专利名称：纳米颗粒及其制备方法
纳米颗粒及其制备方法
技术领域：
本发明涉及药物载体领域，尤其涉及一种纳米颗粒及其制备方法。
背景技术：
聚合物纳米颗粒和纳米脂质体为代表的两类主流纳米载体能高效包裹和传输药 物、基因等，成为各国科学家的研究热点。聚乙交酯丙交酯(PLGA)、聚乳酸、聚己内酯等聚 合物纳米颗粒具有生物相容性性好、生物降解可控且降解产物毒性低、易实现靶向控制释 放等优点，日益受到青睐，部分产品已投入市场和临床实验。纳米脂质体具有磷脂双分子 层的生物膜结构，具有极好的亲水性、亲脂性和天然的靶向性、长效性、包容性等特性，且无 毒、无免疫原性、吸收速度快、生物利用度高、易于表面功能化，应用前景十分广阔。但聚合 物纳米颗粒半衰期短，引入亲水性聚合物聚乙二醇(PEG)进行修饰也不能有效得到解决， 同时颗粒易团聚等日益构成聚合物纳米颗粒开发应用的技术瓶颈。纳米脂质体也存在明显 缺陷，对强疏水性的成分包封率低、制备纯化需要多步操作也是其一直未能解决的难题。
发明内容
基于此，有必要提供一种半衰期适中、不易团聚、对强疏水性的成分包封率高、制 备纯化方便的纳米微粒，并且有必要提供一种该纳米颗粒的制备方法。 —种纳米颗粒，聚乙交酯丙交酯(PLGA)处于中心作为内核，磷脂以单层环绕于 PLGA内核表面，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基(DSPE-PEG-C00H)穿插于所述的 单层磷脂中作为外壳。 优选的，纳米微粒的直径为80-250nm。 —种上述纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤 (1)、取PLGA溶于乙氰中，得到PLGA乙氰溶液； (2)、移取磷脂、DSPE-PEG-COOH溶于乙醇水溶液中，并搅拌加热，得到混合乙醇水 溶液； (3)、将所述的PLGA乙氰溶液逐滴加至所述的混合乙醇水溶液中反应，搅拌，即可
得到PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。优选的，PLGA乙氰溶液浓度为l-5mg/ml。 优选的，磷脂为大豆卵磷脂或脑磷脂。 优选的，磷脂和DSPE-PEG-COOH质量比为4 : 1。 优选的，乙醇水溶液浓度为4% 。 优选的，加热温度为65t:。 优选的，PLGA乙氰溶液与混合乙醇水溶液体积比为1 : 1.5-6。 优选的，PLGA乙氰溶液与混合乙醇水溶液的反应时间为2小时，反应温度为恒温
65°C。 磷脂、DSPE-PEG-C00H、 PLGA具有良好的生物相容性，可生物降解并通过正常的生理途径吸收或排出体外。疏水性PLGA内核能包载疏水性药物，同时可控制药物在体内缓慢释放。磷脂环绕于PLGA表面形成的亲水性单层结构使颗粒能够避免免疫系统的识别并增强颗粒系统循环的半衰期。DSPE-PEG-COOH穿插于单层磷脂中提供PEG外壳，从而使得颗粒具备空间稳定性、静电稳定性以及长循环等特点，不易团聚，同时羧基易于交联抗体、肽、探针等配体，从而使得颗粒具有靶向性。此外，该纳米颗粒的制备方法简便易行，便于操作推广。
具体实施方式
纳米颗粒以聚乙交酯丙交酯(PLGA)为内核，磷脂环绕于PLGA表面，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基(DSPE-PEG-COOH)穿插于单层磷脂中提供PEG外壳。其制备方法主要是PLGA、磷脂、DSPE-PEG-COOH通过一步纳米沉淀法自组装成PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。首先取适量的PLGA溶于乙氰中，得到PLGA乙氰溶液，浓度范围控制在l-5mg/ml ;再将磷脂、DSPE-PEG-COOH以8 : 2的质量比溶于4%乙醇水溶液中，并搅拌加热至65。C，从而得到混合乙醇水溶液；然后将PLGA乙氰溶液逐滴加至上述混合乙醇水溶液中，加入的乙氰溶液与混合乙醇水溶液体积比为1 : 1.5-6，在65t:条件下连续搅拌2小时，期间允许溶剂挥发，即可得到PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。 PLGA具有生物可降解的特性，易于包裹疏水性成分，被选择作为疏水性的内核；磷脂以单层环绕于疏水的PLGA内核表面；DSPE-PEG-COOH穿插于单层磷脂中提供PEG外壳，使得颗粒具备空间稳定性、静电稳定性以及长循环等特点，同时羧基能交联抗体、肽、探针等配体。 下面通过具体的实施例进一步说明上述PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒的制备方法。实
施例中磷脂选用大豆卵磷脂，但在具体制备过程中还可以选用脑磷脂。
实施例1 : (1)、取适量的PLGA溶于乙氰中，得到PLGA乙氰溶液，浓度为2mg/ml ; (2)、取0. 06mg DSPE-PEG_C00H、0. 24mg大豆卵磷脂，加入至3ml 4%乙醇水溶液
中，加热搅拌至65°C ，得到混合乙醇水溶液； (3)、将1ml PLGA乙氰溶液逐滴加至3ml上述混合乙醇水溶液中，65。C条件下连续搅拌2小时，期间允许溶剂挥发，即得平均直径为80-250nm的PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。
