专利名称：纳米结构脂质载体及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及纳米粒制剂领域，尤其涉及一种凝集素修饰的纳米结构脂质载体及其 制备方法和应用。
背景技术：
纳米结构脂质载体(nanostructured lipid carriers, NLC)是新一代脂质纳米 粒，与固体脂质纳米粒(solid lipid nan0partiCles，SLN)不同之处在于，它是采用混合类 脂为载体材料，将液体脂质混合到固体脂质中制备而得。液体脂质的加入，可扰乱固体脂质 规则的晶格结构，增加纳米粒结构中不规则晶型的比例，使承载脂溶性药物的空间容量增 加，从而提高载体的载药能力。因此，纳米结构脂质载体既具备固体脂质纳米粒生物相容性 好的优点，同时也改善了固体脂质纳米粒在载药量方面的不足，具有较好的发展前景。在口服制剂研究中，纳米结构脂质载体具有一定的黏附性，有助于增加其在肠粘 膜吸收部位表面接触面积，延长滞留时间，但该粘附作用主要通过机械嵌合、范德华力、氢 键等理化作用粘附于粘膜表面，受黏液凝胶层更新的影响，黏附时间较短，属于非特异性黏 附作用。来源于植物的花生凝集素或麦胚凝集素能够特异性结合肠上皮细胞表面受体，是 实现特异性生物黏附作用的理想生物黏附材料。张娜等以麦胚凝集素为生物黏附材料，将 麦胚凝集素与磷脂酰乙醇胺通过化学反应共价结合，然后将反应产物作为处方中脂质成分 制备了麦胚凝集素修饰固体脂质纳米粒，其降低血糖效果比未修饰制剂更显著，相对生物 利用度更高[张娜，平其能，闫婷婷，等.麦胚凝集素修饰胰岛素固体脂质纳米粒的研究，山 东大学学报，2006,44 (2) : 122-126]，但以上制备过程需要磷脂酰乙醇胺，成本较高，且上述 研究仅对固体脂质纳米粒进行了麦胚凝集素修饰。
发明内容
本发明要解决纳米结构脂质载体在肠粘膜表面黏附时间短的技术问题，提供一种 凝集素修饰的纳米结构脂质载体，该纳米粒与肠上皮细胞产生特异性结合，促进细胞对纳 米粒的摄取，从而促进药物口服吸收，提高药物生物利用度。此外，还需要提供一种纳米结构脂质载体的制备方法和应用。为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现在本发明的一个方面，提供了一种纳米结构脂质载体，包含以下重量百分比的成 分脂质材料2 10% ；乳化剂5 20% ；凝集素0. 1 ；水70 92%。优选的，该纳米结构脂质载体的组成成分按其重量百分比计为脂质材料2 10% ；乳化剂5 20% ；凝集素0. 1 ；其余为水。优选的，所述乳化剂为聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯(吐温)与聚乙烯醇的混合物。更 优选的，所述乳化剂为吐温80与聚乙烯醇的混合物，因为吐温80比其他吐温产品乳化性更强。
所述脂质材料包括固体脂质和液体脂质；优选的，所述固体脂质选自山嵛酸甘 油酯、单硬脂酸甘油脂、甘油棕榈酸硬脂酸酯；所述液体脂质选自单亚油酸甘油酯、油酸 聚乙二醇甘油酯。所述纳米结构脂质载体的粒径范围为lOOnm 300nm。所述凝集素包括麦胚凝集素或花生凝集素。在本发明的另一方面，还提供了一种上述纳米结构脂质载体的制备方法，包括以 下步骤将脂质材料加热至熔融作为油相，将含有乳化剂的水相加热至相同温度并与该油 相混合，制成分散液a，将分散液a经高压均质机在适宜压力下均质处理，得分散液b ；取分散液b在适宜转速下超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育，透 析处理后，加凝集素溶液孵育，经亲和层析柱纯化，获得凝集素修饰的纳米结构脂质载体。优选的，所述方法中加热至熔融的温度为60 80°C;均质压力为500 lOOObar ； 超滤离心的转速为2000 5000rpm ；戊二醛溶液孵育时间为10 30min。本发明的制备方法采用截留分子量为1000kd的超滤器将分散液b离心，能够有效 除去水相中游离的聚乙烯醇；透析袋的截留相对分子量(即留在透析袋内的生物大分子的 最小相对分子质量)为12000，能够有效除去游离戊二醛。在本发明的另一方面，还提供了一种上述纳米结构脂质载体的应用，用于作为药 物的给药载体。一般的，本发明的纳米结构脂质载体可作为口服、经皮及静脉注射等给药的载体。优选的，本发明的纳米结构脂质载体适于作为难溶性药物口服给药的载体。本发明纳米结构脂质载体，能有效促进药物口服吸收，提高药物生物利用度；并且 由于本发明纳米结构脂质载体的制备过程中未使用磷脂酰乙醇胺，生产成本较低。此外，本 发明纳米结构脂质载体可以包封脂溶性较强的药物，达到较高包封率。
