专利名称：胡颓子提取物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种胡颓子提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
痛风是一种以血中尿酸增高为特征的代谢性疾病，随着我国人民生活水平的提高，高尿酸血症和痛风的发病率逐年上升，在西药治疗痛风的临床用药过程中越来越多的药物学家报道了西药副作用大，不适宜在临床上长期使用。因此，通过对中医药的研究，寻找一种安全、可靠、有效的降低尿酸的药物就显得非常重要，许多学者一般的研究思路是首先要降低尿酸的含量，从而控制病情的发展。研究降低尿酸含量的目前思路主要有2种，一是发现黄嘌呤氧化酶抑制剂，来抑制尿酸的合成，减少痛风症的发生，成功的药物有“别嘌醇”。但是人们很快发现，黄嘌呤氧化酶抑制剂，只能治标，不能治本，因为许多人血液尿酸很高，但不一定都发痛风症，只要尿液中的尿酸排量大，就可以保证不发痛风症。因此，增加尿酸尿排量的药物成为人们研究的另一个热点，增加尿酸尿排量的成功药物代表是“苯溴马隆”，但是这类药物不能克服的最为重要的问题是——尿酸引起的肾损伤，尿酸结晶沉积在关节会产生痛风性关节炎，沉积在肾组织会造成肾损伤。据统计，痛风症患者(不包括高尿酸血症)最终有40%发生肾衰。基于上述的病因、病机和病变情况，本发明的研究思路是探索一种“降尿酸-促进尿酸肾排量-修复高尿酸性肾损伤”药物。通过大量研究，发明人找到了疗效确切、安全可控、价格低廉胡颓子药材及其一系列的提取物，该药材及其提取物具有降尿酸-促进尿酸肾排量-修复高尿酸性肾损伤的作用，在抗痛风方面具有独特优势。该药材及其药理作用迄今没有相关文献进行研究报道。
发明内容
本发明的目的是克服上述不足之处，提供一种以1 β，3 β，23-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸为主要活性物质的胡颓子提取物及其制备方法。本发明另一目的是提供胡颓子药材或胡颓子提取物在制备降尿酸、促进尿酸肾排泄、修复肾损伤方面的应用。胡颓子为胡颓子科植物胡颓子Elaeagnus pungens Thunh.的干燥根。夏、秋季采挖，洗净，晒干。除去杂质，洗净，润软，切薄片，干燥，筛去灰屑。具有活血止血、祛风利湿、 止咳平喘和解毒敛疮的功效。常用于咯血，便血，月经过多，风湿关节痛，黄疸，水肿，泻痢， 小儿疳积，咳喘，咽喉肿痛，疮疥和跌打损伤。本发明的目的是通过以下方式实现的一种胡颓子提取物，该提取物中主要活性成分为1β，3β，23_三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸，该主要活性成分的含量为5%。 99%，优选活性成分的含量为50% 98%。上述提取物为胡颓子水提物、胡颓子醇提物、胡颓子的活性部位或胡颓子的活性成分；其中，胡颓子的活性部位中活性成分1 β，3 β，23_三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸的含量为50%以上，包括胡颓子酸水解后的醇提物制备部位、醇提物的酸水解液制备部位和醇提物大孔树脂法制备部位；胡颓子的活性成分包括胡颓子中1 β，3 β，23_三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸单体成分。其中，胡颓子水提物是按照以下方法制备得到的称取胡颓子颗粒，用水加热提取，过滤提取液，滤液浓缩。胡颓子醇提物是按照以下方法制备得到的称取胡颓子颗粒，用乙醇溶液回流提取，过滤提取液，滤液浓缩；乙醇溶液的浓度为50% 95%。