实施例2 : 将1ml PLGA乙氰溶液逐滴加至1. 5ml混合乙醇水溶液中，其他同实施例1 ，最终得到平均直径为80-250nm的PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。
实施例3 : 将1ml PLGA乙氰溶液逐滴加至6ml混合乙醇水溶液中，其他同实施例1 ，最终得平均直径为80-250nm的PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。
实施例4 : 取适量的PLGA溶于乙氰中，得到PLGA乙氰溶液，浓度为lmg/ml，其他同实施例1，最终得到平均直径为80-250nm的PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。
实施例5: 取适量的PLGA溶于乙氰中，得到PLGA乙氰溶液，浓度为5mg/ml，其他同实施例1，最终得到平均直径为80-250nm的PLGA-磷脂-PEG纳米颗粒。 磷脂、DSPE-PEG-COOH、 PLGA具有良好的生物相容性，可生物降解并通过正常的生理途径吸收或排出体外。疏水性PLGA内核能包载疏水性药物，同时可控制药物在体内缓慢释放。磷脂环绕于PLGA表面形成的亲水性单层结构使颗粒能够避免免疫系统的识别并增强颗粒系统循环的半衰期。DSPE-PEG-COOH穿插于单层磷脂中提供PEG外壳，从而使得颗粒具备空间稳定性、静电稳定性以及长循环等特点，不易团聚，同时羧基易于交联抗体、肽、探针等配体，从而使得颗粒具有靶向性。此外，该纳米颗粒的制备方法简便易行，便于操作推广。 以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
权利要求
一种纳米颗粒，其特征在于，包括聚乙交酯丙交酯、磷脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基，聚乙交酯丙交酯处于中心作为内核，磷脂以单层环绕于聚乙交酯丙交酯内核表面，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基穿插于所述的单层磷脂中作为外壳。
2. 如权利要求1所述的纳米微粒，其特征在于，纳米微粒的直径为80-250nm。
3. —种纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤(1) 、取聚乙交酯丙交酯溶于乙氰中，得到聚乙交酯丙交酯乙氰溶液；(2) 、移取磷脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基溶于乙醇水溶液中，并搅拌加热，得到混合乙醇水溶液；(3) 、将所述的聚乙交酯丙交酯乙氰溶液逐滴加至所述的混合乙醇水溶液中反应，搅拌，即可得到聚乙交酯丙交酯_磷脂_聚乙二醇纳米颗粒。
4. 如权利要求3所述的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的聚乙交酯丙交酯乙氰溶液浓度为l-5mg/ml。
5. 如权利要求3所述的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的磷脂为大豆卵磷脂或脑磷脂。
6. 如权利要求3所述的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的磷脂和所述的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基质量比为4 : i。
7. 如权利要求3所述的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的乙醇水溶液浓度为4%。
8. 如权利要求3所述的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的加热温度为65°C。
9. 如权利要求3所述的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的聚乙交酯丙交酯乙氰溶液与所述的混合乙醇水溶液体积比为1 : 1.5-6。
10. 如权利要求3所述的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的聚乙交酯丙交酯乙氰溶液与所述的混合乙醇水溶液的反应时间为2小时，反应温度为恒温65°C。
全文摘要
本发明涉及一种纳米颗粒及其制备方法，其中聚乙交酯丙交酯(PLGA)处于中心作为内核，磷脂以单层环绕于PLGA内核表面，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基(DSPE-PEG-COOH)穿插于单层磷脂中作为外壳。磷脂、DSPE-PEG-COOH、PLGA具有良好的生物相容性，并且能包载疏水性药物，控制药物在体内缓慢释放。磷脂环绕于PLGA表面能使颗粒能够避免免疫系统识别而增加其循环半衰期，PEG外壳使得颗粒具备空间稳定性、静电稳定性以及长循环等特点，不易团聚，同时羧基易于交联抗体、肽、探针等配体，从而使得颗粒具有靶向性。该纳米颗粒的制备方法简便易行，便于操作推广。
文档编号A61K9/16GK101708162SQ20091018881
公开日2010年5月19日 申请日期2009年12月10日 优先权日2009年12月10日
发明者蔡林涛, 贾冬雪, 郑明彬, 龚萍 申请人:深圳先进技术研究院