下面结合附图和具体实施方式
对本发明作进一步详细的说明。图1是本发明凝集素修饰的纳米结构脂质载体的制备方法流程图。
具体实施例方式本发明利用纳米结构脂质载体表面辅料羟基为功能基团，通过戊二醛交联羟基以 及对蛋白氨基的偶联作用，将特异性生物黏附材料凝集素与纳米结构脂质载体共价结合， 实现对纳米结构脂质载体表面进行凝集素修饰，旨在增强肠上皮细胞与纳米粒的黏附性和 对纳米粒的摄取能力，从而提高药物口服生物利用度。本发明的纳米结构脂质载体，包含以下重量百分比的组分脂质材料2 10%;乳 化剂5 20% ；凝集素0. 1 1 %。优选的，该纳米结构脂质载体的组成成分按其重量百分比计为脂质材料2 10% ；乳化剂5 20% ；凝集素0. 1 ；其余为水。本发明纳米结构脂质载体的粒径范围为lOOnm 300nm。本发明纳米结构脂质载体的制备方法，包括以下步骤(见图1)
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将脂质材料加热至熔融作为油相，将含有乳化剂的水相加热至相同温度并与该油 相混合，制成分散液a，将分散液a经高压均质机在适宜压力下均质处理，得分散液b ；取分散液b在适宜转速下超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育，透 析处理除去多余的游离戊二醛后，加凝集素溶液孵育，以使凝集素与纳米结构脂质载体共 价结合，再经亲和层析柱纯化，除去未结合的凝集素，获得凝集素修饰的纳米结构脂质载 体。优选的，该制备方法中加热至熔融的温度为60 80°C ；均质压力为500 lOOObar ；超滤离心的转速为2000 5000rpm ；戊二醛溶液孵育时间为10 30min。实施例1将山嵛酸甘油酯-油酸聚乙二醇甘油酯((2 1)2%)加热至80°C熔融作为油相， 将含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(5% )溶液的水相加热至与油相相同温度，并 与该油相混合，制成分散液a，将分散液a经高压均质机在800bar压力下均质，得分散液b ；取分散液b在3000rpm超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育lOmin， 透析处理后，加凝集素溶液(0.5% )孵育，经亲和层析柱，磷酸盐缓冲液洗脱，收集凝集素 修饰的脂质纳米粒。检测制备的凝集素修饰纳米结构脂质载体的平均粒径为251. 9nm,凝集素修饰 率为6. 8%。实施例2将山嵛酸甘油酯-单亚油酸甘油酯((2 1)2%)加热至80°C熔融作为油相，将 含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(5%)溶液的水相加热至与油相相同温度，并与 该油相混合，制成分散液a，将分散液a经高压均质机在800bar压力下均质，得分散液b ；取分散液b在2000rpm超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育lOmin， 透析处理后，加凝集素溶液(0.2% )孵育，经亲和层析柱，磷酸盐缓冲液洗脱，收集凝集素 修饰的脂质纳米粒。检测制备的凝集素修饰纳米结构脂质载体的平均粒径273. 2nm,凝集素修饰率 为 10. 4%。实施例3将单硬脂酸甘油酯-油酸聚乙二醇甘油酯((2 1)5% )加热至60°C熔融作为 油相，将含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(8%)溶液的水相加热至与油相相同温 度，并与该油相混合，制成分散液a，将分散液a经高压均质机在500bar压力下均质，得分散 液b ；取分散液b在4000rpm超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育20min， 透析处理后，加凝集素溶液(0.2% )孵育，经亲和层析柱，磷酸盐缓冲液洗脱，收集凝集素 修饰的脂质纳米粒。检测制备的凝集素修饰的纳米结构脂质载体的平均粒径为184. 5nm，凝集素修 饰率为18. 2%。