酸水解后的醇提物制备部位是按照以下方法制备得到的取胡颓子颗粒，加入水没过药材，调节系统中的PH达到1 2，加热，酸水解2 4小时后，再加入胡颓子药材8 12倍量的50% 95%乙醇溶液回流提取，过滤得到药液，药渣再加入胡颓子药材8 12倍量的50% 95%乙醇溶液回流提取，合并提取液，调ρΗ达到6 7，浓缩，室温静置12小时以上，滤过，得沉淀物，将该沉淀物水洗至中性，然后用5% 30%乙醇洗涤，干燥洗涤后的沉淀物，即得。醇提物的酸水解液制备部位是按照以下方法制备得到的取胡颓子药材颗粒，加入胡颓子8 12倍量的50% 95%乙醇溶液回流提取，过滤提取液，滤液浓缩至浓度为Ig 生药/ml ；调pHl 2，加热水解3 4小时，减压浓缩，静置12小时以上，过滤，得沉淀物， 水洗沉淀物至水洗液呈中性，然后用5% 30%乙醇洗涤，洗涤后沉淀物干燥，即得。醇提物大孔树脂法制备部位是按照以下方法制备得到的取胡颓子药材颗粒，加入胡颓子药材8 12倍量的浓度为50% 95%乙醇溶液回流提取，过滤提取液，稀释至浓度为0. Ig 0. Olg生药/ml的5% 30%的乙醇溶液；再将该药液上已处理好的大孔吸附树脂柱，柱子的径高比为1 4 8，上样药材量与树脂重量比为1 1 2，上样流速为4 6BV/h ；上样后，用10 12倍柱体积的浓度为30 40%乙醇冲洗除杂，流速为1 4BV/h ；再用浓度为50% 70%乙醇冲洗4 8倍柱体积，流速为1 4BV/h，收集浓度为 50% 70%乙醇的洗脱液，浓缩、干燥，即得。大孔吸附树脂可以为离子交换大孔吸附树脂、非极性大孔吸附树脂、中极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂；优选中极性大孔吸附树脂、非极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂；最优选非极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂。所述的离子交换大孔吸附树脂为D900型大孔吸附树脂；所述的非极性大孔吸附树脂为D101、HPD-300、HPD-100, HPD-200A、HPD700型大孔吸附树脂；所述的弱极性大孔吸附树脂为HPD-722 ；所述的中极性大孔吸附树脂为ADS-7或DM-130型大孔吸附树脂；优选 HPD-722、HPD-700、HPD-100、D10l、HPD-300 或 DM-130 型大孔吸附树脂，最优选 HPD-700 型大孔吸附树脂。胡颓子的活性成分1 β，3 β，23-三羟基齐墩果烷-12-烯_28_酸是通过以下方法制备得到的取胡颓子的活性部位，湿法上硅胶柱，活性部位与硅胶重量比1 20 40， 用氯仿与甲醇混合系统进行冲洗，取氯仿甲醇的体积比为35 1 15 1的洗脱液， 得到粗分物；将粗分物继续湿法上硅胶，以氯仿甲醇系统冲洗，取氯仿甲醇的体积比为 20 1的洗脱液，回收溶媒，干燥，获得活性成分。上述胡颓子提取物及胡颓子药材可在制备降尿酸、促进尿酸肾排泄、修复肾损伤的药物中应用。还可将胡颓子药材或胡颓子提取物与药学上可接受的载体制成口服制剂或注射剂。与现有技术比较本发明的有益效果本发明首次提出了以1β，3β，23_三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸为主要活性成分的胡颓子提取物，药效实验表明，胡颓子药材及其提取物具有明显的降尿酸、促进尿酸肾排量、修复肾损伤作用，特别是对高尿酸性肾损伤及糖尿病性肾损伤有显著的修复作用，并且疗效确切、安全可控、价格低廉。以下通过部分主要实验过程进一步说明本发明一、研究胡颓子有效部位时不同型号树脂对1 β，3β，23_三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸(简称化合物Ε)的静态吸附与解吸附能力考察试验材料胡颓子药材(购自福建)；乙腈(色谱纯，Tedia，USA)；水(纯净水)； 95%乙醇(食用级，南京鼎新试剂有限公司)；大孔吸附树脂(河北沧州)；1.