发油用0-环糊精包合，备用，蒸馏后的水溶液另器收集；将药渣、剩余延胡索及其余茯苓、王不留行、山慈菇、肉苁蓉、皂角刺、淫羊藿加8倍量水，煎煮2次，每次2小时，将2次煎液与上述蒸馏后的水溶液合并，滤过，滤液减压浓縮至相对密度为1.01.1，加乙醇使含醇量达40%，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，再加乙醇使含醇量达50%，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.201.25的稠膏，加入延胡索细粉，真空干燥，粉碎，制粒，干燥后与经e-环糊精包合后的挥发油混合，经常规工艺加入常规辅料制成临床接受的丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂、贴剂或冻干粉针剂。10、如权利要求l-4任一所述的药物组合物在制备治疗乳腺增生的药物中的应用。11、如权利要求5所述的药物组合物在制备治疗乳腺增生的药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种治疗乳腺增生的药物组合物及其制备方法。该药物组合物由柴胡、香附、延胡索、茯苓、王不留行、山慈菇、白术、郁金、当归、肉苁蓉、皂角刺、淫羊藿组成，该组合物的制备方法中采用蒸馏提取挥发油、包合、煎煮、减压浓缩、干燥等步骤，最终加入常规辅料，经常规方法，制成临床接受的剂型。实验表明该药物组合物具有抗炎、镇痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治疗妇女乳腺增生的作用。文档编号A61K36/88GK101461926SQ200910076680公开日2009年6月24日申请日期2009年1月15日优先权日2009年1月15日发明者慧郁申请人:慧郁