专利名称：猪牙花乙醇提取物的制剂工艺和抑菌作用的制作方法
技术领域：
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及猪牙花乙醇提取物的制剂工
艺和抑菌作用。本发明产品对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有不 同程度的抑制作用，可开发为天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的 各种形式的产品。
背景技术：
猪牙花(Erythroni咖 j即omcum Decne.)为百合禾斗(Xiliaceae)猪牙花属 (Erythronium)多年生草本植物，生于林下湿地。分布于我国东北地区，朝鲜、日本也有分 布。 金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌等广泛分布于自然界，常可 引起皮肤、组织及器官的化脓性炎症，它产生的毒素进入人体肠道后可引起食物中毒。固内 外有不少关于金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌等引起人类食物中毒的 报道。 目前，对于猪牙花植物的研究国内外鲜见报道。因此，本发明对猪牙花全草的80% 的乙醇提取物的制剂工艺和抑菌活性作用进行了研究。 本发明的猪牙花全草的80%的乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽 孢杆菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用，这种抑菌作用具有积极的应用价值，可开发为 天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。
发明内容
1、一种以猪牙花全草为原料制备猪牙花乙醇提取物的制剂工艺和抑菌作用，其特 征在于包括以下步骤 步骤(一)取干燥猪牙花全草，除去猪牙花全草中的杂物，然后烘干或晒干，粉碎 成40目粉末，用8-10倍量80%乙醇室温下浸提4-6h后超声1-1. 5h，温度为3(TC，功率为 80W ; 步骤(二 )将步骤( 一 )中的80 %的乙醇提取液用滤纸过滤，滤渣再分别用6倍 量与4倍量80%的乙醇重复以上步骤各一次； 步骤(三)将步骤(二)中的80%的乙醇滤液合并，回收乙醇，得猪牙花乙醇提 取物； 步骤(四)将步骤(三)中的猪牙花乙醇提取物进行抑菌试验，对金黄色葡萄球 菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用。 2、根据权利要求1所述的制备工艺，制备猪牙花乙醇提取物的制剂工艺和抑菌作 用原料为猪牙花(Erythroniumj即onicum Decne.)的干燥全草。
根据本发明，本发明中的"％ "是重量百分比。
具体实施例方式
本发明所述的猪牙花乙醇提取物的制剂工艺和抑菌作用包括以下实施例，下面的
实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1 : (1)称取干燥猪牙花全草80g，除去其中的杂物，然后烘干，粉碎成40目粉末，用8 倍量80%乙醇室温下浸提4h后超声lh，温度为30。C，功率为80W; (2)将步骤(1)中的80%的乙醇提取液用滤纸过滤，滤渣再分别用6倍量与4倍 量80%的乙醇重复以上步骤各一次； (3)将步骤(2)中的80%的乙醇滤液合并，回收乙醇，得猪牙花乙醇提取物；
(4)将步骤(3)中的猪牙花乙醇提取物进行抑菌试验，对金黄色葡萄球菌、沙门氏 菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用。
实施例2: (1)称取干燥猪牙花全草80g，除去其中的杂物，然后晒干，粉碎成40目粉末，用10 倍量80%乙醇室温下浸提6h后超声1.5h，温度为3(TC，功率为80W; (2)将步骤(1)中的80%的乙醇提取液用滤纸过滤，滤渣再分别用6倍量与4倍 量80%的乙醇重复以上步骤各一次； (3)将步骤(2)中的80%的乙醇滤液合并，回收乙醇，得猪牙花乙醇提取物； (4)将步骤(3)中的猪牙花乙醇提取物进行抑菌试验，对金黄色葡萄球菌、沙门氏
菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用。 药理试验例猪牙花乙醇提取物的抑菌作用 1实验材料 1. 1材料 猪牙花(Erythronium j即onicum Decne.)采集于吉林省临江市老岭基地。
1. 2供试菌种 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门