上样液浓度的考察(1)色谱条件日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10A型紫外检测器， Agela-C18(4. 6mmX 15cm)色谱柱；检测波段:212nm ；流动相乙腈水=55 45 ；流速 1. OmL/min ；温度室温(18°C )。(2)样品的配置对照品溶液的制备精密称取化合物E对照品1. 5mg,甲醇定容至10mL，即得浓度为150 μ g/mL的化合物E溶液。上样液的制备称取胡颓子药材120g，按实施例2工艺提取，合并提取液，减压浓缩至干。加入10%的乙醇1200mL，配制成0. lg/mL(生药材)。经实验得到随着含醇量的增加，化合物E的溶解度增加；随着质量浓度的降低，化合物E的溶解度也在增加。考虑到浓度越低，上样体积就会很大。而且高浓度的颗粒较大， 易堵住柱子，可选择0. Ig 0. Olg生药/ml的5% 30%的乙醇溶液上样，优先选择质量浓度为0. 05g生药/mL，含醇量为20%的上样液。2.不同树脂对化合物E的静态吸附与解吸附考察经初步筛选后，发现离子交换大孔吸附树脂、非极性大孔吸附树脂、中极性大孔吸附树脂和弱极性大孔吸附树脂均对胡颓子的有效成分均有吸附作用，选择这几类树脂中有代表性的树脂进行进一步研究，由于各种型号树脂的吸水率有较大差异，因此在计算吸附容量时，以干树脂重量为基准进行计算。干树脂重量的计算按国标(树脂吸水饱和后，2000r/min离心20分钟，除去多余的水分)处理树脂后，测定各型号湿树脂的含水量 (105°C干燥池)，计算试验所用湿树脂相应的干重量。按下式计算树脂对皂苷的吸附容量和洗脱率，结果见表1。
所加药液中E的量一未被吸附的E的量
吸附容量(mg/g)=-
树脂重量W
权利要求
1.一种胡颓子提取物，其特征在于该提取物中主要活性成分为ι β，3 β，23_三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸，该主要活性成分的含量为5%。 99%。
2.根据权利要求1所述的胡颓子提取物，其特征在于该提取物中主要活性成分为1β， 3 β ,23-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸，该主要活性成分的含量为50^-98 ^
3.根据权利要求1所述的胡颓子提取物，其特征在于该提取物为胡颓子水提物、胡颓子醇提物、胡颓子的活性部位或胡颓子的活性成分；胡颓子的活性部位中活性成分1β， 3 β，23-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸的含量为50%以上，胡颓子的活性部位包括胡颓子酸水解后的醇提物制备部位、醇提物的酸水解液制备部位和醇提物大孔树脂法制备部位；胡颓子的活性成分包括胡颓子中1 β，3 β，23_三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸单体成分。
4.根据权利要求3所述的胡颓子提取物，其特征在于胡颓子水提物是按照以下方法制备得到的称取胡颓子颗粒，用水加热提取，过滤提取液，滤液浓缩。
5.根据权利要求3所述的胡颓子提取物，其特征在于胡颓子醇提物是按照以下方法制备得到的称取胡颓子颗粒，用乙醇溶液回流提取，过滤提取液，滤液浓缩；乙醇溶液的浓度为50% 95%。
6.根据权利要求3所述的胡颓子提取物，其特征在于酸水解后的醇提物制备部位是按照以下方法制备得到的取胡颓子颗粒，加入水没过药材，调节系统中的PH 1 2，加热，酸水解2 4小时后，再加入胡颓子药材8 12倍量的50% 95%乙醇溶液回流提取，过滤得到药液，药渣再加入胡颓子药材8 12倍量的50% 95%乙醇溶液回流提取，合并提取液，调PH达到6 7，浓缩，室温静置12小时以上，滤过，得沉淀物，将该沉淀物水洗至中性， 然后用浓度为5% 30%乙醇洗涤，干燥洗涤后的沉淀物，即得。