实施例4将甘油棕榈酸硬脂酸酯-油酸聚乙二醇甘油酯((2 1)8% )加热至75°C熔融作 为油相，将含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇(10% )溶液的水相加热至与油相相同温度，并与该油相混合，制成分散液a，将分散液a经高压均质机在lOOObar压力下均质， 得分散液b;取分散液b在4500rpm超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育30min， 透析处理后，加凝集素溶液(0.8% )孵育，经亲和层析柱，磷酸盐缓冲液洗脱，收集凝集素 修饰的脂质纳米粒。检测制备的凝集素修饰的纳米结构脂质载体的平均粒径为243. 4nm，凝集素修 饰率为15. 6%。实施例5将甘油棕榈酸硬脂酸酯_(单亚油酸甘油酯油酸聚乙二醇甘油酯，1 1) ((2 1)8%)加热至75°C熔融作为油相，将含有聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯和聚乙烯醇 (15% )溶液的水相加热至与油相相同温度，并与该油相混合，制成分散液a，将分散液a经 高压均质机在800bar压力下均质，得分散液b ；取分散液b在5000rpm超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育30min， 透析处理后，加凝集素溶液(0.5% )孵育，经亲和层析柱，磷酸盐缓冲液洗脱，收集凝集素 修饰的脂质纳米粒。检测制备的凝集素修饰的纳米结构脂质载体的平均粒径为155. lnm，凝集素修 饰率为17. 3%。以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能 因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说， 在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范 围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
权利要求
一种纳米结构脂质载体，其特征在于，包含以下重量百分比的成分脂质材料2～10％；乳化剂 5～20％；凝集素 0.1～1％；水 70～92％。
2.根据权利要求1所述的纳米结构脂质载体，其特征在于，所述乳化剂为聚氧乙烯山 梨醇脂肪酸酯与聚乙烯醇的混合物。
3.根据权利要求1所述的纳米结构脂质载体，其特征在于，所述脂质材料包括固体 脂质和液体脂质；所述固体脂质选自山嵛酸甘油酯、单硬脂酸甘油脂、甘油棕榈酸硬脂酸 酯；所述液体脂质选自单亚油酸甘油酯、油酸聚乙二醇甘油酯。
4.根据权利要求1所述的纳米结构脂质载体，其特征在于，所述纳米结构脂质载体的 粒径范围为lOOnm 300nm。
5.根据权利要求1所述的纳米结构脂质载体，其特征在于，所述凝集素包括麦胚凝集 素或花生凝集素。
6.一种权利要求1所述纳米结构脂质载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 将脂质材料加热至熔融作为油相，将含有乳化剂的水相加热至相同温度并与该油相混合，制成分散液a，将分散液a经高压均质机在适宜压力下均质处理，得分散液b ；取分散液b在适宜转速下超滤离心，将离心所得的浓缩液加戊二醛溶液孵育，透析处 理后，加凝集素溶液孵育，经亲和层析柱纯化，获得凝集素修饰的纳米结构脂质载体。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述加热至熔融的温度为60 80°C； 所述压力为500 lOOObar ；所述超滤离心的转速为2000 5000rpm。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述戊二醛溶液孵育时间为10 30mino
9.权利要求1所述的纳米结构脂质载体的应用，其特征在于，用于作为药物的给药载体。
10.根据权利要求9所述的纳米结构脂质载体的应用，其特征在于，用于作为难溶性药 物口服给药的载体。
全文摘要
本发明涉及纳米粒制剂技术领域，公开了一种凝集素修饰的纳米结构脂质载体，包含脂质材料、乳化剂、以及凝集素。本发明还公开了上述纳米结构脂质载体的制备方法及应用。本发明的纳米结构脂质载体，能有效促进药物口服吸收，提高药物生物利用度。
文档编号A61K9/14GK101890170SQ20101022486
公开日2010年11月24日 申请日期2010年7月13日 优先权日2010年7月13日
发明者冯年平, 刘颖, 巫姗, 谭蓉, 陈志强 申请人:上海中医药大学