氏菌(Salmonellaenterica)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均由吉林农业大学预防
兽医学实验室提供，在3rc蛋白胨牛肉汤中培养12h。 2实验方法与结果 2. 1猪牙花乙醇提取物抑菌试验 2. 1. 1营养琼脂培养基的配制牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、 NaC15.0g、蒸馏水
1000mL、琼脂20. 0g、pH7. 0。灭菌。 2. 1. 2滤纸片法测定最小抑菌浓度(MIC) 将猪牙花乙醇提取物用二倍稀释法进行稀释，培养皿上分别接种金黄色葡萄球 菌，大肠杆菌，沙门氏菌，枯草芽孢杆菌悬液各0. 2mL(菌浓度106CFU)，涂布均匀，然后将直 径5mm的灭菌滤纸片在提取液中浸泡2h后贴在培养基上，每皿3片等距放置，每菌三份平 行，另外，每个菌种用灭菌的滤纸片做一份空白对照及链霉素(100ug/mL)进行阳性对照， 置培养箱中37t:下培养24h。用十字交叉法测量并记录抑菌圈的大小，结果取三次重复实 验的平均值，得不同浓度提取物对供试菌的抑菌效果，抑菌圈不明显所对应的提取物浓度 即为最低抑菌浓度。
2. 2结果 猪牙花乙醇提取物对4种细菌的抑菌作用，结果如表1所示。 表1猪牙花乙醇提取物对4种细菌的抑菌作用
浓度(mg/mL)_金黄色葡萄球菌_大肠杆g_j少门氏菌__枯草芽f包杆B
卵0 ^ "~:
40(5 ++ ++ +++ +十
200 如+ + ++ +
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25 十十 - - -
/25 + — — — 注-无抑菌圈出现；+-抑菌圈不明显；+抑菌圈直径为6_7mm ;++抑菌圈直径为
8-10mm ;+++抑菌圈直径为11mm以上. 由表1可知猪牙花乙醇提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为12. 5mg/mL， 对沙门氏菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度均为100mg/mL，对大肠杆菌的最小抑菌浓度为 200mg/mL。 通过具体实施例说明猪牙花乙醇提取物抑菌效果很好，可作为天然抗菌剂用于食 品、药品等行业，代替有毒副作用的合成抗菌剂。猪牙花乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、沙 门氏菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌有良好的抑制作用，可以制备食品添加剂以及各种剂型的 药品，用于预防与治疗因食物被细菌污染而导致的食物中毒。
权利要求
一种以猪牙花全草为原料制备猪牙花乙醇提取物的制剂工艺和抑菌作用，其特征在于包括以下步骤步骤(一)取干燥猪牙花全草，除去猪牙花全草中的杂物，然后烘干或晒干，粉碎成40目粉末，用8-10倍量80％乙醇室温下浸提4-6h后超声1-1.5h，温度为30℃，功率为80W；步骤(二)将步骤(一)中的80％的乙醇提取液用滤纸过滤，滤渣再分别用6倍量与4倍量80％的乙醇重复以上步骤各一次；步骤(三)将步骤(二)中的80％的乙醇滤液合并，回收乙醇，得猪牙花乙醇提取物；步骤(四)将步骤(三)中的猪牙花乙醇提取物进行抑菌试验，对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用。
2. 根据权利要求1所述的制备工艺，制备猪牙花乙醇提取物的制剂工艺和抑菌活性作用的原料为猪牙花(Erythronium japonicum Decne.)的干燥全草。
全文摘要
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及猪牙花乙醇提取物的制剂工艺和抑菌作用。取干燥猪牙花全草，除去猪牙花全草中的杂物，然后烘干或晒干，粉碎成40目粉末，用8-10倍量80％乙醇室温下浸提4-6h后超声1-1.5h，温度为30℃，功率为80W，然后用滤纸过滤，滤渣再分别用6倍量与4倍量80％的乙醇重复以上步骤各一次，合并三次滤液，回收乙醇，得猪牙花乙醇提取物。本发明产品对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有不同程度的抑制作用，可开发为天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。
文档编号A61K36/896GK101773597SQ20101013467
公开日2010年7月14日 申请日期2010年3月1日 优先权日2010年3月1日
发明者张崇禧, 蔡恩博, 郑友兰 申请人:山东大学威海分校