7.根据权利要求3所述的胡颓子提取物，其特征在于醇提物的酸水解液制备部位是按照以下方法制备得到的取胡颓子药材颗粒，加入胡颓子8 12倍量的50% 95%乙醇溶液回流提取，过滤提取液，滤液浓缩至浓度为Ig生药/ml ；调pHl 2，加热水解3 4小时，减压浓缩，静置12小时以上，过滤，得沉淀物，水洗沉淀物至水洗液呈中性，然后用浓度为5 % 30 %乙醇洗涤，洗涤后沉淀物干燥，即得。
8.根据权利要求3所述的胡颓子提取物，其特征在于醇提物大孔树脂法制备部位是按照以下方法制备得到的取胡颓子药材颗粒，加入胡颓子药材8 12倍量的50% 95%乙醇溶液回流提取，过滤提取液，稀释至浓度为0. Ig 0. Olg生药/ml的5% 30%的乙醇溶液；再将该药液上已处理好的大孔吸附树脂柱，柱子的径高比为1 4 8，上样药材量与树脂重量比为1 1 2，上样流速为4 6BV/h;上样后，用10 12倍柱体积的浓度为 30 40%乙醇冲洗除杂，流速为1 4BV/h ；再用浓度为50 70%乙醇冲洗4 8倍柱体积，流速为1 4BV/h，收集浓度为50 70%乙醇的洗脱液，浓缩、干燥，即得。
9.根据权利要求8所述的胡颓子提取物，其特征在于大孔吸附树脂为离子交换大孔吸附树脂、非极性大孔吸附树脂、中极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂；优选中极性大孔吸附树脂、非极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂；最优选非极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂。
10.根据权利要求9所述的胡颓子提取物，其特征在于所述的离子交换大孔吸附树脂为D900型大孔吸附树脂；所述的非极性大孔吸附树脂为DlOl、HPD-300、HPD-100,HPD-200A、HPD700型大孔吸附树脂；所述的弱极性大孔吸附树脂为HPD-722 ；所述的中极性大孔吸附树脂为ADS-7或DM-130型大孔吸附树脂；优选HPD-722、HPD-700、HPD_100、D101、 HPD-300或DM-130型大孔吸附树脂，最优选HPD-700型大孔吸附树脂。
11.根据权利要求3所述的胡颓子提取物，其特征在于胡颓子的活性成分1β，3 β， 23-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸是通过以下方法制备得到的取胡颓子的活性部位，湿法上硅胶柱，活性部位与硅胶重量比1 20 40，用氯仿与甲醇混合系统进行冲洗，取氯仿甲醇的体积比为35 1 15 1的洗脱液，得到粗分物；将粗分物继续湿法上硅胶， 以氯仿甲醇系统冲洗，取氯仿甲醇的体积比为20 1的洗脱液，回收溶媒，干燥，得到活性成分1 β，3 β，23-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸。
12.—种权利要求1 11所述的胡颓子提取物及胡颓子药材在制备降尿酸、促进尿酸肾排泄、修复肾损伤的药物中的应用。
13.一种含有权利要求1 11所述的胡颓子提取物的药物组合物，其特征在于将胡颓子药材或胡颓子提取物与药学上可接受的载体制成口服制剂或注射剂。
全文摘要
本发明公开了一种胡颓子提取物及其制备方法和应用，该提取物中主要活性成分为1β，3β，23-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸，主要活性成分的含量为5‰～99％。药效实验表明，胡颓子药材及其提取物具有明显的降尿酸、促进尿酸肾排泄、修复肾损伤的作用。
文档编号A61K36/185GK102225081SQ201110166570
公开日2011年10月26日 申请日期2011年6月20日 优先权日2011年6月20日
发明者杨中林 申请人:中国药科大学